UNIVERSIDAD NACIONAL DEL ALTIPLANO

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

“EFECTO DE LOS MÉTODOS DE BENEFICIO DE CAFÉ

CATIMOR (LAVADO, HONEY, NATURAL, ANAERÓBICO)
SOBRE LA CALIDAD FÍSICA Y SENSORIAL EN ALTO
INAMBARI, PERÚ”

TESIS

PRESENTADA POR:

RICARDO NAHUEL VALENZUELA ANTEZANA

PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE:

INGENIERO AGROINDUSTRIAL

PUNO - PERÚ

2023
 DEDICATORIA

A Dios por permitirme vivir, por darme las

oportunidades de ampliar mis

conocimientos día a día.

A mi madre y abuela que guían mis

pasos y son testigo de mis logros en

la eternidad.

A mi familia nuclear, extensa, y a mi familia

que uno escoge, mis amigos y a mi

compañera de vida.

R. N. V. Antezana
 AGRADECIMIENTOS

• A la Universidad Nacional del Altiplano, por haberme brindado conocimientos,

habilidades, y comedor universitario cuando más lo necesite.

• A mi director de tesis Dra. Genny Luna Mercado por su apoyo, su asesoramiento,

y disposición de tiempo en el desarrolló del presente trabajo de investigación y

por haber confiado en mi persona.

• Al laboratorista Rufino Aroni, Ing. Edgar Gallegos y Dr. Wenceslao Medina que

me brindaron amistad, conocimiento y confianza durante mi formación

profesional, que permitió al grupo de estudios Agroser lograr el 1er puesto en el

Segundo Concurso Tecnológico Inter Escuelas Profesionales de Innovación

Tecnológica en el año 2013, logrando por primera vez este logro para mi escuela

profesional.

R. N. V. Antezana
 INDICE GENERAL

DEDICATORIA

AGRADECIMIENTOS

ÍNDICE GENERAL

INDICE DE FIGURAS

ÍNDICE DE TABLAS

INDICE DE ACRÓNIMOS

CARTA DE ACEPTACIÓN DE PUBLICACIÓN

1. CAPITULO I. INTRODUCCIÓN ................................................................... 10

2. CAPITULO II. ARTÍCULO ACEPTADO .................................................... 12

3. REFERENCIAS ................................................................................................ 28

4. ANEXOS ............................................................................................................ 34

5. ANEXO 1: INFORMACIÓN DE LA REVISTA ........................................... 34

6. ANEXO 2: TRADUCCIÓN AL ESPAÑOL ................................................... 35

Área: Ingeniería y Tecnología.

Tema: Desarrollo de Procesos y Productos Agroindustriales Sostenibles y Eficientes.

FECHA DE SUSTENTACIÓN: 12 de junio de 2023

 INDICE DE FIGURAS

Figure 1. Methodology applied for the processing of Catimor coffee. .......................... 16

Figure 2. Summary of research methodology ................................................................ 18

Figure 3. Performance of processing methods for Catimor coffee ................................ 20

Figure 4. Sensory diagram of Catimor coffee by processing method ............................ 26

 INDICE DE TABLAS

TABLE 1 SCORING AND CLASSIFICATION FOR SPECIALTY COFFEES

ACCORDING TO SCA (2003). .................................................................. 14

TABLE 2 PHYSICAL QUALITY OF CATIMOR COFFEE SUBJECTED TO FOUR

PROCESSING METHODS ......................................................................... 19

TABLE 3 MASS BALANCE BY PROCESSING METHOD FOR CATIMOR

COFFEE ....................................................................................................... 20

TABLE 4 SENSORY QUALITY ATTRIBUTES FOR CATIMOR COFFEE BY

PROCESSING METHOD ........................................................................... 21

TABLE 5 TOTAL SCORE, CLASSIFICATION AND DESCRIPTION OF CATIMOR

COFFEE BY PROCESSING METHOD..................................................... 22

 INDICE DE ACRÓNIMOS

m.s.n.m. : Metros sobre el nivel del mar

m.a.s.l. : Meter above sea level

SCA : Specialty Coffee Association

R1 : Repetition 1

R2 : Repetition 2

R3 : Repetition 3

CECOVASA LTDA : Central de Cooperativas Agrarias Cafetaleras de los Valles de

Sandia

NTP : Normas Técnicas Peruanas

ISO : International Organization for Standardization

CQI : Coffee Quality Institute

CRD : Completely randomized design

ANOVA : Analysis of variance

ITC : Centro de Comercio Internacional

INACAL : Instituto Nacional de Calidad

 CARTA DE ACEPTACIÓN DE PUBLICACIÓN

En base al reglamento de titulación alternativa, se realizó la tesis en formato artículo

científico para su revisión a la revista Coffee Science (Brasil) esta indexada en SCOPUS

– Q3, la cual acepto la investigación luego de una rigurosa evaluación, asimismo la

revista solo acepta artículos en inglés, motivo por el cual presento en ese idioma. A

continuación, se presenta la carta de aceptación por parte de la revista indexada.

 1. CAPITULO I. INTRODUCCIÓN

El café es un producto agrícola importante en el mundo (Gutiérrez-Calle et al.,

2021) y la bebida más popular del mundo después del agua (Barbin et al., 2014; Mussatto

et al., 2011), Perú es el octavo productor de café a nivel mundial (International Coffee

Organization, 2020), este producto es producido en 10 regiones del Perú desde 600 hasta

2,200 metros sobre el nivel del mar (m.s.n.m), con una superficie cosechada de 375,000

ha (Junta Nacional del Café, 2019). Por las diferentes altitudes en la producción, el Perú

posee ecosistemas diversos y cafés de diversas cualidades, los cafés especiales son una

oportunidad de mejora económica y social para pequeños productores, ya que el precio

del café está relacionado con la calidad (Márquez et al., 2020; Rosas-Echevarría et al.,

2019; Silva et al., 2014).

La variedad Catimor es resistente a la roya amarilla y de alta productividad (

Research World Coffee, 2020; Julca-Otiniano et al., 2018), por ello es mayormente

cultivada en zonas de altitudes medias y bajas.

