Transcripción 2023

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TRANSCRIPCIÓN DEL MENSAJE

GENÉTICO

Dra. Raquel Cifuentes Cabrera


Contenidos
• 1. Definición de expression genética, procesos, gasto de energía.
• 2. Transcripción y maduración de ARNs
• 3. Características de la transcripción eucariota
• 4.Ubicación cellular del proceso
• 5. Sentido de la síntesis de ARN
• 6.Tipos de ARN polimerasas eucariotas y funciones.
• 7. Tipos de ARN mensajero, ribosomal de ransferencia interferencia,
pequeños nucleares y nucleolares.
• 8. Estructura del gen
• 9. Unidad de transcripción; sitio de inicio y terminación, intrones, exones UTR
• 10. Secuencias reguladorasl elementos CIS y TRANS
• 11. Sitio promotor caja TATA
• 12. Otras secuencias de control proximal
• 13 Potenciadores o enhancers, silencers
• 14. Fases de la transcripción del ARNm: inicio, elongación
y terminación, poliadenilación
• 15. Procesamiento del transcrito primario (hnRNA)
• 16.Adición del casquete 7 metil guanosina, extremo 5’
• 17.Poliadenilación extremo 3’
• 18 Corte y empalme o splicing
• 19. Modiificación o maduración del ARNm, ARNr y ARNt.
Flujo de la Información Genética en la Célula,
expresión del material genético.
Dogma central de la biología celular y molecular
• Genes: Secuencia específica de
ADN que contiene información
específica para la síntesis de una
proteína específica.

• ARN: se sintetiza a partir de un


molde de ADN; para la síntesis
de proteínas; se necesitan los
siguientes: ARNm, ARNr, ARNt y
ARN pequeños.

• Proteína: secuencia específica de


a.a, que corresponde a la
secuencia de nucleótidos del
ARNm, copiado del ADN.
Qué es la Transcripción del Mensaje Genético.

• Síntesis de una molécula de


RNA complementaria a la
secuencia de bases de un
molde de ADN.

• Procariontes y eucariontes
transcriben el mensaje
genético a cualquiera de los
diferentes ARN.

• Diferentes clases: ARNm,


ARNt, y ARNr. Y ARN
nucleares, nucleolares
pequeños y de interferencia,
que suprimen la expresión de
genes por interferencia.
Principales Clases de ARN
• ARN Precursores: pre ARNm, • Existen tres grandes grupos:

pre ARNt, pre ARNr.


• ARN de interferencia ARNi, son
moléculas que suprimen la expresión de
• ARN implicados en la síntesis genes específicos, por interferencia con
de proteínas: mensajero, el ARNm 20 a 25 nucleótidos.
ribosomal, de transferencia
• RNA nucleolar pequeño,
• ARN reguladores: ARN transformadores de las bases originales
pequeños, ribonucleoproteínas del ARNr y ARNt (snoRNA).
que regulan funciones de la
transcripción y expresión de los • RNA interferentes, siRNA

genes. Poseen de 20 a 25
• Todos desempeñan funciones
nucleótidos
reguladoras en la transcripción,
generalmente silenciado genes.
Principales Clases de ARN
Transcripción y Traducción, Dogma de la Biolología Molecular

• Los diferentes tipos de ARN,


dirigen el proceso de síntesis de
proteínas.

• Todos son sintetizados y


madurados en el núcleo y luego
se dirigen al citoplasma para
realizar el proceso de síntesis de
proteínas.

• Para la síntesis proteica primero


se deben estructurar y madurar
los diferentes ARN que luego
realizaran el proceso en el
citoplasma.
Transcripción del Mensaje ADN-ARN
• Conlleva 3 pasos:
• 1. Iniciación de la transcripción a partir de la hebra de
ADN molde, la ARN polimerasa y los factores de
transcripción de inicio deben ubicarse en el sitio
promotor.

• 2. Elongación de la cadena de RNA, el molde de ADN


es copiado por la ARN polimerasa que agrega
ribonucleótidos en dirección 5’---3’, antiparalelamente
al ADN, 3’---5’.

• 3. Terminación de la transcripción, con el


aparecimiento de una secuencia de terminación, la
ARN polimerasa detiene el copiado y se liberan ARN
y enzimas del molde de ADN.

• La dirección de síntesis es de 5 a 3, los nucleótidos


se unen por enlaces fosfodiester de forma
antiparalela al ADN.

• La enzima se mueve del extremo 3 al 5 del molde de


ADN.
Dirección de Síntesis
Dirección de Síntesis
Momentos de la Transcripción
Que se requiere para realizar el proceso
• Gen del ADN.

• Enzima Arn Polimerasa


• Sitio Promotor

• Secuencias Reguladoras de la expresión


en el gen, caja TATA

ATP.

• Ribonucleótidos

• Factores de Transcripción, enzimas que


facilitan la acción de la ARN polimerasa,
generales y adicionales.

• Enzimas encargadas de la maduración


de los ARN
Que es el sitio promotor. Inicio de la Transcripción.

