Microbiologia General I

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Teora endosimbiotica, dos clulas se ayudan, la teora supone que las mitocondrias y

cloroplastos evolucionaron a partir de bacterias que fueron fagocitadas por una clula
eucaritica ancestral.
Cloroplastos y mitocondrias tienen su propio DNA son organismos independientes.

Louis Pasteur: Vacuna contra la rabia, pasteurizacin, refuta la teora de la generacin


espontnea; fermentacin lctica y butrica.
Robert Koch: Descubre Mycobacterium tuberculosis; desarrollo postulados para
enfermedades infecciosas.
1.- Postulado: El MO patgeno sospechoso debe estar presente en todos los casos de
enfermedad y ausente en animales sanos. (Aislar el agente patgeno).
2.- Postulado: Cultivar al MO y obtenerlo de manera pura.
3.- Postulado: Reproducir la enfermedad (inoculado) a un animal
4.- Postulado: Recuperar al agente patgeno (idntico al original).

CLASIFICACIN DE LOS SERES VIVOS


Taxonoma binomial: Nomenclatura cientfica, nombre cientfico. Es un convenio estndar
usado para denominar los diferentes tipos de organismos (vivos o extintos). Es binomial
debido a que se usan dos palabras para determinar al individuo: la primera, el nombre del
gnero; y la segunda, un epteto latino.
Un taxn es un grupo de organismos emparentados.
Reino
Phylum
Subphylum
Clase
Orden
Familia
Genero
Especie

CLASIFICACIN REINOS
Se basan en varios criterios como la complejidad celular, la reproduccin y nutricin.
Haeckel: 3 Reinos
Reino Protista (Bacterias, levaduras, protozoarios, algas verde-azules, hongos).
Animal
Vegetal
Stainer: 3 Reinos Protista
Inferior: Bacterias (Procariontes), Algas verde azul (cianobacterias).
Superior: Levaduras, hongos, protozoos (eucariontes).
Whitaker 1969 5 Reinos
Animal
Vegetal
Fung
Protista
Monera

DOMINIO WOESE FOX 1978


3 dominios Eukarya, Eubacteria, Archaea.

REINO FUNG
Pared celular a base de quitina
Va de lo unicelular a lo pluricelular
No tiene clorofila
Ambientes hmedos
Preferencia pH acido
Nutricin: Absorcin
Reproduccin: Sexual, asexual o ambas
Hetertrofos (se alimentan compuestos orgnicos)
La mayora produce esporas (esporulacin)
Descomponen la materia orgnica para integrarla. Sirven como alimento, producen
antibiticos, alucingenos, venenos, toxinas (nicotoxinas) algunos producen alimentos
especficos, participan en la fermentacin en la produccin de bebidas alcohlicas.
Saprofitos: cuando se alimentan de materia orgnica muerta.
Patgenos (micosis): Cuando se alimentan de materia orgnica viva.
Hifa es la unidad estructural. Si tiene divisiones Septado. No tiene divisiones cenoctico.
Conjunto de hifas de llama micelio.

FUNGI CLASES

Zygomycota: Hifas cenocticas, hongos saprofitos (mayoria), cuando las defensas


son bajas son oportunistas, presentan estructuras globosas, hifas gruesas,
reproduccin asexual, forman zygosporas. Ejemplos: Smittium sp, Rhizopus sp,
Mortierella sp, Mucor sp, Blakeslea trispora.
Deuteromycota: ms evolucionado, hifas septadas ms delgadas, la gran mayora
son saprofitos y patgenos, algunos producen antibiticos, pluricelulares. Ejemplos:
Alternaria sp, Fusarium sp, Aspergillus sp, Penicillium sp, Cladosporium sp,
Verticillium sp, Microsporium sp, Trichophyton sp, Epidermophyton sp.
Basidiomycota (setas): Pluricelulares, todos son sexual basidiosporas, hifas
septadas, alimentados por absorcin, alimentos alucingenos, venenosos, el micelo
forma el talo. Ejemplos: Agaricomycetes sp, Calocera sp, Cerinosterus sp,
Dacrymyces sp, Dacryonaema sp, Dacryopinax sp, Auricularia sp, Amanita sp.
Ascomycota: Son unicelulares, levaduras (todos), no producen hifas, asexual por
gemacin, sexual ascospora, participan en la fermentacin alcohlica. Ejemplos:
Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, Kluyveromyces sp, Torulaspora sp.

Hongos filamentosos Zygomycota / Deuteromycota


Talosporas (funcin de resistencia) Fragmentacin
Artrospora Artroconidio Forma de cuadros
Clamidospora Clamidioconidio Forma de circulo
Blastospora Blastoconido Forma irregular
Aleuriospora Aleurioconidio Forma regular
Dictiospora Dictioconidio Forma regular

REINO PROTISTA
Eucariota
Mayora unicelular en alguna etapa de su vida
No debe desarrollar tejidos
Alimentacin: ingestin, absorcin y fotosntesis
De vida libre y saprofitos
Hetertrofos y auttrofos
Aerobios y anaerobios
Extracelulares e intracelulares
No se desarrollan a partir de embriones
Asexual o sexual
Pueden poseer uno o ms ncleos por clula
Pueden desarrollar estructuras de resistencia
Reino Protista
Protophyta (vida libre, fotosntesis)
Protozoarios (+Sarcomastigophora{- sarcodina(amebas)
- mastigophora(flagelados) }
+ Ciliophora[ciliada] + apicomplexa[endoparsitos de animales]
Sarcodina (amebas) orgnulo de locacin- seudpodos
Ectoplasma tiene funcin de movilidad
Endoplasma funcin digerir y reproduccin
Fisin binaria-asexual-amebas
Quiste estructura de resistencia
Ejemplos: Entamoeba sp, Trypanosoma cruzi, Trichomonas vaginalis, Giardia lamblia,
Balantidium coli, Plasmodium sp, Amoeba sp, Rhodomonas sp, Goniomonas sp,
Trachelomonas sp, Paramecium sp, Macrocystis sp.

REINO MONERA
Procariontes
Unicelulares
Reproduccin: asexual fisin binaria
Nutricin: Absorcin
Mviles o inmviles
Vida libre, patgenos o comensales
Metabolismo: aerobio, anaerobio
Presentan pared celular la mayora.
Las bacterias tienen 1 cromosoma
Auttrofos las cianobacterias
Ejemplos: Mycobacterium sp, Actinomyces sp, Nocardia sp, Corynebacterium sp,
Micrococcus sp, Escherichia sp, Staphylococcus sp, Pseudomonas sp, Klebsiella sp, Shigella
sp, Serratia sp.

VIRUS
Es una partcula infecciosa submicroscopica, son intracelulares, obligados estrictos,
formados por una cubierta proteica (capside-envoltura) y un cido nucleico dentro del
capside DNA o RNA.
La envoltura tiene doble capa lipdica.
Los virus envueltos son muy lbiles (poco estable).
La membrana celular tiene receptores.
Infectan la clula para replicarse.
CLASIFICACION
Envueltos o desnudos
Especificidad
Por su cido nucleico: DNA y RNA
Bacterifagos: virus que afecta a las bacterias; organoespecificos: virus que ataca al hombre;
tropismo: Especificidad a una clula.

Priones son protenas infecciosas, protenas endgenas (enfermedad de las vacas locas).
Por estmulos se modifican y se vuelven anmalos. Se autoreplican los priones.
Son resistentes a proteasas
Los anticuerpos no le hacen dao
Resisten altas temperatura

Eucariota (Protista,
Caractersticas Procariota (Monera)
fung, animal, vegetal)
Presenta Ncleo NO SI
Tamao PEQUEA GRANDE
Organizacin UNICELULAR PLURICELULAR
Presenta citoesqueleto NO SI
Divisin celular FISION BINARIA MITOSIS O MEIOSIS
PARED CELULAR MEMBRANA CELULAR
Orgnulos NO SI
Cromosomas 1 MAS DE 1

Caractersticas Eubacteria Archaea Eukarya


Estructura procariota
DNA cerrado circulado
Histonas presentes
Ncleo rodeado por membrana
Pared celular Pseudopeptidoglucano
Peptidoglucanos Algunos
s
Masa ribosomal (vel) 70S 70S 80S
Intrones (DNA no expresado)
Plsmidos (porcin

extracromosomica de DNA)
Sensibilidad de los ribosomas a la

toxina diftrica
Sensibilidad a los antibiticos
Crecimiento por enzima de 80 Algunos Algunos (mayora)
Reinos Monera Monera Animal, Vegetal
Fung y protista

MEDIOS DE CULTIVO
Cualquier sustrato natural o sinttico que permite el desarrollo de los MO.

