Vacunas para la enfermedad de Gumboro: una mirada al pasado, un guio al futuro

VACUNAS PARA LA ENFERMEDAD DE GUMBORO:

UNA MIRADA AL PASADO, UN GUIO AL FUTURO
A. Pags-Mant (Laboratorios Hipra, S.A.)



Introduccin
La Enfermedad de Gumboro, fue diagnosticada por primera vez por A.S. Cosgrove (1) en 1962
y posteriormente bautizada como Enfermedad Infecciosa de la Bolsa (IBD) por Hitchner (2) en
1970. Se caracteriza por producir una afeccin aguda, altamente contagiosa, que afecta al
sistema inmune del ave, especialmente a la bolsa de Fabricio. En su forma clnica, las aves
aparecen abatidas, plidas, con plumas erizadas, ataxia y diarreas blanquecinas o rojizas.

El agente etiolgico es un virus perteneciente al gnero Birnavirus, de la familia Birnaviridae.
Se trata de un virus que posee un genoma de ARN (cido ribonucleico) de doble cadena,
segmentado en dos hebras: A y B.

El estudio del genoma viral (3) ha esclarecido muchos de los interrogantes sobre su
comportamiento (Fig. 1). El gen VP2, enclavado en el segmento A, que codifica para la
cpside externa del virus, es el responsable su antigenicidad. Se ha identificado en este gen
una regin de alta mutagenicidad, la vVP2, que contiene una de las claves para entender la
filogentica de este virus (4).

Figura 1. Representacin simplificada de la estructura molecular del genoma del virus de IBD formado
por dos segmentos. El segmento A contiene la regin codificante para la cpside externa (gen VP2)- con
la regin hipervariable (vVP2)-, para la cpside interna (VP3), para la proteasa (VP4) y el gen VP5 que
todava no tiene una funcin bien esclarecida, aunque se cree que tiene cierta importancia en la
patogenia de la enfermedad. El segmento B contiene el gen VP1 que expresa la RNA polimerasa viral.










Los primeros antgenos
A lo largo de los aos, la mutabilidad de este virus, le ha hecho capaz de superar todas las
barreras profilcticas que se le han interpuesto a travs de varias generaciones de vacunas.
Los primeros antgenos, orientados a producir infecciones naturales controladas, se
elaboraron a base de homogenizados de bolsas procedentes de aves infectadas con cepas de
campo. Estos preparados, se administraban por va oral a las aves, causando una infeccin de
curso leve. Este contacto con el virus inmunizaba parcialmente a las aves, que tras una
infeccin de campo en la granja, sufran de sintomatologa ms moderada que las aves no
inmunizadas.

Vacunas atenuadas suaves
Unas dcadas ms tarde, se empezaron a desarrollar, por medio de tcnicas ms seguras y
eficaces, antgenos de mayor calidad. Se emplearon embriones de pollo y medios de cultivo
celular en los que se produca ms eficazmente antgeno para elaborar vacunas. Las cepas
que se utilizaron, fueron eficaces para controlar la forma clnica de la enfermedad, pero se
descubri entonces la capacidad del virus de causar la deplecin de la bolsa de Fabricio,
produciendo inmunosupresin en el ave y dando lugar a la forma subclnica de la enfermedad.
Esta presentacin causaba respuesta pobre a posteriores vacunaciones e incrementaba la
susceptibilidad a cualquier tipo de agente patgeno. Los trabajos desarrollados por Wyeth et
al (8), Pags-Mant (5) y otros autores, probaron que la vacunacin de las reproductoras con
VP2 VP4 VP3
VP1
VP5
A
B
vVP2

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vacunas vivas e inactivadas confera una proteccin superior y ms homognea a la
descendencia que con los planes convencionales con vacunas vivas. De este modo, gracias a la
inmunidad maternal transferida a travs de la yema, la descendencia estara protegida
durante las primeras dos o tres semanas de vida, claves para su desarrollo inmunolgico.

