GENÉTICA MOLECULAR

La genética molecular es el campo de la genética que estudia la estructura y

la función de los genes a nivel molecular

1. DOGMA CENTRAL
recordatorio: replicación para mitosis y meiosis
transcripción y traducción: expresión génica

2. REPLICACIÓN
El proceso de replicación de ADN es el mecanismo que permite al ADN duplicarse (es
decir, sintetizar una copia idéntica). De esta manera de una molécula de ADN única, se
obtienen dos o más "réplicas"
de una se obtienen dos, no más
2.1 CARACTERÍSTICAS
• Empieza en un punto de origen
• Requiere un cebador o primer de ARN para empezar
• Semiconservativa: cada molécula de ADN resultante de la replicacion tiene una
cadena vieja y otra de nueva síntesis
• Adición de nucleótidos en sentido 5'-->3'
• Los nucleótidos son inicialmente dNTP (desoxirribonucleótido-3-fosfato) por qué?
• Bidireccional: la replicacion ocurre en las dos direcciones: las dos cadenas que
forman la molécula de ADN son antiparalelas y ambas se tienen que replicar
• Semidiscontinua: hebra conductora y rezagada = continua y discontinua
• Participan varias enzimas
• Diferente en eucariotas y procariotas
2.2 ETAPAS

INICIACIÓN

1. Reconocimiento de la secuencia origen

2. Helicasa rompe puentes de hidrógeno entre las dos cadenas
3. Proteínas SSB impiden que las cadenas se vuelvan a unir
4. Topoisomerasas I y || (girasa) desenrollan y liberan tensiones, para ello pueden hacer
cortes que luego se reparan con ligasas

COMPLEJO DE RECONOCIMIENTO DE ORIGEN DE LA REPLICACIÓN no es superimportante

• Reconoce una secuencia concreta de ADN llamada ARS y se une a ella
• Se trata de un complejo de 6 enzimas que trabajan juntas
ELONGACIÓN
¿qué es el cebador?
1. La primasa (es una ARN Pol) sintetiza el cebador a partir de la cadena molde complementaria
2. ADN Pol Ill añade dNTPs libres que se unirán al OH del extremo 3' anterior ¿cómo?
3. ADN Pol I escinde (quita) los cebadores con su acción exonucleasa y los sustituye
polimerizando ADN
4. Las ligasas reparan los fragmentos cortados entre el cebador y el ADN, por lo tanto une los
fragmentos de Okazaki y además
recordar en elongación que una parte es continua y otra discontinua
TERMINACIÓN con fragmentos de okazaki y numerosos cebadores

• Las burbujas de replicación se encuentran y las dos doblescadenas de ADN quedan

separadas. en procariotas
• En eucariotas hay varias burbujas que se van a encontrar y las últimas terminan en los
telómeros, ya que es ADN lineal. la replicación de una burbuja es un replicón
Se acortan los telómeros por la eliminación de los cebadores porque es adn lineal
2.3. TELOMERASA

La telomerasa es una enzima formada por un complejo proteína-ácido ribonucleico con

actividad polimerasa que está presente en células de la línea germinal, en tejidos fetales y
en ciertas células madres poco diferenciadas, que replica el ADN en los extremos de los
cromosomas eucarióticos y permite el alargamiento de los telómeros. y por lo tanto impidiendo...

También se encuentra presente en organismos eucariotas unicelulares. La telomerasa es

reprimida en las células somáticas maduras después del nacimiento, produciéndose un
acortamiento del telómero después de cada división celular

2.4. DIFERENCIA EN LA REPLICACIÓN ENTRE PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS

PROCARIOTAS EUCARIOTAS

No es necesario ese desempaquetamiento El proceso previo al inicio de la replicación

tan complejo antes de la replicación al requiere el desempaquetamiento de
tener ADN desnudo y menos replegado estructuras espaciales más complejas
porque tiene histonas y está más enrollado
Se han identificado 3 no
ADN polimerasas Más tipos de polimerasas diferentes
creo que esta sea una buena característica para un examen

Existen numerosos puntos de inicio

de la replicación, formándose
Un punto de inicio de la replicación u burbujas y horquillas
muchas horquillas de replicación
origen de replicación y dos horquillas de para acelerar el proceso, al poseer
replicación mayor cantidad de ADN
, o lo que es lo mismo , una burbuja
Los fragmentos de Okazaki son
Los fragmentos de Okazaki poseen entre 1 menores en extensión, de unos 100
000 y 2 000 nucleótidos
no muy relevante a 200 nucleótidos
Al ser el ADN circular no se produce se acortan los telómeros
Al ser el ADN lineal se acorta el
acortamiento porque no existen extremos o extremo de las hebras en cada ciclo
telómeros de replicación al eliminarse el ARN
cebador terminal y actúa el enzima
telomerasa que fabrica los
fragmentos que faltan
2.5. ENZIMAS QUE INTERVIENEN

• PRIMASAS(ARN polimerasas dependientes de ADN): Sintetizan el ARN cebador usando

como molde una cadena de ADN.

