SISTEMA DE GESTIÓN DE LA CALIDAD CODIGO: OXILAB-5-IT-005

EDICION Nº 1
FECHA: 01-06
OXIALQUILADOS VENEZOLANOS,
REVISION Nº 0
C.A.
FECHA. 01-06

INSTRUCCIÓN DE TRABAJO OXILAB-5-IT-005

Determinación de Fenoles
SM-4500-P-C

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR::

Tomás Rodríguez Albertina Ferreira Alix Guerrero
CARGO: CARGO: CARGO:
Técnico de Laboratorio Jefe de Laboratorio Gerente de Laboratorio
FIRMA: FECHA: FIRMA: FECHA: FIRMA: FECHA:

CAUCIÓN
El presente Documento es propiedad integral de Oxialquilados Venezolanos, C.A., por consiguiente, el
personal responsable a quien se le suministre copia del mismo, debe cumplir con la siguiente normativa: (a)
No puede ser enmendado, dado que toda corrección debe ser tramitada a través del Líder QSHA; (b) No
puede ser fotocopiado o impreso sin la debida autorización del Líder QSHA; (c) No puede ser trasladado
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específica y permitir su fácil acceso por parte del personal usuario
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Tabla de Contenido

TABLA DE CONTENIDO.......................................................................................................... 2
CONTROL DE CAMBIOS.................................................................................................. 3
1. ASPECTOS GENERALES 4
1.1. ALCANCE Y APLICACIÓN...........................................................................................4
1.2. FUNDAMENTO.......................................................................................................... 4
1.3. RESPONSABILIDADES...............................................................................................4
1.4. INTERFERENCIAS...................................................................................................... 4
1.5. PRECAUCIONES DE SEGURIDAD................................................................................4
1.6. EQUIPOS Y MATERIALES...........................................................................................5
2. DESCRIPCIÓN DE LA INSTRUCCIÓN 6
2.1. ANÁLISIS DE LA MUESTRA........................................................................................7
2.2. PROCEDIMIENTO DE OPERACIÓN ESPECTROFOTÓMETRO SHIMADZU:..........................8
2.3. CÁLCULOS............................................................................................................... 8
2.4. VERIFICACIÓN:......................................................................................................... 9
2.5. EXPRESIÓN DE RESULTADOS:...................................................................................9
3. CONSIDERACIONES ADICIONALES 9
3.1. PRECISIÓN............................................................................................................... 9
3.2. INCERTIDUMBRE DE LA MEDICIÓN..............................................................................9
3.3. TIEMPO DE ANÁLISIS:................................................................................................9
3.4. Referencia.............................................................................................................. 9

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CONTROL DE CAMBIOS
REV. FECHA PÁGINAS
DESCRIPCIÓN GENERAL DEL CAMBIO
NO. EDICIÓN AFECTADAS

0 1 Todas Emisión inicial

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1. ASPECTOS GENERALES

1.1. Alcance y Aplicación

La reacción de vapores destilados de compuestos fenólicos con 4-
aminoantipirina a pH 7,9 +/- 0.1 en presencia de Ferrocianuro de potasio formara
un sólido seco coloreado de antipirina. Este sólido es guardado en solución
acuosa y la absorbancia es medida a una longitud de onda 500 nm.
La mínima cantidad detectable es 1 g de fenol con celda de 5 cm y 100 ml de
destilados son usados y 10 g de fenol para celda de 1 cm.

1.2. Fundamento

Los compuestos fenólicos destilables reaccionan con el 4-aminoantipirina a pH

7,9+/-0,1 en presencia de ferrocianuro de potasio, para formar una solución
coloreada de antipirina, cuya absorbancia es medida a una longitud de onda de
500 nm.

1.3. Responsabilidades
TÍTULO DEL CARGO TIPO DE RESPONSABILIDAD

Analista de Laboratorio Ejecución del método descrito en esta Instrucción.

Coord. Técnico del Laboratorio Control de la Aplicación de esta Instrucción.
Jefe de Laboratorio Ambiental Aprobación de los resultados de la ejecución del método.
Coordinador de la Calidad Actualización continua de este Documento.

1.4. Interferencias
Las interferencias más comunes son las generadas por las bacterias
degradadores de fenoles, agentes oxidantes o reductores y pH alcalinos, estas se
superan acidificando con ácido fosfórico 10% 2 ml/L de muestra. Se debe
destacar que las condiciones de análisis, su previa destilación minimizan estas
interferencias.

1.5. Precauciones de Seguridad

Riesgos Precauciones tomadas
Dudas en acciones de trabajo Siga los procedimientos de trabajo y/o
pregunte a uno o mas personas que
conozcan sobre el tema.
Piense, analice la situación, luego actúe.

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Vea primero hacia donde va, observe que

el area este despejada, mantener el area
Caida al mismo nivel, heridas y
de trabajo despejada, en orden y
golpes
limpieza.