Los procesos postcosecha son determinantes para las características físicas y

sensoriales del producto final, independientemente del método de procesamiento, la

fermentación tiene gran influencia en la composición de los granos y su calidad

(Velásquez & Banchón, 2022; Guevara-Sánchez et al., 2019; Rodrigues et al., 2020;

Cândido et al., 2019). Existen diferentes métodos de procesamiento o beneficio de café:

vía seca o natural y vía húmeda o lavado (de Oliveira et al., 2018; Hamdouche et al.,

2016; Borém et al., 2013), también el método semi seco o honey que combina los métodos

anteriores (Aswathi et al., 2022; Karim et al., 2019), el método anaeróbico también es

una alternativa reciente, en la cual la fermentación se realiza sin presencia de oxígeno

(Mulyara & Rahmadian, 2021), estos métodos añaden valor al café (Nasution et al.,

2020).

10
 En los últimos años los cafés especiales son más requeridos en el mercado, la

denominación de café especial está fuertemente relacionado con la calidad física y

sensorial, la clasificación de café según la Specialty Coffee Association (SCA), clasifica

los cafés especiales de 0 a 100 puntos, resultante de una evaluación física y sensorial.

Existe escasa bibliografía sobre la influencia de los métodos de beneficio en

diferentes variedades de café en la calidad, en especial en Perú y América del Sur, existen

estudios de comparación de métodos lavado, natural, y honey en China (Chen et al.,

2019), en Korea estudiaron los métodos lavado, natural y anaeróbico (Kim et al., 2022),

en Colombia se estudió la calidad sensorial (Cruz-O’byrne et al., 2020) con el método

lavado.

Con el fin de generar mayores alternativas para los productores de café, aplicando

métodos de procesamiento no tradicionales, esta investigación tiene por objetivo evaluar

el efecto de cuatro de los métodos de beneficio de café catimor (lavado, honey, natural,

anaeróbico) sobre la calidad física y sensorial en Alto Inambari.

11
 2. CAPITULO II. ARTÍCULO ACEPTADO

EFFECT OF PROCESSING METHODS (WASHED, HONEY, NATURAL,

ANAEROBIC) OF CATIMOR COFFEE ON PHYSICAL AND SENSORY QUALITY

IN ALTO INAMBARI, PERÚ

ABSTRACT

Coffee cultivation is an important economic activity produced mainly by small producers

and is a major exportation product in Peru. Among the coffee varieties grown in the Puno

region, the Catimor variety predominates, mainly because of its resistance to yellow rust

and productivity. We investigated the effect on the physical and sensory quality of four

coffee processing methods (washed, honey, natural, anaerobic) and a control sample.

Samples of three kilograms of Catimor coffee cherry were harvested for each benefit

method, then the Specialty Coffee Association (SCA) methodology was applied to

evaluate the physical and sensory quality, and the results were analyzed with analysis of

variance and Tukey's multiple comparison. The results showed that yield, the main

attribute of physical quality, grouped the treatments into two different groups: (1) control,

71.17%; washed, 75.83%; and honey, 75.24%; and (2) natural, 44.45%, and anaerobic,

45.70%, from the harvest of the coffee cherry to green coffee, only 13.01% to 15.13% is

used for roasting, consumption or transformation. Regarding the sensory quality, of the

sensory attributes, only fragrance and body were significantly different, and the total cup

score was 82.50 (control), 84.00 (washed), 82.88 (honey), 85.75 (natural) and 87.38

(anaerobic). There is a significant difference between the treatments, despite the lower

physical yields of the natural and anaerobic benefits, these benefit methods significantly

improve sensory quality and therefore profitability. This study provides a reference for

coffee producers on the processing method to generate greater profits, and the organic

and volatile components related to the beneficial methods should be studied.

12
Keywords: anaerobic; coffee farmer; processing method; profitability; wet.

INTRODUCTION

Coffee is an important agricultural product in the world (Gutiérrez-Calle et al., 2021) and

the most popular beverage in the world after water (Barbin et al., 2014; Mussatto et al.,

2011). Peru is the eighth largest producer of coffee worldwide (International Coffee

Organization - ICO, 2020). This product is produced in 10 regions of Peru from 600 to

2,200 meters above sea level (m.a.s.l.), with a harvested area of 375,000 ha (Junta

Nacional del Café - JNC, 2019). Due to the different altitudes in production, Peru has

diverse ecosystems or life zones, therefore, coffees of diverse qualities, and specialty

coffees are an opportunity for economic and social improvement for small producers

since the price of coffee is related to quality (Márquez et al., 2020; Rosas-Echevarría et

al., 2019; Silva et al., 2014). The Catimor variety is resistant to yellow rust and of high

productivity (Research World Coffee - RWC, 2020; Julca-Otiniano et al., 2018), which

is why it is mostly cultivated in areas of medium and low altitudes, usually from 900 to

1600 m.a.s.l.

Postharvest processes determine the physical and sensory characteristics of the

final product, regardless of the processing method, and fermentation has a great influence

on the composition of beans and their quality (Velásquez and Banchón, 2022; Guevara-

Sánchez et al., 2019; Rodrigues et al., 2020; Cândido et al., 2019). There are different

coffee processing or processing methods: dry or natural methods and wet or washed

methods (de Oliveira et al., 2018; Hamdouche et al., 2016; Borém et al., 2013).

Additionally, the semidry or honey method combines previous methods (Aswathi et al.,

2022; Karim et al., 2019). The anaerobic method is also a recent alternative, in which

13
fermentation is carried out without the presence of oxygen (Mulyara and Rahmadian,

2021). These methods add value to coffee (Nasution, Hasyim and Lubis, 2020).

In recent years, specialty coffees have become more required in the market, and the

denomination of specialty coffees is strongly related to their physical and sensory

qualities. Table 1 presents the classification of coffees according to the Specialty Coffee

Association (SCA), which classifies specialty coffees from 0 to 100 points, resulting from

a physical and sensory evaluation.

Table 1 Scoring and classification for specialty coffees according to SCA

(2003).

Score Quality Classification

90-100 Outstanding Specialty

85–89,99 Excellent Specialty

80–84,99 Very good Specialty

< 80 Below specialty quality Not specialty

There is little literature on the influence of processing methods in different coffee

varieties on quality, especially in Peru and South America. There are studies comparing

washed, natural, and honey methods in China (Chen et al., 2019); in Korea, they studied

the washed, natural, and anaerobic methods (Kim et al., 2022); in Colombia, the sensory

quality was studied (Cruz-O'byrne; Piraneque-Gambasica; Aguirre-Forero, 2020) with

the washed method.

