GAMBARAN HASIL PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK

APUSAN DARAH MALARIA DENGAN VARIASI WAKTU

PENGAMBILAN SAMPEL YANG BERBEDA

YAYOK ZAIREN
N121 09 561

PROGRAM KONSENTRASI
TEKNOLOGI LABORATORIUM KESEHATAN
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2013
 GAMBARAN HASIL PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK
APUSAN DARAH MALARIA DENGAN VARIASI WAKTU
PENGAMBILAN SAMPEL YANG BERBEDA

SKRIPSI

Untuk melengkapi tugas-tugas dan memenuhi syarat-syarat

untuk mencapai gelar sarjana

YAYOK ZAIREN
N121 09 561

PROGRAM KONSENTRASI
TEKNOLOGI LABORATORIUM KESEHATAN
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2013

ii
 GAMBARAN HASIL PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK
APUSAN DARAH MALARIA DENGAN VARIASI WAKTU
PENGAMBILAN SAMPEL YANG BERBEDA

YAYOK ZAIREN

N121 09 561

Disetujui oleh :

Pembimbing Utama,

Dr. Agnes Lidjaja, M.Kes., Apt

NIP. 19570326 198512 2 001

Pembimbing Pertama, Pembimbing Kedua,

Prof. Dr. H. faisal Attamimi, MS Drs. H. Syaharuddin Kasim, M.Si., Apt

NIP. 19440428 197110 1 001 NIP. 19630801 199003 1 001

Pada Tanggal, Mei 2013

iii
 PENGESAHAN

GAMBARAN HASIL PEMERIKSAAN MIKROSKOPIK

APUSAN DARAH MALARIA DENGAN VARIASI WAKTU
PENGAMBILAN SAMPEL YANG BERBEDA

Oleh

YAYOK ZAIREN

N121 09 561

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi

Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin
Pada Tanggal Mei 2013

Panitia Penguji Skripsi :

1. Ketua : Subehan, S.Si., M.Pharm.Sc.,Ph.D., Apt ………...

2. Sekretaris : Yusnita Rifai, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt ...……..

3. Anggota (Ex.Off) : Dr. Agnes Lidjaja, M.Kes., Apt ....…….

4. Anggota (Ex.Off) : Prof. Dr. H. Faisal Attamimi, MS .…...….

5. Anggota (Ex.Off) : Drs. H. Syaharuddin Kasim, M.Si., Apt ..….......

6. Anggota : Dra. Christiana Lethe, M.Si., Apt ..…...….

Mengetahui :
Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Hasanuddin

Prof. Dr. Elly Wahyudin, DEA., Apt

NIP. 19560114 198601 2 001

iv
 PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini adalah karya saya

sendiri, tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar

kesarjanaan di suatu Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya

juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan

oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan

disebutkan dalam daftar pustaka

Apabila dikemudian hari terbukti bahwa pernyataan saya ini tidak benar,

maka skripsi dan gelar yang diperoleh, batal demi hukum.

Makassar, Mei 2013

Penyusun,

YAYOK ZAIREN

v
 UCAPAN TERIMAKASIH

Alhamdulillah, puji syukur ke hadirat Allah SWT atas segala rahmat dan

karuniaNya sehingga penelitian dan penulisan karya akhir yang merupakan

syarat untuk mencapai gelar sarjana pada program konsentrasi Teknologi

Laboratorium Kesehatan Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin ini dapat

terselesaikan. Penulis menyadari bahwa selama menyusun skripsi ini begitu

banyak masalah yang menghambat, namun berkat tekad, doa, pertolongan,

bimbingan dan dukungan dari berbagai pihak sehingga masalah tersebut

dapat teratasi sampai selesainya skripsi ini.

Dengan penuh rasa hormat penulis menyampaikan banyak terima

kasih kepada Ibu Dr. Agnes Lidjaja, M.Kes., Apt selaku pembimbing utama,

Bapak Prof. Dr. H. Faisal Attamimi, MS selaku pembimbing pertama, beserta

Bapak Drs. H. Syaharuddin. Kasim, M.Si., Apt selaku pembimbing kedua,

yang senantiasa telah meluangkan waktu dan pikiran dalam memberikan

bimbingan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Terima kasih

penulis ucapkan kepada Bapak Subehan, S.Si., M.Pharm.Sc.,Ph.D., Apt, Ibu

Yusnita Rifai, S.Si., M.Pharm., Ph.D., Apt. dan Ibu Dra. Christiana Lethe,

M.Si., Apt selaku tim penguji yang telah banyak memberikan bantuan dan

saran kepada penulis sampai selesainya skripsi ini.

Terima kasih yang sebesar-besarnya penulis juga sampaikan kepada

vi
1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Hasanuddin, Ibu Prof. Dr. Elly

Wahyudin, DEA beserta seluruh staf pegawai.

2. Bapak Subehan,S.Si, M.Pharm.Sc, Ph.D,Apt selaku ketua Program

Konsentarsi Teknologi Laboratorium Kesehatan dan beserta para staf

pegawai yang telah banyak membantu.

3. Bapak Drs. A. Ilham Makhmud, Dip.Sc., Apt. selaku penasehat akademik

yang senantiasa memberikan dorongan semangat dan nasehat kepada

penulis.

4. Bapak dan Ibu dosen Fakultas Farmasi, khususnya staf pengajar pada

program studi Teknologi Laboratorium Kesehatan atas segala ilmu yang

telah diajarkan dengan penuh kesabaran dan kerja keras, semoga Allah

membalasnya dengan yang lebih baik.

5. Kepala bagian dan staf Laboratorium P2M-PL Dinas Kesehatan Kab.

Maluku Tenggara yang telah memberikan arahan dan bimbingan selama

proses penelitian. Kepala Puskesmas Ohoira dan Staf atas bantuannya

dalam pelaksanaan penelitian

6. Teman dan sahabatku Nurul . H. Nuhuyanan dan keluarga Reubun (Kak

Nia, Babang Dullah ) atas bantuan, dukungan dan doanya selama

melaksanakan perkuliahan di Makassar.

7. Teman-teman yang istimewa dan BEPH tercinta (kak Hajra, Fitra. D.

Dewi, Nurul Annisa, Sharaswati Djohar, Sari Elfitrina, A. Sri. Gusnita,

Annisa Saleh, Nurma. A. Fernatubun, Nurul. I. Naili.) atas persahabatan,

kekeluargaan dan kebersamaan selama ini, serta Sahabat seperjuangan

mahasiswa Teknologi Laboratorium Kesehatan angkatan 09

vii
 (SPIR09RAPH) yang tidak bisa disebutkan satu persatu terima kasih atas

berbagai pertolongan, semangat, dan kebersamaannya.

