Laporan Praktikum Mikrobiologi

Medium berfungsi untuk mengisolasi, menumbuhkan mikroorganisme,
memperbanyak jumlah, menguji sifat- sifat fisiologi, dan menghitung jumlah mikroba. Dalam proses pembuatan medium harus disterilisasi dan menerapkan metode aseptis untuk menghindari kontaminasi pada medium. Praktikum ini bertujuan untuk mempelajari prosedur umum untuk merekonstitusi (mengembalikan kepada keadaan asalnya) medium berbentuk bubuk (terdehidrasi) dan menaruhnya dalam jumlah yang dikehendaki ke dalam wadah-wadah yang sesuai. Serta mempelajari ciri morfologi dan kultural mikroorganisme yang tumbuh sebagai koloni murni.Pada percobaan ini dapat disimpulkan bahwa pembuatan media pertumbuhan bakteri dilakukan dengan media nutrient agar (NA) didapatkan hasil positif mengandung bakteri pada sampel tangan dan sampel tutup botol. Bentuk koloni pada kedua sampel berbeda tergantung spesiesnya. Pertumbuhan dan bentuk
morfologi bakteri juga dapat dipengaruhi oleh kondisi lingkungan, faktor biotik, dan abiotik.

A. TUJUAN PRAKTIKUM 1. Memilih dan menentukan jenis perbenihan yang sesuai untuk suatu uji. 2. Membuat beberapa perbenihan dasar yang digunakan dalam praktek mikrobiologi. 3. Melakukan sterilisasi alat dan media. 4. Melakukan uji sterilitas terhadap media yang telah disterilkan. B. DASAR TEORI Jenis media berdasarkan konsistensinya: 1. Media cair, contoh : nutrien agar, potato dextrose agar. 2. Media padat, contoh : kaldu pepton, tryptic soy bronth, nutrien broth. 3. Media semi padat, contoh : nutrien gelatin. Jenis media menurut kandungannya : 1. Defined media (synthetic media) : media yang komponen penyusunnya sudah diketahui / ditentukan untuk mengetahui kebutuhan nutrisi mikroorganisme. 2. Media kompleks (complex media) : media yang komponen penyusunnya tidak diketahui, untuk mengetahui kebutuhan nutrisi mikroorganisme, misalnya ekstrak daging, ekstrak khamir, pepton dll. 3. Media umum (general media) : media pendukung bagi banyak pertumbuhan mikroorganisme, contohnya TSB, TSA. 4. Media penyubur (enrichment media) : berguna untuk mempercepat pertumbuhan mikroorganisme tertentu. 5. Media selektif (selective media) : mendukung pertumbuhan mikroorganisme tertentu (seleksi) dengan menghambat pertumbuhan mikroorganisme lain.

Tempe adalah makanan tradisional yang dihasilkan dari fermentasi biji kedelai atau beberapa bahan lainnya. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pengaruh penambahan rempah-rempah terhadap kualitas tempe berdasarkan warna, tekstur, aroma, dan rasa tempe serta mengetahui perbedaan kualitas tempe yang ditambah dengan berbagai macam rempah-rempah. Hasil skoring warna tempe menunjukkan warnanya yang paling bagus adalah kemiri, ketumbar, bawang putih dengan rata-rata 4. Skoring kepadatan tempe yang paling padat adalah merica , ketumbar, cabai dengan rata-rata 4. Skoring aroma tempe yang memiliki aroma bagus adalah kemiri, merica, bawang putih dengan rerata 4 dan skoring pada rasa tempe yang memiliki rasa enak adalah kemri dan ketumbar dengan rerata 4. Penambahan rempah-rempah dalam proses pembuatan tempe dapat meningkatkan kualitas tempe, dengan menambah cita rasa. Rempah-rempah terkandung nutrisi yang juga diperlukan untuk pertumbuhan kapang, sehingga miselium kapang tumbuh lebih optimal. Warna, tekstur, aroma dan rasa tempe dengan penambahan rempah-rempah menunjukkan warna yang bervariasi.
Kata Kunci:  Tempe, Rempah, Kedelai & Suplemen