• Secuencia de ADN a la que se


une la polimerasa y que precede
al sitio de inicio de la síntesis de
ARN.
• Determina el sitio de unión de la
polimerasa y los factores de
transcripción.
• El nucleótido con el que empieza
la transcripción es el +1 y el
anterior es el -1.
• El ADN anterior al inicio hacia el
extemo 3, se dice corriente
arriba, río arriba
• Las direcciones que estan
después del sitio de inicio,
dirección 5`corriente o río abajo
Sitio de inicio de la transcripción, río arriba, río
abajo
Sitio Promotor. Inicio de la Transcripción
• Nucleótido +1= punto de inicio
de la transcripción

• -10 bases corriente arriba del


punto de inicio, secuencia TATA
o caja de Pribnow.

• En la ubicación -35 se
encuentra la secuencia
TTGACA, secuencia -35.
• Ambas son secuencias
consenso o secuencias
reguladoras del sitio promotor
Sitio promotor del ADN eucarionte
Promotor de la ARN Polimerasa II
• En los sitios promotores se encuentran
regiones reguladoras que aumentan o
disminuyen la transcripción, ejemplo:

• Promotor de la ARN polimerasa II, 3


elementos importantes:
• 1. Promotor basal o mínimo aquí se
encuentra la caja TATA, secuencia
iniciadora Inr y el segmento BRE, que
orienta la unión del factor FTIIB al sitio
promotor.

• 2. Elementos proximales o en cis,


regulan la expresión del gen.

• 3. Elementos distales o trans estos


pueden ubicarse adelante o atrás de la
transcripción potenciadores y
silenciadores, enhancers o silencers.
Regiones reguladoras de un Promotor, Promotor Basal o Mínimo
de la ARN Polimerasa II.
Elementos Reguladores Cis y Trans
• Elementos reguladores CIS, • Elementos reguladores trans
regulan la transcripción de genes regulan genes distantes del gen
cercanos, presentes en la misma que transcribe, regulando los genes
molécula de ADN, son sitios de como sitios de unión a factores de
unión a factores de transcripción transcripción
Elementos Reguladores Trans
Polimerasa en Procariotas y Eucariotas
ARN Polimerasas en Eucariontes

Enzima Localización Producto sintetizado.

ARN polimerasa I Nucleolo Pre ARN ribosomal,


arnr, 28s,18s y 5.8s

ARN Polimerasa II Nucleoplasma Pre ARN mensajero,


RNAsn nuclear
pequeño
ARN Polimerasa III Nucleoplasma Pre ARNt y pre ARNr
5s y otros pequeños
ARN nucleolares
ARN Polimerasas, Funciones

Polimerasa Funciones
AR Npolimerasa I, Síntesis, reparación y revisión de
precursores de ARN r, 13 sub
unidades, necesita 2 factores de
transcripción, UBF y SL1

ARN polimeras II: Repara y sintetisa precursores de


ARNm, micro ARNs , requiere
factores de transcripción para
unirse a los sitios promotores del
ADN, 8 a 12 sub unidades. 7 o
más factores de transcripción

ARN polimerasa III Sintetiza ARNt, ARNr 5s y otros


pequeños ARN en el citoplasma,
14 sub unidades, 3 factores de
transcripción
Polimerasas de ARN en eucariontes
Promotores Eucariontes y Factores de Transcripción
Factores de Transcripción
• Proteínas auxiliares en el proceso de la transcripción.
• Factores de transcripción basales e inducibles.
• Factores de transcripción inducibles o reguladores que activan
genes mediante la unión de proteínas activadoras.
• Existen muchos tipos de FT
• Diferentes para cada una de las polimerasas.
• Sus nombres: FT= factores de transcripción, un número romano que
señala a la polimerasa con la que actúan y una letra que identifica a
cada factor, TFIA, TFIIB.
• TFIIH, actividad de helicasa, corta puentes de H en el ADN, fosforila
la ARN polimerasa II en el extremo carboxilo.
• El TFIID= factor inicial de unión unido al TBP, factor que se une a la
caja TATA. TBP= Tata box binding protein.
Factores de Transcripción de la ARN Polimerasa II
1. Inicio de la Transcripción en la Cadena del ARNm
• Los factores de transcripción basales TFIIA, TFIIB, TFIID,
se unen al sitio promotor que también posee una caja
TATA, en la posición -25.

• La sub unidad TBP (tata binding protein) del factor TFIID,


promueve específicamente la unión de la polimerasa a la
caja TATA.

• Seguidamente se unen el resto de factores de


transcripción al complejo de inicio para que pueda darse
la elongación de la cadena.
Inicio de la Transcripción, plegamiento y flexibilidad
de la cadena de ADN
Inicio de la Cadena
2. Elongación de la Cadena, ARN Pol II
• La elongación requiere de los factores TFIIE, TFIIH, que se
unen corriente arriba a la ARN polimerasa II, ambas son
necesarias para que la polimerasa abandone el sitio
promotor.

• Una vez unido el TFIIE ya se puede unir el TFIIH, el cuál


continúa unido a la polimerasa, este factor tiene varias
funciones, ATPasa, helicasa y cinasa, fosforila el dominio
carboxiterminal de la polimerasa II, para iniciar la elongación.