Terima kasih yang sangat tulus dan terkhusus penulis ucapkan

kepada Ayahanda tercinta Muhammad Zairen dan Ibunda tercinta Atikah

Kamaruzzaman atas segala kasih sayang, cinta, doa, bimbingan, didikan dan

dukungan yang begitu besar yang telah diberikan kepada ananda hingga

sampai saat ini. Kepada kakak dan Iparku Premyatno Zairen Dan Suryati

terima kasih atas segala doa dan kasih sayangnya. Kepada adikku Danisa

Zairen (COCO), Ke-2 Keponakan Kecilku Naila. A. Zairen (A) dan Muhamad.

D. Zairen (Engkong) serta seluruh keluarga besar atas doa restu, dukungan

dan semangat yang ditanamkan dalam menuntut ilmu.

Penulis menyadari sepenuhnya atas kekurangan dan keterbatasan

penulisan karya akhir ini, untuk itu semua saran dan kritikan dalam

penyempurnaannya akan penulis terima dengan segala kerendahan hati.

Semoga karya ini dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan

dan kita semua.

Makassar, Mei 2013

Yayok Zairen

viii
 ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian tentang gambaran hasil pemeriksaan

mikroskopik apusan darah malaria dengan variasi waktu pengambilan
sampel yang berbeda. Penelitian ini bertujuan untuk mendapatkan gambaran
hasil pemeriksaan mikroskopis Plasmodium sp. pada apusan darah malaria
yang diambil dengan variasi waktu berbeda berdasarkan gejala klinis demam
serta menganalisis gejala dan tanda klinis malaria yang paling banyak
muncul pada penderita malaria di daerah endemis malaria. Desain Penelitian
ini adalah cross sectional. Diagnosis malaria ditetapkan berdasarkan
pemeriksaan apusan darah secara mikroskopik. Hasil penelitian dari 35
penderita malaria klinis diperoleh 15 orang penderita malaria. Sebanyak 4
orang (26,66%) di antaranya dengan gejala klinis demam, dan 11 orang
(73,33%) di antaranya datang tanpa gejala klinis demam. Hasil pemeriksaan
mikroskopik malaria sebanyak 3 kali pada 22 sampel negatif dengan variasi
waktu 4 jam terdapat 2 sampel positif terinfeksi P. vivax. Ditemukan spesies
Plasmodium dominan adalah P. vivax 12 orang (80%). Berdasarkan tingkat
infeksi, penderita yang mengalami hiperparasitemia (infeksi malaria berat) 2
orang (13,33%) dan mengalami hipoparasitemia (infeksi malaria ringan) 13
orang (86,66%). Gejala klinis yang paling banyak ditemukan adalah demam,
badan pegal, tubuh terasa dingin dan menggigil, pusing, sakit kepala,
gangguan pencernaan dan gabungan gejala-gejala tersebut. Tanda klinis
yang dijumpai hanyalah kenaikan suhu tubuh dan penderita terlihat pucat.
Disimpulkan bahwa demam bukanlah gejala klinis yang selalu ada pada
penderita malaria di daerah endemis.

ix
 ABSTRACT

The research about on description of result checkup microscopic

blood malaria smear using variation time has been done. The aims of this
research was to find description of result checkup microscopic Plasmodium
sp. on blood malaria smear which was taken with different time variation
based on fever clinical symptom. So analyze symptom and clinical marks
malaria which much appear at malaria patient in malaria endemic areas. This
design research is cross sectional. Diagnosis malaria has defined based on
checkup blood smear result by microscopic. From 35 patients clinical malaria
has found 15 malaria patients, 4 persons (26,66%) with fever clinical
symptom, and 11 persons (73,33%) come without fever clinical symptom.
Result of checkup microscopic malaria with 3 time in 22 negative sample
with variation time 4 hours has found 2 positive sample infected P. vivax. Has
found dominant spesies Plasmodium is P. vivax 12 persons (80%). Dominant
based on infection level, patients who experienced hiperparasitemia
(infection of weight malaria) 2 persons (13,33%) and experience of
hipoparasitemia (mild malaria infection) 13 persons (86,66%). clinical
symptoms are most commonly found is fever, body feels cold and shivering,
dizziness, headache, indigestion and joint symptoms. Clinic mark which has
found is just rise in body temperature and the patient looks pale. concluded
that fever is not clinic symptom which always there on malaria patient in
endemic areas.

x
 DAFTAR ISI

Halaman

PERNYATAAN .................................................................................. v

UCAPAN TERIMA KASIH ................................................................. vi

ABSTRAK ......................................................................................... ix

ABSTRACT......... ............................................................................... x

DAFTAR ISI ...................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ................................................................................ xiv

DAFTAR GAMBAR ........................................................................... xv

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................ xvi

DAFTAR ARTI LAMBANG DAN SINGKATAN .................................. xvii

BAB I PENDAHULUAN ................................................................. 1

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ......................................................... 5

II.1 Tinjauan Umum Penyakit Malaria .................................. 5

II.1.1 Definisi Penyakit Malaria .......................................... 6

II.1.2 Epidemiologi .............................................................. 6

II.1.3 Etiologi ....................................................................... 8

a. Siklus Pada Manusia (Fase Aseksual) .......................... 8

b. Siklus Pada Nyamuk Anopheles Betina .......................... 10

II.2.Tinjauan Umum Plasmodium Malaria ............................ 11

a. Plasmodium falcifarum …. .............................................. 11

b. Plasmodium vivax ........................................................... 12

xi
 II.3 Gambaran Klinis ........................................................... 14

II.3.1 Patogenesis Malaria .................................................. 14

II.3.2 Gejala ......................................................................... 15

a. Stadium Dingin (Cold Stage) .......................................... 15

b. Stadium Panas (Hot Stage) ........................................... 16

c. Stadium Berkeringat (Sweating Stage) ........................... 16

II.3.3 Penularan Malaria ...................................................... 17

a. Penularan secara alamiah (Natural Infection) ................ 18

b. Penularan yang tidak alamiah ........................................ 18

II.4 Diagnosis Malaria .......................................................... 19

II.4.1 Anamnesis .................................................................. 20

II.4.2 Pemeriksaan Fisik ....................................................... 21

II.4.3 Diagnosis atas dasar pemeriksaan laboratorium ....... 21

1. Mikroskopik ..................................................................... 21

2. Teknik Mikroskopik lain ……………………………………. 22

a. Metode Teknik QBC (Quantitative Buffy Coat) …………. 22

b. Teknik Kawamoto …………………………………………… 23

3. Metode Pemeriksaan Biomolekuler………………………… 23

4. Pemeriksaan dengan tes diagnostik cepat (RDT) ………... 24

BAB III PELAKSANAAN PENELITIAN ............................................ 25

III.1 Desain Penelitian .......................................................... 25

