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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA VEGETAL

MANUAL DE GUÍAS PRÁCTICAS


DE

Elaborado:
Ing. Lucia Quichimbo. Mg.
Sc Loja – Ecuador
2020
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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
MANUAL DE GUIAS PRÁCTICAS DE BIOLOGIA
INTRODUCCIÓN

El Manual de guías de biología es una herramienta didáctica al estudio de las “Ciencias de la


vida”, que le permite al estudiante integrar los conocimientos de la Biología básica que ha
adquirido en cursos previos y más avanzados.

Actualmente la biología, posee un amplio espectro de acción y está involucrada en una serie de
actividades que, inciden en el comportamiento del individuo y en su entorno. Al hablar de la
biología como una ciencia, esta se divide en áreas conexas a través del fenómeno “vida”, que
involucra un cambio radical en la forma de pensar y actuar de los individuos y su relación con
temas socio ambientales como la sobrepoblación, la contaminación, la bioética. A partir de la
tercera parte del siglo XX, la biología se divide en áreas como la botánica y la zoología, la
ecología, la bioquímica y la biofísica, la evolución, la genética y la fisiología. Esta división aun
con fines prácticos, ha sido desbordada por el desarrollo que se ha logrado en la biología, que ha
permitido ampliar sus fronteras que ahora incluye campos tan diversos como la cibernética, la
ingeniería y la manipulación genética; la producción de organismos artificiales, etc.
http://www.serbi.ula.ve/serbiula/librose/pva/Libros%20de%20PVA%20

El presente Manual de guías prácticas de biología ha sido diseñado para facilitar el aprendizaje a
los estudiantes que se inician en el campo del estudio del fascinante mundo de las ciencias
biológicas. Utiliza el método científico como su eje fundamental, para facilitar el aprendizaje de
los conceptos más generales de las ciencias biológicas que complementan la programación
teórica en Biología que recibe el estudiante. Con este manual se pretende establecer un contacto
directo con los fenómenos biológicos y las actividades de investigación científica, teórico
prácticas de tal manera que se prepare profesionales calificados y con una formación integral en
el conocimiento biológico.

El objetivo: principal de este manual de prácticas es ayudar al estudiante universitario en la


observación directa de los fenómenos biológicos, a través del método científico y consolidar los
conocimientos de la teoría con la practica, de tal manera que sea capaz de aplicar conceptos y
relacionarlos, además de facilitar la integración del conocimiento y despertar el interés del
estudiante en esta ciencia.

ELEMENTOS DE UNA PRACTICA

A continuación, se describen los elementos que integran una práctica: tema, objetivos,
fundamento teórico (Revisión de literatura), materiales y reactivos, procedimiento, resultados,
conclusión, cuestionario y/o preguntas de control, bibliografía- webgrafia consultada, anexos
(Repositorio de gráficos y fotos). Por otro lado, es necesario tener presente que las prácticas de
laboratorio deben estará acorde a la planificación del silabo, el horario, número de horas
prácticas, número de alumnos. la disponibilidad de equipos y material.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
a. Tema o título de la práctica.
En este elemento deberá expresarse el nombre de la práctica, este tema o título debe ser
sugerente, atractivo y relacionado con el tema o problema en estudio.

b. Objetivo de la práctica

El objetivo de la práctica señala la finalidad del experimento o actividad específica. Está


directamente relacionada con la demostración o comprobación practica que se va a llevar a
efecto. En la redacción puede proponerse un solo objetivo general o bien, en ocasiones,
desglosar diferentes niveles de éste; es decir objetivos específicos, como incisos del objetivo
general. Deberán ser redactados en forma clara, concisa, y ordenada.

c. Fundamento teórico (Introducción)


En este elemento se anotan los conceptos teóricos que sustentan el experimento propuesto:
teorías, leyes, métodos, técnicas y estrategias en las que se apoya. También se mencionan los
antecedentes de la situación actual; es decir del problema que se está resolviendo, las técnicas
usadas en el desarrollo de la práctica o proyecto experimental, según el caso, y todos aquellos
datos e información que permiten llevar a efecto el experimento. Este debe ser breve,
concreto y suficiente, y estar apoyado con las referencias bibliográficas utilizadas para el
desarrollo de la práctica.
e. Materiales, equipos y reactivos

Se detalla todo lo requerido en cuanto al tipo de equipos, materiales (reactivos, didácticos y


referenciales), tecnologías, instrumental, herramientas, instalaciones, software y personal.

Cada equipo tiene que ser manejado por un número pequeño de alumnos, de acuerdo al número
de estudiantes, número de equipos, y de acuerdo a la práctica. Lo ideal sería de un equipo por
estudiante, para favorecer una mejor discusión, además, para mantenerlos activos a lo largo de
la práctica.

f. Procedimiento de la práctica

Se describe la secuencia de la actividad práctica, relacionando los métodos, procedimientos y


las técnicas en una secuencia rigurosa y coherente, se debe explicar al estudiante los pasos que
debe seguir para realizar las actividades en el laboratorio y los detalles para pasar de una parte a
otra en cada acción planeada. Así como también, la relación de estos procedimientos con el uso
adecuado del material, equipos y del instrumental. El sistema educativo moderno, plantea el reto
de formar personas altamente preparadas y con flexibilidad mental para adaptarse a los cambios
por la introducción de nuevas tecnologías.

g. Resultados: El propósito de este es presentar los datos obtenidos en el desarrollo del


experimento, los cuales ponen de manifiesto que la actividad práctica realizada representa una
solución para el problema planteado, o es motivo del experimento. Estos pueden ser ilustrados
mediante gráficas, cuadros, diagramas o con cualquier representación adecuada, para darles
mayor objetividad y facilitar su lectura e interpretación.

h. Conclusiones: Comprende las contribuciones personales a partir de los resultados de la


práctica, o bien de las acciones producidas de todo el proceso de la práctica. En algunos casos
incluyen recomendaciones para futuras prácticas relacionados con el tema.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
i. Cuestionario y/o preguntas de control: El docente, se encarga de realizar el cuestionario de
preguntas de acuerdo a la temática de la practica realizada.

j. Bibliografía – Web grafía consultada: En este punto se indica la bibliografía básica y


complementaria con la que fueron elaborados los contenidos de las prácticas. Se recomienda
consultar las principales revistas que prioritariamente publican trabajos experimentales
específicos del área en estudio, así como libros de reciente publicación sobre la temática, y se
debe incluir la lista de sitios web o páginas web.
k. Anexos. Generalmente se incluyen fotografías o ilustraciones que puedan aportar algo extra a
la investigación.

RECOMENDACIONES
a. Cuidados

El personal que trabaja en un laboratorio está expuesta a riesgos no sólo de orden biológicos
sino también a los químicos, físicos, eléctricos, mecánicos y otros, siendo importante que
adquieran destrezas y modos de proceder en caso de accidente, y cumplir con las normas de
seguridad que tiene el laboratorio.