CLASIFICACION
Naturales: alimentos
Sintticos

Consistencia
Lquidos: Contenidos en tubos, botella, matraz, fermentadores.
Semislidos: Tubos
Solidos: Tubos o en placa.
Agar bacteriolgico; Agar, polisacrido extrado de las algas, funde a 92C solidifica a 42C,
no es hidrolizado por la mayora de las bacterias.

Utensilios para sembrar:


Asa
Hisopo
Pipeta
Jeringas
Asa de dridiaski

Medio liquido: siembra por agitacin o punto contacto


Sirven para:
Proliferar mi bacteria
Hacer diluciones
Pruebas bioqumicas o identificacin fisiolgica
Cuantificar bacterias
Prueba de sensibilidad a los antibiticos
Pruebas de desinfeccin

Medio semislido (agar bacteriolgico 0.2-0.4%): siembra con asa recta, picadura hasta las
partes del tubo.
Su principal funcin es de movilidad, sirve para ver fisiologa bacteriana, MIO, SIM, O/F.

Medio slido (agar bacteriolgico 1.5-2.0%): Siembra solo en la superficie (urea de


Cristensen y citrato de simons), o en superficie y picadura (KIA, TSI, LIA).
Funciones: Mantenimiento de cepas, ver pruebas fisiolgicas.

Funciones de sembrar en placa


Aislar y obtener colonias puras
Morfologa colonial (identificar presuntivamente)
Ver hemolisis
Ver reacciones bioqumicas (medios diferenciales)
Cuantificar UFC
Pruebas de sensibilidad a los antibiticos (difusin)
Pruebas de sensibilidad a los desinfectantes (difusin)

Composicin
1. Bsicos: Medios lquidos o solidos tienen los nutrimentos mnimos necesarios para el
desarrollo de MO. Bacterias no exigentes nutricionalmente. Ejemplos: Agar nutritivo,
Agar BHI, Agar soya tripticaseina o equivalentes en caldo.
2. Enriquecidos: Son medios bsicos a los cuales se les agregado nutrimentos
adicionales tales como sangre de ternera, conejo, humano, suero fetal de ternera,
cidos esenciales, vitaminas, suplementos como factor 8, factor 9. Ejemplo: Agar
sangre, Agar chocolate, Agar Lowenstein-Jensen, Agar Columbia.
3. Selectivos: Son medios a los cuales se les han agregado inhibidores para
seleccionar que solo crezca determinado tipo de bacterias y por lo tanto se inhiba el
crecimiento de otros.
Se agregan inhibidores tales como antibiticos, colorantes, modificar el pH, sales
biliares, exceso de cloruro de sodio, azida de sodio, desinfectantes, tensoactivos.
Ejemplos: Agar EMB, Agar MacConkey, Agar Sal y manitol, Agar verde brillante, Agar
SB, Agar Vogel Johnson, Agar endo, Agar chapman, Agar s-110, Agar SS.
4. Diferenciales: Son medios selectivos a los cuales se les ha agregado un sustrato y
por lo general un indicador para poder diferenciar alguna reaccin bioqumica.
Ejemplos: Agar EMB, Agar MacConkey, Agar Sal y manitol, Agar verde brillante, Agar
SB, Agar Vogel Johnson, Agar endo, Agar chapman, Agar s-110, Agar SS.
Todos los medios diferenciales son selectivos pero no todos los selectivos son
diferenciales.
5. Especiales: Pueden ser slidos, semislidos, lquidos; pueden estar en tubo, placas
son llamados pruebas bioqumicas y sirven para evaluar la fisiologa de las bacterias
(para la identificacin).
Ejemplos: Rojo de fenol + lactato, sacarosa, dextrosa, SIM, Gelatina nutritiva, TSI,
KIA

Otras
Transporte: Son medios semislidos principalmente, los cuales contienen sustancias
qumicas para mantener la viabilidad de los MO y prcticamente no tienen
nutrimentos. Ejemplos: Kary blade, Stuar
Enriquecimiento: Lquidos, selectivos, tienen inhibidores que permite el crecimiento y
enriquecimiento en nmero de un grupo determinado de bacterias y por lo tanto inhibe
otras.
Ejemplo: Caldo selenito, tetrapionato caldo, caldo eterico, caldo peptonado.
Bifsicos: Medios enriquecidos que pueden prepararse en matraz, tubo o vasos, fase
slida y liquida.

MORFOLOGIA COLONIAL
Medio de cultivo
Nombre de la bacteria
Tamao
Forma (puntiforme, circular, filamentosa, irregular, rizoide, como huso).
Borde (entero, ondulado, filamentoso, lobulado, rizado, lacerado).
Elevacin (Plana, elevada, convexa, pulvinada, umbilicada, embonada).
Superficie (Lisa, brillante, radial, concntrica, rugosa).
Luz transmitida (Transparente u Opaca)
Luz reflejada (Brillante o Mate)
Color de la colonia
Textura (Seca, viscosa, cremosa, pastosa, algodonosa).
Otros: -Color del medio pigmento hemolisis olor Swarming H 2S Fermentacin.
Cultivo en caldo caractersticas: Turbidez, pelcula, sedimento.
Objetivo de la morfologa colonial: finalidad es observacin presuntiva.

TINCIONES
Colorante: Compuesto qumico que le brinda color a las clulas a las que se les aplica. Se
clasifican:
cidos: Tienen un anin colorido. (Eosina, Fucsina acida, acido pcrico, rojo congo,
naranja G, rosa bengala).
Bsicos: Tienen un catin colorido. (Cristal violeta, hematoxilina, fucsina bsica,
tionina, safranina, verde de malaquita, violeta de genciana).
Neutros: sales de ambos colorantes. (Eosinato de azul de metileno, giemsa)

Composicin qumica: todos tienen anillos aromticos y dobles enlaces. La mayora estn
formados por cromoforo (parte de la molcula que le da el color). Auxocromo (Parte qumica
que se une a la estructura especifica de la clula, sirve como puente).
Fsicos: -Absorcin (grado de soluto que retiene) Adsorcin (Absorcin externa)
Permeabilidad Osmosis Difusin Capilaridad (capacidad de un lquido de subir en
dimetros pequeos).

Tinciones
Simples: Utiliza solo un colorante, para tener un contraste, observar la morfologa
individual del MO.
Diferenciales: Cuando se visualiza ms de un color porque se utiliza mas de un
colorante.
Especiales: Contrasta o resalta un organelo bacteriano.

DIFERENCIALES
TINCION DE GRAM
Fundamento: Se basa en la diferencia entre las paredes celulares de las bacterias Gram
positivas y Gram negativas.
1. Cristal violeta (colorante primario) (Azul de metileno, verde de malaquita, eosina o
algn colorante obscuro).
2. Lugol (mordiente) se fija al colorante y se forma un complejo cristal violeta-I 2
I2 / I- I-3
3. Alcohol-acetona
4. Safranina (colorante secundario) (fucsina)
Solubilizacion de los lpidos de la segunda membrana (Gram negativos) (Rosa).
Se deshidrata la pared y se quedan cerrados los poros con el complejo (Gram positivos)
(morado).
Gram Positivo Rhodococcus
Staphylococcus Clostridium
Micrococcus Lactobacillus
Bacillus Listeria
Corynebacterium Streptococcus
Enterococcus
Gram Negativo Serratia
Escherichia Klebsiella
Shigella Proteus
Salmonella Enterobacter
Pseudomonas Legionella
Neisseria

TINCION DE ZIEHL NEELSEN (ACIDO RESISTENTE)


Fundamento: Se basa en la pared celular de las bacterias acido-alcohol resistentes; el calor
o detergente desestabiliza las ceras.
Presentan un PEPTIDOGLUCANO especial unido a ACIDOS MICOLICOS (lpidos),
GLUCOLIPIDOS Y CERAS a travs de ARABINOGALACTANOS Y ARABINOMANANOS.
Los componentes lipdicos le confieren las siguientes propiedades:
- Carcter hidrfobo
- Resistencia a la desecacin
- Resistencia agentes antibacterianos: cidos, lcalis, detergentes, colorantes.
- Resistencia a la decoloracin por una mezcla de cido y alcohol.

1. Frotis se agrega Fucsina fenicada = Carbolfucsina calentando a emisin de vapores 5


min (se disuelven las ceras y penetra el colorante fucsina).
2. Lavar con agua
3. Decolorar con alcohol-acido hasta eliminar el colorante.
4. Lavar con agua
5. Agregar Azul de metilo 30 seg
BAAR
Kin Youn: Tincin en frio al colorante Carbol Fucsina, se le agrega un tenso activo twin (es un
detergente, que solubiliza los lpidos).

