УДК 543.544(075.

8)
ББК 24.46я73
В48

Р е ц е н з е н т ы:
кафедра химии БГПУ имени Максима Танка
(заведующий кафедрой кандидат химических наук,
доцент Н. В. Суханкина);
кандидат химических наук, доцент Л. Я. Крисько

В48 Винарский, В. А.
Масс-спектрометрия и хромато-масс-спектральный анализ : посо-
бие / В. А. Винарский, Р. А. Юрченко. – Минск : БГУ, 2013. – 135 с.
ISBN 978-985-518-890-3.

Рассмотрены вопросы современной масс-спектрометрии органиче-

ских соединений: методы ионизации и разделения ионов, физико-хими-
ческие основы процесса масс-спектрометрического распада молекул ис-
следуемых соединений, использование различных типов масс-детекторов
для идентификации и установления количественного содержания компо-
нентов в сложных по составу объектах после их разделения методами га-
зовой, жидкостной, сверхкритической флюидной хроматографии и капил-
лярного электрофореза.
Предназначено для студентов высших учебных заведений, обучающих-
ся по специальности 1-31 05 01 «Химия (по направлениям)».

УДК 543.544(075.8)
ББК 24.46я73

ISBN 978-985-518-890-3 © Винарский В. А.,

Юрченко Р. А., 2013
© БГУ, 2013
 ВВЕДЕНИЕ
В настоящее время среди используемых в экспериментальных иссле-
дованиях инструментальных физико-химических методов анализа наи-
более мощными и многоцелевыми являются спектральные методы, та-
кие как: инфракрасная спектроскопия, спектроскопия комбинационного
рассеяния, спектроскопия в ультрафиолетовой области спектра, спект-
роскопия ядерного магнитного резонанса и масс-спектрометрия, актив-
но применяемые в химии, биологии, медицине, экологии, при контроле
технологических процессов, в криминалистике и других областях науч-
ных исследований.
Масс-спектрометрия – один из самых востребованных методов физи-
ко-химического анализа, который предполагает перевод молекул исследу-
емых компонентов анализируемого образца в ионизированное состояние,
последующее эффективное разделение образовавшихся как положитель-
ных, так и отрицательных ионов и их надежную регистрацию.
Масс-спектрометрия появилась в 1901 г., когда немецкий физик
В. Кауфман создал первый прототип параболического масс-спектро-
графа, использованного им для изучения «катодных лучей». В 1913 г.
Дж. Томсон впервые спектрально зарегистрировал изотопы неона, а в
1918 г. А. Демпстер сконструировал первый магнитный масс-спектрометр
с источниками для электронной и термической ионизации.
На протяжении последующих 50 лет масс-спектроскопия остава-
лась прерогативой исключительно физиков и физико-химиков, кото-
рые успешно применяли ее для измерения таких характеристик атомов и
молекул, как энергия ионизации, прочность связей в молекуле, точные
массы атомов элементов, природная распространенность нуклидов хи-
мических элементов, и только после 1950 г. этот метод стал применять-
ся для идентификации достаточно сложных по своей структуре органи-
ческих соединений по набору характеристических фрагментных ионов.

3
 Знание классических химических реакций с участием органических
соединений и привлечение теории устойчивости органических ионов по-
зволили приписать отдельным фрагментам конкретные структуры.
Традиционная органическая масс-спектроскопия первоначально ис-
пользовалась для решения двух задач:
1) идентификации веществ;
2) изучения особенностей фрагментации ионизированных молекул
органических соединений в газовой фазе в ионном источнике.
Возможности классической органической масс-спектроскопии зна-
чительно расширились с появлением метода хромато-масс-спектрального
анализа, а последовавшее за ним соединение масс-спектрометра с жид-
костным хроматографом еще в большей степени расширило круг изуча-
емых соединений. Оснащение же масс-спектрометра одновременно не-
сколькими анализаторами привело к тому, что сегодня этот метод можно
использовать при исследовании практически любых соединений самых
разнообразных структур.
В этой связи один из первых масс-спектроскопистов Ф. Мак-Лаф-
ферти в шутку отметил, что если химическую задачу нельзя решить с по-
мощью масс-спектрометрии, то ее вообще нельзя решить.
Признанием важности масс-спектрометрии для развития современ-
ной науки стало присуждение в 2002 г. Нобелевской премии Д. Фенну и
К. Танаке за разработку методов ионизации биоорганических молекул,
молекулярные массы которых составляют миллионы дальтон.
Из главных достоинств масс-спектрометрии необходимо отметить
высокую чувствительность, экспрессность, информативность, надеж-
ность, меньшую зависимость, а в ряде случаев и полное отсутствие не-
обходимости в использовании веществ-стандартов.
Кроме отмеченного, масс-спектрометрия имеет явное преимущес-
тво перед другими физико-химическими методами анализа, поскольку
оперирует с простейшими характеристиками исследуемых соединений:
массой молекулы и ее основных фрагментов, а также с отношением ко-
личеств этих фрагментов.
Для получения достоверного масс-спектра индивидуального соеди-
нения оказывается достаточным 10‾ 9–10‾ 10 г вещества даже при приме-
нении простейшего по своему устройству масс-спектрометра.
При необходимости выполнения операции простого детектирования
только одного конкретного соединения в сложной по составу анализируе-
мой смеси порог обнаружения может быть снижен до величин 10‾ 12–10‾ 14 г.
Использование современного оборудования и методов ионизации ис-
следуемых соединений часто позволяет увеличить чувствительность ме-
тода еще на несколько порядков.

4
 При применении даже простейших приемов для ионизации индиви-
дуального соединения и последующего получения обычного масс-спектра
необходимо затратить всего 1–2 мин, а время анализа сложной по соста-
ву смеси соединений в режиме хромато-масс-спектрометрии определяет-
ся исключительно численным значением времени удерживания каждого
конкретного компонента анализируемой смеси в процессе их хромато­
графического разделения.
Компьютер, являющийся неотъемлемой составной частью современ-
ного хромато-масс-спектрометрического комплекса, позволяет обеспе-
чить управление процессом проведения анализа, надежную регистрацию
получаемых данных, их сбор и обработку с необходимой для конкретно-
го анализа скоростью, а также получить полную информацию обо всех
компонентах анализируемой смеси.
Поскольку масс-спектр – это реальная характеристика конкретно-
го соединения, отражающая его структурные особенности, надежность
использования метода масс-спектрального анализа для идентификации
этого соединения оказывается очень высокой.
Следовательно, располагая только 1 мкл раствора анализируемой
пробы, при использовании приемов газовой или высокоэффективной
жидкостной хроматографии с масс-селективным детектированием и при
наличии соответствующих компьютерных баз данных можно получить
абсолютно исчерпывающую информацию о ее качественном и количе-
ственном составе.
Ни один другой из применяемых сегодня методов анализа не сочета-
ет в себе такой же универсальности, экспрессности и информативности.
 Глава 1
ОСНОВЫ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОГО
АНАЛИЗА

1.1. ФИЗИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ИОНИЗАЦИИ МОЛЕКУЛ

И РАСПАДА МОЛЕКУЛЯРНЫХ ИОНОВ

После ввода исследуемого вещества в масс-спектрометр необходи-

мо обязательно осуществить процесс ионизации молекул анализируе-
мого образца.
Ионизация – это процесс превращения нейтрального атома или мо-
лекулы в заряженную частицу. В результате этого процесса при удалении
электрона будет иметь место образование положительных ионов, а при
присоединении электрона – образование отрицательных ионов.
Первичный ион, образующийся при удалении (или присоединении)
электрона, имеет массу, равную молекулярной массе исследуемого сое-
динения, и называется первичным молекулярным ионом с нечетным числом
электронов, или катион-радикалом:
М → М+• + е−.
К процессам ионизации следует относить и процессы, связанные с
отщеплением гидрид-иона (Н-) или присоединением катиона (протон,
катион металла, органический или неорганический катион) либо анио-
на. В этом случае массы первичных ионов отличаются от молекулярной
массы исследуемых веществ на массу отщепляемой или присоединяемой
заряженной частицы.
Образовавшиеся в процессе ионизации первичные молекулярные
ионы в зависимости от природы исследуемого соединения, способа
ионизации и величины избытка внутренней энергии находятся в разно-
образных возбужденных состояниях, что обусловливает разное время их
жизни и степень вероятности процессов их дальнейшего превращения,
приводящих к образованию фрагментных ионов.

6
 Процессы фрагментации протекают обычно за время 10‾13 с. При этом
первоначальные (родоначальные, исходные) ионы в результате простых раз-
рывов связей превращаются в осколочные (фрагментные) ионы с более низ-
кой величиной внутренней энергии. Если образовавшиеся осколочные
ионы обладают все еще достаточным избытком внутренней энергии, то и
они претерпевают дальнейший распад. Этот процесс будет продолжаться
до тех пор, пока не будет израсходован весь избыток внутренней энергии,
присущий исходному иону.
Процессы фрагментации характеризуются значительным числом по-
следовательных и конкурирующих направлений распада, вероятность
которых определяется природой молекулы и элементов, ее составляю-
щих, энергией разрывающихся связей, внутренней энергией образую-
щихся ионов, стабильностью ионов и отделяемых нейтральных частиц,
а также величиной временного интервала между образованием ионов и
их детектированием.
Вероятность образования того или иного типа ионов во многом опре-
деляется используемым способом ионизации молекул исследуемых сое-
динений.
Сегодня существует уже несколько десятков способов ионизации, из
которых наиболее часто на практике используются следующие:
zzэлектронный удар (ионизация электронами);
  
zzфотоионизация;
  
zzхимическая ионизация;
  
zzионизация полем;
  
zzдесорбция полем;
  
zzбомбардировка быстрыми атомами или ионами;
  
zzдесорбция плазмой;
  
zzионизация термораспылением;
  
zzионизация электрораспылением;
  
zzматрично-активированная лазерная десорбция/ионизация;
  
zzионизация при десорбции лазером без матрицы;
  
zzтермическая ионизация;
  
zzионизация в искровом источнике;
  
zzионизация в источнике с индуктивно-связанной плазмой.
  
При ионизации молекул исследуемых соединений электронами обра-
зуются положительные и отрицательные ионы. Для регистрации ионов
обеих полярностей в современных масс-спектрометрах предусмотрены
устройства, обеспечивающие изменение полюсов ионно-оптической си-
стемы, масс-анализаторов и детекторов.
При ионизации молекул исследуемых соединений электронами, элек-
трораспылением, если из них удаляется два и более электронов, образу-
ются многозарядные ионы. Это характерно для молекул ароматических со-

7
единений, а также соединений с разделенными центрами, способными
локализовать заряд.
При ионизации молекул электронами, фотоионизации, ионизации или
десорбции полем образуются молекулярные ионы: М+•– при удалении элек-
трона, М‾• – при захвате электрона.
Если образовавшиеся молекулярные ионы имеют время жизни порядка
10‾5 с, что достаточно для преодоления ими расстояния от ионного источ-
ника до детектора, то они могут быть зарегистрированы в масс-спектре.
Наибольшей стабильностью обладают молекулярные катион-радикалы,
образующиеся при ионизации электронами соединений, имеющих сопря-
женные π-электронные или ароматические системы связей.
Масс-спектры химической ионизации с регистрацией положительных
ионов содержат пики протонированных молекул [М + Н]+.
Для масс-спектров химической ионизации с регистрацией отрицатель-
ных ионов характерны псевдомолекулярные ионы [М – Н]-•.
В масс-спектрах химической ионизации могут регистрироваться кла-
стерные ионы или аддукты. Например, если в качестве газа-реагента ис-
пользуется метан, то в плазме газа-реагента присутствуют ионы [С2Н5]+,
[С3Н5]+, которые с молекулами анализируемого соединения ВН могут
образовывать кластерные ионы:
ВН + [С2Н5]+ → [BHС2Н5]+,
ВН + [С3Н5]+ → [BHС3Н5]+.
К кластерным ионам можно отнести и ионы [M + Met]+ (Met – металл
или неорганический катион), регистрируемые при десорбции полем, бомбар-
дировке быстрыми атомами, а также ионы [M + Hal]+, образующиеся при
химической ионизации в присутствии газа-реагента, содержащего галоген.
Для ионизации электрораспылением характерны многозарядные про-
тонированные молекулы [М + nH]n+.
При распаде молекулярных, псевдомолекулярных и кластерных ионов
образуются осколочные ионы. Распад молекулярных катион-радикалов мо-
жет протекать в результате гомолитических и гетеролитических разрывов
связи, а также в результате перегруппировочных процессов.
Образование метастабильных ионов обусловлено следующими про-
цессами.
Все ионы, образующиеся непосредственно в ионизационной камере
в результате ускорения приобретают одинаковую кинетическую энергию.
Если образовавшиеся ионы имеют достаточное время жизни для того,
чтобы успеть долететь до детектора (для секторных приборов с магнит-
ными и электростатическими анализаторами это время составляет около

8
10‾6 с), то они фиксируются в регистрируемом спектре в виде нормаль-
ных симметричных пиков.
Очевидно, что ионы с меньшим временем жизни по пути из ионного
источника до детектора могут распадаться. Особый интерес представляет
распад таких ионов в области между источником ионизации и анализато-
ром масс, которая носит название бесполевого пространства, поскольку
в этой области на образовавшиеся ионы не действуют никакие электро-
магнитные поля. При распаде ионов в этой области каждый новый ион
будет иметь меньшую кинетическую энергию и по этой причине ока-
жется расфокусированным по сравнению с другими ионами, имеющи-
ми одинаковую энергию. Такие ионы регистрируются в спектре в виде
размытых (диффузных) пиков и являются следствием образования ме-
тастабильных ионов.
Регистрация в спектре пиков нуклидных ионов объясняется тем, что в
природе многие элементы существуют в виде нескольких нуклидов, т. е.
полинуклидные, а мононуклидными являются только малое число элементов.
Полинуклидные элементы условно делятся на две группы:
zzэлементы с большим содержанием одного из нуклидов;
  
zzэлементы, содержащие соизмеримые количества двух и более ну-
  
клидов.
У элементов с большим содержанием одного из нуклидов в спектре
наряду с интенсивным пиком молекулярного иона М всегда присутству-
ют малоинтенсивные пики ионов М + 1 и даже М + 2. Их появление свя-
зано с присутствием в природе наряду с основным нуклидом 12С, нукли-
да 13С (распространенность которого равна 1,08 %).
По мере увеличения содержания атомов углерода в исследуемой мо-
лекуле, вероятность появления в ней одного, двух и даже трех атомов 13С
возрастает.
Именно по этой причине для исследуемого соединения с 10 атомами
углерода в молекуле соотношение интенсивностей пиков М, М + 1, М + 2
и М + 3 составляет 100 : 10 : 0,45 : 0,01.

1.2. ТЕОРЕТИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ ПРОЦЕССОВ

ОБРАЗОВАНИЯ И РАСПАДА МОЛЕКУЛЯРНЫХ ИОНОВ

Существует ряд более или менее строгих теоретических подходов к

описанию процессов образования и распада молекулярных ионов. Од-
нако на сегодня ни один из них не может достаточно точно предсказать
массовые числа и интенсивности пиков всех ионов в масс-спектре даже
достаточно простых органических соединений.

9
 Практически любой процесс образования заряженной частицы об-
условлен передачей ей дополнительной внутренней энергии. В зависи-
мости от используемого способа ионизации образующиеся молекулярные
ионы могут характеризоваться величиной избыточной энергии в диапа-
зоне от 0 до 20 эВ. Учитывая, что 1 эВ = 96,48 кДж, наиболее «горячие»
ионы имеют энергию порядка 2000 кДж, которая значительно превыша-
ет энергию таких же реакционных частиц, образующихся в растворах.
Предположим, что молекулярный ион исследуемого соединения ABXY
может распадаться или с разрывом центральной связи B – X, или претер-
певать перегруппировку с образованием химической связи между ранее
не связанными атомами A и Y в соответствии с уравнениями:
AY+• + B – X ← ABXY+• → AB+ + XY•.
Будем считать, что возможное распределение образовавшихся моле-
кулярных ионов по энергиям характеризуется вероятностной функцией
Р – Е, приведенной на рис. 1.