Todo persona o estudiante que ingrese al laboratorio, a realizar cualquier actividad o práctica
docente, debe tener conocimiento de las normas de seguridad que reposan en el laboratorio. En
el caso de estudiantes que ingresa por primera vez a realizar prácticas docentes, recibirán la
inducción o normas de seguridad que tienen que cumplir al inicio y termino de la práctica, el
responsable que debe indicar esta inducción será el técnico del laboratorio, Por ello se deberá
propiciar la capacitación de todas las personas expuestas a los riesgos del laboratorio: alumnos,
laboratorista, personal de mantenimiento y limpieza, entre otros.

b) Preparación de prácticas:

En el laboratorio es importante planificar las practicas u otra actividad con el objeto de eliminar
o disminuir los riesgos posibles que se puedan presentar.

La planificación de las prácticas se realizará en coordinación con el docente de la materia,


mismos que informarán el nombre de la materia, tema de la práctica de acuerdo a lo planificado
en el silabo, número de estudiantes, número de grupos, y el horario de clases prácticas

El docente tiene que presentar la guía de la práctica al técnico encargado del laboratorio y al
estudiante dos días antes de iniciar la práctica para que tenga conocimiento.
Antes de iniciar la práctica u otra actividad, el técnico se encarga de verificar las condiciones
del laboratorio, instalaciones, equipos.
El técnico realiza limpieza de equipos, herramientas, mesones, esterilización de material de
vidrio y otros, preparación de soluciones.
Organiza el número de equipos, numero de materiales, soluciones de acuerdo al número de
estudiantes por grupo.
Terminada la practica el técnico se encarga inmediatamente de recolectar el material ocupado en
las practica, limpieza de equipos ocupados y colocados en su lugar, eliminación y ubicación de
materiales de riesgo (corto punzante, vidrios, y otros) en los recipientes etiquetados que tiene el
laboratorio.
Al término de la práctica, el estudiante tiene que registrarse.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
REGLAS GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO

Al Estudiante:

Las indicaciones que se dan a continuación le permitirán comprender la utilidad de las prácticas
en el laboratorio y las normas que deberá tener presente (Aplicación normas del Instructivo)

INGRESO AL LABORATORIO

 Docente, estudiante, pasante, egresado, debe ingresar con su respectivo mandil.


 Lavarse las manos con agua y jabón antiséptico, al inicio de cada procedimiento.
 Utilice guantes de látex, mascarillas, gafas, en todo procedimiento y de acuerdo al riesgo al
que se esté expuesto.
DURANTE LA PRÁCTICA Y ACTIVIDAD LABORAL

 Obligatorio usar en el laboratorio mandil blanco, manga larga y cerrado.


 Mantener el sitio de trabajo limpio y en orden
 No fumar ni comer, ni maquillarse en el área de trabajo
 Mantener las uñas cortas y limpias.
 Si su cabello es largo recójalo hacia atrás.
 Disponer sobre la mesa solo los libros y cuadernos que sean necesarios.
 No guardar alimentos en los congeladores.
 En caso de lesiones con objetos corto punzante o vidrio, informar al docente o técnico del
laboratorio.
 Colocar los objetos corto punzante desechados y de vidrio roto en los respectivos
recipientes etiquetados.
 Al momento de utilizar los reactivos, no dejar destapados, ni aspire su contenido, (alcohol,
éter, cloroformo, ácidos) emiten vapores tóxicos.
 Celular, solamente lo utilizará al momento de fotografiar, si tiene una llamada urgente
solicita permiso y sale a contestar.
 Mantener el orden y silencio durante la actividad práctica.

AL TERMINO DE LA PRACTICA Y CULMINACION DEL TRABAJO

 Realizar la limpieza de ambientes de trabajo una vez cumplida la actividad.


 Limpiar, ordenar, guardar, entregar o desechar todos los equipos, materiales e insumos
utilizados durante la práctica.
 Guardar, limpiar o desechar el equipo de protección personal. Realizar la limpieza de
ambientes de trabajo concluida la práctica.
 Todos los materiales, muestras, deberán ser descontaminados por el técnico del
Laboratorio, antes de eliminarlos o de limpiarlos para reutilizar
 No dejar destapados los frascos de los reactivos, ni aspire su contenido, (alcohol, éter,
cloroformo, ácidos), emiten vapores tóxicos.
 Lavarse las manos con jabón antiséptico, preferiblemente líquido, al final de cada
procedimiento y concluido la actividad.
 Retirar el mandil, al concluir la práctica o actividad.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
“RECONOCIMIENTO Y FAMILIARIZACIÓN CON LOS, EQUIPOS, Y
MATERIALES UTILIZADOS Y LA APLICACIÓN DEL INSTRUCTIVO.

UBICACION ZONAL DEL LABORATORIO DE FISIOLOGIA VEGETAL

A.63.B.50

EQUIPOS:

 Congelador horizontal. Código: B1-B3-B4-B5.LFV-001


Descripción técnica: Contiene bisagras balanceadas, etiqueta
con información de uso, vedación magnética, cesto (removible),
reja divisoria (removible), asa, tapa drenaje, consola, pies
estabilizadores o rodillos, control de temperatura, luz verde:
indica que el producto está conectado, luz amarilla: indica que
la función congelación rápida está accionada, pulsador de
congelación rápida indicado para acelerar la congelación de
alimentos.

(Debe ser desconectado después de 48 horas). (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)


Mantenimiento: Preventivo 2019

 Refrigerador. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-002


Descripción técnica: Refrigerador domestico de 2 puertas,
tipo compresor, clase ST. Posee un control de flujo de aire o
temperatura del congelador, sistema no frost sin escarcha,
reloj y termómetro digital, ice maker automático (es un
accesorio que produce hielo automáticamente), dispensador
de agua, chilled room (lugar más frio del refrigerador),
parrillas de vidrio flotante, parrillas de vidrio sobre noyos,
parrillas metálicas y/o de vidrio con bujes, balcones
plásticos, balcones metálicos, calentamiento periférico,
calentamiento del divisor central. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-UNL) Mantenimiento: Preventivo 2019

 Incubadora o germinador digital. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-003


Descripción técnica: Presenta una máquina de refrigeración,
calefacción, un humidificador, condensador, unidad de control,
ventilación, suministro de aire fresco, y un cuarto para pruebas
o ensayos, contiene programas que consisten en varias
secciones: en función de la versión del dispositivo, perfil de
temperatura, el perfil de la humedad, perfil de iluminación).
(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)
Mantenimiento: Preventivo 2019

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

 Incubadora o germinador digital tipo MKKL 600/1200. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-


05

Descripción técnica: Dimensiones externas;


Aproximadamente 2000 x 740 x 800 mm (HxWxD);
dimensiones internas: aproximadamente 1350 x 530 x 650 mm
(HxWxD); rango de temperatura: Desde 2 hasta + de 55 oC;
Rango de humedad relativa: desde 50 hasta 96%; temperatura
ambiente: 10 hasta 300C; humedad relativa Ambiental: Max
85%; Conexiones: Voltaje: 230 V/50HZ. /1000 Vatios.
Externamente presenta una puerta; está equipado con un
termostato mecánico que funciona como un limitador de la
temperatura de ajuste del termostato. Pantalla digital;
internamente presenta cinco parrillas, para la iluminación utiliza seis lámparas fluorescentes de
36 vatios (W), está adaptado a una llave de paso, adherido a un filtro, que sirve como
humidificador. ((Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

