Scribd Logo
Unggah

Selamat datang di Scribd!

  • 80 tayangan

    Uji HI

    Diunggah oleh

    Yohana Saynandya
    Dokumen tersebut menjelaskan tentang uji haemagglutination inhibition (HI) untuk mengukur titer antibodi dan mengidentifikasi jenis virus. Uji ini berprinsip pada hambatan aglutinasi eritrosit oleh virus akibat adanya antibodi spesifik. Langkah-langkahnya meliputi pembuatan suspensi eritrosit, pengenceran antigen, inkubasi serum dan antigen, lalu pembacaan hasil berdasarkan terjadinya aglutinasi atau tidaknya.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    Uji HI

    Diunggah oleh

    Yohana Saynandya
    80 tayangan16 halaman
    Dokumen tersebut menjelaskan tentang uji haemagglutination inhibition (HI) untuk mengukur titer antibodi dan mengidentifikasi jenis virus. Uji ini berprinsip pada hambatan aglutinasi eritrosit oleh virus akibat adanya antibodi spesifik. Langkah-langkahnya meliputi pembuatan suspensi eritrosit, pengenceran antigen, inkubasi serum dan antigen, lalu pembacaan hasil berdasarkan terjadinya aglutinasi atau tidaknya.

    Hak Cipta

    © © All Rights Reserved

    Format Tersedia

    PDF, TXT atau baca online dari Scribd

    Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

    Apakah konten ini tidak pantas?

    Dokumen tersebut menjelaskan tentang uji haemagglutination inhibition (HI) untuk mengukur titer antibodi dan mengidentifikasi jenis virus. Uji ini berprinsip pada hambatan aglutinasi eritrosit oleh virus akibat adanya antibodi spesifik. Langkah-langkahnya meliputi pembuatan suspensi eritrosit, pengenceran antigen, inkubasi serum dan antigen, lalu pembacaan hasil berdasarkan terjadinya aglutinasi atau tidaknya.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pdf atau txt
    80 tayangan16 halaman

    Uji HI

    Diunggah oleh

    Yohana Saynandya
    Dokumen tersebut menjelaskan tentang uji haemagglutination inhibition (HI) untuk mengukur titer antibodi dan mengidentifikasi jenis virus. Uji ini berprinsip pada hambatan aglutinasi eritrosit oleh virus akibat adanya antibodi spesifik. Langkah-langkahnya meliputi pembuatan suspensi eritrosit, pengenceran antigen, inkubasi serum dan antigen, lalu pembacaan hasil berdasarkan terjadinya aglutinasi atau tidaknya.

    Hak Cipta:

    © All Rights Reserved
    Unduh sebagai PDF, TXT atau baca online dari Scribd
    Unduh sebagai pdf atau txt
    dari 16

    Hemaglutination Inhibition

    Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi


    Fakultas Kedokteran Hewan
    Universitas Brawijaya
    Malang
    Uji HI
     Haemagglutination Inhibiton (HI) atau Hambatan Hemagglutinasi:
    pengujian yang ditujukan untuk mengetahui titer antibodi, baik antibodi
    karena kasus infeksi maupun antibodi hasil vaksinasi.
     Hemaglutination Test digunakan untuk mendeteksi adanya antibodi
    spesifik. Seperti antibodi terhadap agen infeksi yang mempunyai
    hemagglutinin (contoh: ND, EDS, IB, dan AI)  identifikasi/ mengetahui
    jenis virus.
    Tujuan
     Mengukur titer antibodi atau antiserum agar diketahui status kekebalan
    tubuh setelah dilakukan vaksinasi virus.
     Mengidentifikasi suatu virus.
    Prinsip
     Prinsip uji HI adalah hambatan aglutinasi RBC oleh virus akibat terikatnya
    virus tersebut dengan antibodi spesifik.
     Netralisasi antibodi oleh antigen spesifik.
     Berbeda dengan pengujian HA, pengujian HI menunjukkan hasil positif
    apabila terdapat endapan eritrosit. Sedangkan hasil negatif ditunjukkan tanpa
    adanya endapan eritrosit.
    Proses Hemaglutinasi oleh Antibodi
    ALAT &
    Bahan
     Microplate V bottom  Vaksin ND/ antigen
     Micropipet  Serum darah positif ND
     Tabung falkon  RBC ayam 1%
     Yellow tip  PBS
    Langkah Kerja
    1. Pembuatan RBC 1%
     Diambil darah ayam
     Dimasukkan tabung EDTA
     Disentrifus 2500 rpm 10 menit
     Dibuang supernatan
     Ditambah PBS dengan perbandingan PBS dan platelet 1:3
     Disentrifus lagi (diulang 3-4 kali), tiap sentrifus PBS supernatant dibuang
     Sentrifus terakhir: platelet diambil (100%)
     Dibuat konsentrasi RBC menjadi 1% diambil 1 ml RBC 10% dan ditambah 9 ml
    PBS (V1M1 = V2M2)

    2. Pengenceran antigen untuk uji HI


     Antigen dibuat standar 4 HA unit
    Pengenceran Antigen
     Antigen 4 HA unit

    Pada Uji HA digunakan untuk mengetahui titer antigen. Titer antigen yang terbentuk, dibuat
    standar 4 HAU (titer HA : 4 HAU).
    Hasil 4HAU
    Contoh:
    1. Titer HA yang terbentuk adalah 128 (pengenceran 2-7), maka:
    27
    = 25 = 32
    22

    Jadi perbandingan antara antigen dan PBS yaitu 1:31 (1 bagian antigen dan 31 bagian PBS).
    Volume total ag yang dibutuhkan seluruh well = 96 well × 25µl = 2400µl.
    2400µl
    32
    = 75µl ag + 2325µl PBS.

    2. Titer HA yang terbentuk adalah 512 (pengenceran 2-9), maka:


    29
    22
    = 27 = 128
    Perbandingan antigen:PBS = 1:127
    25µl ag + 3175µl PBS.
    Langkah Kerja Uji HI
    1. Microplate diisi PBS 25 µL pada semua well.
    2. Diisi serum di sumuran A1. Dilakukan pengenceran sampai sumuran A11 dengan
    mengambil 25 µL dari sumuran pertama dan dimasukkan kedua. Diulangi sampai
    sumuran A11
    3. Ditambah antigen 25 µL di sumuran A1-A12
    4. Diinkubasi suhu ruang 30 menit
    5. Ditambah RBC 1% sebanyak 25 µL di semua sumuran
    6. Diinkubasi 30 menit
    7. Dibaca hasil

    Titer antibody  angka pengenceran tertinggi yang masih mampu menghambat


    aglutinasi eritrosit
    Skema
    Intepretasi Hasil

    Uji HI, hasil dinyatakan positif menghambat aglutinasi eritrosit, jika


    setelah inkubasi terdapat endapan eritrosit berbentuk titik di tengah
    sumuran mikroplet.
    Membaca Hasil

    Endapan eritrosit
    tilt and flow
     Dibaca dari permukaan, dilihat adanya endapan eritrosit
     Mikroplate dapat dimiringkan, dan dibaca dari bawah plate
     Jika dimiringkan ada aliran sel darah merah (tilt and flow) = hasilnya positif
    Interpretasi Hasil

    Hasil positif Hasil negatif

     KV : Kontrol Virus
     K : Kontrol
    Hasil Uji HI
    THANK YOU

    Anda mungkin juga menyukai