UNIDAD # 2

FUNDAMENTOS DE ESPECTROSCOPIA
METODOS ESPECTROSCÓPICOS DE ANALISIS
Los métodos espectrométricos, opticométricos, o espectroscópicos, son un amplio grupo de métodos
analíticos que se basan en la espectroscopia atómica y molecular. La espectroscopia es un término
general para la ciencia que trata de las distintas interacciones de la radiación con la materia.
Históricamente, las interacciones de interés se producían entre la radiación electromagnética y la
materia, sin embargo, ahora el término espectroscopia se ha ampliado para incluir las interacciones
entre la materia y otras formas de energía, por ejemplo, las ondas acústicas y los haces de partículas
como iones o electrones.
Los métodos espectrométricos más ampliamente utilizados son los relacionados con la radiación
electromagnética, que es un tipo de energía que toma varias formas, de las cuales las más fácilmente
reconocibles son la luz y el calor radiante. Sus manifestaciones más difícilmente reconocibles
incluyen los rayos gamma y los rayos X, así como las radiaciones ultravioletas, de microondas y de
radiofrecuencia.
Los métodos espectroscópicos de análisis se basan en la medición de la radiación electromagnética
emitida o absorbida por los analitos. Los métodos de emisión utilizan la radiación emitida cuando un
analito es excitado por energía térmica, eléctrica o energía radiante. Los métodos de absorción se
basan en la disminución de la potencia (o atenuación) de un haz de radiación electromagnética como
consecuencia de su interacción con el analito.

CLASIFICACION
1. Métodos basados en la Absorción de radiación
- Colorimetría
- Espectrofotometría (visible, ultravioleta, absorción atómica)
- Resonancia magnética nuclear
2. Métodos basados en la Emisión de radiación
- Fotometría de flama
- Fluorescencia
- Métodos radioquímicos
- Rayos X
3. Métodos basados en la dispersión de la radiación
- Turbidimetría
- Espectroscopia Raman
- Nefelometría
4. Métodos basados en la refracción de radiación
- Refractometría
- Interferometría
5. Métodos basados en la Rotación de radiación
- Polarimetría
- Dispersión óptica rotatoria

IMPORTANCIA
Uno de los métodos fisicoquímicos más empleados en el análisis es el de la medida de la absorción o
emisión de la energía radiante. La gran difusión de esta técnica es consecuencia de los factores
siguientes:

1) El amplio intervalo de longitudes de onda o de frecuencia de energía radiante y sus diferentes

modos de interacción con la materia.
2) La existencia en el mercado de instrumentos de medida cada vez más precisos.
3) Las ventajas inherentes al método.
 Generalmente el análisis es muy rápido, una vez que se ha establecido el método para eliminar
interferencias.
 El método es muy cómodo para medidas repetidas de un mismo constituyente, como sucede en la
rutina del análisis de control.
 Aplicable a la determinación exacta de cantidades de constituyentes mucho menores que con los
métodos gravimétricos o volumétricos.
 Métodos que permiten determinaciones de trazas o microcantidades de componentes de interés en
muestras diversas.
 Estos métodos suelen emplearse para determinar cuantitativamente pequeñas cantidades de una
sustancia.
 Con frecuencia es un método no destructivo de la muestra, lo que puede ser importante cuando el
constituyente es muy valioso. Como sucede en los programas de investigación con ciertas sustancias
bioquímicas o elementos transuránicos.

Los métodos espectrofotométricos tienen tal importancia que son los más utilizados en casi todos los
laboratorios industriales como elementos de investigación, control de calidad o de enseñanza. Estos
métodos presentan como se observa varias y preponderantes ventajas en la solución de muchos
problemas. Estas ventajas incluyen rapidez, sencillez, especificidad y sensibilidad.

ENERGIA RADIANTE
La energía radiante se define como la energía transmitida en forma de radiación electromagnética y se
propaga en forma de ondas transversales, su vibración es perpendicular a la dirección de su
propagación. Puede ser emitida por sustancias bajo condiciones de gran excitación, tales como las
producidas por altas temperaturas o por descargas eléctricas. Esta energía al entrar en contacto con la
materia puede ser absorbida, transmitida, reflejada y refractada por muchas sustancias en diferentes
estados de agregación (sólido, líquido, disolución y gas) a la radiación incidente a una longitud de
onda apropiada.
La luz y otras formas de energía radiante parecen tener naturaleza dual. La teoría Ondulatoria es
necesaria para explicar la difracción, la refracción y otros efectos ópticos, pero en la actualidad se sabe
que tanto la emisión como absorción de energía radiante se efectúa mediante partículas discretas
llamadas fotones o quantos, que son partículas muy pequeñas con una masa de reposo nula; se
desplazan en forma rectilínea, hasta ser absorbidos por la materia.
La refracción es el cambio de dirección de un haz de energía radiante al pasar oblicuamente de un
medio a otro medio de diferente densidad y la difracción es la modificación que experimentan todas
las ondas en movimiento al pasar por los bordes opacos, al atravesar estrechas hendiduras o agujeros o
al ser reflejadas desde superficies rayadas de la radiación electromagnéticas se explican por la
naturaleza ondulatoria de la luz. La energía radiante, al viajar por el espacio se considera como una
perturbación periódica con componentes eléctricos y magnéticos que pueden interaccionar con la
materia.
 Movimiento ondulatorio de la Luz
LA MATERIA
La materia está integrada por moléculas o átomos, y puede presentarse en distintos estados físicos.
Así, por ejemplo, las moléculas pueden estar muy separadas entre sí, como en los gases, o bien
formando aglomerados como en líquidos y sólidos. Las moléculas de un sólido pueden ordenarse
como cristales, tal como sucede con las sales inorgánicas, o distribuirse desordenadamente, como en
la madera. Cualquiera que sea su disposición, las moléculas están en constante movimiento, no sólo
de vibración, sino de rotación y traslación.
En el caso de átomos individuales, los electrones que giran pueden pasar de un orbital a otro, proceso
que requiere un cambio de energía. Tanto la estructura química de las moléculas como su ordenación,
influyen en la forma en que dicha sustancia interacciona con la energía.

PROPAGACION DE LA RADIACION ELECTROMAGNETICA

La radiación electromagnética es un tipo de energía que se transmite por el espacio a enormes
velocidades. Adopta muchas formas, siendo la más fácilmente reconocible la luz y el calor radiante.
Manifestaciones menos evidentes son los rayos X, luz ultravioleta, microondas y las ondas de radio.
Para caracterizar a muchas de las propiedades de la radiación electromagnética, es conveniente
adjudicar una naturaleza ondulatoria a su propagación y describir estas ondas con parámetros como
velocidad, frecuencia, longitud de onda y amplitud. No obstante, en contraste con otros fenómenos
ondulatorios no requiere medio de apoyo para su transmisión y pasa fácilmente por el vacío. Esto nos
indica que la radiación presenta una propiedad ondulatoria
El modelo ondulatorio para la radiación no explica completamente los fenómenos asociados con la
absorción o la emisión de energía radiante; para estos procesos es necesario considerar la radiación
electromagnética como un flujo de partículas discretas de energía llamadas fotones o quantos. Esta
propiedad es conocida como propiedad o modelo corpuscular.
Resumiendo podemos decir que:
1. La radiación electromagnética presenta un comportamiento dual o de tipo doble. Es decir,
presenta un carácter ondulatorio y de naturaleza electromagnética. De acuerdo a la teoría Ondulatoria
la energía se propaga en el espacio a grandes velocidades y en forma de onda.
2. Con diversos fines, resulta conveniente considerara a la radiación electromagnética como un campo
de fuerza eléctrico oscilatorio en el espacio, que está acompañado de un campo de fuerza magnético
dispuesto perpendicularmente. Entonces, las ondas por cual es transportada la energía consisten en
desplazamientos eléctricos y magnéticos que ocurren en forma perpendicular en dirección de la
propagación de la radiación.
3. La teoría corpuscular o energética señala que la radiación es netamente energética porque puede
ser transformada en otra forma de energía; calor y electricidad, luz, magnetismo, etc. En vista que la
naturaleza ondulatoria de la radiación electromagnética no explica los fenómenos de la absorción y
emisión.
4. La energía radiante como pequeños paquetes de energía que toman el nombre de fotones de
propagación ondulatoria y puede caracterizarse por longitud de onda (), frecuencia (), y energía, lo
que demuestra que la energía radiante no es continua, sino que es compuesta por "cuantos", elementos
de energía.
5. La cantidad de energía que tiene cada fotón depende de la frecuencia de la radiación. Esta energía
varía ampliamente de un valor de frecuencia a otro; para fotones de una misma frecuencia tienen la
misma cantidad de energía.
6. La radiación electromagnética, cuyas ondas son todas de una longitud, se denomina
monocromática (un solo color) que significa que la radiación tiene una sola frecuencia, la radiación
monocromática polarizada en un plano, que es el tipo más simple de radiación; polarizada en un plano
significa que la oscilación tiene lugar en un plano del espacio, y sólo en uno y la radiación constituida
por ondas de diferentes longitudes de onda se llaman policromáticas, es decir de varios colores.
7. Las ondas electromagnéticas se diferencian entre si por su longitud de onda y se clasifican en
largas, cortas, ultracortas.