Mantenimiento: Preventivo 2019

 Destilador de agua. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-06

Descripción técnica: Destilador diseñado para proporcionar


aproximadamente 3 litros /hora de agua destilada de ata pureza.
La conexión de agua debe encontrarse a 1 metro del destilador,
el paso del agua debe ser ajustado por una válvula de cierre y
un tubo reductor.
Sirve para destilar agua tipo III para diferentes usos (lavado de
semillas, medios de cultivo, lavado de cristalería y muestras
vegetales, preparación de soluciones, etc). (Foto. Laboratorio
de Fisiología Vegetal-UNL)

Mantenimiento: Preventivo 2019

 Incubadora. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-07


Descripción técnica: contiene un botón para encender,
termostato para regular la temperatura, termómetro, una puerta
con manija, botón para controlar la ventilación; internamente
contiene dos parrillas, y un ventilador.

Incubadora o germinador manual, que funciona con un


parámetro temperatura; sirve para realizar ensayos o pruebas de
germinación de semillas. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

 Balanza digital. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-08

Descripción técnica: Marca Mettler PE. Balanza metálica,


contiene un nivelador, una barra para encender y apagar,
capacidad mayor a 10000 gramos funcionamiento a 120v/60,
se usa para pesar unidades de gramos de sustancias químicas,
semillas, etc., (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-
UNL).

 Balanza de tres pesas. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-09

Descripción técnica: Marca Ohaus es un instrumento de


pesaje triple, consta de un brazo mayor con capacidad (500g,
100g y 10g); un pato superior; dos pesas de un kilogramo y
una de 500gramos. Se utiliza el para permite su pesaje tanto
de semillas como de animales. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-Unl

 Estufa eléctrica o estufa universal. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-10

Descripción técnica: Termostato que va de de 30 – 200o


C; Termómetro de o a 200 oC; Voltios: 110; Watios: 1500;
50-00-00-220oC; 7/70. La estufa eléctrica es un equipo de
estructura metálica, constituido por tres paredes y dos
cámaras, entre las cuales circula el aire seco y caliente,
paredes exteriores recubiertas por una capa de asbesto
reduciendo la radiación del calor, presenta un termostato
para regular la calefacción, una escala en forma de reloj
para graduar la temperatura marcada y un botón regulador,
dispositivo para regular entrada y salida de aire, un juego
de interruptores para encendido y apagado del equipo.

Equipo cerrado que permite controlar la temperatura, humedad y otras condiciones necesarias
para el desarrollo de una práctica o de investigación. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-
UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
 Estufa. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-11
Descripcion técnica. - Estufa metálica marca MEMMERT, serie 231808.
Voltios: 220; Vatios: 2200

 Incubadora: Código: B1-B3-B4-B5. LFV-12


Descripción: Marca LAP LINE Instruments. Modelo 150-12hertz 50/50, voltios 120,
amperios 1.0, serie 0074, scienc teachimg.

 Microscopio meopta. có Código: B1-B3-B4-B5. LFV-13

Descripción técnica: Microscopio con sistema óptico. Sistema de


iluminación incorporado: foco de bayoneta de 12 V. Oculares:
Objetivos: 4X, 10X, 45 X, 60 X Y 100X. Platina Mecánica.
Condensador con diafragma.

Equipo eléctrico que permite la observación de estructuras


microscópicas. ((Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Estereomicroscopio Erma óptica works. Código:. : B1-B3-B4-B5 LFV-14

Descripción técnica: Estéreo microscopio con oculares de W5 X


STEREO y zoom rango 2,0 X- 4,0 X. la plantilla es de
vidrio esmerilado de 75mm de diámetro para iluminación
transmitida y contraste de blanco / negro de 75 mm para
iluminación. Modos de enfoque situados a ambos lados con
dispositivo de control de fricción. Sistema de enfoque por piñón.
Cabeza Binocular inclinado, a una distancia interpupilar ajustable,
corrección dióptrica ambos tubos oculares Modelo 21052. Equipo
eléctrico que permite la observación de estructuras macroscópicas

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
de plantas, insectos y semillas. (Foto. Laboratorio de FisiologíaVegetal-UNL)

 Estereocopio bauusch lam stereo-zoonn. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-15

Descripcion técnica: Marca BAUUSCH LAM STEREO-ZOONN de 08 mod. AVB, con


dos oculares micrométricos. Nro. 31-15-71.

 Microcentifuga BRINMINE INSTRUMENTS INC. Código: B1-B3-B4-B5. LFV-16


5414-13437 BRINMINE INSTRUMENTS INC. Color amarillo.

 Cámara de aislamiento manual. Código: B1-B2-B3-B4. LFV-017


Descripción técnica: es un área estéril, que sirve para
realizar la siembra de semillas en condiciones controladas
bajo asepsia, siembra de material vegetal infestado en medios
de cultivo. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Calibrador digital: código: Código: B1-B2-B3-B4. LFV-018

Descripción técnica: Funciona a batería SR44 (celda de


óxido de plata). Equipado con un desplaye digital para
mostrar las medidas ya sea en mm o en pulgadas. La
precisión del pie de rey normalmente es de: 1/10 mm =
0.1 mm Permite apreciar longitudes de 1/10, 1/20 y 1/50
de milímetro utilizando el nonio. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
MATERIALES

Material de vidriería. - Este material debe estar y usarse limpio y estéril, resistentes al fuego
directo, altas temperaturas, resistentes a los ácidos y álcalis, entre las clases de vidriería
podemos citar JENA de la casa SCHOTT de Alemania Occidental, PIREX fabricado por
diferentes casas.

 Probetas

Tubo graduado en toda su longitud, provisto de una base


ensanchada que le sirve para mantenerse en pie, sirve para medir
volúmenes de líquidos y soluciones con poca exactitud, existen de
diferente volumen desde 10 ml hasta 2000 ml; su margen de error
es de ± 5 ml. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Vaso de precipitación

De vidrio pírex, resistente al calor y altas temperaturas, de forma


cilíndrica posee un pico en su parte superior, que sirve para el
trasvase de líquidos, evitando el derrame de un recipiente a otro, no
son exactos, utilizado para la preparación de soluciones y la
cocción de medios de cultivo, disolución de reactivos, filtraciones.
Existen de diferente volumen desde 20 ml hasta 2000 ml; posee un
margen de error de ± 5 ml. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL

 Erlenmeyer

Recipiente cónico de boca angosta y base ancha, apropiados para


realizar mezclas, agitando el contenido del líquido evitando que se
derrame, de poca exactitud, con margen de error de ± 5 ml. Se
usan para preparar medios de cultivo y para cultivar medios
sólidos o líquidos. Se usan matraces de todas las capacidades,
dependiendo del volumen de trabajo. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal- UNL

