Amibas de vida libre

Naegleria, Acanthamoeba,
Balamuthia y Sappinia
Introducción Las amibas de vida libre (AVL)

protozoos eucariontes aerobios.

amibas anfizoicas = vivir libremente en la naturaleza ó vida parásita

Géneros asociados con enfermedades humanas: Naegleria,

Acanthamoeba, Balamuthia y Sappinia
Introducción Las amibas de vida libre (AVL)

Diseminadas en la naturaleza se encuentran en suelo, agua y aire.

Las infecciones comprometen cerebro, ojos, pulmones y piel.
Bajo número de infecciones, dificultad en su diagnóstico, reto de encontrar tratamientos
antimicrobianos eficaces y la morbilidad, alta mortalidad en infecciones cerebrales

Acanthamoeba y Naegleria, entre otras AVL, pueden actuar como vectores y reservorios de
virus, hongos y bacterias.
Introducción Las amibas de vida libre (AVL)

portadores humanos
Ausencia de importancia
epidemiológica

entre una higiene

deficiente y la
Escasa relación
diseminación de la
infección.
Antecedentes históricos

1841-Dujardin 1899-Schardinger 1912- Alexieff 1959- 1965- Fowler y 1966- Patras y

Culbertson y Carter Andujar-
Las denomina Describió Ameba Define y reúne a col. encontraron que Kenney en 1971
amebas limax, gruberi, Naegleria pequeñas amebas Comprobaron que las estas amebas eran identificaron como
nombre se utilizó gruberi (aspecto de vermes) y amebas que capaces de producir Acanthamoeba
para incluir las las bautiza como contaminaban un cuadro meníngeo
agrupadas tipo cultivos de tejidos, amebas
diversas amebas que Hartmanellas. fulminante, en el
se fueron flagelar por Awerinzer eran capaces de hombre, 4 casos de recolectadas de
descubriendo en 1910 y Rafalko en producir meningitis humana autopsias de
1947 meningoencefalitis en identificadas post
ratones y monos pacientes.
mortem
 Antecedentes históricos

1968- Carter 1970-Carter 2001-2003- 1993-2003 2001-2009 Sappinia Recientemente-

Gelman Muñoz y col pedata Ozkoc S. y col
1era vez aisló una ameba Determinó que Publicó el caso de Dan a conocer la
desde LCR de un paciente correspondía a Naegleria encefalitis amebiana presencia de amebas de causante de encefalitis de Nueva cepa
que padecía de fowleri. causada por Sappinia vida libre en fuentes un individuo joven. El potencialmente
meningoencefalitis diploidea, px 38 años acuáticas de algunas paciente fue tratado con patógena,
biopsia:inflamación zonas del país (Chile) varios fármacos y Paravahlkampfia,
necrosante y hemorrágica sobrevivió posible 1er cepa aislada
con trofozoítos de doble de px con queratitis
núcleo diferente de
Vahlkampfia
El reconocimiento de Sappinia en la etiología de la encefalitis amibiana sugiere que hay otros agentes amibianos de enfermedad que
aún no han sido identificados. Lo anterior puede ser facilitado por el desarrollo de técnicas de identificación modernas como las de
microscopia y biología molecular, entre otras.
Naegleria fowleri
Características generales
• Única especie de género aislada en
casos de meningoencefalitis
amibiana primaria (MEAP) en
humanos.

• Tiene tres estadios en su ciclo de

vida: trofozoíto o forma vegetativa,
flagelado y quiste
Naegleria fowleri
Características generales El trofozoíto
Tamaño
10 - 25 μm

locomoción
• seudópodos tipo lobópodos.

citoplasma granular:
• mitocondrias, lisosomas y vacuolas;

Núcleo:
• parte central con gránulos de cromatina y nucléolo esférico

Reproducción
• fisión nuclear, promitosis
Naegleria fowleri
Características generales y ciclo de vida

• El flagelado tiene forma de pera y es biflagelado, (hasta

10 flagelos); no se alimenta, reversible a trofozoíto.

