Revisado por:

Prof. Marvin Querales; Prof. Ruth lvarez; Susan Rojas, Maribel Petrola.

UNIVERSIDAD DE CARABOBO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA DE CIENCIAS BIOMDICAS Y
TECNOLGICAS
DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA.

PRCTICA N 04
CARBOHIDRATOS

Profesores del Departamento de Bioqumica

GUIA DE TRABAJOS PRCTICOS BIOQUMICA DE GENERAL 1

2do AO DE MEDICINA /PROFESORES DEL DEPARTAMENTO.
 Revisado por:
Prof. Marvin Querales; Prof. Ruth lvarez; Susan Rojas, Maribel Petrola.

Universidad de Carabobo
Escuela de Ciencias Biomdicas y Tecnolgica
Departamento de Bioqumica
Bioqumica- Medicina

PRCTICA N 04
CARBOHIDRATOS

1. INTRODUCCIN 2. OBJETIVOS DE LA PRCTICA

Los carbohidratos, tambin llamados

hidratos de carbono, glcidos o
azcares son la fuente ms abundante 2.1. Identificar en una solucin
y econmica de energa alimentaria de problema la presencia de glcidos,
nuestra dieta. Estn presentes tanto glcidos reductores, glcidos no
en los alimentos de origen animal reductores, pentosas, cetosas,
(leche y sus derivados), como en disacridos, polisacridos
alimentos de origen vegetal (legumbres,
2.2. Diferenciar en una solucin
cereales, harinas, verduras y frutas).
problema la presencia de un glcido
Las funciones que los glcidos reductor de uno no reductor, un
cumplen en el organismo son monosacrido de un disacrido,
principalmente energticas y almidn de glucgeno
estructurales. 2.3. Interpretar el fundamento de cada
una de las reacciones de
La finalidad de esta prctica, es
reconocimiento de glcidos en el
identificar en una solucin problema
trabajo prctico.
las propiedades fsicas y qumicas de
los glcidos, as como, interpretar el
fundamento de cada una de las
reacciones de reconocimiento de los
mismos.

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ismero L. Estas designaciones no

tienen nada que ver con la isomera
3. MARCO TERICO ptica (la capacidad de desviar el plano
de luz polarizada, la cual se representa
con los smbolos (d y l) d:
Los glcidos se pueden definir como dextrorrotatorio (+ gira el plano de la
aldehdos o cetonas de alcoholes luz polarizada a la derecha) y l:
polihidroxlicos. Se pueden clasificar levorrotatorio (- si gira el plano de la
en tres grandes grupos: luz polarizada a la izquierda).
monosacridos, oligosacridos y
polisacridos. El gliceraldehdo es una aldotriosa, y la
dihidroxiacetona es una cetotriosa.

3.1. CLASIFICACIN DE LOS

GLCIDOS

1. MONOSACRIDOS. Se definen
como azcares simples que no pueden
hidrolizarse en unidades ms Las tetrosas tienen poca importancia
pequeas. De acuerdo al nmero de en el humano si las comparamos con
tomos de carbono de sus molculas, las pentosas y hexosas.
los podemos clasificar en: triosas (3
tomos de carbono), tetrosas (4), Las pentosas ms importantes en el
pentosas (5), hexosas (6) heptosas (7). humano son la Ribosa y la 2-
Desoxirribosa. En solucin existe
Adems se pueden clasificar en fundamentalmente como anillo de
aldosas y cetosas, de acuerdo a si cinco miembros que contiene oxgeno y
poseen un grupo funcional aldehdico y cuatro tomos de carbono. Dada la
cetnico respectivamente. semejanza de este anillo con el furano
se dice que estos azucares estn en la
forma furansica.
Las triosas son los carbohidratos ms
pequeos. Las figuras de triosas que Las frmulas de proyeccin de
vemos a continuacin se representan Haworth se utilizan para indicar la
siguiendo el mtodo de Fischer. Si el forma cclica de los monosacridos.
grupo OH unido al penltimo carbono Las mismas colocan el anillo
est colocado hacia la derecha sobre furansico perpendicular al plano de la
la estructura de Fischer, el azcar es pgina. Si un grupo OH se proyecta a
un ismero-D; si el grupo OH est la derecha sobre la estructuras de
colocado hacia la izquierda es un Fischer el mismo se proyectar hacia