 Balón volumétrico

Recipiente esférico, con una abertura que se prolonga en un tubo


de boca angosta, por su característica evita que se derramen los
líquidos, de fácil manejo, son exactos, sirve en la preparación de
soluciones antioxidantes y sales minerales. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-UNL

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

 Tubos de ensayo

De vidrio pírex, resistentes al calor directo, de diferente


longitud y diámetro, base redondeada o plana, para cubrir los
tubos de ensayo, una vez inoculado el explante, se usan los
siguientes materiales: tapas algodón no absorbente, papel
aluminio, tapones de plástico, tapones de hule, tapa rosca, si el
medio de cultivo es líquido, en el interior del tubo se coloca un
soporte de papel filtro con la finalidad que el explante a ser
inoculado sea colocado en la parte superior evitando que se
caiga en el fondo
del mismo, por su diámetro permite sembrar un solo explante, con menos riesgo de
contaminación. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)
 Cajas de petri

Recipientes circulares con tapa y base de vidrio o de plástico,


sirve para colocar el material vegetal, semillas, embriones,
explante de hojas, se utilizan también, para la germinación de
ciertas semillas con algodón saturado de agua destilada,
colocadas en el germinador °C. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-UNL)

 Embudo de cristal

Recipiente cónico, con un vástago que termina en bisel,


permite separar un sólido de una solución, sirve para
filtraciones con algodón o papel filtro, para la distribución o
el trasvase de líquidos, cuando los recipientes son de boca
angular, Previene contra el desperdicio o derramamiento
innecesario o accidental. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL)

 Pipeta milimetrada

Son tubos huecos graduados en toda su longitud, sirve para


medir o pipetear soluciones con absoluta precisión, tomando
siempre en cuenta con qué tipo de soluciones se va a trabajar.
(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

 Pipeta volumétrica

Instrumento aforado, es un tubo transparente de vidrio o


plástico que posee solamente una grabación, ensanchado es su
parte media que indica una capacidad volumétrica
determinada. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Mortero de porcelana con su mango

De porcelana o de cristal, de forma semiesférica provista de


un mango del mismo material, sirve para triturar y reducir en
polvo las sustancias que se encuentran en forma de partículas
grandes (ejemplo carbón activado), además, para la trituración
de muestras vegetales. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal- UNL)

 Frascos con tapa

Por su característica no resiste al calor directo y altas


temperaturas, se los utiliza para guardar semillas de tipo agrícola
forestal y agronómico. generalmente de tapa tipo garra (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Porta objeto y cubre objeto


La porta objeto es una lámina rectangular fina de cristal, con dimensiones de 76 x 26 mm,
existen de otras dimensiones, ésta es la más conocida y utilizada, para colocar cortes de tejido
vegetal. El
cubre objeto es una lámina de cristal cuadrada de 12 x 12 mm,
que es colocada luego de la muestra preparada sobre la porta
objeto. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNl)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
4.2.2 Material de disección e inoculación. - De material inoxidable que resistan continuas
esterilizaciones en autoclave, estufa y flameo, sirven para la manipulación de material vegetal,
semilla, todo este material de inoculación debe ser envuelto en papel aluminio.

 Pinzas

Se utiliza de varios tipos de tamaño, para inocular, trasplantar, como


material de apoyo y manipulación para la siembra de semillas bajo
condiciones controladas. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-
UNL)

 Tijeras

El tamaño y el tipo de tijeras dependen del propósito del ensayo, más


frecuentemente se las emplea para cortar hojas vegetales, raíces,
pedúnculos bajo ciertas condiciones asépticas. (Foto. Laboratorio de
Fisiología Vegetal-UNL)

 Espátulas

Llamadas también paletas, de diferente tamaño, de mango corto y largo,


sirve como apoyo para el peso de reactivos, vitaminas, hormonas. (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Bisturí (mango y cuchillo)

Se usan estos instrumentos para realizar incisiones en meristemos,


yemas, pedúnculo, anteras, debiendo estar esterilizados para evitar las
contaminaciones a los tejidos.

(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

 Agujas de disección

Varillas de acero y platino, con punta aguda, se maneja por un mango


que contiene en un extremo, utilizados para transportar sustancias en
preparación como cortes de tejidos vegetales, inocular esporas de
helechos, semillas de orquídeas, aislamiento de meristemos o células
en cultivo de fácil desmenuzamiento

(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Vaqueta o agitador de vidrio

Es una varilla de vidrio o metal que sirve para mezclar o remover


soluciones y evitar su derrame. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL)

 Mechero de alcohol

El mechero de alcohol es utilizado para la siembra de semilla, genera


energía calorífica mediante la quema de combustible (butano,
alcohol, etc.), con la llama se consigue un menor rendimiento térmico
en el área de trabajo dentro de la cámara de flujo laminar durante el
proceso de inoculación o siembra, también se utiliza para
cauterizar semillas contaminadas. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL/ejemplo

Material fungible. - Comprende todo el material necesario para las prácticas de fisiología y
biología, luego de ser utilizado es descartado o desechado.

 Algodón

Empapados con alcohol o cloro se usa para la desinfección de las


áreas de trabajo; en la confección de tapones para tubos de ensayo y
caias petri como medio de germinación para germinar semillas.
(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
 Papel filtro

De constitución porosa de célula pura, permite el paso de los


líquidos reteniendo los sólidos no disueltos como un colador fino;
en la confección de caballetes cuando el medio de cultivo es líquido
y en la germinación de semillas. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL)

 Papel aluminio

Sirve para envolver todo el material de inoculación previo al


autoclaveado, se usa en la confección de tapas para tubos,
erlenmeyers, probetas evitando la entrada de polvo. (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Papel kraff

Material grueso, resistente a la humedad y altas temperatura, sirve


para envolver cajas petri, algodón, papel filtro y aluminio para su
esterilización en la autoclave. (Foto. Laboratorio de Fisiología
Vegetal-UNL)

 Gradillas

Forma parte de la utilería de laboratorio, sirven para colocar tubos


de ensayo luego de la inoculación de explantes, existen de
diferente longitud, diámetro y capacidad, como también de
deferente material ya sea plástico, aluminio y madera. (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
 Botellas Ámbar

Por su color oscuro evitan que traspasen los rayos de luz directa,
recomendable para guardar soluciones madres de Murashige &
Skoog) evitando que se degraden, existen de diferente volumen y
tamaño (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

 Piseta

Llamado frasco lavador, es de plástico desde su interior sale un


tubo hacia afuera y termina en curva, existe de capacidad de uno y
medio litro, fácil de manipular, contiene siempre agua destilada,
facilita la limpieza del material de vidriería como enjugue y para
enrazar soluciones. (Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-
UNL)

 Rociador

De plástico, de fácil manipulación con solo presionarlo, con


alcohol sirve para rociar y desinfectar material que será introducido
en la cámara de flujo laminar, desinfección del área a trabajar, y
con agua para el riego y fertilización de plantas. (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

Material de identificación. - Sirve para etiquetar e identificar frascos, botellas, maceteros, etc.