• Los quistes son esféricos (7 a 15 μm de diámetro) y

poseen una doble pared con uno o dos poros
https://www.youtube.com/wat
ch?v=7OPg-
ksxZ4Y&ab_channel=Kurzgesa
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Video Naegleria fowleri
Acanthamoeba spp.
Características generales

• Más de 24 especies

• Patógenas comunes: son A.

castellanii y A. polyphaga.

• Ciclo de vida dos estadios:

trofozoíto y quiste
Acanthamoeba spp.
Trofozoíto
Tamaño
12 - 56 μm

Movimiento
seudópodos finos (acantópodos)

Citoplasma:
múltiples mitocondrias, lisosomas,
ribosomas y vacuolas
Núcleo
vesicular con nucléolo esférico
localizado centralmente
Reproducción
fisión binaria, por mitosis
Acanthamoeba spp.
Quiste
Tamaño 8 - 29 μm diámetro

Pared doble, celulosa como componente.

Pared ondulada o arrugada

externa o
ectoquiste
Pared estrellada, poligonal, esférica u oval.
interna o
endoquiste
Poros se forman en la unión del ectoquiste y el
endoquiste , cubiertos por un opérculo
Acanthamoeba spp.
Quiste
Se forman como reacción a condiciones
ambientales adversas:

desecación falta de alimento

presencia de Presencia de
agentes químicos agentes físicos
• (desinfectantes y • (calor, congelamiento y
antimicrobianos) radiación ultravioleta).
Acanthamoeba spp.
Ciclo de vida
Ciclo evolutivo y clínico de Acanthamoeba
Balamuthia mandrillaris
Características generales y ciclo de vida
Trofozoíto
• 12 - 60 μm, pueden alcanzar hasta 60 y 120 μm de largo.
• -Forma irregular, forma limax o aspecto de araña (numerosos
seudópodos, sin ramificaciones).
• -uninucleado con un núcleo vesicular; puede tener más de un
nucléolo.
• -En cultivo celular trofozoítos multinucleados.
• -Otros organelos: mitocondria, RER con ribosomas.
• -Reproducción fisión binaria, división del núcleo por mitosis.

Quiste
• mide entre 13 y 30 μm, carece de poros
• triple constitución: fina capa externa irregular o ectoquiste, una capa
interna densa y gruesa o endoquiste y una capa fibrilar amorfa media
llamada mesoquiste.
Sappinia pedata • Originalmente clasificada como Sappinia diploidea, en
2009 fue reclasificada como Sappinia pedata.
Características generales y ciclo de vida

• En el único caso descrito de infección cerebral: manejo

de ganado fue un factor importante en la transmisión
de la amiba
• - el ciclo de vida del parásito tal vez implique un
huésped animal intermediario. Dif a otras AVL
• Su ciclo de vida comprende dos estadios: el trofozoíto y
el quiste
 • trofozoíto mide entre 40 y 60 μm,
Sappinia pedata -seudópodos son indistintos, presenta una película que se ondula
cuando la amiba se mueve.
Características generales y ciclo de vida - Característica distintiva: presencia de dos núcleos colocados muy
juntos uno respecto del otro.
- Citoplasma: mitocondrias con característicos patrones tubulares y
una red parecida al aparato de Golgi.
- se dividen por fisión binaria y la división del núcleo se realiza por
mitosis.

• Los quistes miden de 13 a 37 μm y se observan dos núcleos

- pueden sobrevivir a los jugos gástricos durante su paso por el
estómago, emulsificantes propiedades de la bilis del hígado,
presencia en las heces no es indicativa de infección.
- Una vez en las heces que tienen abundancia de bacterias las amibas
pueden exquistar. Debido a su constante presencia en las heces se le
ha caracterizado como coprozoica.
patologías causadas por las amibas de
Características comparativas de las
Abreviaturas: H&E,
hematoxilina y eosina;
IFA, anticuerpos
inmunofluorescentes; IIF,
inmunofluorescencia
indirecta; PHMB,
polihexametilén
biguanida.
vida libre.
Naegleria fowleri
Características generales
• Cuerpo flexible, emisión de seudópodos como bombeos
eruptivos monopodiales

• no mayor de 30 µm.