III.2 Tempat dan Waktu Penelitian ...................................... 25

III.3 Populasi Penelitian ....................................................... 25

III.4 Sampel dan Bahan Penelitian ...................................... 26

xii
 III.5 Kriteria Sampel ............................................................. 26

III.5.1 Kriteria Inklusi ............................................................ 26

III.5.2 Kriteria Eksklusi .......................................................... 27

III.6 Defenisi Operasional ..................................................... 27

III.7 Alat Dan Bahan Penelitian ........................................... 28

III.7.1. Alat Penelitian ........................................................... 28

III.7.2 Bahan Penelitian ........................................................ 28

III.8. Prosedur Kerja .............................................................. 29

III.8.1 Prosedur Pengambilan Sampel Penelitian

(Darah Kapiler) ………………………………………… . 29

III.8.2 Pewarnaan apusan darah tebal dan tipis

dengan Giemsa …………………………………………. 30

III.8.3 Pemeriksaan dengan Mikroskop ……………………… 31

a. Pembacaan apusan darah tipis ………………………… 31

b. Pembacaan apusan darah tebal ………………………... 31

c. Interpretasi Hasil Pemeriksaan ……………………………. 31

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................. 33

IV.1 Hasil Penelitian .............................................................. 33

IV.2 Pembahasan .................................................................. 37

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ………………………………….. 45

V.1 Kesimpulan ................................................................... 45

V.2 Saran ............................................................................ 46

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................... 47

xiii
 DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Masa inkubasi penyakit malaria ……….…………… 10

2. Hasil pemeriksaan laboratorium ……………………. 34

3. Karakteristik dasar sampel penelitian ……………… 34

4. Karakteristik dasar penderita positif 35

malaria……………..................................................

5. Karakteristik penderita malaria berdasarkan hasil 35

pemeriksaan apusan darah malaria ……………….

6. Karakteristik diagnosis mikroskopik berdasarkan

variasi waktu pengambilan sampel dengan 36
perbandingan gejala khas demam
………………………………………………………….
36
7. Karakteristik berdasarkan gejala dan tanda klinis
sampel penelitian
……………………………………………………........

xiv
 DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Peta startifikasi malaria 2009…….……..................................... 7

2. Proses Penularan malaria ………………………………………. 9

3. Morfologi Stadium Plasmodium falcifarum pada apusan darah

tebal dan tipis ………………........................................... 12

4. Morfologi Stadium Plasmodium vivax pada apusan darah tebal

dan tipis)....................................................................................... 13

xv
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Skema alur penelitian………………………....……………….. 50

2. Skema kerja pemeriksaan mikroskopik apusan darah tebal

dan tipis ………………………………………………… 51

3. Foto-foto penelitian …………………………………………… 52

4. Surat pernyataan responden ……………………………… 55

xvi
 DAFTAR LAMBANG DAN SINGKATAN

Lambang/singkatan Arti

P. falcifarum Plasmodium falcifarum

P. vivax Plasmodium vivax
P. malariae Plasmodium malariae
P. ovale Plasmodium ovale
SR Spleen Rate
PR Parasite Rate
SR Sporozoite Rate
Hb Hemoglobin
API Annual parasite Incidence
AMI Annual malaria Incidence
SD Sediaan Darah
QBC Quantitavie Buffy Coat
Acridine Orange Pulasan jingga akridin
PCR Polymerase Chain reaction
ACD Active Case Detection

xvii
 PCD Passive Case Detection
UPK Unit Pelayanan Kesehatan
HRP-2 Histidine rich protein 2
p-LDH Enzim parasite lactate
dehydrogenase
RDT Rapid Diagnostic Test

xviii
 BAB I

PENDAHULUAN

Malaria merupakan salah satu masalah kesehatan masyarakat yang dapat

menyebabkan kematian terutama pada kelompok risiko tinggi yaitu bayi, anak balita, ibu

hamil. Plasmodium malaria pada manusia ada 4 spesies yaitu P. vivax, P. falciparum, P.

ovale dan P. malariae. (1).

Malaria ditemukan lebih dari 90 negara atau hampir diseluruh bagian dunia,

terutama yang beriklim tropis dan subtropis. Penduduk yang berisiko terkena malaria

berjumlah sekitar 2,3 miliar atau 41% dari jumlah penduduk dunia. Di dunia diperkirakan

kasusnya berjumlah sekitar 300-500 juta kasus dan mengakibatkan 1,5-2,7 juta kematian

setiap tahun, terutama di negara-negara Benua Afrika. Di Indonesia, dari 576

Kabupaten/Kota, 424 Kabupaten/Kota (73,6%) merupakan daerah endemis malaria dan

sekitar 45% penduduk Indonesia berisiko tertular malaria. Pada tahun 2009, KLB

dilaporkan terjadi di pulau Jawa (Jawa Tengah, Jawa Timur dan Banten), Kalimantan

(Kalimantan Selatan), Sulawesi (Sulawesi Barat), NAD dan Sumatera (Sumatera Barat,

Lampung) dengan total jumlah penderita adalah 1.869 (1,2,3).

Tingginya kasus malaria klinis merupakan sesuatu yang perlu segera disikapi. Hal

ini bisa saja terjadi bila diagnosis malaria hanya ditegakkan berdasarkan gejala dan tanda

klinis terutama demam. Ada tidaknya Plasmodium pada sediaan darah dipengaruhi oleh

stadium yang sedang terjadi pada penderita. Stadium itu salah satunya meliputi stadium

1
 2

demam. Padahal gejala dan tanda klinis demam pada penderita

malaria di daerah endemis umumnya tidak khas dan hampir sama

seperti gejala dan tanda klinis pada penderita infeksi lainnya (demam

dengue, demam tifoid) terutama pada fase awal infeksi dan terlebih

untuk daerah yang dinyatakan bebas malaria atau yang Annual

Parasite Incidencenya rendah sehingga menyulitkan para klinisi untuk

mendiagnosis malaria dengan mengandalkan pengamatan

manifestasi klinis saja (4).

Tanda dan gejala klinis malaria yang timbul bervariasi

tergantung pada berbagai hal antara lain usia penderita, cara

transmisi, status kekebalan, jenis Plasmodium, infeksi tunggal atau

campuran. Selain itu yang tidak kalah penting adalah kebiasaan

menggunakan obat anti malaria yang kurang rasional dan dapat

mendorong timbulnya resistensi. Berbagai faktor tersebut dapat

mengacaukan diagnosis malaria. Belum ditemukannya definisi klinis

berupa keluhan dan atau gejala klinis malaria di daerah endemis

tertentu dapat menyebabkan over diagnosis dan over treatment untuk

malaria. untuk itu diperlukan pemeriksaan laboratorium sebagai

penunjang diagnosis sedini mungkin (4,5,6).

