Citocromo P450

● Concepto/definición
Los citocromos P450 son miembros de una superfamilia de hemoproteínas que
activan dioxigeno para catalizar la oxidación de hidrocarburos inactivados
mediante la siguiente reacción;

Presentan una amplia versatilidad funcional, siendo capaz de catalizar una gran
cantidad de procesos y unirse a un número elevado de sustratos. Entre las
reacciones catalizadas por este citocromo se encuentran principalmente
reacciones de oxidación (N-oxidaciones, S-oxidaciones, epoxidaciones),
hidroxilaciones aromáticas y alifáticas, desalquilaciones, desulfuraciones,
desaminaciones y deshalogenaciones. Este gran número de reacciones
metabólicas hace que el citocromo P450 sea una herramienta fundamental en la
comprensión de la respuesta individual a los fármacos, ayudándonos a
comprender mejor determinados efectos beneficiosos, o adversos que pudieran
ocurrir en un paciente.

● Genes e isoformas
ISOENZIMAS EN HUMANOS

Tabla 1. Principales P450 de metabolización de fármacos en el hígado humano

A pesar de existir algunos citocromos P450 que se localizan exclusivamente en
tejidos extrahepáticos (por ejemplo, CYP1A1 o CYP2F1), es en tejido hepático
donde alcanzan su máxima expresión. Las familias 1, 2 y 3 son las que catalizan la
mayor parte de las reacciones de biotransformación de fármacos. El 70% del
contenido hepático de citocromos P450 corresponde a estas familias. Las
principales enzimas del citocromo biotransformadoras son CYP1A2, 2A6, 2B6, 2C9,
2C8, 2C19, 2D6, 2E1, y 3A443, siendo CYP2D6 y CYP3A4 las dos más importantes
a nivel de biotransformación y CYP3A4 y CYP2C, los más abundantes
representando un 30% y un 20% respectivamente en hígado.
ISOFORMAS
Familia CYP1
Incluye dos subfamilias, 1A y 1B; a su vez 1A presenta dos citocromos muy
parecidos, CYP1A1 y CYP1A2. La subfamilia 1B solamente el CYP1B1. Esta familia
está representada por la aril hidrocarburo hidroxilasa, responsable de la
activación metabólica de numerosos hidrocarburos policíclicos ambientales,
promutágenos y procarcinógenos, como el benzopireno, presentes en el humo del
cigarrillo y otros productos de combustión.
En cuanto al metabolismo de drogas , el miembro más relevante es el CYP1A2
que se encarga de inactivar las metilxantinas, varios antidepresivos y la clozapina.
Esta familia está sujeta a inducción, especialmente por tóxicos ambientales.
CYP1B1: Es el principal enzima del metabolismo de estrógenos carcinogénicos y
está involucrado en la activación metabólica de procarcinógenos de hidrocarburos
aromáticos policíclicos.
Familia CYP2
Está representada en los tejidos, especialmente el hígado, por 5 subfamilias. Las
subfamilias 2A y 2B tienen escasa importancia para el metabolismo de drogas, en
cambio, las subfamilias 2C, 2D y 2E son más relevantes.
CYP2A6: constituye alrededor del 5-10% del total CYP hepático microsomal en el
hombre. Aunque la cumarina es su principal sustrato, muchos tóxicos y
pro-carcinógenos como el metilterbutiléter, la nicotina, la N-nitrosodietilamina y la
N-nitrosobenzilmetilamina también lo son.
CYP2B6: lleva a cabo el metabolismo de compuestos como la nicotina, el
bupropión, y muchas toxinas y carcinógenos. Su expresión en el cerebro es
específica de determinadas regiones y se localiza tanto en neuronas como en
astrocitos. Los niveles de CYP2B6 en cerebro se encuentran elevados en
fumadores y alcohólicos, alterando de este modo la sensibilidad a fármacos que
actúan a nivel central, incrementando la susceptibilidad a toxinas y carcinógenos,
y contribuyendo a la tolerancia central de la nicotina.