Utilice los equipos de seguridad, guantes,

lentes, batas.
Si tiene alguna duda verifique los MSDS
de los reactivos, materiales: Fenol, KBr,
Contacto con reactivos quimico, KBr3, Na2S2O3 5H2O, K3Fe(CN)6 ,NH4OH,
ácidos, bases, solventes, toxicos HCl, KH2PO4, K2H2PO4 , NaOH, 4-
aminoantiprina Evite la inhalación y
contacto con la piel al manejar ácidos y
caústicos.
Los envases de reactivos tienen que estar
bien identificados y almacenados.
En caso de vapores, trabaje bajo
campana de extracción.

Informe a personas cercana q esta

trabajando con químicos.
Falta de iluminación Asegurece que el area poseea una
iluminación adecuada.

1.6. Equipos y Materiales

Equipo de Destilación (ver anexo)
Espectrofotómetro UV / Visible (COD:OXILAB-5-ESPEC-005)
pH metro.(COD: Oxilab-5-pH-001, Oxilab-5-pH-002, Oxilab-5-pH-003)
Beaker. Capacidad: 250 ml
Pipetas. Capacidad: (1 y 5) ml.
Balanza. Precisión:  0,0001 g (COD: OXILAB-5-bal-000)
Balones aforados. Capacidad:(100, 500,1.000) ml

Reactivos
Solución Stock de fenol (COD:OXIALB-5-PAT-FENOL-030): Diluir 1g de fenol
en agua destilada hasta 1.000 ml, (Sol. De 1000 ppm de fenol.)
Solución intermedia de Fenol: Diluir 1 ml de la solución stock de fenol en agua
destilada y recién hervida y enfriada, llevar a 100 ml 1ml = 10 g ( 10 ppm ).
Solución patrón de fenol: Diluir 50 ml de solución intermedia de fenol a 500 ml
con agua destilada recién hervida y enfriada 1 ml = 1,00 g de fenol (Preparado
para 2 hrs de uso).
Solucion de Bromuro-Bromato: Disolver 2,784 g de KBrO3 anhidro en agua,
agregue 10 g de cristales de KBr, disolver y diluir a 1.000 ml
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HCl concentrado.
Solución de tiosulfato de sodio 0,025 M: Disolver 6,205 de Na2S2O3 5H2O en
agua destilada, agregue una perlita de hidróxido de sodio y diluya hasta 1.000 ml
de solución.
Solución de indicador de almidón. Calentar 0,5 g de almidón en 50 ml de agua
destilada hasta que se forme una solución espesa.
Solución de hidróxido de amonio, NH4OH 0,5 N: Diluir 35 ml de NH4OH
concentrado a un litro con agua destilada.
Solución de Buffer de fosfatos. Disuelva 104,5 g de K2HPO4 y 72,3 g KH2PO4
en agua destilada y diluya a 1.000 ml de solución (pH = 6,8), si la solución no
tiene el pH indicado, se debe preparar nuevamente.

Solución de 4-aminoantipirina: Disuelva 2,0 g de 4-aminoantiprina en agua

destilada y diluya 100 ml de solución (preparar esta solución diariamente)
Solución de ferrocianuro de potasio; Disuelva 8,0 g de K3Fe(CN)6 en agua
destilada y diluir a 100 ml de solución. (Filtrar si es necesario, guardar en una
botella de vidrio oscuro, cambiar semanalmente).
Solución de Hidroxido de sodio 2.5 N: Diluir 10 g de NaOH en 100 mL de agua
destilada
Cloroformo.
Sulfato de sodio anhidro, Cristales.
Yoduro de potasio.
Tome un erlenmeyer de 500 mL, adicione 100 mL de agua destilada, agregue 50
mL de la solución stock de fenol y 10 mL de solución de bromuro-bromato,
adicione inmediatamente 5 mL de HCl concentrado, mezcle suavemente, si el
color marrón del bromuro-bromato no persiste agregue 10 mL mas,(normalmente
se utiliza 40 ml de bromuro-bromato para 1000 mg/L de fenol), tape y repose en
la oscuridad por 10 minad). Agregue un gramo de KI (yoduro de potasio). Titule
con tiosulfato de sodio 0,025 N (30-35 ml aproximadamente). Para la titulación;
agregue 20 ml de tiosulfato y luego 0,5 ml de indicador de almidón (color azul.
Continúe titulando hasta que la coloración desaparezca. Realice un blanco con
50 mL de agua destilada y 10 ml de sol. Bromuro-bromato siga el mismo
procedimiento:

mg/ l de Fenol = 7,842 [(A x B ) - C]

Donde:
A = ml de Tiosulfato en el blanco.
B = ml de Bromuro-Bromato dividido entre 10 = 4
C= ml de Tiosulfato en la muestra.