Pertumbuhan mikroorganisme sangat bergantung pada kandungan nutrisi yang terdapat dalam lingkungan sekitarnya. Dalam melakukan kultivasi bakteri pada suatu media, diperlukan persyaratan yaitu semua unsur hara yang dibutuhkan mikroorganisme harus terpenuhi pada media agar mikroorganisme yang tumbuh dapat berkembang dengan optimal pada media. Kultivasi bakteri adalah metode untuk melipatgandakan jumlah mikroba dengan membiarkan mereka berkembang biak dalam media biakan yang telah disiapkan dalam kondisi yang terkendali. Menurut Suriawati (2005), media harus memiliki tekanan osmosis, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai dengan kebutuhan dari mikroba, zat penghambat pertumbuhan organisme harus dihilangkan pada media, dimana media harus steril sehingga kultur mikroba yang tumbuh tidak terkontaminasi. Sterilisasi digunakan untuk menghilangkan gangguan yang dapat disebarkan oleh mikroorganisme atau kontaminasi dan meminamilisir penurunan kualitas inokulasi (Dewi et al., 2017). Sterilisasi terhadap alat dan bahan sebelum pelaksanaan kegiatan praktikum mikrobiologi membantu hasil atau identifikasi yang akurat terhadap pemeriksaan mikrobiologi. Dengan melakukan praktikum ini, diharapkan kultivasi bakteri dan pembuatan media dapat membantu memasok bakteri untuk bidang Rekayasa Kehutanan. II. TUJUAN 1. Menentukan perbedaan komposisi media pertumbuhan untuk bakteri dan jamur 2. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi panas menggunakan autoklaf 3. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi fisik menggunakan teknik filtrasi 4. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi kimia menggunakan alkohol 70%, antibiotik, dan antifungi 5. Menentukan perbedaan dan fungsi dari teknik-teknik isolasi dan purifikasi mikroba 6. Menentukan perbedaan dan fungsi dari teknik-teknik kultivasi mikroba MODUL III -MUHAMMAD YUNUS SULTHAN AZHAR IDRUS -11518053 III. HIPOTESIS 1. Perbedaan komposisi media pertumbuhan untuk bakteri dan jamur adalah pada media pertumbuhan bakteri komposisinya dari ekstrak daging dan ekstrak ragi, sedangkan komposisi media pertumbuhan jamur utamanya berupa ekstrak kentang. 2. Prinsip sterilisasi panas dengan autoklaf adalah menggunakan panas dan tekanan uap air yang dihasilkan untuk membunuh bakteri setelah dipanaskan.

untuk tujuan pembiakan, isolasi, pengujian sifat sifat fisiologis dan perhitungan jumlah mikrobia, maka kita memerlukan suatu medium. media merupakan suatu bahan yang terdiri atas campuran nutrient. umumnya medium mengandung air, sumber energi, ntrogen, sulfur, posfat, oksigen, hidrogen serta unsur unsur kelumit (trace mineral). media ini dapat pula ditambahkan faktor pertumbuhan berupa asam amino, vitamin, atau nikleotida

