MINISTERIO DEL PODER POPULAR PARA LA SALUD

RESIDENCIA ASISTENCIAL PROGRAMADA BACTERIOLOGÍA CLÍNICA

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
“HOSPITAL VARGAS DE CARACAS”

Neisseria, Moraxella,Legionella
Haemophillus.

Caracas, Mayo 2017

 Genero: Neisseria
Reino Bacteria
Clase Betaproteobacter
ia
Orden Neisseriales
Familia Neisseriaceae
Genero Neisseria
N. gonorrhoeae Patógenos
N. meningitidis estrictos

N. Lactamica
N. sicca Otras
N. subflava especies
N. cinerea
N. elongata
N.mucosa
Generalidades
o Diplococos Gram Negativos
o Forma de granos de café
o Crecen a temperaturas comprendidas entre 35-37˚C y en
atmosferas húmedas
o Capnofilos ( 5% CO₂)
o Reducen los nitratos a nitritos
o Oxidasa y catalasa positivo
Neisseria gonorrhoeae
Agente
Su nombre procede del físico alemán Albert Neisser, el cual causal de
efectuó la primera descripción del microorganismo la gonorrea
responsable de la gonorrea 1879
o Trasmisión sexual o contaminación en el alumbramiento.
o También llamados gonococos
o Nutricionalmente exigentes
o No forman capsula
o Generan ácido por oxidación de carbohidratos (Glucosa)
 Factores asociados a virulencia
Pili o frimbrias (Pilina ): proteína involucrada en la adhesión inicial de las
células no ciliadas, proporciona mecanismo de resistencia ante la
destrucción mediada por los neutrófilos

Proteína Por (proteína I) :proteínas integrales de dicha

membrana que forman poros o canales para permitir el paso
de nutrientes al interior de la célula y la salida de los productos
de desecho

Proteína Opa (Proteína de opacidad) : interviene en la

unión firme a las células epiteliales y las células
fagociticas.

Proteína bRmp (Proteína de reducción modificable): loquean la

estimulacion de anticuerpos, disminuyendo los efectos bactericidas
del suero ante los gonococos
Factores asociados a virulencia

Sideroforos

Lipooligoracárido (LOS): tiene actividad

de endotoxina

Proteasa de IgA 1: Destruye la inmunoglobulina

A1.
Patogenia
Manifestaciones clínicas
◻ Uretritis gonococcica
◻ Salpingitis
◻ Conjuntivitis
◻ Lesiones cutáneas
◻ Artritis gonococcica
◻ Bacteriemia
◻ Perihepatitis (síndrome de Fitz-Hugh-Curtis)
 Diagnostico y cultivo
Muestra
Muestras
genitales Hisopado
• Hisopado uretral rectal
• Hisopado cervico-
vaginal

Recolección de
muestra:
• Dacrón • Medio de transporte
• Alginato de stuart
calcio • Medios Transgrow o
• Algodón. Jembec son también
útiles pero más caros.
Diagnostico y cultivo
La tinción de Gram sensible más del 90%
en para detectar las infecciones
gonocócicas en hombres con uretritis
purulenta

Medios de cultivo

• Tayer-martin Suplementos antibióticos:

• Martin-lewis o NYC Selectivos vancomicina, colistin, nistatina y la
New york City trimetoprima y anfotericina B.

Agar Enriquecidos
chocolate
Incubación a 35-37˚C
y con una humedad
de 70%-80%
Diagnostico y cultivo

Agar Agar Tayer-Martin Agar NYC

chocolate

Oxidasa y superoxol
Positivo Positivo
(+) (+)
Diagnostico confirmatorio
o Gram de muestra
o Crecimiento en agares enriquecidos y selectivos
o Oxidasa (+) y catalasa (+)

Oxidación de carbohidratos

Consiste en agar con cistina,

tripticasa de soya con glucosa,
maltosa, lactosa o sacarosa al 1%.
Teniendo como indicador rojo de
fenol
Pruebas de susceptibilidad
Resistencia:
• Penicilisnasa
◻ Penicilina • Betelactamasa

◻ Cef. De 3ra generacion (Ceftriaxone)

◻ Ciprofloxacina
◻ Tetraciclina
◻ Estreptomicina
Neisseria. meningitidis
o Son diplococos Gram negativos capsulados.
o Conocidos como meningococos
o Catalasa y oxidasa positiva
o Nutricionalmente exigentes
o Generan ácido por oxidación de carbohidratos
(glucosa y la maltosa).
 Neisseria. meningitidis

◻ Transmisión a traves de bioaerosoles

Se reconocen 13 serogrupos según su polisacarido

capsular A, B, C,D , E29, H, I, K, L, X,Y, Z, W135.

