Clases Biología Molecular Dogma Central de La BM

Biología molecular….
Dogma central de la
biología molecular
2019-2
Dogma central de la biología
molecular
Cuál es la molécula que transmite la herencia
• HISTORIA
• Antes se pensaba que el mat gen era proteína!
• Principios del siglo XX  genes en cromosomas
• 1920  Cromosomas = ADN + Proteína
• ADN en cantidad apropiada (gametos con la ½) 
acorde con descubrimientos de Mendel
• Pero solo correlación! No se demostraba
Frederick Griffith, 1920
• Estudio Streptococcus pneumoniae.
• Dos tipos de bacterias (S, virulentas) y las (R, no
virulentas)
• Y estos ratones muertos tenían una bacteria viva
que se parecía a la S!!!
• Descubrió el principio de transformación químico de
una cepa
• Podía causar un cambio heredable en la otra cepa.
• ¿Cuál era el principio de transformación?
• Análisis químicos del principio transfórmate

permitió identificar que este se podía
extraer de la célula
• Se heredaba a la siguiente generación
Avery, MacLeod, and McCarty, (experiment aislado DNA)
Experimento
confirmatorio
Cambia la actividad de la
célula convirtiéndola en
una maquina de
elaboración de fagos
Son las proteínas o el DNA
que es transferido a la nueva
generación de fagos
Oswald T.
Estructura del DNA
La estructura del ADN? Respuesta a preguntas:
¿Cómo se replica el ADN en las divisiones
nucleares?
¿Cómo hace el ADN que se sinteticen proteínas
específicas?
La estructura del ADN fue determinada tras reunir
evidencia de diferentes tipos:
Rosalind Franlklin
Watson y Crick solo la reunieron y dedujeron
Cristalografía de Rayos X
• Evidencia Crucial: cristalografía de rayos X del ADN (Rosalind
Franklin y Maurice Wilkins).
• Permite saber la posición de los átomos respecto a otros.
• ¿Qué más se sabía sobre el DNA?
• El ADN es un polímero de nucleótidos.
• Cuatro nucleótidos: con cuatro BN diferentes
• Existen dos purinas (adenina y guanina) y dos
pirimidinas (citosina y timina).
• Erwin Chargaff (1950)  No importa el organismo,
siempre las cantidades:
• A=T
• C=G
• ….La cantidad total de purinas es igual a la cantidad de
pirimidinas (Regla de Chargaff)
• Linus Pauling había sugerido que ADN debía tener
puentes de H pero no había visto las cristalografías de
rayos X
Estructura de los ácidos Nucleicos
• ¿Recordemos cuales son los ácidos nucleicos?
DNA y RNA
Francis Crick y James D. Watson
establecieron la estructura general del
ADN construyendo modelos:
• La molécula de ADN tenía forma de
hélice (Cristalografía de Franklin)
• Sabían las distancias dentro de la
hélice (2nm de ancho)
• Sabían proporciones de nucleótidos
(Chargaff)
• Estructura química de los
nucleótidos
Figura 11.6 ADN es una Doble Hélice
La Estructura del AND
• Cuatro características resumen la arquitectura
molecular del ADN:
• La molécula de ADN es una doble hélice.
• El diámetro de la molécula de ADN es uniforme.
• El giro en el ADN es hacia el lado derecho
• Las dos hebras corren en diferentes direcciones (es
decir, son antiparalelas).
Figura 11.7 El Apareamiento de las Bases en el ADN es Complementario
Las hebras son antiparalelas:
Enlaces fosfodiester: Grupo Fosfato con grupo OH

…Una hebra de ADN tiene un grupo 5’ fosfato en un extremo (el extremo
5’), y un grupo 3’ hidroxilo en el otro extremo (en el extremo 3’).
Figura 11.7 El Apareamiento de las Bases en el ADN es Complementario
Hay otros grupos que pueden

hacer Puentes de H…….. Y
están libres
Clave para la interacción con

proteínas importantes
Clave para que la replicación de

la hebra será semi-conservativa
Clave para la reparación del

DNA
• El material genético tiene cuatro características que son
esenciales para su función:
• Millones de nucleótidos: Almacena toda la información
genética de un organismo.
• Es susceptible a mutación.
• Apareamiento perfecto de bases:
• Replicación de forma exacta durante el ciclo de división celular.
• Transcripción a RNA de forma exacta: responsable del fenotipo de un
organismo.
Replicación del DNA….
Veamos un video introductorio ……..
https://www.youtube.com/watch?v=uEwyWgSvLc0
Recordemos: ¿cuál es la fase del ciclo