Penemuan penderita yang dicurigai sebagai penderita malaria

klinis merupakan suatu hal yang perlu dilakukan oleh petugas

kesehatan secara dini untuk itu dapat dilakukan dengan pemeriksaan

mikroskopis sebagai metode standar yang meliputi pengambilan dan

 3

pemeriksaan malaria berupa apusan darah tipis dan tebal yang

diidentifikasi dengan mikroskop, dan menghitung densitas (human

malaria) pada apusan darah tipis dan tebal. Diagnosis malaria yang tepat

sangat penting dalam menemukan adanya Plasmodium malaria dalam

darah, untuk pengobatan yang tepat dan cepat agar komplikasi dapat

dihindari (7,8,9).

Sampai saat ini diagnosis pasti malaria berdasarkan ditemukannya

parasit malaria dalam apusan darah secara mikroskopik masih digunakan.

Dalam hal ini pemeriksaan satu kali dengan hasil negatif tidak

mengenyampingkan diagnosa malaria. Pemeriksaan darah tepi tiga kali

dan hasil negatif maka diagnosa malaria dapat dikesampingkan. Untuk

penderita tersangka malaria, bila pemeriksaan apusan darah pertama

negatif, perlu diperiksa ulang setiap 4-6 jam untuk mendapatkan diagnosis

defenitif malaria (10).

Berdasarkan latar belakang tersebut maka dilakukan penelitian

dengan rumusan masalah yaitu bagaimanakah gambaran hasil

pemeriksaan mikroskopis apusan darah malaria dengan variasi waktu

pengambilan sampel yang berbeda ?

Tujuan umum penelitian ini adalah untuk mendapatkan gambaran

hasil pemeriksaan mikroskopis Plasmodium sp. pada apusan darah

malaria yang diambil dengan variasi waktu berbeda berdasarkan gejala

klinis demam. Tujuan khusus dari penelitian ini adalah membandingkan

hasil pemeriksaan mikroskopis apusan darah malaria yang diambil dengan

 4

variasi waktu berbeda yaitu ; pada penderita yang menunjukkan

gejala khas demam dan tidak demam, serta menganalisis gejala dan tanda

klinis malaria yang paling banyak muncul pada penderita malaria di daerah

endemis malaria.

Manfaat dari penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi

dalam program kesehatan, ilmu pengetahuan dan masyarakat mengenai

faktor yang berpengaruh terhadap kejadian malaria. Diharapkan hasil

penelitian ini dapat berguna dan memberikan wawasan pengetahuan bagi

perkembangan teknologi diagnostik malaria.

 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Tinjauan Umum Penyakit Malaria

Penyakit malaria telah diketahui sejak zaman Yunani. Klinik penyakit

malaria adalah khas dan mudah dikenal, karena demam yang naik turun

dan teratur disertai menggigil. Pada waktu itu sudah dikenal febris tersiana

dan febris kuartana. Selain itu ditemukan kelainan limpa, yaitu splenomegali

(11).

Penyakit malaria sudah dikenal sejak tahun 1753, tetapi baru

ditemukan parasit dalam darah oleh Alphonse Laxeran tahun 1880. Untuk

mewarnai parasit, pada tahun 1883 Marchiafava menggunakan metilen biru

sehingga morfologi parasit ini lebih mudah dipelajari. Siklus hidup

plasmodium di dalam tubuh nyamuk dipelajari oleh Ross dan Binagmi pada

tahun 1898 dan kemudian pada tahun 1900 oleh Patrick Manson dapat

dibuktikan bahwa nyamuk adalah vektor penular malaria (12,13).

Pada tahun 1890 Giovanni Batista Grassi dan Raimondo Feletti

adalah dua peneliti Italia yang pertama kali memberi nama dua parasit

penyebab malaria pada manusia, yaitu Plasmodium vivax dan Plasmodium

malariae. Pada tahun 1897 seorang Amerika bernama William H. Welch

memberi nama parasit penyebab malaria tertiana sebagai Plasmodium

falciparum dan pada 1922 John William Watson Stephens menguraikan

nama parasit malaria keempat, yaitu Plasmodium ovale (14).

5
 6

II.1.1 Definisi Penyakit Malaria

Penyakit malaria adalah penyakit yang disebabkan oleh parasit dari

genus Plasmodium yang termasuk golongan protozoa melalui perantaraan

tusukan (gigitan) nyamuk Anopheles spp. yang hidup dan berkembang biak

dalam sel darah merah manusia dan tubuh nyamuk. Penyakit ini secara

alami ditularkan melalui gigitan nyamuk Anopheles betina (11, 12, 13).

Spesies Plasmodium pada manusia adalah Plasmodium falciparum

(P. falciparum), Plasmodim vivax ( P. vivax), Plasmodim ovale ( P. ovale ),

dan Plasmodium malariae (P. malariae). Jenis Plasmodium yang banyak

ditemukan di Indonesia adalah P. falciparum dan P. vivax, sedangkan P.

malariae ditemukan di beberapa propinsi antara lain : Lampung, Nusa

Tenggara Timur, dan Papua. Sedangkan P. ovale pernah juga di temukan

di Nusa Tenggara Timur dan Papua (14).

II.1.2 Epidemiologi

Malaria ditemukan di daerah-daerah, mulai dari 640 lintang utara

(Arch angel, Uni Soviet dahulu) sampai 320 lintang selatan (Cordoba,

Argentina), didaerah 400 m bawah permukaan laut (laut Mati), dan 2600 m

diatas permukaan laut Cochabamba (Bolivia). Diantara batas lintang dan

ketinggian ini, ada daerah-daerah yang bebas malaria, tergantung dari

keadaan dan lingkungannya. Malaria merupakan penyakit tropis yang

endemis. Di Indonesia malaria ditemukan tersebar luas disemua pulau

dengan derajat dan berat infeksi yang berbeda-beda (15 , 16).

 7

Penularan malaria tergantung dari adanya tiga faktor utama yang

merupakan dasar epidemiologinya, yaitu : hospes (manusia), parasit (

Plasmodium), dan lingkungan (fisik, biologis, kimia dan sosial ekonomi).

Keadaan malaria diberbagai daerah endemis tidak sama, derajat

endemisitas dapat diukur dengan berbagai cara, seperti angka limpa

(spleen rate), angka parasit (parasite rate), dan angka sporozoit (sporozoite

rate ), yang disebut dengan malariometri. Angka limpa adalah prosentase

orang dengan pembesaran limpa pada penduduk daerah endemis yang

diperiksa. Pemeriksaan pembesaran limpa dilakukan dengan cara Hackett.

