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    TP1: IDENDIFICATION D’UN SUCRE

    Ce TP a pour but d’identifier certaines propriétés chimiques des oses en solution, via des réactions
    chimiques colorimétriques spécifiques.

    I- Mise en évidence du caractère réducteur

    1- Réaction de Fehlling
    Principe :
    En milieu alcalin et à chaud, le groupement hémiacétal des glucides réducteurs réduit les ions Cu 2+ en ions Cu+. Ces
    ions se combinent alors aux ions hydroxydes du milieu pour former de l’oxyde de cuivre, rouge, qui précipite.

    Glucide réducteur + 2 Cu2+  Produits d’oxydation + 2 Cu+

    Mode Opératoire :
    Solution X Glucose Fructose Saccharose Eau

    Réactif
    Fehling A 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
    Fehling B 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
    Solution 1 ml 1 ml 1 ml 1ml 0.5 ml

    - Placer les tubes dans un panier et mettre le tout au bain-Marie pendant 2 min à 95°C.
    - Observer

    II-Mise en évidence des oses par des Réactions furfuraliques

    En milieu acide et à chaud, les oses sont déshydratés en dérivés furfuraliques.


    Le furfural et ses dérivés sont capables de se condenser avec de nombreuses substances aromatiques (chromogènes)
    comme des phénols ou des amines cycliques pour donner un composé coloré caractéristique d’un ose ou d’un
    groupe d’oses (chromophore).

    1- Réaction de Selliwanof : Caractéristique des Cétoses


    Principe :
    CETOSES Molécules colorées en rouge

    HCL+ Chauffage + dérivé aromatique (Résorcine)

    Mode opératoire :

    Solution X Glucose/Galactose Fructose Saccharose

    Réactif
    Réactif de 1.5 ml 1.5 ml 1.5 ml 1.5 ml
    seliwanoff
    Solution 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml

    - Placer les tubes dans un panier et mettre le tout au bain-Marie pendant 2 min à 95°C.
    - Observer
    2- Réaction à l’Ortho-toluidine : Caractéristique des Aldoses

    Principe :
    Acide acétique (CH3COOH) et thiourée contenus dans le réactif (Ortho-toluidine)

    ALDOSES base de Schiff


    Chauffage

    a) Aldohéxoses coloration vert foncée


    b) Aldopentoses coloration jaune orange
    Mode Opératoire :

    Solution X Glucose/Galactose Arabinose

    Réactif
    Réactif 1.5 ml 1.5 ml 1.5 ml
    d’Ortho-
    toluidine
    Solution 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml

    - Placer les tubes dans un panier et mettre le tout au bain-Marie pendant 2 min à 95°C.
    - Observer

    III- Mise en évidence de l’oxydation du Glucose :

    1- Réaction à la Glucose Oxydase

    Principe :
    La glucose oxydase est une enzyme bactérienne qui oxyde uniquement le glucose en acide gluconique.

    Glucose Oxydase
    a) Glucose + O2 Acide Gluconique (bleu vert) +H2O2

    Peroxydase
    b) H2O2 formé + ortho-dianisidine) Complexe coloré jaune brun +H2O

    Mode opératoire :

    - Tremper une bandelette de glucose - oxydase dans chaque solution de sucre : inconnu, glucose, galactose.
    - Observer.

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