Рис. 1. Вероятностная функция распределения образовавшихся

молекулярных ионов по энергиям:
ЭИ – величина энергии ионизации; 1 – область энергий молекулярных
ионов ABXY+•; 2 – область энергий стабильных ионов m*; 3 – область энергий
молекулярных ионов AY+•; 4 – область энергий молекулярных ионов АВ+

Эта кривая в определенной степени похожа на фотоэлектронный

спектр поглощения молекулы исследуемого соединения.
Если частицы, обладающие дополнительной внутренней энергией,
находятся в растворе, то в результате реализации частых столкновений
очень быстро происходит усреднение их энергии.
В ионизационной камере масс-спектрометра все будет определяться
используемым методом ионизации. Так, при химической ионизации су-
ществующее достаточно высокое давление в источнике ионизации при-
10
водит к многочисленным столкновениям ионов, радикалов и молекул и
можно предполагать определенное усреднение их внутренней энергии.
При ионизации электронами условия высокого вакуума препятству-
ют столкновениям частиц, и судьба образовавшегося иона будет зависеть
исключительно от той внутренней энергии, которую он приобрел в ре-
зультате процесса ионизации. Именно величина этой энергии и опреде-
ляет то, что только одна часть всех ионов достигнет детектора без фраг-
ментации, другая часть – в виде каких-либо перегруппировочных ионов,
третья – в виде каких-либо осколочных ионов, четвертая – в виде фраг-
ментных ионов второго поколения и т. д.
В этой связи следует учитывать, что поскольку речь идет о мономо-
лекулярных реакциях изолированных частиц, живущих очень короткое
время, набор и количество продуктов реакции определяется, прежде все-
го, кинетическими, а не термодинамическими факторами.
В 1952 г. практически одновременно возникли две теории, направ-
ленные на интерпретацию мономолекулярных реакций в газовой фазе в
условиях глубокого вакуума.
Первая из них была названа квазиравновесной теорией (КРТ) и основы-
валась на том, что приобретенная избыточная энергия равномерно рас-
пределяется по всем связям в молекуле, а точнее по всем энергетическим
состояниям молекулярного иона за время, равное 10‾12 с. Таким образом,
квазиравновесие между этими состояниями достигается уже до того, как
начнется процесс распада молекулярного иона.
В этом случае вероятности путей фрагментации определяются только
энергией и структурой каждого конкретного иона, а не способом иони-
зации, механизмом образования или структурой предшественника (для
осколочных ионов).
Возможные исключения, как правило, наблюдаются с простейшими
молекулами в случаях сильно отличающихся друг от друга по энергии воз-
бужденных электронных состояний и очень быстрыми процессами рас-
пада, характеризующимися константами скоростей k > 1011.
Вторая теория, близкая к квазиравновесной и отличающаяся тем,
что описывает процессы, происходящие в нейтральных молекулах, но-
сит название РРКМ, по фамилиям ее авторов – О. Райса, Х. Рампсберга,
Л. Касселя и Р. Маркуса.
Основной задачей этих теорий является расчет скоростей распада ча-
стиц с разрывом любой химической связи в зависимости от количества
избыточной внутренней энергии.
Обе эти теории базируются на следующих четырех допущениях:
zzвращательные, колебательные, электронные и поступательные дви-
  
жения частиц независимы друг от друга;

11
 zzдвижения ядер могут быть описаны уравнениями классической ме-
  
ханики, хотя и с учетом квантово-механических коррекций;
zzвсе микросостояния частиц равновероятны, т. е. избыточная энер-
  
гия равновероятно распределяется по всем степеням свободы иона;
zzсуществует энергетическая граничная поверхность, разделяющая
  
родительские и дочерние ионы. Эта поверхность может пересекаться
только в одном направлении, т. е. для любого родительского иона дости-
жение этого переходного состояния означает необратимый распад с обра-
зованием продуктов.
Так, например, при ионизации электронами сам процесс потери элек-
трона нейтральной молекулой протекает за время 10‾ 16 с и расстояния
между ядрами при этом не изменяются. Колебания ядер могут начаться
только через 10‾ 12–10‾ 13 с.
В возбужденном состоянии ионы находятся не более 10‾ 8 с и в течение
этого времени могут оказаться на любых уровнях всех возможных возбу-
жденных состояний – вращательных, колебательных, электронных. За
это время в результате протекания излучательных или безызлучательных
процессов ион из возбужденного состояния либо переходит в основное
электронное состояние, либо распадается.
Время нахождения иона в источнике ионизации составляет 10‾ 6 с,
следовательно, около 99 % всего этого времени ион будет находиться в
основном электронном состоянии.
Вероятность какой-либо трансформации молекулярного иона зави-
сит от величины его внутренней энергии и связана с величиной констан-
ты скорости k каждого конкретного процесса.
Возможный характер изменения логарифмов констант скоростей раз-
личных превращений молекулярного иона ABXY+• от величины его вну-
тренней энергии приведен на рис. 2.
AB

AY

Рис. 2. Изменение величины логарифма константы скорости превращения

молекулярного иона от величины его внутренней энергии:
1 – для превращения М+• → AB+; 2 – для превращения М+• → AY+•

12
 Молекулярные ионы, энергия которых ниже критической энергии
для самой низкоэнергетической реакции распада Ео, регистрируются в
виде М+•.
Предположим, что молекулярный ион соединения ABXY может рас-
падаться или с разрывом центральной связи B – X, или претерпевать пе-
регруппировку с образованием химической связи между ранее не связан-
ными атомами A и Y в соответствии с уравнениями:
AY+• + B – X ← ABXY+• → AB+ + XY•.
Если энергия иона М+• меньше энергии иона AY+•, то ион стабилен
и регистрируется как М+•.
Обозначим через Е1/2(AY+•) такую энергию, при которой ровно одна
половина количества ионов М+• распадается с образованием AY+•, а дру-
гая половина остается в виде М+•.
Точно таким же образом Е1/2(АВ+) будет соответствовать энергии, при
которой половина М+• распадается с образованием AY+•, а половина –
с образованием АВ+.
Следовательно, для случая, представленного на рис. 1, 2, все молеку-
лярные ионы с энергией выше Е1/2(АВ+) будут распадаться с образовани-
ем АВ+, так как в этой точке скорость образования АВ+ становится выше
скорости образования AY+•.
Получается, что формально площади под кривыми на рис. 1 с обо-
значениями М+•, AY+•, АВ+ соответствуют начальным долям токов этих
ионов в регистрируемом полном ионном токе.
Для вычисления же реальной интенсивности соответствующих пи-
ков в масс-спектре следует обязательно учитывать вторичные процессы
распада этих первичных ионов.
При изменении внутренней энергии молекулярного иона М+• изме-
няется и характер функции вероятностного распределения образовав-
шихся молекулярных ионов по энергиям Р – Е, и вид регистрируемого
масс-спектра, поскольку некоторые реакции будут частично или полно-
стью подавляться более эффективными для данной энергии реакциями.
Именно изменением характера функции распределения Р – Е объясня-
ется изменение регистрируемого масс-спектра при снижении энергии
ионизирующих электронов.
Один из возможных вариантов записи масс-спектрометрической ин-
формации в графической форме представлен на рис. 3.
Пусть молекулярный ион ABXY+• распадается в соответствии с ранее
приведенной схемой или с простым разрывом связи с образованием иона
АВ+, или с перегруппировкой, приводящей к образованию иона AY+•.

13
 Вертикальное сечение графических зависимостей, приведенных на
рис. 3, позволяет оценить изменения интенсивностей пиков в регистри-
руемом масс-спектре при каждом конкретном значении энергии моле-
кулярного иона М+•.

AB

AY

Рис. 3. Зависимость интенсивности пиков ионов в спектре от величины вну-

тренней энергии молекулярного иона М+•

Следует отметить, что предложенные строгие математизированные

теории не применимы к реальным органическим молекулам, поскольку
за исключением простейших молекул все другие случаи требуют очень
больших временных затрат даже при использовании современного ком-
пьютерного оборудования.
Кроме этого, значительные ошибки могут быть вызваны незнанием
реальных структур ни родительских ионов, ни дочерних ионов, ни пере-
ходного состояния.
Распределение энергии по связям в исследуемой молекуле также не
очевидно.
По вышеперечисленным причинам самым большим успехом этих
строгих физических теорий на сегодня можно считать расчеты спектров
легких алканов (пропан, бутан), являющихся простейшими молекулами
с одним типом химических связей между атомами.
Существует, однако, и упрощенный подход для полуколичественно-
го описания процессов фрагментации сложных органических молекул,
основанный на использовании для расчета численных значений констант
скоростей реакций распада следующего уравнения:
N −1
 E − E0 
k = ν  ,
 E 
14
где k – константа скорости; v – частотный фактор; Е – избыток внутрен-
ней энергии; Е0 – критическая энергия конкретной реакции; N – число
осцилляторов.
Частотный фактор обратно пропорционален мере стерических за-
труднений в активированном комплексе (переходном состоянии) и фак-
тически является численной характеристикой изменения энтропии в
процессе, и для простого разрыва связи он принимается равным ее ко-
лебательной частоте. Для перегруппировочного процесса требуется абсо-
лютно конкретное расположение атомов в пространстве, что приводит к
уменьшению величины частотного фактора.
Число осцилляторов в молекуле, содержащей n атомов, рассчитыва-
ется из соотношения
N = 3n – 6.
При этом следует учитывать, что на практике не все осцилляторы рав-
ноценны и величина константы скорости реакции распада завышается.
По этой причине число осцилляторов обычно уменьшается в три раза.
При использовании этой упрощенной теории для расчета интенсив-
ностей фрагментных ионов в регистрируемом масс-спектре не следует
исключать возможности протекания вторичных процессов распада этих
ионов при наличии у них достаточной внутренней энергии, а также и те
обстоятельства, что интенсивность пика иона в спектре зависит как от
скорости его образования, так и от скорости его распада.

1.3. ПРИНЦИПИАЛЬНАЯ БЛОК-СХЕМА

МАСС-СПЕКТРОМЕТРА

Принципиальная блок-схема масс-спектрометра приведена на рис. 4

и включает специальные системы и устройства, последовательно обеспе-
чивающие выполнение всех необходимых операций анализа, такие как:
система ввода анализируемой пробы;
zz
  
система ионизации исследуемых соединений анализируемой пробы;
zz
  
анализатор масс – устройство для разделения образовавшихся
zz
  
ионов – компонентов пробы – на индивидуальные зоны;
детектор ионов – система регистрации индивидуальных зон ионов –
zz
  
компонентов пробы;
система обработки полученных данных по разделению индивиду-
zz
  
альных зон ионов – компонентов пробы – и их регистрации;
система представления результатов анализа в виде таблицы и (или)
zz
  
спектра.

15
 Рис. 4. Принципиальная блок-схема масс-спектрометра

В соответствии с особенностями их устройства и функционирования

существующие масс-спектрометры принято характеризовать следующи-
ми основными показателями:
zzтипом применяемого метода ионизации;
  
zzтипом используемого анализатора масс;
  
zzколичеством используемых анализаторов одного или нескольких
  
типов;
zzвеличиной разрешающей способности;
  
zzчувствительностью, которая зависит от метода ионизации и типа
  
используемого детектирующего устройства;
zzдиапазоном определяемых масс.
  
Результаты масс-спектрального анализа могут регистрироваться в
виде зависимости, отражающей изменение величины полного ионно-
го тока от времени при различных скоростях съемки, и как масс-спектр.
При регистрации результатов анализа в координатах, отражающих
изменение величины полного ионного тока от времени, форма получае-
мой графической зависимости, приведенной на рис. 5, аналогична фор-
ме классической хроматограммы.
При графическом изображении результатов анализа в виде масс-спек-
тра, по оси абсцисс откладывается величина отношения массы иона к его
заряду, а по оси ординат – их интенсивности, т. е. относительное количе-
ство ионов данного вида.
На рис. 6 приведен масс-спектр, регистрируемый для этилбензола при
его ионизации электронами.
Величину интенсивности принято выражать или в процентах по
отношению к полному ионному току (суммарной интенсивности всех
ионов в спектре), или в процентах к величине интенсивности макси-
мального иона.
В качестве единицы массы могут быть использованы:
zzатомные единицы массы (а. е. м.);
  
zzдальтоны (Да).
  
1 а. е. м. = 1 Да ≈ 1,6605402 • 10‾27 кг.

16
 ,

10 спектров/с 250 спектров/с

Рис. 5. Форма сигнала додекана на хроматограмме,
регистрируемая по полному ионному току при различных скоростях съемки

Mr = 106

Рис. 6. Масс-спектр этилбензола

Необходимо различать следующие понятия:

номинальная молекулярная масса – масса, рассчитанная суммиро-
zz
  
ванием целочисленных атомных масс наиболее распространенных ну-
клидов элементов;
мононуклидная молекулярная масса – масса, рассчитанная сум-
zz
  
мированием точных атомных масс наиболее распространенных нукли-
дов элементов;
средняя молекулярная масса – масса, рассчитанная суммировани-
zz
  
ем усредненных атомных масс элементов.

17
 1.4. СИСТЕМЫ ВВОДА АНАЛИЗИРУЕМЫХ ПРОБ

Системы ввода необходимы для подачи достаточного количества

образца в ионный источник таким образом, чтобы его состав максималь-
но точно отвечал составу анализируемого образца.
В классической масс-спектрометрии процедура ввода анализируе-
мого образца уже сама является самостоятельной и достаточно сложной
технической задачей.
Объясняется это тем, что анализируемая проба находится, как пра-
вило, при атмосферном давлении, а для устранения возможности не-
желательных химических реакций между молекулами или ионами ис-
следуемых соединений во внутреннем объеме источника ионизации
масс-спектрометра в нем постоянно поддерживается высокий вакуум
порядка 10‾ 6–10‾ 7 кПа.
В качестве одной из первых систем ввода анализируемых проб газов,
жидкостей, твердых веществ, имеющих достаточно высокое давление
пара при комнатной температуре или при температурах до 350 оС, слу-
жил баллон напуска, объемом 50–2000 см3, внутренняя поверхность ко-
торого выполнена из стекла или металла. Баллон напуска прогревается
до необходимой температуры, и анализируемые вещества находятся во
внутреннем объеме баллона в газообразном состоянии при давлении по-
рядка 10‾ 2–10‾ 3 кПа.
Процесс переноса анализируемого образца из баллона напуска в си-
стему ионизации, названный процессом молекулярного натекания, осу-
ществляется через молекулярный натекатель, представляющий собой зо-
лотую или стальную фольгу толщиной 0,25 мм, в которой содержится
несколько отверстий диаметром 0,005–0,02 мм.
Вместо такого соединительного устройства могут использоваться ка-
пилляры малого внутреннего диаметра, а также мембраны, проницаемые
только для компонентов анализируемого образца.
Основное требование к этой системе ввода пробы заключается в том,
чтобы скорость напуска паров анализируемого образца в источник иони-
зации оставалась постоянной в течение всего времени анализа, а хими-
ческий состав образца не изменялся в результате протекания каких-либо
термических или каталитических превращений. В случае анализа много-
компонентных смесей величина парциального давления каждого из ин-
дивидуальных компонентов должна быть независимой от присутствия
других компонентов.
Устройства такого рода использовались на начальных этапах разви-
тия масс-спектрометрии, когда применялись малоэффективные вакуум-
ные системы, а скорость развертки масс-спектра была невысокой и со-
ставляла минуты.

18
 Основной недостаток этой системы ввода анализируемой пробы –
необходимость осуществления перевода вещества в газовую фазу в усло-
виях недостаточно глубокого вакуума, что оказывается весьма проблема-
тичным для большого числа исследуемых образцов.
В настоящее время при исследовании твердых, а также жидких ве-
ществ с очень низким давлением пара, общепринятым является способ
прямого ввода анализируемой пробы в устройство ионизации.
Принципиальное устройство одного из возможных типов системы
прямого ввода изображено на рис. 7.
Анализируемый образец в виде пылинки или раствора в подходящем
растворителе помещается в маленькую ампулу, изготовленную из стекла,
кварца, алюминия или платины, которая укрепляется на конце штока.