Pertumbuhan mikroorganisme sangat bergantung pada kandungan nutrisi yang terdapat dalam lingkungan sekitarnya. Dalam melakukan kultivasi bakteri pada suatu media, diperlukan persyaratan yaitu semua unsur hara yang dibutuhkan mikroorganisme harus terpenuhi pada media agar mikroorganisme yang tumbuh dapat berkembang dengan optimal pada media. Kultivasi bakteri adalah metode untuk melipatgandakan jumlah mikroba dengan membiarkan mereka berkembang biak dalam media biakan yang telah disiapkan dalam kondisi yang terkendali. Menurut Suriawati , media harus memiliki tekanan osmosis, tegangan permukaan, dan pH yang sesuai dengan kebutuhan dari mikroba, zat penghambat pertumbuhan organisme harus dihilangkan pada media, dimana media harus steril sehingga kultur mikroba yang tumbuh tidak terkontaminasi. Sterilisasi digunakan untuk menghilangkan gangguan yang dapat disebarkan oleh mikroorganisme atau kontaminasi dan meminamilisir penurunan kualitas inokulasi (Dewi et al., 2017). Sterilisasi terhadap alat dan bahan sebelum pelaksanaan kegiatan praktikum mikrobiologi membantu hasil atau identifikasi yang akurat terhadap pemeriksaan mikrobiologi. Dengan melakukan praktikum ini, diharapkan kultivasi bakteri dan pembuatan media dapat membantu memasok bakteri untuk bidang Rekayasa Kehutanan. II. TUJUAN 1. Menentukan perbedaan komposisi media pertumbuhan untuk bakteri dan jamur 2. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi panas menggunakan autoklaf 3. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi fisik menggunakan teknik filtrasi 4. Menentukan fungsi dan prinsip dasar dari sterilisasi kimia menggunakan alkohol 70%, antibiotik, dan antifungi 5. Menentukan perbedaan dan fungsi dari teknik-teknik isolasi dan purifikasi mikroba 6. Menentukan perbedaan dan fungsi dari teknik-teknik kultivasi mikroba MODUL III -MUHAMMAD YUNUS SULTHAN AZHAR IDRUS -11518053 III. HIPOTESIS 1. Perbedaan komposisi media pertumbuhan untuk bakteri dan jamur adalah pada media pertumbuhan bakteri komposisinya dari ekstrak daging dan ekstrak ragi, sedangkan komposisi media pertumbuhan jamur utamanya berupa ekstrak kentang. 2. Prinsip sterilisasi panas dengan autoklaf adalah menggunakan panas dan tekanan uap air yang dihasilkan untuk membunuh bakteri setelah dipanaskan. 3. Prinsip sterilisasi fisik dengan teknik filtrasi adalah menfiltrasi atau menyaring cairan dengan suatu saringan dengan ukuran pori-pori yang sangat kecil sehingga mikroba tertahan pada saringan tersebut. 4. Sterilisasi kimia menggunakan alkohol 70%, antibiotik, dan antifungi berfungsi untuk membersihkan atau mensterilisasi secara kimia. Alkohol 70% mampu mematikan mikroorganisme secara umum, antibiotik mampu mematikan bakteri, dan antifungi mampu mematikan jamur. 5. Teknik isolasi dan purifikasi berfungsi untuk memisahkan atau memindahkan mikroba. Pada teknik isolasi bakteri dipisahkan/dipindahkan dari lingkungan aslinya, sedangkan pada purifikasi bakteri dipisahkan/ dipindahkan dari koloninya. 6. Fungsi teknik kultivasi mikroba metode tusuk, gesek, dan tanam adalah untuk budidaya mikroba. Perbedaan ketiga metode tersebut adalah pada cara meletakkan/memasukkan mikroba pada media tumbuh. IV. CARA KERJA 1. Persiapan Alat dan Bahan dengan Teknik Aseptik Praktikum pewarnaan sel bakteri diawali dengan menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan. Alat dan bahan yang akan digunakan adalah alkohol 70%, alkohol 96%, antibiotik streptomisin, antifungi nystatin, autoklaf, batang l, bunsen, cawan petri steril, falcon steril, filter, glukosa, jarum oose, kapas lemak, kawat oose, kawat oose bulat, kawat oose lurus, kultur campuran, kultur jamur Penicillium sp., kultur jamur Rhizopus oligosporus, kultur bakteri Serratia marcescens dan Staphylococcus aureus, medium NA dalam cawan petri, medium NA padat, medium NB dalam MODUL III -MUHAMMAD YUNUS SULTHAN AZHAR IDRUS -11518053 tabung reaksi, medium PDA dalam cawan petri, mikropipet, NA cair, plat NA miring dalam tabung reaksi, plat NA tegak dalam tabung reaksi, plat PDA dalam cawan petri, suntik steril, dan tabung reaksi. Meja, tangan, serta peralatan yang akan digunakan harus dibersihkan terlebih dahulu menggunakan alkohol 70% untuk meminimalisir terjadinya kontaminasi.

ACARA 1 SISTEM SALURAN PENCERNAAN HEWAN TERNAK BAB I PENDAHULUAN Diadakannya praktikum ini adalah untuk mengetahui saluran pencernaan hewan ruminansia,pseudo-ruminansia, dan non-ruminansia. Dan mengidentifikasi bagian, ciri dan fungsi masing-masing bagian saluran pencernaan ternak ruminansia, non ruminansia dan pseudo ruminansia. Organ pencernaan ruminansia dimulai dari mulut, kemudian menuju retikulum, selanjutnya omasum, abomasum, usus halus, diusus halus terdapat tiga bagian, yaitu duodenum, jejenum dan ileum. Kemudian ke usus besar dan terakhir ke anus. Sistem pencernaan pseudo ruminansia meliputi mulut, esophagus, lambung, hati, usus halus, sekum, usus besar dan anus. Sistem pencernaan non ruminansisa meliputi mulut, esophagus, tembolok, proventikulus, gizzard (ampela), usus halus, usus besar dan kloaka. Tujuannya dilakukan praktikum ini agar kami mengetahui sistem pencernaan ruminansia, non ruminansia dan pseudo ruminansia dengan baik dan benar. Selain itu manfaat setelah kami melakukan praktikum, kami dapat memahami dan lebih mengetahui mengenai sitem pencernaan ruminansia, non ruminansia dan pseudo ruminansia. BAB II MATERI DAN METODE Praktikum Fisiologi Ternak dengan materi Saluran Pencernaan Hewan Ternak dilaksanakan hari Jumat tanggal 15 September pukul 09.15 -11.15 WIB di Laboratorium Fisiologi dan Biokimia, Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang.

Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat makanan (nutrisi) yang diperlukan mikroorganisme untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekulmolekul kecil yang dirakit untuk menyusun komponen sel. Dengan media pertumbuhan dapat dilakukan isolat mikroorganisme menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya (Sosilowati dan Listyawati 2001). Pembiakan mikroba dalam laboratorium memerlukan medium yang berisi zat hara serta lingkungan pertumbuhan yang sesuai dengan mikroorganisme. Zat hara digunakan oleh mikroorganisme untuk pertumbuhan, sintesis sel, keperluan energi dalam metabolisme, dan pergerakan. Lazimnya, medium biakan berisi air, sumber energi, zat hara sebagai sumber karbon, nitrogen, sulfur, fosfat, oksigen, hidrogen serta unsur-unsur sekelumit (trace element). Dalam bahan dasar medium dapat pula ditambahakan faktor pertumbuhan berupa asam amino, vitamin atau nukleotida (Waluyo 2011). Media biakan ada yang berbentuk padat, cair dan semi padat. Media padat adalah media biakan yang dipadatkan dengan agar, ada yang bersifat reversible (dapat dibalik) seperti agar nutrien dan ada yang bersifat ireversible (tidak dapat dibalik) seperti serum darah terkoagulasi. Dalam kedokteran, media padat yang bersifat irreversible paling sering digunakan. Sedang agar nutrient banyak digunakan dalam media lain. Bentuk media lain berupa cair adalah campuran komponen-komponen zat kimia tertentu dengan air suling, sedang media yang secara fisik merupakan intermediate antara media cair dan padat, seperti agar lunak (Atlas 2004). Berdasarkan komposisinya, media terdiri dari media sintesis, semi sintesis, dan non sintesis. Media sintesis yaitu media yang komposisi zat kimianya diketahui secara pasti. Media semi sintesis yaitu media yang sebagian dari komposisi kimianya diketahui, sedangkan media non sintesis yaitu media yang komposisi zat kimia dalam medianya tidak diketahui. Sementara berdasarkan fungsinya media terdiri dari media umum, media selektif, media differensial, media uji, dan media diperkaya. Media umum yaitu media yang terdiri dari pepton dan ekstrak khamir untuk pertumbuhan banyak jenis mikroba. Contohnya adalah media NA (Nutrient Agar). Media selektif adalah media yang ditambah zat tertentu sehingga bersifat selektif yang hanya merangsang pertumbuhan satu jenis mikroba dan jenis lainnya mati. Contohnya media TCBS (Thiosulfate Cytrat Bile Salt). Media diffferensial adalah media yang yang mengandung suatu komponen yang menyebabkan pertumbuhan mikroba tertentu dengan adanya perubahan tertentu yang dapat membedakan mikroba tersebut dari mikroba yang lainnya. Comtohnya media EMBA (Eosin Metilen Blue Agar). Media uji adalah media dengan komposisi tertentu untuk mengetahui atau menguji adanya zat tertentu. Sementara media diperkaya adalah media yang berisi komponen komplek, seperti darah, serum dan lain-lain.

Koloni bakteri tiap spesies berbeda, koloni bakteri sendiri merupakan kumpulan bakteri sehingga terbentuk suatu kelompok. Dewasa ini, bakteri sering digunakan sehingga penting untuk mempelajari morfologi koloni bakteri, karena bila bakteri dinokulasikan dan ditumbuhkan pada suatu media maka bakteri itu akan menunjukkan sifat-sifatnya. Sehingga bila sudah diketahui morfologi bakteri maka sel-sel bakteri dapt dipisahkan sehingga sel tumbuh menjadi koloni pada mediumnya masing-masing.
Pada percobaan yang dilakukan, mmorfologi yang diamati adalah Eschericia coli dan Bascillus subtilis. Bakteri tersebut diamati pada 4 medium yaitu petri dish, agar miring, agar cair (broth), agar tegak. Parameter yang diamati adalahan pertumbuhan, bentuk koloni, pergerakan, elevasi, kilat, topografi, warna koloni, warna pigmen,bau.