• género Naegleria se puede comparar con Vahlkampfias,

las que habitan en aguas temperadas, son patógenas
facultativas → (MEAP) en los humanos.

• Suelen ingresar como flagelados a través de las fosas

nasales.
Identificación Naegleria
• Procedimiento complejo, no pueden ser obtenidos por microscopia sólo de luz, según lo indicado por Martínez en
1985.29

• Se estudiarán varios parámetros como:

morfología de tolerancia a la conducta patrones

quistes temperatura inmunológica enzimáticos

capacidad
entre otros.
agresora
Naegleria fowleri

• Temp normal de crecimiento 37°C

• Se desarrolla sin problemas a temperaturas más altas,

cercana a 46°C → microorganismos termófilos.

• Sus movimientos son generalmente unidireccionales

• Es posible que las tres fases de N. fowleri lleguen o

invadan la mucosa nasal, nunca se han aislado formas
flagelares ni quistes en líquido cefalorraquídeo ni en
tejidos, solamente formas trofozoíticas ameboideas.

• Al llegar a la zona nasal quistes y flagelares → trofozoítos

Naegleria fowleri

• Puede crecer en ambientes con:

• rangos amplios de pH
• agua dulce a 10°C
• suelo a 8°C.

-mayor parte de las cepas: acuíferos con temperaturas

elevadas, natural o artificialmente en el laboratorio en
rangos de 40 a 45°C.
Como la mayoría de los protozoos, en condiciones
desfavorables los trofozoítos se enquistan. Los quistes
miden entre
Naegleria fowleri Epidemiología
Generalmente la MEAP
Lugares de recreación en que las piscinas están
contaminadas con estos agentes.
-En piscinas calentadas de modo artificial.
-También se han registrado casos relacionados con el
lavado de la cara con agua contaminada y la inhalación de
polvo
-N. fowleri se ha aislado de una variedad de fuentes de
agua:
suministro de agua doméstica
recreativas e instalaciones de aguas térmicas
aguas contaminadas de fuentes industriales.

Factores que favorecen la presencia de N. Fowleri: la temperatura, pH, coliformes, y la cantidad de materia
orgánica presente
Naegleria fowleri

• Las amebas del ambiente pueden comportarse como

transmisores de otros microorganismos.

• Legionella pneumophila se desarrolla fácilmente en la

ameba N. fowleri y este protozoario puede proporcionar
un entorno propicio intracelular para la multiplicación
de L. pneumophila.

• Generalmente Naegleria spp destruye a L. pneumophila

dentro de las primeras 24 horas por fagocitosis
Naegleria fowleri Patogenia y Patología

• El daño más significativo meningoencefalitis amebiana

primaria (MEAP).

Tipo de encefalitis aguda fulminante que afecta también a las

meninges y lleva a la muerte en pocos días.
En esta patología, los hemisferios cerebrales y el cerebelo
aparecen edematosos y muy congestionados; el bulbo olfatorio
y la corteza orbitofrontal presentan necrosis y hemorragia.
-La mayoría de los casos de MAP se presenta en niños y/o
jóvenes aparentemente sanos, con antecedentes anamnésicos
de haber practicado recientemente natación o juegos en fuentes
de agua dulce.
Naegleria fowleri
aspiración de
aguas
contaminadas

techo de la
cavidad nasal

mucosa
olfatoria

nervio olfatorio

atraviesan la
lámina
cribiforme

avanzan hasta
el espacio
subaracnoideo.
Naegleria fowleri Patogenia y Patología
En el cerebro
causan histólisis por producción de hidrolasas lisosomales y
fosfolipasas que degradan la mielina, ocasionan necrosis
hemorrágica y edema, que son las características
histopatológicas de la MEAP, provocando daños graves e
irreversibles.
sitios infectados más cercanos al SNC:
• mucosa y los nervios olfatorios.