La subfamilia 2C contiene al menos siete genes de los cuales, CYP2C9 y CYP2C19
exhiben alto polimorfismo. El CYP2C9 constituye un porcentaje importante de la
masa metabólica del órgano y es inducible por drogas; metaboliza el
anticoagulante warfarina, la fenitoína y algunas sulfonilureas.
El CYP2C19 representa la [S]- mefenitoína hidroxilasa y entre otras drogas
metaboliza algunos inhibidores de la bomba de protones, citalopram y otros
antidepresivos, diazepam y varios antiepilépticos, y el propranolol.
La subfamilia 2D, a la que pertenece el CYP2D6, a pesar de su relativamente
baja contribución a la masa metabólica del hígado (sólo el 2% del total),
metaboliza entre el 20 y 25% de los fármacos, entre ellos fármacos de uso
cardiovascular, la mayoría de los neurolépticos, los antidepresivos tricíclicos,
ciertos ISRS como la fluoxetina, los inhibidores de la monoaminooxidasa (IMAO) y
los opiáceos codeína y dextrometorfano; por ello la mayoría de las interacciones
entre psicofármacos y fármacos cardiovasculares se observan a este nivel.
El CYP2D6 exhibe alto polimorfismo, especialmente en las poblaciones europeas.
Debido a que los polimorfismos solo afectan la capacidad metabólica de las
drogas, la enzima carece de función endógena.
La subfamilia 2E, contiene el CYP2E1, que es también inducible. CYP2E1, es una
de las enzimas CYP más estudiadas tanto en animales como en humanos, debido
a su papel en el metabolismo del etanol y por su participación en la activación
metabólica de una serie de procarcinógenos, como N-dimetil nitrosamida y de
solventes orgánicos como el tetracloruro de carbono y el benceno (25). El
contenido hepático de CYP2E1 es alrededor de 7% de CYP total y también se
encuentra presente en el cerebro y pulmón.
Familia CYP3A
La familia 3 metaboliza casi el 55% de las drogas en uso a través de su miembro
más representativo, el CYP3A4, que en el hígado representa el 30% del contenido
total de citocromos.
Otros miembros de la familia son, el CYP3A3, el CYP3A7 y el CYP3A5. Todos se
hallan agrupados en una zona estrecha del brazo corto del cromosoma 7.
Las enzimas de la familia 3 son inducibles por fármacos y su presencia es
clínicamente relevante en la mucosa intestinal (donde participan reduciendo la
biodisponibilidad oral de muchos medicamentos) y otros tejidos. Adicionalmente,
estos citocromos participan en el metabolismo de esteroides endógenos.
CYP3A4 contribuye fundamentalmente al metabolismo del 50% de los fármacos
utilizados actualmente y que sufren metabolismo oxidativo. Este citocromo es el
más abundante en el hígado humano y también es abundante su expresión en el
tracto gastrointestinal. El enorme metabolismo que tiene lugar en las vías
gastrointestinales debido al CYP3A4, contribuye a la baja disponibilidad de
muchos fármacos que se administran por vía oral.
Por otra parte, el estudio del intestino delgado está adquiriendo un gran interés
respecto al metabolismo de fármacos, ya que el conocimiento del CYP intestinal
no es tan grande como el del CYP hepático. Existe una elevada variabilidad
interindividual en CYP1A2, CYP2A6 y CYP2E1 en duodeno humano, que puede
dar lugar a una variable biodisponibilidad de los fármacos utilizados por vía oral,
complicando así la terapia farmacológica, especialmente en el caso de fármacos
que poseen una estrecha ventana terapéutica.
CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 y CYP3A4 son las principales isoformas del
metabolismo de los fármacos y contribuyen al metabolismo oxidativo de más del
90% de los fármacos de uso clínico actual.

