Communication

Signalisation

Présenté par: M. Dehimat

1
Généralités
Répéteurs impliqué dans l’ Endocytose
 Récepteurs à la transferrine & récepteurs aux lipoprotéine faible densité
Récepteurs extracellulaires (Surface)
Régulation des récepteurs de surface
Récepteurs intracellulaires
 Signalisation par des récepteurs hormonaux intracellulaire,
Rôle de Ca++ dans la transduction des signaux
Diffusion d’ion et potentiel de membrane
Régulation des récepteurs de surface
Signalisation chez les plantes
Défauts dans les voies de transduction du signal (Cas du Cancer)

2
Apprendre les déférentes voies Comprendre la spécificité du
de transduction du signal complexe récepteurs-ligands dans
l’activation des voies de
signalisation

Savoir le dégrée de sensibilité des

Classifier les récepteurs/ ligands voies de signalisation, aux
selon leurs mode d’activation et altérations de l’interruption du
leurs localités dans la cellule signal qui peuvent provoquer des
tumeurs

3
4
Chez l’homme et les autres organismes multicellulaires, des
molécules signal spécifiques sont libres des cellules d’un organe et
sont perçue par les cellules d’autres organes partout dans le corps, le
message « molécule signal est présente » est converti en des
changement spécifiques du métabolisme ou de l’expression des
gènes par l’intermédiaire de réseaux souvent complexes désignés
« voies de transduction du signal»
Ces voies amplifient le signal initial er provoquent des changement
dans les propriétés des molécules effectrices spécifiques

5
De petites domaines qui reconnaissent des résidus spécifiques sont
présents dans beaucoup de protéines de signalisation et sont
essentiels pour déterminer la spécificité des interaction

Des gènes codant pour des composants de voies de transduction du

signal qui contrôlent la croissance des cellules sont souvent mutés
dans le cancer qui peuvent être mutés en forme (oncogène: qui sont
activé de manière constitutive et indépendant des signaux)

6
Introduction

• L’énorme capacité structurelle et fonctionnelle des organismes

multicellulaire est due à leur capacité de cordonnier les réaction
biochimique des divers cellules de l’organisme entier
• La base de cette coordination est la communication intercellulaire qui
permet à une cellule d’influencer le comportement d’autres cellules
d’une manière spécifique

7
• A) Définition
La communication cellulaire peut être définie de la manière suivante : ce
sont des signaux moléculaires (ou messagers) émis par une cellule (dite
émettrice) et reconnus par une autre cellule (dite réceptrice, sachant que
la cellule émettrice peut être également la cellule réceptrice).
La réception du signal extérieur est suivie d'un relais à l'intérieur de la
cellule qui va conduire à l'amplification du signal induisant des effets
moléculaires variés ainsi qu'un changement d'état de la cellule réceptrice.
Ce processus est organisé dans le temps et discontinu.

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Régulation cellulaire suite à un signal extracellulaire

9
Définitions

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14
15
16
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20
21
22
23
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 Autres molécules
informationnelles

 Les immunoglobulines

 Facteurs de croissance

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colony stimulating factors, leukemia inhibitory factor, stem
cell factor, insulin-like growth factors

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Stratégies

31
Communication cellulaire

32
2. Le type autocrine
• La cellule sécrète un signal soluble qui agit sur un de ses propres
récepteurs. La cellule émettrice est la cellule cible

33
3. Communication de cellule à cellule
• échange de molécules par le biais des jonctions communicantes.
• Transmission de signaux par le biais des cadhérines (cf cours adhérence
cellulaire).
Ligand attaché à la membrane de la cellule Y se lie au récepteur
membranaire de la cellule X.

34
• 1) A proximité
1. Le type paracrine
Les médiateurs sont :
sécrétés à proximité de la cellule cible par les
cellules voisines
très rapidement détruits.