 Cinta masking

También llamada cinta aseguradora, sirve para la identificación de


soluciones madres, tubos y frascos inoculados y reactivos. (Foto.
Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
 Marcadores

Preferible de tinta indeleble y punta fina, sirve para la


identificación de soluciones, y para identificar frascos, tubos de
ensayo, cajas petri, luego que se ha realizado la siembra in vitro.
(Foto. Laboratorio de Fisiología Vegetal-UNL)

BIBLIOGRAFÍA

http://www.serbi.ula.ve/serbiula/librose/pva/Libros%20de%20PVA%20

Minchala, J. 2012. Catálogo de Equipos del Laboratorio de Micropropagación Vegetal.


Universidad Nacional de Loja. 25 p.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
PRÁCTICA N° 1

TEMA: Microscopía en las ciencias biológicas

OBJETIVOS:

 Conocer el funcionamiento, componentes, cuidados y limpieza del microscopio


óptico y el microscopio estereoscópico.

INTRODUCCION

El instrumento básico para el estudio de células y tejidos vegetales es el MICROSCOPIO DE


LUZ, su poder resolutivo es la capacidad de hacer que aquellos objetos que están muy juntos
aparezcan separados; para que nos demos una idea el poder resolutivo del ojo humano es de
aproximadamente 0.1 mm, de modo que si dos líneas están separadas entre sí por menos de
0.1 mm, dichas líneas aparecerán como una sola línea, no importa cuánto se acerque el
observador a ellas; para tener un ejemplo, la mayoría de las células tienen un diámetro inferior
a
0.1 mm es decir sin ayuda de lentes la vemos como una sola estructura.

Los microscopios empleados en microscopia común son de tipo óptico o compuesto y el


estereoscopico o de disección; se disponen de una gran variedad de modelos en su
construcción; básicamente, los microscopios ópticos se caracterizan por tener un tubo que lleva
dos sistemas de lentes: el ocular en el extremo superior y el objetivo en el extremo inferior; la
imagen se forma por el objetivo y se magnifica por el ocular.

Los microscopios equipados con un solo ocular se llaman monoculares; aquellos con dos
oculares, binoculares; dependiendo de su tipo, un microscopio puede estar equipado con varios
objetivos intercambiables, los más comunes son 2.5x (lupa), 10x, 40x y 100x. Un accesorio
indispensable en los microscopios es el condensador, el cual es un tercer sistema de lentes que
ayuda a regular el contraste de la imagen y la intensidad de la iluminación; los condensadores
no se encuentran en los microscopios de disección o estereomicroscopios.

Con el microscopio óptico pueden lograrse aumentos de hasta 2000x. El aumento total es el
producto de poder de aumento del ocular multiplicado por el poder de aumento del objetivo y
por el poder de aumento del condensador. El poder resolutivo del microscopio de luz, está
limitado por la longitud de onda de la luz visible que utiliza, a esto se le denomina campo
brillante; sin embargo ciertas técnicas de la microscopia de luz, han ayudado a aumentar el
alcance de éste instrumento; una de éstas técnicas se conoce como microscopia de campo
obscuro, en éste método se utilizan lentes que desvían los rayos de luz de manera que sólo la
luz que pasa a través del espécimen llega hasta el ojo del observador, esto hace que el objeto
parezca brillante sobre un fondo obscuro.
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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
Manejo de microscopios

 El microscopio debe ser transportado utilizando LAS DOS MANOS A LA VEZ, con
la mano izquierda se sujeta por el brazo y con la mano derecha se sujeta por la parte
inferior.
 Antes de trasladarlo asegúrese de que todas las piezas que lo componen están
aseguradas a él; asegúrese sobre todo objetivos, platina, espejo, lámpara y cable de luz
enrollado.
 El sitio de utilización debe ser sobre una superficie firme, plana, estar LIMPIA, sin
ningún objeto.
 El contacto tomacorriente debe estar a una distancia para que el cable no quede ni muy
tenso ni muy holgado, el cable debe estar ubicado de tal manera que durante su uso no
estorbe ni puedan atorarse los usuarios.

USO DEL MICROSCOPIO.

 Durante su uso, por ningún motivo debe ser movido de su lugar, como el uso
del microscopio es común, los usuarios son los que deben moverse para hacer las
observaciones
 La intensidad de la luz debe ser regulada de tal manera que NO SOBREPASE la mitad
de graduación máxima, lo ideal es un tercio, esto con varias finalidades: no calentar
demasiado los microscopios, no dañar los reguladores, no sobre calentar los focos y
con ello fundirlos y sobre todo no perjudicar la retina del usuario.
 Por ningún motivo deben ponerse al microscopio material de cristalería que este
húmedo o que contenga alguna substancia (colorante, solvente, reactivo, agua);
únicamente debe hacer contacto con el microscopio material de cristalería:
portaobjetos, cajas Petri, vidrios de reloj, portaobjetos excavados.
 NO poner material directamente sobre la platina o la placa de observación.

LIMPIEZA ÓPTICA.

 Para evitar la contaminación de las superficies ópticas.


 Mantener el microscopio cubierto con su funda cuando no está en uso.
 No toque los lentes con ningún objeto, sobre todo ponga atención en párpados, pestañas,
dedos, aceite de inmersión o jalea de glicerol, etc. Los ojos del usuario no deben
contener ninguna pintura, polvo, etc.
 No frote los lentes con objetos que pudiera tener abrasivos o partículas que pudieran
dañarlos (batas, pañuelos, papel absorbente, camisas, etc.).

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
 No ponga en el microscopio portaobjetos que contengan en la superficie inferior: agua,
aceite, resina, jalea, o cualquier medio de montaje, etc.
 Para remover contaminación de las lentes.
 Es mejor examinar la lente con lupa o estereomicroscopio que a simple vista, la
luz reflejada es preferible.
 Se pueden remover partículas sueltas por medio de soplar con una perilla de aire.
 Otros contaminantes se quitan con disolventes como agua o xileno; antes de usar un
disolvente, cerciórese de que lo que va hacer no es perjudicial al microscopio; estos se
aplican con frotación con papel de lentes, papel seda o con algodón limpio. Estos
materiales no se vuelven a usar, porque podrían acarrear abrasivos, huellas digitales u
otras películas delgadas de grasa pueden quitarse con disolventes según el paso II. (en
caso de que estén los lentes sucios, el técnico responsable del laboratorio es quien
deberá realizar esta operación).
 Después de usar disolventes, los últimos restos del contaminante se remueven con
papel de lentes, algodón seco o espuma de poliestireno (unicel). El poliestireno es
soluble en xileno y etanol, así que es importante que no esté en contacto con éstos,
sobre todo, sobre los lentes. La espuma de poliestireno se corta en barras de 10 a 15
mm de diámetro, con una navaja se recortan puntas sucesivas para crear superficies
limpias, las cuales se usan para frotar los lentes. Consulte con los técnicos del
laboratorio en caso de cualquier duda de la limpieza del microscopio.