To generate greater alternatives for coffee producers, applying nontraditional

processing methods, this research aims to evaluate the effect of four methods of

processing coffee (Coffea arabica L.) variety Catimor de Alto Inambari on physical and

sensory quality.

14
MATERIALS AND METHODS

Study area

The study was conducted at the Cari farm, Chillcayoc Sector, Pampayamayo

Village Center, Alto Inambari district, Puno region (Peru; Latitude: -13.993249,

Longitude: -69.237123; between 1200 and 1330 m.a.s.l.). The temperature during the

study period was between 15.1 and 27 °C, and the relative humidity was between 47 and

78% (day and night), according to Folmer B. (2017) the climatic cluster is constant. These

parameters were obtained with a data logger (TempU03, TZONE, Taiwan) from July to

September 2022 (end of harvest season).

Biological material

Mature coffee fruits (selective harvest) of the Catimor variety were harvested, and a

control sample of the same variety was also harvested (as is usually done in the study

area, without selective harvest). The plantations were cultivated for 6 years under the

agroforestry system. Then, the float test was performed, removing immature fruits and

debris. Three kilograms were washed and selected for each experimental unit to carry out

coffee processing. The fruits were between 13 and 18 °Brix, measured with an optical

refractometer (M80, ATC, China), and the color was measured with a colorimeter (Basic,

VINCKOLOR, China). In the CIELab measurement system, three repetitions were made

by measuring 30 cherry coffee fruits harvested with selective harvesting, similar to the

methodology used by Buitrago-Osorio et al. (2022) and Rincon-Jimenez et al. (2021).

The average values for L, a, and b were 28.95 ± 5.12, 11.22 ± 3.33 and 7.04 ± 4.40,

respectively.

Coffee processing

Four coffee processing methods were applied: washed, honey, natural and anaerobic,

applying methodologies by Karim et al. (2019), Alomia and Untiveros (2021), Vilca

15
(2014) and Mulyara and Rahmadian (2021). For each method, three replicates were

performed. Figure 1 shows the methodology used for coffee processing.

Figure 1. Methodology applied for the processing of Catimor coffee.

The washed processing method was also used for the control sample (traditional method)

and T1, the fermentation time was 15 hours, and drying was carried out for 10 days. The

honey process - T2 (yellow honey) was carried out by drying the samples after pulping,

and the drying time was 15 days.

The natural method - T3 was carried out by drying the samples after conditioning, and

the drying time was 23 days. The anaerobic method - T4 was carried out by fermenting

16
the sample in a GrainPro bag without presence of air, inside a hermetically sealed 15-liter

container, the drying time was 23 days.

In all the processing methods, fermentation was also carried out under ambient conditions

and drying was carried out until the recommended moisture content of 10 to 12% (dry)

was reached (Anokye-Bempah et al., 2022).

Drying was carried out in a solar dryer with wooden pallets, mesh and windows as

ventilation system, under natural conditions, at temperatures between 15 and 40 °C and a

relative humidity of 29 to 91%. Storage was carried out under shade in Ziplock bags at

ambient conditions of 12 to 18 °C and 39.8 to 58% relative humidity. These parameters

were obtained with a data logger (TempU03, TZONE, Taiwan).

Physical and sensory quality

SCA methodology was used for coffee quality, samples were evaluated separately

according to process method, for the physical analysis (the grading green coffee protocol),

the following parameters were considered: moisture (NTP ISO 11294:2001),

granulometry and yield, mass balance was calculated according with methodology used

by Karim, Wijayanti and Sudaryanto (2019). Figure 2 summarizes the methodology used

in the research. The sensory quality analysis was performed in the quality control

laboratories of the Central de Cooperativas Agrarias Cafetaleras de los Valles de Sandia

CECOVASA LTDA (accredited as SCA Premier Training Campuses) and of the coffee

trading company CANDELARIA. The analyses were carried out by two professional

tasters with international certification Q Arabica Grader granted by the Coffee Quality

Institute (CQI), using the methodology SCA (2003) used as an international standard that

considers 10 attributes (fragrance, flavor, residual flavor, acidity, body, balance,

uniformity, clean cup, sweetness, taster's score), and the total score.

17
 Figure 2. Summary of research methodology

Profitability

To determine the profitability of the coffee processing methods, profitability was

determined according to the prices per quintile of parchment coffee (coffee season 2021-

2022), which the central cooperative CECOVASA LTDA pays to the coffee producer.

This organization has been operating since 1970 and is the main exporter of coffee in the

study region.

Statistical design and data analysis

A completely randomized experimental design (CRD) with four treatments and

three replications was used, using analysis of variance (ANOVA). For the comparison of

treatments, Tukey's multiple comparison methodology was used with a significance level

Pr≤ 0.05, and the data were analyzed with R 4.2.2.2 software and RStudio Desktop

2022.12.0.

18
RESULTS

Physical quality

Moisture values are within the range of 10 to 12% recommended for optimum

storage (Anokye-Bempah et al., 2022; ITC, 2022; SCA, 2003). Table 2 details the

physical attributes of Catimor variety coffee subjected to four processing methods.

Table 2 Physical quality of Catimor coffee subjected to four processing methods

Processing Method

Control* Washed Honey Natural

(wet) (wet) (semidry) (dry) Anaerobic

Moisture 10.00% 10.50% 10.80% 11.00% 11.40%

Grain size 14 (9%), 15 14 (3%), 15 14 (5%), 15 14 (4%), 15 14 (3%), 15

(N° grid) (91%) (97%) (95%) (96%) (97%)

* Without selective harvesting

The yield of the treatments (Figure 3) shows a significant difference (p<0.05)

according to Tukey's test, grouping into two groups with similar yields, but different

between groups: processing method (control, washed, honey) and (natural and anaerobic),

this is attributable to the similarity of processes of each group, given that in the natural

and anaerobic processing methods drying and storage is performed with the whole coffee

fruit without the removal of the husk and mucilage, unlike the washed and honey

methods.

19
 Figure 3. Performance of processing methods for Catimor coffee

The mass balance of the main coffee processing processes (Table 3) shows that

from harvest (coffee cherry), only 13.01% to 15.13% is used for roasting and

consumption, and the difference is waste that is discarded in each process.