35
2) A distance
1. Le type endocrine
Des cellules spécialisées sécrètent des molécules (hormones) qui
sont larguées dans le sang circulant et se distribuent dans tout
l'organisme. Mécanisme relativement lent (de plusieurs secondes
à plusieurs heures).

Compte tenu de la dilution des hormones, les cellules cibles

doivent posséder des récepteurs de haute affinité (10-8 M).

36
37
 2. Transport synaptique
Le corps du neurone est parfois situé très à distance de la cellule cible.
Le neurone émetteur transmet le signal, par le biais d'un long
prolongement cellulaire (l'axone), à la cellule cible.

38
39
B) Principes de la communication cellulaire

• 1) Spécificité de diffusion
Les cellules possèdent (ou non) le récepteur (noté R) ou message (noté A).

Le message peut être diffusé soit :

A toutes les cellules (ex : l'insuline)
ou réservé à un ou plusieurs types très
spécifiques de cellules (les cellules rénales).

40
2) Variabilité dans les récepteurs pour un
même ligand

• Un même ligand est capable d'induire des réponses différentes d'une

cellule ou d'un récepteur à l'autre
Comme le montre si bien ce schéma :

41
 Dans cet exemple, le messager agit
comme facteur de croissance
en augmentant le taux de cycline.

Schéma descriptif de la régulation de différentes cellules

suite à la réception d'un même signal

42
• Il y a activation du récepteur transmembranaire après qu’un facteur
hydrosoluble s’y est fixé.
• La protéine relais va se fixer sur ce récepteur transmembranaire et la
protéine relais va changer de conformation puis va se fixer sur la
région promoteur du gène cible qui active la transcription et
conduisant à la synthèse de protéine.
• Les facteurs liposolubles se fixent sur le récepteur intracellulaire puis
le couple récepteur intracellulaire-facteur liposoluble va sur le gène
pour activer la transcription.

43
• Lorsque le récepteur change de conformation, le récepteur ouvre par
exemple un bouveau domaine et ce récepteur peut alors recruter une
protéine (= croix rouge sur le schéma).
• Cette protéine va changer de conformation et va se phosphoryler où se
désphosphoryler et va changer de conformation.
• La protéine (=croix rouge du schéma) est un facteur de transcription qui va
se fixer sur la région promoteur d’un gène et va se transloquer (= adresser
au noyau) et alors on à une augmentation de la synthèse d’ARNm.
• Lorsque le facteur liposoluble se fixe à une protéine porteuse qui se fixe à
un récepteur liposoluble intracellulaire, le récepteur change de
conformation puis l’ensemble récepteur facteur liposoluble va dans le
noyau et peut par exemple se lié au promoteur d’un gène et permet la
synthèse d’ARNm.

44
3. Communication par des médiateurs gazeux

• Ils peuvent être : monoxyde d'azote NO ; oxyde de carbone CO...Ils

traversent facilement les membranes cellulaires.
• Exemple : NO vasodilatation (rôle vasodilatateur de la nitroglycerine),
relaxation des fibres musculaires lisses, neurotransmission.
• Les NO-synthases transforme l’arginine en NO+ citruline. Ce NO active
une enzyme nommé guanylate cyclase qui transforme le GMP en
GMPc.

45
 Récepteurs membranaires
« Ligand »

R
Milieu
é « Transduction »
extracellulaire
c
e
Membrane p
plasmique
t
e « Effecteur
Cytosol u primaire »
r

« 2nd
messager »

« Effecteur
secondaire »
46
 Récepteurs membranaires
Ehrlich, 1910 : « Pour qu’une substance puisse agir, elle doit se fixer »

R membranaires : protéines membranaires intrinsèques

reconnaissant des molécules hydrophiles
(peptides, protéines…)

3 Domaines :
- Extracellulaire
hydrophile (glycosylé)
site de reconnaissance & fixation spécifique du ligand
- Transmembranaire
Séquence(s) hydrophobe(s)
- Intracellulaire
Domaine fonctionnel (Transduction)

Mono / multimère
47
 Récepteurs membranaires

Ligand
libre Récepteur

Liaison de faible énergie

L. hydrogène
L. Van der Waals
L. ioniques
L. Hydrophobes
Grand nombre

Sensibles l’environnement (pH, ions…)

48
Récepteurs membranaires

Comment le signal extracellulaire

est converti en signal intracellulaire ?

