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TEMA 15 2
LAS MUTACIONES Y LA INGENIERÍA GENÉTICA
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LAS MUTACIONES Y LA INGENIERÍA GENÉTICA
Pese a esta actividad, la ADN polimerasa deja un nucleótido equivocado por cada 10 nucleótidos
añadidos, lo que significa un valor demasiado alto. Para reducir este número, hay una serie de
enzimas que constituyen sistemas de reparación, que revisan el ADN recién sintetizado y
reparan estas lesiones, disminuyendo la proporción de errores a uno por cada 10º nucleótidos
replicados.
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Reparación sin escisión. Se conocen varios mecanismos directos de reparación de las lesiones
que actúan sin necesidad de escindir las hebras de ADN. Por ejemplo, existen unas enzimas
fotorreactivas (se activan con la luz) que son capaces de romper los enlaces entre dos
pirimidinas contiguas, como por ejemplo los dímeros de timina.
Sistema SOS. Cuando un agente mutagénico produce muchas mutaciones génicas en el ADN,
puede que se inicie la duplicación de este sin que los mecanismos reparadores hayan podido
corregirlas. En este caso, es posible que queden nucleótidos con su base alterada o sin ella.
Como la ADN polimerasa tan solo reconoce las bases A, T, C y G, la duplicación quedaría
paralizada. Para evitarlo, hay un sistema enzimático, denominado enzimas correctoras del
sistema SOS, que elimina este bloqueo. Para ello, en los lugares en los que hay una base
errónea, que no se complementa ni con A, T, C o G, el sistema SOS introduce un nucleótido al
azar que, probablemente, no será el que correspondería. Así, la replicación puede continuar,
aunque las células hijas que se formen tendrán un ADN con algunos nucleótidos cambiados
(mutaciones).
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4.1.ANEUPLOIDÍAS
Es la alteración en el número normal de ejemplares de cada tipo de cromosoma, sin que dicha
alteración llegue a afectar a todo un juego completo de cromosomas.
En los seres diploides lo normal es tener dos ejemplares de cada tipo de cromosomas. El número
de cromosomas de un juego completo varía según la especie. Por ejemplo, en los seres humanos
un juego completo de cromosomas comprende 23 tipos de cromosomas en las mujeres y 24 tipos
de cromosomas en los hombres.
Existen varios tipos de aneuploidías:
• Nulisomía. Falta un par de cromosomas homólogos (hay 2n-2 cromosomas).
• Monosomía. Falta un solo cromosoma (hay 2n-1 cromosomas).
• Disomía. Se da en organismos haploides que tienen una pareja de cromosomas homólogos
(hay n+1 cromosomas).
• Trisomía, tetrasomía, etc. Existe un cromosoma de más, o dos, etc. (2n+1 cromosomas,
2n+2 cromosomas, etc.).
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4.2.EUPLOIDÍAS
Las euploidías son alteraciones en el número de juegos completos de cromosomas de un
organismo. Existen dos tipos:
• Monoploidía o haploidía. Es la presencia de un solo juego de cromosomas en las células.
Se ha de distinguir la monoploidía regular, que es la generada por la meiosis, como la que
presentan los gametos, las meiosporas y los individuos formados por partenogénesis
sexual, como por ejemplo los zánganos, de la monoploidía accidental, que es la generada
por mutación. Esta última es muy rara. Se ha observado en una parte de las células de
algunas plantas.
• Poliploidía. Consiste en la presencia de más juegos cromosómicos de lo que es normal en
un determinado tipo de célula; por ejemplo, en una célula diploide, el hecho de tener tres
juegos (3n) o triploidía, cuatro juegos (4n) o tetraploidía, etc.
La poliploidía es rara en los animales, pero frecuente en las plantas. Las formas
poliploides presentan hojas y frutos más grandes, por lo que tienen gran interés
económico en el sector agrícola. Así, el 47 % de las plantas angiospermas que se utilizan
para el consumo humano son poliploides.
En función del número de especies que intervienen en la generación de un organismo
poliploide, se distinguen dos modalidades:
o Autopoliploidía. Todos los juegos cromosómicos proceden de la misma especie.
o Alopoliploidía. Los juegos cromosómicos proceden de dos especies diferentes.
Para conseguir artificialmente organismos poliploides se tratan con colchicina las células de las
plantas progenitoras. Esta sustancia se extrae del azafrán silvestre e inhibe la formación del
huso acromático durante el proceso de división celular. Como consecuencia, los cromosomas no
migran a los polos celulares, sino que permanecen juntos en una única célula. Así, a partir de
células 2n se pueden obtener células 4n y, a partir de ellas, también gametos 2n, cuya unión
daría lugar a individuos 4n o tetraploides.