Рис. 7. Устройство системы прямого ввода пробы:

1 – металлический шток; 2 – кварцевая (стеклянная) ампула;
3 – исследуемый образец; 4 – уплотняющая гайка; 5 – запорно-проходной кран;
6 – отверстие в кране; 7 – ручка крана; 8 – вентиль

Чтобы не нарушить вакуум в источнике ионов, в конструкции систе-

мы ввода пробы специально предусмотрены шлюзовая камера и проход-
ной кран. После введения штока с пробой в шлюзовую камеру, происхо-
дит процесс ее вакуумирования до величины давления 10‾2–10‾3 кПа. Если
анализируемая проба вводится в виде раствора, то используемый раство-
ритель испаряется.
Затем проходной кран поворачивают и открывают отверстие для пе-
ремещения ампулы с образцом уже непосредственно в источник ионов.
При таком способе ввода пробы процесс испарения исследуемого
образца осуществляется в условиях глубокого вакуума в самом источни-
ке ионов.
При необходимости малолетучий анализируемый образец может
быть нагрет по специальной температурной программе до 1000 °С, а

19
для прямого ввода высоколетучих веществ разработан вариант, пред-
усматривающий предварительное охлаждение исследуемого образца
жидким азотом.
Осуществление процесса абсолютно полного испарения всей анали-
зируемой пробы позволяет измерить достоверное содержание в ней каж-
дого из компонентов и наряду с качественным анализом проводить ко-
личественные определения.
При прямом вводе пробы следует обращать особое внимание не толь-
ко на величину температуры испарителя, но и на величину температуры
самого источника ионизации. Если исследуемое вещество труднолетучее,
а испаритель прямого ввода перегрет, то при низкой температуре источ-
ника ионизации компоненты пробы могут конденсироваться на стенках
источника ионов, что приводит к его быстрому загрязнению.
Кроме этого, последовательно повторяющиеся процессы испарения
и конденсации приводят к повышению влияния образующихся продук-
тов термической деструкции компонентов анализируемой пробы на про-
цесс ионизации и, как следствие, к искажению масс-спектра.
Возможность осуществления на практике операций программируе-
мого нагревания анализируемого образца в вакууме позволяет одновре-
менно решить следующие задачи:
zzперевести в газовую фазу широкий круг органических соединений
  
включая и низколетучие;
zzподобрать оптимальную температуру для регистрации наиболее ка-
  
чественного масс-спектра;
zzосуществить анализ смеси соединений с разной степенью летучести.
  
Реализуемое на практике фракционное испарение позволяет в неко-
торых случаях провести достаточно быстрый качественный и количест-
венный анализ смеси без ее предварительного разделения.
Важной характеристикой прямого ввода пробы является существен-
ное уменьшение количества образца, необходимого для получения масс-
спектра. Избыточное количество образца может привести к искажению
масс-спектра из-за возможного протекания ионно-молекулярных реак-
ций и вызвать быстрое загрязнение источника ионов. Предпочтительным
является нанесение вещества на шток из раствора и ввод штока с анали-
зируемым образцом в источник ионов только после операции предвари-
тельного испарения растворителя.
В настоящее время достаточно перспективным является мембранный
ввод анализируемых проб, особенно при анализе летучих органических
веществ, находящихся в полярных растворителях.

20
 Один из типов устройства прямого мембранного ввода приведен на
рис. 8.
4

1 3
5

Рис. 8. Схема устройства прямого мембранного ввода анализируемой пробы в

источник ионизации:
1 – подача раствора анализируемой пробы в воде к мембране;
2 – отвод анализируемого раствора от мембраны; 3 – обогреватель;
4 – мембрана; 5 – масс-спектрометр

Мембрана закрепляется на конце штока, который может либо разме-

щаться вне источника ионов, либо находиться непосредственно в источ-
нике ионов.
Раствор анализируемого вещества в воде подается по трубке к той сто-
роне мембраны, которая не контактирует с источником ионов. При этом
другая сторона мембраны находится в области высокого вакуума уже вну-
три ионного источника. Существующий перепад давлений на разных сто-
ронах мембраны обеспечивает прохождение неполярных молекул через
мембрану в ионный источник, тогда как полярные молекулы раствори-
теля через мембрану не проникают.
При этом анализируемые соединения должны быть достаточно ле-
тучими, чтобы легко испаряться на вакуумируемой стороне мембраны.
Для изготовления мембран используются органические материалы,
способные пропускать в источник ионов масс-спектрометра только те сое-
динения, которые или достаточно хорошо растворяются в материале мем-
браны, или достаточно хорошо адсорбируются мембраной и характеризу-
ются при этом высокими коэффициентами диффузии внутри мембраны.
Примером являются силиконовые эластомеры и полифосфазены,
обладающие высокой проницаемостью для неполярных веществ и пол-
ностью непроницаемы для полярных соединений. Такая мембрана не
пропускает воду, неорганические газы, газообразные соединения и соли.
Величина предела обнаружения широкого круга органических сое-
динений с молекулярной массой менее 300 Да составляет несколько на-
нограммов в дм3.

21
 1.5. ОСНОВНЫЕ СПОСОБЫ ИОНИЗАЦИИ
МОЛЕКУЛ ИССЛЕДУЕМЫХ СОЕДИНЕНИЙ

1.5.1. Электронный удар, электронная ионизация,

или ионизация электронами
Среди различных методов ионизации исследуемых соединений осо-
бое положение занимает электронный удар (электронная ионизация, или
ионизация электронами). Исторически это был первый метод, использо-
ванный на практике для ионизации органических соединений в 1918 г.
Он же остается наиболее распространенным и на сегодня.
Основными достоинствами данного метода ионизации являются
надежность и универсальность. Кроме того, в существующих в настоящее
время компьютерных библиотеках масс-спектров (Wiley, NIST, AIPSIN)
используются спектры, регистрируемые при применении в качестве ме-
тода ионизации именно электронного удара.
Название метода «электронный удар» несколько не соответствует дей-
ствительности. Реального удара электронов по молекуле исследуемого
соединения не происходит. Электрон, пролетая вблизи молекулы иссле-
дуемого соединения, возбуждает ее электронную оболочку, и электроны
молекулы могут перемещаться на более высокие электронные орбитали,
а могут и вообще покинуть молекулу.
Принципиальная схема устройства для ионизации электронами при-
ведена на рис. 9.

Рис. 9. Схема источника ионизации электронами

22
 Пучок электронов генерируется в источнике ионизации масс-спек-
трометра раскаленным катодом (филаментом), изготовленным из ре-
ния или вольфрама и конструктивно выполненным, как правило, в виде
проволоки или пластины. Этот пучок электронов, разностью потенциа-
лов величиной порядка 12–70, ускоряется по направлению к аноду, в об-
ласть ионизации.
Перпендикулярно пучку электронов из системы напуска в эту же об-
ласть ионизации подаются молекулы анализируемого образца, находя-
щиеся в парообразном состоянии.
Молекулы исследуемых соединений, находясь в источнике иониза-
ции в газообразном состоянии при давлении 10‾5–10‾6 мм рт. ст., возбуж­
даются электронами и ионизируются. Образующиеся положительные
ионы вытягиваются электрическим полем из зоны ионизации и форми-
руются в пучок с силой тока 10‾7–10‾14 А, который обычно ускоряется до
энергии 1–10 кэВ и затем направляется в масс-анализатор.
В таких условиях исключается возможное взаимодействие образовав-
шихся ионов с молекулами исследуемых соединений и, следовательно,
исключается расфокусировка пучка ионов, а также возможность проте-
кания мешающих анализу ионно-молекулярных реакций.
Низкое давление в источнике ионизации дополнительно позволяет
обеспечить более продолжительную эксплуатацию филамента, который
при повышенном давлении обычно быстро выходит из строя.
Источник ионизации для предотвращения конденсации образца на
его поверхностях, как правило, термостатируется в диапазоне темпера-
тур 200–250 °С.
Существующие источники ионизации подразделяются на источники
закрытого и открытого типов.
В источниках закрытого типа (источники Нира) фокусировка элек-
тронных и ионных пучков осуществляется с помощью системы щелей.
Область источника, где непосредственно происходит ионизация, может
быть заключена в специальный корпус – камеру ионизации, в которую
анализируемый образец в газообразном состоянии поступает по подво-
дящим трубкам, а щели в корпусе служат для ввода электронного пучка
и вывода пучка образовавшихся ионов.
В источнике открытого типа область ионизации не ограждена стен-
ками и вместо фокусировки с помощью щелей используется электроста-
тическая фокусировка электронных и ионных пучков, которая на пра-
ктике является более стабильной и простой.
В источнике ионизации под действием ионизирующих электронов
молекулы исследуемых соединений могут претерпевать следующие воз-
можные типы превращений:

23
 А–В + е‾ → [ A–B ]• + e‾ (возбуждение)
А–В + е‾ → [ A–B ]+ + 2e‾ (ионизация)
А–В + е‾ → [ A–B ]+n + (n+1) e‾ (многократная ионизация)
А–В + е‾ → [А]+ + [B]‾ + e‾ (образование ионной пары)
А–В + е‾ → [А]+ + B + e‾ (диссоциативная ионизация)
А–В + е‾ → [ A–B ] ‾ (захват электрона)
Вероятность протекания того или иного из приведенных выше про-
цессов напрямую зависит от величины энергии ионизирующих электро-
нов, которая выражается в электронвольтах и равна произведению заряда
электрона на величину разности потенциалов между катодом и анодом.
Сам процесс взаимодействия электрона с молекулой исследуемого
соединения происходит, как правило, за время 10‾17 с. В результате этого
взаимодействия молекула приобретает энергию, которая одновременно
с ионизацией дополнительно вызывает ее вращательное, колебательное
и электронное возбуждение.
Все существующие теории масс-спектрометрического распада мо-
лекул исследуемых соединений и подходы к интерпретации получаемых
масс-спектров базируются в основном на первоначальном образовании,
полученном в результате протекания процесса электронной ионизации,
так называемом молекулярном катион-радикале.
Формально процесс ионизации можно представить следующим урав-
нением:
М + е‾ → М+• + 2е‾.
В результате этого процесса и образуется молекулярный ион (М+•).
Этот молекулярный ион носит также название – нечетноэлектронный
ион, или катион-радикал.
Для того чтобы исследуемая молекула потеряла свой электрон, необхо-
дима такая величина энергии ионизирующих частиц, которая будет выше
какого-то определенного критического значения. Эта энергия является ха-
рактеристичной для каждого индивидуального соединения и называется
энергией ионизации (ЭИ). Поскольку каждая из молекулярных или атомных
орбиталей в исследуемой молекуле имеет свою собственную энергию, то
каждая молекула имеет несколько значений энергий ионизации.
В масс-спектрометрии под энергией ионизации, как правило, подра-
зумевается первый потенциал ионизации, т. е. энергия, соответствующая
высшей занятой молекулярной орбитали.
Величина энергии ионизации для большинства органических сое-
динений чаще всего находится в диапазоне 6–12 В. Следовательно, если
энергия электронов, излучаемых катодом, ниже требуемых величин,
ионизация молекул анализируемого образца невозможна, и масс-спектр
не будет получен.

24
 Эффективность процесса ионизации молекул исследуемых соедине-
ний, наблюдаемая на практике, оказывается очень низкой. Как правило,
фактически ионизируется примерно одна из десяти тысяч молекул иссле-
дуемого образца. Более 99,99 % молекул исследуемых соединений оста-
ются неионизированными и откачиваются из внутреннего объема источ-
ника ионизации вакуумными насосами.
Этот факт позволяет еще раз подчеркнуть реализуемую на практике
уникальную чувствительность масс-спектрометрии, свидетельствующую
о том, что для получения масс-спектра исследуемого соединения доста-
точны всего лишь его нано- или пикограммовые количества.
Степень вероятности протекания процесса ионизации изменяется
при переходе от одного исследуемого вещества к другому. Эта характе-
ристика для каждого исследуемого соединения имеет свой количествен-
ный показатель, называемый сечением ионизации.
Если энергия ионизации достаточно низкая и лишь незначительно
превышает потенциал ионизации молекул исследуемого соединения,
масс-спектр содержит, в основном, пики молекулярных ионов. Если же
энергия ионизирующих электронов значительно превышает потенциал
ионизации молекул исследуемого соединения, то эти молекулы получают
при ионизации некоторую избыточную энергию (обычно это 2–3 В), ко-
торая может либо высвободиться путем испускания фотона, либо перейти
в энергию колебательного движения. В результате этого может происхо-
дить разрыв межатомных связей в молекуле и будет иметь место образо-
вание осколочных ионов, т. е. протекает процесс фрагментации молекулы.
Минимальная энергия ионизирующих электронов, при которой в
масс-спектре помимо молекулярного будет регистрироваться и осколоч-
ный ион, называется энергией появления данного иона. Чем выше энер-
гия ионизирующих электронов, тем большее число направлений распа-
да М+• реализуется, причем если избыточная энергия образовавшегося
осколочного иона остается достаточно высокой, то могут идти и вторич-
ные процессы его распада.
В результате фрагментации происходит распад молекулярного иона
на две частицы, одна из которых – ион с меньшей массой (осколочный
ион), вторая – радикал или нейтральный фрагмент:
М+•→[М – N]+• + N;
М+•→ [М – Х]+ + Х•.
Незаряженные радикалы Х• и нейтральные частицы N детектором
не регистрируются.
Схема образования фрагментных ионов при ионизации электронами
молекулы анизола представлена на рис. 10.

25
 Рис. 10. Схема образования фрагментных ионов при ионизации
электронами молекулы анизола
Регистрируемый при этом масс-спектр представлен на рис. 11.
В приведенном примере пик молекулярного иона является в масс-
спектре самым интенсивным, что свидетельствует о высокой устойчиво-
сти образующегося катион-радикала.

Mr = 108

Рис. 11. Масс-спектр анизола при его ионизации электронами

26
 По мере увеличения склонности молекулярного иона к фрагмента-
ции его интенсивность в масс-спектре относительно осколочных ионов
будет падать и крайним случаем является полное отсутствие молекуляр-
ного пика в масс-спектре.
Масс-спектр циклического эфира 18-краун-6, самым тяжелым ионом
в котором является частица с массой 177 а. е. м. [(С2Н4)4О4Н]+, приве-
ден на рис. 12.
I

Mr = 264

Рис. 12. Масс-спектр циклического эфира 18-краун-6

В подобных случаях в масс-спектре отсутствует достоверная инфор-

мация относительно реальной молекулярной массы исследуемого соеди-
нения, что существенно затрудняет его идентификацию.
Поскольку пучок электронов не является монохроматичным, причем
разброс по энергиям, как правило, очень велик и может достигать 5 эВ,
это приводит к тому, что условия взаимодействия молекул исследуемого

27
образца с низкоэнергетическими электронами оказываются не стабиль-
ными, соответственно не стабилен и регистрируемый масс-спектр.
На практике для ионизации обычно используется либо близпорого-
вый интервал энергии ионизации (8–15 эВ), либо энергии ионизации
порядка 30–70 эВ. Как правило, при понижении энергии электронов от-
носительная интенсивность пиков молекулярных ионов увеличивается,
а интенсивность пиков осколочных ионов уменьшается.
Масс-спектры пропанола-1 (Мr = 60), регистрируемые при энергиях
ионизирующих электронов 70 эВ, 20 эВ, 14 эВ и 11 эВ, приведены на рис. 13.

Рис. 13. Масс-спектры пропанола-1 (Мr = 60), регистрируемые

при различных энергиях ионизирующих электронов

28
 Однако следует учитывать, что эффективность ионизации при высо-
ких энергиях электронов на несколько порядков больше, чем в близпо-
роговой области.
Исследование зависимости величины ионного тока от величины
энергии ионизирующих электронов свидетельствует о том, что полный
ионный ток достигает максимума лишь при энергиях электронов около
50 эВ (рис. 14).