49
 Récepteurs membranaires
Allostérie

Messager
extracellulaire
Milieu
extracellulaire

Membrane
plasmique

Cytosol
Messager
intracellulaire

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Récepteurs membranaires
ou
Coopération ?

VEGF-R

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 Récepteurs membranaires

Tous les ligands sont-ils égaux devant un récepteur ?

52
 Ligands / Agonistes / Antagonistes
Agoniste
Ligands
Antagoniste - Compétitifs
- Non compétitifs

« Agent qui se lie à un récepteur spécifique en induisant son activation »

« Substance qui se lie à un récepteur spécifique sans provoquer son

activation mais qui peut bloquer l’action d’un médiateur agoniste »
Agoniste
Signal intracellulaire

Antagoniste
Signal intracellulaire

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Ligands / Agonistes / Antagonistes
- Curare,  -bungarotoxine
- Tétracaïne et Proadifen

54
 Récepteurs membranaires
FGF

FGF-R3
FGF-R3

- Cellules épithéliales (vessie, prostate) Chondrocytes

- lignée B

 Prolifération Prolifération

Carcinome Hypochondroplasie,
Nanisme thanatophore

55
 Récepteurs membranaires
Exemples
VEGF-B VEGF-A

1 ligand → x récepteurs + + + + -
&
x ligands → 1 récepteur

Membrane
plasmique

Cytosol

VEGF-R1 VEGF-R2 Tie-2

Cellule endothéliale
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 Récepteurs membranaires

1 récepteur → plusieurs ligands

1 ligand → plusieurs récepteurs

1 ligand + 1 récepteur → plusieurs effets (cellules)

Effet cellulaire = F (récepteur, ligand, type cellulaire)

Sans oublier les interactions entre les voies de signalisation !!!

57
La liaison d'un récepteur et de son ligand est :

• hyperaffine (reconnaissance du ligand parmi des millions de molécules de

l'environnement)

• spécifique (liaison très préférentielle pour un ligand)

• réversible (ce qui permet la désactivation du R) Il peut y avoir X récepteurs

ayant des actions ou des spécificités tissulaires différentes pour une même
hormone.

58
 Récepteurs membranaires
Récepteurs
membranaires

À activité Sans activité

enzymatique enzymatique

RTK RTP Canaux Couplés R

(RYK) (RYP) ioniques Prot G cytokines

59
 Récepteurs membranaires
Récepteurs
membranaires

À activité Sans activité

enzymatique enzymatique

RTK RTP Canaux Couplés R

(RYK) (RYP) ioniques Prot G cytokines

60
 Récepteurs membranaires
Récepteurs
membranaires

À activité Sans activité

enzymatique enzymatique

RTK RTP Canaux Couplés R

(RYK) (RYP) ioniques Prot G cytokines

61
Récepteur canaux ionique-dépendants
Peuvent être classés :
1. Soit canal ionique et récepteur ne 2. Soit le canal ionique est couplé à
font qu’un (A) : ce sont les un récepteur (B): ce sont les
récepteurs canaux ionique (RCI) récepteurs couplés à des canaux
ou récepteurs ionotropique, le ionique (RCCO) ou récepteurs
ligand pouvant être extracellulaire métabotropique, la liaison au
( le plus souvent récepteur, le plus souvent un
neurotransmetteur ) ou récepteur couplé aux protéines G
intracellulaire ( un ion : Na +, k+ ( ou RCPG), pouvant être :
Ca++, ou une petite molécules • Directe par les p G elle-même o(Gs, Gi
p,ex, ATP), et Gbg)
• indirecte par un second messager ou
une protéine kinase dépendent du RCPG
ou d’un récepteur membranaire (RM)

