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Universidad Tecnológica PROTOCOLO DE VALIDACIÓN Revisión n°1

de San Juan del Río, PARA UNA INCUBADORA
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Química Farmacéutica VALIDACIÓN DE MÉTODOS ANALÍTICOS IQF02SV-18

Protocolo de Validación
Incubadora

INTEGRANTES
Luis Ignacio LOZANO PEREZ Firma: LL MK MJ MD
Karla María MANCILLA ORTIZ Grado: Estudiantes
Jesús MARTINEZ MALDONADO
Kimberly DARIANA MENDEZ JURADO

Destinatarios

SECTORES Ejemplares
Responsable Sanitario Informático
Responsable de Unidad Biológica Informático
Responsable de Unidad Química Informático
Responsable sub-unidad « Microbiología » Informático
Responsable de Gestión de Calidad Original
Responsable de Metrología Informático
Asistente de Calidad Informático
Conocimiento del documento :

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1. Objetivo

1.1. Cartografía de la estufa de cultivo (incubadora): el propósito de un mapeo es

verificar que la temperatura en el interior de la estufa es homogénea en todas
partes y que la temperatura que se muestra en el dial corresponde a ella. La
temperatura de la incubadora es de 37°C ± 1°C.

2. Fundamento teórico y campo de aplicación

2.1. Se utilizan 9 sondas colocadas en diferentes posiciones en los estantes de la estufa

y la temperatura es medida en cada una de ellas, primero cada minuto y luego cada
tres minutos.
2.2. El mapeo debe realizarse al recibir un nuevo equipo antes de su uso, para
determinar una temperatura específica (trazar el cambio de temperatura durante
el año), para incubadoras que cambian de temperatura durante el fin de semana,
después de una reparación, periódicamente (si el horno es estable, cada año se
debe verificar si hay una desviación en la incubadora durante las revisiones diarias).
2.3. En general, la prueba se lleva a cabo en una estufa vacía. Sin embargo, es necesario
comprobar si hay un equivalente cuando la estufa está cargada, debido a que el
peso en lugares específicos puede influir en las temperaturas.

3. Responsabilidades

3.1. Es responsabilidad del Responsable de Metrología asegurar el cumplimiento de este

procedimiento.
3.2. Es responsabilidad del supervisor de área capacitar a los analistas y verificar el
cumplimiento de este procedimiento.

4. Textos de referencia

4.1. Folleto de documentación de la AFNOR, FD V08-601, febrero de 2005, 1ª titulación,

Microbiología de los alimentos, Cámaras termostáticas, Caracterización, verificación
y seguimiento diario.
4.2. Hoja de documentación de la AFNOR, FD X07-015, agosto de 2007, 1ª titulación,
Conexión de los resultados de las mediciones al Sistema Internacional de Unidades
(SI).
4.3. AFNOR, X07-016, diciembre de 1993, 1ª titulación, Metrología, Pruebas, Metrología
en la empresa, Métodos prácticos para establecer procedimientos de calibración y
verificación de los equipos de medida.

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5. Precisiones

5.1. Después de colocar las sondas, esperar hasta que la temperatura visualizada haya
vuelto a la normalidad.
5.2. Si la incubadora está vacía, no es posible comprobar si la asignación es válida bajo
carga. Se recomiendo efectuar el ensayo con una carga llena o parcialmente llena.
5.3. Asegurar de que las 9 sondas están correctamente conectadas a los patrones de
medición SI por medio de una calibración, al menos una vez al año. AFNOR : FDV08-
601

6. Materiales

6.1. 9 sondas
6.2. Incubadora BINDER a 37°C
Nota 1. Para el reporte de validación, es necesario recolectar los datos establecidos en el
Anexo 1 Sondas, donde se muestra un ejemplo. Esta información se encuentra disponible en
los documentos asociados a las sondas que se utilizarán en el ensayo.