Рис. 14. Зависимость величины ионного тока

от энергии ионизирующих электронов

Наряду с однозарядными в процессе ионизации образуются двух- и

более зарядные ионы. Количество многозарядных ионов существенно
меньше, чем однозарядных, и зависит, прежде всего, от структуры моле-
кул образца, а также от условий эксперимента. Например, повышенным
выходом многозарядных ионов характеризуются полициклические аро-
матические углеводороды.
В некоторых случаях, когда хотят увеличить интенсивность пика М+•,
снимают спектр, используя ионизирующие электроны с энергией 12–
20 эВ. Следует подчеркнуть, что в этом случае возрастает только относи-
тельная интенсивность пика М+• и пиков перегруппировочных ионов по
отношению к интенсивности пиков осколочных ионов, тогда как абсо-
лютная интенсивность всех пиков в спектре падает.
Кроме того, происходит потеря определенной части информации, так
как многие направления фрагментации в таких условиях не реализуют-
ся. Установлено, что при уменьшении энергии ионизирующих электро-
нов уменьшается число и интенсивность пиков в спектре, хотя доля мо-
лекулярного иона возрастает.

29
 Существует важный вывод, о котором следует всегда помнить: если
пик молекулярного иона отсутствует в масс-спектре, полученном при энер-
гии ионизирующих электронов 70 эВ, его не будет и при меньшей энергии
электронов.
В этом случае следует говорить о нестабильности молекулярного иона
данного соединения. Установлено, что значительное число органических
соединений характеризуется нестабильными молекулярными ионами в
условиях электронного удара. Это один из существенных недостатков
данного метода ионизации.
Наряду с положительными ионами в условиях электронного удара
образуются и отрицательные ионы (молекулярные анион-радикалы). К со-
жалению, качество спектров отрицательных ионов в этом случае остав-
ляет желать лучшего. В частности, доминирующий пик в спектре зача-
стую обусловлен малоинформативным ионом (Cl‾, F‾, CN‾). Кроме того,
выход отрицательных ионов значительно меньше, чем положительных.
Тем не менее информация, заключенная в масс-спектрах отрицательных
ионов, может служить хорошим дополнением к информации, получен-
ной по спектрам положительных ионов.
Качество и информативность спектров отрицательных ионов можно
повысить при использовании электронов с малыми (тепловыми) энерги-
ями. Такой метод называется методом резонансного захвата электрона и
заключается в ассоциации электрона одной из молекулярных орбиталей
молекулы анализируемого образца.
Как правило, отрицательные ионы образуются в нескольких резонанс-
ных областях с энергиями электронов 0–10 эВ. Эти области могут характе-
ризоваться разными выходами ионов и разными направлениями фрагмен-
тации молекулярных анион-радикалов. Наличие нескольких резонансных
областей придает масс-спектру дополнительное измерение, поскольку одно
и то же химическое соединение характеризуется несколькими масс-спект-
рами. Этот факт открывает хорошие перспективы по масс-спектрометри-
ческой идентификации структурно близких соединений.
Масс-спектры положительных ионов, получаемые в условиях иони-
зации электронами, являются очень информативными для исследования
структуры органических соединений. К настоящему времени такие масс-
спектры измерены для очень большого числа соединений и представле-
ны в форме баз данных, позволяющих по любым пикам, фрагментам мо-
лекул идентифицировать анализируемое вещество.
Ионизация электронами используется для исследования веществ с
молекулярными массами до 1,2 кДа, которые испаряются без разложения.

30
 Важнейшими достоинствами метода ионизации электронами явля-
ются:
zzпростота экспериментальных установок;
  
zzвысокая воспроизводимость масс-спектров;
  
zzприменимость к большинству летучих веществ;
  
zzбольшой объем структурной информации, заключенной в масс-
  
спектрах;
zzналичие объемных высокоэффективных баз масс-спектров, при-
  
годных для быстрой идентификации веществ;
zzвысокая чувствительность;
  
zzвозможность измерения высокоточных масс ионов.
  
Тем не менее для анализа термолабильных, высокомолекулярных и
труднолетучих соединений этот метод ионизации не пригоден.
В спектрах электронного удара многих таких веществ пик М+• име-
ет низкую интенсивность либо вообще отсутствует. Широкий разброс по
энергиям ионизирующих электронов не позволяет с достаточной точно-
стью определять характеристики молекул и ионов (энергии появления и
ионизации). Работа над устранением основных недостатков ионизации
электронами привела к созданию представительного ряда альтернатив-
ных методов ионизации.

1.5.2. Ионизация фотонами

На практике получить монохроматический пучок фотонов значи-

тельно проще, чем пучок электронов. Поэтому метод фотоионизации
позволяет устранить разброс ионизирующих частиц по энергиям, кото-
рый присущ электронному удару. В коммерческих приборах используют-
ся монохроматические пучки фотонов с разбросом энергий в диапазоне
0,01–0,02 эВ, в то время как при ионизации электронами этот разброс
энергий составляет до 5 эВ.
Энергия фотонов обратно пропорциональна длине их волны. Так,
энергии в 1 эВ соответствует длина волны 12395 Å.
Основными источниками фотонов для масс-спектральных исследо-
ваний являются благородные газы.
Так, например, характеристики гелиевого и аргонового источников
следующие:
тип Не 1: Не → Не• → Не + hv, Е = 21,22 эВ λ = 584,3 Å;
•
тип Ar 1: Ar → Ar → Ar + hv, E = 11,62 эВ λ = 1066,7 Å.

31
 Поскольку энергии фотонов, излучаемых различными инертными
газами в условиях тлеющего разряда, лежат в диапазоне 1–40 эВ, это по-
зволяет ионизировать практически любые органические соединения.
Конструктивно устройство источника ионов, применяемого для фо-
тоионизации, практически такое же, как и для ионизации электронами.
Однако принципиальной особенностью этого устройства является от-
сутствие в нем катода, вместо которого используется источник УФ-све-
та (газоразрядная лампа, чаще всего водородная), дающий интенсивное
излучение света с энергией фотонов в диапазоне 7–13 эВ.
Сама газоразрядная лампа, используемая для получения фотонов,
располагается вне камеры ионизации. Фотоны проникают в камеру
ионизации через окошко, изготовленное из фторида лития.
Поскольку энергия фотонов обычно лежит в пределах ионизации ис-
следуемых органических молекул, регистрируемые масс-спектры похо-
жи на низковольтные масс-спектры ионизации электронами и содержат
преимущественно пики молекулярных ионов.
Существенным достоинством метода ионизации фотонами является
полная передача их энергии при взаимодействии излучения с молекула-
ми исследуемых соединений.
В настоящее время доля работ с использованием классической фото-
ионизации (за исключением процессов с применением лазера) невелика.
Это связано с экспериментальными сложностями, незначительной фраг-
ментацией молекулярных ионов, зависимостью фрагментации от энер-
гии фотонов, а также необходимостью переводить анализируемый обра-
зец в газовую фазу, как и в случае электронного удара.
В последнее время для осуществления процесса фотоионизации ста-
ли использовать лазерное излучение со строго фиксированной длиной
волны света.
Метод оказывается чрезвычайно полезным для установления энерге-
тических характеристик (потенциалы ионизации и появления) исследуе-
мых молекул, радикалов, ионов.
Чувствительность определений при использовании этого метода
ионизации довольно низка.
Разновидностью этого метода является фотохимическая ионизация при
атмосферном давлении, когда образование первичных ионов происходит
под воздействием фотонов УФ-света.
Принципиальная схема источника фотохимической ионизации при
атмосферном давлении приведена на рис. 15.

32
 -

hν

Капилляр

Рис. 15. Схема источника фотохимической ионизации

при атмосферном давлении

При использовании криптоновой лампы испаренный исследуемый

образец облучается фотонами с энергией до 10,6 эВ. Поскольку молеку-
лы большинства используемых в жидкостной хроматографии подвижных
растворителей имеют гораздо большие потенциалы ионизации, этот ме-
тод эффективен при проведении анализа веществ, потенциал ионизации
которых ниже 10,6 эВ.

1.5.3. Химическая ионизация

В 1966 г. М. Мансон и Ф. Филд описали новую технику получения

масс-спектра – химическую ионизацию, являющуюся в настоящее вре-
мя вторым по значимости методом ионизации.
Это «мягкий» метод ионизации. Поскольку избыточная энергия мо-
лекулярных ионов в этом случае не превышает 5 эВ, то, как следствие,
фрагментация оказывается весьма незначительной. Иногда спектр пред-
ставляет собой только пик молекулярного иона.
Таким образом, основное достоинство этого метода ионизации за-
ключается в его способности предоставлять информацию о молекуляр-
ной массе анализируемых соединений в тех случаях, когда электронный
удар не в состоянии этого сделать.
Принципиальная схема устройства для химической ионизации при-
ведена на рис. 16.

33
 Рис. 16. Схема источника химической ионизации:
1 – анализируемый образец; 2 – газ-реагент; 3 – нить накала; 4 – магниты;
5 – выталкивающий электрод; 6 – фокусирующие линзы;
7 – ускоряющие пластины; 8 – поток исследуемых ионов

Главным отличием ионного источника при химической ионизации

от источника ионизации электронами является более высокое давление
в источнике ионизации, достигающее до 0,1 кПа, которое создается за
счет присутствия в источнике ионизации так называемого газа-реаген-
та. В качестве такого газа-реагента может служить практически любое ле-
тучее вещество – гелий, вода, метан, аммиак, сероуглерод, бензол, эти-
лендиамин, изобутан.
Желательно, но не строго обязательно, чтобы этот газ-реагент был
способен образовывать при взаимодействии с электронами или в резуль-
тате протекания различных ионно-молекулярных реакций один или не-
сколько ионов с высокой реакционной способностью.
Само анализируемое соединение вносится в источник ионизации, как
и в случае электронного удара, в микроколичествах с парциальным дав-
лением на уровне 10‾6 кПа.
Процесс химической ионизации осуществляется в основном в резуль-
тате следующих ионно-молекулярных реакций:
zzсначала в источнике ионизации, содержащем используемый газ-ре-
  
агент, при ионизации электронами с энергией 70–200 эВ создается плаз-
ма с преобладанием в ее составе каких-либо первичных ионов, которые на-
зываются ионами-реагентами. Например, при использовании в качестве
газа-реагента метана в источнике ионизации возможно протекание прев-
ращений, приводящих к возникновению следующих ионов:
СН4 + е‾ → [CH4]+•, [CH3]+, [CH2]+•;

34
 при увеличении давления в источнике ионизации происходят столк-
zz
  
новения между первичными ионами и нейтральными молекулами газа-
реагента и могут образовываться следующие вторичные ионы:
[CH4]+• + СН4 → [CH5]+ + •CH3;
[CH3]+ + СН4 → [C2H5]+ + H2;
[CH2]+• + СН4 → [C2H4]+• + H2;
[CH2]+• + СН4 → [C2H3]+ + H2 + •H;
[C2H3]+ + СН4 → [C3H5]+ + H2.
При давлении 0,1 кПа плазма газа-реагента на 95 % состоит из ионов
[CH5]+ , [C2H5]+ и [C3H5]+. Именно эти частицы и являются основными
ионами-реагентами химической ионизации метаном.
Если в условиях электронного удара образующиеся ионы не претер-
певают столкновений с молекулами анализируемых соединений в свя-
зи с высоким вакуумом в источнике ионизации, то в случае химической
ионизации такие столкновения оказываются неизбежными.
Таким образом, при введении в плазму газа-реагента даже 0,1 % ис-
следуемого вещества уже могут протекать ионно-молекулярные реакции
с участием молекул исследуемого образца и вторичных ионов.
Так, например, в плазме газа-реагента метана, в которой присутст-
вуют ионы метония [CH5]+, являющиеся наиболее сильными донорами
протона, может происходить процесс переноса протона от вторичного
иона на молекулу исследуемого соединения, а также процесс отщепле-
ния гидрид-иона от молекулы исследуемого соединения и его перенос
на вторичный ион.
Эти процессы описываются следующими уравнениями:
BH + [CH5]+, [C2H5]+ + H+ → [BH2]+ + CH4, C2H4, H;
BH + [CH5]+, [C2H5]+ – H‾ → [B]+ + CH4, C2H5, H.
Образовавшиеся ионы [BH2]+ являются протонированными молекула-
ми и называются также псевдомолекулярными ионами. Ионы [B]+ получи-
ли название квазимолекулярных ионов.
Оба этих типа ионов могут претерпевать дальнейший распад в соот-
ветствии с уравнениями:
[BH2]+ → [B]+ + Н2;
[BH2]+ → [А]+ + С;
[B]+ → [А]+ + D.
Вероятность протонирования молекулы исследуемого соединения за-
висит от величины ее сродства к протону и сродства к протону использу-
емого газа-реагента. Установлено, что чем выше сродство к протону мо-
лекулы исследуемого соединения, тем больше вероятность протекания
реакции ее протонирования.

35
 При использовании в качестве газа-реагента изобутана ионом-реа-
гентом выступает трет-бутилкатион, который образуется при отщепле-
нии атома водорода от молекулярного иона.
Среди других достаточно часто используемых газов-реагентов мож-
но выделить воду и аммиак. Тогда в первом случае ионом-реагентом яв-
ляется Н3О+, а во втором – NH4+.
В качестве газа-реагента используется и водород, причем образова-
ние иона-реагента Н3+ было впервые описано А. Демпстером еще в 1916 г.
Хорошие результаты получены при использовании в качестве газа-ре-
агента диметилового эфира. Основным ионом-реагентом в этом случае
служит катион CH3ОCH2+, при взаимодействии которого с молекулой
анализируемого вещества возможно образование следующих трех продук-
тов: [M + CH3OCH2]+, [M + CH3OCH2CH2OH]+, [M + CH3OCH2CH2O]+.
Интенсивности пиков этих ионов зависят от структуры соединений,
включая тонкие стереохимические различия.
Химическая ионизация диметиловым эфиром позволяет различать
дизамещенные изомерные бензолы, определять длину цепочки поли-
этиленгликолей.
Триметилборат в качестве газа-реагента приводит к возникновению
реакционно способного иона-реагента (CH3O)2B+, с помощью которого
удается различать изомерные диолы и полиолы, получать структурную
информацию об амидах.
Полезный ион-реагент CH3OCH2CH2OCH2+ образуется при исполь-
зовании в качестве газа-реагента 2-метоксиэтанола. Хорошие результа-
ты получены при его использовании для анализа нуклеозидных антиби-
отиков.
Ионом-реагентом при использовании ацетофенона или его замещен-
ных аналогов служит ароил-катион. Его можно с успехом использовать
для анализа гидроксилсодержащих соединений (например, метаболитов).
Реакции между ионами-реагентами и молекулами анализируемого
образца можно разделить на следующих четыре типа: протонирования,
перезарядки, электрофильного присоединения, отрыва аниона.
Реакция протонирования исследуемого соединения М описывается
уравнением
M + BH+ → MH+ + B.
Способность или неспособность иона реагента ВН+ протонировать
молекулу образца легко установить при сравнении количественных ха-
рактеристик сродства к протону соединений В и М. Если сродство к про-
тону вещества М больше сродства к протону вещества В, идет реакция
протонирования М.