• HELICASAS: Rompen los puentes de hidrógeno entre las dos cadenas complementarias
y las separan para que sirvan de molde. Es decir, desenrollan la hélice de ADN.
y separan
• TOPOISOMERASAS: Eliminan las tensiones generadas en la doble hélice por el
desenrollamiento producido por la helicasa, cortando una cadena del ADN (las
topoisomerasas I) o las dos cadenas (las topoisomerasas II). Una vez eliminadas las
más general
tensiones, las unen de nuevo. A la topoisomerasa II se le denomina girasa.
no es necesario
distinguir entre las dos
• PROTEÍNAS SSB: Se unen a las cadenas sencillas en sitios en los que se ha
desenrollado la hélice molde, pero que todavía no ha sido duplicada, estabilizándola
mientras dura la replicación. Impiden que se enrede el ADN, dejando el molde listo para
ser copiado.

• NUCLEASAS: Rompen los enlaces fosfodiéster entre nucleótidos. Van separando

nucleótidos de uno en uno, empezando por el extremo hidroxilo 3' libre (exonucleasa
3'-5) • por el extremo 5' (exonucleasa 5'→3). Entre sus funciones, destacan: rompen una
de las hélices y dan lugar a un origen de replicación (crean un ADN primer), escinden los
ARN cebadores y reparan lesiones del ADN. puedes simplificar este párrafo y poner sus
funciones por puntos
• LIGASAS: Unen los fragmentos de ADN adyacentes mediante enlaces fosfodiéster. Así,
por ejemplo, sellan el hueco existente entre los fragmentos de Okazaki.

• ADN POLIMERASAS: Catalizan la formación de enlaces fosfodiéster entre nucleótidos.

es decir, añaden nuevos desoxirribonucleótidos
para hacer la elongación
2. TRANSCRIPCIÓN

Tanto la transcripción como la traducción son responsables de la expresión génica

ojo, la transcripción también tiene otra
• Transcripción: Paso del gen de ADN a un ARNm función: crear ARNt y ARNr

• Traducción: Paso del ARNm maduro a uno o varios polipépetidos en los ribosomas

Sobre estos dos procesos se produce regulación mediante factores de transcripción,

secuencias reguladoras, factores de traducción.
virus
Un gen es un fragmento de ADN o ARN que determina un carácter, una enzima de una
ruta metabólica, un polipéptido o varios (Mediante un ARNm policistrónico (procariotas) o
mediante la eliminación de intrones del ARNm (eucariotas)) simplifica mi definición, busca otra
Varios genes determinan una proteína: por ejemplo en el caso de una proteína
oligomérica o de estructura cuaternaria integrada por varios polipéptidos
EN REPLICACIÓN
2.1. CARACTERÍSTICAS La adn polimerasa I tiene
acción polimerasa y
• Primer paso de la expresión génica hexonucleasa por eso es capaz
• Está modulada o controlada de cortar o escindir el
• Diferente en procariotas y eucariotas fragmento cebador de ARN con
• ADN → ARN su actividad hexonucleasa y
• ARN Polimerasa (no es necesario cebador): holoenzima sustituirlo por nuevo ADN por
su actividad polimerasa
2.2. ETAPAS
INICIACIÓN

• Reconocimiento de secuencia promotora

"aguas arriba" del sitio de inicio ----------
• Desprendimiento del factor sigma
• Formación de una burbuja de transcripción

ELONGACIÓN

Adición de ribonucleotidos de 5’a 3’ a partir

de la cadena molde o codificadora a partir de
la lectura de la ARN polimerasa

La cadena molde------determina el
ARNm producto de la transcripción
complementario

TERMINACIÓN

La ARN polimerasa reconoce en el ADN señales de terminación que indican el final de

la transcripción. Se cierra la burbuja de transcripción formada en el ADN y se separa la
ARN polimerasa del ARN mensajero transcrito. puede ser dependiente de la prot. rho o con un
bucle de autoapareamiento de C-Gs
Las procariotas, al no tener núcleo definido, realizan transcripción y traducción de
manera simultánea (los ribosomas se unen al ARN mensajero cuando aún se está
transcribiendo).

Puede ser independiente de RHO, que es una secuencia que sirve de señal para
terminar (produciendo un lazo de horquilla y un serie de 6 a 8 uracilos). Por otro lado,
puede ser dependiente de RHO, cua do una proteína se une al complejo ARN
polimerasa y se mueve hacia el extremo 3’ desplazando la hebra molde y debilitará la
interacción haciendo que se disocien (incluyendo la polimerasa) ok
2.3. CONCEPTO DE ARN POLICISTRÓNICO

• Es propio de procariotas
• Varios genes —>1 ARNm —-> varios polipeptidos
• No necesita ser procesado como en eucariotas eso no tiene que ver con que sea policistrónico
• Cada gen da lugar a una proteína en cambio en eucariotas el ARNm monocistrónico
da lugar a una sola proteína aunque el splicing alternativo puede hacer que haya varias
versiones de proteínas
 2.4. TRANSCRIPCIÓN EUCARIOTAS características

• ADN unido a histonas

La transcripción se realiza en el núcleo y una vez separado el ARN, se modifica el

extremo 3' mediante poliadenilación (incorporación de una cadena de nucleótidos de
adenina, llamada cola poli-A) que estabiliza el ARN y regulará la traducción fuera del
núcleo. esto ya sería parte de la maduración lo vas a explicar más abajo
no suele salir
Este ARN sintetizado, llamado ARN heterogéneo nuclear (ARNhn) se exportará al
citoplasma (a través de los poros nucleares) para iniciar la traducción pero antes de ello
requiere una modificación conocida como maduración: los dos puntos a qué vienen?

