CUESTIONARIO

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1) Explique el método Rodac:
El método de contacto directo del agar con los microorganismos que se multiplican
(RODAC= Replicate Organisms Direct Agar Contact) utiliza placas Petri especiales, ideales
para la investigación de gérmenes en superficies. Se usa medio de cultivo TSA o diferentes
medios selectivos a conveniencia. Se añade a una placa de Rodac, un medio de cultivo sólido
(seleccionado en función de los microorganismos buscados), en ligero exceso, para que la
superficie quede convexa. Las superficies a controlar suelen ser limpiadas periódicamente
con detergentes y/o desinfectantes. Para realizar el recuento total de microorganismos en
superficie, es aconsejable neutralizar los restos de detergentes y desinfectantes ya que podrían
inhibir el crecimiento. Para ello se utilizará preferentemente un medio de cultivo que
contenga polisorbato, histidina y lecitina (a veces llamados Tween 80 y lecitina) que
funcionan como neutralizantes de aldehídos, compuestos fenólicos y amonios cuaternarios,
que suelen ser utilizados como desinfectantes y detergentes con actividad antibacteriana. Con
esta neutralización se consigue evitar interferencias, debido a que estas sustancias no pueden
inhibir el crecimiento colonial durante el periodo de incubación y por tanto no afectan a la
ulterior lectura e interpretación de resultados (Burguet L, 2013).
2) Explique el método de enjuague total:
Este método se emplea para tomar muestras de objetos pequeños como son cucharas,
tenedores, biberones, etc. o para el muestreo de superficies interiores de envases, botellas y
bolsas de plástico, etc. (IPN).
3) ¿Cómo se detecta Staphylococcus en portadores sanos?
Se siembra en placas Petri que contengan medio Agar Base Sangre, estriando con el asa para
obtener colonias aisladas para su identificación. Se observan las características morfológicas
de los distintos aislamientos y a las presuntas colonias de Staphylococcus se les realiza una
coloración de Gram, buscando sus características tintoriales. Se procede a la identificación,
para lo cual se emplea un test de diagnóstico e identificación Liofilchem de Italia System
Stafilococchi; se re suspenden las colonias a identificar en 5 mL de solución salina estéril al
0,85 % y de esa suspensión se trasfiere 0,2 mL (200 UL) a los pocitos del test de
identificación, donde se encuentran las pruebas bioquímicas y se procede a su incubación de
18-24 horas a una temperatura de 35 ± 2 oC.24. Una vez transcurrido el período de incubación
se procede a la lectura por cambios de coloración (Reij y Den Aantrekker, 2004).
4) Mencione la importancia del muestreo de superficie en la industria alimentaria:
Los análisis microbiológicos constituyen uno de los métodos de evaluación de la calidad

microbiana de los alimentos y de la higiene de los utensilios, equipos y superficies que
intervienen en el proceso de elaboración. Cuando resulta imposible analizar la totalidad del
universo poblacional se emplean métodos de muestreo, de cuya sensibilidad y exactitud
dependen de los resultados obtenidos y por consiguiente afectan a las decisiones a tomar. En
la actualidad este procedimiento se considera obsoleto puesto que el problema de hacer
análisis de producto final es que se detecta el problema, pero no se pueden identificar las
causas. Se considera que ningún método de análisis microbiológico viable permite afirmar
con total seguridad que el producto analizado presenta la calidad microbiológica deseada,
pero si nos indica la probabilidad de que sea cierto (Pecorelli y cols., 1993).
BIBLIOGRAFIA
 Burguet Lago, N., Brito Godoy, L. C., & Cánovas Borges, I. (2013). Evaluación de
la efectividad de un desinfectante mediante el método de placas de contacto. Revista
Cubana de Farmacia, 47(2), 185-192.
 Instituto Politécnico Nacional. Escuela Nacional de Ciencias Biológicas.
Departamento de Microbiología. Manual de Laboratorio de Microbiología Sanitaria.
 Pecorelli, S., Rosmini, M.R., Cabrera, A., Moreyra, E. y Otero, J. 1993. Comparación
de tres procedimientos de muestreos para el análisis microbiológico de superficies.
Fleischwirtschaft. Español 1, 38.
 Reij, M.W. y Den Aantrekker, E.D. 2004. Recontamination as a source of pathogens
in processed foods. International Journal of Food Microbiology 91, 1-11.

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2) Explique el método de enjuague total:

3) ¿Cómo se detecta Staphylococcus en portadores sanos?

4) Mencione la importancia del muestreo de superficie en la industria alimentaria:

Los análisis microbiológicos constituyen uno de los métodos de evaluación de la calidad

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