Mycobacterium sp
Nocardia sp
Actinomyces sp
Cryptosporidium

TINCIONES ESPECIALES
Tincin negativa
Para teir la capsula, formada de polisacridos, polmeros de cido glucoronido. Se utiliza
rojo congo o tinta china (es una suspensin particulada).
Fundamento: Las partculas se quedan alrededor.
Tcnica Rojo Congo
1. Colocar una gota de rojo congo y la bacteria en el portaobjetos
2. Hacer una suspensin de la cepa
3. Adicionar mordiente de capsula (hace puentes con la capsula y el rojo congo).
4. Lavar con agua y secar
Klebsiella pneumoniae
Streptococcus pneumoniae
Cryptococcus neoformans
Bacillus anthracis su capsula son polipeptidos de polmeros de acido glutamico

TINCION DE GRANULOS METACROMATICOS


Formados de polifosfatos de cadena larga, granulos de volutina-sinonimo. Tienen diversas
funciones la principal reserva de energa.
Fundamento: Afinidad, los colorantes bsicos tien estructuras acidas.
Corynebacterium sp
Rhodococcus sp

Tincin de Albert
Frotis con el colorante Albert 3-4 min, enjuagar con agua, se agrega lugol, enjuagar con
agua.
Tincin de Loeffler
Frotis con una gota de agua, se agrega azul de metileno 3-4 min enjuagar con agua.

TINCION DE SHAEFER FULTON (ESPORAS)


Para teir esporas; su principal funcin es para resistencia. Son capas proteicas; protenas
termoresistentes. Las esporas son refractiles.
Fundamento: El calor desestabiliza las capas exteriores y permite que entre el colorante por
difusin.
1. Hacer frotis y fijar al calor
2. Agregar Verde de malaquita 8-10 min a emisin de vapores, sin dejar secar el
colorante, enjuagar con agua
3. Agregar safranina
Endo espora y espora libre
Cada clula solo produce una espora.
La bacteria se observa de color rosa y la espora de color verde.
Se puede observar con tincin de Gram.
Bacillus sp Gram positivoAerobia
Clostridium sp Gram positivoAnaerobia

TINCION DE LEIFSON
Tie flagelos. Algunas bacterias tienen organelos de locomocin.
Fundamento: Afinidad qumica acido-base
Proteinasflagelina
Ciliospillina
Solamente los produce en medios semislidos y liquidos
1. Dejar secar, fijar con alcohol
2. Se agrega el colorante de Leifson (-Sulfato de aluminio y potasio Sulfato de amonio
Acido tnico[Mordente] Fucsina basica).
Se depositan las sales de sulfato en el flagelo. Se hace mas grueso el flagelo

Salmonella
Escherichia coli

-Vibrio -Cocobacilos diplococos 2(streptococcus pneumoniae) ttradas 4 Sarcina 8


(micrococcus lysodeikticus) Estreptococo (streptococcus pyogenes) Estafilococos
(staphylococcus aureus) Estreptobacilo (bacillus cerius) Espirilos (treponema pallidum)
CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS POR SUS REQUERIMENTOS FISICOQUIMICOS
TEMPERATURA
Psicrfilas -10-15C Top= 4C
- Flavobacterium sp

- Chlamydomonas nivalis

- Polaromonas vacuolata

-Fragilaria sublinearis

-Micrococcus cryophilus

-Candida scotti

Mesfilas 30-45C Top= 37C


- Staphylococcus aureus

- Escherichia coli

-Neisseria gonorrhoeae

- Enterococcus faecalis

-Trichomonas vaginalis

- Corynebacterium diphtheriae

- vibrio cholerae

Termfilas 45-75C
-Bacillus stearothermophilus

- Picrophilus oshimae

- Chloroflexus aurantiacus

- Thermus aquaticus

- Marinithermus hydrothermalis

-Thermoplasma acidophilum

Hipertermfilas >75C
- Thermococcus celer.

- Pyrolobus fumarii

- Infernus sp

- Methanopyrus kandleri

- Pyrococcus furiosus

- Nanoarchaeum equitans

-Pyrodictium sp

- Staphylithermus sp

PH
Acidofilas: crecen en pH acido.

- Lactobacillus sp

- Helicobacter pylori

-Thiobacillus sp

- Sulfolobus sp

- Gluconobacter sp

-Acetobacter aceti

- Thiobacillus thiooxidans

-Dunaliella acidophila

-Picrophilus oshimae

-Cyanidium caldarium

Neutrofilas: Crecen en pH neutro


- Escherichia coli
- Staphylococcus aureus
- Clostridium sp
- Pseudomonas fluorecens
- Corynebacterium sp
- Streptococcus pyogenes
- Euglena gracilis
- Paramecium bursaria
- Nitrosomonas sp
- Thermothrix thiopara

Basofilas: Crecen en pH alcalino


- Vibrio Cholerae
- Salmonella typhi
- Bacillus firmus
- Microcystis aeruginosa
- Bacillus alcalophilus
- Natronobacterim gregoryi

PRESION OSMOTICA
Halofilos: Microorganismos que requieren del ion sodio para desarrollarse.
-Halococcus sp Salinibacter ruber Dunaliella salina Halomonas sp Flavobacterium sp
Halofilicos discretos: (1-6%)
Halofilicos moderados: (7.5%) Staphyococcus aureus
Halofilicos extremos: (15-30%) Halobacterium salinarum
Halofilo extremo: los que slo crecen cuando la concentracin de NaCl se acerca a la
saturacin (15-30% NaCl)
Halofilo facultativo: crecen en una solucin de NaCl pero no la necesitan (1-6% NaCl)
Halofilo obligado: necesita NaCl para su crecimiento (7.5% NaCl)
Osmofilos: Los organismos capaces de crecer en ambientes con alta concentracin de
azucares se denominas. Penicillium sp, Saccharomyces sp.
Xerfilos: aquellos capaces de crecer en ambientes muy secos. Xeromyces sp,
Metallogenium sp, Pedomicrobium sp
Capnofilico: organismos que requieren pequeas cantidades de CO2 (3-5% CO2).
Neisseria sp, Haemophilus sp

TENSION DE OXIGENO

El oxgeno en los seres vivos sirve como aceptor de electrones.


Aerobios estrictos

- Penicillum notatum
- Aspergillus flavus
- Bacillus sp
- Staphylococcus sp
- Pseudomonas sp
- Mycobacterium tuberculosis

Microaerofilos

- Methanobacterium formicicum
- Spirillum volutans
- Neisseria gonorrhoeae
- Borrelia burgdorferi
- Campylobacter sp
- Helicobacter pylori

Anaerobios estrictos

- Clostridium sp
- Fusobacterium sp
- Anaerococcus sp
- Veillonella
- Actinomyces
- Prevotella
- Bilophila
Anaerobios facultativos

- Escherichia coli
- Salmonella typhi
- Shigella dysenteriae
- Yersinia pestis
- Serratia marcescens
- Klebsiella pneumoniae
- Morganella morganii
- Plesiomonas shigelloides
- Providencia rettgeri
- Buchnera aphidicola

Anaerobios aerotolerantes

- Streptococcus pyogenes
- Propionibacterium acns
- Lactobacillus sp
- Gluconobacter sp
- Microaerophilic streptococci

Para el crecimiento microbiano es fundamental contar con agua para realizar todas las
reacciones bioqumicas y enzimticas. El agua difunde siempre desde una zona de alta
concentracin (baja concentracin de solutos) a una zona de baja concentracin de agua
(alta concentracin de solutos).
La actividad de agua depende de la disponibilidad de sta en el medio ambiente y de la
concentracin de solutos presentes en ella. Por lo que se relaciona bien con las
concentraciones de NaCl.
La disponibilidad de agua que se encuentra libre es necesaria para que las bacterias se
multipliquen. Esta agua que no est comprometida con ningn nutriente recibe el nombre de
actividad de agua (Aw). y se indica con un nmero que va desde 0 hasta 1. Cuanto ms
cercano a cero es ese valor, menos disponible est el agua para las bacterias.

Frasco de mayonesa no es anaerobiosis, quedan pequeas trazas de oxigeno (Microaerofilo)

Una cmara de anaerobiosis es un sistema anaerobio completo que permite procesar


muestras y realizar el aislamiento y la identificacin de bacterias anaerobias, sin exposicin
al aire.
Fundamento
La generacin de H2 y CO2 por medio de una reaccin qumica cuyos sustratos se
encuentran separados en un sobre al cual se le agrega agua, desencadenando la reaccin.