Daerah disebut hipo endemis bila angka limpa dibawah 10% pada anak

yang berumur 2-9 tahun; meso endemis bila antara 10-50%; hiper endemis

bila diatas 50% dan holo endemis bila melebihi 75% (12, 17).

Annual Parasite Incidence (API)

Dan Annual Malaria Incidence (AMI) Tahun 2009

Gambar 1. Peta startifikasi Malaria 2009

(Sumber : Ditjen PP & PL. Epidemiologi Malaria di Indonesia. KemenKes RI 2011.
Hal 2)
 8

Angka parasit ditentukan dengan persentase orang yang apuasan

darahnya positif pada saat tertentu, sedang slide positivity rate (SPR)

adalah persentase apusan darah yang positif dalam periode kegiatan

penemuan kasus (active case detection). Annual Parasite Index (API)

adalah jumlah apusan darah positif dibandingkan dengan jumlah apusan

darah yang diperiksa per tahun dalam permil (0/00). Berat ringannya infeksi

malaria pada suatu masyarakat diukur dengan densitas parasit (parasite

density), yaitu jumlah rata-rata parasit dalam apusan darah positif.

Sedangkan berat ringannya infeksi malaria pada seseorang diukur dengan

hitung parasit (parasite count) yaitu jumlah parasit dalam 1 ml darah (18, 19

).

II.1.3 Etiologi

a. Siklus Pada Manusia (Fase Aseksual)

Pada waktu nyamuk Anopheles infektif menghisap darah manusia,

sporozoit yang berada di kelenjar liur nyamuk akan masuk kedalam

peredaran darah manusia selama lebih kurang ½ jam. Setelah itu sporozoit

akan masuk kedalam sel hati dan menjadi tropozoit hati. Kemudian

berkembang menjadi skizon hati yang terdiri dari 10.000-30.000 merozoit

hati (tergantung spesiesnya). Siklus ini disebut siklus ekso-eritrositer yang

berlangsung selama lebih kurang 2 minggu. Pada P.vivax dan P. ovale,

sebagian tropozoit hati tidak langsung berkembang menjadi skizon, tetapi

ada yang menjadi bentuk dorman yang disebut hipnozoit. Hipnozoit

tersebut dapat tinggal di dalam sel hati selama berbulan-bulan

 9

sampai bertahun-tahun. Pada suatu saat, bila imunitas tubuh

menurun, akan menjadi aktif sehingga dapat menimbulkan relaps ( kambuh

) (20, 21).

Merozoit yang berasal dari skizon hati yang pecah akan masuk ke

peredaran darah dan menginfeksi sel darah merah. Didalam sel darah

merah, parasit tersebut berkembang dari stadium tropozoit sampai skizon

(8-30 merozoit, tergantung spesiesnya). Proses perkembangan aseksual ini

di sebut skizogoni. Selanjutnya eritrosit yang terinfeksi (skizon ) pecah dan

merozoit yang keluar akan menginfeksi sel darah merah lainnya. Siklus ini

disebut siklus eritrositer (14).

Gambar 2. Proses Penularan Malaria

(Sumber : Ditjen PP-PL. Pedoman Penatalaksanaan Kasus Malaria di Indonesia.
DepKes RI.Jakarta. 2008. Hal. 4 )
 10

b. Siklus Pada Nyamuk Anopheles Betina (Fase Seksual)

Apabila nyamuk Anopheles betina menghisap darah penderita yang

mengandung gametosit, didalam tubuh nyamuk, gamet jantan dan betina

melakukan pembuahan menjadi zigot. Zigot berkembang menjadi ookinet

kemudian menembus dinding lambung nyamuk. Pada dinding luar lambung

nyamuk ookinet akan menjadi ookista dan selanjutnya menjadi sporozoit.

Sporozoit bersifat infektif dan siap ditularkan kembali ke manusia. Dalam

kaitan dengan siklus hidup Plasmodium ini, kita mengenal istilah masa

inkubasi, yaitu rentang waktu sejak sporozoit masuk sampai timbulnya

gejala, klinis yang ditandai dengan demam. Masa inkubasi bervariasi

tergantung spesies Plasmodium (lihat tabel 1) (14, 15).

Tabel. 1 Masa Inkubasi penyakit Malaria

Plasmodium Masa inkubasi (hari)

P. falciparum 9 – 12

P. vivax 12 – 17

P. ovale 16 – 18

P. malariae 18 – 40

Sumber : Ditjen PP-PL. Pedoman Penatalaksanaan Kasus Malaria di Indonesia. DepKes

RI.Jakarta. 2008. Hal. 4

Masa prepaten adalah rentang waktu sejak sporozoit masuk

sampai parasit dapat dideteksi dalam darah dengan pemeriksaan

mikroskopik maupun imunokromatografi (16).

 11

II.2 Tinjauan Umum Plasmodium Malaria

a. Plasmodium falcifarum

Spesies ini menyebabkan penyakit malaria tersiana (malaria

tropika), disebut pula malaria subtertiana, malaria “estivoatumnal”, atau

lebih tepat malaria falciparum, yang sering menjadi malaria yang

berat/malaria serebralis, dengan angka kematian yang tinggi. Infeksi oleh

spesies ini menyebabkan parasitemia yang meningkat jauh lebih cepat

dibandingkan spesies lain dan merozoitnya menginfeksi sel darah merah

dari segala umur (22).

Plasmodium falciparum merupakan spesies yang paling berbahaya

karena penyakit yang ditimbulkannya dapat menjadi berat. Stadium dini

yang dapat dilihat dalam hati adalah skizon yang berukuran ± 30 µ pada

hari keempat setelah infeksi. Jumlah merozoit pada skizon matang (mature)

kira – kira 40.000 buah. Dalam darah bentuk cincin stadium tropozoit muda

Plasmodium falciparum sangat kecil dan halus dengan ukuran kira – kira

seperenam diameter eritrosit. Pada bentuk cincin dapat dilihat dua butir

kromatin, beberapa bentuk cincin dapat ditemukan dalam satu eritrosit

(infeksi multipel) (23).

Stadium skizon muda Plasmodium falciparum dapat dikenal dengan

mudah oleh adanya satu atau dua butir pigmen yang menggumpal. Pada

spesies parasit lain terdapat 20 butir atau lebih butir pigmen pada stadium

skizon yang lebih tua. Selain itu pada permukaan eritrosit yang terinfeksi
 12

akan membentuk knob yang berisi berbagai antigen Plasmodium

falciparum (22,23).

Gambar 3. Morfologi stadium Plasmodium falcifarum pada apusan darah tebal (atas) dan
tipis (bawah)
(Sumber : NAMRU-2 Buku Panduan Diagnosis Mikroskopik Malaria. Departemen
Parasitologi Medik. Jakarta. 2007. Hal 6.)