o La mayor parte de las infecciones a nivel mundial se

relacionan con los serogrupos A, B, C, Y y W135
 Factores asociados a virulencia
o Capsula de polisacarido: Resistencia a la fagocitosis y
supervivencia durante la invasión al SNC

o Pili o fimbrias (Clase 1 y 2 ): fijación de los

microorganismos a las células mucosas de la nasofaringe

o Proteinas porinas (porA y por B): Inducción de opotosis

de fagolisosomas y celulas diana.
Factores asociados a virulencia
o Proteinas Opa (clase 5) y Opc: Facilitan la
adherencia bacteriana a al epitelia y a los
neutrofilos, asi como la invasion a las celulas
endoteliales.
o Proteasa IgA1: Disminucion de la inmunidad en las
mucosas
o Lipooligosacarido y Sideroforos
Patogenia
Manifestaciones clinicas
o Meningitis

o Meningococcemia

o Neumonia
Diagnostico y cultivo
Muestra

Sangre Biopsias e
hisopados
nasofaringeos

LCR

Gram de muestra
Diagnostico y cultivo
◻ Siembra en agar sangre y chocolate (Enriquecido)
◻ Tayer-martin (Selectivo)
Diagnostico y cultivo
◻ Oxidasa (+)
◻ Catalasa (+)
◻ Utilización de carbohidrato Glucosa(+) y maltosa
(+)
Pruebas de susceptibilidad
◻ La prueba de susceptibilidad a los antimicrobianos
de N. meningitidis no debe hacerse por difusión en
disco.

◻ Determinación de la concentración mínima inhibitoria

(CIM) por microdilución en caldo o por el uso de la
tira de Etest®
 Moraxella catarrhalis

o Diplococo Gram-negativo.
o Aerobio.
o Oxidasa positivo
o 3er patogeno mas importante
del tracto respiratorio
Factores asociados a virulencia
◻ Lipooligosacarido
◻ Proteinas de la membrana externa
CpoB: captacion del hierro o la
utilizacion de lactoferrina y transferrina. o Fimbrias
o Proteínas reguladoras
Proteína CD: la unión a la mucina del hierro
humana (nasofaringe y oido medio)

Proteina E: Captación de
nutrientes para la bacteria.

UspA-1 : capacidad adherente de la bacteria a las

células epiteliales del hospedador,
UspA-2 : relacionado con la resistencia a la actividad
bactericida del suero humano
Manifestaciones clínicas
◻ Otitis media
◻ Sinusitis Niños

◻ Inf. del tracto respiratorio inferior

◻ Complicacion en pacientes con EBPOC en adultos

◻ Neumonia en ancianos
Diagnostico y cultivo
Muestra

Gram mustra: diplococos

gramnegativos es altamente
predictiva de la presencia de
M. catarrhalis en la muestra

Medios de cultivo
convencionales:
(sangre y chocolate)
colonias redondas,
opacas, convexas,
color gris
Criterios y pruebas para identifacion

o Ausencia de pigmentación en agar sangre (no

hemolítica).
o Producción de oxidasa y catalasa.
o Producción de DNAasa.
o Hidrólisis de la tributirina.
o Ausencia de producción de ácido a partir de glucosa,
maltosa, sacarosa y fructosa.
o Reducción de nitratos y nitritos.
Susceptibilidad
◻ Fluoroquinolonas
◻ Amoxicilina-clavulánico,
◻ Cefalosporinas (1ra,2da y 3ra)
◻ Trimetoprin-sulfametozaxol
◻ Macrólidos
◻ Cloranfenicol
 Genero Legionella
Familia Legionellaceae
Genero Legionella
Especie pneumophila

o 53 especies y 3 subespecies. Mas del 90% de las

infecciones L. pneumophila
o Bacilos Gram negativos Intracelulares
o Aerobios estrictos
o Nutricionalmente exigentes
o Requieren medios de cultivo suplementados con l-cisteína
y su crecimiento se estimula por el hierro.
 Legionella pneumophila
◻ Las infecciones humanas se asocian a la
exposición a aerosoles contaminados
(p. ej., torres de refrigeración de aire
acondicionado, saunas de hidromasajes, duchas o vaporiradores).
o Agente etiologico de:
o Fiebre Pontiac
o Enfermedad de loslegionarios
 Patogenia
Sujetos vulnerables que
inhalan partículas
infecciosas

Se una a los receptores

CR3 del complemento de los
fagocitos mononucleares,
(endocitosis)

Proliferacion en su vacuola
intracelular y producen
enzimas proteolíticas
(fosfatasas,
lipasas y nucleasas) que
matan la célula hospedadora
Diagnostico y cultivo
◻ Las muestras deben recogerse con cuidado para
evitar los aerosoles y transportarse al laboratorio
a temperatura ambiente en recipientes esteriles.