La combinacin del H2 y el O del aire para formar agua generan la anaerobiosis, esta
reaccin se cataliza utilizando granallas de Zinc recubiertas de Paladio (o platino) las cuales
se encuentran depositadas en una canastilla dentro de la jarra.
Una tirilla de papel impregnada en Azul de metileno (azul en presencia de O2, incoloro en
ausencia) introducida en la Jarra es el indicador de Anaerobiosis.
Sobre generador contiene borohidrato sodico, bicarbonato sodico y acido citrico.
Se trata de sobres comerciales que contienen 2 tabletas, una de borohidruro de sodio
(BH4Na) y otra de cido ctrico y NaHCO3. Al agregar agua dentro del sobre se produce la
activacin de las tabletas:
BH4Na + 2 H2O BO2Na + 4 H2
C6H6O7 + 3 NaHCO3 Na3 (C6H5O7) + 3 H2O + 3 CO2
2 H2 + O2 (Catalizador paladio) H2O

CAJA PETRI OXIPLATE


O2 + 2 H2 (O xirrasa) 2H2O

Agar Brewer (Tiene 3 inhibidores)

AGAR TIOGLICOLATO
FUNDAMENTO: Las sustancias reductoras como tioglicolato de sodio y cistena
proporcionan una anaerobiosis suficiente y debido a los grupos -SH- de estos compuestos,
se neutralizan los efectos bacteriostticos de los derivados mercuriales, arsenicales y de
otros metales pesados. La presencia de una baja cantidad de agar, retarda la dispersin de
CO2 y O2.
BACILOS
Gram Positivo COCOS
Gram Negativo
Clostridium sp Gram Positivo Gram Negativo
Peptostreptococcus sp Veillonella sp
Actinomyces sp Bacteroides sp
Anaerococcus sp
Bifidobacterium sp Bilophia sp
Finegoldia sp
Eubacterium sp Fusobacterium sp
Micromonas sp
Lactobacillus sp Porphyromonas sp
Peptococcus sp
Propionibacterium sp Prevotella sp
Mobiluncus sp

Los grnulos metacromaticos son cadenas de polifosfatos inorgnicos.


Membrana celular: (doble membrana). Doble capa lipdica, protenas, es fluida.
Funcin: delimita el espacio exterior del interior, intercambio de sustancias del interior al
exterior y viceversa (sustancias solubles), reguladora de iones (regulador de la presin
osmtica), absorcin y excrecin, conservador de energa. Permeable y bastante selectiva,
anclaje a protenas consecuencia la formacin de porinas, genera energa electromotriz.
Membrana celular, el metabolismo bacteriano se hace en la cara interna, ah se encuentran
todas las enzimas y protenas.

SISTEMAS DE TRANSPORTE DE MEMBRANA


Transporte simple: difusin (no hay gasto de energa)
Translocacin de grupo: sustrato que entra se pega un grupo fosfato (Gasto de
energa y modificacin qumica).
Sistema ABC: La protena se acopla a su sustrato (Solo gasto de energia).
LA permeabilidad est dada por las porinas.
Albumina protena transportadora.

ESTRUCTURA DE TRANSPORTE TRANSMEMBRANALES


Uniportadores
Antiportador
Semiportador

Pared celular esta formada por peptidoglucanos, fosfolpidos

Pared bacteriana, protege a la bacteria de ella misma la presin interna es muy elevada
(evite que la pared se lise). Es ligeramente mas resistentes las Gram positivas.

Flagelos son estructuras que sirven para la movilidad, formados por flagelina, grosor va de
0.01-0.05 m.

Cilios son formados de pillina, sirven para adherencia, llevan a cabo conjugacin.

Capsula material extracelular formado de polisacridos, principalmente acido glucoronido.


La capsula la protege de la fagocitosis.
Bacterias: K. pneumoniae, S. pneumoniae, S. pyogenes, S. typhi, P. aeruginosa, E. coli,
Yersinia pestis, Haemophilus sp, Neisseria gonorrhoeae, Campylobacter jejuni, Bacillus
anthracis, Cryptococcus neoformans.
Esporas son estructuras de resistencia, producidas por Gram positivas (no todas), pueden
sobrevivir durante muchos aos.
Formadas por cidos nucleicos, rico en protenas, pH acido, rico en enzimas, cantidad
mnima de agua. Su metabolismo es latente.
Tiene protenas anhidras que les confiere una gran resistencia, puentes de disulfuro
(resistencia al calor).
Estructura
Corem (citoplasma) centro.
1er capa es la membrana interna
2 capa es la pared celular
3 capa, corteza (cortex)
4 capa, membrana externa
5 capa, cuticula o cubierta proteica
6 capa, exosporio (capa mas externa) muy gruesa

Bacterias: Thermoanaerobacter sp, Clostridium sp, Bacillus sp, Alicyclobacillus sp,


Sporolactobacillus sp, Desulfotomaculum sp, Paenibacillus sp, Thermoactinomyces sp.

Bacterias acido resistente BAAR


Ceras bastantes complejas, cidos grasos de cadenas largas de entre 60-90 tomos de
carbono, tiene lipoarabinomananos con cabeza de manosa peptidoglicanos, glucolipidos,
arabinosa, galactosa, protenas asociadas a la membrana celular as como a la pared celular.
Bacterias: Mycobacterium sp, Nocardia sp, Gordonia sp, Corynebacterium sp (se tie
debilmente), Tsukamurella sp, Actinomyces sp, Rhodococcus sp (Gram positivo y BAAR).
Mycoplasma sp: No tiene pared celular no se tie con Gram ni BAAR.
Virus de la viruela (el virus mas grande 200 nm)

El mecanismo de esporulacin es muy rpido aprox. Entre 15 y 20 minutos si cae en un


medio favorable va a germinar.
MO esporulados: Sporomusa sp, Sporohalobacter sp, Anaerobacter sp, Desulfitobacterium
sp, Amphibacillus sp, Halobacterium sp, Heliophilum sp, Sporosarcina sp.

Caracterstica Gram positiva Gram negativa


Incapaz de retener el
Tincin de Gram Retiene colorante primario
colorante primario
Capa de peptidoglucano Muy grueso hasta 200 Delgada una capa
capas
cidos teicoicos Presente Ausente
LPS (lipopolisacaridos) Ausente Presente
cido periplasmico Ausente Presente
Membrana externa Ausente Presente
Contenido de lpidos y
Reducido En exceso
lipoprotenas
Dos anillos si son
Estructura flagelar 4 anillos
flagelados
Toxinas Exotoxinas (algunos) Endotoxinas
Resistencia a la destruccin fsica Resistente Dbil
Sensibilidad a la lisozima Sensible Resistente
Bastante elevada Toleran los colorantes
Inhibicin por colorantes bsicos
(sensibles) (resistente)
Resistencia a la azida de sodio Elevada Reducida
Resistencia a la desecacin Resistente Sensibles
Capsula Algunos Algunos
Esporulacin Algunos Ninguna

FACTORES DE PATOGENICIDAD FACTORES DE VIRULENCIA


Catalasa Capsula
Hemolisinas Adherencia
Toxinas Colonizacin
Hialuronidasa Invasibidad
Elactasas Reproduccin intracelular
Citolicinas Resistencia a los antibiticos
Coagulasa
Desoxirribonucleasas DNAsas
Ribonucleasas
Colagenasa

CATALASA
2H2O2 (catalasa) 2H2O + O2
Catalasa positiva si hay burbujas, Catalasa negativa si no hay burbujas
Inhibe la destruccin del fagosoma dentro del fagolisosoma.

HEMOLISINAS
ASO y ASS
Las hemolisinas son sustancias que producen lisis de los eritrocitos, mediante la produccin
de poros en la membrana citoplasmtica. Actan sobre la membrana de los eritrocitos. Las
bacterias necesitan el hierro para su desarrollo. Sideroforos protenas que atrapan el hierro. -
Staphylococcus aureus, -Streptococcus pyogenes
-Bacillus Subtilis - Streptococcus mutans

COAGULASA
Coagula el plasma. Produce pared de fibrina alrededor de las bacterias para protegerlas de
la fagocitosis. EVADE LA FAGOCITOSIS POR ENMASCARAMIENTO.

HIALURONIDASA
Tiene elactasa y colagenasa. Neutraliza el cido hianuronico (tejido conectivo). Pase a tejidos
ms profundos. Factor que hace que la clula se disemine, es el principal factor de
diseminacin. S. aureus, B. anthracis, S. pyogenes, S. typhi, E. coli, S. dysenteriae.

