La biopharmacie

Biodisponibilité - Bioéquivalence
et dissolution
INTRODUCTION
• Années 1954.
• Observation accidents toxiques dus à des
surdosages ou d’absence d’effets thérapeutiques
attribués à des sous-dosages
• Nouvelle notion : disponibilité médts , =
disponibilité physiologique, biologique ou
biodisponibilité.
• « dose administrée égale dose résorbée »???
• Actuellement, dose administrée ≠ la dose résorbée .
I- Evolution du principe actif dans
l’organisme 
I.1- Phase biopharmaceutique
I.1.1- Libération 
Lors de l’administration d’une forme solide, la 1 ere étape de
la mise à disposition du PA est sa libération.
Libération rapide ou lente .
Elle dépend de:
• La forme galénique.
• La nature des excipients.
• La technologie de mise en forme (mode de granulation,
compression : variabilité de la pression).
 Pour les comprimés à libération rapide, la mise à
disposition de l’organisme nécessite la destruction de
leur structure par désintégration et désagrégation selon
le schéma suivant :

Principaux
stades de la
mise à
disposition d’un
principe actif à
partir d’un
comprimé
(d’après
Wagner).
I.1.2- Dissolution 
• Pour traverser les membrane biologiques ou pour être
absorbé le PA doit être dispersé à l’état moléculaire en
milieu aqueux au site d’absorption. Cette mise en
solution constitue l’étape de la dissolution qui est
préalable à l’étape de l’absorption.

 
Modalités d’absorption
Le médicament doit passer une barrière qui le sépare de la
circulation générale (l’épithélium digestif lors d’une
administration orale par exemple).

Parmi les différents mécanismes, 2 sont importants :

• Diffusion passive : pas de consommation d’énergie/non
spécifique/ pas de compétition/ pas de saturation ⇒ Loi de
Fick++

• Transport actif : contre un gradient/ saturable/ spécifique/

compétition++/ énergie++
 Modalités d’absorption
L’absorption est influencée par :

• Les caractéristiques du médicament :

▫ Physico-chimiques : pKa (la forme non ionisée d’un médicament est absorbée plus
facilement)
▫ Hydro/lipo solubilité
▫ Taille et morphologie de la molécule
▫ La forme galénique (sirop, comprimé, gélule…) qui détermine la vitesse de
dissolution du médicament…

• Les caractéristiques liés à l’individu :

▫ Le pH digestif
▫ La vitesse de vidange gastrique et la mobilité intestinale
▫ L’alimentation : repas riche en graisses…
▫ La prise associée de médicament (pansements digestifs, modificateurs de vidange
gastrique)
▫ L’âge
▫ Les pathologies associées : digestives, cardiaques (diminution débit…
I.2- Phase pharmacocinétique 
Cette phase correspond au devenir in vivo du PA
II- La biodisponibilité
II-1- Définition
 La biodisponibilité se définit comme étant la
vitesse et l’étendue avec lesquelles la substance
ou sa fraction active gagne la circulation
générale.
 Quantité relative de PA absorbé à partir d’une
forme pharmaceutique qui atteint le site d’action
 vitesse du processus
II-3- Paramètres de la biodisponibilité 
L’évaluation de la biodisponibilité se fait par dosage du
PA dans le sang total, le plasma, la salive, les urines ou
autre liquide biologique d’un individu sain, à la suite
d’une prise unique ou répétée d’un médicament.
II-4- Différents types de biodisponibilité 
II-4-1- La biodisponibilité absolue : F
 Elle est destinée à évaluer l’intérêt d’une voie
d’administration (orale, rectale…) par rapport à la voie
intraveineuse qui est considérée comme référence.
 Pourcentage de la dose administrée (de 0 à 100%), qui
atteint la circulation générale
• La biodisponibilité absolue est par définition comprise
entre 0 et 1.

• On voit selon cette équation que si toute la dose

administrée (par la voie choisie) est absorbée (comme
en intraveineux) la biodisponibilité absolue de ce
produit sera de 1.