Inokulasi merupakan pemindahan mikroba dari lingkungan aslinya ke media yang baru dengan menggunakan tingkat ketelitian yang sangat akurat agar tidak terjadi kontaminasi dari mikroba lain atau gangguan dari serangga. Media merupakan bahan yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme karena mengandung banyak vitamin, nutrisi, energi atau unsur hara lain yang dimana mempunyai peran yang sangat penting bagi kelangsungan hidup suatu mikroorganisme. Praktikum ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui teknik dan fungsi media pada inokulasi mikroba, serta untuk mengetahui pengaruh dari pengenceran bertingkat terhadap inokulasi media. Pembuatan larutan fisiologis 0,85% dilakukan untuk mengencerkan suspensi dari bahan yoghurt hingga mencapai pengenceran 10-5 yang kemudian diinokulasi dengan menggunakan metode spread plate. Metode spread plate dilakukan dengan cara media NA dituang ½ volume cawan petri ke dalam cawan petri kemudian ditunggu hingga memadat. Bahan yang berasal dari yoghurt kemudian dituang ke atas permukaan media dan ditebar dengan menggunakan hockey stick. Berdasarkan hasil percobaan ini, terdapat mikroba yang tumbuh pada cawan petri dengan bentuk bulat tidak beraturan, berwarna kuning, serta penyebarannya yang tidak merata. Kontaminasi juga terjadi pada praktikum ini, yaitu tumbuhnya hifa pada hari kedua.

Di Indonesia, terutama pada mahasiswa bioteknologi kajian mikrobiologi merupakan kajian wajib dalam bentuk mata kuliah bagi mahasiswa prodi biologi/bioteknologi. Kajian mikrobiologi di perguruan tinggi selalu disertai dengan pelaksanaan praktikum untuk membekali mahasiswa untuk menguasai softskill keterampilan kerja ilmiah yang biasa dilakukan di dalam laboratorium. Salah satunya adalah teknik dan cara pewarnaan gram bakteri.
Melihat dan mengamati bakteri dalam kedaan hidup sangat sulit, karena selain bakteri itu tidak berwarna juga transparan dan sangat kecil. Untuk mengatasi hal tersebut maka dikembangkan suatu teknik pewarnaan sel bakteri. Ini merupakan salah satu cara yang paling utama dalam penelitian-penelitian mikrobiologi. Hal itu untuk mempermudah proses identifikasi  bakteri.

Dalam melakukan percobaan ini kita tahu tentang cara mengenal dan mebuat beberapa media pertumbuhan mikroba, telebih dahulu kita harus menumbuhkan atau membiakan bakteri/jamur tersebut. Mikroorganisme dapat berkembang biak dengan alami atau dengan bantuan manusia. Mikroorganisme yang dikembangkan oleh manusia diantaranya melalui media. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan kebutuhan jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang hanya mengandung garam anargonik di tambah sumber karbon organik seperti gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu medium yang sangat kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks lainnya.

Didalam bidang ilmu mikrobiologi, untuk dapat menelaah bakteri khususnya dalam skala laboratorium, maka terlebih dahulu kita harus dapat menumbuhkan mereka dalam suatu biakan yang mana di dalamnya hanya terdapat baktri yang kita butuhkan tersebut tanpa adanya kontaminasi dari mikroba lain. Biakan yang semacam ini biasanya dikenal dengan istilah biakan murni. Untuk melakukan hal ini, haruslah di mengerti jenis-jenis nutrien yang disyaratkan bakteri dan juga macam ligkungan fisik yang menyediakan kondisi optimum bagi pertumbuhan bakteri tersebut (Pelczar dan Chan, 1986).
Pemindahan bakteri dari medium lama ke medium yang baru atau dikenal dengan istilah inokulasi bakteri ini memerlukan banyak ketelitian. Terlebih dahulu kita harus mengusahakan agar semua alat-alat yang akan digunakan untuk pengerjaan medium dan pengerjaan inokulasi benar-beanr steril. Hal ini untuk menghindari terjadinya kontaminasi, yaitu masuknya mikroba lain yang tidak diinginkan sehinggabiakan yang tumbuh di dalam medium adalah benar-benar biakan murni (Dwidjoseputro, 1980).
Pada praktikum yang dilakukan akan dikenalkan dan dipelajari beberapa metode isolasi bakteri, yaitu metode  streak plate (metode penggoresan diatas medium agar, sehingga didapatkan koloni tunggal), metode pour plate (menuangkan sampel bakteri kemudian medium agar, lalu diratakan dalam petrdish), serta metode spread plate (metode penumbuhan bakteri diatas medium agar, lalu meratakannya dengan trigalski). Dalam praktikum ini juga akan mempelajari cara mengisolasi bakteri dari udara, Starbio dan Rodac.