Otras zonas comprometidas

• Base y el tronco del encéfalo, cerebelo.

Las lesiones meníngeas permiten distinguir entre la MAP y las encefalopatías producidas por otros tipos de
amebas, como Acanthamoeba y Balamuthia, que provocan lesiones cerebrales granulomatosas.
Naegleria fowleri Patogenia y Patología

• Meningoencefalitis con consecuencia fatal

• Curso clínico rápido (Periodo de incubación de 3 a 5
días), muerte en 7 a 10 días
• Enfermedad caracterizada por intenso dolor frontal de
la cabeza, fiebre, nausea, vómito, rigidez de cuello
• Seguido por coma y por último la muerte (por falla
cardiorrespiratoria por edema cerebral grave)
Naegleria fowleri Diagnóstico

• Diagnostico por LCR

• Problemas para identificar esta ameba en el LCR por
confusión con macrófagos o células epiteliales
• Microscopia de luz en preparaciones in vivo o con tinciones
• Wright (Citoplasma azul claro núcleo rosa), Giemsa,
Hematoxilina y eosina.
• El diagnostico se confirma con el aislamiento de la ameba
(cultivo) (por la meningitis bacteriana)
• Cultivos bacterianos negativos
Naegleria fowleri Diagnóstico
 Tratamiento
Meningoencefalitis Amebiana primaria

Anfotericina B es el único fármaco que actúa en contra de N. fowleri y solo es

efectivo cuando se administra al inicio de la infección
 Mecanismo de Infección
Encefalitis Amebiana Granulomatosa
(EAG)
• Acantameba spp y Balamuthia mandrilaris
• Atacan a inmunosuprimidos, pero no es
regla
• Estas amebas tienen la capacidad de
producir neumonitis y ulceraciones de la
piel
• Lo que sugiere que estas amebas tienen
como puerta de entrada el torrente
sanguíneo, pero no se descarta el tejido
neuroepitelial olfatorio.
• Dispersion por via hematógena hasta SNC
• Cerebro, cerebelo y base del cerebro partes
mas afectadas
 Mecanismo de Infección
Encefalitis Amebiana Granulomatosa
• El periodo de incubación no se conoce
• Hidrolasas lisosomales y fosfolipasas que degradan los fosfolipidos de
las vainas de mielina
• Además liberan enzimas (aminopeptidasas, hidrolasas, esterasas,
fosfatasas acidas y alcalinas) que de forma directa o indirecta dañan el
sistema nervioso central
 Manifestaciones Clínicas
Encefalitis Amebiana

• Enfermedad prolongada se
desconoce el periodo de
incubacion
• Dolor de cabeza, cambios de
personalidad, ataques, nivel
deprimido de la conciencia y
coma.
 Diagnóstico
Encefalitis Amebiana
• Diagnostico clínico difícil normalmente post mortem
• Tuberculosis cerebral, encefalitis viral, cáncer y absceso cerebral, pero en base a los antecedentes del paciente cuadro
respiratorio bajo, no respuesta al tratamiento y presencia de nódulos cutáneos
• El aislamiento de quistes y trofozoitos de las lesiones y del LCR confirma el diagnostico
 Tratamiento
Encefalitis Amebiana

• Tratamiento no eficaz
• Ketoconazol y Clotrimazol en estudios in vitro
• Cierta efectividad itraconazol, miconazol, sulfametacina, pentamidina gluconato de
clorhexidina
 Queratitis Amebiana
Especies de la ameba Acanthamoeba
Inflamación crónica de la córnea
Esta especie entra al estroma de la cornea por un rompimiento del epitelio consecutivo a un
traumatismo menor o abrasión del epitelio protector
Lentes de contacto ayudan a que esta ameba penetre el epitelio
También las infecciones ayudan a la penetración de la ameba

Manifestaciones Clínicas
• Intenso dolor ocular, fotofobia, visión borrosa y congestión en la conjuntiva.