Table 3 Mass balance by processing method for Catimor coffee

Processing Method

Control* Washed Honey Natural

(wet) (wet) (semidry) (dry) Anaerobic
Harvesting 100.00% 100% 100.00% 100.00% 100%
Conditioning 85.94% 89.29% 89.33% 89.52% 89.52%
Pulping 42.41% 44.64% 47.23% - -
Demucilaging 39.73% 40.85% - - -
Drying 18.28% 18.48% 19.86% 34.04% 32.88%
Hulling and grading 13.01% 14.02% 14.95% 15.13% 15.03%
Bagging 13.01% 14.02% 14.95% 15.13% 15.03%
* Without selective harvesting

20
Sensory quality

The results of the sensory quality are presented in Table 4, which indicate that there is a

significant difference between the processing methods (p<0.05). The sensory quality

attributes fragrance and body are different for each treatment, affirming that the

processing method influences the organoleptic attributes proposed by Várady et al. (2022)

and Worku et al. (2018). The attributes (flavor, residual flavor, acidity, balance,

uniformity, clean cup, sweetness and taster score) do not present significant differences,

which is attributed to the fact that the treatments were performed on a single coffee

variety.

Table 4 Sensory quality attributes for Catimor coffee by processing method

Processing Method

Control* Washed Honey Natural

(wet) (wet) (semidry) (dry) Anaerobic

Aroma 7.63 7.88 7.75 8.25 8.50

Flavor 7.50 7.88 7.63 8.13 8.38

Aftertaste 7.38 7.50 7.38 7.75 8.25

Acidity 7.38 7.75 7.63 7.88 8.25

Body 7.50 7.63 7.50 7.88 8.00

Balance 7.63 7.63 7.50 8.13 8.00

Uniformity 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00

Clean Cup 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00

Sweetness 10.00 10.00 10.00 10.00 10.00

Overall 7.50 7.75 7.50 7.75 8.00

* Without selective harvesting

21
 The total score of sensory quality attributes, description and classification are

presented in Table 5. The treatments presented significant differences (p<0.05), and the

statistical test grouped the processing methods into three groups: (1) control, washed, and

honey; (2) washed, honey, and natural; and (3) natural and anaerobic.

Table 5 Total score, classification and description of Catimor coffee by

processing method

Processing
Score Quality - Classification Description
Method

Chocolate, barley, panela, green

Control*
82.50 Very Good - Specialty banana, astringent rough finish,
(wet)
medium citric acidity, juicy body

Sweet chocolate, chamomile,

Washed molasses, caramel, short smooth

84.00 Very Good - Specialty
(wet) finish, medium citrus acidity,

smooth juicy body

Caramel, honey, chocolate, cereal,

Honey
82.88 Very Good - Specialty dried cane, mild citric acidity,
(semidry)
smooth body

Red wine, grape, malt, short sweet

Natural finish, apple caramel, cognac,

85.75 Excellent - Specialty
(dry) medium citric acidity, creamy and

long lasting body

Pineapple, apricot, pomegranate, red

Anaerobic 87.38 Excellent - Specialty apple, sweet wine, caramel, butter,

black raisins, blackberries, capulin,

22
 acetic and phosphoric acidity,

effervescent, creamy and long-

lasting body

* Without selective harvesting

Profitability

Profitability for coffee producers is related to quality (Silva et al., 2014). In the production

zone, sensory quality is prioritized, unlike other regions where physical quality is also

taken into account. This is why it would be worthwhile to carry out coffee processing

with anaerobic and natural methods, since according to the collection prices, the producer

would obtain per quintal of parchment coffee of 46 kilograms the following income per

processing method as a minimum: S/600 (control), S/750 (washed), S/600 (honey), S/850

(natural), and S/950 (anaerobic), the last treatment being the most profitable, followed by

the natural beneficiation method.

DISCUSSION

Physical quality

Regarding granulometry, the bean size for all treatments meets the export criteria that

coincide with the values of Guevara-Sánchez et al. (2019) and ITC (2022), which indicate

that exportable coffee beans are larger than the size of mesh No. 14-5. 60 mm in diameter

(INACAL, 2021), attributable to selective harvesting, the results of the control sample

present a lower percentage of exportable beans, possibly because this was harvested

without selective harvesting, and overripe, ripe, semiripe, and green beans were

processed, coinciding with research that concludes that the stages of maturity influence

physical properties (Buitrago-Osorio et al., 2022; Rincon-Jimenez et al., 2021).

23
The yield values of the washed beneficiation method coincide with the results of research

conducted in the study area (Mamani and Condori, 2019; Jarata, 2015), and they also

resemble values reported by Alomia and Untiveros (2021) in Satipo (80.83%) and Julca-

Otiniano et al. (2018) in Chachamayo (73. 62%), the yields of the honey and natural

processing methods coincide with the results of Alomia and Untiveros (2021), 75.19%

and 47.33%, respectively, because the yields of the anaerobic and natural methods are

similar since the coffee cherry remains intact until the moment of processing to obtain

green coffee, where husk, mucilage and parchment are discarded. The mass balance

shows that on average, only 14.43% of the harvested coffee is roasted, 85.57% are

residues (husk, mucilage, grain husk, defects, among others), and the results are similar

to the results reported by Karim, Wijayanti and Sudaryanto (2019), but there are

differences because they conducted the study with robusta coffee.

Sensory quality

The effect of the washed processing method improves sensory quality to a greater extent

than the honey method in the Catimor variety by generating higher values of flavor and

taster appreciation. The sensory quality attributes of greater value were obtained with the

anaerobic and natural processing methods. Since the processing, drying and storage in

both methods are carried out with the coffee cherry intact, there is migration of simple

and complex molecules to the coffee bean, which would be attributed to the improvement

of the sensory quality, confirming that there are differences between processing methods

(Várady et al., 2022; Tassew et al., 2021; Alomia and Untiveros, 2021).

The similarity between processes (1) washed and honey and (2) natural and anaerobic is

attributable to the similarity of processes and total score between groups, coinciding with

24
that proposed by Rodriguez et al. (2020), which indicates that there is no chemical or

sensory difference between the washed and honey methods. The natural beneficiation

method in comparison with the washed and honey method presents higher values,

coinciding with the results of Dharmaputra et al. (2021) and Tassew et al. (2022). The

significant increase in the total score of the anaerobic and natural methods is attributed to

the metabolites that generate complex sensory descriptors, resulting from the presence of

microorganisms (mainly bacteria and yeasts) during the fermentation process and

migration of molecules during fermentation and drying.