• Más factores de transcripción (proteínas reguladoras)

• ARN Pol más complejas, sintetizan distintos ARN:
- ARN Pol I: ARN ribosómico
- ARN Pol II: ARN mensajero
- ARN Pol III: ARN transferente (y ribosomico)

• En eucariotas el ARN se procesa después de transcrito, por eso antes de ser

procesado se llama precursor y después maduro.
• La cadena molde y codificante pueden variar para diferentes genes (arriba o abajo)

2.4.1. MADURACIÓN DE LOS ARNm

• CAPERUZA DE METILGUANOSINA EN 5'

- Evita la degradación
- Favorece el reconocimiento por los ribosomas

• COLA DE POLI-A EN 3'

- Unos doscientos nucleótidos de adenina

- Ayudan al ARNm a viajar al citoplasma
- Protegen frente a la degradación por endonucleasas ("fecha de caducidad")

• ELIMINACIÓN DE INTRONES → SPLICING

no codificantes
• Se eliminan unas secuencias del precursor que no servirán (intrones) dejando las que sí que
servirán para traducir (exones)
codificantes
• El proceso de corte, eliminación y empalme se denomina splicing.
• Un mismo precursor puede ser procesado de distintas formas, eliminando unos intrones u
otros → maduración alternativa
• La maduración o eliminación de intrones alternativa es lo que permite en eucariotas que 1
solo gen monocistronico pueda dar lugar a distintas proteínas
 2.5. DIFERENCIACIÓN CELULAR

Cada célula tiene los mismos genes, pero expresan unos genes u otros
dependiendo de su función, por los tipos celulares (tejidos).
Las hormonas activan factores, las hay proteicas y lipídicas esto se verá al final
2.5.1. FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN

Proteínas que ayudan a "encender" o "apagar" la transcripción de ciertos genes.

aguas arriba
La actividad de los promotores puede modificarse por la presencia de otras secuencias, que
suelen estar cerca de las promotoras y pueden ser estimuladoras (aumentan la tasa de
transcripción) o atenuadoras (disminuyen la tasa de transcripción). Dichas secuencias se
activan o reprimen por factores de transcripción.
activan una secuencia reguladora
• Activadores: promueven la transcripción de un gen
• Represores: disminuyen la transcripción de un gen
inhiben una secucencia reguladora
Los factores de transcripción permiten que las células combinen diferentes fuentes de
información para “decidir" si expresan un gen, según las necesidades.

TIPOS

• BASALES/GENERALES:Son los imprescindibles para que se inicie y se pueda dar la

transcripción. Permiten que funcione la ARNpol
• FACTORES NO INDUCIBLES:Permiten y potencian la transcripción de genes que
siempre deben expresarse (constitutivos) porque tienen funciones básicas.
• FACTORES INDUCIBLES: Son los que controlan la transcripción de genes específicos
según convenga.

2.5.2. SECUENCIA DE ADN REGULADORA

Ciertas secuencias del ADN están relacionadas con que

se de o no la transcripción. Están aguas arriba
(upstream) del inicio.
aquí hay repetición respecto a lo de arriba
• PROMOTOR: marca inicio de la transcripción
• INTENSIFICADORAS: potencian la transcripción
• SILENCIADORAS: inhiben la transcripción

¡Todas ellas estimuladas por factores de transcripción!

reguladas

2.6. PROCESAMIENTO/ MADURACIÓN DE

ARN (DIFERENCIAS) este apartado iría en maduración
(es una curiosidad)
• PROCARIOTAS: únicamente en ARNr y
ARNt (se eliminan algunas secuencias)
• EUCARIOTAS: se da en todos los ARN
(Nos centramos en la maduración de
ARNm)
2.7. OPERONES (procariotas)

Una secuencia de genes muy cercanos, trabajan u "operan juntos"

para transcribir un único ARNm (que si es policistrónico daría lugar a
varios polipéptidos)

2.8. DIFERENCIAS TRANSCRIPCIÓN

PROCARIOTAS EUCARIOTAS

El proceso es más simple El proceso es más complejo

El ARN transcrito primario es funcional (no El ARN transcrito primario sufre en el

precisa maduración postranscripcional) núcleo el proceso de maduración o
procesamiento postranscripcional

Los ARNm se empiezan a traducir según Los ARNm deben ser transportados al
van transcribiendo citoplasma para ser traducidos.
Intervienen 3 tipos de RNApol (I, Il y III)

Interviene un solo tipo de RNApol. El RNAm es monocistrónico (codifica

El RNAm es policistrónico (codifica para para una sóla cadena polipeptídica)
varias cadenas polipeptídicas)