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    BIO-BILIRRUBINA TOTAL

    Reactivo líquido para la determinación fotométrica de


    Bilirrubina Total en suero o plasma.

    Para uso en el diagnóstico in Vitro. TÉCNICA


    Llevar el reactivo a la temperatura que se realizará el ensayo. Las
    SIGNIFICANCIA CLÍNICA pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no
    La bilirrubina es producto de la degradación de la hemoglobina en contaminar el reactivo.
    el sistema retículo endotelial, la cual es transportada al hígado
    unida a albúmina. Esta bilirrubina, conocida como bilirrubina TÉCNICA MUESTRA NORMAL
    indirecta o libre, es insoluble en agua y es conjugada en el hígado
    con ácido glucurónico, siendo excretada hacia el intestino por vía Desconocido Calibrador Blanco reactivo
    biliar, donde es metabolizada por la flora bacteriana. La bilirrubina
    Muestra (mL) 0.10 ---- ----
    total corresponde a la suma de la bilirrubina indirecta o libre, y la
    bilirrubina conjugada o directa. Un aumento en la bilirrubina total es Calibrador (mL) ---- 0.10 ----
    producto de una obstrucción en la vía biliar; hepatitis; cirrosis; Reactivo trabajo (mL) 1.00 1.00 1.00
    enfermedad hemolítica y algunas deficiencias enzimáticas Agua destilada (mL) ---- ---- 0.10
    hereditarias. La bilirrubina indirecta o libre, se encuentra elevada
    Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (20° a
    por causas pre-hepáticas, tales como enfermedades hemolíticas, o
    25°C.) o 6 minutos a 37° C., llevando a cero el instrumento con el
    bien problemas metabólicos intra-hepáticos que involucran el
    blanco reactivo. El color resultante es estable por 30 minutos.
    proceso de conjugación. En neonatos es importante el control de la
    bilirrubinemia, ya que la bilirrubina indirecta o libre es neurotóxica. Δ Abs. = (Abs. Muestra) – (Abs. Blanco)

    FUNDAMENTOS DEL MÉTODO TÉCNICA MUESTRA RECIEN NACIDO


    La mayoría de los métodos utilizados para la determinación
    de bilirrubina utilizan ácido sulfanílico diazotizado, formándose Desconocido Calibrador Blanco reactivo
    azobilirrubina coloreada. En medio acuoso sólo reacciona la Muestra (mL) 0.02 ---- ----
    bilirrubina conjugada o directa; para medir la bilirrubina total
    es necesario la incorporación de un acelerador, inicialmente se Calibrador (mL) ---- 0.02 ----
    utilizó metanol (Malloy- Evelyn), y posteriormente benzoato de Reactivo trabajo (mL) 1.00 1.00 1.00
    sodio (Jendrassic-Grof). El método Mexlab-VALTEK® se basa en Agua destilada (mL) ---- ---- 0.02
    la modificación propuesta por Gerarde, en la cual se utiliza como Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente (20° a
    acelerador DMSO. La azobilirrubina formada es medida 25°C.) o 6 minutos a 37° C., llevando a cero el instrumento con el
    fotométricamente entre 540 y 600 nm, siendo la intensidad del blanco reactivo. El color resultante es estable por 30 minutos.
    color formado directamente proporcional a la cantidad de
    bilirrubina directa o total presente en la muestra. Δ Abs. = (Abs. Muestra) – (Abs. Blanco)