36
 Чем больше разность в величинах сродства к протону (СП) веществ
М и В, тем большей избыточной энергией будет обладать протонирован-
ный молекулярный ион МН+:
Е = СП(М) – СП(В).
Величины сродства к протону наиболее часто используемых газов-ре-
агентов лежат в диапазоне от 423 кДж/моль для водорода до 936 кДж/моль
для этилендиамина. Следовательно, при использовании водорода в ка-
честве газа-реагента уровень фрагментации будет максимальным, а при
использовании этилендиамина – минимальным.
Следует подчеркнуть, что в результате реакций этого типа образуют-
ся четноэлектронные ионы.
Для газов-реагентов, не содержащих доступных атомов водорода,
важнейшей альтернативой переносу протона становится перенос элек-
трона, т. е. процесс перезарядки.
Процесс перезарядки описывается следующим уравнением:
М + Х+• → М+• + Х.
Избыточная внутренняя энергия образующегося молекулярного иона
рассчитывается по уравнению
Е = ЭР(Х+•) – ЭИ(М),
где ЭР – энергия рекомбинации, а ЭИ – энергия ионизации.
Вновь, как и в случае протонирования, чем меньше разность между
этими двумя величинами в приведенном уравнении, тем меньшей избы-
точной энергией будет обладать молекулярный ион.
С учетом, что энергия ионизации большинства органических молекул
лежит в диапазоне 6–12 эВ, а энергии рекомбинации типичных газов-ре-
агентов – в диапазоне от 9,2 эВ (бензол) до 24,6 эВ (гелий), можно подо-
брать такой газ-реагент, чтобы образующийся молекулярный ион обла-
дал необходимой для каждого конкретного случая энергией.
Таким образом, реакция перезарядки позволяет получать нечетно­
электронные молекулярные ионы, аналогичные образующимся при элек-
тронном ударе, но уже с заданной внутренней энергией.
Реакция электрофильного присоединения описывается уравнением
M + X+ → MX+.
Так, если исследуемая молекула имеет достаточно высокую величи-
ну сродства к протону, она протонируется ионом аммония, если же она
является слабым основанием с низким сродством к протону, в результа-
те присоединения иона аммония возникает стабильный комплекс, при-
чем электроны для его образования предоставляются гетероатомами или
центрами ненасыщенности в молекуле.

37
 Наиболее наглядным примером этой реакции является образование
интенсивных пиков ионов [M+NH4]+ широким кругом органических со-
единений при использовании в качестве газа-реагента аммиака.
Аналогичные аддукты образуются и при использовании других га-
зов-реагентов: для ионизации метаном характерны ионы [M+C2H5]+ и
[M+C3H5]+, для ионизации монооксидом азота – ионы [M+NO]+.
Реакция отрыва аниона описывается уравнением
AB + X+ → AX + B+.
Этот процесс характерен для взаимодействия молекул, обладающих
низкой величиной сродства к протону, с протонирующими реагентами
или для реагентов перезарядки с образцами, для которых перенос заряда
является эндотермическим процессом.
Примером служит образование ионов [MH]+ при ионизации мета-
ном алифатических углеводородов.
Большинство ионов реагентов способно участвовать более чем в одной
из указанных реакций. Выше уже упоминался ион аммония. Аналогично
ион NO+ может вести себя и как реагент перезарядки, и как реагент от-
рыва аниона, и как электрофильная частица.
Иногда желаемый эффект достигается при использовании смеси га-
зов-реагентов. Так, применение влажного аргона приводит к образова-
нию ионов реагентов Ar+• и Н3О+. Первый вызывает перезарядку с по-
следующей интенсивной фрагментацией, а второй действует как мягкий
протонирующий агент, генерируя стабильные ионы МН+.
Химическая ионизация обычно используется для получения интен-
сивных пиков молекулярных ионов.
Масс-спектры три-н-бутиламина (Mr = 185), записанные в условиях
электронной и химической ионизации, приведены на рис. 17.

Химическая ионизация, газ-реагент – метан

Рис. 17. Масс-спектры три-н-бутиламина (Мr = 185), полученные в условиях

ионизации электронами и химической ионизации

38
 Недостатком метода химической ионизации является, как и в случае
электронного удара, необходимость перевода образца в газовую фазу, что
не позволяет анализировать малолетучие и термолабильные соединения.
Для получения структурной информации в условиях химической
ионизации очень удобно использовать тандемную масс-спектрометрию
с активацией соударением.
Еще одно направление использования химической ионизации – это
изучение H/D-обмена. Таким образом можно сосчитать число активных
атомов водорода в молекулах анализируемых образцов. В качестве газов-
реагентов используются СН3ОD, D2O, ND3. Помимо подсчета активных
атомов водорода метод иногда позволяет различать изомеры, а также ге-
нерировать в газовой фазе изотопные аналоги, меченные по определен-
ным положениям.
Очень эффективными ионами-реагентами оказались катионы метал-
лов. Впервые об использовании для масс-спектрометрического анализа
катионов щелочных металлов было заявлено в 1976 г. Следует упомянуть
использование ионов железа Fe+ для установления положения кратных
связей в алкенах, алкинах и кислотах, а также катионов меди Сu+ для ана-
лиза карбонилсодержащих соединений.
Наиболее важные достоинства метода химической ионизации:
zzналичие пиков протонированных молекул, пригодных для опреде-
  
ления молекулярной массы;
zzпростота спектров;
  
zzмалое число пиков осколочных ионов;
  
zzдостаточно высокая чувствительность.
  
Недостатки метода химической ионизации:
zzсильная зависимость спектров от природы образца и газа-реагента;
  
zzприменимость только к летучим и термически устойчивым веществам;
  
zzограниченная информативность получаемых масс-спектров;
  
zzотсутствие универсальных баз данных масс-спектров.
  
Химическая ионизация отрицательных ионов. В стандартных условиях
химической ионизации в ионизационной камере присутствуют низко­
энергетичные тепловые электроны, а из молекулы газа-реагента помимо
положительных ионов образуются также и отрицательные ионы.
Молекулы исследуемого образца могут захватывать электроны с обра-
зованием анион-радикалов (резонансный захват электронов) или всту-
пать во взаимодействие с ионами-реагентами.
При взаимодействии молекул исследуемых соединений с ионами-реа-
гентами могут протекать следующие типы ионно-молекулярных реакций:
zzдепротонирования;
  
zzперезарядки;
  
zzнуклеофильного присоединения;
  
zzнуклеофильного замещения.
  

39
 Реакции депротонирования описываются уравнением
A‾ + BH → AH + B.
Этот процесс, как и для положительных ионов, контролируется ве-
личинами сродства к протону. Если величина сродства к протону иона
реагента А- выше, чем иона В-, реакция оказывается экзотермичной, и
процесс идет.
Величины сродства к протону наиболее часто используемых ионов-ре-
агентов лежат в диапазоне от 1689 кДж/моль для NH2‾ до 1395 кДж/моль
для Cl‾. Сильное основание NH2‾ будет депротонировать практически лю-
бое органическое соединение, тогда как мягкий ион Cl‾ реагирует с весь-
ма ограниченным кругом субстратов.
Процесс перезарядки может протекать в том случае, если величина
сродства к электрону анализируемой молекулы выше, чем молекулы га-
за-реагента:
B + A‾• → B‾• + A.
Например, молекула кислорода характеризуется низкой величиной
сродства к электрону. Реагируя с органическими субстратами, ион О2‾•
приводит к образованию в результате перезарядки молекулярных ани-
он-радикалов.
Перезарядка может вести и к потере характеристических ионов. В
частности, если в ионном источнике в результате какого-либо процесса
образуются атомы фтора, обладающие очень высоким сродством к элек-
трону, они могут, реагируя с анион-радикалами образца, превращать по-
следние в нейтральные частицы.
Реакции нуклеофильного присоединения будут иметь место в тех случа-
ях, когда анионы-реагенты с низкой величиной сродства к протону мо-
гут реагировать с молекулами исследуемых соединений с образованием
стабильных аддуктов:
B + A‾ → AB‾.
Один из наиболее активных в этом отношении ионов-реагентов Сl‾.
В результате нуклеофильного присоединения он образует комплексы с
широким кругом органических молекул.
Реакции нуклеофильного замещения могут наблюдаться по той причине,
что любое основание является одновременно нуклеофилом, т. е. наряду с
атакой на атом водорода возможна атака и на атом углерода:
AB + C‾ → BC + A‾.
Наиболее активно вступают в реакцию нуклефильного замещения
ионы ОН‾ и О2‾•. Последний столь активный нуклеофил, что может вы-
теснять атом водорода из ароматических соединений.

40
 Пульсирующая химическая ионизация. Этот метод позволяет одновре-
менно получать масс-спектры химической ионизации положительных и
отрицательных ионов. Два вида спектров удачно дополняют друг друга,
что важно и для целей структурного определения, и для количественных
расчетов, поскольку пределы обнаружения для разных соединений зави-
сят от заряда ионов.
Метод успешно используется на квадрупольных приборах, поскольку
анализатор этого типа легко пропускает и катионы, и анионы. Для маг-
нитных секторных приборов такой вариант неприемлем.
В данном режиме полярность вытягивающего потенциала переклю-
чается со скоростью примерно 10 000 раз в секунду, поэтому ионы сгруп-
пированы в «пакеты» с чередованием положительных и отрицательных.
После прохождения анализатора положительные ионы направляются на
один детектор, а отрицательные — на другой. Происходит регистрация
сразу двух типов спектров.
Важным моментом является природа газа-реагента, который должен
«работать» в обоих режимах. Например, хорошим вариантом является
смесь метана с монооксидом азота, в которой роль основных ионов-реа-
гентов выполняют CH5+ и ОН‾.
Десорбционная (прямая) химическая ионизация. Скорости испарения
и деструкции органических веществ имеют разные температурные за-
висимости. Установлено, что при низких температурах предпочтитель-
на деструкция исследуемых соединений, а при высоких температурах –
их испарение.
Типичный характер изменения логарифмов скоростей процессов ис-
парения и деструкции органических соединений от температуры приве-
ден на рис. 18.

Рис. 18. Зависимость скоростей испарения и деструкции

от температуры образца

41
 Следовательно, испарение труднолетучего вещества можно осущест-
вить при его быстром нагревании до такой температуры, при которой ис-
парение осуществляется наиболее эффективно.
В настоящее время для прямой химической ионизации используют
обогреваемые электрические эмиттеры. Очень хорошо зарекомендова-
ли себя эмиттеры полевой ионизации, но поскольку они сложны в изго-
товлении, обычно используется вольфрамовая, рениевая или платиновая
проволока диаметром 50–200 мкм.
Для увеличения выхода молекулярных ионов проволока покрывает-
ся нанесенным с помощью электрофореза полиимидным слоем. После
снятия спектра для повторного использования эмиттера желательна его
термическая обработка. Как правило, эмиттеры с полиимидным слоем
могут быть использованы для исследования не более чем 10 образцов.
Метод десорбционной химической ионизации используется для ана-
лиза термолабильных и нелетучих соединений: cахаров, пептидов, солей,
кислот. Масс-спектр представляет собой интенсивный пик молекуляр-
ного иона и ряд пиков фрагментных ионов, часть из которых может быть
обусловлена не фрагментацией молекулярного иона, а термодеструкци-
ей исходной молекулы.
Зачастую десорбционную химическую ионизацию используют для
увеличения выхода молекулярных ионов. В этом случае полезно несколь-
ко повысить давление в ионизационной камере за счет газа-реагента. Не-
которое снижение абсолютной чувствительности компенсируется опре-
деленным подавлением фрагментации.
Очень важную роль играет газ-реагент. Так, фрагментация аскор-
биновой кислоты при использовании метана интенсивнее, чем при ис-
пользовании аммиака (ионы [M + NH4]+). Еще лучшие результаты полу-
чаются при применении анионов Сl‾. В этом случае спектр представлен
исключительно пиками иона [М + Сl]‾. Таким образом, для снижения
фрагментации предпочтительно использовать «мягкие» ионы-реагенты
(NH4+, Cl‾, ОН‾).
Для каждого вещества существует оптимальная температура реги-
страции спектра. По этой причине сначала анализируемое неизвестное
соединение нагревают со скоростью 10 град./мин, и затем находят опти-
мальное значение температуры испарения. При повторном определении
резко нагревают исследуемое вещество до этой температуры.
Существенным недостатком метода является быстрое ухудшение ка-
чества масс-спектра во времени. Это связано с процессами термодеструк-
ции, которые все-таки идут с заметной скоростью. Некоторого улучше-
ния можно добиться при быстрой развертке спектра.

42
 Химическая ионизация при атмосферном давлении. Экспериментально
этот способ ионизации позволяет ионизировать молекулы исследуемых
соединений вне вакуумной системы масс-спектрометра при атмосфер-
ном давлении в среде азота или аргона.
Принципиальная схема источника ионизации приведена на рис. 19.

Рис. 19. Схема источника химической ионизации при атмосферном давлении

В качестве источника ионизирующего излучения используется или

коронный разряд, или источник β-частиц 62Ni.
Образующиеся ионы через узкую диафрагму поступают в аналитиче-
скую часть масс-спектрометра.
В общем случае масс-спектры, полученные этим методом, близки к
спектрам, регистрируемым при химической ионизации.
Другой вариант этого метода заключается в том, что ионизации под-
вергается распыленный раствор анализируемого образца, выходящего из
хроматографической колонки жидкостного хроматографа.
При этом исследуемый раствор через тонкую трубку подается в
устройство, где он распыляется до туманообразного состояния, смеши-
вается с воздухом или азотом и с большой скоростью поступает в высо-
котемпературную зону, в которой происходит испарение используемого
для хроматографического разделения подвижного растворителя, а анали-
зируемые вещества переходят в газообразное состояние.
Образовавшийся газ поступает в область ионизации, причем пары
растворителя выступают в качестве газа-реагента. По механизму химиче-
ской ионизации происходит взаимодействие образующихся ионов с мо-
лекулами исследуемого образца, что приводит к их протонированию или

43
отщеплению от них протона. В этих условиях возможен и захват электро-
нов с образованием отрицательных ионов.
На выходе из источника ионов расположен ряд последовательных
сепараторов с узкими входными отверстиями. Здесь происходит откачка
легких молекул для снижения избыточного давления. В результате в ана-
лизатор, работающий в условиях глубокого вакуума, поступают в основ-
ном ионы анализируемого вещества.
Метод хорошо зарекомендовал себя для анализа небольших, как по-
лярных, так и неполярных, молекул (< 1200 Да).
Для анализа веществ с более высоким потенциалом ионизации ис-
пользуются специальные фотоионизируемые присадки, которые пере-
дают заряд молекулам исследуемых соединений.
Основным достоинством метода является высокая чувствительность.

1.5.4. Полевая ионизация

Еще один метод получения интенсивного пика молекулярного иона –

полевая ионизация.
Ионный источник состоит из двух главных элементов – анода
(эмиттера) и катода, разность потенциалов между которыми составля-
ет порядка 10 кВ. Эмиттер представляет собой рениевую или вольфра-
мовую проволоку, поверхность которой покрыта большим количест-
вом микроигл из пиролитического углерода с радиусом кривизны около
10‾5 см (рис. 20).
В простейшем случае эмиттером могут служить острие иглы или лез-
вие бритвы. Оба электрода располагаются настолько близко друг к другу,
что достигается градиент потенциала порядка 108 В/см.
Молекула образца, находящаяся в газовой фазе, оказываясь в непо-
средственной близости от эмиттера, подвергается воздействию этого поля.
Основным механизмом ионизации
служит туннельный переход электро-
на из молекулы органического соедине-
ния на эмиттер. Энергия, переносимая
в результате такого процесса, составля-
ет доли электронвольта, т. е. избыточ-
ная энергия молекулярного иона M+•
значительно ниже, чем даже в услови-
ях химической ионизации. Кроме того,
другие электроны ионизирующейся мо-
лекулы не возбуждаются, и M+• оказы-
Рис. 20. Проволочный эмиттер,
вается в основном (невозбужденном)
покрытый слоем микроигл
электронном состоянии.

44
 Высокий положительный потенциал эмиттера резко выталкивает
образовавшийся катион из источника. Среднее время присутствия M+•
в источнике полевой ионизации составляет 10‾12 с, тогда как в случае
электронного удара это время составляет 10‾6 с. В результате этого даже
возможные низкоэнергетические процессы фрагментации не успевают
реализоваться в полной мере, и спектр зачастую представляет собой един-
ственный пик, принадлежащий молекулярному иону.
Полевая ионизация, являясь наиболее мягким методом, в то же вре-
мя не устраняет недостатка химической ионизации и электронного удара,
связанного с необходимостью перевода образца в газовую фазу. Для его
преодоления была предложена модификация метода, получившая широ-
кое признание и названная полевой десорбцией.