In the control processing method (traditional in the production zone), barley, green

banana and astringency descriptors were found, which diminish its sensory quality

(Paredes-Espinosa et al., 2022). This is attributed to the fact that the harvest is carried out

without selective harvesting, processing unripe and pinto fruits that generate these

descriptors.

The anaerobic processing method presents higher scores, highlighting fruity descriptors,

dried fruits, red fruits, acetic acidity, phosphoric acidity, and effervescence, coinciding

with the values obtained by Jimenez et al. (2023) and Diaz (2020), presenting greater

complexity (Figure 4), being classified according to the international SCA standard as a

specialty coffee of excellent quality, as is the case with the natural processing method.

25
 Figure 4. Sensory diagram of Catimor coffee by processing method

The results indicate that there are significant differences between the coffee processing

methods and the control sample. The washed and honey methods have better physical

quality than the natural and anaerobic methods but contrast in sensory quality where the

last abovementioned methods present higher values than the washed and honey methods.

These differences are mainly attributed to the selective harvesting, the processes of each

processing method, especially fermentation and drying, the migration of simple and

complex chemical substances to the coffee bean, and the metabolites resulting from the

metabolic activity of the microorganisms present during these processes. Finally, the

anaerobic method presents the highest sensory values due to the complexity of sensory

attributes that it generates, attributed to metabolites generated by microorganisms that

develop in the absence of oxygen in the fermentation process.

26
CONCLUSION

There is a significant difference between the following processing methods: washed,

honey, natural and anaerobic in physical and sensory quality. The washed and honey

methods present similar physical quality but are superior to the natural and anaerobic

processing methods. The washed, natural and anaerobic processing methods improve the

sensory quality of Catimor variety coffee, and the honey processing method is not

recommended for the processing of Catimor variety coffee. Despite the lower physical

yields of the natural and anaerobic methods, it is recommended to use these processing

methods because of the significant increase in sensory quality, therefore, they are more

profitable. This increase is attributed to selective harvesting, the presence and interaction

of molecules and metabolites during the fermentation and drying processes, and the types

of microorganisms present. The anaerobic processing method is attributed to the greater

complexity of sensory quality with respect to other methods due to the development of

microorganisms in the absence of oxygen during the fermentation process, constituting

together with the natural processing method an alternative for coffee growers to generate

greater income and make coffee cultivation more profitable. There are also processing

methods such as red honey, black honey, lactic fermentation, malic fermentation, and

carbonic fermentation that could improve the physical and sensory quality of coffee, and

the related organic and volatile components should also be studied.

AUTHORS' CONTRIBUTION

RNVA wrote the manuscript and performed the experiment, GILM supervised the

experiment and co-work the manuscript, and GILM review and approved the final

version of the work, RNVA conducted all statistical analyses.

27
 3. REFERENCIAS

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33
 4. ANEXOS

5. ANEXO 1: INFORMACIÓN DE LA REVISTA

34
 6. ANEXO 2: TRADUCCIÓN AL ESPAÑOL

EFECTO DE LOS MÉTODOS DE BENEFICIO DE CAFÉ CATIMOR (LAVADO,

HONEY, NATURAL, ANAERÓBICO) SOBRE LA CALIDAD FÍSICA Y

SENSORIAL EN ALTO INAMBARI, PERÚ

RESUMEN

El cultivo de café es una actividad económica importante, producido mayormente por

pequeños productores, siendo un producto principal de exportación en el Perú, entre las

variedades de café cultivadas en la región Puno predomina la variedad Catimor, por su

resistencia a la roya amarilla y productividad principalmente. Se investigó el efecto en la

calidad física y sensorial de cuatro métodos de beneficio de café (lavado, honey, natural,

anaeróbico) y una muestra control, se cosecharon muestras de tres kilogramos de café

Catimor para cada método de beneficio, posteriormente se aplicó la metodología de la

Specialty Coffee Association (SCA) para evaluar la calidad física y sensorial, los

resultados se analizaron con análisis de varianza y comparación múltiple de Tukey. Los

resultados demostraron que el rendimiento, atributo principal de la calidad física, agrupa

a los tratamientos en dos grupos diferentes: (1) control 71,17%, lavado 75,83%, honey

75,24% y (2) natural 44,45%, anaeróbico 45,70%; respecto a la calidad sensorial, de los

atributos sensoriales solo fragancia y cuerpo son significativamente diferentes, el puntaje

total en taza fue: 82,50 (control), 84,00 (lavado), 82,88 (honey), 85,75 (natural) y 87,38

(anaeróbico). Existe diferencia significativa entre los tratamientos, a pesar de los

rendimientos menores de los beneficios natural y anaeróbico, estos métodos de beneficio

mejoran significativamente la calidad sensorial, por ende, la rentabilidad. El estudio da

referencia al productor cafetalero sobre el método de beneficio a usar para generar

mayores ingresos económicos, se debe estudiar los componentes orgánicos y volátiles

relacionados con los métodos de beneficio.

35
Palabras clave: anaeróbico, beneficio de café; calidad física; calidad sensorial; Catimor;

método de procesamiento; rentabilidad.

INTRODUCCIÓN

El café es un producto agrícola importante en el mundo (Gutiérrez-Calle et al., 2021) y la

bebida más popular del mundo después del agua (Hailu, 2015; Barbin et al., 2014), Perú

es el octavo productor de café a nivel mundial (International Coffee Organization, 2020),

este producto es producido en 10 regiones del Perú desde 600 hasta 2,200 metros sobre

el nivel del mar (m.s.n.m), con una superficie cosechada de 375,000 ha (Junta Nacional

del Café, 2019). Por las diferentes altitudes en la producción, el Perú posee ecosistemas

diversos y cafés de diversas cualidades, los cafés especiales son una oportunidad de

mejora económica y social para pequeños productores, ya que el precio del café está

relacionado con la calidad (Márquez et al., 2020; Rosas-Echevarría et al., 2019; Silva et

al., 2014).

La variedad Catimor es resistente a la roya amarilla y de alta productividad (World Coffee

Research, 2020; Julca-Otiniano et al., 2018), por ello es mayormente cultivada en zonas

de altitudes medias y bajas.

