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Perspectivas de la fusión de protoplastos en el mejoramiento genético vegetal

Article · September 2017

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3 authors, including:

Luis C Ortega-Macareno Marco A. Ramírez-Mosqueda

Universidad Veracruzana Facultad de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Universidad Veracruzana
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In vitro selection of plantlets Vanilla planifolia Jacks. resistant Fusarium oxysporum View project

Biotechnology bases for the micropropagation of Stevia rebaudiana View project

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DIRECCIÓN GENERAL
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Editorial
COORDINADORA EDITORIAL
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ASISTENTE EDITORIAL
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EDITORES GRÁFICOS
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Año Catorce
REDACTORAS Y CORRECTORAS DE ESTILO
Número 215
Adriana del Carmen Zavala Alonso Septiembre de 2017
Diana Alicia Almaguer López
COLABORADORES
Investigadores, maestros, alumnos de posgrado, De acuerdo con el profesor del Laboratorio de Ficología de la Facultad de
egresados de la UASLP y otras instituciones
Ciencias de la Universidad Nacional Autónoma de México, Jorge Gonzá-
CONSEJO EDITORIAL
Alejandro Rosillo Martínez lez González, en su artículo Las algas de México (1987), bajo el término
Facultad de Derecho Abogado Ponciano Arriaga Leija
Adriana Ochoa de algas se agrupan aproximadamente 21 000 especies que difieren no-
Facultad de Ciencias de la Comunicación
tablemente en su forma, tamaño, estructura celular, metabolismo, com-
Anuschka Van´t Hooft
Facultad de Ciencias Sociales y Humanidades posición bioquímica, tipo de ciclo de vida y hábitat.
Ruth Verónica Martínez Loera
Facultad del Hábitat
María del Carmen Rojas Hernández Los estudios de algas en nuestro país iniciaron en el año de 1846, cuan-
Facultad de Psicología
do F. M. Liebman visitó y recolectó en costas mexicanas material que
Hugo Ricardo Navarro Contreras
Coordinación para la Innovación y Aplicación sirvió de base para el trabajo de Jacob George Agardh en 1847 sobre
de la Ciencia y la Tecnología
Amado Nieto Caraveo
algas de México, única nación latinoamericana con mares de aguas tem-
Facultad de Medicina pladas, subtropicales y tropicales, que brindan gran diversidad al medio
Vanesa Olivares Illana
Instituto de Física ambiente marino.
Juan Antonio Reyes Agüero
Instituto de Investigación de Zonas Desérticas
Según consta en el documento Perspectivas para la Industria de las
UNIVERSITARIOS POTOSINOS, nueva época, año catorce, número 215, de Algas Marinas de la Organización de las Naciones Unidas para la Ali-
septiembre de 2017, es una publicación mensual gratuita fundada en mar-
zo de 1993 y editada por la Universidad Autónoma de San Luis Potosí, a tra- mentación y la Agricultura (2002), la industria de algas marinas en
vés del Departamento de Comunicación Social, que tiene como principales
objetivos difundir el conocimiento generado por la investigación científica México se ha circunscrito a Baja California para su venta a productores
y tecnológica de la UASLP y otras instituciones nacionales y extranjeras e
informar sobre los avances, descubrimientos y teorías que se han obteni- de Estados Unidos de América, pese a que el cultivo de especies
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64, Colonia Centro, C.P. 78000, tel. 826-13-00, ext. 1505, [email protected]. comestibles —como Undaria, Laminaria y Porphyra— produciría re-
Editor responsable: LCC Ernesto Anguiano García. Reservas de Derechos al
Uso Exclusivo núm. 04-2012-112911453700-203, ISSN: 1870-1698, ambos sultados financieros mucho más atractivos que cualquier cultivo de
otorgados por el Instituto Nacional del Derecho de Autor, licitud de Título
núm. 8702 y licitud de contenido núm. 6141, otorgados por la Comisión Ca- algas marinas para extraer ficocoloides, una substancia obtenida de las
lificadora de Publicaciones y Revistas Ilustradas de la Secretaría de Goberna-
ción. Sistema Regional de Información en Línea para Revistas Científicas de
América Latina, el Caribe, España y Portugal, Latindex, folio: 24292. Impresa
paredes celulares de estos organismos.
por los Talleres Gráficos de la Universidad Autónoma de San Luis Potosí, a
cargo de Guadalupe Patricia Ramos Fandiño, directora de Publicaciones y
Fomento Editorial de la UASLP, en avenida Topacio s/n esquina Boulevard
Río Españita, colonia Valle Dorado, San Luis Potosí, S.L.P., este número tuvo
Existe una tradición antigua de consumo de algas marinas endémicas en
un tiraje de 3,500 ejemplares.
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Las opiniones expresadas por los autores no necesariamente reflejan la
postura de la universidad. de quienes las consumen, además de otros usos que pueden dársele,
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SEPTIEMBRE 2017 215 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 1