62
 Récepteur canal ionique
Canal ionique = pore aqueux → transport passif d’ions
(sens gradient électrochimique)

Ionotropique Métabotropique

63
 Récepteur canal ionique

Ionotropique Métabotropique
Acétylcholine Nicotinique Muscarinique
(muscle squelettique) (muscle cardiaque)

Glutamate NMDA, AMPA, kainate mGluR

GABA GABAA GABAB

(Ac. -amino butyrique)

Autres Sérotonine Adrénaline (β-adr.)

64
 Récepteur canal ionique
Récepteurs cholinergiques
Ionotropique Type Métabotropique

nicotinique Nom muscarinique

rapide Conduction Lente

SNC (10 %) SNC (90 %)

Expression S.N.
+ SNP + SNP
Expression Musc. card.,
Cell. Musc. Sq. périphérique Cell. Endo.

7 Sous-types 5

Excitateur Effet Excitateur / Inhibiteur

65
Récepteur nicotinique

Structure

pentamérique : 2 , ou 

Monomère : 4 hélices  (M1-M4)

66
B - RECEPTEURS A 7 DOMAINES TRANSMEMBRANAIRES

67
 Petites molécules endogènes

- acides aminés
(acide glutamique et -amino-butyrique)
- amines
(acétylcholine, adrénaline, noradrénaline,
dopamine, histamine, mélatonine,
sérotonine)
- nucléosides
(adénosine) et nucléotides (ADP, ATP, UTP)
- lipides
Stimuli sensoriels (anandamide, leucotriènes, Platelet
Activating Factor, prostaglandines,
thromboxane A2)
Protéines
Photons Ions (molécules olfactives,
(rhodopsine Ca++ gustatives, phéromones) - glucagon
des batonnets) - hormones glycoprotéiques
(thyrotropine TSH, lutropine LH,
follitropine FSH,
choriogonadotropine HCG)
- protéases
(thrombine)

http://www.123bio.net/cours/liaison/partie4688.html
68
CYCLE DES PROTEINES G

http://www.123bio.net/cours/liaison/partie48.html
69
 EFFECTEURS DES PROTEINES G
Nombreuses isoformes de chacune des sous-unités

Gas/Gai Gaq Gao

Amines b-adrénergiques Acétylcholine Acétylcholine

Hormones parathyroïdiennes Amines a -adrénergiques Amines a -adrénergiques
Glucagon [+] [-] Neuromédiateurs Neuromédiateurs
vasopressine

Adénylate Canaux Ca++

Phospholipase C Canaux K+
cyclase
Transducine

ATP AMPc PIP2 IP3 (Ca++)

(PKA) DAG (PKC)

Phosphodiesterase
70
 L’activation des effecteurs/le niveau de 2nd messager
est la résultante d’un équilibre
nd

Exemple de l’AMPc
Ga S Ga i
GLUCAGON Acetylcholine
Amines Adenylate Amines
cyclase
β adrénergiques a adrénergiques

+
INSULINE

Réponse
Activation / inhibition
cellulaire
71
 LES RECEPTEURS A 7 DOMAINES TRANSMEMBRANAIRES
Voies relayant le signal : effecteurs des proteines G G

Ligand Récepteur

PIP2

PKC PLC
DAG AC
Ga q Ga s/i
ATP
Protéine

AMPc
Protéine
P IP3 PKA ou

Ca++ RE
Ca++ Ca++ IP4 Protéine Protéine

Ca++ Calmoduline Ca++

P
Ny
Protéine PKA
CAM-kinases
P
Protéine CREB
Activée CRE
P ou inhibée
(cAMP response element) 72
Récepeteurs-enzyme