Variantes americanas
En plena intensificacin de la avicultura, los completos programas de vacunacin generaban
en las aves altas tasas de anticuerpos neutralizantes especficos. Esta fuerte presin de
seleccin sobre el virus llev a la aparicin de nuevas variantes. Las constantes
modificaciones en el gen VP2 condujeron a la prdida de eptopos o sitios de unin del virus
con los anticuerpos neutralizantes. Estas modificaciones son las que permitieron al virus
evadir la fijacin de dichos anticuerpos a su cpside externa. Estas cepas fueron llamadas
variantes, pues no eran neutralizadas por anticuerpos eficaces frente a cepas clsicas
convencionales. Estas variantes tenan la particularidad de causar atrofia bursal severa e
inmunosupresin, incluso en aves provenientes de reproductoras hiperinmunizadas contra
cepas clsicas. A raz de ello, en Estados Unidos, especialmente en estados como Maryland y
Delaware, se han establecido programas regulares de monitoreo serolgico y pruebas de
proteccin in vivo para conocer el estatus inmunitario de las aves frente a cepas variantes y
clsicas. Una de las propuestas ms slidas que explica la forma en las que estas variantes
aparecieron en EEUU, defendida por el Dr Snyder (6), detalla que algunos de los eptopos que
tapizan la cpside externa del virus, se perdieron, generando cepas capaces de escapar a la
neutralizacin de anticuerpos especficos contra ese mismo eptopo (fig. 2). Algunos de los
ms importantes factores que generaron este tipo de problemas fueron la alta recirculacin
de virus por el reuso de cama, la especialmente elevada densidad aviar y el continuo
movimiento de aves en la zona.

Figura 2. Propuesta de Snyder sobre la prdida de eptopos de superficie por la que se generan
variantes antignicas capaces de escapar a la neutralizacin de anticuerpos especficos.









Patotipos virales
Aparecieron en la pasada dcada, en Europa, casos clnicos de IBD con elevadas mortalidades
de hasta casi un 100% que se diseminaron por Asia y Latinoamrica. Son brotes causados por
los llamados vvIBDV, cepas de virus muy virulentas de IBD. Quedan algunos pases en los que
no se ha hecho ningn reporte por el momento, como en EEUU, Pases Nrdicos de Europa,
Australia y Nueva Zelanda. Se cree que estas cepas tambin se originaron por modificacin en
la regin hipervariable del gen de la VP2 (vVP2), pero no se ha determinado si estos cambios
fueron los que originaron ese incremento de virulencia o por el contrario, este se origin por
otros mecanismos y los cambios genticos que detectamos molecularmente son solamente
variaciones propias de estas cepas vvIBDV. En Espaa, los primeros casos fueron detectados
en agosto de 1989 (7) y se controlaron con la implantacin de medidas higinico-sanitarias y
vacunacin con cepas intermedias. Recientemente, se han repetido nuevos brotes en nuestro
pas, el primero en Noviembre de 2001, el cual tras pruebas de infeccin y tipificacin
molecular por RT-PCR y RLFP, pudimos identificar como causado por una cepa vvIBDV. La
actuacin a nivel de campo se resolvi tambin con el establecimiento de medidas de
bioseguridad, potenciando la homogeneidad de los niveles de inmunidad pasiva de los pollos y
enfatizando la vacunacin con cepas intermedias (9). Uno de los problemas que se plantearon
durante la aparicin de estos casos internacionalmente, fue el de optimizar el clculo del da
de vacunacin en los pollos. Fueron diseados algunos instrumentos para la estimacin de
este clculo como la frmula de Kouwenhoeven o la frmula de Deventer. Ambas son
herramientas que tienen como objetivo estimar el catabolismo de los anticuerpos pasivos, y
10 10
8 8
179
R63 R63
B69

Delaware Clsica
179
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adecuar a este el momento ms ptimo para vacunar sin neutralizar en exceso la vacuna o sin
demorar demasiado para no asumir riesgos innecesarios. Estas herramientas no contemplan
todas las situaciones posibles y desde luego son criticables, pero en ciertos casos, no dejan de
ser de ayuda para el tcnico.