 CONTENIDO
SECCIONES
11 Columna DE FRENTE A LA CIENCIA
RUTH VERÓNICA MARTÍNEZ LOERA

40 Divulgando UN PASEO
POR EL COSMOS
¿Qué hemos aprendido del eclipse?
GLORIA DELGADO INGLADA

MIRADOR DE LA CIENCIA
¡Los drones al rescate!
DANIEL ULISES CAMPOS DELGADO

ENTRE MOLÉCULAS

4
Septiembre y la pirotecnia
MARTHA ALEJANDRA LOMELÍ PACHECO

44 Protagonista de
la gestión pública
Guillermo Aguilera Alejo
PATRICIA BRIONES ZERMEÑO

4 Las macroalgas, ¿pueden 48 Primicias

16 28
ayudarnos a resolver
30
Buscan reducir la quema de combustible con BLI
¡Necesitas ayuda profesional!

29
28
DEPARTAMENTO DE COMUNICACIÓN SOCIAL,
problemas de índole mundial? 27
26 UASLP
ANGEL MARIO LÓPEZ HIDALGO Y COLS. 25
24

47 A través del tiempo…

23
22

12 Perspectivas de la fusión 21
20 San Luis Potosí, cuna de la radiología
de protoplastos en el 19
SILVIA ARACELI SALAZAR VÁZQUEZ
No te dejes destruir

18

mejoramiento genético vegetal 17

¡Reacciona!

16

LUIS C. ORTEGA MACARENO Y COLS.

15 48 Ocio con estilo
14
13 Leer, escribir y pensar: grandes crímenes
12
DIANA ALICIA ALMAGUER LÓPEZ
Sectas y otras creencias
11
16 10
9
vistas desde la sociología 8
La violencia aumentará

7
criminológica 6
5
JUAN CARLOS RAMÍREZ SALAZAR 4
3
2
1

22 Implantes dentales
CARLOS EMMANUEL SANDOVAL SÁNCHEZ

28 Nivel de violencia entre

34
parejas de universitarios
MACRINA BEATRIZ SILVA CÁZARES Y COLS.

34 Profesionalización del
servicio público
FERNANDO RODRIGO PALAVICINI PIÑA

22 12
2 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 215 SEPTIEMBRE 2017
 Recibido: 03.05.2017 I Aceptado: 07.08.2017

Palabras clave: Cultivo de tejido, protoplastos,

hidridación somática, in vitro y fitomejoramiento.

Perspectivas
de la fusión de
protoplastos
en el mejoramiento
genético vegetal
LUIS CARLOS RODRIGO ORTEGA MACARENO
MARCO ANTONIO RAMÍREZ MOSQUEDA
LOURDES GEORGINA IGLESIAS ANDREU
[email protected]
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGÍA Y ECOLOGÍA APLICADA DE LA UNIVERSIDAD VERACRUZANA

El fitomejoramiento y su importancia
Se considera que el fitomejoramiento es la ciencia de modificar de
manera permanente cualquier tipo de planta para mejorar e incre-
mentar su aprovechamiento económico. Los programas de mejora-
miento genético abarcan la inducción y manipulación de variaciones
genéticas en un determinado cultivo y la posterior selección de las
nuevas combinaciones genéticas de interés agrícola. Los procesos
de modificación llevados a cabo en el fitomejoramiento conllevan
el crecimiento y desarrollo de la planta, la cantidad o calidad de las
estructuras, productos vegetales y la resistencia a factores bióticos
como patógenos y al estrés ambiental.