AJUSTE DEL MICROSCOPIO ÓPTICO O DE LUZ TRANSMITIDA

 La microscopia de luz transmitida, conocida también como campo claro es el método de


microscopia óptica más usual, ya que con su ayuda se puede observar sin complicaciones
y mayores esfuerzos las preparaciones biológicas ya sea con o sin tinción. Para obtener
la resolución óptima cuando se ilumina por completo el campo visual, es indispensable
ajustar el condensador, el diafragma de campo luminoso y el diafragma de apertura según
el principio de KÖHLER para ajustar correctamente la iluminación. Para lograr esto el
cono luminoso de la iluminación se adapta al cono de abertura del objetivo, de esta
manera se aprovecha la apertura numérica de la óptica y se evita esa luz “innecesaria”
que se manifiesta como luz difusa incomoda

AJUSTE DE LA DISTANCIA INTERPUPILAR

 Otro aspecto importante a considerar es que cada persona tiene una distancia
interpupilar específica, para ello deberá realizarse el ajuste alejando o juntando los
oculares

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
de tal manera que al estar observando a través de ellos se vean los dos círculos
superpuestos de tal manera que solo se distinga uno solo.

MATERIALES Y EQUIPOS:

Materiales

- Láminas de la colección del laboratorio


- Aceite de inmersión

Equipos

- Microscopio
- Estereomicroscopio

PROCEDIMIENTO: Analizar

Partes del microscopio compuesto

- Sistema Mecánico / Sistema óptico / Sistema de Iluminación

Cuidados del Microscopio

- Transporte, Limpieza, Ubicación, Objetivos, Oculares, Diafragma, Condensador

Manejo del Microscopio y observación de la placa

1. Identifique el objetivo de menor aumento y colóquelo en su sitio girando el revólver,


haciendo uso del tornillo macrométrico, baja la platina con lentitud.
2. Mueva el condensador hacia arriba, hasta unos pocos milímetros por debajo de la
platina, abra completamente el diafragma y mire por el ocular hasta lograr que el campo
esté brillante y completamente iluminado.
3. Coloque la placa sobre la platina.
4. Mire por el ocular y con el tornillo macrométrico suba lentamente hasta que aparezca la
imagen del objeto.
5. Utilizando el tornillo micrométrico, focalice la imagen hasta que esta sea nítida.
6. Después de haber enfocado con el objetivo de menor aumento, gire el revólver y
coloque en posición el objetivo de mediano aumento
7. Focalice la imagen hasta ser nítida.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
8. Para utilizar el objetivo de 100 X, debe girar el revólver y dejar despejada la
preparación sin objetivo, colocar una gota de aceite de inmersión, girar el revólver de
nuevo y colocar el objetivo de 100 x.
9. Focalice la imagen con el tornillo micrométrico e identifique las diferentes partes de las
células: núcleo, citoplasma, membranas, etc
10. Gire el revólver y retire la preparación.
11. Limpie el objetivo de 100 X con papel especial.
12. Observe la placa en el estereomicroscopio

RESULTADOS:

CONCLUSIONES: (A elaborar por el estudiante)

RECOMENDACIONES: (A elaborar por el estudiante)

PREGUNTAS DE CONTROL:

1. ¿Cuáles son las partes del microscopio óptico? Describa cada una de ellas y su función.
2. Dibuje las estructuras observadas en la placa.
3. ¿Cuál es la función de cada parte del microscopio?
4. Realice un esquema del microscopio óptico y uno del microscopio, estereoscópico,
anotando el nombre de sus partes.
5. Realice esquemas de una muestra de preparación fija a distintos aumentos. ¿Cuál es el
objetivo de tener orden, cuidado y limpieza del microscopio?
6. Explica cuál es la utilidad de tener un correcto ajuste en el microscopio.
7. Discute a que se puede deber que se obtenga poca resolución y mal contraste de la imagen.
8. Explica cómo se obtiene el aumento al que se están haciendo las observaciones.
9. Discute por que dos personas diferentes pueden no ver con la misma nitidez la misma
imagen.
10. Investiga sobre la historia y descubrimiento del microscopio.
11. Investiga a que se puede deber que los ojos del observador se cansan con largos ratos
de observación al microscopio

BIBLIOGRAFÍA:

Chataing, B.; Nieves, E. 2009. Universidad de Los Andes, Manual de laboratorio de Biología.
Primera edición. Venezuela.

Curtis, H.; Schnek, A.; Flores G. 2001. Biología. Sexta edición. España. Morales, N. 2019. Guías
de prácticas de la asignatura de Biología.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
DARNELL, J., (2003) “Biología Celular y Molecular”. Editorial Médica Panamericana,
Barcelona,.Cuarta edición.

LODISH Harvey & Arnold Berk. (2005). Biología Celular y Molecular. 5 edición Editorial
Panamericana

SOLOMÓN. (2008). Biología. Octava edición Editorial Mc Graw-Hill.

ANEXOS (Fotos)

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Ing. Mg. Sc. …………………………….
Docente de la asignatura

Presidente/a del curso

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
PRÁCTICA N ° 2

TEMA: Reconocimiento e identificación de la célula vegetal.

OBJETIVO:

 Caracterizar los distintos tipos celulares, describiendo la estructura y función que


ejercen cada uno de sus componentes, con énfasis en la célula vegetal.

MATERIALES Y REACTIVOS:

Materiales

- 10 Porta y cubre objetos


- 10 Caja Petri
- 5 Mango y hoja de bisturí
- 10 Hoja de papel absorbente
- 5 Jeringas
- 5 Pizetas
- 3 Podadoras
- Fundas plásticas
- Cinta maski
- Marcadores

REACTIVOS

- Ácido acético 5
- Verde de metilo
- Glicerina líquida pura
- Agua destilada

EQUIPOS Y HERRAMIENTAS:

- Microscopio

PROCEDIMIENTO:

Recolección del Material Vegetal

1. Se procederá a seleccionar el material vegetal de la planta que se encuentre en


estado totalmente sano.

2. Con ayuda de una podadora se tomará muestras de hojas de las especies de Lirio Rojo
y Luma, las mismas que se colocarán en una funda plástica, con su respectiva identificación.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
Montaje de Muestras

1. En el Laboratorio de Fisiología Vegetal, se procederá a realizar cortes longitudinales (2


mm aproximadamente) de las hojas con ayuda de un bisturí.
2. Seguidamente se colocará los cortes en las cajas petri con agua destilada.
3. Posteriormente se sumergirá los cortes de las hojas en ácido acético por un tiempo
aproximado de 5 minutos.
4. En un portaobjetos se colocará con ayuda de un gotero una gota de azul de metilo y
de glicerina pura, donde se procederá con una pinza a poner una muestra (corte de
hoja) y cubrirla con el cubre objetos
5. Una vez montada la muestra se procederá a llevarla al microscopio para su respectiva
revisión.

RESULTADOS: (a elaborar por estudiante)

CONCLUSIONES: (a elaborar por el estudiante)

RECOMENDACIONES: (a elaborar por el estudiante)

PREGUNTAS DE CONTROL:

1. ¿Defina que es la célula y describa sus partes constitutivas?

2. ¿Grafique las estructuras encontradas en las muestras analizadas en el Laboratorio?

3. ¿Escriba la diferencia entre una célula eucariota y procariota?