TOXINAS
Caractersticas Exotoxina Endotoxina
Quien las produce Principalmente las Gram positiva y Gram negativas nicamente
algunas Gram negativa
Estructura qumica Todas proteicas (proteina) Carbohidratos (LPS)
Excretadas por la bacteria SI NO (se libera cuando se lisa
la bacteria)
Resistencia al calor Termosensibles (sensibles) Termoresistentes
Inmunogenicidad SI, elevada Poco
Produccin de vacunas SI, todas NO
Formacin de toxoides SI NO
Inactivacin con calor SI NO
Inactivacin con formaldehido SI NO

Exotoxina Endotoxina
Botulinica (clostridium botulinum) Colerica (Vibrio cholerae)
Difterica (corynebacterium diphtheriae) Enterotoxina termolbil y termoestable
(Escherichia coli)
Tetanica (Clostridium tetani) Enterotoxina (Salmonella typhi)
Antracica (Bacillus anthracis) Shiga (Shigella dysenteriae)
Estreptolisina O y S (Streptococcus pyogenes) Enterotoxina estafiloccica (Staphylococcus
aureus)
Perfringolisina (Clostridium perfringens) Diarreica y vomitoxina (Bacillus cereus)
ELASTASAS
Hidroliza la elastina, sirve para diseminarse, es un factor de diseminacin.

COLAGENASA
Hidroliza el colgeno, disemina, penetra tejidos.

QUERATINASA
Hidroliza la queratina (piel, uas y cabello)

CITOLISIMAS
Lisan a las clulas, cualquier celula
S. aureus, S. pyogenes, Bacillus sp algunas

LEUCOSININAS
Lisan a los leucocitos. S. aureus, S. pyogenes, P. aeruginosa

FACTORES DE VIRULENCIA
CAPSULA: los MO encapsulados son los mas virulentos inhibe la fagocitosis, evaden la
fagocitosis. La capsula enmascara al receptor.

ADHERENCIA: Se adhieren para permanecer, se adhieren a cualquier celula, rgano.


S. pyogenes protena N para adherirse al epitelio. Cilios de adherencia E. coli y S. typhi

COLONIZACION: (Multiplicacion) proliferacin en el sitio de infeccin.

INVASIVIDAD: La capacidad de un MO para distribuirse de un tejido a otro distante.

REPRODUCCION INTRACELULAR: Evaden el sistema inmunolgico M. tuberculosis se


reproduce dentro de clulas de alveolos. S. typhi, S. dysenteriae, Y. pestis, chlamydia sp, C.
jejuni. P. aeruginosa

RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS: ninguna terapia daa. P aeruginosa es


multirresistente.
FACTOR DE PATOGENICIDAD HACE DAO DIRECTAMENTE.
FACTOR DE VIRULENCIA LA BACTERIA PUEDE PROLIFERAR

CUANTIFICACION
Sirve para:
Concentracion minima
Dosis letal
Dosis infectiva
Limites microbianos
Establecer si un producto alimenticio es apto para consumo
Pruebas del NMP
Pruebas de sensibilidad a los antibiticos
Pruebas de sensibilidad a los desinfectantes

Metodos directos: cuantifica directamente a la bacteria


Metodos indirectos: no se observa la bacteria, se observan productos.
Viable: cuantifica bacterias vivas.
Total: cuantifica bacterias vivas y muertas.

-Filtracion
-Vaciado en placa (Con o
Viable sin diluciones)
-Miles y Mirsa
-Asa calibrada
Directo
-Conteo electronico
-Conteo en camara
(Neubauer y Prettof
Total
Metodos Hausser)
de -Breed (especifico para
cuantificaci leche)
on de MO
Viable -NMP

-Turbidimetria
Indirecto (Nafelometro de MC
Farland)
-Espectrofotometria
Total -Peso Seco, Peso humedo
-Actividad metabolica
(Produccion CO2,
Determinacion de
nitrogeno)
TURBIDIMETRIA: McFarland se realiza una curva estndar a los 10 tubos se les agrega
cloruro de bario (BaCl2) 1% y H2SO4 1%. El BaSO4 precipita. Se lee a 540 nm. Se realiza
una curva patrn con agua.
Restricciones: Tiene que ser liquida, no tiene que tener color, no tiene que tener partculas en
suspensin, tenga muchas bacterias.

VACIADO EN PLACA: fundamento dispercion homognea de bacterias de una muestra


liquida.
Ventajas: Es la mas utilizada, es la mas aceptada (filtracin, turbidimetria, NMP).
Desventajas: Puede contaminarse fcilmente, es tardada, usa mucho material, las clulas se
pueden daar, vaciar agar a temp adecuada, mezclar adecuadamente.

LA MAYORIA DE PRUEBAS ES PARA MUESTRAS LIQUIDAS.

PESO SECO: Enorme cantidad de bacterias

ASA CALIBRADA: Fundamento, Distribucin uniforme de las bacterias, depende del radio de
la asa.
Ventajas: no se tiene que hacer diluciones, no hay restricciones, es fcil de sembrar.
Desventajas: volumen muy pequeo.

NMP: Metodo oficial para anlisis de agua potable NOM 201; es un mtodo muy sensible que
determina coliformes; se usa caldo rojo de fenol mas lactosa; menos de 30 no es
representativo estadsticamente y mas de 300 representa error en el conteo.
Fundamento: probabilidad estadstica de distribuir uniformemente, para distribuirla en los
tubos multiples. Tiene un 95% de confianza. Se pueden usar 9 tubos o 15 tubos Serie 10
(10ml), serie 1 (9ml) serie 0.1 (9.9ml). NMP/100ml
Tubos son positivos (+) cuando A/G A(acido=amarillo), G(gas=burbuja)
Se utilizan las tablas de McCrady
Desventaja: solamente detecta coliformes, utiliza mucho material.

CONTEO ELECTRONICO: Ventajas: rpido, automatizado


Desventajas: no debe haber partculas en suspensin, muy caro
CINETICA DE CRECIMIENTO BACTERIANO
Forma en que se multiplican las bacterias en un medio adecuado con respecto al tiempo.
El tiempo de incubacin de las bacterias es para saber en cuanto tiempo prolifera, cuanto
tiempo se produce el producto.

LEY DEL CRECIMIENTO NATURAL: La velocidad de crecimiento de una poblacin es


directamente proporcional a la poblacin presente en un instante o inicio.
g k
N=N o e kt N=2 g N o =
t 2 Velocidad generacional
2 kt inN N o
t g= g= m=k =
k 2 t

N= # de bacterias
t= tiempo
g= numero de generaciones (la vez que se reproduce el individuo y crea una nueva
desendencia)
tg = tiempo generacional (tiempo que tarda en duplicarse la formacin de bacterias)

TIEMPOS GENERACIONALES
Nombre de la bacteria Temp optima C Tg (hr)
Vibrio natriegens 37 0.16
B. stearothermophilus 60 0.14
E. coli 40 0.35
B. subtilis 40 0.43
Pseudomonas putida 30 0.75
Vibrio marinos 15 1.35
Rhodobacter sp 30 2.2
Mycobacterium tuberculosis 37 6
Nitrobacter agilis 27 20
Treponema pallidum 37 30
Mycobacterium leprae 37 indefinido

CURVA DE CRECIMIENTO BACTERIANO


Representacin grafica de la reproduccin y muerte de bacterias.
FASES VELOCIDAD (K)
A Resago Fase lag 0
B Aceleracion No es K
C Exponencial K
D Retardo No es K
E Estacionaria 0
F Delive/muerte -K

Modelo sincronico; se necesita medio enriquecido ocurre en medio liquido se se logra


sincronizar mantener todas las caractersticas fisicoqumicas optimas

MEDIOS DE CULTIVO CONTINUOS


Medio de cultivo no continuo (no se renuevan los nutrimentos)

DIFERENCIAS ENTRE CULTIVO CONTINUO Y ESTATICO


Cultivo Continuo Esttico
Poblacin bacteriana Constantes Disminuye la velocidad de crecimiento
Nutrientes Constantes Disminuyen
Desechos del metabolismo Se eliminan Se acumulan
Velocidad de crecimiento Controlable No Controlable
Densidad de poblacin Controlable No Controlable

Cultivos continuos (medios cerrados) (lquidos)


Sistema de flujo de volumen constante. Se agrega continuamente medio de cultivo fresco y
se elimina el medio excedente. Los MO estn en crecimiento cte.
Sistemas de cultivo continuo: Turbidostato y quimiostato

En los medios continuos se logra la sincronizacin de las bacterias.


Cultivo se mantiene con coeficientes de crecimiento ctes.
Crecimiento balanceado, composicin celular cte.
Generacin de biomasa cte como productividad

Cuando la velocidad de flujo es muy grande, disminuye la velocidad de crecimiento


bacteriano.
Cuando la velocidad de flujo es pequea, disminuye la velocidad de crecimiento bacteriano.
Ventajas: Proliferacion de MO a una velocidad cte.; Eliminacion de desechos toxicos para
favorecer el aumento del crecimiento poblacional; Costos de operacin y trabajos bajos;
Opera por periodos largos, tiempos muertos bajos.
Desventajas: A velocidades altas se rompe el estado estacionario y el cultivo es lavado del
quimiostato; El medio utilizado contiene todos los nutrientes esenciales en exceso, de forma
que la poblacion crece en una manera similar

IMPORTANCIA DEL AGUA


Actividad del agua: Es la presin de vapor del aire en equilibrio dividido entre la presin de
vapor de una sustancia o solucin y la presin de vapor del agua a la misma temperatura.