Pada saat terjadi proses sitoadherensi (mempercepat proses

pengikatan), knob tersebut akan berikatan dengan reseptor sel endotel

kapiler. Akibat dari proses ini terjadi penyumbatan dalam pembuluh kapiler

yang menyebabkan terjadinya iskemia (defisiensi darah) jaringan.

Terjadinya sumbatan ini juga didukung oleh proses tebentuknya “ rosette”

yaitu bergerombolnya sel darah merah yang berparasit dengan sel darah

merah lainnya (22, 23).

b. Plasmodium vivax

P. vivax menyebabkan malaria tertiana atau tertianague. Spesies ini

memiliki kecenderungan menginfeksi sel – sel darah merah yang muda atau

retukulosit sehingga sel darah yang diinfeksi memberi kesan adanya

 13

pembesaran yang lebih nyata dari yang sebenarnya. Morfologi dari

Plasmodium vivax yaitu tropozoit muda tampak seperti cincin stempel,

dengan titik kromatin pada satu sisi. Pada stadium yang lebih tua dari

stadium cincin, eritrosit yang diinfeksi membesar dan menjadi pucat, karena

kekurangan Hb (22)

Gambar 4. Morfologi stadium Plasmodium vivax pada apusan darah tebal (atas) dan tipis
(bawah)
(Sumber : NAMRU-2 Buku Panduan Diagnosis Mikroskopik Malaria. Departemen
Parasitologi Medik. Jakarta. 2007. Hal 7.)

Tropozoit yang tumbuh bentuknya bertambah besar, tidak beraturan,

mempunyai pigmen yang halus dan menunjukkan gerakkan amoeboid yang

jelas. Setelah 36 jam, tropozoit itu memenuhi lebih dari separuh eritrosit

yang membesar, intinya mulai membelah, menjadi skizon. Setelah 48 jam,

skizon mencapai ukurannya yang maksimal dan mengalami segmentasi

yang maksimal pula. Pigmen berkumpul di pinggir, dan terdapat 16 – 18 sel

merozoit yang berbentuk bulat atau lonjong, berdiameter 1,5 – 2 µ (23).

 14

Gametosit berbentuk lonjong, mengisi hampir seluruh eritrosit.

Mikrogametosit mempunyai inti yang besar, berwarna merah muda yang

pucat, dan sitoplasmanya berwarna biru pucat. Makrogametosit

mempunyai sitoplasma yang lebih biru, intinya tampak padat, berwarna

merah terletak di pinggir Plasmodium. Dengan pewarnaan yang kuat

tampak titik – titik yang halus, bulat, seragam, bewarna merah muda atau

kemerah – merahan di dalam sitoplasma eritrosit. Butir – butir ini disebut

titik – titik schuffner ( Schuffer’s dots) yang pada infeksi Plasmodium vivax

ditemukan pada fase Plasmodium, kecuali bentuk cincin (23).

II.3 Gambaran Klinis

II.3.1 Patogenesis Malaria

Patogenesis malaria sangat kompleks, dan seperti patogenesis

penyakit infeksi pada umumnya melibatkan faktor parasit, faktor penjamu,

dan lingkungan. Ketiga faktor tersebut saling terkait satu sama lain, dan

menentukan manifestasi klinis malaria yang bervariasi mulai dari yang

paling berat , yaitu malaria dengan komplikasi gagal organ (malaria berat),

malaria ringan tanpa komplikasi, atau yang paling ringan, yaitu infeksi

asimtomatik (12).

Tanda dan gejala klinis malaria yang timbul bervariasi tergantung

pada berbagai hal antara lain usia penderita, cara transmisi, status

kekebalan, jenis Plasmodium, infeksi tunggal atau campuran. Selain itu

yang tidak kalah penting adalah kebiasaan menggunakan obat anti malaria

yang kurang rasional yang dapat mendorong timbulnya resistensi.

 15

Berbagai faktor tersebut dapat mengacaukan diagnosis malaria

sehingga dapat disangka demam tifoid atau hepatitis, terlebih untuk daerah

yang dinyatakan bebas malaria atau yang Annual Parasite Incidence–nya

rendah (18, 24).

II.3.2 Gejala

Gejala umum penyakit malaria yaitu demam. Di duga terjadinya

demam berhubungan dengan proses skizogoni (pecahnya

merozoit/skizon). Gambaran karakteristik dari malaria adalah demam

periodik, anemia dan splenomegali. Berat ringannya manifestasi malaria

tergantung jenis Plasmodium yang menyebabkan infeksi. Untuk P.

falciparum demam tiap 24-48 jam, P. vivax demam tiap hari ke-3, P.

malariae demam tiap hari ke-4, dan P. ovale memberikan infeksi yang

paling ringan dan sering sembuh spontan tanpa pengobatan (24, 25).

Sebelum timbulnya demam, biasanya penderita mengeluh sakit

kepala, kehilangan nafsu makan, merasa mual di ulu hati, atau muntah

(semua gejala awal ini disebut gejala prodromal). Sesudah serangan panas

pertama terlewati, terjadi interval bebas panas selama 48 – 72 jam, lalu

diikuti dengan serangan panas berikutnya seperti panas pertama; dan

demikian selanjutnya. Secara klinis ada 3 stadium yang khusus pada

malaria, yaitu :

a. Stadium dingin (Cold Stage)

Stadium ini dimulai dengan menggigil dan perasaan sangat dingin.

Nadi penderita cepat tetapi lemah. Bibir dan jari-jari pucat kebiru-biruan
 16

(sianotik). Kulitnya kering dan pucat, penderita mungkin muntah dan

pada penderita anak sering terjadi kejang. Stadium ini berlangsung selama

15 menit – 1 jam diikuti dengan meningkatnya temperatur (26, 27, 28).

b. Stadium Panas (Hot Stage)

Setelah menggigil/merasa dingin, pada stadium ini penderita

mengalami serangan panas. Muka penderita menjadi merah, kulitnya

kering dan dirasakan sangat panas seperti terbakar, sakit kepala

bertambah keras, dan sering disertai dengan rasa mual atau muntah-

muntah, dapat terjadi syok (tekanan darah turun). Nadi penderita menjadi

kuat kembali. Biasanya penderita menjadi sangat haus dan suhu badan

bisa meningkat menjadi 41°C. Stadium ini berlangsung selama 2 – 4 jam

diikuti dengan keadaan berkeringat (26, 27, 28).

c. Stadium Berkeringat (Sweating Stage)

Pada stadium ini penderita berkeringat mulai dari temporal, diikuti

seluruh tubuh sampai basah, temperatur turun, penderita merasa lemah

dan sering tertidur dan pada saat terbangun akan merasa lemah. Stadium

ini berlangsung selama 2 sampai 4 jam. Sesudah serangan panas pertama

terlewati, terjadi interval bebas panas selama 48 – 72 jam, lalu diikuti

dengan serangan panas berikutnya seperti panas pertama; dan demikian

selanjutnya (26, 27, 28).