BIBLIOGRAFÍA:

Curtis, H.; Schnek, A.; Flores G. 2001. Biología. Sexta edición. España. Mader, S. 2008.
Biología. Novena edición. México.

ANEXOS (Repositario de fotos)

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Ing. Mg. Sc. …………………………….
Docente de la asignatura

Presidente/a del curso

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
INFORME DE PRÁCTICA N° 3

TEMA: Observación del desarrollo del proceso de la mitosis en células vegetales

OBJETIVO:

 Analizar la importancia de la división celular en el crecimiento y la reposición de células


en tejidos desgastados.
 Realizar adecuadamente la técnica de laboratorio en la preparación de placas de mitosis.
 Observar microscópicamente las fases de mitosis para determinar las diferentes fases del
proceso de mitosis en células vegetales para su respectiva descripción morfológica y
reproducción.

REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

Definición de los procesos de mitosis y meiosis

 Mitosis

La mitosis es la división nuclear asociada a la división de las células somáticas de las células
de un organismo eucarístico que no van a convertirse en células sexuales. Una célula mitótica
se divide y forma dos células hijas idénticas, cada una de las cuales contiene un juego de
cromosomas idéntico al de la célula parental. Las plantas y los animales están formados por
miles de millones de células individuales organizadas en tejidos y órganos que cumplen
fusiones específicas (Rangel, 2017).

 Las cuatro fases de la Mitosis

Profase: Es un huso cromático empieza a formarse fuera del núcleo, mientras los cromosomas
se condensan.

Metafase: Los cromosomas se alinean en un punto medio formado una placa metafísica.

Anafase: Las cromátidas hermanas se separan bruscamente los polos opuestos del huso de la
separación de los polos.

Telofase: Posteriormente la membrana se comienza a adelgazar por el centro y finalmente se


rompe. Después de esto, en torno a los cromosomas se reconstruye la envoltura nuclear.

 Meiosis

Son las características típicas de la meiosis 1, solo se hacen evidentes después de la


replicación del ADN, en lugar de separarse las cromatinas hermanas se comportan como
bivalentes o una
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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
unidad, como si no hubiera ocurrido duplicación formando una estructura bivalente que en si
contiene cuatro cromatinas. Por lo tanto, las dos progenies de esta división contienen una
cantidad doble de ADN, pero estas están diferentes de las células diploides normales (Zita,
2018).

Leptoteno: En esta fase, los cromosomas se hacen visibles, como hebras largas y finas que le
dan la apariencia de un collar de perlas.

Cigoteno: Es un periodo de apuramiento activo en el que se hace evidente que la dotación


cromosómica del meiocito corresponde de hecho a dos conjuntos completos de cromosomas
se llaman cromosomas homólogos.

Paquiteno: Esta fase se caracteriza por la apariencia de los cromosomas como hebras gruesas
indicativas de una sinapsis completa. Los engrosamientos cromosómicos en forma de perlas,
están alineados de forma precisa en las parejas homologas, formando en cada una de ellas un
patrón distintivo.

Diploteno: Es cuando va ocurrir este apareamiento las cromatinas homologas parecen


repelerse y separarse ligeramente y pueden apreciarse unas estructuras llamadas quiasmas
entre las cromatinas la aparición de estos quiasmas nos hace visible el entrecruzamiento
ocurrido en esta fase.

Metafase: En esta fase los centrómeros no se dividen están ausencia de división presenta una
diferencia importante con la meiosis.

Anafase: Como la mitosis el anafase comienza con los cromosomas moviéndose hacia los
polos.

Telofase: Son aspectos variables de la meiosis 1. En muchos organismos, estas etapas ni


siquiera se producen.

 Las cuatro frases de la meiosis 2

Profase: Los centriolos de desplazan hacia los polos opuestos de las células.

Metafase: Las cromatinas aparecen, con frecuencia, parcialmente separadas una de otra en
lugar de permanecer perfectamente adosadas, como en la mitosis.

Anafase: Son arrastradas por las fibras del huso acromático hacia los polos opuestos.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
Telofase: Forman de nuevo los núcleos alrededor de los cromosomas.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales de campo

- Puntas de raíces de cebolla (cebollas de bulbo)

Materiales de laboratorio

- Agua
- Alcohol acido (3ml de HCI y 97ml de etanol 95 %)
- Orceína
- Aceite de inmersión
- Microscopio
- Estereoscopio
- Vidrio de reloj
- Portaobjetos
- Navajas
- Mechero
- Papel absorbente

PROCEDIMIENTO

1. Cinco o seis días antes de comenzar el experimento, escoja un bulbo de cebolla fresca
y elimine mediante un raspado con una cuchilla, las raíces secas que se hallan en la
base del bulbo.
2. En un frasco de boca ancha o un vaso desechable coloque o asiente la base de la
cebolla, vierta agua en el frasco hasta tocar la base de la cebolla. Mantenga la base de
cebolla húmeda y cambie el agua diariamente.
3. Cuando las raíces alcancen 3 cm aproximadamente de longitud, extraiga la cebolla
del recipiente y corte el último centímetro de la punta.
4. Deposite estas raíces en la solución fijadora de Carnoy (3 metanol: 1 ácido acético)
durante 20 minutos.
5. Traslade las raíces a un recipiente que contiene ácido clorhídrico al 10% durante
10 minutos. Este tiempo varía según el tipo de célula.
6. Coloque las raíces en un recipiente con agua y lávela por 5 minutos.
7. Traslade las raíces a un recipiente con acetocarmín. Este colorante las debe cubrir
totalmente durante 20 minutos.
8. Saque la raíz del recipiente que contiene el acetocarmín y póngala en un portaobjeto.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
9. Corte nuevamente la raíz, dejando el extremo inferior (ápice) y deseche el otro extremo.
10. Coloque en ángulo recto el cubreobjeto, bájelo lentamente hasta que se pose en
el preparado, y luego haga una leve presión on el dedo hasta conseguir una extensión
del preparado.
11. Selle los bordes del cubreobjetos con esmalte y deje secar.
12. Observe con el objetivo de menor aumento para localizar las figuras mitóticas, y
posteriormente con el objetivo de mayor aumento para discriminar detalles. Guiándose
por las figuras de la galería de imágenes, identifique las fases de la mitosis y dibújelas.

RESULTADOS: (a elaborar por estudiante)

CONCLUSIONES: (a elaborar por el estudiante)

RECOMENDACIONES: (a elaborar por el estudiante)

PREGUNTAS DE CONTROL

1. ¿Cuáles son las fases de la mitosis?

2. ¿Cuáles son las fases de la meiosis?

3. ¿Cuáles son las son las diferencias entre mitosis y meiosis?

BIBLIOGRAFÍA

Jimenez, A. (2017). Disolución del NaCl en el agua – simulation, animation – eduMedia.