ACTIVIDAD DEL AGUA DE DIVERSAS SUSTANCIAS


Actividad de agua Material o Sustancia Ejemplo de bacteria
1 Agua pura Spirillum sp
0.995 Sangre humana Streptococcus sp, E. coli
0.980 Agua de mar Vibrio sp, Pseudomonas sp, bacterias marinas
0.950 Pan Gran variedad de Gram positivas Bacillus sp
0.900 Jamon Staphylococcus sp, Leuconostoc mesenteroides
0.850 Chorizo saccharomyces oxii
0.800 Mermelada Penicillum sp
0.750 Pescado salado Halobacterium sp
Cereales, caramelos,
0.700 xeromyces bisporus
frutos secos

METABOLISMO ENERGETICO (Para producir energa ATP)


Energa libre estndar de hidrolisis de compuestos

Facilidad de liberacin P
fosforilados 6 KCal
Fosfoenol piruvato -14.8
1,3 bisfosfoglicerato -11.8
Acetilfosfato -10.1
ATP -7.3
Glucos-1-P -5
Fructosa-6-P -3.8
Glucosa-6-P -3.3

La CoA, FADH2, NADH, NADHD, GTP, AcCoA son


compuestos de alta energa.

PROCESOS POR LOS CUALES LAS CELULAS OBTIENEN ENERGIA


Fermentacin
Respiracin celular
Fotosntesis
Son vas metablicas. Es una secuencia de rx qumica, catalizadas por enzimas que tienen
lugar en el citoplasma celular principalmente, se libera y se almacena energa proveniente de
molculas orgnicas, mediante una serie de rx controladas y no de forma brusca.

MECANISMOS POR LOS CUALES SE OBTIENE ATP


Fermentacin (Transferencia de sustrato)
Respiracin celular (Fosforilacion oxidativa)
Fotosntesis (Fotofosforilacion) obtencin de ATP por rx redox por medio de energa
solar.

C6H12O6 6CO2 + 6H20 Respiracion celular; oxidacin total libera energa de un


compuesto organico hasta CO2 y H20
En la fotosntesis es al revs no se produce energa
Fermentacion es la oxidacin parcial de un compuesto organico a otros compuestos
organicos (con menos atomos de carbono), se obtiene menos energa; fermentacin
alcohlica, fermentacin lctica, fermentacin actica, Fermentacion butrica, fermentacin
propionica.
2NADH + 8H+ + O2 + 6ADP + 6Pi 2NAD+ + 8H2O + 6ATP
NADH 3 ATP
FADH2 2 ATP

GLUCOLISIS (anapletorica) (Ruta o via Embden-Meyerhof-Parnas)


La glucolisis consta de 2 fases
1. Fase preparatoria, gasta energa 2 ATP
2. Fase de conservacin de la energa, obtiene energa
2 ATP netos
2 NADH 6 TP 8 ATP equivalente/glu
Es un catabolismo parcial de una mol de 6 atomos de carbono de 3 atomos
LOS INTERMEDIARIOS CLAVE SON: Gliceraldehido-3-P, Piruvato, Fosfoenolpiruvato.
FUNCIONES E LA GLUCOLISIS: Oxidacion parcial, obtencin de NADH(reducido) para
incrementar el poder reductor til en la biosntesis (anabolismo). ES UNA VIA CATABOLICA.
Obtencion de aminocidos a partir de los intermediarios, la glucolisis NO SIRVE PARA
OBTENER ENERGIA.
VIA DE LAS HEXOSAS FOSFATO (anapletorica) (Via del fosfogluconato, pentosa fosfato,
derivacin hexosa monofosfato, ciclo de las pentosas, Shunt de las pentosas)
RUTA ALTERNA A LA GLUCOLISIS
INTERMEDIARIOS: Glucosa-6-P, Gliceraldehido-3-P, piruvato
EJEMPLOS DE MO: Bacillus subtilis, E. coli, Leuconostoc, enterococcus faecalis.
Se obtiene 1 ATP neto, se obtiene NADPH 3 ATP a partir de su compuesto oxidado
(NADP+) 4 ATP equivalentes

Unica via metabolica en la que se obtienen azucares de 5 atomos de carbono para la sntesis
de acidos nucleicos.
Las ENZIMAS mas importantes del Shunt de las pentosas: transcetolasa y transaldolasa. La
transcetolasa transfiere grupos de 2 carbonos desde los sustratos de la via de la pentosa
fosfato, as se re-arregla los tomos de carbono que entran en esta va. Transaldolasa
transfiere 3 grupos de carbn y as tambin est implicada en un cambio de los esqueletos
de carbn de los substratos de la via de la pentosa fosfato.

FUNCIONES: Via alterna para reponer intermediarios. No se ha observado en anaerobios.


Esta presente en levaduras y tambin en plantas. Se obtienen azucares con 5 atomos de
carbono. Via multifuncional, porque degrada hexosas, pentosas, la oxidacin de las pentosas
se da por secuencias glucoliticas. El nico que lleva la oxidacin completa de la glucosa
hasta CO2 y H2O. Leuconostoc mesenteroides.

PRODUCTOS QUE SE OBTIENEN A PARTIR DE LOS INTERMEDIARIOS


Clave: GLUCOSA-6-FOSFATO

-Polisacaridos
Fosfato de -Criptofano
pentosa -Ac. nucleicos
-Histidina

-Triptofano
Glucosa-
6-fosfato Fosfato de Corismat -
tetrosa o Fenilalanina
-Tirosina
-Glicina
Sintesis 3-
Fosfatos
de Fosfolicerat Cerina
-Cisterina
de triosa -
lipidos o
Triptofano

RUTA DE ENTNER DOUDOROFF (Anfibolica)


Se obtienen dos NADPH por mol de glucosa, se obtiene 1 ATP neto
LA realizan los sig. Generos bacterianos: Rhizobium sp, Pseudomonas sp, Agrobacterium sp,
Azotobacter sp, Neisseria sp, Xanthomonas sp, spirillum sp.
En bacterias Gram positivas no se ha detectado.
INTERMEDIARIOS CLAVE: Glucosa-6-fosfato, gliceraldehido-3-P, 6-fosfogluconato, piruvato.

VIA DE LA FOSFOCETOLASA (anfibolica) (Warburg-Dickens)


Es la ruta que siguen ciertas bacterias lcticas (especialmente Lactobacillus y Leuconostoc).
La enzima fosfocetolasa rompe el azucar C5 y da lugar a dos ramas que condicen a la
formacin de lactato y etanol en un proceso de feremntacin heterolctica.
INTERMEDIARIOS CLAVE: Glucosa-6-fosfato, 6-fosfogluconato, gliceraldehido-3-fosfato,
ribulosa-5-fosfato, acetilcoenzima A, piruvato
FUNCIONES: via multifuncional por todos sus intermediarios

Gliceraldehido-3-fosfato su funcin es e obtener lpidos principalmente


ACoA no es una molecula energtica sin embargo al ser metabolisada en el ciclo de Krebs
produce 27 ATP equivalentes. Su funcin de la ACoA es producir energa en el ciclo de
Krebs.

CICLO DE KREBS (anfibolica)


Se lleva a cabo en la cara interna de la membrana (ah estn las enzimas). El citoplasma
tiene un pH ligeramente alcalino.
REACCIONES QUE SE LLEVAN A CABO: Condensaciones, deshidrataciones, oxidaciones,
reducciones, descarboxilacion, fosforilacion a nivel sustrato.
INTERMEDIARIOS CLAVE: oxalacetato, -cetoglutarato, succinilCoA, acido oxalacetico.
La glucosa fosforilada ya entra al interior, en el interior de la membrana ya comienza la
glucolisis.
El ciclo de Krebs es para producir energa y es reversible
Balance energtico
15 ATP equivalente. Se obtienen 30 ATP equivalentes / 1 mol de glucosa
Glucolisis produce 8 ATP eq y el ciclo de Krebs 30 ATP eq.
FUNCIONES: Es una via respiratoria, produccin de energa, oxidacin total de la glucosa,
obtencin de ACoA(biosntesis de lipidos), obtencin de succinilCoA, obtencin de NADH y
FADH para incrementar el poder reductor en la via de cadena respiratoria.
El oxalacetato se va por la via fosfoenolpiruvato (gluconeogenesis), el cual es un precursos
de la glucosa.