Muestras
Esputo
◻ Las Legionellas aparecen como bacilos bronquiales

gramnegativos finos y pleomorfos teñidos de

forma débil
Diagnostico y cultivo
Descontaminacion con
Hcl

Agar cabon-extracto de
levadura con buffer
(BCYEa)
Incubar a 35˚C y
observar durante
5 dias

◻ Detección del antígeno de Legionella en orina permite un diagnóstico rápido

sensible y específico de la neumonía causada por L. pneumophila, aunque sólo del
serogrupo 1 (sensibilidad del 70-90%
La prevención y especificidad
de la legionelosis mayor
exige la del 99%)
identificación del foco ambiental del
microorganismo y la reducción de la carga
microbiana.
Pruebas de susceptibilidad
◻ No se efectúan de forma habitual pruebas de sensibilidad in
vitro con las legionellas, ya que estos microorganismos
demuestra tener buen crecimiento en los medios de cultivo
empleados habitualmente para estas pruebas.

◻ Además, algunos antibióticos que parecen disponer de

actividad in vitro no son efectivos para el tratamiento de las
infecciones
◻ La enfermedad es de resolucion espontanea. Se ha
demostrado sensibilidad a macrólidos (como azitromicina y
claritromicina) o fuoroquinolonas.
 Genero: Haemophillus
◻ Familia: Pasteurellaceae o H. Influennzae
◻ Genero: Haemophillus o H. pararinfluennzae
o H. aegyptius.
o H. ducreyi
◻ Bacilos gramnegativos pequeños, en ocasiones pleomórficos
◻ Inmoviles

◻ La mayoría de las especies de Haemophilus necesita medios

complementados con factores de crecimiento:

◻ 1) Hemina (factor X)

◻ 2) Nucleótido de nicotinamida y adenina (Factor V)

◻ Haemophillus (no encapsulado) se encuentra presente como

microbiota de orofaringe
Haemophillus influenzae
o Tras la introducción de la vacuna, la Anteriormente era responsable de
más del 95% de las infecciones
mayor parte de las enfermedades invasivas por Haemophilus
que ocasionadas por el serotipo B
desaparecieron y más de la mitad de las enfermedades invasivas se deben
ahora a cepas no encapsuladas.
Factores asociados a virulencia
◻ Lipopolisacárido: con actividad de endotoxina, y la
membrana externa presenta proteínas específicas
de la especie. Alteran la función ciliar y ocasionan
daños en el epitelio respiratorio.
◻ Pili o fimbrias
◻ La capsula tipo b: compuesta por un acido teicoico
lineal que contiene ribosa, se denomina PRP
(polirribosil-ribitol-fosfato)}
◻ Proteasas de IgA1: Colonización en las mucosas
Factores asociados a virulencia
◻ Proteinas OapA: es responsable de su morfologia
opaca de las colonias.
◻ Proteinas Hia, Hsl, HAP.
◻ Bacterionas llamadas «Hemocinas»
◻ Proteinas de la membrana externa P2 y P6.
Patogenia
Alteran la
función ciliar y ocasionan
daños en el epitelio respiratorio

Las bacterias se pueden translocar a través de

células epiteliales y endoteliales para ingresar
en el torrente sanguíneo

En ausencia de anticuerpos
opsonirantes específicos dirigidos
contra la cápsula polisacárida, se
puede producir una bacteriemia con
un gran número de bacterias.
Manifestaciones clinicas
◻ Meningitis
◻ Laringitis Frecuente en
niños no
◻ Epiglotitis vacunados

◻ Celulitis
◻ Otitis media
◻ Neumonia
◻ Bronquitis
Haemophillus ducreyi
◻ Agente causal del «chancroide» o «chancro blando» una
infección de transmisión sexual altamente contagiosa
caracterizada por ulceras genitales yperianales dolorosas y
linfadenopatia inguinal sensible a la palpación

◻ Todas las cepas parecen tener fimbrias superficiales finas y

enmaranadas.
◻ Proteinas de la membrana externa
◻ Lipooligosacaridos
◻ Citotoxina/hemolisina
Diagnostico y cultivo
LCR, muestra Hisopados
Muestras
respiratorias. genitales Microaerofilia
35-37˚C
Los microorganismos Haemophilus
aparecen como pequeños
cocobacilos Gramnegativos de
tinción pálida

Agar sangre con estría de Agar chocolate

S. aureus «Satelitismo) Colonias lisas,
color gris
azulado
Identificación

Antibiograma por método de difusión en disco

con sus respectivos suplementos

Susceptibilidad: Cefalosporinas con inhibidores de

betalactamasas. Cef de 3ra Y 4ta generación,
Fluoroquinolonas, Carbapenems, Macrolidos