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    Práctica 2 y 3

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    BRYAN ALFREDO LINARES MARTINEZ
    Este documento describe los resultados de prácticas de laboratorio sobre técnicas de cultivo de microorganismos, incluyendo el cultivo en medios sólidos y líquidos usando diferentes técnicas de siembra. También cubre técnicas de tinción para visualizar las colonias y morfología bacteriana bajo el microscopio.

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    Práctica 2 y 3

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    BRYAN ALFREDO LINARES MARTINEZ
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    Este documento describe los resultados de prácticas de laboratorio sobre técnicas de cultivo de microorganismos, incluyendo el cultivo en medios sólidos y líquidos usando diferentes técnicas de siembra. También cubre técnicas de tinción para visualizar las colonias y morfología bacteriana bajo el microscopio.

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    Práctica 2 y 3

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    Este documento describe los resultados de prácticas de laboratorio sobre técnicas de cultivo de microorganismos, incluyendo el cultivo en medios sólidos y líquidos usando diferentes técnicas de siembra. También cubre técnicas de tinción para visualizar las colonias y morfología bacteriana bajo el microscopio.

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    de 8

    Integrantes :María Guadalupe Domínguez Pérez

    Bryan Alfredo Linares Martínez


    Gabriela Rodríguez Salazar
    Carolina Osornio Botello

    Microbiología y Parasitología
    Universidad Cuauhtémoc de Querétaro.

    Practica No.2
    “Elaboración de medios de cultivo y técnicas de sembrado”

    Observaciones y resultados:

    En esta imágen podemos ver los resultados de las siembras que se hicieron,
    utilizando la técnica de siembra por estría cruzada en caja.

    Los resultados se pueden ver muy fácil ya que se distinguen los cambios de
    color y de las texturas del agar.
    Aquí podemos ver como se tiene que esterilizar el asa para poder tener los
    resultados deseados sin mezclar las bacterias.

    En estas imágenes se puede observar los tubos con agar ya con siembra, la
    técnica fue siembra por zigzag.

    Cuestionario:

    1. ¿Qué asegura la esterilización por calor húmedo durante un tiempo de 15


    min. a 121 °C?

    El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus


    proteínas celulares. Uno de los principales métodos de la esterilización con
    calor húmedo es la esterilización por vapor a presión comúnmente en un
    autoclave en la cual se alcanzan las temperaturas de 121° C para la
    esterilización por 15 min.

    2. ¿Qué características de un material o sustancia se requieren conocer para


    elegir el método adecuado de esterilización? Dar algunos ejemplos.

    En la clasificación de los métodos de esterilización se manejan 3


    diferentes tipos de esterilización las cuales son
    por:
    3. ¿Cuál es la diferencia entre esterilización, desinfección y asepsia?

    Una desinfección se aplica sobre objetos con ayuda de desinfectantes y


    también sobre tejidos vivos. Mientras que una esterilización es la desinfección
    de toda forma de vida, aniquilando todo microorganismo ya sean patógenos
    o no patógenos.Y por último la asepsia es una acción que se consigue con la
    esterilización de una manera correcta y es toda ausencia de germen y de
    cualquiera de sus formas de resistencia.

    4. Mencionar otras dos técnicas de aislamiento en medio sólido y comparar


    con la técnica de estría cruzada.

    Técnica de estría cruzada: Se coloca la muestra y se realiza un barrido


    con un asa de inoculación hasta lograr separar colonias individuales de la
    cepa de interés.

    - Por diseminación en superficie: agotamiento de ansa, depósito y


    posterior quemado y dilución
    - Por mezcla

    5. Investigar la clasificación química, utilidad e interpretación de cada medio


    de cultivo usado en esta práctica.

    Agar nutritivo

    Composición/Ingrediente (g/L)

    Peptona 5.0

    Extracto de carne 3.0

    Gelatina 120.0

    Agua destilada cpb 1L

    Nutrient Agar se utiliza para el cultivo de bacterias y para el recuento


    de organismos en agua, alcantarillado, heces y otros materiales.

    Caldo Nutritivo

    Composición/Ingrediente (g/L)

    Peptona de caseína 5.0


    Cloruro de sodio 8.0

    Extracto de carne 3.0

    Agua oxigenada cpb 1L

    Se puede utilizar para el cultivo y la enumeración de bacterias que no son


    particularmente exigentes.

    Conclusión :
    Gracias a esta práctica se logró utilizar y aprender algunos de los métodos
    que existen para cultivar bacterias , de esta manera poder hacer uso del
    microscopio para su visualización e interpretación de las mismas gracias a la
    inoculación artificial de una porción de la muestra ,así como su técnica
    aséptica , seguimiento cuidadoso de tal manera evitando accidentes como,
    la contaminación y pérdida del cultivo en el laboratorio .

    Se pudo deducir que en cualquier medio de cultivo es importantes ajustar el


    pH ya que la mayoría de los microorganismo crecen mejor en pH neutro con
    esto favoreciendo su crecimiento .Con este propósito durante la incubación se
    debe proporcionar una temperatura acorde al crecimiento óptimo de los
    microorganismos .

    Bibliografía:
    SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS. (s. f.). Microbiología.