7. Procedimiento

7.1. La verificación se realiza en el interior de la incubadora. Ajustar la temperatura del

horno. Se trabaja en una incubadora a 37°C ± 1°C (1°C es el EMT1 para esta clase de
incubadora).
7.2. Conectar 9 sondas y colocarlas en diferentes posiciones en ambas placas, como se
muestra en la Figura 1. Posición de sondas.

Figura 1: Posición de sondas

1
Error Máximo Tolerado. En metrología, el error máximo permitido para un instrumento de medida; si la
medición está fuera de la zona definida por el EMT, el instrumento de medida se declara no conforme
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7.3. En la primera placa se colocan 4 sondas no demasiado cerca de las paredes (1 a 4).
En la placa superior, se colocan 4 sondas (5 a 8) y la novena sonda estará en el centro
del área de trabajo, entre las 2 placas.
7.4. Después de la instalación de las sondas, la temperatura debe ser estable en un
régimen establecido cercano a la temperatura objetivo. El tiempo de recuperación
será aquel en que la incubadora alcance la temperatura deseada.
7.5. Cuando se alcance la temperatura establecida, realizar 30 mediciones (mínimo).
Registrar una medición por minuto.
7.6. A partir de la trigésima medición, la temperatura se mide cada 3 minutos, ya que las
temperaturas siguen aumentando, por lo que suponemos que aún no hemos
alcanzado el régimen extendido.
7.7. Debido a las cargas, la distribución de la temperatura no es buena. Tal vez las cargas
no están bien distribuidas en el horno
7.8. Lectura. La sonda debe estar conectada a un transmisor y todos los transmisores
deben estar conectados a un colector que a su vez estará conectado a un ordenador
para recoger nuestros datos. También, se posible conectar las 9 sondas a un colector
que se conectará a un ordenador para recoger nuestros datos o bien realizarlo de
forma manual. Ver Anexo 2 Toma de muestras.
7.9. Criterio de aceptación ≤ EMT

8. Tratamiento estadístico

Estabilidad por sonda = valor máximo - valor mínimo

Estabilidad máxima Valor de estabilidad por sonda más alto
Promedio por sonda Promedio del muestro por sonda
Media de las medias Promedio de todos los promedio obtenidos de las sondas
= valor objetivo - media de las medias
Desviación del punto de ajuste
El valor objetivo será la temperatura ideal de la incubadora (37°C)
Indicador del error = valor indicado en el equipo - media de las medias
Desviación estándar
Desviación estándar de cada sonda
experimental
Incertidumbre extendida 𝑈𝑖 𝑒𝑥𝑡𝑒𝑛𝑑𝑖𝑑𝑎 = k √𝜎 2 + 𝑢 2 , donde k = 2 y u (incertidumbre de la sonda) = 0,1 °C

Valor mínimo = Promedio por sonda - Incertidumbre extendida

Intervalos de confianza
Valor máximo = Promedio por sonda + Incertidumbre extendida
Conformidad La media de la sonda debe estar entre los intervalos de confianza
Homogeneidad = 𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑚𝑎𝑥 − 𝑣𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑚𝑖𝑛
Desviación estándar global Desviación estándar de todos los valores
2 2
𝑈𝑖 = k √𝜎𝑣𝑎𝑙𝑒𝑢𝑟𝑠 𝑔𝑙𝑜𝑏𝑎𝑙𝑒𝑠 + 𝑢
Incertidumbre de la media
Media + incertidumbre

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Desviación estándar de la repetibilidad

𝜎 𝑟𝑒𝑝𝑒𝑡𝑖𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑
1 2 2 2 2 2 2 2 2 2
= √𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 1 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 2 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 3 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 4 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 5 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 6 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 7 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 8 + 𝜎𝑆𝑜𝑛𝑑𝑎 9
9
Desviación típica de la reproducibilidad
𝜎 𝑅𝑒𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑖𝑏𝑖𝑙𝑖𝑑𝑎𝑑