Los procesos postcosecha son determinantes para las características físicas y sensoriales

del producto final, independientemente del método de procesamiento, la fermentación

tiene gran influencia en la composición de los granos y su calidad (Velásquez & Banchón,

2022; Guevara-Sánchez et al., 2019; Rodrigues et al., 2020; Cândido et al., 2019). Existen

diferentes métodos de procesamiento o beneficio de café: vía seca o natural y vía húmeda

o lavado (de Oliveira et al., 2018; Hamdouche et al., 2016; Borém et al., 2013), también

el método semi seco o honey que combina los métodos anteriores (Aswathi et al., 2022;

Karim et al., 2019), el método anaeróbico también es una alternativa reciente, en la cual

36
la fermentación se realiza sin presencia de oxígeno (Mulyara & Rahmadian, 2021), estos

métodos añaden valor al café (Nasution et al., 2020).

En los últimos años los cafés especiales son más requeridos en el mercado, la

denominación de café especial está fuertemente relacionado con la calidad física y

sensorial, en la Tabla 1 se presenta la clasificación de café según la Specialty Coffee

Association (SCA), que clasifica los cafés especiales de 0 a 100 puntos, resultante de una

evaluación física y sensorial.

Tabla 1

Puntuación y clasificación para cafés especiales según (SCA, 2003).

Puntaje Total Calidad Clasificación

90 - 100 Sobresaliente Especialidad
85 – 89,99 Excelente Especialidad
80 – 84,99 Muy Bueno Especialidad
Por debajo de calidad de
< 80 especialidad Comercial

Existe escasa bibliografía sobre la influencia de los métodos de beneficio en diferentes

variedades de café en la calidad, en especial en Perú y América del Sur, existen estudios

de comparación de métodos lavado, natural, y honey en China (Chen et al., 2019), en

Korea estudiaron los métodos lavado, natural y anaeróbico (Kim et al., 2022), en

Colombia se estudió la calidad sensorial (Cruz-O’byrne et al., 2020) con el método

lavado.

Con el fin de generar mayores alternativas para los productores de café, aplicando

métodos de procesamiento no tradicionales, esta investigación tiene por objetivo evaluar

el efecto de cuatro métodos de beneficio de café (Coffea arabica L.) variedad Catimor de

Alto Inambari en la calidad física y sensorial.

37
MATERIALES Y MÉTODOS

Área de estudio

El estudio se realizó en la finca Cari, Sector Chillcayoc, Centro Poblado Pampayamayo

del distrito de Alto Inambari región Puno (Perú, Latitud: -13.993249, Longitud: -

69.237123; entre 1200 a 1330 m.s.n.m). La temperatura durante el periodo de estudio fue

entre 15.1 a 27 °C y la humedad relativa ambiental de 47 a 78 %, estos parámetros fueron

obtenidos con un data logguer (TempU03, TZONE, Taiwán), durante los meses de julio

a septiembre del año 2022.

Material biológico

Se cosecharon frutos de café maduros (cosecha selectiva) de variedad Catimor, también

se cosecho una muestra de control de la misma variedad (como usualmente se realiza en

el área de estudio, sin cosecha selectiva), las plantaciones tienen 6 años cultivados bajo

sistema agroforestal, posteriormente se realizó la prueba de flote, quitando frutos

inmaduros y desechos, se lavaron y seleccionaron 3 kilogramos por cada unidad

experimental para realizar el beneficio de café, los frutos tuvieron entre 13 a 18 °brix,

medidos con un refractómetro óptico (M80, ATC, China), el color fue medido con un

colorímetro (Basic, VINCKOLOR, China), en el sistema de medición CIELab, se

realizaron tres repeticiones por medición de 30 frutos de café cerezo cosechados con

cosecha selectiva, similar a la metodología usada por Buitrago-Osorio et al. (2022) y

Rincon-Jimenez et al. (2021), el promedio fue L: 28.95 ± 5.12 , a: 11.22 ± 3.33 y b: 7.04

± 4.40.

Beneficio de café

Se aplicaron cuatro métodos de beneficio de café: lavado, honey, natural y anaeróbico,

aplicando metodologías realizadas por Karim et al. (2019), Alomia & Untiveros (2021),

38
Vilca (2014) y Mulyara & Rahmadian (2021), para cada método se realizaron tres

repeticiones . En la Figura 1 se muestra la metodología usada para el beneficio de café.

Figura 1. Metodología aplicada para el beneficio de café variedad Catimor

El método de beneficio lavado fue usado también para la muestra de control (método

tradicional), el tiempo de fermentación fue por 15 horas, el secado se realizó por 10 dias.

El beneficio honey se realizó secando las muestras posterior al despulpado, el tiempo de

secado fue de 15 dias. El método beneficio natural se realizó secando las muestras después

del acondicionamiento, el tiempo de secado fue de 23 dias. El método anaeróbico se

realizó, fermentando la muestra en un recipiente de 15 litros cerrado herméticamente, el

tiempo de secado fue de 23 días. En todos los métodos de beneficio el secado se realizó

hasta llegar a la humedad recomendada de 10 a 12% (Anokye-Bempah et al., 2022).

El secado se realizó en un secador solar con tarimas de madera y malla, a condiciones de

temperatura entre 15 a 40 °C, humedad relativa 29 a 91 %, el almacenamiento se realizó

39
bajo sombra en bolsas zipblock, a condiciones ambientales de 12 a 18 °C y 39.8 a 58 %

de humedad relativa, estos parámetros fueron obtenidos con un data logguer (TempU03,

TZONE, Taiwán).

Calidad física y sensorial

Para el análisis físico se consideraron los parámetros: humedad, granulometría y

rendimiento, en la Figura 2 se resume la metodología utilizada en la investigación, el

análisis de calidad sensorial se realizó en los laboratorios de control de calidad de la

Central de Cooperativas Agrarias Cafetaleras de los Valles de Sandia CECOVASA

LTDA (acreditado como SCA Premier Training Campuses), y de la empresa

comercializadora de café CANDELARIA, los análisis fueron realizados por dos

catadores profesionales con certificación internacional Q Arabica Grader otorgado por el

Coffee Quality Institute (CQI), se utilizó la metodología (SCA, 2003) usada como

estándar internacional que considera 10 atributos (fragancia, sabor, sabor residual, acidez,

cuerpo, equilibrio, uniformidad, taza limpia, dulzor, puntaje del catador), y el puntaje

total.