CICLO DEL GLIOXILATO (anapletorica)


Ciclo de Krebs pero simplificado
FUNCIONES: Es una ruta alterna de reposicion de intermediarios del ciclo de Krebs y no
para obtencin de energa, aunque si se produce energa.
MO que usan esta via usan ac. Grasos o el acetato como nica via. E. coli. Mycobacterium
tuberculosis para sintetizar acidos micolicos.
No se produce piruvato, tampoco oxalacetato por descarboxilacion.

Para que se desarrolle se tiene que inducir la produccin de enzimas de este


ciclo: isocitratoliasa y la malatosintetasa.
El glioxilato se salta los pasos de produccin de CO2.
El acetato como nica fuente de carbono se utiliza para la sntesis de succilato via succimida.
Es til para la conversin neta de grasas en carbohidratos evitando rx de produccin de CO2
que se dan en el ciclo de Krebs.

-OXIDACIN
Es un proceso catablico de los cidos grasos en el cual sufren remocin, mediante
la oxidacin, de un par de tomos de carbono sucesivamente en cada ciclo del proceso,
hasta que el cido graso se descompone por completo.
4 reacciones
1.- Oxidacion 2.- Hiratacion 3.- Oxidacion 4.- Tiolisis
En cada ciclo se pierden 2 atomos de C en forma de ACoA. #ciclos= No de C -1 / 2
En cada ciclo se prouce 1 mol de FADH2(2 ATP) y NADH (3ATP) cada ACoA vale 12 ATP.
Una molecula con 16 atomos de carbono tiene 7 vueltas produce. # ATP total 129 ATPs
(14 ATP) 7FADH2, (21 ATP) 7NADH (96 ATP) 8acetil-CoA -2 ATP por activacin

CICLO DE CALVIN-BENSON (fase de fijacin el CO2 de la fotosintesis)


Consiste en una serie de procesos en los estomas de los cloroplastos de los organismos
fotosintticos.
En el ciclo de calvin se integran y convierten molculas inorgnicas de CO2 en molculas
organicas sencillas a partir de las cuales se formara el resto de los compuestos bioqumicos
que consituyen a los seres vivos. Se puede denominar como asimilacin del carbono.
Enzima RuBisCo.
3 fases: 1.- Fijacion del carbono 2.- Reduccion 3.- Regeneracion
Se consumen 3 ATP en el ciclo de Calvin

FERMENTACIONES
Todas las fermentaciones provienen del piruvato, se realizan por MO especficos asi como
enzimas especificas.
DESINFECTANTES
Los bactericidas son de accin irreversible, los bacteriostticos sonde accin reversible.
Alcoholes: Desnaturalizan protenas, lesionan membranas, la longitud de cadena y masa
molecular son mas efectivos, son menos solubles.
EtOH 100% es impermeable, no puede entrar a la membrana mientras que al 70% es mas
efectivo, ya que al tener agua entra por la membrana.
Fenoles: Mecanismo de accin lesin de la membrana celular e inactiva enzimas y protenas.
Cobre inhibe esporulados pero es muy toxico.
Grupos sulfihidrilos de las protenas mecanismo de accin quelacion entre el metal

CARACTERSTICAS DEL DESINFECTANTE IDEAL


Ningun agente quimico antimicrobiano solo es el mejor para uno o todos los propsitos. Si
hubiera un desinfectante ideal, tendra que poseer un conjunto de caractersticas
extraordinarias.
1. Actividad antimicrobiana
2. Solubilidad
3. Estabilidad
4. No deber ser toxico al hombre u otros animales
5. Homogeneidad
6. No deber reaccionar con material orgnico o extrao
7. Toxicidad para los microorganismos a la temperatura ambiente y a la del cuerpo
8. No deber corroer ni teir
9. Capacidad de penetracin
10. Propiedad desodorante
11. Capacidad detergente
12. Disponibilidad

SELECCIN DE AGENTES QUMICOS ANTIMICROBIANOS


Se tienen que considerar los siguientes factores en la seleccin de agentes qumicos
antimicrobianos:
Naturaleza del material que ser tratado
Tipo de microorganismos
Condiciones ambientales

PRINCIPALES GRUPOS DE AGENTES QUIMICOS ANTIMICROBIANOS


1. Fenoles y compuestos fenlicos
2. Alcoholes
3. Halgenos
4. Metales pesados y sus compuestos
5. Colorantes
6. Detergentes
7. Compuestos de amonio cuaternario
8. cidos y lcalis
9. Glutaraldehido
10. Quimioestabilizadores gaseosos (oxido de etileno, beta-propiolactona, formosi)

Se pueden clasificar de acuerdo a la capacidad de desinfeccin:

GRADO ALTO: destruyen toda clase de organismos con excepcin de esporas bacterianas.
GRADO INTERMEDIO: destruyen microbacterias, bacterias y la mayora de virus y hongos.
GRADO BAJO: destruyen la mayora de las bacterias, algunos hongos y algunos virus.

MECANISMOS DE ACCION DE LOS AGENTES QUIMICOS


Los agentes qumicos actan de manera primaria por uno de los tres mecanismos:
1. Rotura de membranas celulares
2. Modificacin de las protenas
3. Modificacin de los cidos nucleicos
EVALUACION DE LOS DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS
Las tcnicas de laboratorio para evaluar los agentes qumicos antimicrobianos siguen uno de
tres procedimientos generales. En cada una el agente es probado contra un microorganismo
seleccionado al que se le denomina microorganismo de prueba.
1. Tcnica de dilucin en tubo
2. Tcnica de dilucin en placa de agar
3. Mtodo del coeficiente fenlico

REVERSION DE LA ACCION ANTIMICROBIANA


La accin bacteriosttica es reversible por definicin. Esto puede lograrse de varias maneras:
Eliminacin del agente
Reversibilidad por sustrato
Inactivacin del agente
Proteccin contra la lisis

ANTIBIOTICOS

En relacin con el tipo de microorganismo que inactivan, se pueden denominar:


antimicrobianos, antivricos, antiprotozoarios y antifungicos.
Antibitico: Son las sustancias qumicas producidas por microorganismos y que poseen
accin bacteriana (actan contra bacterias).
Quimioteraputico: Compuestos obtenidos por sntesis qumica y con caractersticas
antibacteriana.
Antimicrobiano: Incluye compuestos obtenidos a partir de microorganismos y los producidos
por sntesis qumica, muchos antibiticos se pueden obtener por sntesis despus de su
caracterizacin.

MECANISMO DE ACCION
Los antimicrobianos ejercen su accin en forma especfica sobre alguna estructura o funcin
del microorganismo a atacar. Esta actividad la realizan a concentraciones muy bajas, y al
producir pocos efectos secundarios puede utilizarse en el interior del organismo humano y
adems presentan una toxicidad selectica, es decir, una mnima toxicidad para las clulas del
organismo.

CLASIFICACION DE LOS ANTIBIOTICOS


Existen diferentes criterios para agrupar a los antibiticos, segn se describe a continuacin.

1.- POR SU EFECTO ANTIBACTERIANO


BACTERIOSTATICO: Impiden el desarrollo y multiplicacin de las bacterias sin
destruirlas, por lo que su efecto es reversible, cuando se retira el antibitico, la
bacteria se multiplica de nuevo.
BACTERICIDAD: Su accin es total, produciendo la lisis bacteriana, con efectos
irreversibles. El prototipo de agentes bactericida lo constituyen los que actan sobre la
pared celular de la bacteria o sobre la membrana citoplasmtica.

2.- POR SU ESPECTRO


a) DE AMPLIO ESPECTRO: Aquellos antibiticos que son activos sobre un numero
amplio de especies bacterianas, por ejemplo la Tetraciclina.
b) DE ESPECTRO INTERMEDIO: Cuando tiene accin sobre un nmero limitado de
especies, por ejemplo los Macrolidos.
c) DE ESPECTRO REDUCIDO: Solamente son activos sobre un pequeo nmero de
especies bacterianas, por ejemplo los Glucopeptidos.