    Recuperado 30 de agosto de 2022, de

    https://hopelchen.tecnm.mx/principal/sylabus/fpdb/recursos/r130167.PDF

    Gutiérrez, S. (2001, octubre). MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN. UCV.


    Recuperado 30 de agosto de 2022, de
    http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicr
    o/10_M%C3%A9todos_de_esterilizaci%C3%B3n.pdf

    ASEPSIA Y ESTERILIZACION. (s. f.). Fetch. Recuperado 30 de agosto

    de 2022, de

    https://webs.um.es/mab/miwiki/lib/exe/fetch.php?media=g2.pdf
    Practica No. 3
    “Morfología Colonial y Tinciones”

    Observaciones y resultados:

    Este es el proceso que se estaba llevando para hacer la fijación de frotis a


    partir de medio líquido.

    En la imagen se ve que se estaba limpiando con agua destilada, es la técnica


    de tinción de Ziehl-Neelsen.

    Esta fue la otra fijación que se realizó, fue la fijación de frotis a partir de medio
    Sólido.
    Este es el resultado de la tinción y así se veía en el microscopio, en la primera
    imágen del microscopio se puede observar staphylococcus y en la segunda se
    ve la salmonella.

    Estos son los resultados del medio líquido, la primera imagen es salmonella y
    la segunda staphylococcus.

    Cuestionario:

    1. ¿Cómo se determina la textura de una colonia?

    Los microorganismos aislados en un cultivo se identifican con base en


    sus características como el tamaño, forma, aspecto y color de la colonia, etc.
    Estas singularidades son fácilmente identificables en medios de cultivos
    sólidos o en cultivos mixtos.

    2. ¿Por qué es diferente la fijación de una muestra proveniente de agar sólido


    en comparación con un medio líquido?

    La diferencia es la concentración del agar: en el medio de cultivo sólido


    contiene de un 1.5 a 2% de composición de agar-agar y el medio de cultivo
    líquido es un caldo, no es agar-agar.

    3. ¿Cuál es la diferencia entre tinción simple, diferencial y estructural?


    - Tinción simple: El colorante utilizado sirve solo para denotar la
    morfología celular.
    - Tinción diferencial: El colorante ayuda a diferenciar células
    bacterianas entre sí o entre partes de una misma célula.
    - Tinción estructural: El colorante ayuda a observar determinadas
    estructuras de los organismos expuestos, tales como: cápsulas,
    esporas, flagelos, etc…

    4. ¿Cuáles son las desventajas de la tinción simple? Investigar otros colorantes


    utilizados para este tipo de tinción además del azul de metileno.

    - Cristal violeta
    - Safranina

    Son catiónicos y se combinan fuertemente con componentes


    celulares cargados negativamente, como los ácidos nucleicos y los
    polisacaridos ácidos.

    5. ¿Qué papel cumple el calentamiento en la tinción de Ziehl-Neelsen?

    Provoca una re-solidificación de los ácidos grasos por lo que el


    colorante ya no puede salir de las bacterias.

    Conclusión:
    Se pudo aprender la descripción de la morfología de las colonias y tener un
    perfil de una especie bacteriana cultivable ,este puede ser muy variable ,en
    caso de que sean por ejemplo puntitos ,se reportan que son puntiformes .
    Se puede decir que las diferencias de los cultivos en relación del medio sólido
    al medio líquido son diferentes ya que en el medio líquido las células no están
    dispersa en un fluido con movimiento ,sino que se agregan formando colonias
    bien definidas la cual se atribuye al crecimiento de las colonias en existencia
    de gradientes de oxígeno, de nutrientes .
    Además la morfología de las colonias dependen de medios ambientales como
    la composición del medio ,la temperatura y porcentaje de humedad.
    El análisis de la morfología bacteriana tiene dos enfoques ,a simple vista o
    microscópica ,en el punto microscópico puede analizarse en función de las
    características generales de la forma, de la elevación y el borde .

    Bibliografía:
    R, O. G. A. (s. f.). Diseño del Kit de Tinción Ziehl Neelsen del Instituto Nacional de
    Higiene “Rafael Rangel”. Scielo. Recuperado 30 de agosto de 2022, de
    http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0798-04772016000100003
    UNIVERSIDAD TECNOLOGICA NACIONAL FACULTAD REGIONAL
    ROSARIO DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUIMICA. (2009). Trabajo práctico
    n° 4 “Tinción y observación de microorganismos.”CATEDRA DE BIOTECNOLOGIA.
    Recuperado 30 de agosto de 2022, de
    https://www.frro.utn.edu.ar/repositorio/catedras/quimica/5_anio/biotecnologia/practico
    4.pdf
    FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS UNIVERSIDAD NACIONAL
    DE CÓRDOBA. (2015). GUIA DE ACTIVIDADES PRÁCTICAS MICROBIOLOGÍA
    AGRÍCOLA. Microbiología Agrícola – F.C.A. U.N.C - 1. Recuperado 30 de agosto de
    2022, de
    http://agro.unc.edu.ar/~microbiologia/wp-content/uploads/2014/04/Guia-de-Trabajos-Pr
    acticos.pdf
    Manual de prácticas de laboratorio Microbiología y parasitología

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