Pop Teste de Coombs Direto

IMUNOLOGIA
POP TESTE: COOMBS DIRETO

PRECEPTORA: KEROLAINE FONSECA COELHO
O teste de coombs é um exame que avalia a presença de anticorpos

específicos que atacam as hemácias/eritrócitos, provocando a sua
destruição e podendo levar ao surgimento de um tipo de anemia conhecida como
hemolítica.
Existem dois tipos principais deste exame, que incluem:
• Teste de Coombs direto: avalia diretamente as células vermelhas do

sangue, verificando se há anticorpos ligados à hemácia e se esses
anticorpos são derivados do próprio sistema imune da pessoa ou recebidos
por transfusão.
• Teste de Coombs indireto: avalia o soro, identificando os anticorpos ali
presentes, e geralmente é solicitado em situações de transfusão, para
garantir que o sangue que será doado é compatível com quem está
recebendo.
TESTE DIRETO DA ANTIGLOBULINA (COOMBS DIRETO)
FINALIDADE
Uso do soro Antiglobulina humana para pesquisa de anticorpos irregulares (PAI),

teste da antiglobulina direta (TAD) e provas de compatibilidade.
Usa-se o teste direto de antiglobulina (Coombs direto) para determinar

se o anticorpo de ligação de eritrócitos (IgG) ou complemento (C3) está
presente nas membranas dos eritrócitos;
Os eritrócitos do paciente são incubados com anticorpos anti-IgG
humana e C3. Se a IgG ou o C3 estiverem ligados às membranas dos
eritrócitos, ocorre aglutinação — que configura resultado positivo;
IMUNOLOGIA
Um resultado positivo sugere a presença de autoanticorpos nos

eritrócitos. Um falso positivo pode ocorrer e nem sempre equivale à
hemólise. Portanto, os resultados sempre devem estar correlacionados
com os sinais e sintomas clínicos.
Aplicações:
Na pesquisa de anticorpos já fixados às hemácias, como ocorrem em:
o Anemia Hemolítica Adquirida Autoimune;

o Doença Hemolítica de Recém Nascido
o Pacientes que tenham recebido transfusões incompatíveis.
PRINCÍPIO DE AÇÃO:
A imunização de coelhos com antiglobulina e complemento produzem a

antiglobulina humana e anticomplemento humano. No teste da antiglobulina as
células são lavadas sucessivamente para remoção das globulinas não ligadas
às células, as lavagens são necessárias para impedir a neutralização da
antiglobulina humana através da molécula anti IgG C3d não ligada. A globulina
poliespecífica humana adicionada nas células lavadas causarão aglutinação se
as células estiverem sensibilizadas com imunoglobulina ou complemento.
Células não sensibilizadas não aglutinarão com a globulina anti-humana.
IMUNOLOGIA
AMOSTRA:
As amostras coletadas em EDTA ou Heparina devem ser tipadas em até

48 horas. Se a demora para a execução do teste for inevitável, hemácias de
sangue coagulado e as colhidas em EDTA ou heparina devem ser separadas do
soro/plasma, lavadas e ressuspendidas em solução preservativa de glóbulos.
Estocar a 2º-8ºC por no máximo 20 dias. O armazenamento prolongado de
hemácias antes da execução do teste pode causar deterioração de antígenos e
resultar em reações mais fracas.
PROCEDIMENTO:
1- Centrifugar amostra de sangue (EDTA) e separar o plasma das hemácias

a serem testadas (paciente);
2- Preparar uma solução de hemácias de 3% a 5% diluídas em solução
salina;
Ex: A 5% seria 950uL de solução salina (0,9%) + 50 uL de hemácias;
A 3% seria 970uL de solução salina (0,9%) + 30 uL de hemácias;

IMUNOLOGIA
3- Colocar em um tubo de ensaio uma gota ou 50µl da suspensão de

eritrócitos diluídos;
4- Lavar as hemácias dos tubos com solução fisiológica 3 vezes, adicione
solução fisiológica até preencher 2/3 do tubo,
5- Centrifugue a 1000 rpm de 1 a 3 min;
6- Despreze o sobrenadante com cuidado para deixar o “botão” de hemácias
no fundo do tubo;
7- Repita esse passo mais duas vezes (total = 3 lavagens);
8- Após a última lavagem remover completamente a salina secando bem as
bordas do tubo com auxílio de um papel de filtro/toalha;
9- Adicionar 2 gotas (100 µL) do Soro antiglobulina humana de coombs
(Anti-IgG monoespecífico ou Anti-IgG+ C3d poliespecífico) em cada
tubo;
10- Homogeneizar;
11- Centrifugar novamente 1 a 3 min a 1000 rpm;
12- Ressuspender suavemente o botão de hemácias, agitando
delicadamente o tubo, observando a presença ou não de aglutinação;
13- Análise dos resultados macroscopicamente e microscopicamente.
14- Registrar os resultados.

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O teste de coombs é um exame que avalia a presença de anticorpos

Existem dois tipos principais deste exame, que incluem:

• Teste de Coombs direto: avalia diretamente as células vermelhas do

TESTE DIRETO DA ANTIGLOBULINA (COOMBS DIRETO)

Uso do soro Antiglobulina humana para pesquisa de anticorpos irregulares (PAI),

Usa-se o teste direto de antiglobulina (Coombs direto) para determinar

Um resultado positivo sugere a presença de autoanticorpos nos

Na pesquisa de anticorpos já fixados às hemácias, como ocorrem em:

o Anemia Hemolítica Adquirida Autoimune;

A imunização de coelhos com antiglobulina e complemento produzem a

As amostras coletadas em EDTA ou Heparina devem ser tipadas em até

1- Centrifugar amostra de sangue (EDTA) e separar o plasma das hemácias

Ex: A 5% seria 950uL de solução salina (0,9%) + 50 uL de hemácias;

A 3% seria 970uL de solução salina (0,9%) + 30 uL de hemácias;

3- Colocar em um tubo de ensaio uma gota ou 50µl da suspensão de

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