3.- POR SU ESTRUCTURA QUIMICA


Esta clasificacin se fundamenta en la estructura qumica que sirve como esqueleto del
antibitico, por ello la lista resulta ser algo larga:

Beta lactamicos Penicilinas


Cefalosporinas Nitroimidazoles
Monobactamicos Polipeptidicos
Carbapenemos Quinolonas
Aminociclotioles Rifampicinas
Aminoglicosidos Sulfonamidas
Anfenicoles Tetraciclinas
Glucopeptidos Sinergistinas
Lincosamidas Macrolido
Nitrofuranos
4.- POR SU MECANISMO DE ACCION
El efecto antibacteriano sobre algunas de las siguientes estructuras o funciones
bacterianas.
a) Impidiendo la sntesis de la pared bacteriana
b) Alterando la permeabilidad de la membrana citoplasmtica
c) Inhibiendo la sntesis proteica
d) Bloqueando la sntesis de cidos nucleicos
e) Interfiriendo las vas metablicas

A y b (bactericida) c, d y e (bacteriosttico)
PRUEBAS DE SENSIBILIDAD
Las pruebas de laboratorio de sensibilidad a los antibiticos se dividen en dos
categoras:
a) PUEBAS DE DIFUSION: El microorganismo aislado y puro que se va a estudiar,
se siembra sobre la superficie de una placa de agar Muller-Hinton conociendo la
concentracin de bacterias que se siembra, se aplican discos de papel filtro que
contengan concentraciones diversas de los antibiticos a probar. Tras la
incubacin de 24 horas se observan y se miden la zona de inhibicin de
crecimiento alrededor de cada disco. El resultado se registra como S (sensible), I
(intermedio) o R (resistente).
b) PRUEBAS DE DILUCION: Se puede conseguir una estimacin ms cuantitativa
de la sensibilidad de una bacteria a un antibitico realizando una prueba de
Concentracin Inhibitoria mnima (CIM), es decir, la concentracin ms baja que
inhibir in vitro el crecimiento de la bacteria a prueba.
Estas pruebas pueden realizarse en una microplaca y forman la base de los
sistemas de pruebas de sensibilidad automatizados.
Otra ventaja de una prueba de CIM es que puede extenderse para determinar la
Concentracin Letal Mnima (CLM), la cual es la concentracin ms baja de un
antibitico necesaria para matar a las bacterias.

COMBINACION DE ANTIBIOTICOS
Los pacientes hospitalizados o ambulantorios, reciben con frecuencia ms de un agente
antibacteriano los cuales pueden interactuar entre si y tambin con otros frmacos,
como los diurticos, las combinaciones de antibiticos pueden ser:
a) SINERGICOS: Si la actividad es mayor a la suma de las actividades individuales.
b) ANTAGONICO: Si la actividad de un frmaco se ve reducida por la presencia de
otro.
c) ADITIVO: Si el efecto de ambos antibiticos combinados, es igual a la suma de
los efectos individuales.

Las pruebas de dilucin y difusin permiten estudiar la accin de combinaciones de


antibiticos.
Mueller Hinton Agar

Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la prueba de


sensibilidad a los antimicrobianos. Adems es til con el agregado de sangre para el
cultivo y aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.

Antibiograma la difusin es el fundamento.


USO Y ABUSO ANTIBIOTICOS
Resistencia
Mercado ilegal
Automedicacin
Tratamientos interrumpidos
No cumplimiento teraputico
Engorda de animales
Todos los anteriores selecciona cepas multirresistentes

MECANISMOS GENETICOS DE INTERCAMBIO DE DNA ENTRE BACTERIAS

-Conjugacion
-Trasformacion
Cromosomicos
-Transduccion
Seleccionar
cepas Mecanismos -Transposicion
multirresistente geneticos
s
Extracromosom
Mutaciones
icos

LA CONJUGACION BACTERIANA es la transferencia de informacin gentica, DNA


forneo a una bacteria receptora del mismo genero.
TRANSDUCCION: Es la transferencia de material gentico de una bacteria a otra
mediante fagos definidos (por medio de virus que infectan)

TRANSPOSICION: Segmento de DNA en el cromosoma o en el plasmido, puede


cambiar de lugar, se traduce a una protena.

MUTACIONES: Cambio de la informacin gentica, provocada por un simple cambio de


base o mas pueden ocurrir espontneamente (errores en la sntesis de DNA) inducidos
por agentes fsicos o qumicos y pueden producir una mutacion puntual o no (una
base).

MUTAGENOS QUIMICOS
ANLOGOS DE BASE MECANISMO DE ACCIN
5-Bromouracilo Es incorporado como una tiamina y tiene
un falso apareamiento con la guanina.
2-aminopurina Se incorpora a una adenina pero se va
aparear con la citosina.

COMPUESTOS QUE REACCIONAN CON EL DNA


El acido nitroso (H2NO2) Desamina a Adenina y citosina ocasionando
apareamientos errneos
Hidroxilamina (NH2OH) Reacciona con la citosina provocando que
guanina-citocina cambien A-T
AGENTES ALQUILANTES
Metil metano sulfonato Introduce un metilo en la guanina ocasionando
que se apare con la timina.
Mostasa nitrogenada, micomicina Provoca que haya entrecruzamiento de las
Microguanidina, nitrosoguanidina cadenas de DNA, provocando mutaciones
puntuales y de lesin

COLORANTES INTERCALANTES
Acridinas y Bromuro de etidio Incersion entre dos pares de bases
(es mutagenico)

RADIACION
Ultravioleta Forma dimeros de T en la misma de DNA

Con esa informacin que han adquirido las bacterias o modificado pueden hacerse
resistente a antibiticos, desinfectantes, plaguicidas, a iones metlicos, sintetizar
capsula, sintetizar toxinas que antes no podan, producir pigmentos, degradar
herbicidas, pueden hacerse mas virulentos, produce hemolisinas, utilizar sustratos que
antes no podan degradar.

MECANISMOS DE RESISTENCIA A LOS ANTIBIOTICOS


Produccion de -lactamasas (penicilinasas) BLEES (Betalactamasa de efecto
extendido)
Modificacion qumica del antibitico, pueden fosforilarlo, degradando ATP, metilar,
acetilar, o reducir u oxidar al antibitico (pierde su actividad).
Produccion de bomba de expulsin
Disminucion de la permeabilidad hacia el antibitico
Produccion en exceso de la protena diana (blanco) Proteina es inhibida por el
antibiotico
Produccion en exceso del metabolito por el cual compite el antibitico (Las sulfas
y el PABA)
Produccion de una ruta alterna que se salte la enzima inhibida
Modificacion de la enzima blanco o disminucin de esta por el antibitico
Cambio en el sitio de unin ribosomal del antibitico
Mayor produccin de enzimas alteradas que todava mantengan cierto % de
actividad.
Produccion de protenas ribosmicas alteradas resistentes a errores de lectura
en presencia de estreptomicina
Resistencia inata o natural, ya la tiene la bacteria
Control
Control de antibiticos
Hacer realmente pruebas, antibiogramas
Llevar el tratamiento completo
No automedicarse
Que solo sea uso terapeutico

MICROBIOLOGIA MEDICA
MO patgeno para que puedan actuar necesitan de un hospedero suceptible,
desarrollarse, dosis infectiva, temperatura corporal (mesofilos), condiciones de nuestro
sistema inmunolgico.
Hasinamiento
Taenia solium . cisticercosis
Patogene estricto aquel organismo que siempre va a causar dao a un hospedero
Mycobacterium tuberculosis
Todos los virus son patgenos: influenza, herpes, papiloma, VIH.
Protozoarios: entamoeba histolytica

INDICADORES MICROBIOLOGICOS
Clostridium perfringens, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae

El grupo coliforme est formado por los siguientes gneros:

1. Escherichia

2. Klebsiella

3. Enterobacter

4. Citrobacter

Colonia: masa celular visible formada por un solo tipo de bacterias.


Morfologa colonial: Es el aspecto fsico visible que presenta la colonia.
UFC: Es una clula viva y aislada que produce una colonia en un breve lapso de
tiempo.
Cepa: Coleccin de bacteria de un solo tipo.
Plasmlisis: Al encontrarse en un medio ms concentrado, el agua sale de las clulas,
por lo que los organismos se desecan y mueren. (La clula se deshidrata).
Plasmoptisis: Lo contrario a plasmlisis. Sucede al encontrarse en un medio mas
diluido como agua destilada, aqu el agua penetrara al interior, dilatndola hasta
reventar. (Lisis) ruptura.
Turgencia: Cuando est en una solucin isotnica.
Porinas: canales donde pasan las molculas.
Patogenicidad: Es la capacidad que tiene un MO de producir dao en un hospedero
sensible (cualitativo).
Virulencia: Es el grado de dao que causa ese MO en un hospedero sensible
(cuantitativo).
Enzima: protenas que catalizan reacciones qumicas en los seres vivos.
Toxina: Sustancias capaces de causar daos en el organismo.
Toxoide: Forma atenuada de la toxina, no causa dao pero estimula el sistema
inmunolgico. Toxina inactivada.
LAS TOXINAS SE INACTIVAN CON CALOR Y SE FORMAN LOS TOXOIDES.
Endotoxina: Toxinas presentes en las membranas externas de algunas bacterias que
solo se libera despus de la destruccin de la pared celular.
Exotoxina: Toxina secretada extracelularmente por un MO.
Ruta anfibolica: es una ruta central de gran relevancia.
Ruta anapletorica: Es una ruta de reposicion de intermediarios

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