PARAMETROS ONDULATORIOS
Cualquier región del espectro podrá ser identificada por su frecuencia, longitud de onda o por su
unidad de frecuencia.

FRECUENCIA ()
Se le define como el número de ondas u oscilaciones que pasan por un punto fijo en la unidad de
tiempo y se le suele indicar con la letra griega nu (v).
La unidad de frecuencia es el hertz (Hz). Una oscilación o ciclo por segundo es igual a un HERTZ,
por lo tanto, se dice que una frecuencia de 10 6 es igual a 10 6 Hz, o sea un megahertz (MHz).

LONGITUD DE ONDA ()

La letra griega lambda () minúscula representa la longitud de onda. Se le define como la distancia
entre dos crestas adyacentes (o dos valles) de una onda. O también se la define como la distancia en
línea recta medida a lo largo de la línea de propagación entre dos puntos que están en dos ondas
adyacentes. A causa de lo cortas que son las longitudes de onda, se expresan en unidades de
dimensiones muy pequeñas, normalmente la micra (µ), la milimicra (mµ) o el angstrom (Å). Así
como otros tipos de unidades:

1 Å ángstrom = 0,1 mµ = 10 -4 µ = 10-7 mm = 10-8 cm = 10-10 m

10 4 Å = 103mµ = 1 µ = 10-3 mm = 10-4 cm = 10-6 m.
µm = micrómetro = 10-6 metros = 10-4 cm = 1 micrón (µ)
nm = nanómetro = 10-9 metros = 10-6 cm = 1 milimicrón (mµ) = 10 Ao
El nanómetro ha sustituido a la antigua unidad milimicrón (mµ) y el micrómetro ha sustituido la
antigua unidad micra (µ).

UNIDADES DE LONGITUD DE ONDA PARA ALGUNAS REGIONES ESPECTRALES

REGIÓN UNIDAD DEFINICIÓN

Rayos X Ángstrom Ao 10 -10

m

-9
Ultravioleta / visible Nanómetro nm 10 m

Infrarrojo Micrómetro m 10 -6
m

UNIDAD DE FRECUENCIA ().

Se define como el número de ondas por centímetro Es el inverso de la longitud de onda, se expresa
en cm-1 (centímetros recíprocos) esta nomenclatura es muy usada en la región del infrarrojo.
1 1
- = ----- = --------
  cm

REGIONES ESPECTRALES
El espectro de energía radiante o espectro electromagnético es único y continuo y abarca
aproximadamente 20 órdenes de longitudes de onda (o energía). Las ondas electromagnéticas suelen
clasificarse en diferentes grupos, según sea su frecuencia, aunque esta clasificación no permite
establecer unos límites precisos para cada grupo.
Se denomina espectro electromagnético al conjunto de todos los tipos de ondas electromagnéticas,
este espectro electromagnético se divide en varias regiones que son:
1.- Ondas de radio, son las ondas electromagnéticas que se utilizan en telecomunicaciones,
incluye las ondas de radio y de televisión. Su rango de frecuencia comprende desde unos pocos
hercios hasta 1 x 10 9 Hz, distinguiéndose en esta zona diferentes bandas.
2.- Microondas, se utilizan en sistemas de comunicaciones como el radar o la banda UHF de
televisión y también en los hornos de microondas. Su rango de frecuencias comprende desde 1
x 10 10 Hz hasta 1 x 10 11 Hz.
3.- Infrarrojos, son las ondas electromagnéticas que emiten los cuerpos calientes. Tienen
diferentes aplicaciones en industria, medicina, etc. Comprenden la zona incluida entre 1 x 10 11
Hz y 4 x 10 14 Hz.
4.- Luz visible, incluye una estrecha franja entre 4 x 10 14 y 8 x 10 14 Hz. Corresponde a esta
banda las frecuencias que corresponden a cada color.
5.- Ultravioleta, esta banda comprende el rango de frecuencias que va de 8 x 10 14 Hz hasta 1 x
10 17 Hz.
6.- Rayos X, comprende un gama de frecuencias que incluye desde 1.1 x 10 17 hasta 1.1 x 10 19
Hz, se usan en medicina.
7.- Rayos gamma, comprenden las frecuencias incluidas a partir de 1 x 10 19 Hz, son
producidos por numerosas sustancias radioactivas.
 ESPECTRO DE RADIACION ELECTROMAGNETICA

Para el caso de la identificación de las diferentes regiones del espectro se ha utilizado unidades de
longitud apropiadas, cuya magnitud esta acorde con el tamaño de la longitud de onda, así por ejemplo
para el visible usualmente se emplea el nanómetro (nm), eso no impide el uso de unidades ángstrom
(Å). Para el caso de la región del infrarrojo es más frecuente el uso de unidades de frecuencia (cm -1).

ENERGIA DE LA RADIACION ELECTROMAGNETICA

La energía de un fotón es variable y está en función de los parámetros frecuencia y de la longitud de
onda de la radiación. La relación que existe entre la energía de un fotón y su frecuencia viene dada
por:

E=.h (1)
Donde:
E = Energía del fotón
= Frecuencia
h = Constante de- Planck (6,626 x 10 -27 erg.seg).

La velocidad de la luz (C) en el vacío cuando se desplaza es:

C
C=. Pero la frecuencia es:  = -----

Reemplazando en: E = h. 
Se tiene
C
E = ----- h (2 )


Donde:
C= 3 x 1010 cm./seg
 = longitud de onda

De estas relaciones matemáticas se puede llegar a las siguientes conclusiones:

“La energía es inversamente proporcional a la longitud de onda (), y directamente proporcional a la
frecuencia () “
En el vacío, la velocidad de la luz a la cual se propaga la radiación es independiente de la longitud de
onda y alcanza su valor máximo. Esta velocidad, representada por el símbolo C, se ha determinado
que vale tanto en el vacío o en el aire 3 x 10 10cm / seg.
Se demuestra claramente por los cálculos que las radiaciones de menor longitud poseen mayor energía
de ahí su poder de penetración y su capacidad de interacción con la materia. Por ejemplo, calcular la
energía de una radiación cuya longitud de onda es de 425 NM.

