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    Micro Cult Ivo

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    PERLA ROSALIA AGUSTIN CORIA
    Este documento describe los pasos para realizar un microcultivo de hongos, incluyendo preparación de muestras, observación macroscópica y microscópica, e identificación de características morfológicas. El objetivo es practicar la técnica de microcultivo para reconocer hongos de importancia médica.

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    ACTIVIDAD PRÁCTICA No.

    MICROCULTIVO

    SABERES PRACTICOS

    1. Realizar adecuadamente la técnica de microcultivo para lograr el


    crecimiento de hongos de importancia médica
    2. Observar en el microcultivo las características morfológicas
    macroscópicas de los hongos de importancia médica
    3. Preparar una muestra para observación microscópica de los hongos y
    observar las características morfológicas de las hifas y estructuras de
    esporulación.

    MATERIALES

    Caja de Petri con agar Sabouraud


    Cubreobjetos
    Tubo con cepa micológica a identificar y/o muestra clínica
    Asa micológica
    Pinzas de disección
    Hojas de bisturí
    Caja de agar Sabouraud
    Agua estéril
    Formol al 10%
    Metanol
    Colorante (azul de lactofenol)

    PROCEDIMIENTO

    A. Análisis macroscópico:

    1. Marque por fuera con un plumón permanente el plato de la caja de Petri


    para dividir en dos secciones. Marque con el plumón dos secciones de
    1cm x 1cm utilizando solo una mitad de la caca de Petri.

    2. Encienda el mechero y cerca de éste abra la caja de Petri

    3. Con su hoja de bisturí estéril proceda a cortar los dos bloques de agar
    Sabourau de 1cm x 1cm que marcó con anticipación y colóquelos uno
    sobre otro en el lado contrario (sin cortes) de la caja de Petri.

    4. Esterilice el asa micológica y espere a que se enfríe, destape el tubo con


    la cepa micológica a identificar o tome la muestra clínica y obtenga una
    asada de la cepa o muestra, cierre el tubo.

    5. Abra su caja de microcultivo e inocule por picadura en los cuatro lados


    del bloque de agar sabouraud

    6. Esterilice el asa micológica en el mechero

    7. Con las pinzas estériles coloque el cubreobjetos sobre el bloque de agar


    y presione con cuidado

    8. Tape la caja de microcultivo e incube a temperatura ambiente por 2


    semanas, obsérvela periódicamente para corroborar el crecimiento
    micológico sobre la superficie de cubreobjetos

    B. Análisis microscópico:

    1. Realice la observación macroscópica del hongo y reporte sus


    resultados

    2. Con las pinzas estériles remueva el cubreobjetos de la caja de


    microcultivo

    3. Realice la tinción del crecimiento micológico adherido a la superficie


    del portaobjetos con azul de lactofenol.

    4. Observe la morfología y estructuras de esporulación del hongo para su


    identificación microscópica en el objetivo seco débil y seco fuerte

    5. Finalmente realice la inactivación del hongo presente en el


    portaobjetos colocándolo en formol al 10% durante 24 horas, y
    disponiendo las cajas de Petri en el lugar indicado para su disposición.
    Lo anterior como una medida de bioseguridad

    RESULTADOS
    1. Describa y dibuje las características morfológicas del micelio presente en
    el microcultivo

    2. En la tinción en fresco, describa y dibuje las características de las hifas


    (tabicadas o cenocíticas)
    3. En la tinción en fresco, describa y dibuje las características de las
    estructuras de esporulación (tipo de conidias, su aspecto y su distribución
    en la hifa)

    CUESTIONARIO

    1. ¿Por qué es importante conocer la técnica para la realización del


    microcultivo?

    2. ¿Cuáles son las formas de reproducción que utilizan los hongos?

    3. ¿Cuáles son algunas formas que pueden adoptar las estructuras de


    esporulación de los hongos de importancia médica?

    UTILIDAD DE LA PRÁCTICA

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