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    Proteinas Totales

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    Este documento describe métodos colorimétricos para determinar las proteínas totales y la albúmina en suero. Las proteínas totales se miden reaccionando con una solución de cobre en medio alcalino para formar un complejo violeta, mientras que la albúmina se mide uniéndose a un colorante verde en condiciones de pH adecuadas. Se proveen detalles sobre la técnica, los reactivos, valores de referencia, rendimiento y observaciones.

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    Este documento describe métodos colorimétricos para determinar las proteínas totales y la albúmina en suero. Las proteínas totales se miden reaccionando con una solución de cobre en medio alcalino para formar un complejo violeta, mientras que la albúmina se mide uniéndose a un colorante verde en condiciones de pH adecuadas. Se proveen detalles sobre la técnica, los reactivos, valores de referencia, rendimiento y observaciones.

    Título original

    proteinas totales

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    Este documento describe métodos colorimétricos para determinar las proteínas totales y la albúmina en suero. Las proteínas totales se miden reaccionando con una solución de cobre en medio alcalino para formar un complejo violeta, mientras que la albúmina se mide uniéndose a un colorante verde en condiciones de pH adecuadas. Se proveen detalles sobre la técnica, los reactivos, valores de referencia, rendimiento y observaciones.

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    Este documento describe métodos colorimétricos para determinar las proteínas totales y la albúmina en suero. Las proteínas totales se miden reaccionando con una solución de cobre en medio alcalino para formar un complejo violeta, mientras que la albúmina se mide uniéndose a un colorante verde en condiciones de pH adecuadas. Se proveen detalles sobre la técnica, los reactivos, valores de referencia, rendimiento y observaciones.

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    PROTEÍNAS TOTALES Y ALBÚMINA

    MÉTODOS COLORIMÉTRICOS PARA LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS TOTALES Y


    ALBÚMINA EN SUERO

    SIGNIFICACIÓN CLÍNICA: MUESTRA:


    Las proteínas son compuestos macromoleculares Suero fresco libre de hemólisis. Si no es posible
    que se encuentran disueltos en el plasma o suero y procesar la muestra en el día, la misma puede
    que desempeñan funciones tales como: actúan en guardarse en congelador hasta una semana.
    defensa contra agentes invasores formando los
    anticuerpos; transportan metabolitos, hormonas y TÉCNICA OPERATORIA:
    sustancias relativamente insolubles; actúan como
    elementos estructurales y contribuyen a mantener la Para proteínas totales:
    presión coloidosmótica del plasma.
    Se observan hipoproteinemias en situaciones pipetear en tubos de ensayo:
    patológicas tales como desnutrición, infecciones Blanco Standard
    prolongadas y en casos de pérdidas renales. En Muestra
    estos casos se observa también hipoalbuminemia . Agua destilada 50 ul --- ---
    Las hiperproteinemias se presentan en casos tales Standard --- 50 ul ---
    como el mieloma múltiple, y las hiperalbuminemias Muestra --- --- 50
    ul
    se relacionan con estados de deshidratación.
    Sol. EDTA/Cu 3.5 ml 3.5 ml 3.5
    ml
    FUNDAMENTOS DEL METODO:
    Mezclar por agitación suave e incubar 15 minutos a 37 Cº.
    Las proteínas, al contrario de otros compuestos
    Retirar los tubos del baño, dejar enfriar y leer en las
    nitrogenados (por ej.: creatinina, urea, ácido úrico),
    siguientes condiciones:
    reaccionan en medio alcalino con el ión cúprico - long. de onda: 540 nm o filtro verde.
    para dar un complejo de color violeta que se mide a - cero de abs.: agua destilada
    540 nm y cuya intensidad de color es proporcional a - estabilidad del color: 12 horas
    la concentración de proteínas totales en la muestra.
    La albúmina del suero, en condiciones de pH Para Albúmina:
    adecuado, tiene la propiedad de unirse a través de
    puentes de hidrógeno y fuerzas de Van der Waals, a pipetear en tubos de ensayo:
    ciertos colorantes o indicadores como el verde de Blanco Standard
    bromo cresol, formando complejos coloreados cuya Muestra
    intensidad de color es proporcional a su Standard --- 10 ul ---
    concentración en la muestra. Muestra --- ---- 10 ul
    Sol. VBC 3.5 ml 3.5 ml 3.5 ml
    REACTIVOS PROVISTOS: Mezclar por agitación suave y dejar los tubos durante 10
    Estos reactivos son para USO IN VITRO y estan minutos a una temperatura de entre 15 y 28 ºC.
    listos para usar. Son estables a temperatura Leer en las siguientes condiciones:
    ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en -long. de onda: 625 nm o filtro rojo.
    el envase. -cero de absorbancia: agua destilada
    ♦ Solución EDTA/Cu: solución de ión Cu (II) de 15 -estabilidad del color: 20 minutos.
    mmol/l, EDTA 16 mmol/l, NaOH 1 mmol/l y
    tensioactivo. CALCULO DE RESULTADOS :
    ♦ Solución VBC: solución de VBC en buffer de
    acetato y tensioactivo. * Proteínas Totales:

    PRESENTACION: P.T.g/dl= P.T.g/dl (standard) . A muestra


    # PROTEINAS TOTALES: envase conteniendo 250 ml A standard
    de solución EDTA/Cu. * Albúmina:
    # ALBUMINA: envase conteniendo 250 ml de
    solución de VBC. Alb. g/dl= Alb.g/dl (standard) . A muestra
    A standard

    SOCIEDAD DE BIOQUÍMICOS DE SANTA FE. AVENIDA URQUIZA 2657 -3000 SANTA FE.TE/FAX (0342) 455 2708 .
    e-mail: [email protected]
    VALORES DE REFERENCIA :
    Estos valores corresponden a personas adultas
    sanas con alimentación mixta normal:

    * Proteínas Totales: 6.3 a 8.1 g/dl (63 a 81 g/l)

    * Albúmina: 3.5 a 4.8 g/dl (35 a 48 g/l)

    RENDIMIENTO ANALÍTICO :
    * Imprecisión: al hacer replicados de la misma
    muestra en distintos días, se obtuvieron
    coeficientes de variación del órden de ± 0.51 % para
    la determinación de proteínas totales y del órden de
    1.5 % para la determinación de albúmina.
    * Linealidad: la reacción para proteínas totales es
    lineal hasta 12 g/dl y la reacción para albúmina es
    lineal hasta 6 g/dl.
    * Especificidad: en la reacción para proteínas
    totales no se observa interferencia por hemólisis
    ligera y bilirrubina hasta 100 mg/l y en la reacción
    para albúmina no se observa interferencia por
    hemólisis ligera y bilirrubina hasta 200 mg/l.

    OBSERVACIONES :
    * En la determinación de proteínas totales la
    turbidéz que puede observarse en los tubos durante
    la incubación se debe al tensiactivo del reactivo y
    desaparece luego de unos minutos a temperatura
    ambiente.
    * En la determinación de albúmina el factor para los
    cálculos puede utilizarse si se respeta la
    temperatura de reacción (15-28 ºC).

    BIBLIOGRAFÍA :
    • Doumas B. ; Watson W.; Biggs H.; Clin. Chim. Acta
    31 (1971).
    • Webster D.; Bignell A.; Atwood E.; Clin. Chim. Acta
    53 (1974).
    • Porntip H.; Charoenpol W.; Clin. Chem. 20/5 (1974).

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