E = 3 x 1010 cm / seg x 6.625 x 10 -27 erg-seg/ fotón = 4.676 x 10 -12 erg /fotón
425 NM x 10 -7 cm
1 NM

Para una radiación con longitud de onda de 500 nm, se tiene:

E = 3 x 10 10 cm / seg x 6.625 x 10 -27 erg-seg/ fotón = 3.975 x 10 -12 erg / fotón
-7
500 NM x 10 cm
1 NM

Donde E es la energía en ergios/ fotón. La relación entre las diversas formas de expresar la energía
para una longitud de onda es la siguiente: 1 electrón voltio (e.v.) =1,602 x 10 -12 ergios = 23,066
calorías = 8,0 x 103 cm-1 = 1,25 x 10-4 cm = 1,25 x 104 Å = 1,25 µ

INTERACCION DE LA ENERGIA RADIANTE CON LA MATERIA

Hay varios mecanismos de interacción entre la materia y la energía radiante. Algunos de estos
fenómenos surgen de la naturaleza ondulatoria de la energía radiante, entre ellos tres que tienen
particular importancia en análisis.
La difracción es la modificación que experimentan todas las ondas en movimiento al pasar por los
bordes de cuerpos opacos, al atravesar estrechas hendiduras o agujeros o al ser reflejadas desde
superficies rayadas.
La refracción es el encorvamiento o cambio de dirección de un haz de energía radiante al pasar
oblicuamente de un medio a otro medio de diferente densidad. Este encorvamiento es resultado de la
ligera diferencia en la velocidad de la radiación electromagnética en los medios y de la longitud de
onda de la radiación.
La rotación óptica es el fenómeno por el cual el plano de polarización de la luz polarizada gira
durante el paso de la luz por un medio material. La composición cualitativa y cuantitativa del medio
determina la ocurrencia o no de esta rotación.
Los átomos, iones o moléculas pueden absorber radiaciones si la energía de los fotones es la de las
frecuencias naturales de valoración de los electrones y/o de los átomos en la molécula. Se dice
entonces que la materia que ha absorbido la energía ha pasado a un estado excitado. La relación de la
energía dada anteriormente muestra que la energía de los fotones aumenta con la frecuencia (o decrece
con la longitud de onda). Los fotones de energía diferente, es decir, de energía radiante de distinta
longitud de onda producen efectos diferentes en el material absorbente.

1. Longitudes de onda muy cortas (rayos gamma y cósmicos) pueden dar lugar a
transformaciones nucleares. Las energías son del orden de millones de electrón voltios (mev).
2. Los rayos X producen transiciones de los electrones en las capas internas del átomo, la
absorción de rayos X es, por tanto, independiente del estado de combinación de los átomos. Se
requieren energías de varios cientos o varios miles de electrón voltios.
3. La absorción de radiaciones de las zonas ultravioletas y visible del espectro afecta a los
electrones de la capa externa (de valencia) de los átomos; de aquí que dependa del estado de la
combinación de átomos. Por ejemplo, el ión bicromato es anaranjado, el ión cromato es
amarillo, el cromo (III) verde solvatado en agua y violeta en algunos complejos. Las energías
son del orden de 1 a 25 ev (electrón voltio).
4. La absorción en el infrarrojo próximo altera las vibraciones de las moléculas. Las energías
son del orden de 0,01 a 1 ev.
5. Cuando se absorbe energía en el infrarrojo lejano y en la región de las microondas se
producen alteraciones en la rotación de las moléculas, necesitándose energías bajas del orden de
10 a 10 ev.

El PROCESO DE ABSORCIÓN
El paso de un haz de radiación a través de un medio transparente de un sólido, líquido, o gas va
acompañado de la absorción parcial de aquélla, y que también la absorción de radiación es equivalente
a una absorción de energía. Entonces cuando una molécula absorbe un fotón, la energía de la molécula
se incrementa y se dice que la molécula pasa a un estado excitado. Si una molécula emite un fotón, su
energía disminuye. El estado de menor energía de una molécula se llama estado basal o fundamental.
Cuando un átomo, ión o molécula absorbe un fotón, la energía que recibe da como resultado una
alteración de su estado, se dice que entonces la especie está excitada (estado de excitación), la
excitación es un proceso en el cual una especie química absorbe energía térmica, eléctrica o radiante y
es promovida a un estado de energía superior. La excitación puede consistir en alguno de los
siguientes procesos:

A) CAMBIOS ELECTRÓNICOS
Los electrones en las moléculas, se encuentran girando en niveles de energía bien definidos.
En condiciones normales, la molécula no está excitada y los electrones se encuentran en el
orbital más bajo; se dice entonces que la molécula se encuentra en su estado fundamental.
Si una molécula absorbe suficiente energía radiante, los electrones pasan del orbital más
bajo a otro de energía más elevada; en el nuevo estado tanto la molécula como el electrón
se encuentran excitados.
Cuando los electrones pertenecen a un átomo, la longitud de onda de la radiación está muy
bien definida en una banda de frecuencias muy estrecha, pero cuando los electrones
pertenecen a una molécula, la energía necesaria para promover el electrón a un estado
excitado varía con el tipo de enlace molecular en que se encuentre implicado. Así por
ejemplo, los electrones de enlaces parafínicos exigen más energía que los enlaces no
 saturados, tales como los aromáticos. Por otra parte, a las energías electrónicas se añaden
las de rotación y vibración.
Estos cambios consisten en el cambio de energía de los electrones distribuidos
alrededor de los átomos de la molécula, es la transición de un electrón a un nivel
energético superior provocado por la absorción de radiación.
Los electrones en un átomo ocupan normalmente las orbitales electrónicas de menor
energía. En un átomo de litio, por ejemplo, dos electrones están normalmente en la orbital
1s y uno en la orbital 2 s. este estado electrónico normal de un átomo se designa como su
estado fundamental.
Si se suministra a ese átomo exactamente la cantidad de energía apropiada, el electrón 2 s
puede trasladarse a una orbital 3 s. De igual manera, un electrón 1 s puede ser trasladado a
una orbital de energía más alta. Un átomo que tiene uno más electrones en una orbital de
energía más alta se dice está en un estado excitado.

b.- CAMBIO VIBRACIONAL

Los átomos enlazados que constituyen una molécula vibran de la misma forma que lo
harían dos objetos más grandes. Una molécula puede imaginarse como un conjunto de
átomos unidos por muelles o enlaces químicos. Los átomos pueden vibrar aproximándose
o alejándose, o bien, flexionarse en ángulo recto, la energía asociada con estos
movimientos es la energía vibratoria.
Los cambios electrónicos examinados hasta ahora en conexión con átomos y iones se
producen cuando entra en interacción energía radiante con moléculas. Pero, además, las
moléculas exhiben movimientos de vibración, cada uno de los cuales está asociado
con una cantidad definida de energía. Exactamente lo mismo que hay niveles de energía
discretos asociados con el movimiento de vibración dentro de la molécula, una molécula
puede ser excitada de un nivel de energía vibracional a otro más alto, por la absorción de
un fotón de la cantidad justa requerida de energía.
Por ello, las moléculas absorben preferencialmente fotones cuyas energías corresponden a
las diferencias en niveles de energía vibracionales dentro de ellas. Una molécula excitada
vibracionalmente, al igual que un átomo excitado electrónicamente, vuelve de ordinario
rápida y espontáneamente a su estado normal fundamental, con pérdidas de energía.
La vibración molecular suele ir acompañada de un aumento en la rotación y por ello, en la
práctica, la energía absorbida corresponde a una combinación de energía vibratoria y
rotatoria.

c.- CAMBIO DE ROTACIÓN

Un tercer mecanismo por el cual puede ser absorbida energía radiante por la materia implica los
niveles de energía rotacional de una molécula absorbente. Por ejemplo, en una molécula de
metanol no sólo hay niveles de energía electrónica asociados con todos los átomos, y
movimientos y niveles de energía vibracionales entre cada par de átomos adyacentes, sino que
hay también rotaciones de las moléculas como un todo. Las energías asociadas con estos
movimientos están también cuantizadas, esto es, sólo son posibles niveles de energía
específicos para una molécula dada.
Una molécula absorbente puede ser excitada de un nivel de energía rotacional a otro más alto,
por absorción de un fotón que proporcione precisamente la cantidad de energía necesaria para
ello y una molécula puede volver a su estado normal fundamental, o a uno menos excitado, por
emisión de un fotón de radiación electromagnética.
No todas las clases de moléculas experimentan cambios rotacionales por la absorción de
fotones. Estas absorciones se encuentran con la mayor frecuencia en moléculas que tienen
dipolos eléctricos permanentes o momentos magnéticos permanentes.
Las cantidades de energía asociadas con cambios de niveles de energía rotacional son en
general muy pequeñas comparadas con las transiciones electrónicas y vibracionales. Se
encuentran los espectros de absorción rotacional pura en las regiones infrarrojas lejana y de
microondas del espectro electromagnético.
ABSORCION DE LA RADIACION
Cada una de estas transiciones requiere una cantidad definida de energía; la probabilidad de que
ocurra una transición particular es máxima cuando el fotón absorbido proporciona exactamente la
cantidad de energía necesaria para la misma. En estas circunstancias, la energía del fotón es
transferida a la molécula promoviéndola a un estado de energía más elevada o estado de excitación.
La excitación de una especie M a su estado excitado M .