1.5.5. Полевая десорбция

Единственное, но принципиальное отличие полевой десорбции от полевой
ионизации – это нанесение раствора образца непосредственно на эмиттер,
который также изготавливается из рениевой или вольфрамовой проволо-
ки, покрытой большим числом микроигл из пиролитического углерода.
Образец наносится на эмиттер путем упаривания анализируемого рас-
твора. После испарения растворителя эмиттер помещается в источник
ионов. Эмиттер может подогреваться во время анализа. Благодаря вы-
сокому градиенту потенциала (107–108 В/см) на микроиглах в результате
туннельного перехода происходит ионизации молекул. В результате тун-
нелирования электрона из молекулы образца ион образуется непосред-
ственно в конденсированной фазе.
Поскольку энергия десорбции иона с поверхности одноименно заря-
женного эмиттера значительно ниже, чем энергия десорбции исходной
нейтральной молекулы, ион переходит в газовую фазу.
Принципиальная схема источника ионизации при полевой десорб-
ции приведена на рис. 21.

Рис. 21. Принципиальная схема источника ионизации полевой десорбцией

45
 В отличие от полевой ионизации здесь образуются в основном четно­
электронные протонированные молекулярные ионы МН+. Добавка к
анализируемому образцу кислот или неорганических солей облегчает
процесс ионизации с образованием ионов МН+ и [М + катион]+. В этом
случае, поскольку ионы присутствуют уже в конденсированной фазе, для
их извлечения требуется меньший потенциал (около 10‾2 В/Å).
Определенные проблемы полевой десорбции (как и полевой иониза-
ции) связаны с изготовлением эмиттеров и нанесением на них образца.
Тонкие углеродные иглы обычно наносят на эмиттер пиролизом бензо-
нитрила в специальной камере. Длинные иглы требуют тщательного из-
готовления, а короткие затрудняют нанесение образца. Спектры часто
получаются неинтенсивными.
Для преодоления этого недостатка используется многократное ска-
нирование внутри узкого интервала масс с последующим интегрирова-
нием. В результате устраняется нестабильность спектра и улучшается от-
ношение сигнал / шум.
Следует отметить, что с увеличением разности потенциалов между
эмиттером и катодом может возрастать фрагментация молекул, что при-
водит к искажению результатов.
1.5.6. Плазменная десорбционная масс-спектрометрия
В основе метода десорбции плазмой лежит принцип сверхбыстрого
нагрева образца для предотвращения его разложения перед испарением
и ионизацией.
Анализируемое вещество помещают на никелевую или алюминизиро-
ванную нейлоновую фольгу, которую с обратной стороны облучают про-
дуктами самопроизвольного распада ядер 252Cf (например, 142Ва и 106Тс).
Многочисленные продукты деления изотопа 252Cf обладают энергия-
ми в сотни мегаэлектронвольт. Когда они проходят через металлическую
фольгу, на которую нанесен анализируемый образец, создается быстрый
локальный разогрев (до 10 000 К).
В результате наблюдается процесс, аналогичный десорбционной хи-
мической ионизации, при котором скорость десорбции (испарения) ор-
ганических молекул оказывается выше скорости их разложения.
Метод десорбции плазмой позволяет получать ионы, обусловленные
присоединением протона к молекуле либо отщепления от нее в резуль-
тате ионно-молекулярных реакций или образования ионных пар. Даль-
нейший распад образующихся ионов минимален.
Метод характеризуется очень высокой чувствительностью и позволяет
получать спектры полярных соединений. Этим методом можно опреде-
лять массы молекул около 104 – 105 Да. Однако в связи с низкими ионными
токами, он может использоваться только с времяпролетным анализато-
ром в импульсном режиме.

46
 Еще одним недостатком является необходимость работы с радиоак-
тивными продуктами распада. Эти ограничения не позволили плазмен-
ной десорбции успешно конкурировать с другими методами анализа по-
добных соединений.

1.5.7. Лазерная десорбционная масс-спектрометрия

Еще один метод анализа нелетучих больших молекул органических
соединений – это лазерная десорбция/ионизация.
В первых работах облучались чистые образцы, однако имея боль-
шие ограничения, этот метод был вытеснен методом десорбции/иониза-
ции лазером образцов, растворенных или диспергированных в матрице.
В простейшем случае разбавленный раствор исследуемого образца сме-
шивается с разбавленным раствором матрицы, причем массовое соотно-
шение образца и матрицы варьируется в диапазоне от 1 : 100 до 1 : 50 000.
Матрицу обычно подбирают по ее способности поглощать лазерную
энергию, которая затем передается молекулам исследуемого образца, не
разлагая их.
Индивидуальные соединения, использующиеся как наиболее распро-
страненные матрицы, приведены на рис. 22.

,
,

Рис. 22. Наиболее распространенные матрицы

(с указанием общепринятых сокращений названий)

47
 Матрица и образец перед смешением растворяются в совместимых
растворителях. При этом важным является подбор оптимальных соотно-
шений образца и матрицы и выполнение следующих требований, предъ-
являемых к растворителю и матрице:
zzрастворитель должен хорошо распределять молекулы образца, что-
  
бы исключить возможность взаимодействий между ними;
zzматрица должна сохранять молекулы образца в изолированном со-
  
стоянии;
zzматрица должна поглощать энергию, подающуюся на образец
  
(обычно это излучение с длиной волны 337 нм);
zzматрица должна обеспечить расход энергии лазера на перевод ана-
  
лизируемых молекул в газовую фазу;
zzматрица должна обеспечивать протекание процесса ионизации мо-
  
лекул исследуемых соединений.
Один из методов приготовления образцов предполагает растворение
анализируемого образца в подходящем растворителе и последующее сме-
шение полученного раствора с более концентрированным раствором ма-
трицы в этом же растворителе. Полученная смесь наносится на мишень,
и растворитель испаряется.
По другому варианту на мишень сначала наносится раствор матрицы
и высушивается. Затем на полученную твердую поверхность наносится
раствор анализируемого образца и также высушивается.
В обоих случаях рекомендуется использовать распыление растворов
на мишень.
Принципиальная схема устройства источника ионизации для лазер-
ной десорбционной масс-спектроскопии приведена на рис. 23.
Мишень вводится в ионный источник масс-спектрометра и облуча-
ется импульсным лазером, азотным лазером с длиной волны излучения
337 нм или Nd : YAG-лазером с длинами волн изучения 254 или 266 нм.
Продолжительность импульса составляет менее 10 нс.
Если для ионизации используется УФ-лазер, молекулы исследуемо-
го образца становятся электронно-возбужденными и ионизируются. При
применении ИК-лазера происходит колебательное возбуждение, сопро-
вождающееся ионизацией. Все образующиеся ионы затем переносятся в
масс-анализатор.
Механизм ионизации молекул исследуемых соединений этим мето-
дом изучен еще не достаточно. Считается, что он во многом сродни де-
сорбционной химической ионизации и плазменной десорбции и связан
с испарением и ионизацией вещества в результате быстрого локально-
го нагрева, когда скорость десорбции превосходит скорость деструкции.

48
 Рис. 23. Схема устройства источника ионизации
для лазерной десорбционной масс-спектроскопии:
1 – шток; 2 – медный наконечник (мишень); 3 – анализируемый образец; 4 – лазер;
5 – световой импульс; 6 – система фокусировки и ускорения ионов;
7 – пучок ионов анализируемого образца

Исходят из того, что короткий световой импульс лазера поглощается

молекулами матрицы и разрушает ее кристаллическую структуру. Часть
молекул матрицы отрывается от поверхности и образует зону высокотем-
пературного суперплотного газа (зона шлейфа), в котором помимо мо-
лекул, ионов и ассоциатов матрицы присутствуют и молекулы исследуе-
мого соединения (рис. 24).

Рис. 24. Схема ионизации молекул исследуемых соединений

в условиях ионизации лазерной десорбцией при содействии матрицы

49
 В этих условиях, поскольку энергия лазера поглощается матрицей,
молекулы исследуемого образца оказываются в газовой фазе, в зоне шлей-
фа, практически без приращения внутренней энергии, т. е. с сохранени-
ем своей исходной структуры.
Установлено, что в процессе облучения лазером происходит присое-
динение протона или катиона металла к молекуле и образуются положи-
тельно заряженные ионы. Источником протонов служит сама матрица,
вернее, протон ее карбоксильной группы. Возможно также и отщепление
протона от молекулы исследуемого соединения, в результате чего обра-
зуются отрицательные ионы.
Метод высокочувствительный, экспрессный и прост в управлении
используемым оборудованием. Является «мягким», и ионизированные
молекулы почти не распадаются далее, в результате чего регистрируются
исключительно простые масс-спектры.
Неудобство заключается в том, что всякий раз необходимо подбирать
подходящую матрицу.
Основной недостаток, как и при плазменной десорбции, – необходимость
использования времяпролетных приборов, поскольку масс-спектрометры дру-
гих типов плохо сочетаются с импульсным лазером.

1.5.8. Бомбардировка быстрыми атомами.

Вторично-ионная масс-спектрометрия
Этот метод ионизации также использует принцип бомбардировки
образца энергетическими частицами.
Пучок ускоренных атомов (обычно благородные газы) направляет-
ся на раствор вещества, нанесенный на металлическую подложку, рас-
положенную на конце штока прямого ввода. Взаимодействуя с вещест-
вом, атомы создают интенсивный локальный разогрев, в результате чего
молекулы поверхностных слоев отрываются в виде плотного газа, содер-
жащего положительные и отрицательные ионы, а также нейтральные ча-
стицы, которые также могут ионизироваться непосредственно над по-
верхностью образца.
Принципиальная схема используемого для этого устройства приве-
дена на рис. 25.
Для получения пучка атомов применяется «атомная пушка». Снача-
ла получают ионы благородного газа, которые далее ускоряются потен-
циалом 6–8 кВ.
Разогнанные ионы взаимодействуют с атомами газа путем переноса
заряда. Этот процесс протекает без заметного изменения кинетической
энергии. Непрореагировавшие ионы отклоняются специальной линзой,

50
 Рис. 25. Схема устройства источника ионизации быстрыми атомами

а образовавшиеся в результате перезарядки ускоренные атомы с энергией

6–8 кэВ направляются под углом 60–70° на поверхность образца.
На выход ионов анализируемого образца существенно влияет масса
разогнанных частиц первичного пучка. Например, пучок атомов Хе эф-
фективнее, чем Аr и тем более Ne.
Если на шток нанесено сухое вещество, то через короткий промежу-
ток времени наблюдается резкое падение интенсивности пучка генери-
руемых ионов, так как разрушается поверхностный слой кристалличе-
ской решетки вещества.
По этой причине чаще всего используют растворенный образец. Диф-
фузия в жидкой матрице протекает достаточно быстро для того, чтобы
обеспечить постоянную концентрацию молекул образца на поверхно-
сти. В этом случае пучки ионов образца необходимой интенсивности мо-
гут генерироваться в течение длительного времени (20 и более минут).
В качестве растворителя (матрицы) может использоваться широкий
круг нелетучих соединений. Среди них наиболее распространен глице-
рин. Температурный диапазон работы с глицерином составляет от –20
до +40 °С при оптимальной температуре 25 °С. Вторым соединением по
частоте использования в качестве матрицы является м-нитробензило-
вый спирт.
Важно, чтобы образец был именно растворен в матрице. Если рав-
номерного растворения нет, качество спектров значительно ухудшается.
Помочь может добавление солюбилизаторов.
Метод бомбардировки быстрыми атомами – модификация вторич-
ноионной масс-спектрометрии, которая заключается в бомбардиров-

51
ке образца разогнанными ионами, например Cs+. Попытки анализиро-
вать органические соединения хотя и позволили получить спектры ряда
труднолетучих веществ, но не привели к серьезным успехам. Причина
заключалась в том, что анализу подвергалось сухое вещество, а быстрое
деформирование поверхности его кристаллической решетки приводило
к получению некачественных масс-спектров.
Когда после успешного применения бомбардировки быстрыми ато-
мами провели эксперименты по бомбардировке растворенного образца
ионами, спектры оказались не хуже, чем при бомбардировке атомами. В
частности, ионы Cs+ с энергией 6 кэВ и атомы Хе с энергией 8 кэВ по-
зволяют получать идентичные спектры.
Хотя важнейшим достоинством бомбардировки быстрыми атома-
ми является возможность получать масс-спектры соединений с массами
в несколько тысяч дальтон, это не мягкий метод ионизации типа поле-
вой десорбции. Бомбардировка образца быстрыми атомами обеспечива-
ет передачу молекулам энергии в широком диапазоне. В результате, на-
ряду с пиками молекулярных ионов, в спектре наблюдаются интенсивные
пики осколочных ионов, что позволяет в ряде случаев не прибегать к акти-
вации соударением для изучения фрагментации и структуры анализируе-
мых молекул.
В качестве иллюстрации на рис. 26 приведен масс-спектр аминофуль-
венальдимина.

m/z

Рис. 26. Масс-спектр аминофульвенальдимина

52
 Следует отметить принципиальное сходство спектров бомбардировки
быстрыми атомами и химической ионизации. Оба вида характеризуются
четноэлектронными ионами типа [М + Н]+ и [М – Н]‾, но не М+• и М‾•.
Отчасти это является результатом ионно-молекулярных реакций, проте-
кающих в плазме над поверхностью образца, частично перенос протона
идет еще в жидкой матрице.
В качестве примера на рис. 27 приведен масс-спектр тетрамези-
тилпорфирина.

Mr = 782,43

Рис. 27. Масс-спектр тетрамезитилпорфирина (матрица ССА)

Использование в качестве растворителя материалов с большей основ-

ностью приводит к образованию ионов [М + матрица]+.
Качество спектров можно повышать добавками, вызывающими об-
разование ионов непосредственно в жидкой фазе. Добавки кислот при-
водят к увеличению интенсивности пиков в спектрах положительных
ионов соединений с центрами основности, а добавки щелочей исполь-
зуются для увеличения выхода отрицательных ионов в спектрах соедине-
ний с кислотными группами.
Иногда полезно добавлять к образцу неорганические соли. Напри-
мер, добавка NaCl к образцам олигосахаридов или полипептидов в гли-

53
цериновой матрице приводит к образованию интенсивных пиков ионов
[M + Na]+.
Модификацией бомбардировки быстрыми атомами является метод бом-
бардировки тяжелыми кластерами. В этом случае в качестве энергетических
частиц используются кластеры ионов аммония с глицерином. В результа-
те их взаимодействия с образцом формируются многозарядные ионы био-
полимеров, т. е. появляется возможность получать спектры более тяжелых
био­полимеров, чем в случае классической бомбардировки быстрыми атома-
ми. Использование кластеров увеличивает также чувствительность анализа.
Проточный (динамический) вариант бомбардировки быстрыми атома-
ми используется для ионизации молекул исследуемых соединений после
их предварительного разделения в хроматографической колонке.
Принципиальная схема источника ионизации приведена на рис. 28.

Рис. 28. Проточный вариант источника ионизации

бомбардировкой быстрыми атомами

В этом методе поток из колонки хроматографа направляется через

капилляр штока ввода в источник ионизации. Капилляр заканчивает-
ся сеткой или медной пластинкой, применяемой в качестве подложки в
статическом варианте метода, в которой высверливается отверстие для
поступления образца. Раствор подается в источник ионизации со скоро-
стью не более 10 мкдм3/мин. Температура подложки поддерживается на
уровне 40–60 °С, что позволяет избежать замораживания образца в ре-
зультате активного испарения растворителя в условиях высокого вакуума.
Низкие приемлемые скорости потока заставляют проводить его деле-
ние на выходе из колонки хроматографа, что, безусловно, ухудшает чув-
ствительность метода, которая, тем не менее, в благоприятных случаях
может достигать уровня пикомолей.
Еще одной конструктивной особенностью метода является подача в
поток глицерина в количестве 1–5 %. Глицерин, необходимый для эффек-
тивной ионизации, служит матрицей. Его можно добавлять непосредст-

54
венно в жидкую фазу перед хроматографированием. Однако в этом случае
может наблюдаться ухудшение разделения компонентов. Поэтому чаще
глицерин вводят на выходе из колонки хроматографа.

1.5.9. Электрораспыление, электроспрей

Ионизация электрораспылением также относится к группе методов
ионизации при атмосферном давлении, реализуемых в условиях вытал-
кивания раствора анализируемого образца через капилляр в присутствии
сильного электрического поля.
Схема источника ионизации с электрораспылением приведена на
рис. 29.