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abajo en las proyecciones de Haworth. proporcin en la forma piransica. El

El anmero beta, tiene el OH tomo de carbono 2 es el tomo de
proyectado hacia la izquierda en las carbono anomrico.
estructuras de Fischer y hacia arriba
en las proyecciones de Haworth. En las Un azcar puede reducir iones de Cu++
figuras el carbono anomrico se seala si su carbono anomrico posee un
mediante un asterisco (*). (Fig. 1). grupo hidroxlico libre. Tales azcares
se denominan: Azcares Reductores,
los cuales pueden cambiar de una
forma de anillo a una estructura de
cadena abierta, permitiendo al grupo
aldehdico del carbono anomrico
llegar a oxidarse a un grupo cetnico.
Los monosacridos: glucosa, galactosa,
Fig. 1: Carbono anomrico. fructosa y ribosa son todos azcares
reductores, entre otros.
Se denomina mutarrotacin a la
interconversin espontnea de los
anmeros alfa y beta en solucin.
2. OLIGOSACRIDOS
Las dos aldohexosas ms importantes
en el hombre son glucosa y galactosa. Del griego Oligo: pocos. Contienen de
Estas, difieren entre s slo en la dos a diez unidades de monosacridos
configuracin del grupo OH del unidas entre s mediante Enlaces
carbono cuatro; por tanto son Glucosdicos.
Epmeros, (dos azcares que difieren
nicamente en la configuracin de un Los oligosacridos ms comunes
tomo de carbono no especfico, son encontrados en la naturaleza resultan
epmeros uno del otro). de la unin de dos monosacridos, de
all que stos se denominan
En solucin menos del 1% de las DISACRIDOS. Cada enlace
hexosas permanece en la configuracin glucosdico se clasifica como o y se
lineal. En su mayora, forman un enumera de acuerdo a la posicin de
anillo de seis miembros que contiene los tomos de carbono que l enlaza.
cinco tomos de carbono y uno de
oxgeno. Dada la semejanza de este En la SACAROSA (Azcar comn de
anillo con el pirano estos azcares se mesa) el carbono-1 alfa-anomrico de
denominan Piranosas. la glucosa se une al carbono-2--
anomrico de la fructosa. Dado que
La cetohexosa ms importante en los ninguno de los carbonos anomricos
humanos es la Fructosa. La Fructosa que posee este disacrido tiene grupo
existe fundamentalmente en forma hidroxlico libre, no podr reducir Cu++,
furansica y una muy pequea a Cu+, ni podr mutarrotar; por lo
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tanto se considera a la sacarosa como En su mayor parte los monosacridos

un azcar no reductor. (Fig. 2). y los oligosacridos son compuestos
cristalinos solubles en agua y de sabor
dulce.

3. POLISACRIDOS O GLUCANOS:

Son polmeros de carbohidratos de

Fig. 2: Estructura de la Sacarosa
elevado peso molecular con ms de
(azcar comn)
diez unidades de monosacridos o de
sus derivados (glucosamina, cido
glucornico, etc.), unidos a travs de
Son disacridos reductores: La puentes o enlaces glucosdicos. Pueden
MALTOSA, un dmero de molculas de estar constituidas por unidades de un
glucosa unidos por enlace -1,4 mismo monosacrido
glucosdico, y la LACTOSA, azcar (homopolisacridos) o de diferentes
naturalmente encontrado en los monosacridos (heteropolisacridos), y
productos lcteos formado por una por lo general son compuestos
molcula de Beta-Galactosa unida a inspidos e insolubles en agua.
una -Glucosa a travs de enlace
glucosdico -1,4. (Fig. 3 y 4). La mayor parte de los glcidos
encontrados en la naturaleza se
presentan como polisacridos y es la
D-Glucosa la unidad monomrica
predominante en ellos, pero tambin
son corrientes polisacridos de otros
glcidos (D-Manosa, D-Galactosa, D-
Fructosa y D-Xilosa).

Fig. 3: Estructura de la Maltosa

Desde el punto de vista funcional se

pueden clasificar en:

-Polisacridos nutricionales o de
reserva: almidn en los vegetales y
glucgeno en los animales y

-Polisacridos estructurales o de
sostn: celulosa en los vegetales y
Fig. 4: Estructura de la Lactosa mucopolisacridos en los animales.