M + hv ------------>M 
Después de un tiempo muy breve, la especie excitada se relaja a su estado basal, cediendo su energía a
otros átomos o moléculas del medio, este proceso produce un ligero aumento de temperatura en el
sistema, y puede describirse con la ecuación

M ----------- M + calor (hv)

La cantidad de energía necesaria para cada uno de los tipos de transiciones varía considerablemente
entre ellos. En general, las transiciones electrónicas promueven a los electrones a niveles
superiores consumen cantidades de energía mayores que las que precisan para provocar
cambios vibracionales, y éstos a su vez, mayores que las que producen alteraciones en los modos
de rotación. Así, las absorciones que se observan en las regiones de las microondas y del infrarrojo
lejano son debidas a desplazamientos en los niveles rotacionales, puesto que la energía de la
radiación es insuficiente para dar lugar a otros tipos de transición. En cambio, las variaciones de los
niveles vibracionales son responsables de las absorciones en las regiones infrarrojas y visible. Como
que para cada nivel vibracional existen una serie de estados rotacionales, en dichas regiones del
espectro se observa la absorción de grupos de longitudes de onda cuyas energías sólo difieren
ligeramente entre sí. La absorción debida a la promoción de un electrón a algún nivel de energía
superior tiene lugar en las regiones del espectro correspondientes al visible, al ultravioleta y a los
rayos X.
Un ejemplo, de la interacción con la materia en lo que se refiere a la absorción de radiación; es cuando
pasa radiación de luz policromática (blanca) a través de un cuerpo transparente que podría ser
amarilla. El cuerpo dejará pasar la luz amarilla, absorbiendo las demás radiaciones. En otros términos
el cuerpo transparente o no rechaza el color amarillo, razón por lo que el ojo humano percibe esa
radiación cuya longitud de onda corresponde el color amarillo. Para demostrar este hecho, si al cuerpo
supuestamente amarillo se hace incidir radiaciones policromáticas ausentes de la radiación amarilla, el
cuerpo absorbe estas radiaciones y aparece negro. Las frecuencias a colores que han sido absorbidas o
eliminadas por absorción o emisión son en realidad energía electromagnética que se ha transferido a
átomos o moléculas han pasado de un estado de mínima energía (fundamental) a un estado de
excitación o más alta energía.
Este proceso de excitación tiene un periodo de vida muy corto, más o menos de 10 -8 seg. Al volver el
átomo o moléculas a su estado basal, llamado proceso de Relajación, que es un proceso en el que una
especie excitada pierde su exceso de energía y regresa a un estado de menor energía. ( Estado de
relajación), indudablemente tendrá que desprender algún tipo de energía, en su defecto sería
imposible el retorno de estado excitado al estado basal. La energía absorbida por los átomos, iones o
moléculas se disipa rápidamente dentro del material absorbente, normalmente en forma de calor; pero
a veces puede ser emitida como energía radiante como luz, fluorescencia o fosforescencia, etc.

ESPECTROS DE ABSORCION
Espectro viene a ser una especie de imagen de la energía radiante absorbida o emitida por un cuerpo,
cuando interacciona con la materia. El espectro de absorción es una gráfica de porcentaje de
transmitancia, absorbancia, logaritmo de absorbancia o absortividad molar de un analito en función de
la longitud de onda o del número de onda y ocasionalmente de la frecuencia. El espectro de absorción
es una gráfica que indica en que forma la absorbancia depende de la longitud de onda.
Las curvas espectrales son características de la sustancia absorbente y, por tanto, estas curvas pueden
utilizarse para el análisis cualitativo del soluto. Algunas sustancias dan espectros con muchos picos
como los compuestos orgánicos y son mucho más complicados que las inorgánicas.
ABSORCIÓN ATÓMICA
Al incidir radiación policromática visible y ultravioleta sobre una sustancia constituida por partículas
monoatómicas; únicamente son absorbidas algunas frecuencias de esa gama. La relativa simplicidad
de los espectros se debe al pequeño número de posibles estados de energía de las partículas
absorbentes. La excitación solo puede producirse mediante un proceso electrónico en el que uno o
más de los electrones del átomo se promocionan a un nivel de energía superior. Por ejemplo; para el
caso particular del Sodio, al estado monoatómico, absorbe radiación correspondiente a 589,00, a
589,59 nm los electrones del átomo de sodio pasa de un nivel 3s a 3p. Se reduce en un espectro con
un pico fuerte de absorción a esa longitud de onda. La radiación visible y ultravioleta tiene la energía
necesaria para producir transiciones únicamente de los electrones más externos o llamados de valencia
o electrones enlazantes. Por otra parte, las frecuencias de los rayos X son varios órdenes de magnitud
más energética y son capaces de interaccionar con los electrones más próximos al núcleo de los
átomos. Los picos de absorción correspondientes a las transiciones electrónicas de estos electrones
más internos se observan, por tanto, en la región de los rayos X.

ABSORCIÓN MOLECULAR
Los espectros de absorción de las moléculas poliatómicas, especialmente en estado condensado, son
considerablemente más complejos que los espectros atómicos, ya que el número de estados de energía
de las moléculas es generalmente enorme si se compara con el de los átomos aislados. La energía
interna de una molécula en su forma total corresponde a:
E total = E electrónica + E vibratoria + E rotatoria
La energía electrónica corresponde a los electrones de átomos que forman una molécula que
proviene de los estados energéticos de sus distintos electrones enlazantes.
La energía vibratoria corresponde típicamente a la molécula, esto es debido a la energía total
asociada al elevado número de vibraciones interatómicas presente en las especies moleculares. En
general, una molécula tiene muchos más niveles cuantizados de energía vibracional que niveles
electrónicos.
La energía rotatoria corresponde al giro de la molécula alrededor de su centro de gravedad, para cada
estado de energía electrónica normalmente corresponde al giro de la molécula, alrededor de su centro
de gravedad. Para cada estado de energía electrónica normalmente corresponde varios estados
vibracionales de la molécula a su vez para una de estas corresponde numerosos estados rotatorios, el
número de estados rotacionales es mucho mayor que el número de estados vibracionales, as´, para
cada estado de energía electrónica de una molécula, generalmente existen varios estados vibracionales
posibles y, a su vez, para cada uno de estos estados vibracionales, son posibles numerosos estados
rotacionales. En consecuencia, el número de posibles niveles de energía para una molécula es
normalmente de unos órdenes de magnitud mayor que para una partícula atómica.
La mecánica cuántica establece que la energía toma valores definidos que solo pueden ser múltiplos
enteros de una porción más pequeña o "paquete" de energía llamado cuanto. Los cuantos de energía
electrónica son de mayor magnitud que los de energía vibratoria, los de energía rotatoria son menor
que los de energía vibratoria.
E electrónica > E Vibratoria > E rotatoria