● Nomenclatura
Imagen 1. Localización del citocromo P450.
En 1987 se establecieron los principios del sistema de nomenclatura y clasificación
que se utiliza hoy en día, los cuales obedecen a criterios filogenéticos y se basan
en la identidad de la secuencia de aminoácidos en las cadenas polipeptídicas de
los diferentes enzimas. Según este criterio, los P-450 se identifican con las siglas
CYP seguido de un número que designa la familia, una letra que identifica la
subfamilia y otro número que se corresponde con el gen (por ejemplo, CYP1A1,
CYP2C9). Con este sistema de nomenclatura quedan totalmente identificados
todos los citocromos P-450, tanto procariotas como eucariotas.

En una misma familia se agrupan aquellos enzimas cuya secuencia de

aminoácidos tiene una similitud mayor del 40%, independientemente de la especie
de procedencia. Dentro de una familia los citocromos P-450 se agrupan en
diferentes subfamilias que, siempre que haya más de una, se denominan
correlativamente empezando siempre por la letra A (por ejemplo, CYP2A, CYP2B,
CYP2C, etc.). En este caso, el requisito para que dos citocromos P-450
pertenezcan a la misma subfamilia es que tengan una homología en la secuencia
de aminoácidos superior al 55%. Así, una concordancia superior al 40% en la
secuencia de aminoácidos se daría en citocromos pertenecientes a una misma
familia; si la concordancia fuese superior al 55%, estaríamos hablando de
miembros de una misma subfamilia. Por último, dentro de la misma subfamilia, los
enzimas individuales se designan según números empezando siempre por el 1 (por
ejemplo, CYP1A1, CYP1A2), teniendo en cuenta que dos citocromos P-450 se
consideran como diferentes siempre y cuando sus respectivas secuencias difieran
en más de un 3%. Actualmente se conocen 57 genes y más de 59 pseudogenes
divididos en 18 familias de genes y 43 subfamilias.

● Variabilidad genética
Dependiendo de la forma en la que captan los electrones del NADPH, los
enzimas P450 pueden clasificarse en cuatro clases:
Clase I: Se encuentran en las membranas mitocondriales de bacterias y
eucariotas. Reciben los electrones de la ferredoxina que se reduce gracias a la
acción de la ferredoxina reductasa. Catalizan diferentes pasos en la biosíntesis de
hormonas esteroideas y la vitamina D3 en mamíferos.
Clase II: Son las mas comunes en eucariotas. Se encuentran ancladas a la cara
externa del retículo endoplásmico (ER) por los residuos amino terminales. Reciben
los electrones directamente del NADPH dependiente de CYP P450 reductasa
(CPR), que es una diflavoproteina FAD/ FMN.
Clase III: no requieren un donador de electrones, son autosuficientes. Catalizan las
reacciones de deshidratación de alquil-hidroperóxidos y alquil-peróxidos
inicialmente generados por dioxigenasas.
Clase IV: reciben los electrones directamente del NADPH.
Las enzimas de clase I y II, de todos los organismos participan en la
detoxificación, o en algunos casos activación, de xenobióticos. Se ha demostrado
que tienen contribución en los procesos de carcinogénesis, y son determinantes en
el metabolismo, tolerancia, selectividad y compatibilidad, de drogas y pesticidas.
Las clases III y IV pueden considerarse como los restos más ancestrales de las
formas de los P450 involucradas en la detoxificación de especies de oxígeno
activo.
Tabla 2. Citocromos P450 humanos

● Metabolismo de sustancias (ciclo)

○ Inductores e inhibidores

CYP Sustratos Inductores Inhibidores

1A2 Acetaminofeno, alosetrón, Alimentos asados al carbón, Artemisinina,

antipirina, cafeína, verduras crucíferas, carne a atazanavir,
clomipramina. la parrilla, lansoprazol, cimetidina,
omeprazol, primidona, ciprofloxacina,
rifampicina, el cigarro. enoxacina.

2A6 Cumarina, Efavirenz, rifampina, Clotrimazol,

dexmedetomidina, fenobarbital isoniazida,
nitrosaminas del tabaco, ketoconazol, letrozol,
nicotina (a cotinina y mentofurano,
2′-hidroxinicotina) metimazol,
metoxaleno,
miconazol,
tranilcipromina

2B6 Artemisinina, bupropión, Carbamazepina, Amiodarona,

clopidogrel, ciclofosfamida, ciclofosfamida, fosfenitoína, amlodipina,
efavirenz. nevirapina. clopidogrel,
clotrimazol,
desipramina.

2C8 Amiodarona, cabazitaxel, Rifampina, barbitúricos Deferasirox,

carbamazepina, cloroquina, gemfibrozilo,
diclofenaco. lapatinib,
montelukast,
pioglitazona.

2C9 Alosetrón, bosentán, Aminoglutetimida, Amiodarona,

celecoxib, clorpropamida, barbitúricos, bosentán, clopidogrel,
 diclofenaco. carbamazepina, fenitoína. delavirdina,
disulfiram,
doxifluridina.

2C18 Tolbutamida, fenitoína Fenobarbital

2C19 Aripiprazol, carisoprodol, Aminoglutetimida, N3-bencilnirvanol,

citalopram, clomipramina, artemisinina, barbitúricos, N3-bencilfenobarbital
clopidogrel. carbamazepina, fenitoína. , cloranfenicol,
cimetidina.

2D6 Amitriptilina, atomoxetina, Desconocido Bupropión, cinacalcet,

bufuralol, bupranolol, cloroquina,
carvedilol. difenhidramina,
fluoxetina.