• Ex: R tyrosine kinase (TK) qui sont comme dans le cas 3 de l’image
précédente. 6 familles. Tous ont un domaine TK dans leur portion C-
Terminale intra cytoplasmique. 1 seul domaine transmembranaire.
• Récepteurs TK se lient au ligand (noté L). Soit les récepteurs existent
sous forme de dimères, soit ils se dimérisent au moment de la liaison
au L.
• Modification de conformation qui se transmet au domaine intra cellulaire
activation du domaine catalytique et chaque récepteur phosphoryle une
tyrosine de son partenaire
• Recrutement de mol de signalisation qui se lient aux tyrosines phosphorylées
• activation d'autres molécules puis signal de dimérisation du ligand

73
Exemple : angiogenèse, multiplication des vaisseaux en réponse à l'hypoxie (= diminution d’O2)L’hypoxie
favorise la production de VGEF qui sera libéré dans le cytosol le VEGF va dimériser le récepteur et activer
une phosphorylation.

74
Peuvent être activés en même temps ou non par deux récepteurs et deux ligands différents.

Peuvent se combiner par activation de deux R et conduire à un effet cellulaire.

75
Transduction du signal

76
Libération du signal

• 1. Exocytose
Des ligands hydrophiles stockés dans les vésicules sont libérés par exocytose
contrôlée (cf exemple thyroïde, cours lysosomes). La plupart des ligands sont
hydrophiles.

2. Shedding = Clivage.
Le clivage se fait par une protéase de la partie extracellulaire d'une protéine
transmembranaire, qui libère un ligand actif.
On a dit que le stimulus était limité dans le temps, il existe donc des
mécanismes chargés d'inactiver le ligand.

77
Processus d'inactivation

• 1. Dégradation par des phénomènes enzymatiques.

2. Recapture

78
3. Shedding
Des protéines clivent le domaine extracellulaire du récepteur, ce qui
entraine la libération d'un récepteur soluble qui peut lier le ligand dans
le milieu extracellulaire sans effets sur la cellule, le R ne lui étant plus
attaché.

4. Activation d'une protéine inhibitrice

5. Endocytose récepteur dépendant
79
4) Rétro-contrôle (feed-back)
• De manière directe ou indirecte, le changement de l'état cellulaire
induit par la réception d'un signal affecte en retour l'émission du
signal.
• Feed back négatif : inhibition du signal de départ
• Feed back positif : amplification du signal de départ

80
Communication cellulaire
81
Rôles

• Les cellules d'un organisme pluricellulaire doivent communiquer les

uns avec les autres pour :
le développement et l'organisation des tissus contrôler
leur croissance réguler
leur fonction
Ces facteurs de communication extérieurs :
influent sur la survie
induisent la mort ou la prolifération des cellules
modifient leur fonction

82
C) Codage et émission du signal

• 1) Synthèse, transport, stockage

• 1. Les ligands hydrophiles (ex : insuline)Le ligand peut être de nature
peptidique mais pas toujours (comme par exemple l'adrénaline). Il est
stocké après sa synthèse dans le cytoplasme de cellules spécialisées.
Sa sécrétion est déclenchée par un signal extracellulaire.
• Il est ensuite transporté sous forme libre dans le plasma (car il ne
peut pas traverser la membrane plasmique). Il se lie enfin à un
récepteur spécifique membranaire sur la cellule cible.
• Durée d'action : courte.

83
F) Modalités de transmission du signal
• 1) Transmission membranaire
1. Généralités sur les récepteurs membranaires
• Glycoprotéine transmembranaire (un ou plusieurs domaines).
• Monomère ou dimère (fixation du ligand => dimérisation).
• La fixation du ligand (hydrosoluble) induit la modification de forme sur le
récepteur.
• se transmet à travers les portions transmembranaires
• démasque les fonctions biochimiques au niveau du domaine intracellulaire
(activité enzymatique de type kinase, ouverture d'un canal ionique, liaison à
une protéine G)

84
3. Les seconds messagers
• Ce sont des molécules intracellulaires activées par l'activation d'un
récepteur suite à la liaison avec son ligand qui activent d'autre
molécules à leur tour (cascade d'activation) => effet final du ligand sur
comportement cellulaire.