12 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 215 SEPTIEMBRE 2017 ORTEGA, L., RAMÍREZ, M. E IGLESIAS, L. PÁGINAS 12 A 15
 El cultivo y la fusión de Figura 1.

protoplastos Tipos de
Entre los procesos biotecnológicos productos que
utilizados en el fitomejoramiento, pueden originarse
se encuentran el cultivo y fusión por la fusión de
protoplastos de
de protoplastos. Uno de los ele- Fusión
dos especies
mentos de mayor utilidad en el
vegetales (Polci y
mejoramiento genético y cul-
Friedrich, 2004).
tivo de tejidos son los de- Heterocarionte
nominados protoplastos,
es decir, los componentes
vivos de las células que
están rodeados por la
membrana plasmática,
y donde se eliminó la
pared celular mediante
métodos mecánicos o enzi- Cibidro Híbrido parcial Híbidro Híbrido parcial Cibidro

máticos.
En fitopatología, los protoplastos han tivo y fusión de protoplastos en diver-
Dado que estas células carecen de contribuido al estudio de la etiología (es- sas especies de importancia agrícola.
pared celular, mantienen la capaci- tudio de las causas) de los virus, su ab- Algunos ejemplos son: cítricos (Citrus
dad de regenerarla, dividirse, formar sorción, procesos infectivos y replicación. reticulata), algodón (Gossypium sp.),
colonias y, posteriormente, regenerar Además, han logrado realizarse estudios papa (Solanum tuberosum), col (Bras-
plantas completas atendiendo a uno de la especificidad y modo de actua- sica oleracea), trigo (Triticum aestivum)
de los principios del cultivo in vitro de ción de hongos y bacterias patógenas, plátano (Musa sp) e incluso se han
tejidos vegetales: la totipotencialidad la evaluación de toxinas y la obtención desarrollado trabajos en especies orna-
celular, que es la capacidad que tienen de clones resistentes a diversos patóge- mentales, como las orquídeas del géne-
las células de dar origen a millones nos y productos fitosanitarios. Uno de ro Dendrobium.
de células, tejidos, órganos, incluso los aportes más importantes del uso de
embriones. Las colonias originadas a los protoplastos es la mejora genética, El cultivo de protoplastos resulta de
partir de protoplastos aislados pueden explotando la variación protoclonal (va- gran utilidad en especies de importan-
ser inducidas a regenerar plantas en riación generada del cultivo de protoplas- cia agrícola, un ejemplo es la Vanilla
condiciones óptimas de requerimien- tos) para la obtención de nuevas varieda- planifolia, orquídea de la cual se extrae
tos nutricionales, de luz y temperatura des vegetales. Esta técnica ha permitido el saborizante conocido como vaini-
controladas. Esta técnica ha resultado agilizar los trabajos de transformación lla. En este cultivo la base genética se
de gran utilidad para realizar investiga- y expresión genética, debido a la fácil encuentra reducida por su sistema de
ciones relacionadas con la regulación transferencia de genes de una especie a reproducción vegetativa. El aislamiento,
de genes asociados en la producción otra a partir de la técnica de hibridación cultivo y fusión de protoplastos es una
de metabolitos. Los metabolitos son somática de protoplastos que no cuen- alternativa, no sólo para generar varian-
compuestos, generalmente orgánicos, tan con la barrera de una pared celular. tes protoclonales útiles, sino también
que participan en las reacciones quí- para realizar trabajos de hibridación
micas que tienen lugar a nivel celular, Avances en los trabajos de fusión de somática interespecífica (proceso por
como son: terpenoides, flavonoides, protoplastos el cual se obtienen híbridos por fusión
alcaloides, poliacetilenos, glucosino- Actualmente se cuentan con trabajos de protoplastos provenientes de geno-
lastos, antocianinas entre otros. que han utilizado las técnicas de cul- mas de especies diferentes) (Montero