2E1 Acetaminofeno, Etanol, isoniazida Amitriptilina,

cloroxazona, dacarbazina, clorpromazina,
enflurano, etanol. cimetidina,
clometiazol,
clotrimazol.

34A1 Acetaminofeno, alfentanilo, Aminoglutetimida, avasimiba, Amprenavir,

alfuzosina, almotriptán, barbitúricos, carbamazepina, azamulina,
alprazolam. efavirenz. boceprevir,
claritromicina,
conivaptán.

3A5
Tiene perfiles de sustrato e inhibidor similares pero, a excepción de algunos
medicamentos, por lo general es menos activo que el CYP3A4.

○ Metabolismo de fármacos

El citocromo P-450 es el principal responsable del metabolismo oxidativo de los

fármacos. Su expresión está regulada por:

— Factores genéticos: formas polimórficas.

— Factores fisiopatológicos: regulación hormonal, enfermedades.
— Factores ambientales.
— Factores nutricionales.
— Inducción, inhibición.
Todos estos factores (imagen 2) condicionan que los niveles hepáticos de los
enzimas p450 varíen notablemente entre diferentes individuos.

Imagen 2. Factores que intervienen en el metabolismo de los fármacos.

Esta variabilidad explica las notables diferencias que en ocasiones se observan en
el metabolismo de fármacos, justificando además la aparición de alteraciones en
la respuesta farmacológica, así como las diferencias individuales en la
susceptibilidad a la acción de tóxicos o carcinógenos.
Los procesos de absorción, distribución, metabolismo y excreción a los que se ve
sometido un fármaco regulan su concentración en el lugar de acción, jugando un
papel determinante en su eficacia farmacológica. Un fármaco con una
farmacocinética inapropiada puede dar lugar a una respuesta inadecuada o muy
variable, que comprometa su uso terapéutico (35). Por otro lado, un fármaco
además de eficaz tiene que ser seguro, resultando, la farmacocinética del mismo
clave en su efecto tóxico.
Por último, el metabolismo hepático de los fármacos tiene una notable influencia
sobre su aclaramiento plasmático, y es la causa más frecuente de la variabilidad
individual que se observa en los parámetros farmacocinéticos. Es por tanto uno de
los factores con más peso en su biodisponibilidad, su efecto farmacológico y su
toxicidad. Es también una de las causas más frecuentes de incompatibilidad y de
aparición de interacciones entre fármacos.

Imagen 3.Metabolismo de los sustratos vía CYP450.

Inhibición enzimática
Agentes moleculares que interfieren en la catálisis de una reacción haciéndola
más lenta o deteniéndola. Como los enzimas catalizan todos los procesos celulares
podemos decir que los inhibidores enzimáticos se encuentran entre los agentes
farmacéuticos más importantes, un ejemplo es la aspirina, la cual inhibe el enzima
que cataliza el primer paso de la síntesis de prostaglandinas, compuestos que
intervienen en procesos que producen dolor.
Inhibición reversible
Un tipo frecuente de inhibición reversible es la inhibición competitiva

Imagen 4.Esquema de inhibición competitiva.

Otros tipos de inhibición reversible son la inhibición acompetitiva y la inhibición
mixta que a menudo se aplican a enzimas con un solo sustrato pero que en la
práctica sólo se observan con enzimas que actúan con dos o más sustratos.
Un inhibidor acompetitivo es el que se fija a un sitio distinto al que se fija el
sustrato en el sitio activo y que a diferencia del inhibidor competitivo, sólo se une
al complejo ES.
Un inhibidor mixto, también se fija en un sitio distinto al del sustrato, pero se fija
tanto a E como a ES.

Imagen 5. Esquema de inhibición mixta.

Inhibición irreversible
Los inhibidores irreversibles son aquellos que se combinan con, o destruyen, un
grupo de enzima que es esencial para su actividad, o los que forman una
asociación no covalente muy estable.
Existe un tipo de inhibidores irreversibles llamado inactivadores suicidas, los
cuales son compuestos poco reactivos hasta que se unen al sitio activo de un
enzima específico. Un inactivador suicida pasa a través de los primeros pasos de
una reacción enzimática normal, pero enseguida se convierte en un compuesto
muy reactivo que se combina irreversiblemente con el enzima, en lugar de
transformarse en el producto normal. Estos compuestos también se conocen con el
nombre de inactivadores basados en el mecanismo, ya que utilizan el mecanismo
de reacción enzimático normal para inactivar la enzima.