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5.2.MUTÁGENOS QUÍMICOS
Son sustancias químicas que reaccionan con el ADN. Provocan, básicamente, tres tipos de
alteraciones:
• Modificaciones de las bases nitrogenadas. El ácido nitroso (HNO2), por ejemplo, provoca
la eliminación de grupos amino de las bases nitrogenadas; la hidroxilamina añade grupos
hidroxilo, y el etilmetanosulfonato (EMS) y el gas mostaza añaden grupos alquilo (metilo,
etilo, etc.). Como consecuencia, se producen errores durante la replicación del ADN.
• Sustitución de una base por otra análoga. Entre los análogos de bases figura el 5-
bromouracilo, que sustituye a una timina, o la 2-aminopurina, que se coloca en lugar de
una adenina. Las modificaciones y las sustituciones de bases nitrogenadas implican
emparejamientos con bases diferentes de las complementanas.
• Intercalación de moléculas. Algunas moléculas, como la acridina o la proflavina, tienen una
estructura similar a un par de bases enlazadas. Estas moleculas se pueden introducir
entre los pares de bases del ADN, por lo que se denominan sustancias intercalantes.
Cuando se produce la duplicación, pueden aparecer inserciones o deleciones de un único
par de bases, con el consiguiente corrimiento en el orden de lectura.
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7.1.ENZIMAS DE RESTRICCIÓN
Las enzimas de restricción son un grupo de enzimas endonucleasas propias de diversas especies
de bacterias, cuya función es destruir los ADN víricos que puedan entrar en estos organismos,
para lo que realizan cortes en el ADN extraño.
Lo interesante de estas enzimas es que cada una de ellas corta el ADN siempre en un mismo
punto de la secuencia de nucleótidos, una secuencia de 4 a 8 pares de nucleótidos denominada
sitio de restricción. La mayoría de estas secuencias son palíndromos, es decir, secuencias
capicúa según la complementaridad de las bases, por lo que son iguales en ambas hebras.
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❖ MECANISMO
Buena parte de las proteínas que más interés despiertan son proteínas producidas por células
eucariotas, como por ejemplo la insulina.
La producción de estas proteínas en procariotas plantea el problema de que los genes
eucariotas contienen intrones, es decir, secuencias de ADN sin sentido que deben retirarse, y las
bacterias carecen de las enzimas necesarias para eliminarlos.
Para resolver este problema se emplea la técnica del ADN complementario.
Se aísla el ARNm maduro de la proteína que interesa.
Se obtiene su ADN complementario la transcriptasa inversa, que produce una hebra de ADN a
parte.
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En ingeniería genética, la PCR se emplea cuando se dispone de poca cantidad de ADN para la
obtención de copias del mismo (clonación de ADN), como alternativa muy ventajosa a su
introducción en bacterias.
Para realizar la PCR se necesitan los siguientes elementos:
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❖ CICLOS DE LA PCR
Completado el primer ciclo se obtienen 2 copias nuevas del ADN diana. El ADN diana aumenta
exponencialmente en cada ciclo.
El segundo ciclo comienza igual; se calienta para que se separen las hebras de ADN, se enfría
para que se unan los cebadores, y se vuelve a elongar la cadena. Como la ADN polimerasa es
termorresistente, no se desnaturaliza al aumentar la temperatura, y no hace falta añadir nueva
enzima en cada ciclo.
Al cabo de unos 20 ciclos se puede obtener un millón de copias, y en pocas horas se tienen
millones de copias del fragmento inicial.
La técnica PC tiene numerosas aplicaciones ya que permite amplificar muestras muy pequeñas
de ADN. Una vez que se dispone de una cantidad adecuada, se puede emplear en técnicas de
ingeniería genética, por ejemplo en medicina forense, para la identificación de restos humanos,
para controlar el origen de los alimentos, en estudios de filogenia evolutiva, etc.
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7.7.Producción de enzimas
En la industria se emplea un gran número de enzimas, sobre todo en la industria alimentaria y en
la producción de detergentes. Muchas de estas enzimas se obtienen directamente de
microorganismos, que las producen de un modo natural.
Pero actualmente también se usan técnicas de ingenieria genética, lo que permite obtener de los
microorganismos enzimas modificadas y mejoradas.
7.8.PRODUCCIÓN DE VACUNAS
La ingeniería genética permite obtener algunos antígenos específicos y puros.
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no se hallan en las células sanas. Se trata de producir anticuerpos monoclonales contra esos
marcadores y unirles sustancias radiactivas o citotóxicas que actúan solo sobre las células
cancerosas.
La mayor parte de los anticuerpos monoclonales empleados procedían de ratón.