Figura 2. Resumen de la metodología de investigación

40
Rentabilidad

Para determinar la rentabilidad de los métodos de beneficio de café, se realizó de acuerdo

a los precios de acopio por quintal de café pergamino (campaña cafetalera 2021 – 2022),

que la central de cooperativas CECOVASA LTDA paga al productor de café, esta

organización opera desde el año 1970, y es el principal exportador de café en la región de

estudio.

Diseño estadístico y análisis de datos

Se utilizo un diseño experimental completamente al azar (DCA) con cuatro tratamientos

y tres repeticiones, utilizando el análisis de varianza (ANOVA), para la comparación de

tratamientos se utilizó la metodología de comparación múltiple de Tukey con un nivel de

significancia Pr≤ 0.05, los datos fueron analizados con el software R 4.2.2 y RStudio

Desktop 2022.12.0.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Calidad física

Los valores de humedad se encuentran dentro del rango de 10 a 12% recomendado para

un óptimo almacenamiento (Anokye-Bempah et al., 2022; ITC, 2022; SCA, 2003), en la

Tabla 2 se detalla los atributos físicos del café variedad Catimor sometido a cuatro

métodos de beneficio. Respecto a la granulometría, el tamaño de grano para todos los

tratamientos cumplen con los criterios de exportación que coinciden con los valores de

Guevara-Sánchez et al. (2019) y ITC (2022), que indican que los granos de café

exportables son de tamaño superior a la malla N° 14 – 5.60 mm de diámetro (INACAL,

2021), atribuible a la cosecha selectiva, los resultados de la muestra control presentan

menor porcentaje de grano exportable, posiblemente porque esta fue cosechada sin

41
cosecha selectiva, es decir se procesaron granos sobre maduros, maduros, pintones, y

verdes, coincidiendo con investigaciones que concluyen que los estados de madurez

influyen en las propiedades físicas (Buitrago-Osorio et al., 2022; Rincon-Jimenez et al.,

2021).

Tabla 2

Calidad física de café variedad Catimor sometidos a cuatro métodos de beneficio

Método de Beneficio
Atributo Control* Lavado Honey Natural Anaeróbico
Humedad 10,00% 10,50% 10,80% 11,00% 11,40%
Granulometría 14 (9%), 15 14 (3%), 15 14 (5%), 15 14 (4%), 15 14 (3%), 15
(N° malla) (91%) (97%) (95%) (96%) (97%)
*Cosechado sin cosecha selectiva

El rendimiento de los tratamientos (Figura 3) presenta diferencia significativa (p<0.05)

según la prueba de Tukey, agrupándose en dos grupos con rendimientos similares, pero

diferentes entre grupos: método de beneficio (control, lavado, honey) y (natural y

anaeróbico), esto es atribuible a la similitud de procesos de cada grupo, dado que en los

métodos de beneficio natural y anaeróbico el beneficio, secado y almacenamiento se

realiza con el fruto del café entero sin la remoción de la cascara y mucilago a diferencia

de los métodos lavado y honey. Los valores de rendimiento del método de beneficio

lavado coincide con los resultados de investigaciones realizadas en la área de estudio

(Mamani & Condori, 2019; Jarata, 2015), también se asemejan con valores reportados

por Alomia & Untiveros (2021) en Satipo (80.83%) y Julca-Otiniano et al. (2018) en

Chachamayo (73.62%), el rendimiento del metodo de beneficio honey y natural coinciden

con los resultados de Alomia & Untiveros (2021), 75.19% y 47.33% respectivamente,

respecto a los rendimientos de los metodos anaeróbico y natural son similares ya que la

cereza de café se mantiene intacta hasta el momento de procesamiento para obtención de

café verde, donde cascara, musilago y pergamino se descartan.

42
 Figura 3. Rendimiento de métodos de beneficio de café variedad Catimor

Calidad sensorial

Los resultados de la calidad sensorial se presentan en la Tabla 3, estos indican que existe

diferencia significativa entre los métodos de beneficio (p<0.05), los atributos de calidad

sensorial fragancia y cuerpo son diferentes para cada tratamiento afirmando que el

método de procesamiento influye en los atributos organolépticos propuesto por Várady

et al. (2022) y Worku et al. (2018), los atributos (sabor, sabor residual, acidez, equilibrio,

uniformidad, taza limpia, dulzor y puntaje catador) no presentan diferencias

significativas, esto se atribuye a que los tratamientos se realizaron a una sola variedad de

café. El efecto del método de beneficio lavado mejora la calidad sensorial en mayor

medida que el método honey en la variedad Catimor, por generar mayores valores de

sabor y apreciación del catador, los atributos de calidad sensorial de mayor valor se

obtuvieron con los métodos de beneficio anaeróbico y natural, ya que el beneficio, secado

y almacenamiento en ambos métodos se realiza con el cerezo de café intacto, existiendo

43
migración de moléculas simples y complejas al grano de café, esto estaría atribuido a la

mejora de la calidad sensorial.

Tabla 3

Atributos de calidad sensorial por método de beneficio de café Catimor

Método de Beneficio
Atributo Control* Lavado Honey Natural Anaeróbico
Francia/Aroma 7,63 7,88 7,75 8,25 8,50
Sabor/Flavor 7,50 7,88 7,63 8,13 8,38
Sabor residual/Aftertaste 7,38 7,50 7,38 7,75 8,25
Acidez/Acidity 7,38 7,75 7,63 7,88 8,25
Cuerpo/Body 7,50 7,63 7,50 7,88 8,00
Equilibrio/Balance 7,63 7,63 7,50 8,13 8,00
Uniformidad/Uniformity 10,00 10,00 10,00 10,00 10,00
Taza Limpia/Clean Cup 10,00 10,00 10,00 10,00 10,00
Dulzor/Sweetness 10,00 10,00 10,00 10,00 10,00
Puntaje catador/Overall 7,50 7,75 7,50 7,75 8,00
* Cosechado sin cosecha selectiva

El puntaje total de los atributos de calidad de sensorial, descripción y clasificación

se presentan en la Tabla 4, los tratamientos presentaron diferencias significativas (p<0.05)

confirmando que existen diferencias entre métodos de beneficio (Várady et al., 2022;

Tassew et al., 2021; Alomia & Untiveros, 2021), la prueba estadística agrupa los métodos

de beneficio en tres grupos: (control, lavado, honey), (lavado, honey, natural), y (natural,

anaeróbico), atribuible a la similitud de procesos y puntaje total entre grupos,

coincidiendo con lo propuesto por Rodriguez et al. (2020) que indica que no hay

diferencia química ni sensorial entre los métodos lavado y honey, el método de beneficio

natural en comparación con el método lavado y honey presenta valores superiores

coincidiendo con los resultados de Dharmaputra et al. (2021) y Tassew et al. (2022).