2
1 1 2
= √(𝜎𝑅é𝑝é𝑡𝑎 ∗ (1 − )+( ∗ { (͞𝑥𝑝𝑎𝑟 𝑠𝑜𝑛𝑑𝑒 1 − ͞𝑥𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑦𝑒𝑛𝑛𝑒𝑠 )2 + (͞𝑥𝑝𝑎𝑟 𝑠𝑜𝑛𝑑𝑒 3 − ͞𝑥𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑦𝑒𝑛𝑛𝑒𝑠 ) + (͞𝑥𝑝𝑎𝑟 𝑠𝑜𝑛𝑑𝑒 3 − ͞𝑥𝑑𝑒 𝑚𝑜𝑦𝑒𝑛𝑛
10 9−1

U Extendida 2
𝑈𝑖 é𝑙𝑎𝑟𝑔𝑖𝑒 = k √𝜎𝑟𝑒𝑝𝑟𝑜 + 𝑢2
En el Anexo 3 Tratamiento estadístico, se presenta un ejemplo de aplicación.

9. Reporte de los resultados obtenidos

9.1. Completar la siguiente tabla con los datos tratados.

Sonda 1 Sonda 2 Sonda 3 Sonda 4 Sonda 5 Sonda 6 Sonda 7 Sonda 8 Sonda 9

Estabilidad por sonda

(= valor máximo - valor mínimo)

Máxima estabilidad

Promedio por sonda

Promedio de los promedios

Desviación del punto de ajuste

(= valor objetivo - media de las
medias)

Indicación de error
(= valor indicado en el equipo - valor
medio)

Desviación estándar experimental

Incertidumbre extendida

Promedio por sonda - temperatura

expandida

Promedio por sonda + temperatura

expandida

Conformidad

Homogeneidad

Desviación estándar valores totales

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Incertidumbre de la media

Media + incertidumbre
Desviación estándar de la
repetibilidad
Desviación típica de la
reproducibilidad
U Extendida

Nota 2. En el Anexo 4 Conclusiones, se muestran conclusiones gráficas.

ANEXOS

Anexo 1. Sondas

MODELO No. SERIAL Calibración No. de Lote ID de Inspección

25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 1 0,0°C 85,0°C 07703 N.E.
0,1°C 85,1°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 2 0,0°C 85,0°C 07703 N.E.
0,2°C 85,2°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 3 0,0°C 85,0°C 30572 N.E.
0,2°C 85,1°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 4 0,0°C 85,0°C 30572 N.E.
-0,2°C 85,8°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 5 0,0°C 85,0°C 07703 N.E.
0,2°C 85,2°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 6 0,0°C 85,0°C 07703 N.E.
-0,1°C 84,9°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 7 0,0°C 85,0°C 30572 N.E.
-0,1°C 85,9°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 8 0,0°C 85,0°C 30572 N.E.
-0,1°C 85,5°C
25,0 °C 90,0°C
HI 147 - 00 9 0,0°C 85,0°C 07703 N.E.
0,1°C 85,1°C