    REACTIVOS CALILBRACIÓN
    Conservados entre 2° y 8°C y protegidos de la luz, estables hasta 1. En la calibración se recomienda utilizar calibrador sérico
    la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Preparación reactivo VALTROL- C (código 8002103), proceder de igual forma que
    de trabajo: Agregar al momento de utilizar, por cada 1 mL de con las muestras.
    reactivo DMSO, 1 gota de reactivo nitrito de sodio (o 0.05 mL.), 2. Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se
    mezclar. Estable por 24 horas protegido de la luz. evidencie alguno de estos acontecimientos:
    3. El lote de reactivo cambia
    Composición reactivo de trabajo: 4. Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
    5. Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera de
    Ácido sulfanílico 30 mM escala.
    HCl 165 mM
    DMSO 5,000 mM CÁLCULOS
    Nitrito de sodio 0.50 mM Para obtener las concentraciones de bilirrubina total, debe
    realizarse una curva de calibración o bien utilizar un factor a partir
    de un standard o calibrador de concentración conocida, con el cual
    MUESTRA se procede en la forma descrita para las muestras en la técnica de
    Utilizar suero o plasma libre de hemólisis. Realizar el ensayo bilirrubina total. El factor o la curva obtenida con el reactivo para
    dentro de un plazo no mayor a las 2 horas, en caso contrario determinación de bilirrubina total son válidos para la determinación
    refrigerar la muestra entre 2° y 8°C., o bien congelar a -20°C para de bilirrubina directa, se recomienda verificar su validez con cada
    períodos más largos. Mantener protegidas de la luz. nuevo kit de bilirrubina total.
    MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRADOS
    Espectrofotómetro manual o automático o fotocolorímetro de filtros
    con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 560 nm ⋀
    (rango 540 a 600 nm), baño termoregulado, cronómetro, pipetas,
    calibrador y sueros controles. ⋀
    PRESENTACIONES DISPONIBLES
    CONTROL DE CALIDAD
    1. Es conveniente analizar junto con las muestras sueros Contenido:
    controles valorados para Bilirrubina Total por este método. Se 1x100 ml
    recomienda la utilización de los sueros controles VALTROL-N 2x100 ml
    (código 8002101) y VALTROL-P (código 8002104). 2x250 ml
    2. Si los valores obtenidos para los controles se encuentran
    fuera del rango de tolerancia, revisar el instrumento, el
    REFERENCIAS
    reactivo y el calibrador.
    1. Malloy H.T. & Evelyn K.A., J.Biol.Chem.119 (481), 1937.
    3. Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de
    2. Jendrassic L. & Grof P., Biochem Z. 291(81), 1938.
    Calidad y establecer las correcciones necesarias en caso
    3. Walters M. I. & Gerarde H. W., Microchem J.15 (231)1970.
    de que no se cumpla con las tolerancias permitidas para los
    4. Young D.S., Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th
    controles.
    ed. AACC Press, 1995.
    ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
    1. Sueros ictéricos: Debe emplearse la técnica descrita para
    recién nacidos.
    2. Es recomendable el realizar un blanco para cada muestra, en
    tal caso se utiliza solamente reactivo DMSO.
    3. Proteger las muestras de la luz directa.
    4. Consultar en nuestra página WEB la ficha de seguridad de
    este reactivo y observar todas las medidas de precaución
    necesarias para la manipulación y eliminación de residuos.
    5. Para técnica en autoanalizadores se recomienda utilizar kit
    específico.

    ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO

    -Linealidad: hasta 20 mg/dl

    -Límite de detección: 0.03 mg/dl

    -Interferencias: Hemoglobina sobre 1,0gr/dl y la lipemia


    (triglicéridos sobre 500 mg/dl) podrían interferir en la técnica. Otros
    medicamentos y sustancias podrían interferir (4).

    Exactitud: Reactivos Mexlab VALTEK no muestran diferencias


    sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
    comerciales. Los detalles del estudio comparativo están
    disponibles bajo solicitud.

    -Repetitividad Intra serie: n = 20

    Nivel Media (mg/dl) C.V %


    Normal 1.5 0.87%
    Patológico 6.12 1.10%

    -Reproducibilidad Inter serie: n = 20

    Nivel Media (mg/dl) C.V %


    Normal 0.89 1.03%
    Patológico 2.1 1.18%

    Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador


    MINDRAY de la serie BS. Los resultados pueden variar al cambiar
    de instrumento o al realizar el procedimiento manualmente

    -Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud

    RANGOS DE REFERENCIA
    Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia
    en función de la población de pacientes. Los rangos de referencia
    que se enumeran a continuación están tomados de la bibliografía Distribuido por:
    existente. Grupo Industrial Mexlab S.A. de C.V.
    01800-111-4343
    Bilirrubina Total Adulto: hasta 1.2 mg/dl www.grupomexlab.com
    Bilirrubina Total Recién Nacido: hasta 13.3 mg/dl

    Rev. 08-2016

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