La transición electrónica en un átomo es provocada por radiaciones que corresponden al visible,

ultravioleta o radiación X. Las transiciones vibratorias son provocadas por radiaciones que
corresponden a la infrarroja 1 a 15 m.
Las transiciones rotatorias son provocadas por radiaciones que corresponden al infrarrojo lejano a 100
m. Los espectros moleculares se particularizan por bandas de absorción que abarca un gran intervalo
de longitudes de onda porque tiene un buen número de estados vibratorios o rotatorios por cada estado
electrónico.
La radiación visible o ultravioleta puede provocar formación de espectro constituidos por niveles
electrónicos, vibracionales o rotacionales. Es posible conseguir espectros únicamente rotacionales
mediante radiaciones cuya energía no supere 0,1 Kcal. /mol. Asimismo, puede conseguirse espectros
vibratorios pero también rotacionales con radiaciones cuya energía no supere 5 Kcal. /mol. Los
espectros electrónicos atómicos que implícitamente son vibracionales y rotacionales, se producen con
energías superiores a 5Kcal/mol.
CARATERISTICAS DE LOS ESPECTROS
Los espectros atómicos constan de una serie de líneas de resonancia, correspondiente cada línea a una
frecuencia o longitud de onda características. Los espectros moleculares en el visible abarcan una
amplia gama de frecuencias contenidas en una banda de absorción. Esa gama de frecuencias que se
encuentran casi juntas son difícilmente detectadas por el instrumento apareciendo los espectros como
curvas suavizadas. Naturalmente que se hace referencia a la absorción electrónica que implica
absorción vibracional y rotacional. Los espectros moleculares vibracionales exentos de absorción
electrónica sólo muestran radiaciones cuyas longitudes de onda corresponden al infrarrojo, cuya
energía es incapaz de provocar excitación electrónica. El espectro que corresponde a este tipo muestra
un aspecto de dientes o picos de absorción de distancia estrecha una de otra, cada una corresponde a
niveles cuánticos vibratorios. Cuando se ha obtenido un espectro vibracional con sus respectivos
niveles vibracionales junto a cada uno puede aparecer una serie de picos más pequeños cuando se trata
de muestras en estado gaseoso donde es posible conseguir que la molécula rote, caso contrario con
muestras líquidas o sólidas donde para la molécula.

METODOS DE ABSORCION
Estos métodos que tiene como base la interacción de la materia con la energía radiante se basan en la
medición de las longitudes de onda o la intensidad o cantidad de la radiación electromagnética que
absorbe la muestra. Las longitudes de onda que absorbe la muestra y la cantidad de radiación que
absorbe la misma, permiten el análisis cualitativo y cuantitativo respectivamente.
DETERMINACIÓN DEL ORDEN CUALITATIVO
Cuando se pasa a través de una sustancia radiación de una gamma de frecuencias que son capaces de
provocar excitación electrónica, vibración molecular o rotación molecular, ocurre absorción en forma
de bandas de longitudes de onda determinada.
En cada tipo de sustancias los átomos, iones o moléculas absorben con cierta preferencia longitudes
de onda de una determinada gama de frecuencia esto hace que los átomos, iones, moléculas puedan
identificarse mediante la longitud a que se da lugar la absorción.
DETERMINACIÓN DE ORDEN CUANTITATIVO
Cuando se hace pasar una radiación monocromática, el número de fotones absorbidos por la muestra, es
proporcional a la concentración sea de átomos, iones o moléculas. Esta propiedad importante de interacción
permite determinaciones cuantitativas de sustancias en una muestra determinada con muy buena precisión y
gran exactitud. La espectroscopia, en general, ofrece grandes posibilidades analíticas. Todos los métodos se
basan en la interacción de la radiación con todos los componentes de los átomos y moléculas, así como en las
ordenaciones moleculares de la materia. En la figura se resumen los distintos campos analíticos, y sus
respectivos rangos de concentración óptimos para la aplicación de cada uno de ellos, el límite de sensibilidad
de todos los métodos puede ampliarse llevando la concentración al rango adecuado, o bien, utilizando técnicas
conjuntas.
 TABLA DE METODOS ANALITICOS
Método Intervalo Precisión selectividad rapidez costo Usos
aproximado Aproximado principales
MOL/L %
Gravimetrá 10-1-10-2 0.1 Pobre lenta bajo inorgánico
moderada
volumetría 10-1-10-4 0.1-1 Pobre moderada bajo Inorgánico
moderada orgánico
Potenciometría 10-1-10-6 2 buena rápida bajo inorgánico
Voltamperometria 10-3-10-10 2-5 Buena moderada moderado Inorgánico
orgánico
espectrofotometría 10-3-10-6 2 Buena Rápida Bajo Inorgánico
moderada moderada moderado orgánico
Espectroscopia 10-3-10-9 2-10 Buena rápida Moderado Inorgánico
atómica alto multielemento
Cromatografía 10-3-10-9 2-5 Buena Rápida Moderado Orgánico
moderada alto multicomponentes

En la tabla se comparan diversos métodos analíticos que se describen con respecto a sensibilidad,
precisión, selectividad, rapidez y costo.

INTRODUCCION A LA ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION

Los principales métodos de absorción serán tratados en esta parte del análisis espectroscópico.

TERMINOLOGIA UTILIZADA EN ESPECTROSCOPIA DE ABSORCION

La ASTM (American Society for Testing Materials) ha creado una nomenclatura uniforme para
el empleo de términos y símbolos en espectroscopia de absorción. En tabla siguiente se enumeran
en las dos primeras columnas las recomendaciones de la ASTM, la columna tres contiene
símbolos que se consideran en la bibliografía antigua.

SIMBOLOS Y TECNICAS UTILIZADAS EN LAS MEDIDAS DE

ABSORCIÓN

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
TECNICAS Y SIMB. DEFINICION OTROS NOMBRES Y SIMBOLOS
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------
 Poder de radiación P, Po Energía de la Intensidad de la radiación saliente e incidente.

 Absorbancia, A Log Po/P Densidad óptica (D.O), Extinción (E)

 Transmitancia T P / Po Transmisión (T)

 Trayecto óptico L, d. b, en cm .
 Absortividad (a) A /bx c Coeficiente de extinción, Extinción específica
Absorción específica K

 Absortividad molar () A/bxc Coeficiente de extinción molar.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

CONCEPTOS BASICOS
La nomenclatura de conceptos establecidos por la ASTM (American Society for Testing Materials)
son:

a) ABSORBANCIA (A)
Es el logaritmo de base 10 del recíproco de la transmitancia expresado por:

A = Log 101 = - Log 10 T = Log (Po)

T P
-*--------------------------
0.-
Cuando no se absorbe luz, P = P o y entonces A =0, cuando se absorbe 90% de la luz, 10 % de ella se
transmite y P = P o / 10, con esto se tiene A = 1. Cuando solo se transmite el 1% de la luz, A = 2. A
diferencia de la transmitancia, es directamente proporcional a la concentración, es decir, la
absorbancia de un medio aumenta cuando la atenuación del haz se hace mayor.