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El Almidn es el polisacrido El Glucgeno es el polisacrido de

de reserva energtica de las plantas, es reserva de los animales, se parece a la
una mezcla de amilosa y amilopectina. Amilopectina en que posee
La Amilosa es una cadena lineal no ramificaciones -1,6 de una cadena -
ramificada de molculas de glucosa 1,4 glucosdica.
unidas entre s a travs de enlaces -
1,4. La Amilopectina es una cadena La Celulosa, es el polisacrido
ramificada, los enlaces glucosdicos de estructural de las plantas posee una
su esqueleto carbonado son los enlaces cadena larga no ramificada de
-1,4; pero los de los puntos de molculas de glucosa unidas por
ramificacin son -1,6. (Fig. 5 y 6). enlaces -1,4.

Tambin se tiene los llamados

Glucosaminoglucanos que son
polmeros de mucopolisacridos y
poseen en su estructura ms de un
tipo de carbohidratos, sus
componentes pueden incluir azcares
aminados, sulfatos y N-acetilados.

Fig. 5: Amilosa
3.2. PRUEBAS DE
RECONOCIMIENTO DE LOS
GLCIDOS.

En la tabla 1, se muestran las

reacciones de reconocimiento de los
glcidos, as como, su fundamento.

Fig. 6: Amilopectina

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PRUEBAS DE NOMBRE DE LA PRUEBA FUNDAMENTO

RECONOCIMIENTO

-Los glcidos que contengan 5 o ms tomos de carbono en presencia de cidos minerales

concentrados (H2SO4, HCL, HNO3, etc.) se deshidratan formando furfural o
hidroximetilfurfural, el cual se condensa con el -naftol originando compuestos de color violeta
intenso.

-La reaccin de Molisch es la prueba ms general utilizada para el reconocimiento de los

Reaccin de Molisch glcidos. Las pentosas originan furfural mientras que las hexosas producen hidroxi-
metilfurfural. Sobre los oligo y polisacridos la accin dbilmente cida del reactivo de
Molisch produce la hidrlisis de estos compuestos originando los monosacridos
correspondientes, los cuales ms tarde en presencia de los cidos minerales fuertes originan los
REACCCIN
derivados furfurlicos correspondientes.
GENERAL
-La presencia de glcidos se evidenciar mediante la aparicin de un anillo color rojo violeta
en el lmite de separacin de los lquidos (cido sulfrico-solucin glucdica).

Las cetosas que posean ms de 5 tomos de carbono en su estructura, al ser tratadas

con cidos minerales en caliente se deshidratan originando derivados furfricos los
CETOSAS Reaccin de Seliwanoff cuales se condensan con la resorcina originando compuestos de color rosado salmn.
Por ebullicin prolongada otros azcares no cetnicos pueden dar una reaccin
positiva aunque de menor intensidad. De all que la reaccin sirve para caracterizar
cetosas cuando la reaccn es positiva en los 30 primeros segundos de ebullicin.

Las pentosas en presencia de cidos minerales concentrados y al calor, se deshidratan

formando furfural el cual se condensa con el orcinol, y el producto formado en
PENTOSAS Reaccin de Bial presencia de una sal frrica originar compuestos coloreados de color verde botella
caracterstico.

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PRUEBAS DE NOMBRE DE LA FUNDAMENTO

RECONOCIMIENTO PRUEBA

-Los glcidos debido a la presencia en su estructura de los grupos aldehdicos y cetnicos

libres o potencialmente libres y a los enedioles formados en medio alcalino y en caliente son
capaces de reducir el hidrxido de cobre a xido cuproso que es un precipitado que vara de
color desde el amarillo hasta el rojo ladrillo de acuerdo a la concentracin del glcido y al
tiempo de calentamiento. -El reactivo de Benedict, el cual se utiliza para evidenciar la
presencia de grupos reductores en los glcidos est constituido por: sulfato de cobre,
citrato de sodio y carbonato sdico en solucin acuosa.-El sulfato de cobre acta sobre el
hidrxido de sodio originando hidrxido cprico, compuesto ste que en ausencia del citrato
Reaccin de de sodio precipitara transformndose en hidrxido cprico de color negro que interferira
Benedict con la reaccin. El papel del citrato de sodio es mantener en solucin el hidrxido cprico
evitando que se forme ese precipitado.
PODER REDUCTOR
Otro componente del reactivo de Benedict es el hidrxido de sodio. Es sabido que los
glcidos que contengan un grupo aldehdico o cetnico libre o potencialmente libre en
presencia de los lcalis sufrir un proceso de enolizacin produciendo compuestos muy
reductores e inestables que reciben el nombre de enedioles, siendo estos ms reductores que
el glcido original.