celular donde se replica el material
genético?
Determinación del Mecanismo de Replicación
del ADN
• El bioquímico americano Arthur Kornberg
demonstró que la molécula de ADN contenía la
información necesaria para su propia replicación.
• Mezclando en tubo de ensayo:
• ADN
• Deoxiribonucleótidos
• Una enzima
Modelo semiconservativo
usaría cada hebra parental como
molde para la nueva hebra.
Modelo conservativo
construiría una hélice
completamente nueva basada en el
molde de la hélice doble vieja.
Modelo dispersivo
usaría fragmentos de la
molécula original de ADN
como moldes para el
ensamblaje de dos moléculas.
Determinación del Mecanismo de Replicación del ADN
Cómo se demostró?
• Matthew Messelson y Franklin Stahl en 1957
marcaje por densidad.
• Utilizaron ADN marcado con Nitrógeno “pesado”
(15N): es más denso que el normal (14N): alimentar
cultivos de bacterias.
Figura 11.9 Experimetno de Meselson–Stahl
Características de la replicación
• Semiconservativa (no dispersiva, ni
conservativa)
• Semidiscontinua (okazaki – debido a la
direccionalidad de polimerización de la
polimerasa)
• Necesita un primer
• Es bidireccional
• El crecimiento de la hebra solo se da en
dirección 5´-3’
• La hebra molde esta en dirección opuesta y es
complementaria con la que se esta sintetizando
Formación del complejo de
replicación
• Es el DNA molde con el complejo de proteínas
necesarias para catalizar la reacción
• Origen de replicación (ORI): lugar donde se va
ensamblar el complejo de replicación, por lo tanto
donde inicia la síntesis de la nueva cadena
• Eucariotas cada cromosoma puede tener mas de un
origen de replicación
• En procariotas normalmente tienen un origen de
replicación
Horquilla de
replicación
Cada complejo de
replicación va
tener dos
horquillas de
replicación
Enzimas necesarias para la
replicación – general
• Que abren el DNA:
• Helicasa
• Topoisomerasa
• SSB
• Que sintetizan la nueva hebra: DNA polimerasa
• Que liga los fragmentos de la hebra rezagada:
Ligasa
PROCESO DE REPLICACION
Iniciación Elongación Terminación

Iniciación…
• Helicasa: realiza la apertura de la doble cadena
SSB. Van a estabilizar la

separación de las cadenas
La polimerasa necesita un primer
Primasa: (RNA polimerasa), va

sintetizar los primeros nucleótidos
de RNA (primer)
Cooper. La Celula
Enlongación-DNA polimerasas
• Extiende el extremo 3’ del

primer (polimeriza 5’  3’)
• Utiliza pirofosfato como la
fuente de energía para
polimerizar
• Estructura tridimensional:
• Explica por qué se
equivoca tan pocas veces
10^6
• Tiene la forma de una
mano
Elongación
Polimerasa III: realiza la síntesis del DNA después
del reconocimiento del primer (procariotas)
Una cadena se enlonga en el
sentido contrario
Cadena líder
Rezagada
F Okazaki: Cada 100 o 2000 nucleótidos en
eucariotas
Elongación de la cadena rezagada
Polimerasa I: va a eliminar los primers y
remplazarlos por DNA (procariotas)
Terminación
• Procesos:
• Separación de
las nuevas
hebras
• Deshacerse de
los primers y
rellenar los gaps
que estos dejan
(ligasa … unión
3´-5´)
Un cromosoma se acortaría en cada ciclo de
replicación
Telomerasa
• Telómeros:
tienen
repeticiones
ricas en GC
Alargamiento de la cadena rica en G

• Secuencias
específicas para
cada sp.
• Telomerasa:
enzima que
asegura la
longitud de los
telómeros
Reparación del DNA
Juguemos …..
Tingo …. Tingo … Tingo …. Tango
Preguntas
1. ¿Mencione dos características estructurales de la
molécula de DNA?
2. ¿Que es un origen de replicación?
3. ¿Cuál es la enzima que inicia el proceso de replicación?
4. ¿Cuál es la tarea de la primasa?
5. ¿En qué dirección sintetiza la DNA polimerasa?
6. ¿Qué es la hebra rezagada?
7. ¿Cuál enzima se encarga de proteger contra el
acortamiento de los cromosomas?
8. ¿Es el DNA capas de ser reparado. Mencione un
mecanismo de reparación?

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Biología molecular….

• Análisis químicos del principio transfórmate

Las hebras son antiparalelas:

Enlaces fosfodiester: Grupo Fosfato con grupo OH

Hay otros grupos que pueden

Clave para la interacción con

Clave para que la replicación de

Clave para la reparación del

Recordemos: ¿cuál es la fase del ciclo

Iniciación Elongación Terminación

SSB. Van a estabilizar la

La polimerasa necesita un primer

Primasa: (RNA polimerasa), va

• Extiende el extremo 3’ del

Alargamiento de la cadena rica en G

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