FUSIÓN DE PROTOPLASTOS SEPTIEMBRE 2017 215 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 13

 y Carmona, 2009). En la figura 1 se plastos efectuado en algunas especies
presentan los posibles productos de fu- como la Vanilla planifolia. (Divakaran et
sión de protoplastos de dos especies. al., 2008; Ortega et al., 2016), Vanilla
Además el aislamiento, cultivo y fusión El andamaniaca (Divakaran et al., 2008) y
de protoplastos se han utilizado para fitomejoramiento Vanilla pompona (Ortega et al., 2016).
modificar características citoplasmáticas En estos trabajos se han obtenido ren-
(alterando la población de organelos) y es la ciencia dimientos considerablemente altos de
así obtener plantas híbridas que no po- de modificar protoplastos viables (80-90 por ciento
drían ser producidas por los métodos de viabilidad), que han permitido su
de manera
de hibridación sexual convencional. uso en los programas de mejoramiento
permanente genético vegetal.
Debido a la escasa variabilidad genética cualquier tipo
de la V. planifolia, susceptible a patóge- ¿Cómo aislar los protoplastos?
nos fúngicos (principalmente del géne-
de planta para Para lograr un proceso efectivo en el
ro Fusarium), el presente trabajo tuvo mejorar su aislamiento de protoplastos, es necesa-
el fin de establecer un protocolo para el rio tener en cuenta algunos factores cla-
aprovechamiento
aislamiento, cultivo y fusión de proto- ves que permitan obtener cantidades
plastos. Así como, la hibridación somá- económico elevadas de protoplastos y altos por-
tica interespecífica entre V. planifolia y centajes de viabilidad. Entre estos fac-
V. pompona con el fin de obtener va- tores resalta la fuente de tejido vegetal.
riación protoclonal, la cual será utilizada En este contexto, se ha indicado que el
en la selección in vitro de genotipos mesófilo foliar (tejido que se encuentra
resistentes a diversos factores bióticos entre las epidermis del haz y del envés
(resistencia a Fusarium oxysporum f. sp. de las hojas) —particularmente de vitro-
vanillae) y abióticos (tolerancia a la se- plántulas (plantas clonadas cultivadas
quía) (figura 2). in vitro, en recipientes de laboratorio)—
resulta la fuente más adecuada para
Los trabajos de fusión de protoplastos realizar aislamientos exitosos. Entre
en la vainilla han resultado exitosos; otros factores que deben tenerse en
cabe mencionar el aislamiento de proto- cuenta están las concentraciones enzi-
máticas, el tiempo de incubación y el

Figura 2.

Aislamiento de protoplastos.
a. Protoplastos de Vanilla
planifolia Jacks.,
b. Vanilla pompona Schiede
(Ortega et al., 2016) b

a Figura 2.
Fusión de protoplastos de Vanilla
planifolia y Vanilla pompona
(Ortega et al., 2016)