- Sensibilidad del reactivo de Benedict.

El reactivo de Benedict en presencia de glcidos reductores originar colores diferentes

los cuales permiten tener una idea aproximada acerca de las concentraciones de stos. As, si
toma color amarillo se interpreta como una escasa cantidad de glcido y se expresa mediante
una (+), si toma color verde (++), verde pardo (+++) , si toma color rojo ladrillo (++++).

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PRUEBAS DE NOMBRE DE LA FUNDAMENTO

RECONOCIMIENTO PRUEBA

-Los glcidos debido a la presencia de grupos aldehdicos y/o cetnicos libres son capaces,
en presencia de cidos diluidos y en caliente, de reducir el acetato de cobre a xido cuproso
que es un precipitado de color rojo.

-Mediante esta reaccin se puede diferenciar monosacridos de disacridos. Los primeros

reducen rpidamente al reactivo, debido a que su grupo reductor se encuentra libre o
potencialmente libre. Los disacridos darn la reaccin despus que hayan sido hidrolizados
DIFERENCIACIN Reaccin de
en los monosacridos respectivos debido al medio cido dbil del reactivo. Por lo tanto, el
DE MONO Y Barfoed
precipitado de color rojo en los disacridos aparecer en un tiempo mayor.
DISACRIDOS
-Esta es la nica reaccin de reduccin que puede ser positiva con la sacarosa (disacrido no
reductor) ya que puede ser hidrolizada por el cido del reactivo originando glucosa y
fructosa, ambos reductores.

-Los polisacridos tratados con el lugol (Solucin iodoiodurada) originan diferentes

compuestos coloreados que permiten reconocerlos. Al aadir una gota de solucin de lugol
al almidn aparecer un color azul intenso y con el glucgeno un color rojo caoba. En mono
POLISACRIDOS Prueba de Lugol y disacridos no dan color con el iodo. Esta coloracin se interpreta como complejos de
absorcin entre el polisacrido y el iodo.

-La amilosa da con el iodo una intensa coloracin azul. En esta reaccin la molcula de iodo
se introduce en los espacios vacos que dejan las unidades de glucosa, y el compuesto de
"inclusin", modifica las propiedades fsicas (intensa absorcin de luz). Al calentarse el
complejo se libera el iodo de los espacios y se pierde el color caracterstico

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-Los glcidos fermentescibles en presencia de las enzimas correspondientes se descomponen

originando alcohol y CO2, compuesto que se desprende en forma de gas y se acumula en el
extremo cerrado del tubo de fermentacin. Al agregar el hidrxido de sodio, este absorbe el
FERMENTACIN ----- CO2 y por lo tanto desaparecen las burbujas formadas. Las reacciones involucradas son:

C6H12O6 ------------------ ------- 2C2H5OH + 2CO2

2 NaOH + CO2 ----------- Na2CO3 + H2O

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5. PARTE EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO N 1: REACCIN DE EXPERIMENTO N 2: REACCIN DE

MOLISCH. BENEDICT.

-Tome 4 tubos de ensayo rotlelos y proceda. -Tome 4 tubos de ensayo, rotlelos y proceda:

TUBOS MUESTRA TUBOS

MUESTRA 1 2 3 4 1 2 3 4

GLUCOSA (mL) 1 --- --- --- GLUCOSA (mL) 1 --- --- ---

SACAROSA (mL) --- 1 --- --- MALTOSA (mL) --- 1 --- ---

ALMIDON (mL) --- --- 1 --- SACAROSA (mL) --- --- 1 ---

SOLUCION PROBLEMA (mL) --- --- --- 1 SOLUCION

--- --- --- 1
PROBLEMA (mL)
REACTIVO DE MOLISH.
3 3 3 3 REACTIVO DE
(GOTAS) 3 3 3 3
BENEDICT (mL)
H2SO4 CONC. (mL) 1 1 1 1

