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    Ce document décrit les procédures pour identifier une souche de Salmonelle, notamment par le sérotypage et le test de l'uréase rapide. Le sérotypage permet de déterminer le sérotype d'une Salmonelle identifiée biochimiquement. Le test de l'uréase rapide identifie la production d'uréase en quelques heures et oriente vers le genre Salmonelle.

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    Tp microbio

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    Les Entérobactéries (5èmepartie) :

    Le sérotypage de Salmonelles et le test de


    l’uréase rapide

    Objectifs : * Reconnaître des colonies suspectes sur milieu sélectif spécifique


    * Mettre en œuvre un test d’orientation rapide vers le genre Salmonella
    * Identifier la bactérie suspecte suite au résultat de l’uréase rapide par
    ensemencement d’une galerie réduite
    * Déterminer le sérotype d’une salmonelle identifiée biochimiquement par la
    technique du sérotypage
    Vous disposez de colonies isolées
    1er jour suspectes d’une souche pure sur
    Manipulation : Gélose Hektoën :
    Vous disposez d’une souche pure
    d’une Salmonelle identifiée
    biochimiquement présentée

    Souche
    numérotée
    présentée sur 1 colonie suspecte dans 8
    gélose Réalisation à 10 gouttes d’Urée –
    nutritive du test de Indole
    inclinée l’uréase
    Réalisation
    du rapide Lecture après 2 heures à
    sérotypage 37°C

    Uréase
    positive ou
    Détermination du négative
    sérotype de la
    salmonelle

    Ensemencements des milieux de la


    galerie réduite d’identification à
    partir du milieu urée-indole
    incubée :

    Kligler-Hajna

    Clarks et Lubs

    Urée Indole

    Mannitol-Mobilité

    Citrate de Simmons
    Incuber les tubes 24 h à 37°C
    Retour sommaire
    Compte-rendu :

    1. Le sérotypage de la Salmonelle

    Montrer sous forme d’un organigramme la démarche ainsi que le résultat de votre sérotypage.
    Déterminer le sérotype et le nom de votre Salmonelle.

    2. Le test de l’uréase rapide

    Décrire l’aspect des colonies suspectes isolées sur gélose Hektoën. Justifier
    votre réponse.
    Indiquer le caractère biochimique recherché sur ce milieu.
    Donner le principe de sa lecture.
    Quel est l’intérêt de ce test rapide?

    2ème jour

    Manipulation :

    Lecture des différents milieux ensemencés : tubes.

    Réaliser les tests complémentaires nécessaires à la mise en évidence de :


    la ! galactosidase
    la voie fermentaire du glucose
    la tryptophane désaminase et de la tryptophanase

    Compte-rendu :

    1. Ensemencements

    Milieux Observations Interprétations Conclusion


    Kligler
    Clark et Lubs

    Citrate de Simmons

    Mannitol- Mobilité

    Urée-Indole

    2. Conclusion

    Proposer une identification jusqu’à l’espèce de la souche initiale sur Hektoën à partir de
    vos résultats et du tableau dichotomique.

    Retour sommaire

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