Retrieved December 5, 2019, from https://www.edumedia-sciences.com/es/media/554-


disolucion-del-nacl-en-el-agua

Rangel, R. (2017). Mitosis y Meiosis - Monografias.com. Retrieved January 17, 2020, from
https://www.monografias.com/trabajos94/mitosis-y-meiosis/mitosis-y-
meiosis.shtml#queeslamea

Reece, J. (2017). División de la Célula | CancerQuest. Retrieved January 17, 2020, from
https://www.cancerquest.org/es/biologia-del-cancer/division-de-la-celula

Zita, A. (2018). Diferencia entre mitosis y meiosis - Diferenciador. Retrieved January 17, 2020,
from https://www.diferenciador.com/diferencia-entre-mitosis-y-meiosis/

ANEXOS (Repositario de fotos)

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
INFORME DE PRÁCTICA N° 4

TEMA: Identificar y caracterizar los tejidos y órganos que conforman los organismos vegetales

OBJETIVO:

 Caracterizar los distintos tipos celulares, describiendo la estructura y función que


ejercen cada uno de sus componentes, con énfasis en la célula vegetal.

REVISIÓN DE LITERATURA (A elaborar por el


estudiante) Indicar los diferentes tejidos vegetales

MATERIALES Y
REACTIVOS:
Materiales

- Porta objetos
- Cubreobjetos
- Pinza
- Hoja de Bisturí
- Mango de bisturí Cajas de Petri
- Bolsas para descarte de basura
- Desinfectante Alcohol 70% Cloro al 5% Cebolla
- Tallos de cartucho
- Tuna

Reactivos

- Azul de metileno
- Agua destilada estéril
- Aceite de inmersión

Equipos

- Microscopio óptico
- Estereomicroscopio

PROCEDIMIENTO:

1. Separar una de las capas internas de la cebolla, desprendiendo con la pinza la membrana
adherida por la cara inferior cóncava de una de sus capas, llevándola al vidrio de reloj para
humedecerla con un poco de agua destilada y evitando que se enrosque.

2. Añadir azul de metileno en la placa Petri, con la muestra de cebolla previamente escurrida
del

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
agua destilada. Este paso también se puede hacer colocando la muestra directamente sobre
el portaobjetos, bien extendida y añadiendo la tinción hasta que la muestra esté totalmente
cubierta.

3. Dejar durante 2 minutos para que la muestra se tiña y después enjuagar con un poco de
agua destilada para retirar el exceso de tinción.

4. Poner una gota de agua sobre la piel de cebolla y, sobre ella, colocar un cubreobjetos para
la observación, evitando la formación de burbujas.

5. Membrana vegetal y el citoplasma. La membrana celular es de celulosa. Los núcleos son


oscuros y visibles y en el interior de los mismos se pueden percibir granulaciones, son los
nucléolos. El citoplasma tiene aspecto claro y suele contener vacuolas.

6. Se realiza el mismo procedimiento para las muestras de tallo de cartucho y tuna.

RESULTADOS / CONCLUSIONES: (A elaborar por el estudiante)

RECOMENDACIONES: (A elaborar por el estudiante)

PREGUNTAS DE CONTROL:

1. ¿Qué tipos de tejidos se encontraron en las muestras procesadas, describa cada uno de
ellos?
2. ¿Relaciona la función de cada tejido con las características de las células que los
componen?
3. ¿Cuál es la importancia y función de cada tejido para la planta?

BIBLIOGRAFÍA:

Chataing, B.; Nieves, E. 2009. Universidad de Los Andes, Manual de laboratorio de Biología.
Primera edición. Venezuela.

Curtis, H.; Schnek, A.; Flores G. 2001. Biología. Sexta edición. España. Morales, N. 2019. Guías
de prácticas de la asignatura de Biología.

ANEXOS (Repositorio de fotos):

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
INFORME DE PRÁCTICA N° 5

TEMA: Bioelementos y Biomoléculas

OBJETIVOS:

 Explicar el origen de los seres vivos y el rol que cumplen los bioelementos y
biomoléculas en su conformación, con énfasis en los organismos vegetales.

REVISION DE LITERATURA: (A elaborar por el estudiante)

MATERIALES Y
EQUIPOS:
Materiales

Portaobjetos

- Cubreobjeto Tubos de ensayo Agua destilada Lugol


- Reactivo de Biuret
- Ácido clorhídrico (HCl) Sudán III
- Cloroformo o éter
- Hoja de Spinacia oleracea.
- Hoja de Paspalum sp.
- Tubérculo de Solanum tuberosum
- Albúmina
- Aceite

Equipos

- Microscopio

PROCEDIMIENTO:

1. Reconocimiento de Ca+2: Observación de células con cristales de Oxalato de Ca+2 en


peciolo de Spinacia oleracea. Realizar corte transversal de peciolo de Spinacia. agregar
una gota de agua destilada. Esquematice, describa y explique lo observado.
2. Reconocimiento de Si: Observación idioblasto con sílice (SiO2) en epidermis foliar de
Paspalum sp. Realizar corte longitudinal de epidermis de Poaceae, y agregue una gota
de agua destilada. Esquematice, describa y explique lo observado.
3. Reconocimiento almidón: Observación de amiloplasto con almidón en células de papa
(Solanum tuberosum). Realizar corte delgado en tubérculo de Solanum tuberosum y
agregue una gota de Lugol. Esquematice, describa y explique lo observado.

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA
4. Reconocimiento de proteínas: En un tubo de ensayo, coloque 3 ml de albúmina.
Luego, agregue al tubo 3 ml de Reactivo de Biuret. Esquematice y describa lo observado
5. Desnaturalización de proteínas: En un tubo de ensayo, agregue 3 ml de albúmina, y
cuidadosamente, agregue 2 ml de ácido clorhídrico (HCl), dejando escurrir por las
paredes del tubo. Esquematice y describa lo observado.
6. Reconocimiento de lípidos: Realice un raspado de semilla de maní (Arachis hipogaea) y
uno de semilla de fréjol (Phaseolus vulgaris), y deposítelos en portaobjetos distintos.
Luego, coloque 3 gotas de Sudán III en ambas muestras y cúbralas con el cubreobjeto,
Esquematice y describa lo observado.
7. Solubilidad de lípidos: En un tubo de ensayo, agregue 3 ml de aceite, y
cuidadosamente, agregue 3 ml de solvente orgánico (cloroformo o éter) dejando escurrir
por las paredes del tubo. Agite suavemente el tubo. Esquematice y describa lo observado.

RESULTADOS: (A elaborar por el estudiante)

CONCLUSIONES: (A elaborar por el estudiante)

RECOMENDACIONES: (A elaborar por el estudiante)

PREGUNTAS DE CONTROL:

1. ¿Escriba la clasificación de las proteínas?

2. ¿Por qué son importantes los lípidos, proteínas y encimas?

3. ¿Describa que tipos de bioelementos y biomoléculas fueron encontrados en la práctica?

BIBLIOGRAFÍA:

Curtis, H.; Schnek, A.; Flores G. 2001. Biología. Sexta edición. España.

Molina, M. 2019. Práctica de laboratorio de bioelementos y biomoléculas.

ANEXOS (Repositorio de fotos)

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Docente de la asignatura

Presidente/a del curso

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LABORATORIO DE FISIOLOGÍA

Firmado electrónicamente por:

LUCIA DEL CISNE


QUICHIMBO
SARAGURO

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