-Calentar simultneamente en agua hirviente

-Agregar el cido sulfrico concentrado por 5 minutos.
dejndolo caer lentamente por las paredes
del tubo.
RESULTADO DE LA MUESTRA
PROBLEMA Y CONCLUSIONES:
RESULTADO DE LA MUESTRA
_________________________________________
PROBLEMA Y CONCLUSIONES:
_________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________
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EXPERIMENTO N 3: SENSIBILIDAD DEL EXPERIMENTO N 4: REACCIN DE

REACTIVO DE BENEDICT. SELIWANOFF.

.-Tome 4 tubos de ensayo rotlelos y proceda.

Tome 3 tubos de ensayo, rotlelos y proceda: MUESTRA TUBOS

1 2 3 4

TUBOS FRUCTOSA (mL) 1 --- --- ---

MUESTRA 1 2 3 SACAROSA (mL) --- 1 --- ---

GLUCOSA 0,01 M XILOSA (mL) --- --- 1 ---

1 --- ---
(mL) SOLUCION
--- --- --- 1
PROBLEMA (mL)
GLUCOSA 0,10 M
--- 1 --- REACTIVO DE
(mL)
SELIWANOFF 3 3 3 3
GLUCOSA 1,00 M (mL)
--- --- 1
(mL)

REACTIVO DE -Mezclar bien. Calentar simultneamente en

BENEDICT 3 3 3 agua hirviente por 5 minutos. Observar y
(mL)
contine calentando hasta los 10 minutos.

Calentar simultneamente en agua hirviente RESULTADO DE LA MUESTRA

PROBLEMA Y CONCLUSIONES:
por 3 minutos.
_________________________________________
_________________________________________
Conclusiones: _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ ________________________________________
_________________________________________
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EXPERIMENTO N 5: REACCION DE BIAL. XPERIMENTO N 6: REACCION DE

BARFOED.

-Tome 4 tubos de ensayo, rotlelos y proceda:

-Tome 4 tubos de ensayo, rotlelos y proceda.

TUBOS

TUBOS MUESTRA 1 2 3 4

MUESTRA 1 2 3 4 GLUCOSA (mL) 1 -- -- --

FRUCTOSA (mL) 1 --- --- --- MALTOSA (mL) -- 1 -- --

XILOSA SACAROSA (mL) -- -- 1 --

--- 1 --- ---
(mL) SOL. PROBLEMA
-- -- -- 1
GLUCOSA (mL)
----- ---- 1 ---
(mL)
REACT. DE
BARFOED 3 3 3 3
SOLUCION
PROBLEMA (mL)
--- --- ---- 1
(mL)

REACTIVO DE
BIAL -Mezclar bien y calentar simultneamente en
2 2 2 2
bao hirviente hasta la aparicin del
(mL) precipitado rojo. Anotar el tiempo en el cual
FeCl3 apareci el precipitado.
3 3 3 3
(GOTAS)

RESULTADO DE LA MUESTRA
PROBLEMA Y CONCLUSIONES:
-Calentar simultneamente en agua hirviente
por 5 minutos. _________________________________________
_________________________________________
RESULTADO DE LA MUESTRA _________________________________________
PROBLEMA Y CONCLUSIONES: _________________________________________
_________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________ _________________________________________
_________________________________________
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EXPERIMENTO N 7: REACCION DE
LUGOL.
CON LOS TODOS LOS RESULTADOS

-Tome 4 tubos de ensayo, rotlelos y proceda: OBTENIDOS IDENTIFIQUE EL

TUBOS
CONTENIDO DE LA SOLUCION
MUESTRA 1 2 3 4

ALMIDON PROBLEMA:
1 -- -- --
(mL)

SOL _________________________________________
PROBLEMA
-- 1 -- -- _______________________________________
(mL)
_________________________________________
GLUCOGENO
_______________________________________
-- -- 1 --
(mL)

GLUCOSA
-- -- -- 1
(mL)

LUGOL
3 3 3 3
(Gotas)

RESULTADO DE LA MUESTRA
PROBLEMA Y CONCLUSIONES:

_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________

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