• Une biodisponibilité absolue de 0,5 pour un produit

signifie que seule la moitié de la quantité administrée
est retrouvée dans la circulation générale
 Exemple d’une différence de biodisponibilité entre deux
types de formes galéniques 

Intraveineuse (référence)
Même dose de principe actif
actif administré Solution orale

Suppositoire
[Cp]

Temps

Très bonne biodisponibilité du principe actif en solution orale ;

Mauvaise biodisponibilité du principe actif en suppositoire .
 II-4-2- La biodisponibilité relative : Fr
Elle implique la comparaison de biodisponibilité de
 2 formulations (même principe actif ):
bioéquivalence pour la mise sur le marché de
génériques ou

.  de 2 voies d’administration ( comprimé, suppositoire…)

pour la même formulation sans faire référence à la voie
IV.

  
 La biodisponibilité relative repose sur la
comparaison non seulement des « AUC » mais
aussi de la vitesse d’absorption.
II-5- La bioéquivalence

• Deux formes pharmaceutiques ( identique ou non)

seront considérées comme bioéquivalents si, à dose
molaire identique, elles présentent des
biodisponibilités similaires, engendrant ainsi des effets,
aussi bien en terme d’efficacité que de sécurité,
similaires.
Le générique :
Les génériques sont des copies de médicaments
princeps tombés dans le domaine public:
- la même quantité de principe actif.
-la même forme pharmaceutique.
-équivalent thérapeutique.
-présenter un avantage économique.
Biodisponibilité similaire veut dire qu’AUC, Tmax et
Cmax du PA sont très similaires pour les deux
formes pharmaceutiques.
 Comprimé A

Comprimé B
Zone d’efficacité
Thérapeutique

Zone des concentrations

Inefficaces
Temps

Comprimé A: très bonne biodisponibilité.

Comprimé B : mauvaise biodisponibilité.

Exemple d’une différence de biodisponibilité entre deux formes

galéniques identiques : Comprimés.
Les comprimés A et les comprimés B ont été formulés avec le
même principe actif à la même dose.
II-5-1- Médicaments soumis à un essai de
bioéquivalence
La notion de bioéquivalence est habituellement liée aux
médicaments génériques, mais il est important de
savoir que même les médicaments princeps doivent
subir des études de bioéquivelence avant leur mise sur
le marché :
Après modification de la formulation,
Après utilisation d’un nouvel excipient,
 II-6- Evaluation de la biodisponibilité 
II-6-1 - Etablissement d’un protocole expérimentale
Le protocole comporte :
A- Choix des sujets : sujets sains
• âge voisin,
• poids identique,
• même sexe,
.
• même ethenie
• bonne santé (examens médicaux, contrôles biologiques), toute
activité physique importante doit être proscrite.

  
 B- Choix des modalités d’administration :
• Administration d’une dose unique :
Pas d’accumulation du fait de l’espacement des prises.
 Avantages : doses administrées relativement faibles, durée de l’essai
relativement courte.
 Inconvénients : faibles taux sanguins au début de l’absorption et à la
fin de l’élimination d’où diminution de la fiabilité des résultats .
.
  
Administration répétée des médicaments :
plus courante que la prise unique .
 Avantages : fiabilité de l’interprétation (taux sanguins
beaucoup plus élevés du fait de l’état d’équilibre).
 Inconvénients : Quantités élevées du PA dans l’organisme
(accumulation probable), durée totale de l’administration longue
(car l’état d’équilibre est atteint après 5 demi-vies d’élimination).
• Médicaments à action prolongée+++

  
C- Choix de la forme de référence 
• Premier cas : médicament connu.
La forme de référence est le princeps.
• Deuxième cas : médicament nouveau.
Principe actif soluble :
formuler une solution de principe actif.
administration simultanée en IV (biodisponibilité
absolue) et per os (biodisponibilité relative).
Principe actif peu ou insoluble :
suspension par voie orale.
 puis par les autres voies d’administration,
étudier la biodisponibilité relative et choisir la voie
pour laquelle la biodisponibilité est la meilleure.
D- Choix des éléments à analysés :
La molécule chimique à analyser :
 Le principe actif inchangé 
ou
le métabolite lorsque le dosage du principe actif inchangé est
impossible (rapidement éliminé).