La luz es
absorbida por
LUZ
LUZ las moléculas
contenidas en
la muestra

b) TRANSMITANCIA (T)
Como consecuencia de las interacciones entre los fotones y las partículas absorbentes, la potencia del
haz disminuye de Po a P. La transmitancia T de la solución, es la relación que existe entre el poder de
radiación transmitida (P) por una sustancia absorbente y el poder de radiación que incide (Po) sobre la
muestra; la transmitancia se expresa con frecuencia como porcentaje

%T= P x 100 %
Po

También se le define como la fracción de la luz incidente que sale de la muestra, por lo tanto, T varía
de cero a uno. La transmitancia porcentual es simplemente 100T y varía entre cero y 100 %

c) TRAYECTO OPTICO (B)

Se le representa por (b) se le llama también camino óptico y es la distancia que la luz atraviesa por la
solución contenida en una celda, es la distancia interior del recipiente que contiene la solución, los
lados de la celda deben ser paralelos y pulidos ópticamente. Se producirá refracción si no es paralela.

d) PODER DE RADIACIÓN
Es la cantidad de energía transportada por un haz de energía radiante que alcanza un área dada de un
detector. Se tiene un haz incidente (Po) y otro saliente o emergente (P)..

e) ABSORTIVIDAD Y ABSORTIVIDAD MOLAR

La luz La luz
transmitida en transmitida en
LUZ
LUZ LUZ
LUZ el sistema es el sistema es
menor a la menor a la
inicial. inicial.
Es la relación entre la absorbancia que presenta la sustancia absorbente y el producto de la longitud de
paso óptico por la concentración. Puesto que la absorbancia es una cantidad adimensional, la
absortividad debe tener unidades que señalan las unidades de b (trayecto óptico) y C (concentración).
Como se verá a continuación, la absorbancia es directamente proporcional a la trayectoria de la
radiación a través de la solución y a la concentración de la especie que produce la absorción.
De acuerdo a la ley de Lambert Beer se tiene que:

A= a b c
A=  b c

Despejando de esta ecuación la absortividad se tiene lo siguiente:

A
a= ---------- = L g -1 cm -1 absortividad específica
bxC

A
 = ---------- = L mol -1 cm -1 absortividad molar
bxC

Donde a es una constante de proporcionalidad llamada absortividad. Resulta que el valor de a

depende de las unidades utilizadas para b y c. Puede tomar las denominaciones de absortividad
específica representada por "a" minúscula cuando la concentración de la sustancia absorbente esta
dada en gramos/litro, miligramos/ mililitro, o miligramos/ litro. Se denomina absortividad molar (  )
cuando la concentración está dada en términos de molaridad (moles/ litro).

LEYES FUNDAMENTALES DE LA FOTOMETRIA

El análisis espectroscópico cuantitativo se basa en la relación entre la cantidad de luz absorbida y la
cantidad de sustancia absorbente. Esta relación, susceptible de demostrarse teóricamente, se observa
de manera experimental en la mayoría de las situaciones analíticas prácticas. La potencia radiante de
un haz o rayo de radiación es proporcional al número de fotones por unidad de tiempo; la absorción
ocurre cuando un fotón choca con una molécula y la lleva a un estado de excitación.
Cuando un haz de luz monocromática pasa a través de una solución que absorbe radiación, parte del
haz fundamentalmente se absorbe. La cantidad de luz absorbida se encuentra bien definida y se ajusta
a ciertas leyes físicas. Así, por ejemplo, si P o es el poder de radiación de un haz monocromática que
incide sobre una solución, y P es el poder de radiación emergente se tiene el siguiente fenómeno que
se representa mediante el siguiente esquema:
La intensidad del haz saliente es significativamente menor que la cantidad del haz que incide sobre la
solución en estudio debido a los siguientes factores:
 POR PÉRDIDAS, desplazándonos de izquierda a derecha, se produce la primera
pérdida por reflexión en las interfaces aire – vidrio. Como muestra la figura en las dos
interfases aire/pared de la cubeta, así como en las dos interfases pared/disolución
tienen lugar reflexiones. Esta pérdida se calcula en función de la siguiente relación:
G-A 2
Pérdida % = [---------]
G-A

G = Indice de refracción vidrio 1,5

A = Indice de refracción del aire 1

Aproximadamente se pierde el 8.5% de un haz por fenómenos de reflexión en su

paso a través de una cubeta en cada uno de las dos interfaces aire - vidrio.
 Se produce pérdidas de algunos fotones de haz a la presencia de pequeñas partículas
de polvo llamadas pérdidas por difracción. Además, la atenuación del haz puede
ocurrir como consecuencia de la dispersión causada por moléculas grandes y, a veces,
de la absorción por las paredes del recipiente.
Para compensar estos efectos, la potencia del haz transmitido por la disolución del
analito se compara, generalmente, con la potencia del haz transmitido por una cubeta
idéntica que sólo contiene disolvente.
 Desde el punto de vista analítico se produce pérdidas de potencia o intensidad, debido
a la absorción selectiva de fotones por la especie absorbente.

Las leyes que gobiernan este proceso de absorción de radiación son denominadas leyes fotométricas o
también se llaman leyes cuantitativas de la absorción..

LEY LAMBERT – BOUGUER

Si en lugar de examinar el fenómeno en términos de la cantidad de luz transmitida, se estudia la
cantidad de luz absorbida, se obtiene una relación en forma distinta. Supongamos que una solución de
concentración unidad y de 1 cm. de trayecto óptico absorbe el 50 % de la radiación de longitud de
onda, que incide sobre ella. Entonces
P = 50 unidades
Po 100

Si se coloca detrás de la primera una segunda solución similar, de 1 cm. de espesor y que absorbe
también el 50 %, sólo 50 unidades de luz inciden sobre ella y, por tanto, emergen 25 unidades. Esta
relación indica que a mayor trayecto óptico disminuye la potencia de radiación transmitida.

Po = 100 50% absorción P1 = 50 50% absorción P2= 25

Haz incidente 1 cm 1 cm haz transmitido

Esta ley señala la relación que existe entre la absorción de radiación y la longitud de la trayectoria a
través del medio absorbente, establece el efecto “espesor” de la cubeta de la muestra llamado también
trayecto o recorrido óptico. Presenta dos enunciados:
 La relación entre la energía radiante incidente (Po) y la saliente o transmitida (P), es
una constante llamada transmitancia.

T=P= %T = P x 100 =
Po Po

 La cantidad de luz absorbida depende de la absortividad del líquido y de la longitud del

trayecto óptico (b) a través de la solución, en el supuesto de que la longitud de onda y la
concentración de la muestra permanezcan constantes.
Donde:
A = a. b = - log T = log Po   A = absorbancia
P a = absortividad
b = trayecto óptico

DIAGRAMA DE LA LEY LAMBERT - BOUGUER

Supongamos que T = P/Po = 0,50 por unidad de trayecto óptico
- Trayecto óptico 0 1 2 3.... n
- Transmitancia 1,0 0,50 0,25 0,125 (0,5)
Se considera que: b= 1 cm

LEY DE BEER
Consideremos un dispositivo óptico donde la radiación incidente, Po, es 100 unidades, la emergente o
transmitido, P1, es 50 y la concentración de la solución 0.1 g por 100 ml. Si se coloca un segundo
recipiente similar en el trayecto de la luz que emerge, la potencia de la radiación, P1, que sale de este
último, es 25 unidades.
Po = 100 0.1 g por 100ml P1 = 50 0.1g por 100 ml P2= 25

Haz incidente b b haz transmitido

Si se cambian ahora las condiciones, de tal modo que el primer recipiente contenga todo el material
absorbente, es decir, que su concentración sea 0.2 g por 100 ml, al medir la potencia de la radiación
que emerge se obtiene un valor de 25 unidades. En consecuencia, para un trayecto óptico dado, la
absorción vendrá dada por la concentración del material absorbente, la absorbancia y la absortividad.

Po = 100 0.2 g por 100ml P1 = 25

Haz incidente b haz transmitido

En 1859, Beer formuló la relación entre la concentración de la especie absorbente y el grado de

absorción. Esta ley relaciona la concentración de la especie absorbente con la radiación transmitida y
la radiación incidente. Su enunciado es el siguiente: “la transmitancia disminuye en progresión
geométrica cuando aumenta la concentración en progresión aritmética”.
Representación:
A = Log Po = Log 1 = - Log T
P T

A=axc c = concentración

La potencia de radiación disminuye conforme aumenta la concentración, la cantidad de energía

disminuye cuando aumenta la concentración.