N2

Рис. 29. Схема источника ионов с электрораспылением

Поток из жидкостного хроматографа направляется в распылительную

иглу-капилляр с внутренним диаметром 0,1 мм, на которую подается вы-
сокое напряжение порядка 6 кВ.
Появление ионов рассматривается как процесс, состоящий из трех
следующих этапов:
zzобразование заряженных капель вблизи выхода из капилляра;
  
zzбыстрое уменьшение размеров капель за счет испарения раствори-
  
теля и последующего образования более мелких капель;
zzобразование ионов в газовой фазе из маленьких заряженных капель.
  
Предполагается, что на выходе из иглы-распылителя в источнике ионов
образуется аэрозоль из заряженных капель с высоким поверхностным
55
зарядом. Эти капли движутся к противоэлектроду, имеющему потенци-
ал Земли. В этом же направлении уменьшается и давление, хотя в этой
части ионного источника (до противоэлектрода) давление поддержива-
ется на уровне атмосферного.
По мере движения к входному отверстию первого сепаратора капли
уменьшаются в размере за счет испарения растворителя. Достигая кри-
тического размера (предел Релея), капля «взрывается» с образованием
более мелких капелек.
Этот процесс многократно повторяется. В итоге возникают микро-
капли, содержащие всего одну заряженную частицу, которая может ока-
заться в газовой фазе после испарения остаточных молекул растворителя.
Альтернативный механизм предусматривает выброс заряженной мо-
лекулы с поверхности одноименно заряженной капли.
В обоих случаях в газовой фазе оказываются несольватированные
молекулы анализируемого вещества, которые проходят через сепаратор
и оказываются в анализаторе.
Поскольку ионизация формально протекает из раствора, присутству-
ющие в нем частицы могут давать с молекулами анализируемого веще-
ства различные аддукты. По этой причине в масс-спектре вместо моле-
кулярного иона присутствуют ионы [М + Н]+, а если в растворитель для
повышения ионизирующей способности добавлены соли щелочных ме-
таллов или аммония, то регистрируются ионы [М + Na]+ или [М + NН4]+
(рис. 30).

Рис. 30. Масс-спектр производного бензимидазола,

снятый в условиях ионизации распылением в электрическом поле,
растворитель – ацетонитрил

56
 Поток газа (как правило, азота), подающийся между противо­
электродом и первым сепаратором, а также коаксиально капилляру
(газ-распылитель), приводит к повышению эффективности распыле-
ния потока жидкости и созданию лучших условий для десольватиро-
вания ионов.
Такая модификация метода часто называется ионоспреем. Этот вари-
ант позволяет также увеличивать скорость потока жидкости в прибор до
200 мкдм3/мин, тогда как в обычном варианте скорость потока состав-
ляет 1–40 мкдм3/мин.
Дополнительные модификации этого интерфейса позволяют ра-
ботать с потоками даже из обычных хроматографических колонок (до
2 см3/мин).
Наряду с попытками увеличения потока велись работы по умень-
шению потока жидкости. В результате был создан метод, названный
«наноспреем». Эта модификация электроспрея оперирует потоками со
скоростями в несколько ндм3/мин и позволяет повысить эффектив-
ность образования ионов анализируемого вещества почти на два по-
рядка.
Тем не менее чувствительность метода при использовании обычных
потоков (до 20 мкдм3/мин) пока остается непревзойденной.
Качественный масс-спектр можно получить при вводе в прибор ме-
нее одного аттомоля (10‾18 М) вещества.
Помимо высочайшей чувствительности и возможности работы с тер-
молабильными и нелетучими соединениями электроспрей предоставил
исследователям возможность анализировать высокомолекулярные сое-
динения с молекулярными массами до миллиона дальтон и выше.
Поскольку ионы, образующиеся в условиях электроспрея, обладают
значительно меньшей внутренней энергией, чем, например, в случае бом-
бардировки быстрыми атомами, их фрагментация практически отсутству-
ет, а масс-спектр зачастую представляет собой набор пиков, обусловлен-
ных молекулярными ионами с различными зарядами (точнее [М + nН]n+).
Это обстоятельство оказывается крайне важным при выполнении анали-
за сложных молекул, например, белков.
Поскольку анализатор масс-спектрометра осуществляет разделе-
ние ионов не по массам, а по отношению массы к заряду, то ион с мас-
сой 100 тыс. Да и зарядом в 100 будет регистрироваться при значении
m/z = 1000.
Электроспрей может эффективно использоваться для анализа сое-
динений с массой до ~ 150 тыс. Да, а зарегистрированный на сегодня ре-
корд составляет 110 млн Да.

57
 Рис. 31. Масс-спектр миоглобина (Mr = 16951,5 Да),
растворитель – смесь «ацетонитрил – вода» (1 : 1)
В случае более тяжелых молекул спектры становятся слишком слож-
ными для расшифровки, так как очень большое число пиков многозаряд-
ных ионов располагается в сравнительно небольшом диапазоне (от m/z
500 до m/z 3000) (рис. 31).

1.5.10. Десорбционная
электрораспылительная ионизация
В 2004 г. появились первые сообщения о новом методе масс-спек-
трометрического анализа – десорбционной электрораспылительной
ионизации, основанной на бомбардировке непосредственно на возду-
хе любой поверхности струей заряженных электрораспыленных капель
растворителя.
Принципиальная схема устройства для реализации метода десорб-
ционной электрораспылительной ионизации представлена на рис. 32.
Микрокапли растворителя, разбиваясь о поверхность исследуемо-
го образца, десорбируют с нее ионы самых разнообразых органических
соединений (от низкомолекулярных до белков) в результате реализую-
щихся в этих условиях различных электростатических и пневматических
взаимодействий. Получающиеся при этом газофазные ионы всасывают-
ся атмосферным интерфейсом масс-спектрометра и анализируются в за-
данном режиме.
Достоинством этого метода является полное отсутствие процедур
пробоподготовки. В качестве подложки для исследуемого образца может
быть использована любая поверхность (металл, пластик, бумага). Анализ

58
 hν – источник энергии

Рис. 32. Принципиальная схема метода

десорбционной электрораспылительной ионизации

можно вести и непосредственно с поверхности земли, органов и тканей

растений и животных. Метод позволяет определять содержание лекар-
ственных препаратов в организме человека, например, путем простого
направления заряженных капель водно-спиртовой смеси на его палец.
1.5.11. Ультразвуковое распыление
Этот метод позволяет получить спектры нелетучих термолабильных
полярных молекул при стыковке масс-спектрометра с жидкостным хро-
матографом или системой для капиллярного электрофореза.
Принципиальная схема используемого источника ионизации приве-
дена на рис. 33.

Рис. 33. Схема источника ионизации ультразвуковым распылением

В этом случае капилляр, соединяющий хроматографическую систему

с источником масс-спектрометра, не обогревается, и на него не подается
высокий электрический потенциал.

59
 Ключевую роль играет поток азота, который подается в систему с
очень высокой скоростью коаксиально капилляру с анализируемой про-
бой. Прибор регистрирует образовавшиеся ионы, начиная с определен-
ной скорости потока. Именно скорость потока имеет первостепенную
важность. Механизм ионизации, а точнее десольватирования имеющих-
ся в растворе ионов, пока не изучен.
Метод хорошо зарекомендовал себя для анализа лекарственных пре-
паратов и их метаболитов. Его чувствительность иногда на 2 порядка пре-
восходит чувствительность традиционно используемой для этих целей хи-
мической ионизации при атмосферном давлении.

1.5.12. Ионизация термораспылением

Метод ионизации исследуемых соединений термораспылением является
«мягким» ионизационным методом, который заключается в том, что водный
раствор анализируемого образца, содержащий небольшое количество соли
щелочного металла, пропускается под давлением через нагретый капилляр.
Часть растворителя исследуемого образца испаряется и со сверхзву-
ковой скоростью попадает в вакуумируемую камеру. Образовавшиеся
пары растворителя обеспечивают пневматическое распыление оставше-
гося раствора анализируемого образца в мелкие капли, которые благо-
даря присутствию в них ионов соли приобретают либо положительный,
либо отрицательный заряд. Вдоль капель из-за их очень малого размера
создается высокий градиент электрического поля, который возрастает по
мере уменьшения размера капель.
В результате приведенных процессов происходит десорбция из ка-
пель ионов типа [М + Н]+, а также кластерных ионов типа [M + Kat]+,
в которых в качестве катионов выступают катионы используемой соли
(NH4+, Na+, K+ и др.).

1.5.13. Пиролитическая масс-спектрометрия

Основная задача пиролитической масс-спектрометрии – это быстрое и
эффективное термическое разложение веществ на более простые, которые
подвергаются последующему анализу. Сейчас, когда методы электрорас­
пыления, или матричной лазерной десорбционной ионизации, позволяют
получать масс-спектры соединений с молекулярной массой в сотни тысяч
и миллионы дальтон, метод пиролитической масс-спектрометрии исполь-
зуется в основном для анализа неразделимых смесей соединений: горючие
сланцы, синтетические полимеры, гуминовые кислоты, микроорганизмы,
другие биологические и геологические материалы.
Пиролиз можно осуществить в самостоятельном приборе, а пиролизат
затем перенести (например, в ловушке, охлаждаемой жидким азотом) в

60
масс-спектрометр. Можно также проводить пиролиз перед колонкой хро-
матографа или даже непосредственно в ионном источнике масс-спектро-
метра. В последнем случае получается только интегральный спектр, яв-
ляющийся суперпозицией спектров всех соединений, образовавшихся в
результате температурного разложения исследуемого образца.
Во избежание появления продуктов окисления, маскирующих реальную
картину, пиролиз принято проводить в среде благородного газа или в ваку­
уме. В качестве метода ионизации наиболее часто используют электронный
удар, химическую ионизацию, полевую ионизацию, ионизацию лазером.
Пиролитическая масс-спектрометрия, как правило, направлена на
решение одной из следующих задач:
zzустановление структурных фрагментов очень сложных соединений;
  
zzсравнение образцов друг с другом (доказательство идентичности).
  
В первом случае желательно использовать комплексный метод, типа
ГХ-МС или ЖХ-МС, а во втором – предпочтительнее получать интег-
ральный спектр.
Такой подход отлично зарекомендовал себя, в частности, для срав-
нения микроорганизмов. В этом случае структуры отдельных продук-
тов распада не важны, тогда как интегральный спектр можно рассматри-
вать как «отпечатки пальцев» данного вида бактерий, вирусов, грибов и
т. д. Идентичность двух образцов микроорганизмов устанавливают таким
образом очень быстро и эффективно. Важно лишь во избежание ошибок
строго контролировать условия проведения эксперимента. Они должны
быть абсолютно одинаковы по скорости нагрева, типу разогрева образца
и температуре пиролиза.
Для осуществления детального сравнения интегральных масс-спек-
тров предложен целый ряд математических подходов.
Использование масс-спектрометра как термогравиметрического де-
тектора позволяет надежно доказать, какое именно соединение выделя-
ется образцом в каждом из зарегистрированных по уменьшению массы
процессов. Температуру в этом случае медленно поднимают до несколь-
ких сотен градусов.
Несколько большими скоростями нагрева характеризуется метод ка-
тодного разогрева (с помощью сопротивления). Для проведения такого
анализа образец наносится непосредственно на проволоку из благород-
ного металла. Проволока с образцом электрически программируемо на-
гревается до нужной температуры с нужной скоростью. Иногда для уве-
личения объема пробы ее помещают непосредственно не на проволоку,
а в нагреваемую от нее кварцевую трубку. Такой подход хорошо зареко-
мендовал себя для анализа полимерных материалов.
Для получения спектров типа отпечатков пальцев наилучшие резуль-
таты получены при использовании индуктивного нагрева в точке Кюри.

61
Точкой Кюри называется температура, при которой ферромагнетики те-
ряют свои магнитные свойства. Например, для железа это происходит при
температуре 770 °С, для никеля – 358 °С, для кобальта – 1120 °С.
Когда проволока (фольга), изготовленная из ферромагнитного ма-
териала, помещается в радиочастотное электромагнитное поле, проис-
ходит ее быстрый разогрев со скоростью до 104 К/с. Точка Кюри дости-
гается за доли секунды. В этот момент материал теряет свои магнитные
свойства, и нагрев прекращается. Однако как только температура упадет
на долю градуса, нагрев возобновляется. Если на проволоку (фольгу) на-
нести образец анализируемого материала, его пиролиз будет проходить
при точно известной температуре.
Несколько пиролитических способов основано на лазерном нагреве
образца. Использование постоянного лазера, работающего в инфракрас-
ном или видимом диапазоне, позволяет проводить нагрев со скоростя-
ми, аналогичными достигаемым пиролизом в точке Кюри. Пятно лазера
обычно имеет диаметр 150–200 мкм, а перемещая лазерный луч по по-
верхности образца, можно определять неоднородности его состава.
Максимальными скоростями нагрева характеризуется метод, который
можно рассматривать как взрывной пиролиз. Пятно импульсного ультра-
фиолетового лазера диаметром 10–25 мкм вызывает локальный разогрев
образца со скоростью до 106 К/с. Образующаяся над поверхностью плаз-
ма состоит не только из молекул. В ней присутствуют радикалы, положи-
тельные и отрицательные ионы. При этом можно получить масс-спектр
без дополнительной ионизации.
Тем не менее в пиролитической масс-спектрометрии для получения
полной картины используют дополнительный метод ионизации. Переме-
щение луча по поверхности позволяет получить информацию о поверхност-
ной неоднородности материала. Поскольку в результате первичного воздей-
ствия лазером молекулы поверхностного слоя образца переходят в газовую
фазу, повторный импульс лазера, направленный в то же место, захватит мо-
лекулы второго слоя, затем третьего и т. д. Таким образом можно получить
информацию об изменениях состава образца от поверхности в глубину.

1.6. РАЗДЕЛЕНИЕ ИОНОВ

После того как проведена ионизация молекул исследуемого образца,

необходимо разделить газообразные ионы, образовавшиеся в источни-
ке ионов в результате самых разнообразных процессов, а также обеспе-
чить фокусировку выделенного пучка ионов, подающегося на детектор.
Разделение ионов исследуемых соединений, образовавшихся в источ-
нике ионов по величине отношения их массы к заряду происходит в масс-
анализаторах.

62
 От характера используемого масс-анализатора зависят:
разрешающая способность масс-спектрометра, которая в свою оче-
zz
  
редь определяет точность измерения массы;
так называемая скорость сканирования, т. е. скорость, с которой ре-
zz
  
гистрируется масс-спектр;
фокусировка выделенного пучка ионов, подающегося на детектор.
zz
  
Обычно скорость сканирования масс-спектрометров с магнитным
анализатором выражается в секундах на декаду масс. Таким образом,
масс-спектрометр с характеристикой скорости регистрации, равной
1 с/декаду, зарегистрирует масс-спектр до массы 1000 за 3 с. При этом
1 с будет затрачена на регистрацию области спектра с отношением массы
к заряду до 10, еще 1 с – на регистрацию области спектра с отношением
массы к заряду от 10 до 100 и еще 1 с – на регистрацию области спектра
с отношением массы к заряду от 100 до 1000.
Большинство из существующих анализаторов масс являются скани-
рующими, когда при непрерывном изменении какого-нибудь параметра
прибора происходит поочередная фокусировка ионов или возрастающей,
или убывающей массы на детектор ионов.
Недостатком этого типа анализаторов масс является их пониженная
чувствительность, так как только ограниченное число ионов в каждый
конкретный момент регистрируется детектором.
Анализаторы масс, представляющие группу несканирующих анали-
заторов, более чувствительны, так как способны собирать все ионы опре-
деленной массы.
В практике масс-спектроскопии в настоящее время используются
следующие типы анализаторов масс:
магнитный секторный;
zz
  
двухфокусные, с прямой и обратной геометрией;
zz
  
квадрупольный;
zz
  
ионная ловушка;
zz
  
времяпролетный;
zz
  
с ионным циклотронным резонансом;
zz
  
с ионным циклотронным резонансом с преобразованием Фурье;
zz
  
гибридные и тандемные;
zz
  
«Орбитрэп».
zz
  
Каждый тип анализатора масс имеет свои преимущества и недостатки.

