Replicación Del ADN Cuarto Medio

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Replicación del ADN

Una vez que se comprobó que el ADN era el material hereditario y se descifró su
estructura, lo que quedaba era determinar como el ADN copiaba su información y
como la misma se expresaba en el fenotipo. Matthew Meselson y Franklin W. Stahl
diseñaron el experimento para determinar el método de la replicación del ADN.

Tres modelos de replicación eran posibles.

Modelo Semiconservativo: Cuando Watson y Crick (1953) propusieron el modelo de


la Doble Hélice indicaron que dicho modelo sugería una forma sencilla de replicación.
El modelo de replicación propuesto por Watson y Crick suponía que el ADN doble
hélice separa sus dos hebras y cada una sirve de molde para sintetizar una nueva
hebra siguiendo las reglas de complementariadad de las bases nitrogenadas. Dicho
modelo recibión el nombre de Semiconservativo, ya que las dos dobles hélices recién
sintetizadas poseen una hebra vieja (una mitad vieja) y otra hebra nueva (mitad
nueva).

Modelo Conservativo: cuando el ADN doble hélice se replica se producen dos dobles
hélices, una de ellas tienen las dos hebras viejas (esta intacta, se conserva) y la otra
doble hélice posee ambas hebras de nueva síntesis.

Modelo Dispersivo: Cuando el ADN doble hélice se replica se originan dos dobles
hélices, cada una de ellas con hebras que poseen tramos viejos y tramos de nueva
síntesis en diferentes proporciones.

El experimento de Meselson-Stahl consiste en cultivar la bacteria Escherichia coli en


un medio que contenga nitrógeno pesado (Nitrogeno-15 que es mas pesado que el
isótopo mas común: el Nitrogeno-14, ). La primera generación de bacterias se hizo
crecer en un medio que únicamente contenía Nitrogeno-15 como fuente de N. La
bacteria se transfirió luego a un medio con N-14. Watson y Crick habían pronosticado
que la replicación del ADN era semiconservativa, de ser así el ADN extraído de las
bacterias luego de cultivarlas por una generación en N-14 tendría un peso intermedio
entre el ADN extraído del medio con N-15 y el del extraído de medio con N-14, y así
fue.

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Los detalles del experimento que incluye un proceso de ultra centrifugación en cloruro
de Cesio

La replicación del ADN, necesita de muchos nucleótidos, enzimas, y una gran cantidad
de energía en forma de ATP. La replicación del ADN en el ser humano ocurre a una
velocidad de 50 nucleótidos por segundo, en procariotas a 500 nucleótidos por
segundo.

Para comenzar la replicación es necesario separar la hebras a través de la ruptura de


los puentes de hidrógeno entre las bases nitrogenadas por medio de las enzimas
helicasas y de las topoisomerasas para aliviar la tensión, además para mantener
separadas las cadenas abiertas se utiliza el factor SSB (proteínas de unión a cadena
simple).

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La iniciación de la replicación siempre acontece en un cierto grupo de nucleótidos, el
origen de la replicación. En las bacterias existe un solo origen de replicación,
denominado Ori C y, a partir de este único punto de origen, la replicación progresa
en dos direcciones.

Los eucariontes poseen muchos orígenes de replicación, probablemente debido a la


enorme cantidad de ADN que poseen y a que su material hereditario esta repartido en
varias moléculas de ADN distintas o varios cromosomas, así se pueden encontrar
varias horquillas de replicación

La replicación del ADN es bidireccional, ya que a partir de un punto de origen progresa


en dos direcciones opuestas, existiendo dos puntos de crecimiento u horquillas de
replicación.

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Debido al antiparalelismo de las dos hélices del ADN y a que las ADN polimerasas
III (enzima que sintetiza el ADN) solamente saben sintetiza ADN en la dirección 5' -→
3', la síntesis de una de las hebras se puede realizar de forma continua, mientras que
la otra hélice para poder sintetizarla al mismo tiempo se necesita polimerizarla a base
de ir añadiendo pequeños fragmentos (fragmentos o piezas de Okazaki). Como una
hélice se sintetiza de forma continua y la otra lo hace de forma discontinua, se dice
que la Replicación es Semidiscontinua.

Como ya se ha dicho anteriormente, las ADN polimerasas III solamente saben


sintetizar ADN en la dirección 5' -→ 3' añadiendo nucleótidos al extremo 3' OH de otro
nucleótido. Para que puedan iniciar la síntesis de ADN necesitan un extremo 3' OH al
que ir añadiendo nucleótidos, y ese extremo 3' OH lo suministra un ARN de pequeño
tamaño alrededor de 25 a 30 ribonucleótidos que se denomina ARN cebador o
"primer".

La síntesis del primer de ARN lo realiza una enzima denominada ARN Primasa. La
Primasa es una ARN polimerasa que utiliza como molde ADN. Todos los fragmentos de
Okazaki comienzan por un Cebador de ARN. Posteriormente, la ADN polimerasa III
lleva a cabo la síntesis del fragmento de ADN correspondiente hasta llegar al siguiente
cebador.

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El primer o cebador de ARN es removido por la ADN polimerasa I. La ADN
polimerasa I se encarga de retirar el ARN cebador mediante su actividad
exonueótídica (eliminación de nucleótidos) y al mismo tiempo rellena el hueco
sintetizando ADN.

Por último, los dos fragmentos de Okazaki tienen que unirse, es necesario enlazar el
extremo 3'OH de un fragmento con el 5'P del siguiente fragmento. Dicha labor de
sellado y unión de los sucesivos fragmentos la realiza la enzima Ligasa.

Enzima Función

ADN Polimerasa III Polimerización del ADN.

Eliminación de Primers y adición de


ADN Polimerasa I
desoxinucleotidos.

Helicasa Separación de las hebras.

Eliminación del sobre-enrollamiento


Topoisomerasa
del ADN.

Síntesis de Primers o cebadores de


RNA Primasa
ARN.

ADN Ligasa Unión de los fragmentos de Okazaki.

Factor SSB Proteínas estabilizadoras del ADN.

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