Cuando se usaban en tratamientos prolongados, el organismo los reconocía como extraños y
terminaba por rechazarlos. Actualmente se emplean anticuerpos humanizados, fabricados por
medio de ingeniería genética. En ellos, la parte que reconoce al antígeno, es decir, su parte
variable, procede de ratón, pero el resto procede del ser humano. Estos anticuerpos
experimentan un menor rechazo.
Una de las primeras enfermedades tratadas con estas técnicas fue la deficiencia de la enzima
adenosina desaminasa (ADA), la llamada enfermedad de los niños burbuja. Otras enfermedades
que se están tratando mediante ingeniería genética son la talasemia, la fibrosis quística y
algunos tipos de cáncer. Sin embargo, aún no ha habido éxitos realmente concluyentes con la
terapia génica. En algunos casos, incluso, se ha relacionado la terapia génica con la aparición de
tumores. No obstante, se esperan grandes avances en estas técnicas.
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Para introducir genes en las células vegetales y obtener plantas transgénicas se emplea el
plásmido Ti de Agrobacteriumtumefaciens u otras técnicas, como la microinyección y las
microbalas de metal recubiertas de ADN.
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crecimiento, con lo que se evita la congelación del medio interno que produciría la muerte
del pez.
En el laboratorio se han conseguido algunos avances con mamíferos. Por ejemplo, en ratones
carentes de la hormona del crecimiento debido a la existencia de una mutación en el gen
correspondiente. Se ha introducido el gen procedente de una rata mediante microinyección en
cigotos homocigóticos. El resultado ha sido la obtención de ratones transgénicos con una
cantidad de hormona de crecimiento 800 veces superior a la de los ratones normales, lo que
origina individuos que tienen el triple de peso y de tamaño.
Otro objetivo sobre el que se está investigando es lograr que las vacas u otros animales
produzcan, con la leche, ciertas proteínas de interés. Actualmente, se ha aprobado el uso de
algunos medicamentos obtenidos por este método. Por ejemplo, la enzima c-1-antitripsinasa, que
se emplea en el tratamiento del entisema, se obtiene de la leche de ovejas transgénicas.
8.1.CLONACIÓN DE PLANTAS
En las plantas que se reproducen asexualmente, la clonación es un proceso natural que ocurre
de forma continua en la naturaleza. Los agricultores realizan clonación artificial cuando, por
ejemplo, propagan una planta mediante esquejes, estacas, bulbos, tubérculos, etc.
Esta capacidad de las plantas se basa en la existencia, en diversos tejidos, de células
totipotentes, es decir, células con la capacidad de generar todos los tipos celulares del adulto.
Ya en la década de 1950, a partir de una sola célula del floema de raíz de la zanahoria, se
consiguió una nueva planta completa cultivándola en un medio con nutrientes y hormonas.
8.2.CLONACIÓN DE ANIMALES
La clonación de animales es más compleja, pues no se han encontrado células adultas
totipotentes a partir de las cuales se regenere un individuo adulto completo. Sin embargo, a
partir de células embrionarias en las primeras fases del desarollo sí se pueden formar individuos
completos. Se pueden extraer varias células de un embrión joven y hacer que se desarrollen para
formar varios animales identicos, es decir, varios clones.
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❖ CLONACIÓN TERAPÉUTICA
Se introduce el núcleo de una célula somática de la persona a tratar en un ovocito al que
previamente se ha extraído el núcleo (ovocito nucleado). El ovocito se desarrolla para formar un
embrión. Cuando este llega al quinto día, se pueden obtener las células madre pluripotentes, que
ya son compatibles con el paciente.
La diferencia con el caso de la oveja Dolly es que estos embriones no se desarrollan para formar
un individuo completo, sino los tejidos que se precisan.
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La utilización de células madre para curar enfermedades debidas a anomalías celulares recibe el
nombre de terapia celular. Algunas enfermedades humanas que se espera curar con esta técnica
son la diabetes (por regeneración de células de los islotes del páncreas), la leucemia infantil (por
regeneración de la médula ósea) y el infarto de miocardio (mediante la regeneración de los
tejidos necrosados del corazón).
9.LA BIOTECNOLOGÍA
Las técnicas empleadas en biotecnología y, en particular, las de ingeniería genética, iniciadas
durante la década de 1970, han dado lugar a que distintos miembros de la comunidad científica
manifestaran su preocupación ante el riesgo que podía suponer su uso.
En 1976 se establecieron unas normas para realizar experimentos con estas técnicas. Destacan
la implantación de medidas de esterilización, el uso de salas a baja presión para evitar la salida
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de aire contaminado en caso de accidente y el uso de cepas de Escherichia coli con deficiencias
genéticas, para evitar su supervivencia fuera de un laboratorio.
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