44
 Tabla 4

Puntaje total, clasificación y descripción de métodos de beneficio de café

Catimor

Método de
Puntaje Calidad - Clasificación Descripción
Beneficio
Chocolate, cebada, panela, plátano
Muy Bueno -
Control* 82,50 verde, final áspero astringente,
Especialidad
acidez cítrica media, cuerpo jugoso
Chocolate dulce, manzanilla,
Muy Bueno - melaza, caramelo, final corto suave,
Lavado 84,00
Especialidad acidez cítrica media, cuerpo jugoso
terso
Caramelo, miel, chocolate, cereal,
Muy Bueno -
Honey 82,88 caña seca, acidez cítrica suave,
Especialidad
cuerpo terso
Vino tinto, uva, malta, final corto
dulce, caramelo de manzana, coñac,
Natural 85,75 Excelente - Especialidad
acidez cítrica media, cuerpo
cremoso y duradero
Piña, albaricoque, granada, manzana
roja, vino dulce, caramelo,
mantequilla, pasas negras, moras,
Anaeróbico 87,38 Excelente - Especialidad
capulí, acidez acética, fosfórica,
efervescente, cuerpo cremoso y
duradero
* Cosechado sin cosecha selectiva

En el método de beneficio de control (tradicional en la zona de producción) se

encontraron descriptores a cebada, plátano verde, astringencia, que disminuyen su calidad

sensorial (Paredes-Espinosa et al., 2022), esto se atribuye a que la cosecha se realiza sin

cosecha selectiva, realizando el beneficio de frutos inmaduros y pintones que generan

estos descriptores.

El método de beneficio anaeróbico presenta mayor puntaje, destacando descriptores

frutales, frutos secos, frutos rojos, acidez acética, fosfórica, y efervescencia coincidiendo

con los valores obtenidos por Jimenez et al. (2023) y Diaz (2020), presentando mayor

complejidad (Figura 4), clasificándose según el estándar internacional SCA como un café

de especialidad de calidad excelente, al igual que el método de beneficio natural. El

45
incremento significativo de puntaje total de los métodos anaeróbico y natural son

atribuidos a los metabolitos que generan descriptores sensoriales complejos, resultantes

de la presencia de microorganismos (bacterias y levaduras principalmente) durante el

proceso de la fermentación y migración de moléculas durante la fermentación y secado.

Figura 4. Diagrama sensorial por método de beneficio de café Catimor

Los resultados indican que existen diferencias significativas entre los métodos de

beneficio de café y la muestra control. El método lavado y honey tienen mejor calidad

física que los métodos natural y anaeróbico, pero contrastan en la calidad sensorial donde

estos últimos métodos presentan valores superiores a los métodos lavado y honey. Estas

diferencias están atribuidas principalmente a la cosecha selectiva, los procesos de cada

método de beneficio, en especial la fermentación y secado, la migración de sustancias

químicas simples y complejas al grano de café, y los metabolitos resultantes de la

actividad metabólica de los microrganismos presentes durante estos procesos, finalmente

el método anaeróbico presenta los valores sensoriales más altos superiores por la

complejidad de atributos sensoriales que genera, atribuidos a metabolitos generados por

46
microorganismos que se desarrollan en ausencia de oxígeno en el proceso de

fermentación.

Rentabilidad

La rentabilidad para los productores de café está relacionada con la calidad (Silva et al.,

2014), en la zona de producción se prioriza la calidad sensorial, a diferencia de otras

regiones donde también se toma en cuenta la calidad física, es por esto que valdría la pena

realizar el beneficio de café con los métodos anaeróbico y natural, ya que de acuerdo a

los precios de acopio, el productor obtendría por quintal de café pergamino de 46

kilogramos los siguientes ingresos por método de beneficio como mínimo: S/ 600

(control), S/ 750 (lavado), S/ 600 (honey), S/ 850 (natural), S/ 950 (anaeróbico), siendo

este último tratamiento el más rentable, seguido del método de beneficio natural.

CONCLUSIONES

Existe diferencia significativa entre los métodos de beneficio: lavado, honey, natural y

anaeróbico en la calidad física y sensorial, el método lavado y honey presentan calidad

física similar pero superiores a los métodos de beneficio natural y anaeróbico. Los

métodos de beneficio lavado, natural y anaeróbico mejoran la calidad sensorial de café

variedad Catimor, el método de beneficio honey no es recomendable para el beneficio de

café variedad Catimor, a pesar de los rendimientos físicos menores de los métodos natural

y anaeróbico, se recomienda utilizar estos métodos de beneficio por el incremento

significativo de calidad sensorial, por lo tanto, son más rentables, este incremento se

atribuye a la cosecha selectiva, presencia e interacción de moléculas y metabolitos durante

los procesos de fermentación y secado, y los tipos de microorganismos presentes, al

método de beneficio anaeróbico se le atribuye la mayor complejidad de calidad sensorial

respecto a otros métodos por el desarrollo de microorganismos en ausencia de oxigeno

47
durante el proceso de fermentación, constituyendo junto al método de beneficio natural

una alternativa para los productores de café con el fin de generar mayores ingresos y hacer

el cultivo de café más rentable. También existen métodos de beneficio como honey rojo,

honey negro, fermentación láctica, fermentación málica, fermentación carbónica que

podrían mejorar la calidad física y sensorial del café, debiéndose estudiar también los

componentes orgánicos y volátiles relacionados.

AGRADECIMIENTOS

Se agradece al CITEcafé y cultivos asociados, CECOVASA, la empresa comercializadora

de café CANDELARIA y al joven productor cafetalero Percy Cari por las facilidades

brindadas para la ejecución de la investigación, finalmente a los catadores Q Grader

Arábica Miguel Conco y Jhonatan Betancur por sus apreciaciones y recomendaciones

sobre las muestras de café estudiadas, que enriquecieron la investigación.

CONTRIBUCIÓN DE LOS AUTORES

RNVA redactó el manuscrito y realizó el experimento, GILM supervisó el experimento

y co-work el manuscrito, y GILM revisión y aprobó la versión final del trabajo, RNVA

llevó a cabo todos los análisis estadísticos.

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