Vacunacin de huevos embrionados (in ovo)
Estos ltimos aos, el problema de la mano de obra en las grandes integraciones ha hecho que
ciertas vacunas como la de la enfermedad de Marek, se hayan administrado frecuentemente
por va in ovo. Algunos de estos productos, homologados en diversos pases tambin para IBD,
han probado su eficacia e inocuidad en pollos de hasta 35 das, pero ms all de dicha edad,
plantean serias dudas que han obligado a complementar los programas profilcticos con
nuevas vacunaciones de las aves tras su nacimiento. Una nueva idea en materia de profilaxis
vacunal se ha lanzado recientemente con un producto que contiene virus vacunal y
anticuerpos neutralizantes en una proporcin tal que permite la replicacin retardada del
virus y el desarrollo de la inmunidad, evitando la accin inmunosupresora del virus a edades
tempranas. Los resultados son prometedores aunque encierran todava algunas dudas en
cuanto a la duracin de la inmunidad, tan importante en muchas situaciones de campo.


Nuevos estudios moleculares
La incesante variabilidad del virus de la enfermedad de Gumboro han llevado a profundizar en
el estudio de los factores implicados en estos cambios. Las lneas de estudio, centrada
mayoritariamente en el gen de la VP2, dan resultados limitados pues segn la longitud del
fragmento de genoma amplificado y los distintos enzimas que se utilizan para su restriccin,
se pueden extraer conclusiones bien diversas. Aunque indudablemente, son herramientas muy
potentes que nos permitirn en el futuro conocer la evolucin que ha seguido este virus en
materia de distribucin geogrfica, patogenicidad y propiedades antignicas. Por ejemplo, en
nuestro pas, trabajos recientes en el campo de la epidemiologa (10) apuntan que existen
aislados de campo tanto de tipo altamente virulento -relacionadas con cepas europeas y
japonesas- como cepas clsicas, pero no del tipo de las variantes americanas. Los estudios
ms interesantes siguen estando enfocados hacia la obtencin de nuevos marcadores de
virulencia que nos sealen a travs de un simple anlisis gentico la patogenicidad de la cepa
estudiada en el campo. En el desarrollo de vacunas recombinantes, hay trabajos europeos con
resultados muy aplicables e interesantes para el futuro, como el que propone la utilizacin de
protenas recombinantes obtenidas de baculovirus, en una vacuna inactivada contra la
enfermedad de Gumboro (11). Parece que esta solucin puede ser una va interesante para
llegar a satisfacer los severos requerimientos en materia de inocuidad y eficacia de vacunas
que demanda la Farmacopea Europea.