Dalam keadaan sebenarnya (di alam bebas) boleh dikata tidak ada bakteri yang hidup tersendiri dan terlepas dari spesies lainnya. Kerap kali bakteri patogen kedapatan bersama-sama bakteri saprobe. Yang terakhir ini boleh disebut penyerbu yang membonceng (secondary invaders). Mungkin juga bakteri patogen yang membonceng. Untuk menentukan siapa pembonceng dan siapa yang dibonceng diberikan pedoman “siapa yang kedapatan disitu lebih dulu, dan siapa yang dating terkemudian”
Di alam, pepulasi mikroba merupakan populasi campuran dari berbagai mikroorganisme atau disebut juga biakan campuran. Teknik biakan murni digunakan untuk memisahkan berbagai macam bakteri tersebut. Untuk dapat memperoleh biakan murni digunakan beberapa teknik biakan yaitu metode agar tuang dan metode penggoresan lempengan agar.

Di Indonesia, terutama pada mahasiswa bioteknologi kajian mikrobiologi merupakan kajian wajib dalam bentuk mata kuliah bagi mahasiswa prodi biologi/bioteknologi. Kajian mikrobiologi di perguruan tinggi selalu disertai dengan pelaksanaan praktikum untuk membekali mahasiswa untuk menguasai softskill keterampilan kerja ilmiah yang biasa dilakukan di dalam laboratorium. Salah satunya penanaman bakteri pada media.
Untuk dapat meneliti mikroorganisme di laboratorium kita harus dapat menumbuhkan mikroorganisme tersebut.  Mikroorganisme dapat berkembang secara alami ataupun buatan. Substrat yang digunakan manusia dalam dalam mengembangkan dan menumbuhkan mikroorganisme disebut media .

Praktikum Mikrobiologi dengan materi Sterilisasi dan Pembuatan Medium dilaksanakan pada hari Sabtu tanggal 14 April 2018 pukul 15.00-18.00 WIB dan materi Metode Hitungan Cawan dan Pewarnaan Gram  dilaksanakan pada hari Minggu tanggal 15 April 2018 pukul 10.00-12.00 WIB di Laboratorium Fisiologi dan Biokimia, Fakultas Peternakan dan Pertanian, Universitas Diponegoro, Semarang.
Materi yang digunakan dalam praktikum ini meliputi alat dan bahan. Alat praktikum terdiri dari erlenmeyer, cawan petri, pipet ukur, penghisap, autoklaf, inkubator, beker glass, gelas ukur, timbangan, oven, tabung reaksi, bunsen, kaca objek, dan mikroskop. Bahan praktikum meliputi filtrat kentang, dextrose, agar, aquades, asam tartarat, alkohol, kertas pembungkus, kapas, aluminium foil, sampel udang pasar, larutan gram A (Violet Kristal), larutan gram B (Lugol), larutan gram C (Etanol), larutan gram D (Safranin), biakan bakteri E. coli dan Stephyloccocus. Metode yang digunakan dalam praktikum sterilisasi yaitu sterilisasi kering menggunakan oven pada suhu 1700C selama 1 jam dan sterilisassi basah menggunakan autoklaf pada suhu 1210C dengan tekanan 2 atm selama 15 menit. Metode yang digunakan pada praktikum pembuatan medium PDA yaitu filtarat kentang, dextrose dan agar dicampur menjadi satu. Metode yang dilakukan pada praktikum pengenceran yaitu dengan pengenceran pada tingkat 10-4, 10-5 dan 10-6. Metode yang dilakukan pada praktikum perhitungan jumlah mikroba yaitu dengan plate count berdasarkan ketentuan SPC dengan pengenceran . Metode yang digunakan pada praktikum pewarnaan gram yaitu menggunakan larutan gram A, B, C dan D lalu diamati dengan mikroskop.
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan, sterilisasi dibagi menjadi dua yaitu sterilisasi basah yang digunakan untuk mensterilkan medium dan sterilisasi kering yang digunakan untuk mensterilkan alat praktikum. Medium yang digunakan dalam praktikum adalah PDA. Medium ini dipilih karena merupakan medium yang sesuai dengan lingkungan hidup mikroorganisme yang memerlukan nutrisi untuk kebutuhan hidupnya. Pengenceran pada sampel dilakukan untuk menentukan jumlah mikroba pada cawan. SPC mikroba yang dihasilkan pada penghitungan cawan dengan sampel udang pasar adalah 104. Pewarnaan gram menggunakan dua biakan bakteri yaitu Eschericia coli yang merupakan bakteri gram negatif dan Staphyloccocus sp. yang merupakan bakteri gram positif. Perbedaan bakteri tersebut terletak pada struktur dinding sel antara kedua jenis bakteri.

i RINGKASAN Rumah merupakan salah satu kebutuhan pokok manusia, disamping kebutuhan sandang, pangan dan kesehatan. Oleh karena itu rumah haruslah sehat dan nyaman agar penghuninya dapat berkarya untuk meningkatkan produktifitas. Konstruksi rumah dan lingkungan yang tidak memenuhi syarat kesehatan merupakan faktor risiko sumber penularan berbagai jenis penyakit, khususnya penyakit yang berbasis lingkungan.

KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS PERTANIAN PURWOKERTO 2017 LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR ACARA III PENGECATAN GRAM PADA BAKTERI Rombongan 2 Kelompok 2 Penanggung jawab : Pegi Vidya Pitaloka (A1F016016) KEMENTERIAN RISET, TEKNOLOGI, DAN PENDIDIKAN TINGGI UNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN FAKULTAS PERTANIAN PURWOKERTO 2017 BAB I. PENDAHULUAN A. Latar Belakang Bakteri mempunyai morfologi, struktur dan sifat-sifat yang khas. Bakteri merupakan mikroorganisme yang berukuran mikroskopik. Selain mikroskopik, bakteri juga hampir tidak berwarna atau transparan dan kontras dengan mediumnya. Sehingga melihat dan mengamati bakteri dalam kedaan hidup sangat sulit. Untuk mengidentifikasi suatu biakan murni bakteri hasil isolasi mula-mula diamati morfologi sel secara mikroskopik melalui pengecetan atau pewarnaan, salah satunya adalah dengan pewarnaan Gram. Pewarnaan Gram merupakan salah satu prosedur yang paling banyak digunakan untuk mencirikan banyak bakteri. Dari pewarnaan Gram dapat diketahui morfologi sel antara lain sifat Gram, bentuk sel, dan penataan sel, berdasarka sifat kimia dan fisika dinding sel mereka, metode ini diberi nama berdasarkan penemunya, ilmuwan Denmark Hans Christian Gram 1884. Pewarnaan Gram dibagi menjadi dua yaitu pewarnaan majemuk karena menggunakan lebih dari satu macam zat warna. Dan pewarnaan diferensial karena pewarnaan ini mampu mengdeferensiasi atau membedakan bakteri, sehingga bakteri dapat digolongkan menjadi dua yaitu Gram negatif dan Gram positif. Selain dengan pewarnaan atau pengecatan, identifikasi bakteri dapat berupa melihat morfologi koloni dan uji biokimia bakteri. Morfologi bakteri meliputi bentuk, ukuran, tekstur, warna koloni,dll. Semantara uji biokimia dilakukan untuk memastikan jenis/spesies bakterinya.

Mikrobiologi adalah ilmu yang mempelajari mikroba. Mikrobiologi adalah salah satu cabang ilmu dari biologi, dan memerlukan ilmu pendukung kimia, fisika dan biokimia. Mikrobiologi sering disebut ilmu praktek dari biokimia. Dalam mikrobiologi dasar diberikan pengertian dasar tentang sejarah penemuan mikroba, macam-macam mikroba di alam, struktur sel mikroba dan fungsinya, metabolisme mikroba secara umum, pertumbuhan mikroba dan faktor lingkungan, mikrobiologi terapan di bidang lingkungan dan pertanian. Mikrobiologi lanjut telah berkembang menjadi bermacam - macam ilmu yaitu virologi, bakteriologi, mikologi, mikrobiologi pangan, mikrobiologi tanah, mikrobiologi industri, dan sebagainya yang mempelajari mikroba spesifik secara lebih rinci atau menurut kemanfaatannya.
Pengujian mikrobiologis dibutuhkan alat optik yang fungsinya dapat melihat objek yang berukuran sangat kecil, alat ini disebut mikroskop. Mikrosskop (bahasa yunani: Micros = kecil dan Scopein = melihat) adalah sebuah alat untuk melihat objek yang terlalu kecil untuk dilihat dengan mata kasar, ilmu yang mempelajari tentang benda ini disebut mikroskopi. Mikroskop pertama kali digunakan oleh Antony Van Leuwenhoek, lewat penelitiannya yang meneliti sel.
Berdasarkan uraian permasalahan di atas, maka perlu dilakukannya praktikum ini, agar dapat mengetahui fungsi dan cara penggunaan mikroskop dalam pengujian mikrobiologis.