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Anexo 2. Toma de muestras

Medida Sonda 1 Sonda 2 Sonda 3 Sonda 4 Sonda 5 Sonda 6 Sonda 7 Sonda 8 Sonda 9
1 34,3 34,9 35,8 37,3 35 35,5 37,1 36,6 34,8
2 34,4 35 35,8 37,3 35 35,5 37,1 36,6 34,8
3 34,4 35 35,8 37,3 35 35,6 37,1 36,7 34,9
4 34,4 35,1 35,9 37,3 35,1 35,6 37,2 36,7 34,9
5 34,5 35,1 35,9 37,3 35,1 35,7 37,2 36,7 35
6 34,5 35,1 35,9 37,3 35,1 35,7 37,2 36,7 35
7 34,5 35,1 36 37,3 35,1 35,7 37,2 36,8 35
8 34,6 35,2 36 37,3 35,2 35,7 37,2 36,8 35
9 34,6 35,2 36 37,4 35,2 35,8 37,2 36,8 35
10 34,6 35,3 36 37,4 35,2 35,8 37,2 36,8 35,1
11 34,7 35,3 36,1 37,3 35,2 35,8 37,2 36,9 35,1
12 34,7 35,3 36,1 37,3 35,3 35,8 37,2 36,9 35,1
13 34,7 35,3 36,1 37,4 35,3 35,8 37,2 36,9 35,1
14 34,8 35,4 36,1 37,3 35,3 35,9 37,2 36,9 35,1
15 34,8 35,4 36,1 37,3 35,3 35,9 37,2 36,9 35,1
16 34,8 35,4 36,1 37,3 35,3 35,9 37,3 36,9 35,1
17 34,8 35,5 36,2 37,3 35,4 35,9 37,3 36,9 35,2
18 34,8 35,5 36,2 37,4 35,4 36 37,3 37 35,2
19 34,9 35,5 36,2 37,3 35,4 36 37,3 37 35,2
20 34,9 35,5 36,2 37,3 35,4 36 37,3 37 35,2
21 34,9 35,5 36,3 37,3 35,4 36 37,3 37 35,2
22 34,9 35,6 36,3 37,3 35,5 36,1 37,3 37 35,3
23 35 35,6 36,3 37,4 35,5 36,1 37,3 37 35,3
24 35 35,6 36,3 37,3 35,5 36,1 37,3 37 35,3
25 35 35,6 36,4 37,3 35,5 36,1 37,3 37,1 35,3
26 35 35,6 36,4 37,3 35,5 36,1 37,3 37,1 35,3
27 35 35,6 36,4 37,3 35,5 36,1 37,3 37,1 35,3
28 35,1 35,7 36,4 37,3 35,5 36,1 37,3 37,1 35,4
29 35,1 35,7 36,4 37,3 35,5 36,2 37,3 37,1 35,4
30 35,1 35,7 36,5 37,3 35,5 36,2 37,3 37,1 35,4
33 35,2 35,7 36,5 37,3 35,6 36,2 37,3 37,1 35,5
36 35,3 35,7 36,5 37,4 35,6 36,3 37,4 37,2 35,5
39 35,3 35,7 36,6 37,4 35,7 36,3 37,4 37,2 35,6
42 35,3 35,8 36,6 37,3 35,7 36,3 37,4 37,2 35,6
45 35,4 35,8 36,7 37,4 35,7 36,3 37,4 37,2 35,6
48 35,5 35,9 36,7 37,4 35,7 36,4 37,4 37,2 35,7
51 35,5 35,9 36,7 37,4 35,7 36,4 37,4 37,3 35,7

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Anexo 3. Tratamiento estadístico

Sonda 1 Sonda 2 Sonda 3 Sonda 4 Sonda 5 Sonda 6 Sonda 7 Sonda 8 Sonda 9

Estabilidad por sonda

(= valor máximo - 1,2 1 0.9 0.1 0.7 0.9 0.3 0.7 0.9
valor mínimo)

Máxima estabilidad 1,2

Promedio por sonda 34,9 35.5 36.2 37.3 35.4 36.0 37.3 37.0 35.2
Promedio de los
36,1
promedios
Desviación del punto
de ajuste
0,9
(= valor objetivo -
media de las medias)
Indicación de error
(= valor indicado en
0,9
el equipo - valor
medio)
Desviación estándar
0,32 0.27 0.26 0.05 0.21 0.25 0.09 0.18 0.24
experimental
Incertidumbre
0,67 0,57 0,57 0,22 0,47 0,54 0,26 0,42 0,52
extendida
Promedio por sonda
- temperatura 34,20 34,88 35,66 37,11 34,90 35,43 37,00 36,54 34,70
expandida
Promedio por sonda
+ temperatura 35,55 36,03 36,80 37,55 35,85 36,51 37,53 37,38 35,75
expandida
No No No No No No
Conformidad Conforme Conforme Conforme
conforme conforme conforme conforme conforme conforme
Homogeneidad 3,35
Desviación estándar
0,90
valores totales
Incertidumbre de la
1,81
media
Media +
37°C ± 0,1
incertidumbre
Desviación estándar
0,22
de la repetibilidad
Desviación típica de
0,95
la reproducibilidad
U Extendida 1,91

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Anexo 4. Conclusiones

Fecha de aplicación : Autorización de difusión :

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