Gejala-gejala yang disebutkan diatas tidak selalu sama pada setiap

penderita, tergantung pada spesies parasit dan umur dari penderita, gejala

klinis yang berat biasanya terjadi pada malaria tropika yang

 17

disebabkan oleh Plasmodium falciparum. Hal ini disebabkan oleh

adanya kecenderungan parasit (bentuk tropozoit dan skizon) untuk

berkumpul pada pembuluh darah organ tubuh seperti otak, hati dan ginjal

sehingga menyebabkan tersumbatnya pembuluh darah pada organ-organ

tubuh tersebut. Gejala berupa koma/pingsan, kejang-kejang sampai tidak

berfungsinya ginjal. Kematian paling banyak disebabkan oleh jenis malaria

ini. Kadang–kadang gejalanya mirip kolera atau disentri. Black water fever

yang merupakan gejala berat adalah munculnya hemoglobin pada air seni

yang menyebabkan warna air seni menjadi merah tua atau hitam. Gejala

lain dari black water fever adalah ikterus dan muntah-muntah yang

warnanya sama dengan warna empedu, black water fever biasanya

dijumpai pada mereka yang menderita infeksi P. falcifarum yang berulang-

ulang dan infeksi yang cukup berat (29).

Secara klasik demam terjadi setiap dua hari untuk parasit tertiana (P.

falciparum, P. vivax, dan P. ovale) dan setiap tiga hari untuk parasit quartan

(P. malariae). P. falciparum lebih menonjol di Afrika bagian selatan Sahara

dengan jumlah penderita yang lebih banyak, demikian juga yang meninggal

dibandingkan dengan daerah-daerah tempat parasit yang lain lebih

menonjol. P. falciparum dan P. vivax kemungkinan mampu

mengembangkan ketahanannya terhadap obat antimalaria (25,26).

II.3.3 Penularan Malaria

Malaria ditularkan ke penderita dengan masuknya sporozoit

Plasmodium melalui gigitan nyamuk betina Anopheles yang spesiesnya

 18

dapat berbeda dari satu daerah dengan daerah lainnya. Terdapat

lebih dari 15 spesies nyamuk Anopheles yang dilaporkan merupakan vektor

malaria di Indonesia. Penularan malaria dapat juga terjadi dengan

masuknya parasit bentuk aseksual (tropozoit) melalui transfusi darah,

suntikan atau melalui plasenta (malaria congenital) (27).

Dikenal adanya berbagai cara penularan malaria:

a. Penularan secara alamiah (Natural Infection)

Penularan ini terjadi melalui gigitan nyamuk Anopheles betina yang

infektif. Nyamuk menggigit orang sakit malaria maka parasit akan ikut

terhisap bersama darah penderita malaria. Di dalam tubuh nyamuk parasit

akan berkembang dan bertambah banyak, kemudian nyamuk menggigit

orang sehat, maka melalui gigitan tersebut parasit ditularkan ke orang lain

(10).

b. Penularan yang tidak alamiah

1. Malaria bawaan (congenital)

Terjadi pada bayi yang baru dilahirkan karena ibunya menderita

malaria. Disebabkan adanya kelainan pada sawar plasenta sehingga tidak

ada penghalang infeksi dari ibu kepada bayi yang dikandungnya (17).

2. Secara mekanik

Penularan terjadi melalui transfusi darah atau melalui jarum suntik.

Penularan melalui jarum suntik banyak terjadi pada para pecandu obat bius

yang menggunakan jarum suntik yang tidak steril (17).

 19

3. Secara oral (melalui mulut)

Cara penularan ini pernah dibuktikan pada burung, ayam (P.

gallinasium) burung dara (P. relection) dan monyet (P. knowlesi). Pada

umumnya sumber infeksi bagi malaria pada manusia adalah manusia lain

yang sakit malaria baik dengan gejala maupun tanpa gejala klinis. Kecuali

bagi simpanse di Afrika yang dapat terinfeksi oleh penyakit malaria, belum

diketahui ada hewan lain yang dapat menjadi sumber bagi Plasmodium

yang biasanya menyerang manusia. Malaria, baik yang disebabkan oleh P.

falciparum, P. vivax, P. malariae dan P. ovale semuanya ditularkan oleh

nyamuk Anopheles. Nyamuk yang menjadi vektor penular malaria adalah

Anopheles sundaicus, Anopheles aconitus, Anopheles barbirostris,

Anopheles subpictus, dan sebagainya (19).

II.4 Diagnosis Malaria

Apabila terdapat 1 atau beberapa komplikasi/manifestasi klinik berat

maka diagnosa pasti malaria berat ditegakkan berdasarkan hasil

pemeriksaan sediaan darah (SD) tebal positif spesies malaria (12, 24).

Pemeriksaan mikroskopik merupakan pemeriksaan terpenting pada

penyakit malaria karena interpretasi pemeriksaan ini selain dapat

mengidentifikasi jenis Plasmodium secara tepat sekaligus juga dapat

menghitung jumlah parasit sehingga derajat parasitemia dapat diketahui.

Salah satu penilaian prognosis dapat dilakukan berdasarkan hitung parasit,

yaitu : Hitung parasit < 100.000/uL, mortalitas < 1%Hitung parasit >

500.000/uL, mortalitas > 50%, dan umumnya prognosis buruk bila hitung
 20

parasit > 250.000/uL atau > 5 %. Selain jumlah parasit pada

pemeriksaan darah tipis/tebal, penentuan jenis Plasmodium beserta

stadium (aseksual) juga penting untuk menilai kemungkinan terjadinya

malaria berat, terutama bila didapatkan P. falciparum stadium skizon.

Setiap pemeriksaan mikroskopis Plasmodium malaria dinyatakan negatif

bila minimal dalam 100 lapang pandang tidak ditemukan parasit malaria.

Pemeriksaan ini perlu diulang setiap 4-6 jam sebanyak 3 x berturut-turut.

Bila hasil tetap negatif, diulang pemeriksaan selang 1 hari, sampai 3 kali.

Apabila hasil pemeriksaan SD tebal selama 3 hari berturut-turut negatif,

maka dapat dinyatakan tidak didapatkan parasit malaria di dalam darah

pasien dan diagnosa malaria mungkin dapat disingkirkan. Tetapi pada

kasus yang diduga malaria berat dengan hasil pemeriksaan darah parasit

malaria tidak ditemukan sebaiknya dilakukan pemeriksaan imunoserologi.

(12, 21).

Diagnosis malaria ditegakkan seperti diagnosis penyakit lainnya

berdasarkan anamnesis, pemeriksaan fisik dan pemeriksaan laboratorium.