LEY LAMBERT - BEER

Las leyes de Bouguer - Lambert y de Beer se pueden combinar fácilmente para obtener un expresión
conveniente, al estudiar el efecto del cambio de concentración en la absorción, podemos notar que la
longitud de la trayectoria a través de la solución se mantendrá constante. Se representa por:

A = a b c = Log Po = = Log 1 = -Log T

P T

Donde: A: Absorbancia
a: Absortividad del medio o líquido
b: trayecto óptico
c: concentración
Po = potencia de radiación incidente
P = potencia de radiación transmitida
De acuerdo con la ley combinada Lambert - Beer llamada simplemente Ley Beer, se expresa que: La
absorbancia de una solución está relacionada linealmente con la concentración de la especie
absorbente (c) y con la longitud del trayecto óptico ( b) de la radiación en el medio absorbente.
Esta Ley de Beer es fundamental en los métodos ópticos de análisis, ya que nos permite calcular la
concentración de una sustancia a partir de la medición de la radiación absorbida por una disolución de
la misma y establece que la absorbancia es proporcional a la concentración de las especies
absorbentes. Estas expresiones muestran que existe una relación lineal entre la absorbancia y la
concentración, de una solución dada, supuestas constantes la longitud del trayecto óptico y la longitud
de onda.

COMPROBACIÓN DE LA LEY BEER

No todas las sustancias absorbentes se ajustan a la Ley de Beer, debido a una serie de factores, para
ellos es necesario previamente realizar un estudio de comportamiento de las sustancias frente a la
radiación. Este consiste en preparar una serie de soluciones de concentraciones conocida u
determinado de ellas su absorbancia. Si la curva obtenida presenta linealidad, la sustancia obedece a la
ley de Beer en cualquier concentración.
Para verificar la conformidad con la ley de Beer se confecciona una gráfica de absorbancia o
Logaritmo de la transmitancia frente a la concentración o de porcentaje de la transmitancia frente a la
concentración. Una curva estándar de acuerdo con la ley combinada Lambert – Beer, una gráfica de
absorbancia contra concentración será una línea recta de pendiente igual a b. La ley Beer sólo
describe adecuadamente el comportamiento de la absorción en soluciones diluidas, en este sentido es
una ley límite. Si bien la ley de Beer se mantiene a bajas concentraciones, es frecuente observar
desviaciones a concentraciones más elevadas. No obstante, esta ley es la piedra angular de algunos
campos de espectroscopia de absorción.
Las premisas de la Ley Beer son:
 El único mecanismo de interacción entre la radiación incidente y la sustancia problema es el de
absorción
 Se Utiliza radiación monocromática
 Las especies problemas ( moléculas o iones) actúen independientemente unos de otros
 La absorción estudiada corresponde a un volumen de sección transversal uniforme

APLICACIÓN DE LA LEY DE BEER A MEZCLAS

La ley de Beer se aplica también a las soluciones que contienen más de un tipo de sustancia
absorbente. Siempre que existe interacción entre las diferentes especies, la absorbancia total para un
sistema de varios componentes está dada por:
A total = A1 + A2 + A3…. + An
=  1 b c1 2 b c2 3 b c3  n b cn

Donde los subíndices se refieren a los componentes absorbentes 1, 2,…. N

DESVIACIONES DE LA LEY DE BEER

La relación lineal entre absorbancia y longitud de trayectoria para una concentración fija de sustancias
absorbentes es una generalización para lo cual no se conocen excepciones. Por el contrario, se
encuentran frecuentemente desviaciones con relación a la proporcionalidad directa entre absorbancia y
concentración medidas cuando b es constante.
Algunas de estas desviaciones son fundamentales y representan limitaciones reales de esta ley; estas
ocurren como consecuencia de la manera en que se mide la absorbancia (desviaciones instrumentales)
o como resultado de los cambios químicos asociados con las variaciones de concentración
(desviaciones químicas) o incompetencia del operario para manejar los estándares en forma correcta
(desviaciones personales).
Los errores al aplicar la Ley de Beer son:

Errores Químicos
Efectos debido a sistemas en equilibrio, debe remarcarse que el valor de la concentración C que
interviene en la Ley de Beer corresponde a la concentración de la especie absorbente, como por
ejemplo, equilibrios de dimerización, complejación, y ácido base.
Efectos debido al disolvente, se elige un disolvente de modo que no absorba apreciablemente en
la longitud de onda de trabajo
Efecto debido a impurezas absorbentes presentes en los reactivos, los reactivos químicos
contienen sustancias a nivel de trazas que pueden causar absorbancia debido a lo sensibles que son
los métodos espectrofotométricos. Para ello se emplea la determinación de un “ Blanco”
Efectos debido a interferentes en la muestra, la muestra puede presentar sustancias que absorben
radiación a la longitud de onda elegida, entones de deben eliminar o disminuir estos tipos de
errores.
Cuando un analito se disocia, se asocia, o reacciona con un disolvente para dar lugar a un
producto con un espectro de absorción diferente al del analito.
Por ejemplo: En el siguiente equilibrio:

2 CrO4 -2 + 2 H+ <------- 2 HCrO4 - <______- Cr2O7 -2 + H2O

El ion dicromato absorbe en la región visible a 450 nm. Al diluir una solución de dicromato, el
equilibrio se desplaza hacia la izquierda. El equilibrio puede ser desplazado totalmente,
distribuyendo prácticamente todo el cromo en el CrO 4 -2.

ERRORES INSTRUMENTALES
 El cumplimiento estricto de la ley de Beer se observa sólo cuando la radiación utilizada es
verdaderamente monocromática, esta observación constituye otra manifestación del carácter
límite de esta ley. Rara vez se puede utilizar en forma práctica una radiación limitada a una
sola longitud de onda.
 Son aquellos errores que provienen de la lectura y de la radiación parásita, otros tipos son las
reflexiones en la cubeta o la calibración inadecuada de la longitud de onda. Se considera también
la radiación no monocromática. La radiación parásita es la radiación extraña que llega al detector
y que no provienen de la muestra se da a valores elevados de absorbancia o bajas
transmitancias. Otro error es el control de la temperatura a temperatura ambiente de la muestra
y de los patrones
 La radiación que emerge del monocromador suele estar contaminada con pequeñas cantidades
de radiación dispersa o parásita, la cual alcanza la rendija de salida como resultado de
dispersiones y reflexiones en varias superficies internas. La radiación parásita, con frecuencia
 difiere sustancialmente en su longitud de onda de la radiación principal y, además, puede no
haber atravesado la muestra.

ERRORES PERSONALES
 Utilización y cuidado de las cubetas de absorción, las cubetas deben estar siempre
extremadamente limpias, sin presentar ralladuras, huellas ni adherencias.
 Competencia personal del operador en el preparado de soluciones, ajustes de pH, tiempo de
espera en el desarrollo del color, temperatura etc.
Pero, es muy frecuente encontrar desviaciones a la proporcionalidad directa entre absorbancia y
concentración (cuando b es constante). Algunas de estas desviaciones son fundamentales y
representan limitaciones reales de esta ley, estas ocurren como se ha mencionado como consecuencia
de la manera en que se mide la absorbancia (desviaciones instrumentales) o como resultado de
cambios químicos asociados con las variaciones de concentración (desviaciones químicas).
Algunas gráficas de la Ley de Beer que no son lineales en todo el rango de concentración pueden ser
de los siguientes tipos:
1. La curva no parte del origen (curva A),
Parte del eje de las absorbancia, significa que la curva no pasa por el origen a una concentración cero,
ya que se produce una absorbancia, esto se debe a lo siguiente factores:
* Existen impurezas que absorben radiación a la longitud de onda de trabajo.
* El reactivo colorante absorbe radiación
* Otros reactivos presentan color propio lo que implica una absorción de radiación.

2. La curva no es recta (curva B)

Esta curva se debe a:
 El instrumento no da respuestas lineales
 El sistema químico se altera con la concentración
 El monocromador no opera adecuadamente, puede haber mucha luz dispersada en el
instrumento
Una variedad de curva que corresponde a este tipo es aquella que significa que la ley se cumple
hasta un determinado rango de concentración, puede presentarse una desviación a partir de otra
concentración que puede ser negativo o positivo.