Le milieu biologique : le sang ou l’urine.

E- Le nombre de sujets :
Le nombre minimal de sujets est de12 et le nombre maximal
est de 18 à 24.
 II-6-2- Méthodes d’évaluation de la
biodisponibilité :
consiste à déterminer :
• La quantité totale de principe actif qui a atteint la
circulation générale.
• La vitesse à laquelle le principe actif a atteint la
circulation générale.
 A- Détermination de la quantité totale de
principe actif :
• Ceci consiste à mesurer l’aire sous la courbe AUC .
Méthode des trapèzes

Consiste à tracer un trapèze entre deux points de

prélèvements :
Le trapèze est délimité par la droite joignant les deux
temps de prélèvement (axe des abscisses), celle reliant
les deux concentrations correspondantes et celles
parallèles à l’axe des ordonnées .
 S2 S3

S1

0 t1 t2 t3 t4 t5 Tps de prélèvement

Mesure de l’aire sous la courbe

AUC = C1 + C2 (t2 - t1) + C2 + C3 (t3 - t2) + ………. Cn-1 + Cn (tn - tn-1)

2 2 2
B-Détermination de la vitesse d’absorption :
Plusieurs méthodes ont été proposées pour déterminer
la vitesse d’absorption, à titre d’exemple la méthode de
Cmax et Tmax ; pour cela il faut réaliser des
prélèvements précoces et nombre suffisant pour bien
localiser le pic (Cmax) et le faire correspondre au
Tmax.
III- Etude de la disponibilité in vitro : Essai
de dissolution
III- 1-Principe de la dissolution

• Déterminer  la  plus ou moins grande aptitude des

formes galéniques à laisser passer en solution, dans un
milieu déterminé, le ou les PA qu’elles contiennent, en
utilisant un  appareil déterminé
 dans des conditions opératoires  bien définis.
• Cet essai estime la libération
du principe actif de sa forme galénique dans le tractus
digestif.
III-2- Appareils de dissolution
• Il existe des appareils de dissolution pour l’ensemble
des formes pharmaceutiques : Comprimés, Gélules,
Poudres, Microgranules, Suppositoires, Formes semi
solides (pommades, gels), Implants, Dispositifs
transdermiques.
III-2-1- Appareil à palettes tournantes
Il est composé des éléments suivants :
• Un récipient cylindrique en verre borosilicaté à fond
hémisphérique (1000ml), muni d’un couvercle servant
à limiter l’évaporation.
• Un Agitateur composé d’une tige verticale ayant une
palette fixée à son extrémité.
• Un bain thermostaté permettant de maintenir la
température du milieu de dissolution à 37± 0,5°C.
 Palettes

Dispositif de fixation Récipient en verre borosilicaté Dissolutest à palette tournante Compose de: Bain +
des gélules spectrophotomètre UV/Vis + pompe + logiciel
III-2-2- Appareil à panier tournant
Il se compose des éléments suivants :
• Un récipient cylindrique (C) en verre borosilicaté à
fond hémisphérique (1000ml).
• Agitateur (A) constitué par une tige verticale à
l’extrémité de laquelle est fixé un panier cylindrique et
métallique (B).
• Un bain thermostaté permettant de maintenir la
température du milieu de dissolution à 37± 0,5°C.
• Panier : La forme pharmaceutique, comprimé ou gélule
est placée dans le panier.
Paniers

