Unidad III Tema 2

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PERÚ Ministerio de Salud Instituto Nacional de

Salud
 

UNIDAD III
PROCESAMIENTO DE LA
BACILOSCOPIA

TEMA 2
PREPARACIÓN Y FIJACIÓN DEL EXTENDIDO.

Blgo. Eddy Valencia Torres.


Laboratorio de Referencia Nacional de Micobacterias
Centro Nacional de Salud Pública
Instituto Nacional de Salud
[email protected]
AMBIENTE Y MATERIAL DE TRABAJO
• Siempre deben aplicarse las normas de
bioseguridad para el manejo de
muestras potencialmente infectantes.
• Distribución áreas en el Laboratorio:
 Recepción de muestras.
 Preparación y fijación de los
extendidos.
 Coloración de los extendidos.
 Microscopia y registro de
resultados.

• Esta distribución evitará los movimientos cruzados y permitirá que el ambiente esté despejado. El
laboratorio de TB podría ser independiente o compartido, con tareas y horarios diferenciados.
Fotos: MANUAL PARA EL DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE LA TUBERCULOSIS. PARTE 1: MANUAL DE ACTUALIZACIÓN DE LA BACILOSCOPÍA,
ORAS - CONHU; 2018.
• Condiciones mínimas del Laboratorio:
 Buena Iluminación
 Ventilación adecuada del laboratorio a través de ventanas
amplias (o extractor de aire), para renovar el aire del
laboratorio.
 Pisos y paredes lisos, lavables, que pueden ser resistentes a
soluciones de limpieza.
 Mesa de trabajo por lo menos 1,00 m. x 0,60 m. de material
lavable y resistente a soluciones desinfectantes.
 Dos lavaderos con caños (uno para lavado de manos y otro
para la tinción de láminas), agua y desagüe,
 Un armario para reactivos y demás materiales
 Mesa para el microscopio.

Fotos: MANUAL PARA EL DIAGNOSTICO BACTERIOLOGICO DE LA TUBERCULOSIS. PARTE 1: MANUAL DE ACTUALIZACIÓN


DE LA BACILOSCOPÍA, ORAS - CONHU; 2018.
Equipos y Materiales mínimas de trabajo:
 Microscopio binocular (10X) y objetivo de  Tres frascos de color ámbar, tipo
inmersión(100X) cuentagotas, para kit de coloración.
 Embudo de vidrio  Aceite de inmersión.
 Caja de láminas portaobjetos.  Etanol 70%.
 Aplicadores o palitos de madera.  Reactivos: fucsina básica, azul de
 Mechero a gas o alcohol. metileno, fenol en cristales, ácido
 Lápiz de cera o lápiz punta de diamante clorhídrico, alcohol de 95°
 Pinza de metal  Soluciones desinfectantes: fenol al 5% o
 Papel lente y Papel de filtro hipoclorito de sodio al 1%.
 Soporte de varillas de vidrio.  Agua destilada.
 Bandeja de metal o plástico para recepción  Bolsas rojas de bioseguridad, para material
de muestras (dimensiones:60 x 40x10 cm). contaminado.
 Soporte para colocar los extendidos
 Libro de Registro y Lapicero.
 Balanza
PREPARACION DEL EXTENDIDO

• Lavarse las manos y ponerse una bata de protección, guantes desechables y respirador
N95.
• Verificar los materiales necesarios para la ejecución de los extendidos.
• Todas las fases de preparación del extendido son completamente sistematizadas, así
como la conservación y el orden de las muestras.
• Procesar las muestras por series. Cada serie no debe ser mayor de 12 muestras.
• Utilizar láminas portaobjetos nuevas y desengrasadas con alcohol 95°, para realizar
los extendidos (No reutilizar las láminas portaobjeto).
Las etapas de la preparación del extendido son las siguientes
Organización del área de Trabajo:

• Colocar sobre la mesa de trabajo una hoja doble de papel periódico o una
bandeja de metal con papel periódico, humedecido con un desinfectante
de uso del laboratorio (hipoclorito de sodio al 1 %).
• Ordenar las muestras con el código correspondiente a la solicitud del
examen.
• Numerar una lámina portaobjeto, el mismo número asignado en la
solicitud del examen.
• Colocar las muestras a la izquierda o derecha del analista en orden
creciente de numeración, ubicar cada lámina delante de la muestra.
• Tomar la primera muestra y la lámina correspondiente y colocar detrás
del mechero de manera que la llama quede entre el operador y el frasco
(esta posición protegerá al operador de posibles formaciones de aerosoles
al abrir el envase y realizar el extendido).
Realización del extendido
• Destapar cuidadosamente el envase, para evitar la formación de
aerosoles.
• Tomar el palillo entre el pulgar y el índice de la mano, para
luego seleccionar la partícula más densa o purulenta de la
muestra de esputo y enrollarla en el aplicador.
• Colocar en el portaobjeto, homogenizar y extender, haciendo
movimientos de vaivén, en el centro de la lámina sin llegar al Homogéneo
borde, dando la forma oval o rectangular hasta lograr un
extendido homogéneo (ni muy fino, ni muy grueso) de tamaño
de 2 cm largo x 1 cm ancho.
• Por ningún motivo debe calentarse la lámina mientras se haga el
extendido, debido a que por el calor puede generar aerosoles y
podría alterar la estructura de los bacilos cuando la lámina se
recalienta. No Homogéneo

Fotos: Manual de la Baciloscopia, INS. En actualización, 2018


• Colocar los extendidos en un soporte y dejar secar a temperatura
ambiente.
• Desechar el aplicador en un recipiente de descarte.
• Cerrar el envase de la muestra colocar en el lado opuesto.
• Continuar el proceso de cada una de las muestras de la misma manera.
• Conservar las muestras hasta terminar las lecturas de las baciloscopias.
• Limpiar la superficie de la mesa de trabajo con una toalla de papel o
algodón embebido en una solución desinfectante, descartar los guantes
desechables.

Fotos: Manual de la Baciloscopia, INS. En actualización, 2018


Fijación del extendido
• Esperar que los extendidos se hayan secado a temperatura
de ambiente.
• Tomar con una pinza cada lámina manteniendo la cara
que contiene la muestra hacia arriba y pasar sobre la
llama de un mechero de dos o tres pasajes rápidos,
cuidando que no se caliente demasiado.

Fotos: Manual de la Baciloscopia, INS. En actualización, 2018


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GRACIAS

Eddy Valencia Torres, Blgo.


Laboratorio de Referencia Nacional de Micobacterias
Centro Nacional de Salud Pública
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