• Elles participent à l'amplification du signal.

Plusieurs types, Ex : IP3, AMPc (AMP cyclique).

85
SECOND MESSAGERS

Ca++

http://helix-web.stanford.edu/people/mliang/research.html

86
 SCHEMA GENERAL DE LA TRANSDUCTION DU SIGNAL

SIGNAL /LIGAND diffusion

(molécules liposolubles / hydrosolubles)
contact cellule/cellule

Spécificité RECEPTION /RECEPTEUR Récepteurs nucléaires

Sensibilité Pompes/canaux ioniques
Récepteurs à 7TM
Récepteurs-enzymes
Intégration

TRANSDUCTION /EFFECTEURS Enzyme : - synthèse 2nd messager

(AMPc, DAG, IP3)
Sensibilité - commutateur moléculaire
AMPLIFICATION
(cascade enzymatique, phosphorylation)

Canal/pompe : 2nd messager Ca++

REPONSE /CIBLE Activité des protéines

Gènes
Canaux ioniques, …

TERMINAISON / RETROCONTROLE
87
 RECEPTEURS A 7TM : EXTINCTION DU SIGNAL
Diminution de la concentration en agoniste
(ex : fente synaptique / acetylcholinesterases)

Activité GTPase des protéines G

Internalisation
Désensibilisation par phosphorylation

Retrocontrole négatif

http://www.123bio.net/cours/liaison/partie48.html
88
Comment ça déroule la cascade du signal?!
Exemples de complexe macromoléculaire
permettant la transmission du signal vers
l'intérieur de la cellule

89
Pr. K. Gharzouli Bioch Physiol Exp 17

90
Protéine de signalisation = "COMMUTATEUR" protéique

Pr. K. Gharzouli Bioch Physiol Exp 18

91
Récepteurs intracellulaires

92
Les ligands hydrophobes

• Le ligand est souvent de nature lipidique.

• Sa sécrétion est également déclenchée par un signal extracellulaire.
• Durée de vie : longue.
• Il sont transportés par des protéines porteuses (PP) plasmatiques
spécialisées (binding protein).
• Le complexe hormone – PP se dissocie près de la cellule cible.
L'hormone traverse la membrane plasmique.
• L'hormone se lie avec une haute affinité à un R cytologique ou
nucléaire de nature protéique.

93
 Réseau de
protéines de
signalisation
intracellulaire

Pr. K. Gharzouli Bioch Physiol Exp 15

94
Récepteurs intracellulaires
• Ex : les récepteurs des hormones steroïdes. A l'état de repos ( L non
fixé sur le R) une protéine inhibitrice est fixée à l'endroit du site de
liaison récepteur – ADN (Heat Shock Protein 90). Lors de l'activation
(L lié au site de liaison) la P inhibitrice HSP90 se détache du R.
• Le complexe L – R est transféré dans le noyau (translocation). Il se
dimérise avec une molécule homologue. Et se fixe à l'ADN sur une
séquence de reconnaissance de P nucléotides (ERH : élément de
réponse à l'hormone).*
• Le site régulateur est situé en amont des gènes (facteurs de
transcription).

95
• Des médicaments anti-hormonaux prennent la place des hormones
naturelles sur les récepteurs (ex : anti-oestrogènes, cancer du sein…)

• Antagonistes : même affinité ou affinité supérieure au ligand naturel

mais la liaison n'est pas suivie d'activation du récepteur.

• On a des séquences consensus dans tous les gènes sensibles à la

testostérone.

96
97
98