14 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 215 SEPTIEMBRE 2017 ORTEGA, L., RAMÍREZ, M. E IGLESIAS, L. PÁGINAS 12 A 15
 regulador osmótico. Para ello es nece- entre ellas; el tratamiento con iones de
sario considerar algunas características calcio (Ca++ ) en un ambiente con pH
de la especie vegetal (grosor del mesó- elevado, neutraliza las cargas superficia-
filo foliar y presencia de cutículas (capa les, lo que favorece el contacto entre LUIS CARLOS
RODRIGO ORTEGA
cerosa externa a la planta), ya que esto protoplastos. El uso de compuestos
MACARENO
determina que pueda llegar a contar- como el polietilenglicol (PEG) al actuar Estudió en la Universidad
se con suficientes protoplastos viables como un puente molecular puede con- de Sucre, Sincelejo, Sucre,
(Ortega et al., 2016). tribuir a promover la adhesión y forma- Colombia. Actualmente
estudia en el Instituto de
ción de puentes citoplasmáticos entre Biotecnología y Ecología
Mediante la hibridación somática se los protoplastos vecinos, y producir fi- aplicada en la Universidad
pretende formar una única célula híbri- nalmente la fusión. Veracruzana en Xalapa,
Veracruz, México.
da. Si los protoplastos involucrados en
la fusión proceden de distintos tipos Posteriormente se debe efectuar la
parentales, se originan heterocariones identificación de los productos de fu-
(célula somática que contiene dos o sión. Esta puede realizarse mediante
más núcleos de procedencia genética varias técnicas: complemento, morfo- menores de 10 por ciento pueden
distinta), y si proceden del mismo tipo logía intermedia o técnicas molecula- afectar negativamente la efectividad de
homocariones (células que contienen res. Sin embargo, resulta indispensable la técnica.
un único tipo genético de núcleo) (fi- verificar que haya ocurrido la fusión de
gura 2), a partir de los cuales puede los protoplastos. Algunos autores (Pol- Estudios futuros encaminados a mejo-
regenerarse una planta completa, me- ci y Friedrich, 2004; Navrátilová, 2004; rar las técnicas de regeneración de los
diante las técnicas de cultivo in vitro Divakaran et al., 2008; Montero y Car- cultivos de protoplastos, así como el
(Montero y Carmona, 2009; Ortega et mona, 2009; y Ortega et al., 2016) han estudio bajo condiciones de campo de
al., 2016). Pablo Polci y Pablo Friedrich empleado para ello la técnica mediante las vitroplántulas obtenidas por esta vía,
mencionan en su libro Biotecnología y la cual pueden aplicarse colorantes es- contribuirán en los programas de mejo-
mejoramiento vegetal (2004) que los pecíficos para teñir los protoplastos de ramiento genético vegetal, que actual-
procesos de hibridación somática han cada uno de los protoplastos parenta- mente se están realizando en un cultivo
permitido generar híbridos que no se les; de este modo, puede evidenciarse de gran importancia agrícola como es
habían podido obtener por cruzamien- la presencia de células fusionadas si V. planifolia. Este tipo de estudios po-
tos sexuales, con lo que ha sido posible uno de los protoplastos parentales se sibilitaría elevar la eficiencia para la ob-
obtener genotipos con características colorea (figura 3). Este método directo tención de genotipos promisorios que
deseables de interés agronómico. Pol- resulta una vía confiable, eficiente, sen- requieren los productores vainilleros de
ci y Friedrich (2004) han indicado que cillo y poco costoso para verificar la fu- nuestro país.
durante el proceso de fusión de proto- sión de protoplastos, por lo que es más
Bibliografía:
plastos ocurren en forma sucesiva los accesible que el empleo de otras técni-
Divakaran, M., Geetha, S., Pillai, K., Nirma, B. y Pete, B. (2008).
siguientes eventos: 1) las membranas cas, como la citometría de flujo, méto- Isolation and fusion of protoplasts in Vanilla species. Current
plasmáticas de protoplastos adyacentes do analítico muy útil para medir múlti- Science, 94, pp.115-120.
Montero, W. y Jiménez, V. (2009). Identificación y selección
entran en íntimo contacto, 2) se produ- ples parámetros celulares que permite de híbridos somáticos obtenidos mediante fusión de
cen alteraciones en sitios localizados de entre otras cosas, generar información protoplastos. Biotecnología vegetal. 9, pp.67-90.
Navrátilová, B. (2004). Protoplast cultures and protoplast
las mismas, formándose puentes cito- acerca del tamaño, forma y compleji-
fusion for Brassicaceae – a review. Horticultural Science.31,
plasmáticos entre protoplastos vecinos dad, fenotipo y cualquier componente pp.140-157.
y 3) las interconexiones citoplasmáticas celular y facilita el análisis y separación Ortega-Macareno, L. C., et al. (2016). Aislamiento y fusión de
protoplastos de Vanilla planifolia Jacks. Ex Andrews y Vani-
se expanden, provocando la fusión. La de aproximadamente 12 000 protoplas- lla pompona Schiede. Revista de la Asociación Colombiana
carga negativa neta de la superficie de tos por minuto; el equipo necesario es de Ciencias Biológicas, 28, pp.16-24
Polci, P. y Friedrich, P. (2004). Hibridación Somática. Biotecno-
las membranas produce la repulsión bastante costoso y las tasas de fusión logía y Mejoramiento Vegetal. Argentina, pp. 97-108.

FUSIÓN DE PROTOPLASTOS SEPTIEMBRE 2017 215 UNIVERSITARIOS POTOSINOS 15

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