• La ARN polimerasa y el TFIIH, separan la cadena e inicia la


copia del ADN colocando ribonucléotidos en el extremo 3’OH.
Alargamiento
• Después del inicio de la transcripción se fosforila el extremo C
terminal de la ARN polimerasa por los TFIIH que permite que la
polimerasa se mueva fácilmente por la cadena de ADN.

• La ARN polimerasa, hace una copia idéntica al molde ADN,


sustituyendo uracilo en lugar de timina.

• De cada uno de los tres principales ARN, se sintetiza un transcrito


primario o pre ARN, que después será procesado o madurado, para
transformarse en ARNm maduro, ARNr maduro ARNt maduro.

• El procesamiento de los ARN requiere una gran variedad de ARN


pequeños y sus proteinas relacionadas que actúan como ribozimas
reguladoras
Alargamiento de la Cadena
Alargamiento de la Cadena
Terminación de la Cadena de ARN
• La copia del gen finaliza cuando
la ARN polimerasa encuentra una
señal de alto que determina el
final de la lectura.

• Generalmente la secuencia de
alto es TTATTT lo que a su vez
determinará la agregación de una
cola poli A al transcrito primario.

• Se desintegra el complejo de
transcripción, se separa el ARN
del ADN y se libera la ARN
polimerasa
Procesamiento del ARN
• Se sintetiza una molécula pre, llamada transcrito primario.

• En el transcrito primario se producen cambios químicos y


estructurales, por ejemplo:

• Metilación.

• Eliminación de segmentos no codificantes intrones.

• Empalme de regiones codificantes exones, proceso


llamado splicing o ayuste, en el ARNm
Procesamiento del ARNr
• El más abundante en las
células.
• Estructura los ribosomas.
• En eucariontes los ribosomas
posen 4 tipos diferentes de
ARN, que se clasifican por su
velocidad de sedimentación.
• Se agregan grupos metilo
especialmente a la ribosa.
• La uridina se convierte en
seudouridina.
• Se transcribe un pre ARNr
primario 45s 13,000 nucleótidos
Síntesis y Procesamiento del ARNr
• Los ribosomas se sintetizan a partir del ADNr, en el nucleolo.
• Sintetizados por la enzima ARN polimerasa I.
• Ribosomas eucariontes poseen cuatro ARNr distitntos, la
sub unidad mayor posee RNA 28s, 5.8s y 5s. La menor solo
tiene 18s.
• Se sintetiza un transcrito primario llamado Pre ARNr 45s de
13.000 nucleótidos.
• Abundante metilación y formación de seudouridinas
• El procesamiento se da por RNA nucleolares pequeños o
snoRNA.
• El promotor está ubicado en -150, reconocido por los
factores TFIUBF y TFISL1
Procesamiento del ARNr
Ribosoma Eucarionte
Procesamiento del ARNt
• ARNt transporta amino ácidos al
ribosoma para la síntesis de
proteínas.

• Cada uno transporta un AA


específico.

• Adopta una estructura secundaria


en hoja de trébol.

• Se sintetiza un pre ARNt o


precursor

• ARN polimerasa III es la


responsable de sintetizarlo.
Promotor del ARNt
Procesamiento del ARNt
• 1. Eliminación de la secuencia lider en el extremo 5’.

• 2. Sustituye dos nucleótidos en el extremo 3’ por la


secuencia CCA.

• 3. Modificaciones químicas por metilación y sustitución de


bases.

• Elimina secuencias internas empalma regiones


adyacentes a las secuencias eliminadas.
Procesamiento del ARNt
Procesamiento del ARNm
• El ARNm se sintetiza en el núcleo y
sale por los poros nucleares al
citoplasma, antes de unirse a los
ribosomas e iniciar la síntesis de
proteínas.

• Se sintetiza un pre ARNm o transcrito


primario en el nucleoplasma.

• Generalmente son moléculas muy


largas que contienen secuencias
codificantes (exones) y no
codificantes (intrones).

• Para ser funcional debe eliminar los


intrones no codificantes
Procesamiento del ARNm
• Agrega el casquete 7 metil guanosina al
extremo 5’, poco después de iniciada la
transcripción( transcripcional), 3 enzimas
involucradas, RNA trifosfatasa, agregación de
guanina, enzima guanil transferasa y la
metilación, metil transferasa

• Agrega una cola poli A de 50 a 250 nucleótidos


en el extremo 3’ por la enzima poli A polimerasa
y algunos otros factores enzimáticos

• Ambos procesos dan estabilidad a la molécula y


protegen al ARN de la acción de nucleasas que
podrían romperlo.

• Elimina intrones y empalma exones,proceso


conocido como splicing o ayuste catalizado por un
complejo enzimático llamado espliceosoma o
ayustosoma, que son ARNns o ribonucleoporteínas.
ribozimas
Elimina intrones, empalma exones
Empalme Alternativo
• Empalmes diferentes
de un mismo ARN
• De una sola molécula
de ARN pueden
sintetizarse varias
proteinas.
Spliceosoma o Ayustosoma

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