Desviación negativa
Se debe a:
* La luz incidente no es monocromática
* La cantidad de reactivo cromoforo agregado para formar la especie
coloreada no es suficiente para que reaccione con el componente activo.
* A cambios químicos que se produce en el sistema.

Desviación positiva
Es una desviación rara, se da pocas veces y se presenta cuando la sustancia presenta turbidez que
absorbe la radiación; la solución problema debe ser transparente, limpia y homogénea. Estas
desviaciones son positivas o negativas según la curva que se obtiene se desvié por encima o por
debajo de la línea recta.
Otra curva irregular se puede presentar de la forma C y en este caso se debe a :

 El instrumento opera en malas condiciones

 Que es el sistema químico de las sustancias no se encuentra bajo control (variables de pH,
temperatura, tiempo de espera, etc.)
 Incompetencia personal.

ERROR FOTOMETRICO
Las mediciones de porcentajes de transmitancia obtenidas con la mayoría de los fotómetros y
espectrofotómetros están sujetas a incertidumbre a causa de errores al azar (fluctuaciones) en el
funcionamiento normal de estos instrumentos. La reproductividad de los ajustes de control del
instrumento, la constancia de la respuesta del detector y de la intensidad de la energía radiante, la
duplicabilidad en el llenado de la celda espectrofotométrica y en su colocación en la cámara de la
muestra, la estabilidad de todo circuito eléctrico auxiliar y la facilidad para leer el medidor o la escala
del porcentaje de método analítico espectrofotométrico, por ello, una variación o incertidumbre entre
cualquiera de estos factores puede afectar al porcentaje de Transmitancia observado al igual que a la
concentración calculada de la especie absorbente.
La mayoría de los instrumentos comerciales, la incertidumbre absoluta en el porcentaje de
transmitancia queda entre los límites aproximados de 0.2 a 1%. Este intervalo de serie de mediciones
con una solución estándar en que cada medición extrañe un reajuste completo de todos los controles
del instrumento y una nueva porción de la solución estándar, en que cada medición entrañe un reajuste
completo de todos los controles del instrumento y una nueva porción de la solución estándar.
En la curva se puede apreciar la influencia que tiene el error cometido en la medida de transmitancia
sobre el error de concentración. Cuando la transmitancia es grande un error del 1 % en su medida se
refleja poco en la concentración, pero si la transmitancia es pequeña, el error en la concentración será
considerable. El error relativo en la concentración viene dado por la relación:

Error relativo = Error en la medida de la concentración

Valor real de la concentración
La relación entre el porcentaje de error relativo y el error en la medida de la transmitancia, puede
obtenerse de la ley de Beer. El error en la medida de la transmitancia se llama error fotométrico.
Numéricamente se puede escribir que:
Error relativo (%) = dc /c
Error fotométrico (%) dT
Siendo " c " la concentración y " T " la transmitancia; teniendo en cuenta que:
A=abc
Absorbancia = A = log Po
P

Transmitancía T = P
Po

Si se recuerda por la Ley de Lambert - Beer que la concentración de la especie absorbente está en
relación directa y lineal con la absorbancia podemos concluir que estos porcentajes de error en
absorbancia son iguales al porcentaje de error en la concentración del componente desconocido y que
todo ello es resultado de la incertidumbre constante de 1 por 100 en la transmitancia.
Podemos llegar a las mismas conclusiones de manera más rigurosa por combinación de las
definiciones básicas de absorbancia y transmitancia con el siguiente resultado:
A = Log 1
T
Ó
1 1 1
A =- --------- In --- = 0,434 ln ---
2,303 T T

La diferenciación de esta ecuación con referencia a T, da:

dA = _ 0,434
dt T

0,434
dA = - ------ dT
T
Para valorar el error relativo en la absorbancia o de la concentración, es necesario dividir cada
miembro de la expresión anterior por la absorbancia (A) así:

dA = _ 0,434 dt= 0,434 dt

A TA t Log t

Esta ecuación muestra que el error relativo en la absorbancia (dA/ A) está gobernado por la
incertidumbre absoluta en la transmitancia observada (dT) al igual que por la recíproca de un producto
de términos (t y Log t) en que interviene la propia transmitancia. En esta exposición seguiremos bajo
el supuesto de que error absoluto en la Transmitancia es 0,01 de modo que el porcentaje de
incertidumbre es el 1 por 100. Por consiguiente, el error relativo en la absorbancia en porcentaje,
puede calcularse a partir de la simple ecuación.
Error relativo en la absorbancia o concentración por 100= dA x 100 = 0,434 dT
A t log t

Donde:
DA/ A = Error relativo de la absorbancia o concentración
T = Transmitancia
t = Error fotométrico 1% (0.01)
Ahora valoraremos el error relativo en la absorbancia en porcentaje que surge de un error de 1 por 100
en las lecturas de Transmitancia, de 1, 5, 10, 15 20, 30, 40, 50 60, 70, 80, 90, y 95 por 100.
 Al nivel de 1 % de transmitancia
dA/A x 100 = 0.434 (0.01) = - 21.7 %
0.01 Log 0.01
 Al nivel de 5 % de transmitancia
dA x 100 = ________0,434_(0.01)_______ = -6,7 %
A (0,05) Log (0,05)

 Al nivel de 50 % de transmitancia
dA x 100 = ________0,434_(0.01)_______ = -2,9 %
A (0,50) Log (0,05)

 Al nivel de 95 % de Transmitancia

dA x 100 = ________0,434 (0.01)________ = -20,5 %

A (0,95) Log (0,05)

Tabulando estos valores calculados se tiene los siguientes resultados:

% dA/A
% transmitancia t

95
20.51
90
10.54
80
5.63
70
4.00
60
3.26
50
2.88
40
2.73
30
2.77
20
3.10
15
3.51
10
4.34
5
6.70
1
21.70
El hecho de que los signos de los errores estén invertidos no tiene importancia, pues solo nos interesa
la magnitud de estas incertidumbres. Es evidente que un error de 1 % en la Transmitancía puede ser
positivo o negativo y por ende, la incertidumbre de la observancia o la concentración tiene la misma
probabilidad de llevar signo más o signo menos. En la figura se presentan gráficamente los resultados
de una serie de cálculos basados en la ecuación rigurosa, del error relativo por 100 en la absorbancia o
en la concentración en función del porcentaje de Transmitancia. De estos resultados se obtienen tres
importantes conclusiones.
1. El error relativo en la absorbancia o la concentración es mínimo con 36.8 % o sea con una
absorbancia de 0.434.
2. El error es constante dentro de los límites razonables entre 20 y 60 % de Transmitancia,
aproximadamente, esto es con 0,7 a 0,2 unidades de absorbancia. Si la muestra es demasiado
diluida (es decir, t demasiado elevada) es necesario concentrar la muestra por extracción,
evaporación u otro método.
3. El error se vuelve extremadamente grande a cada extremo de la escala de porcentaje de
Transmitancia. Por consiguiente, para efectuar determinaciones cuantitativas de máxima exactitud
habrán de limitarse las lecturas de instrumento al intervalo de absorbancia de 0,7 a 0,2 de unidad.
Esta restricción puede satisfacerse fácilmente por variaciones adecuadas en la longitud del trayecto
óptico de la muestra y el tamaño o volumen de la muestra tomada para el análisis. La manera
inusual de variación de este error surge del hecho de que los instrumentos miden transmitancia,
siendo así que las concentraciones son proporcionales a la absorbancia

4. Porcentaje de error relativo en la absorbancia o en la concentración calculada de la especie

absorbente en función del porcentaje de Transmitancia a causa de 1 por 100 del valor
absoluto en el porcentaje de Transmitancia observado.