Factores de riesgo
• Uso de lentes de contacto suaves
• Empleo de soluciones salinas caseras
• Exposición a agua contaminada
• Traumatismos menores en ojo
 Diagnóstico
Queratitis Amebiana
• Frecuentemente se confunde con queratitis por hongos o
herpes pero los análisis son negativos para estos MO
• Histopatológicamente queratitis necrosante aguda o
subaguda, con inflamación granulomatosa del tejido corneal
y congestión conjuntival.
• Trofozoítos y quistes en estroma de la cornea

• Diagnostico rápido por raspado de la cornea con tinción y observación con micro de luz.
• Anticuerpos fluorescentes
• Cultivo de la ameba
• PCR
• Técnicas inmunológicas basadas en la especificidad del Ag-Ac
 Tratamiento
Queratitis Amebiana

Tratamiento no sencillo debido a la

resistencia del parásito
Ketoconazol, miconazol, isotionato de
propimidina y biguanida de
poliexametileno
 Prevención
• MEAP
• Diseminar información sobre este MO
• Cloración de agua de albercas (0.5 a 1mg/L) y la temperatura del agua de 26ºC
• Limpieza adecuada de abastecimientos públicos de agua
• EAG
• Esta enfermedad es oportunista y es mas difícil prevenirla por lo que lo único que se
recomiendo es evitar factores de riesgo sobre todo en personas inmunosuprimidas.
• Se recomienda usar un clip nasal al nadar
• QA
• Tener cuidado con las recomendaciones del fabricante de los lentes de contacto y no
utilizarlos durante la practica de deportes acuáticos, usar goggles.
 Prevención
• >30 cepas detectables por
amplificación del ADN por PCR y
polimorfismo del tamaño del
fragmento.
• Cepas mexicanas similares a las
asiáticas, USA y Europa.
• Prevención: evitar baños nasales
religiosos, evitar clavados en lagos
contaminados y nadar con la cabeza
fuera del agua
• “Ingestión del trofozoíto no causa
enfermedad”
Epidemiología de las AVL
Hasta la fecha se tiene conocimiento a nivel mundial

de:

• Aprox 300 casos de MEAP

• 200 de EAG por Acanthamoeba spp.

• 150 de EAG por B. mandrillaris

• 1 por S. pedata

• 5 000 de QA en Estados Unidos y alrededor de 10

000 en todo el mundo.

Epidemiología de las AVL

Con toda seguridad estas cifras están

subestimadas

En muchos países la realización de necropsias es

mínima o no se practica y la QA por lo general no

se reporta.
 Epidemiología de las AVL en México

Se tiene un registro aprox de 33 casos de MEAP.

• 23 en Mexicali
• Resto : Sonora, Monterrey, Huetamo (Michoacán) y Tamaulipas.

12 casos de EAG por B. mandrillaris

• 4 en DF, 4 en Jalisco, 2 en Guanajuato,1 Estado de México y 1 en
Puebla.
• Existe registro de un caso de EAG por Acanthamoeba
spp. que sobrevivió
• Otro de una infección cerebral mixta en el que se identificaron
Acanthamoeba spp. y Aspergillus spp.
 Epidemiología de las AVL en México
• 5 de QA.
• Se han detectado Naegleria, Acanthamoeba y
Hartmannella en pacientes asintomáticos;
• N. lovaniensis en lactante y en individuos con
quemaduras infectadas y rinitis

• Hartmannella se observó en un caso de

encefalitis, no se pudo comprobar su función
como agente causal de la enfermedad

• Amibas de la familia Leptomyxidae asociadas a

un caso de anemia aplásica grave.
patologías causadas por las amibas de
Características comparativas de las
Abreviaturas: H&E,
hematoxilina y eosina;
IFA, anticuerpos
inmunofluorescentes; IIF,
inmunofluorescencia
indirecta; PHMB,
polihexametilén
biguanida.
vida libre.