Telah diketahui bahwa mikroba ada yang menguntungkan dan ada pula yang merugikan, adapun mikroba yang merugikan dapat disingkirkan, dihambat dengan atau dibunuh menggunakan bahan kimia, pertumbuhan bakteri dapat dihambat oleh faktor-faktor lain yaitu oleh sinar matahari, logam suhu, dll. Berbagai jenis bahan kimia yang dibuat secara sintetik telah banyak dimanfaatkan orang untuk menyembuhka luka dan telah diuji khasiatnya, zat yang demikian disebut dengan zat antiseptic. Pada pengamatan ini sangat penting sekali untuk dilakukan untuk dapat mengetahui antiseptic yang mana dapat menghambat pertumbuhan bakteri

Salah satu pengendalian aktivitas mikrobia adalah mengatur faktorfaktor lingkungan yang mempengaruhinya. Pertumbuhan mikroba umumnya sangat tergantung dan dipengaruhi oleh faktor lingkungan, perubahan faktor lingkungan dapat mengakibatkan perubahan sifat morfologi dan fisiologi. Hal ini dikarenakan, mikrobia selain membutuhkan nutrien yang sesuai untuk pertumbuhannya, juga diperlukan faktor lingkungan yang memungkinkan pertumbuhan optimumnya. Faktor-faktor tersebut meliputi faktor biotik dan abiotik. Faktor abiotik meliputi faktor fisik dan kimia lingkungan. Beberapa faktor abiotik yang perlu mendapat perhatian ialah temperatur, pH, daya logam berat (daya oligodinamik), sinar gelombang pendek, kelembaban, pengeringan, dan tekanan osmosis. Sedangkan faktor biotik meliputi assosiasi atau kehidupan bersama antara mikrobia. Asosiasi ini dalam bentuk sinergisme, sintropisme, dan antibiose (Jutono, 1980). Mikrobia dalam pertumbuhannya dipengaruhi oleh beberapa faktor, baik faktor fisik, kimia, maupun biologi. Dalam mengatur dan mengendalikan mikrobia maka harus mengetahui faktor yang mempengaruhinya. Hal ini terutama faktor dari luar, atau faktor lingkungan. Faktor ini mempengaruhi mikrobia, baik fisiologi maupun morfologi. Maka dalam praktikum ini dilakukan percobaan pengaruh faktor luar terhadap pertumbuhan mikrobia, dalam hal ini adalah bakteri. Faktor luar yang akan diujikan dan dipelajari dalam percobaan kali ini adalah pengaruh temperatur, pengaruh logam Cu, pengaruh desinfektan (HgCl2, HNO3, NHClO, iod, dan alkohol 70%), dan pengaruh antibiotik (Amphicillin) pada , Chloroxylenol, dan ekstrak serai. Suhu dipelajari karena bakteri mampu hidup pada kondisi suhu tertentu, pengaruh logam Cu dalam hal ini mampu merusak pertumbuhan bakteri karena bersifat toksis terhadap mikrobia. Pengaruh desinfektan dipelajari karena hampir senyawa kimia mampu menghambat pertumbuhan mikrobia bahkan membunuh mikrobia. Pengaruh antiseptik dipelajari karena kemampuan penggunaan senyawa kimia untuk membunuh dan menekan pertumbuhan mikrobia. C. Tujuan 1. Mengetahui pengaruh suhu (4 ºC, 37 ºC, dan 55 ºC) terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli 2. Mengetahui pengaruh suhu (4 ºC, 37 ºC, dan 55 ºC) terhadap pertumbuhan bakteri Bascillus subtilis 3. Mengetahui pengaruh logam berat Cu dan HgCl2 terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli 4. Mengetahui pengaruh logam berat Cu dan HgCl2 terhadap pertumbuhan bakteri Bascillus subtilis 5. Mengetahui pengaruh desinfektan (Iod, NaClO, HNO3, dan alkohol 70% terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli 6. Mengetahui pengaruh desinfektan (Iod, NaClO, HNO3, dan alkohol 70% terhadap pertumbuhan bakteri Bascillus subtilis 7. Mengetahui pengaruh Antibiotik (Amphicillin, Chloroxylenol dan ekstrak serai) terhadap pertumbuhan bakteri Eschericia coli 8. Mengetahui pengaruh Antibiotik (Amphicillin, Chloroxylenol dan ekstrak serai) terhadap pertumbuhan bakteri Bascillus subtilis II. TINJAUAN PUSTAKA Menurut Fardiaz (1992), pertumbuhan dapat didefinisikan sebagai pertambahan secara teratur semua komponen di dalam sel hidup. Pada organisme multiseluler, yang disebut pertumbuhan adalah peningkatan jumlah sel per organisme, dimana ukuran sel juga menjadi lebih besar. Pada organisme uniseluler