Conclusiones
La enfermedad de Gumboro sigue siendo, tras ms de cuarenta aos, una virosis de suma
relevancia en la avicultura moderna de hoy, por su estrecha vinculacin con el sistema
inmunitario de las aves y por la desarrollada capacidad del virus de superar las barreras
profilcticas que se le han ido interponiendo. Las distintas generaciones de vacunas han sido
muy tiles para contener las mortalidades y la inmunosupresin que produce el virus. No
obstante, hace falta una firme autocrtica para poder ponderar correctamente si los enfoques
preventivos que se han planteado han sido los ms correctos. No olvidemos que este virus es
altamente resistente al medio ambiente por su condicin de virus sin membrana y por su
especial habilidad para agruparse en superestructuras. Tiene adems una elevada
difusibilidad y capacidad de replicacin, y puede permanecer viable en vectores indirectos
muy fcilmente. Todo ello no hace ms que sealar que uno de los puntales de cualquier
programa de control tiene que basarse por encima de todo en establecer y respetar un
estricto programa de medidas de bioseguridad sobre todos los puntos crticos del proceso: el
emplazamiento, con accesos de personal y transportes, el personal, mediante hbitos de
higiene y uso de vestimentas de proteccin, el agua, a travs de su desinfeccin y anlisis, la
cama, como vehculo que es de infecciones, los roedores y otras plagas como moscas y
escarabajos, y finalmente el programa de desinfeccin al final de cada ciclo, enclavado todo
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ello en un sistema todo-dentro todo-fuera. No hay que olvidar que, para desarrollar un
programa vacunal correcto, y sobretodo para escoger la vacuna del patotipo correcto, es
fundamental conocer la clase de cepa que tenemos en la explotacin, es decir, qu tipo de
virus es molecularmente. Adems, tras aos de experiencia, uno de los puntos ms relevantes
en la estrategia de lucha contra la enfermedad, ha sido la transferencia de inmunidad
maternal como base para un programa de proteccin del pollo. Uno de los puntos crticos ms
importantes tras la correcta i nmunizacin de las reproductoras, es la gestin de la
transferencia de esta inmunidad al pollito. Que esta transferencia se realice de forma ptima,
es decir, con tasas de anticuerpos elevados y homogneos para todos los lotes de pollos es
indispensable para que la proteccin sea real. Naturalmente realizar esto conlleva una
enorme dificultad que en ocasiones implica cambios y costos en las empresas difciles de
asumir. No obstante, es esencial comprender que, al margen de los programas estrictamente
vacunales, la direccin que debemos seguir para poder controlar la enfermedad es
inevitablemente esta.
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Referencias bibliogrficas

(1) A.S. Cosgrove, 1962. An apparently new disease of chickens- avian nephrosis.
Avian diseases 6: 385-389.
(2) S.B. Hitchner.1970. Infectivity of Infectious Busal Disease virus for embryonating
eggs. Poultry Science 49, 511-516.
(3) T. Van den Berg. Acute infectious bursal disease in poultry: a review. Avian
Pathology (2000) 29, 175-194.
(4) Varias referencias: Yamaguchi et al, 1997 , Cao et al 1998, Chen et al 1998 y
Eterradossi et al, 1999.
(5) Pags-Mant, Comunicacin Personal, 1975. Tesis doctoral, Universidad de
Zaragoza. Cintica de anticuerpos de IBD mediante una tcnica de Elisa indirecto
en reproductoras pesadas. 1990.
(6) J.J. Giambrone. Auburn University, USA. IBD virus, an old foe changes its face
again. 2001. World Poultry special Gumboro, 2001.
(7) Pags-Mant, A., Pujol, P., Durn, D., Fernndez, F., Hernando, A. Estudios
clnicos y laboratoriales de una cepa de la enfermedad de Gumboro IBD aislada
en Baleares.1991
(8) Wyeth, P.J., Cullen, G.A. Transmission of immunity from inactivated
infectious Bursal disease oil-emulsion vaccinated parent chickens to their chicks.
Vol. 362-363. 1978.
(9) Jover, A., Saubi, N., Pags-Mant, A.. Anlisis molecular y estudio de
patogenicidad de aislados recientes de IBDV en Espaa. Jornadas sobre la
enfermedad de Gumboro. Cesac, Reus, Tarragona, Septiembre 2002.
(10)Maj, N., El-Attrache, J., Villegas, P., Ramis, A., Pags-Mant, A; N. Ikuta.
Caracterizacin molecular de nueve cepas de campo espaolas de virus de la
enfermedad de Gumboro. Avian Diseases 46: 859-868, 2002.
(11)Saubi, N., Martnez- Torrecuadrada, J. L., Casal, I., Vela, C., Pags-Mant, A.,
Espua, E. The use of recombinant proteins in a killed, infectious bursal disease
virus (IBDV) vaccine.