Práctica 5 - Extracción de Adn

ARANZAZU GIL TORIBIO
1ºLAB CLÍNICO Y BIOMÉDICO
PRÁCTICA 5:
EXTRACCIÓN DEL ADN

OBJETIVO
 Comprender el proceso de extracción de ADN.
 Establecer un protocolo que nos permita obtener ADN mediante elementos cotidianos
entendiendo el porqué de cada uno de los elementos empleados.
MATERIAL
 Muestra a extraer
 Sal de mesa
 Lavavajillas o detergente liquido
 Alcohol 96º
 Agua destilada o mineral
 Vasos de precipitado
 Zumo de piña
 Vaso desechable
FUNDAMENTO TEÓRICO
Los ácidos nucleicos son macromoléculas poliméricas encargadas de almacenar, transmitir y
expresar la información genética de los seres vivos
- El ácido desoxirribonucleico (ADN) que contiene la información genética y hereditaria

de un organismo y se controla su transmisión a la descendencia.
- El ácido ribonucleico (ARN) que se encarga de la expresión del ADN mediante la
síntesis de proteínas.
La estructura del ADN es una larga cadena de monómeros (nucleóticos) con una estructura
secundaria de doble hélice complementaria que contienen la información genética codificada
por la secuencia de sólo 4 bases [A: Adenina, T: Timina, C: Citosina y G: Guanina].
La extracción de ADN se puede realizar a partir de cualquier célula o tejido de un ser vivo. El
ADN está confinado en el interior de las células (núcleo) o en órganos citoplasmáticos como
mitocondrias o cloroplastos protegidos por membranas. Para tener acceso al DNA se debe
vencer las barreras que constituyen las membranas y paredes en su caso.
La extracción de ADN permite exponer esta molécula a diversos reactivos y enzimas para
realizar diferentes técnicas de diagnóstico y la purificación permite eliminar sustancias y
elementos que pueden interferir en los análisis.
PROCEDIMIENTO
• Obtenemos una muestra a partir de la cual poder obtener ADN: enjuagarnos la boca con 1o
mL de agua durante 30-4o segundos y verter el enjuague de nuevo en el vaso.
• Añadimos 1omL de zumo de piña al enjuague y removemos para homogenizar.
• Preparamos las diluciones que emplearemos más adelante en dos vasos de precipitados que
compartiremos con nuestra pareja.
• Disolvemos en un vaso de precipitados 25 ml de agua destilada o mineral junto con 5g de sal y

removemos hasta disolver la sal.
• En otro vaso, mezclaremos 5mL de detergente líquido junto a 15ml de agua

destilada o mineral
• Homogeneizamos bien y mezclamos 7 ml de nuestro enjuague + papaína en un vaso de

precipitado, 7 ml. de solución salina y 5mL de la mezcla de detergente.
• Homogeneizamos bien y pasamos ‚5mL de la mezcla a un tubo de ensayo.
• Añadimos 10 ml de alcohol frio al tubo de ensayo. Es muy IMPORTANTE que vertamos

dicho alcohol lentamente por las paredes del tubo para evitar que se mezcle y conseguir dos
capas bien diferenciadas, ya que será en esta separación entre la capa de mezcla y de alcohol
dónde precipite el ADN.
• Tras dejarlo reposar unos minutos, veremos cómo van apareciendo en esa interfase pequeños
hilos o fibras blanquecinas (nuestro ADN).
Fibras de ADN
• Para poder extraerlo con facilidad, emplearemos palillo fino y lo pasaremos a un tubo
Eppendorf donde lo lavaremos con alcohol.
2
• Visualización de la muestra en microscopio.
CUESTIONES
o ¿Para qué sirve la disolución salina que ponemos en la mezcla?
Es la encargada de neutralizar la carga del ADN, ya que los iones de sodio con carga + son
atraídos por las cargas – del ADN. Lo que permitirá que las moléculas de ADN se unan y
no se repelan entre sí.
o ¿Para qué utilizamos el detergente?
El detergente se utiliza para romper las paredes celulares, las membranas plasmáticas y las
membranas nucleares y asi dejar salir libres las moléculas de ADN.
o ¿Para qué se utiliza el alcohol?
El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua per, cuando se encuentra
en alcohol se desarrolla y precipita en la interfase entre alcohol y agua.
o ¿Para qué se añade el zumo de piña?
Tiene un proceso enzimático y se encarga de romper la proteína, ayudando asi la limpieza

del ADN.
o ¿Qué otros componentes deberían llevar nuestra solución de lisis si queremos

asegurarnos de que nuestra muestra de ADN no está deteriorada?
3
Agentes caotrópicos, solución eficaz para inactivar las nucleasas, que desnaturalizan las
macromoléculas impidiendo que realicen su actividad.
o Indica los pasos a seguir en un laboratorio real para obtener ADN purificado a partir de
un enjuague bucal. Escoge en cada caso el método que consideres.
La obtención de ácidos nucleicos purificados a partir de una muestra biológica se suele
llevar a cabo mediante un único protocolo técnico continuado que consta de tres fases:
- Pretratamiento de la muestra: antes de iniciar la extracción, consistirá en
centrifugar la suspensión celular y eliminar el sobrenadante.
- Extracción de los ácidos nucleicos.
- Purificación de los ácidos nucleicos.

Práctica 5 - Extracción de Adn

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Práctica 5 - Extracción de Adn

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Práctica 5 - Extracción de Adn

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

ARANZAZU GIL TORIBIO

1ºLAB CLÍNICO Y BIOMÉDICO

EXTRACCIÓN DEL ADN

- El ácido desoxirribonucleico (ADN) que contiene la información genética y hereditaria

• Añadimos 1omL de zumo de piña al enjuague y removemos para homogenizar.

• Disolvemos en un vaso de precipitados 25 ml de agua destilada o mineral junto con 5g de sal y

• En otro vaso, mezclaremos 5mL de detergente líquido junto a 15ml de agua

• Homogeneizamos bien y mezclamos 7 ml de nuestro enjuague + papaína en un vaso de

• Homogeneizamos bien y pasamos ‚5mL de la mezcla a un tubo de ensayo.

• Añadimos 10 ml de alcohol frio al tubo de ensayo. Es muy IMPORTANTE que vertamos

o ¿Para qué utilizamos el detergente?

o ¿Para qué se utiliza el alcohol?

o ¿Para qué se añade el zumo de piña?

Tiene un proceso enzimático y se encarga de romper la proteína, ayudando asi la limpieza

o ¿Qué otros componentes deberían llevar nuestra solución de lisis si queremos

También podría gustarte