Diagnosis pasti malaria harus ditegakkan dengan pemeriksaan apusan

darah secara mikroskopik atau tes diagnostik cepat (12, 15).

II.4.1 Anamnesis

Pada anamnesis sangat penting diperhatikan:

1) Keluhan utama: demam, menggigil, berkeringat dan dapat disertai sakit

kepala, mual, muntah, diare dan nyeri otot atau pegal-pegal;

2) Riwayat berkunjung dan bermalam 1- 4 minggu yang lalu ke daerah

endemik malaria;
 21

3) Riwayat tinggal di daerah endemik malaria;

4) Riwayat sakit malaria;

5) Riwayat minum obat malaria satu bulan terakhir;

6) Riwayat mendapat transfusi darah.

II.4.2 Pemeriksaan fisik.

1) Demam (pengukuran dengan termometer ≥ 37,50 C);

2) Konjungtiva atau telapak tangan pucat;

3) Pembesaran limpa (splenomegali);

4) Pembesaran hati (hepatomegali).

II.4.3 Diagnosis Atas Dasar Pemeriksaan Laboratorium

1. Mikroskopik.

Pemeriksaan dengan mikroskop, yaitu pemeriksaan apusan darah

tebal dan tipis di Puskesmas/lapangan/Rumah Sakit untuk menentukan ada

tidaknya parasit malaria (positif atau negatif), spesies dan stadium

Plasmodium serta kepadatan parasit (29).

a) Semi Kuantitatif

(-) = Negatif (tidak ditemukan parasit dalam 100

LPB/lapangan pandang besar)

(+) = Positif 1 (ditemukan 1 -10 parasit dalam 100 LPB)

(++) = Positif 2 (ditemukan 11-100 parasit dalam 100 LPB)

(+++) = Positif 3 (ditemukan 1 -10 parasit dalam 1 LPB)

(++++) = Positif 4 (ditemukan >10 parasit dalam 1 LPB)

 22

b). Kuantitatif

Jumlah parasit dihitung per mikro liter darah pada apusan darah

tebal (leukosit) atau apusan darah tipis (eritrosit).

Contoh: Bila dijumpai 1500 parasit per 200 lekosit, sedangkan

jumlah lekosit 8.000/uL maka hitung parasit = 8.000/200 X 1500, parasit =

60.000 parasit/ µl. Bila dijumpai 50 parasit per 1000 eritrosit = 5%. Bila

jumlah eritrosit 450.000 maka hitung parasit = 450.000/1000 X 50 = 225.000

parasit µl (12).

2. Teknik mikroskopik lain

Berbagai jenis upaya telah dilakukan untuk meningkatkan

sensitivitas teknik mikroskopik yang konvensional, diantaranya teknik QBC

(Quantitavie Buffy Coat) dengan pulasan jingga akridin (acridine orange)

yang berfluoresensi dengan pemeriksaan mikroskop fluoresen merupakan

salah satu hasil usaha ini, tetapi masih belum dapat digunakan secara luas

seperti pemeriksaan apusan darah tebal dengan pulasan giemsa

menggunakan mikroskop cahaya biasa. Teknik Kawamoto, merupakan

modifikasi teknik pulasan jingga akridin yang memulas apusan darah bukan

dengan giemsa tetapi dengan akridin dan diperiksa dengan mikroskop

cahaya yang diberi lampu halogen (12, 17, 24).

a. Metode teknik QBC (Quantitative Buffy Coat)

Teknik ini berdasarkan kemampuan jingga akridin (acridine orange)

memulas asam nukleat yang berada dalam sel. Sampel darah dari ujung

jari penderita dikumpulkan dalam tabung mikrohematokrit yang berisi zat

 23

akridin dan antikoagulan, kemudian tabung disentrifuge pada 12000

rpm selama 5 menit parasit yang berfluorensensi dengan pemeriksaan

mikroskop fluorensen merupakan salah satu hasil usaha, tapi cara ini tidak

digunakan dalam pemeriksaan rutin seperti pada pemeriksaan mikroskopis

(19).

b. Teknik Kawamoto.

Metode ini dikembangkan tahun 1991 oleh Kawamoto dengan

menggunakan apusan darah tipis dan tebal seperti pada pulasan

konvensional kemudian diwarnai dengan acridin orange ( 1 – 2 tetes ) dan

diperiksa dengan mikroskop cahaya dengan lampu halogen (23).

3. Metode Pemeriksaan Biomolekuler

Pemeriksaan ini digunakan untuk mendeteksi DNA spesifik parasit/

Plasmodium dalam darah penderita malaria. Pemeriksaan ini juga bisanya

disebut metode pemeriksaan PCR (Polymerase Chain reaction) dengan

prinsip reaksinya menggandakan segmen DNA spesifik dari parasit

Plasmodium, mempunyai kemampuan mendeteksi 1 copi Gen Plasmodium

dan spesifitas dan sensitifitas tesnya tinggi (100%) tetapi metode tidak bisa

digunakan untuk pemeriksaan rutin malaria karena peralatan yang

harganya cukup mahal dan membutuhkan tenaga yang profesional terlatih

(11, 24).
 24

4. Pemeriksaan dengan tes diagnostik cepat (Rapid Diagnostic Test).

Mekanisme kerja tes ini berdasarkan deteksi antigen parasit malaria

dengan menggunakan metoda imunokromatografi, dalam bentuk dipstik.

Tes ini sangat bermanfaat pada unit gawat darurat, pada saat terjadi

kejadian luar biasa dan di daerah terpencil yang tidak tersedia fasilitas lab

serta untuk survei tertentu. Tes yang tersedia di pasaran saat in;

mengandung:

a) HRP-2 (Histidine rich protein 2) yang diproduksi oleh trofozoit, skizon

dan gametosit muda P. falciparum;

b) Enzim parasite lactate dehydrogenase (p-LDH) dan aldolase yang

diproduksi oleh parasit bentuk aseksual atau seksual P. falciparum, P.

vivax, P. ovale dan P. malariae (7)

Kemampuan rapid test yang beredar pada umumnya ada 2 jenis yaitu:

a. Single yang mampu mendiagnosis hanya infeksi P. falciparum.

b. Combo yang mampu mendiagnosis infeksi P. falciparum dan non

falciparum. Oleh karena teknologi ini baru memasuki industri maka

sangat perlu untuk memperhatikan kemampuan sensitivity dan

specificity dari alat ini. Dianjurkan untuk menggunakan rapid test dengan

kemampuan minimal sensitivity 95% dan specificity 95%. Hal yang

penting lainnya adalah penyimpanan Rapid Diagnostic Test (RDT) ini

sebaiknya dalam lemari es tetapi tidak dalam frezer pendingin (14, 17,

18).