Metabolismo Del Adn

METABOLISMO DEL ADN
Dogma central de la
Biologa Molecular
ADN
Polip
Traduccin
Transcripcin
ARNm
ADN
ARNm
Polipptido
Regulacin
Replicacin
Retrotranscripcin
Estructura del ADN
ADN estructura
Estructura: sentido y
antisentido
Estructura de los genes

Tamao:
500 pb gen protamina
3000 - 10000
3 000 000 pb gen distrofina
El gen se lee de 5 a 3
Organizacin del genoma y nmero de

genes
No codificante 90%
Genes Codificante 10%
Exones
Intrones(80-90% del gen)
Secuencias no codificantes
Repetitivas en
tandem(centromeros,telomeros,ribosomales)
Dispersas
Alu I (AGCT)
Microsatelites (CAG CAG CAG CAG CGA)
Jks
Asociacion
Cancer
Medicina forense
Paternidad
at
at
at
at
at
at
at
at
a
t
a
t
a
t
a
t
a
t
a
t
a
t
a
t
Microsatelites
(MS) Regiones altamente repetitivas del ADN
ctg
ctc
ccc
tgt
ggt
tct
ctc
tct
ct
la longitud de los MS es muy

variable de persona a persona.
Cada individuo tiene en todas
sus clulas MS de una longitud
determinada.
Disribucin de los genes
Expresion genica.....22%
Vias metaboicas......17%
Division celular........ 12%
Defensa...................12%
Sealizacion............12%
Estructurales.............8%
Otros........................17%
Genoma e informacin
La secuencia del genoma humano(32000 millones de bases) ocuparia 200

volumenes de 1000 paginas cada uno
Genoma nuclear y genoma

mitocondrial
Genoma humano esta compuesto
por 23 pares de cromosomas que
se localizan en el ncleo y una
pequea molcula de ADN circular
contenido en la mitocondria
Replicacin del ADN
Ciclo celular y ADN
MODELS OF DNA REPLICATION

(a) Hypothesis 1:
(b) Hypothesis 2:
(c) Hypothesis 3:
Semi-conservative
replication
Conservative replication
Dispersive replication
Intermediate molecule
DNA marcado con 15N y 14N separado

por un gradiente de densidad
(a)
Meselson and Stahl

Semi-conservative replication of DNA
Isotopes of nitrogen (non-radioactive) were used in this

experiment
Generations
0
HH
Equilibrium
Density Gradient
Centrifugation
0.3
HH
Detection of
semiconservativ
e replication in
E. coli by
density-gradient
centrifugation.
The position of a
band of DNA
depends on its
content of 14N
amd 15N. After
1.0 generation,
all the DNA
molecules are
hybrids
containing equal
amounts of 14N
and 15N
0.7
1.0
HL
1.1
1.5
1.9
HL
LL + HL
2.5
3.0
4.1
0 and 1.0
mixed
0 and 4.1
mixed
HL
LL
LL
LH
Existe un sitio en el genoma

bacteriano donde comienza la
replicacin?
Existe un nico origen de

replicacin en el genoma
bacteriano?
Es la replicacin bidireccional a partir

del origen?
Plsmido digerido en proceso de replicacin
Caractersticas de la
Replicacin
Semiconservativa
Origen nico de replicacin por
replicn
Origen: regin definida =
replicador
Bidireccional
En que direccin ocurre la

replicacin sobre cada una de las
cadenas de DNA?
Modelos propuestos
Problema de la polaridad de las DNA

polimerasas
Hiptesis de R. Okazaki
La sntesis de DNA es discontinua
Deben formarse segmentos de tamao
pequeo que pueden ser aislados
Debe existir una enzima (ligasa) que
ligue esos fragmentos pequeos
REPLICACION DEL ADN
Protenas Requeridas para la REPLICACIN del ADN

Protena
Funcin
ADN
que corrige todos los errores cometidos en la
polimerasa replicacin o duplicacin.
III
Topoisome- Separa la alfa hlice de ADN y relaja la energa de
rasa II (ADN separacin
girasa)
De unin de Mantiene separada la doble cadena de ADN

ADN
unindose a las cadenas sencillas
Helicasa
Primasa
Separa la doble cadena de ADN con gasto de ATP.

Su accin en la replicacin produce retorcimientos
que deben ser eliminados por ez. Topoisomerasas
Es tipo ARN polimerasa que sintetiza cortos
fragmentos de ARN para la sntesis de ADN
Protenas Requeridas para la REPLICACIN del ADN

Protena
Funcin
SSB
se une al ADN de hlice sencilla y lo estabiliza
retrasando la regeneracin de la doble hlice.
Endonucleasas que cortan el segmento errneo
ADN ligasa
ADN
polimerasa II
ADN poli I
Girasas
forma enlaces covalentes entre nucletidos del