2. DESCRIPCIÓN DE LA INSTRUCCIÓN

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2.1. Análisis de la Muestra

 Tome 250 ml de muestra y ajuste el pH a 4 con una solución de NaOH
2,5 N
Nota: Si la Muestra ha sido preservada con H2SO4 con.
 Coloque la muestra en un balón de 500 ml con un codo. El balón se
coloca en el equipo de destilación (Manta de calentamiento, serpentines
conectados al sistema de agua para la condensación) ver anexo, Fig. 1.
 Destile hasta recoger +/- 200 ml de muestra, y deje reposar el balón hasta
que baje a temperatura ambiente y con un guante térmico desconecte el
balón del equipo de destilación y agregue 50 ml de agua destilada,
continúe destilando de hasta recoger los 250 ml.
Nota: No deje secar el balón de destilación, esto causa daño al balón de
destilación el cual es muy costoso, ademas de la perdida de tiempo en el
analisis, por seguridad se debe vigilar este proceso.
 Del destilado se recogen 100 ml de muestra y añada 2,5 ml de solución
NH4OH 0,5 N
 Luego Ajuste el pH a 7,9 +/- 0.1 con buffer de fosfato.
Nota: El pH se ajusta gota a gota y se debe utiliza un pH metro calibrado.
 Agregue a la muestra ya ajustada 1 ml de 4- Aminoantipirina y mezcle.
 Agregue 1 mL de solución ferrocianuro de potasio y mezcle.
 Espere 15 min. Para la reacción de los indicadores, lleve a una celda de
vidrio de 1 cm, y lea en la curva de calibración del espectrofotómetro
shimadzu.
 Destile agua hasta recoger 100 ml de agua destilada para ser utilizarlo
como blanco aplicándole el mismo procedimiento de la muestra.

Nota: Realice semanalmente corrida del patrón de 0,5 mg/L de fenol con el
fin de verificar el comportamiento del equipo, método y curva de calibración,
reportar resultados en el cuaderno de análisis espectrofotómetro SHIMADZU.

Nota: Prepare patrón de fenol 500 ppm y prepare las siguientes

concentraciones: 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, y 1 ppm a partir del patrón de 10
ppm, para la construcción de la curva de calibración en el espectrofotómetro.

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2.2. Procedimiento de Operación Espectrofotómetro Shimadzu:

 Presione el interruptor principal “ON/OFF”, que esta ubicado en la parte
posterior del equipo y espere de 15 a 20 min. El equipo localizara la
información de inicio automáticamente e indicara cuando comenzar.
 Presione la tecla “RETURN” y aparecerá menú “MODE MENU”
 Presione la tecla (F1) “PARAMS” y aparecerá en pantalla el listado de
curvas con los métodos, seleccione el método de Fenoles presionando la
tecla “SET” (F2), introducir el número 4 y presione “ENTER”.
 Luego aparecerá en pantalla el recuadro con la palabra “RETURN” ,
presione la tecla “RETURN”,
 Aparecerá en pantalla el menú “QUANTITATION”, Presione la tecla (F3)
“SMPL MEAS” e introduzca la celda con el blanco reactivo en el
compartimiento lateral del equipo y presione “AUTOZERO”, luego la celda
con muestra y presione “STAR”, aparecerá el resultado en pantalla, tomar
como mínimo 2 mediciones para mayor confiabilidad y reportar el
promedio.
 Reporte los resultados y patrón de verificación, en el cuaderno para
análisis en el espectrofotómetro SHIMADZU (COD: OXILAB-5-REG-003)

2.3. Cálculos
La concentración de fenol se obtiene directamente de la curva de calibración. (el
Espectrofotómetro permite en su programa dar el resultado directamente, este
paso es a modo de información de cálculos)
Usando la curva de calibración
mg fenol/L = A/B x 1000
Donde
A = mg fenol in muestra, de la curva de calibración y
B = mg muestra original

Usando el estándar simple de fenol

mg fenol / L = C x D x 1000
E x B
Donde:
C = mg de solución estándar de fenol
D = Absorbancia de la muestra y
E = Absorbancia de la solución estándar de fenol.

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2.4. Verificación:
Se realiza semanalmente con un patrón de trabajo de 0,50 mg/l +/- 0.10 de
Fenol, preparado a partir del estándar de 1000 mg/l (COD: OXILAB-5-FENOL-
030), reportar en el cuaderno de análisis del Espectrofotómetro Shimadzu,(COD:
OXILAB-5-REG-003) en caso de estar fuera del rango reporte al coordinador
técnico, quien tomara las medidas al caso.

2.5. Expresión de resultados:

Exprese el resultado en mg/l de fenol. Reporte lo resultado en el cuaderno de
análisis de fenol, (COD: OXILAB-5-REG-003), Donde debe registrar como
mínimo lo siguiente, Fecha de la muestra, nombre del analista, identificación de la
muestra y resultados.

3. CONSIDERACIONES ADICIONALES

3.1. Precisión
No existen datos de precisión y exactitud para la determinación de fenol, aun no a
sido establecida en SMWW

3.2. Incertidumbre de la medición

0.45 ppm.

3.3. Tiempo de análisis:

Tiempo para el análisis es de 4 hr. , las horas hombres son de 1,5

3.4. Referencia
Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 1.998. 20 th
Edition. APHA.AWWA.WEF. 5530-C. 4-aminoantipyrine Direct Photometric
Method.

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4. ANEXO

4.1. Equipo de destilación

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