Récipient en verre borosilicaté

III-2-3- Cellule à flux continu
Cet appareil se compose des éléments suivants :
• Un réservoir pour le milieu de dissolution ;
• Une pompe à débit réglable servant à faire remonter le
milieu de dissolution à travers la cellule à flux continu ;
• Une cellule à flux continue, constituée d’un matériau
transparent, montée verticalement et munie d’un filtre
permettant la rétention des particules non dissoutes ;
• Un bain d’eau avec thermostat 37± 0,5°C.
Intérêt : étudier la dissolution des formes orales à
libération modifiée
Le milieu de dissolution provenant d’un réservoir traverse la
cellule dans laquelle est déposée la forme pharmaceutique .La
dissolution est assurée par le passage du milieu de dissolution et
par le renouvellement permanant de l’interface solide-liquide.
Le milieu chargé en principe actif est récupéré dans le
collecteur.
Milieu de dissolution 
• Eau +++= si solubilité du principe actif varie peu en fonction
du pH.
• Solutions tampons acides ou alcalines.
• Milieu gastrique artificiel puis milieu intestinal artificiel : si
la solubilité du principe actif varie avec le pH, le mieux est
de faire varier progressivement le pH de 1,2 à 7,5.

Milieu gastrique (pH  1,2) Milieu intestinal (pH  7,5)

NaCl …………………… 2g KH2PO4…………………6,8g
HCl …..……..q.s.p….pH = 1,2 NaOH 0,1N ….q.s.p……..pH = 7,5
Eau distillée….q.s.p….1000ml Eau distillée….q.s.p……..1000ml
•  Interprétation des résultats de dissolution :
Analyse graphique des courbes  par comparaison des profils de
dissolution du produit à tester par rapport à la référence.

Fig: profiles de dissolution des comprimés à 850 mg de metformine hydrochloride (formulation

A et B) dans le milieu PH 6.8, sous 75 rpm -USP II.

 
IV- Corrélation In vivo-In vitro
IV- 1- Le système de classification BCS
• Pour prédire la probabilité de parvenir à une corrélation
in vitro in vivo, la Food and Drug Administration a
développé un système de classification
biopharmaceutique (BCS : Biopharmaceutical
Classification System) qui se base sur la solubilité du
principe actif (haute ou basse), sa perméabilité
intestinale (haute ou basse) ainsi que sa dissolution,
comme il est montré dans le tableau 1, et permet de
définir 4 catégories de molécules.
 Classe Solubilité Perméabilité

1 Haute Haute

2 Faible Haute
3 Haute Faible
4 Faible Faible

Tableau 1: BCS. Classification des molécules en

fonction de leur solubilité et de leur perméabilité
(in vivo ou in vitro) et impact de ces paramètres
sur l'absorption .
 Conditions Commentaire
Une substance médicamenteuse est considérée à haute
solubilité si la plus grande dose est soluble dans 250ml d’un
Solubilité
milieu aqueux, et dans un intervalle de pH de 1 à 8.
Un médicament à libération rapide est considéré comme à
dissolution rapide quand la quantité dissoute pendant 30 min
Dissolution n’est pas inferieur à 85% , dans un volume de dissolution de
900ml.
Une substance médicamenteuse est considérée à haute
Perméabilit perméabilité quand l'absorption de la dose administrée chez
é l’homme est supérieure à 90%.

Les milieux inclus : milieu acide 0.1N ou tampon à pH 4.5 : Simulation du

fluide gastrique avec enzymes selon USP (United States Pharmacopeia).
tampon pH 6.8 : simulation du fluide intestinal avec enzymes selon USP.

Tableau 2 : Système de classification biopharmaceutique

 IV- 1- Exonération des essais de biodisponibilité par
comparaisons des profils de dissolution
• Les études de bioéquivalence sont très coûteuses et
lourdes. La réglementation internationale fixe les
conditions de dispense de ces études.

• Pour les produits pharmaceutiques dont le principe

actifs appartient à la classe 1, des études comparatives
de dissolution in vitro peuvent être utilisées pour
démontrer l’équivalence de deux médicaments.