○ Miembros relevantes

Conjugación
● Concepto/definición
En las reacciones de conjugación, los productos de la transformación metabólica
de los fármacos son combinados con compuestos endógenos hidrosolubles
(agentes conjugantes). Estas reacciones son catalizadas por enzimas como las
transferasas.
La formación de glucurónidos es la reacción de fase II más importante y es la
única que se lleva a cabo en el sistema de enzimas microsomales del hígado. Los
glucurónidos se secretan en la bilis y se eliminan en la orina. La conjugación
aumenta la solubilidad de la mayoría de los fármacos y facilita su excreción renal.
La conjugación con aminoácidos como glutamina o glicina produce conjugados
que se excretan con facilidad por la vía urinaria, pero no biliar. El envejecimiento
no afecta la formación de glucurónidos. Sin embargo, en los neonatos, la
conversión a glucurónidos es lenta, y potencialmente acarrea efectos graves (p. ej.,
como con el cloranfenicol).
La conjugación también puede consistir en acetilaciones o sulfoconjugaciones. Los
ésteres de sulfato son polares y se excretan fácilmente en la orina. El
envejecimiento no afecta estos procesos.

● Tipos
Glucuronidación
Acetilación
Formación de ácido mercaptúrico
N, O y S-metilación
Transulfuración

Imagen 6. Principales reacciones de conjugación.

 Imagen 7. Reacciones de fase II

● Sustratos endógenos
● Transferasas y su localización
Una transferasa es una enzima que cataliza la transferencia de un grupo
funcional, por ejemplo un metilo o un grupo fosfato, de una molécula donadora a
otra aceptora. Por ejemplo, una reacción de transferencia es la siguiente:
A–X + B → A + B–X
Corresponden al EC 2 en la catalogación mediante números EC. Sus subclases
son:

● EC 2.1 incluye enzimas que transfieren grupos de un sólo carbono

(metiltransferasas)
● EC 2.2 incluye enzimas que transfieren grupos aldehído o cetona
● EC 2.3 incluye aciltransferasas
● EC 2.4 incluye glicosiltransferasas
● EC 2.5 incluye enzimas que transfieren grupos alquilo or arilo
● EC 2.6 incluye enzimas que transfieren grupos con nitrógeno;
(transaminasas)
● EC 2.7 incluye enzimas que transfieren grupo fosfato; (fosfotransferasas,
incluyendo a polimerasas y kinasas)
● EC 2.8 incluye enzimas que transfieren un grupo sulfurado
(sulfurotransferasas y sulfotransferasas)
● EC 2.9 incluye enzimas que transfieren gupos que contienen selenio
Las transferasas participan de manera directa en la regulación de muchos
procesos biológicos al silenciar por mecanismos epigenéticos las secuencias de
ADN que codifican la información necesaria para la síntesis de los elementos
celulares. Uno de ellos son las Glutatión-S-transferasa en el hígado participa en la
desintoxicación de las células hepáticas, ayudando a protegerlas de las especies
reactivas del oxígeno (ROS), de los radicales libres y de los peróxidos de
hidrógeno que se acumulan en el citoplasma celular y son altamente tóxicos.

● Sustratos exógenos
El sistema de monooxigenasas es un complejo multienzimático cuya oxidasa final
es una hemoproteína denominada citocromo P450 (CYP). Este sistema se
encuentra presente en diferentes tejidos como el riñón, pulmón, piel, intestino,
corteza adrenal, testículos, placenta y otros, pero es particularmente activo en el
hígado. Además de participar en el metabolismo de sustratos de naturaleza
exógena como drogas, pesticidas, procarcinógenos, anestésicos, solventes orgánicos,
entre muchos otros, el CYP participa en el metabolismo de sustratos endógenos de
importancia biológica como colesterol, ácidos biliares, hormonas esteroidales y
ácidos grasos
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Bibliografía
Donato, M. T. (2004). ¿ Qué es el citocromo P-450 y cómo funciona?. Monografías
de la Real Academia Nacional de Farmacia.
Fernández, A. G., de Sande García, M. A., Fernández, A. M. M., Ramos, S. B., &
Galán, M. J. G. (2011). Aspectos fundamentales del Citocromo P450. FUNDACIÓN
TEJERINA.
Rodríguez González, J. C., & Rodeiro Guerra, I. (2014). El sistema citocromo P450 y
el metabolismo de xenobióticos. Revista Cubana de Farmacia, 48(3), 495-507.
Alberto Checa Rojas. (2017). Metabolismo de fármacos.
Autoevaluación