ADN ligando o uniendo extremos corregidos
corrige daos causados por agentes fsicos
rellenan correctamente el espacio
elimina los sper enrollamientos positivos que se
generan por delante de la horquilla de
replicacin.
El proceso de la replicacin
Iniciacin. Involucra el
reconocimiento de la posicin en
dnde empieza la replicacin de una
molcula de DNA.
Elongacin. Eventos de la horquilla
de replicacin en dnde es
sintetizada una hebra
complementaria.
Terminacin. Poco entendia
Inicio de la replicacin en E.
coli
El origen de replicacin de E. coli se
conoce como oriC.
Presenta 245 pb de DNA.
Contiene dos motivos cortos
repetidos, uno de nueve nucletidos
(nonmero), cinco copias y otro de
13 nucletidos (tridecmero) 3
copias.
INICIACIN.
Para
que
pueda
formarse
la
horquilla
de
replicacin es necesario que las dos cadenas se

separen para sintetizar el cebador y el DNA de la
cadena de nueva sntesis.
Para ello el ADN debe desenrollarse y el punto de

partida viene determinado por una secuencia
especfica de nucletidos conocida como origen
de replicacin en la que hay gran cantidad de T y
A.
Esta secuencia es reconocida por protenas

iniciadoras que controlan este proceso y
enzimas conocidas como helicasas, que rompen
los puentes de hidrgeno de forma que una vez
unidas las protenas iniciadoras al DNA
provocan el desenrollamiento de estas regiones.
Para iniciar la replicacin se requieren las

helicasas y es as como tas contribuyen a la
formacin del origen de replicacin.
Una vez abierta la cadena de DNA se unen

otras protenas y enzimas adicionales:
Protenas SSB: encargadas de la estabilizacin

del ADN monocatenario, impiden que el ADN
se renaturalice o forme de nuevo la doble
hlice, de manera que pueda servir de molde.
Las topoisomerasas evitan que se retuerzan y

formen superenrrollamientos cortando una o
ambas cadenas de DNA reponindolos.
ELONGACIN.
En el siguiente paso, la holoenzima DNA Pol

III cataliza la sntesis de las nuevas cadenas
aadiendo nucletidos sobre el molde.
La DNA polimerasa sintetiza las nuevas
cadenas, complementarias a cada una de
las cadenas primitivas.
Esta sntesis se da bidireccionalmente desde
cada origen, con dos horquillas de
replicacin que avanzan en sentido opuesto.
Se sintetiza el DNA en sentido 5 3 partiendo

de un ARN cebador molcula formada por
nucletidos de ARN catalizados por ARN
primasas que contiene un grupo 3'hidroxilo
libre que forma pares de bases con una hebra
molde complementaria y acta como punto de
inicio para la adicin de nucletidos con el fin
de copiar la hebra molde.
Replicacin del ADN
Sntesis del ADN
Inicio de la sntesis de DNA con un cebador

.
TERMINACIN.
o Cuando una DNA polimerasa hace

contacto con el extremo de otro
fragmento de Okazaki contiguo , el
ARN cebador de este es eliminado y
otra enzima, la DNA ligasa conecta
los dos fragmentos de Okazaki de
DNA recin sintetizado.
o Una vez que se han juntado todos
se completa la doble hlice de ADN.
Sntesis de cebadores, unin de fragmentos

de Okazaki y eliminacin de los cebadores.
FIN DE LA REPLICACIN.
La Replicacin termina cuando la secuencia
de bases nitrogenadas corresponden a un

triplete AUG que indica una pausa en la
replicacin y hasta ese punto se codifica la
protena, para dar paso a la traduccin.
RESUMEN.
La replicacin es el proceso mediante el cual, a partir
de una molcula de DNA progenitora, se sintetiza una
nueva, originndose as dos molculas de DNA hijas,
de secuencia idntica a la del DNA original.
Esta constituida por tres pasos:
Iniciacin:
-DNA doble cadena debe abrirse.
-Ocurre desenrollamiento.
Elongacin:
-Copia simultnea de ambas cadenas.
- Replicacin en direccin 5 3.
Terminacin:
-Se completa la doble hlice de DNA y se da una pausa
en la replicacin.
GRACIAS!!

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Estructura del ADN

Estructura de los genes

Organizacin del genoma y nmero de

la longitud de los MS es muy

Disribucin de los genes

La secuencia del genoma humano(32000 millones de bases) ocuparia 200

Genoma nuclear y genoma

Replicacin del ADN

Ciclo celular y ADN

MODELS OF DNA REPLICATION

DNA marcado con 15N y 14N separado

Meselson and Stahl

Isotopes of nitrogen (non-radioactive) were used in this

Existe un sitio en el genoma

Existe un nico origen de

Es la replicacin bidireccional a partir

Plsmido digerido en proceso de replicacin

En que direccin ocurre la

Problema de la polaridad de las DNA

REPLICACION DEL ADN

Protenas Requeridas para la REPLICACIN del ADN

De unin de Mantiene separada la doble cadena de ADN

Separa la doble cadena de ADN con gasto de ATP.

Protenas Requeridas para la REPLICACIN del ADN

forma enlaces covalentes entre nucletidos del

replicacin es necesario que las dos cadenas se

Para ello el ADN debe desenrollarse y el punto de

Esta secuencia es reconocida por protenas

Para iniciar la replicacin se requieren las

Una vez abierta la cadena de DNA se unen

Protenas SSB: encargadas de la estabilizacin

Las topoisomerasas evitan que se retuerzan y

En el siguiente paso, la holoenzima DNA Pol

Se sintetiza el DNA en sentido 5 3 partiendo

Replicacin del ADN

Sntesis del ADN

Inicio de la sntesis de DNA con un cebador

o Cuando una DNA polimerasa hace

Sntesis de cebadores, unin de fragmentos

de bases nitrogenadas corresponden a un

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