1.6.1. Магнитный секторный анализатор масс

Хронологически первым анализатором масс был магнитный, прин-

цип работы которого заключается в следующем:

63
 вылетающие из источника ионов заряженные частицы попадают в
zz
  
магнитное поле анализатора, силовые линии которого направлены пер-
пендикулярно движению частиц;
под действием магнитного поля траектория движения частиц ис-
zz
  
кривляется и каждый из ионов начинает двигаться по окружности, ра-
диус которой пропорционален величине отношения массы частицы к ее
заряду m/z. Ионы с меньшим значением m/z отклоняются сильнее, чем
более тяжелые (рис. 34).

Рис. 34. Действие магнитного поля на траекторию движения ионов

Принципиальная схема устройства магнитного секторного анализа-
тора масс представлена на рис. 35.

Рис. 35. Схема масс-спектрометра с магнитным секторным анализатором:

1 – источник ионов; 2 – выходная фокусирующая щель источника ионов;
3 – ионный луч; 4 – магнит; 5 – щель коллектора; 6 – детектор ионов

Ионы исследуемых соединений, образовавшиеся в источнике ионов,

выводятся оттуда благодаря системе электродов и ускоряются потенциа-
лом V (2–8 кВ) по направлению к анализатору, приобретая при этом оди-
наковую кинетическую энергию, равную zV (где z – заряд иона).
На входе в магнитный анализатор кинетическая энергия такого иона
будет выражаться следующим уравнением:

64
 mν2
zeV = ,
2
где m – масса иона; e – единичный заряд; z – число таких зарядов у иона;
ν –скорость иона.
Попадая перпендикулярно магнитным силовым линиям в зону дей-
ствия магнитного поля с напряженностью В, этот ион будет двигаться по
окружности с радиусом кривизны траектории, равным R, причем сила Ло-
ренца при этом уравновешивается центробежной силой:
mν2
Bzeν = .
R
Уравнение, представленное в форме
BzeR = mν,
наглядно демонстрирует тот факт, что магнит является анализатором
именно моментов, а не масс.
Комбинация уравнений приводит к основному уравнению разделе-
ния ионов в магнитном анализаторе:
m B 2R2
= .
ze 2V
Изменяя величины ускоряющего напряжения или напряжения маг-
нитного поля, можно изменять радиус кривизны траектории ионов, при-
чем при непрерывном их изменении ионы с последовательными значе-
ниями отношений массы к заряду по очереди попадают в детектор ионов.
Процесс изменения этих напряженностей и называется сканированием.
Для получения масс-спектра можно сканировать либо ускоряющее
напряжение, либо напряженность магнитного поля.
Если в масс-спектрографе осуществляется разделение ионов по ра-
диусам их траекторий в постоянном магнитном поле, то в этом случае все
ионы одновременно достигают фотопластинки, расположенной в фо-
кальной плоскости, и засвечивают ее.
Исходя из расположения сигналов на пластинке и интенсивности
засветки, можно устанавливать массы ионов и их количество, т. е. полу-
чать масс-спектр.
Однако следует учитывать, что изменение величины ускоряющего на-
пряжения всего в два раза вызывает некоторую дефокусировку ионного
пучка и потерю чувствительности. При этом изменяется и разрешающая
способность детектора.
Поэтому масс-спектры чаще всего принято получать сканированием
напряженности магнитного поля при сохранении постоянной величины
ускоряющего напряжения V.
Магнитные анализаторы обычно имеют низкое или среднее разрешение.

65
 1.6.2. Двухфокусный секторный масс-спектрометр
Масс-спектрометры только с одним магнитным анализатором на-
зываются однофокусными, и в них происходит лишь компенсация не-
гомогенности в направлении ионов, выходящих из ионного источника.
Однако поскольку секторный магнит является анализатором мо-
ментов, а не масс, то ионы с одинаковой массой, но с различной кине-
тической энергией не собираются в точечном фокусе однофокусного
магнитного прибора. Разброс кинетической энергии ионов в несколь-
ко электронвольт ограничивает достижимое разрешение детектора. Для
преодоления этого недостатка на пути ионов дополнительно устанавли-
вают второй анализатор – электростатический, обеспечивающий фоку-
сировку ионов по энергии.
Электростатический анализатор может располагаться до или после
магнитного анализатора. Если электростатический анализатор установ-
лен между ионным источником и магнитным анализатором, то принято
говорить о прямой геометрии прибора. Если первым анализатором явля-
ется магнитный, вторым – электростатический, то говорят об обратной
геометрии прибора.
Для большинства масс-спектрометрических задач расположение ана-
лизаторов не принципиально, однако при работе в некоторых режимах
тандемной масс-спектрометрии необходим прибор обратной геометрии.
Принципиальная схема магнитного секторного анализатора масс
двойной фокусировки прямой геометрии приведена на рис. 36.

Рис. 36. Схема магнитного секторного анализатора масс

двойной фокусировки прямой геометрии:
1БП – бесполевое пространство 1, 2БП – бесполевое пространство 2

66
 Следует подчеркнуть, что секторные приборы характеризуются диа-
пазоном величин m/z до 10 000, наивысшей точностью измерения масс
(< 5 м. д.) и непревзойденным динамическим диапазоном (107).
Давление в анализаторе секторного прибора не должно превышать
10-7 кПа.
Приборы с двойной фокусировкой характеризуются большей вели-
чиной разрешающей способности и позволяют добиться разрешающей
способности масс-спектрометра до 150 000.
Под разрешением (R) понимается способность получать на данном
приборе раздельное изображение двух ионов с массами m и (m + ∆m), ко-
торое, например, приведено на рис. 37.

Рис. 37. Определение величины

разрешающей способности
анализатора масс

Идеальная форма пиков ионов – прямоугольная, реальная – Гауссова.

В зависимости от глубины ложбины между двумя соседними пика-
ми принято говорить о разрешении на уровне 10 % от высоты пиков для
магнитных приборов и 50 % – для квадрупольных.
Так, например, разрешение 1000 для магнитных приборов означа-
ет, что пики с массами 100,0 и 100,1 Да на масс-спектре отделяются друг
от друга, т. е. не накладываются друг на друга вплоть до 10 % их высоты.
Численное значение величины разрешения рассчитывается по урав-
нению
m
R= .
∆m
Так, например, разрешение, необходимое для того, чтобы отличить
ион N2+, точная относительная масса которого равна 28,006158, от иона
СО+, точная относительная масса которого равна 27,994915, оказывает-
ся равной следующему отношению:

67
 28 28
R= = = 2490.
28, 006158 − 27,994915 0, 011243
Если ∆m = 1, то R теоретически является максимальной массой, ре-
гистрируемой прибором, когда пики остаются разделенными.
Для расчета разрешающей способности можно использовать только
один пик и нет необходимости снимать масс-спектр двух ионов с очень
близкими массами. В этом случае в качестве ∆m используется полуши-
рина пика с массой m.
Разрешение 80 000 не означает, что на приборе можно получить раз-
решенный пик однозарядных ионов с такой относительной массой. Ре-
гистрируемая масса пропорциональна B2/V, но безграничное увеличение
В сопряжено с техническими сложностями и нецелесообразно, а умень-
шение V понижает и разрешающую способность.
Что же означают тогда величины разрешающей способности масс-
спектрометров в десятки и сотни тысяч?
Дело в том, что каждый нуклид любого химического элемента имеет
уникальный характеристический дефект массы. Поскольку за стандарт
принят основной нуклид углерода 12C (12,000000), массы всех осталь-
ных нуклидов элементов не являются целыми числами. Так, относитель-
ная масса основного нуклида водорода (1H) – 1,00782506, азота (14N) –
14,00307407, кислорода (16O) – 15,99491475 и т. д.
Измерение точной относительной массы иона (4–6 знаков после за-
пятой) однозначно определяет его элементный и изотопный состав. Про-
ведение измерений с такой точностью называется масс-спектрометрией
высокого разрешения. Измерения проводят вручную или с помощью ком-
пьютера, совмещая положение пика неизвестного иона на шкале масс с
ближайшим пиком иона известного состава.
В качестве реперов масс можно использовать любое соединение, ха-
рактеризующееся интенсивным пиком с величиной m/z, близкой из-
меряемой. Наиболее распространенными для этой цели являются пер­
фторкеросин, перфтортрибутиламин, другие полностью фторированные
соединения.
Использование перфторированных соединений объясняется их лету-
честью, а также тем, что фтор – мононуклидный элемент. В спектрах таких
соединений регистрируются интенсивные сигналы фрагментных ионов,
равномерно перекрывающие весь диапазон значений от m/z = 19 до М+•.
Простейшим примером использования масс-спектрометрии высоко-
го разрешения может служить разделение мультиплета с целочисленной
массой 28 Да. Три соединения с такой массой практически всегда присут-
ствуют на уровне фона при съемке масс-спектров. Это азот, оксид угле-
рода (II) и этилен.
68
 На однофокусном приборе с разрешением 500 молекулярные ионы
всех трех соединений проявятся в виде одного общего пика (рис. 38, а).
Повышение разрешения изменяет характер регистрируемого спектра
(рис. 38, б, в, г).
Действительно, для разделения пиков ионов СО и С2H4 с относи-
тельными массами 27,994915 и 28,03300 Да необходимо разрешение
R = 28/(28,03300 – 27,994915) = 770, тогда как для разделения пиков ио-
нов СО и N2 с относительной массой 28,006158 Да – уже 2490.

Рис. 38. Зависимость формы пика ионов с целочисленной массой 28 Да

от разрешающей способности R анализатора масс:
а – R = 250; б – R = 600; в – R = 1500; г – R = 5000

Если учесть, что число ионов с одинаковой целочисленной массой

резко возрастает с увеличением массы, то важность масс-спектрометрии
высокого разрешения и, естественно, увеличения разрешающей способ-
ности приборов становится очевидной.
Современные секторные приборы обладают разрешающей способно-
стью 60 000–80 000, в некоторых случаях до 150 000. Сверхвысокое раз-
решение достижимо при использовании масс-спектрометрии с преобра-
зованиями Фурье.
Неправильно считать, что увеличение разрешающей способности од-
нозначно ведет к увеличению точности измерения массы. Как только раз-
решения оказывается достаточно для получения индивидуальных пиков с
одной целочисленной массой, которые принадлежат образцу и стандарту,
бессмысленно повышать разрешение далее, поскольку при этом падают
и точность измерения, и чувствительность анализа.

1.6.3. Квадрупольный анализатор

Квадрупольный анализатор, часто называемый квадрупольным филь-

тром масс, состоит из четырех параллельных стержней (монополя) кру-
глого или гиперболического сечения.

69
 Принципиальная схема квадрупольного анализатора приведена на
рис. 39.
Противоположные стержни электрически попарно соединены и на-
ходятся под напряжением, складывающимся из компоненты постоянно-
го тока U и высокочастотной компоненты Vocosωt. Вторая пара стержней
имеет равную по величине, но противоположную по знаку компоненту
постоянного тока, а фаза высокочастотной компоненты сдвинута на 180°.

–(U +Vocosωt)

+(U +Vocosωt)
Рис. 39. Схема квадрупольного анализатора (вертикальное сечение)

Ионы, вводимые в промежуток между полями действием небольшого

ускоряющего напряжения (10–20 В), под действием электрического поля
колеблются относительно осей x и у с возрастающей амплитудой, сохра-
няя направление движения вдоль электродов. Ионы, получившие боль-
шую амплитуду, могут нейтрализоваться на электродах.
Однако при определенных соотношениях напряжений U/V, специ-
фичных для каждого значения отношения массы к заряду, ионы соот-
ветствующей массы будут иметь ограниченную амплитуду колебаний и,
двигаясь вдоль электродов, попадут в выходную щель и затем на коллек-
тор ионов, где и происходит их детектирование.
Таким образом, поскольку каждый ион имеет свою собственную ча-
стоту, зависящую от массы, через квадруполь пролетают лишь те части-
цы, частота которых находится в резонансе с радиочастотой квадруполя.
На практике масс-спектр генерируется сканированием U и Vo при со-
хранении постоянной величины отношения U/Vo. Регистрируемая масса
m пропорциональна Vo, т. е. линейное изменение Vo предоставляет кали-
бруемую линейную шкалу масс.
Квадруполь легко управляется компьютером, имеет хороший динами-
ческий диапазон (105), обеспечивает высокую скорость записи масс-спек-
тров (до 0,1 с/декада), стыкуется со всеми системами ввода, способен без
модифицирования разделять и положительные, и отрицательные ионы.
Его достоинствами являются также быстрота сканирования, неболь-
шие размеры, дешевизна и возможность работы при повышенном (до
5·10‾6 кПа) давлении.

70
 Эти факторы обусловили широчайшее распространение квадруполь-
ных приборов, начиная с 70-х гг. XX в., особенно для серийных стандарт-
ных анализов, съемки рутинных спектров электронного удара или хими-
ческой ионизации.
Еще один импульс для использования приборов этого типа связан с
созданием метода электрораспыления. Современные квадруполи рабо-
тают в диапазоне величин m/z до 3000–4000, что делает их чрезвычайно
удобными для анализа белков, пептидов, других биомолекул с примене-
нием электрораспыления, когда образование многозарядных ионов про-
исходит в условиях атмосферного давления.
Квадрупольные анализаторы отлично зарекомендовали себя также
в приборах гибридной геометрии для тандемной масс-спектрометрии.
Для этих же целей широко используются системы из трех или пяти квад-
руполей.
К недостаткам анализаторов этого типа можно отнести не самый ши-
рокий диапазон масс (до m/z 3000–4000), низкую разрешающую способ-
ность (точность измерения массы при отношении массы к заряду, рав-
ному 1000, составляет 0,1 %) и плохие результаты при работе в режиме
матричной лазерной ионизации.
Существуют также гексапольные анализаторы, в которых вместо че-
тырех вдоль центральной оси параллельно расположено шесть монопо-
лей. Такие анализаторы обеспечивают образование более узкого пучка
ионов и часто используются как интерфейсы между источником иони-
зации при атмосферном давлении и времяпролетными анализаторами.

1.6.4. Ионная ловушка

Ионная ловушка была впервые описана одновременно с квадру-

польным анализатором, но к настоящему времени превратилась из
простого детектора к газовому хроматографу в высокоэффективный
хромато-масс-спектрометр с диапазоном регистрируемых ионных (мо-
лекулярных) масс в десятки тысяч дальтон, разрешающей способностью
до 25 000, возможностью работы в режиме тандемной масс-спектроме-
трии с регистрацией до 10 поколений фрагментных ионов и высочай-
шей чувствительностью.
Основой прибора являются три электрода: два концевых (полюсных)
гиперболической формы, обычно имеющие потенциал Земли, и один
центральный кольцевой электрод диаметром 0,5–1,5 см между ними,
на который подается дополнительное высокочастотное осциллирующее
электрическое поле.
Принципиальная схема ионной ловушки приведена на рис. 40.

71
 Рис. 40. Принципиальная схема устройства ионной ловушки

Эта система электродов создает некое подобие ячейки, или ловуш-

ки, ионов. Ионы в таких ловушках движутся в трехмерном пространстве
и могут продолжительное время удерживаться в объеме между электро-
дами обычно около центра ловушки, претерпевая синусоидальное дви-
жение на стабильных во времени траекториях.
Образовавшиеся в ионном источнике ионы исследуемых соединений
какое-то время удерживаются полем центрального электрода. В классиче-
ском варианте нестабильного масс-селективного сканирования импульс-
ное изменение амплитуды радиочастотного напряжения, приложенного
к кольцевому электроду, заставляет ионы с определенным значением m/z
переходить на нестабильные траектории и покидать ловушку, попадая на
электронный умножитель. В результате это и генерируется в масс-спектр.
Ионная ловушка может действовать одновременно как источник ионов,
как камера для ионно-молекулярных реакций и как анализатор масс.
Для ионизации образца используют электронный удар или химиче-
скую ионизацию. Работа ведется в импульсном режиме. Например, им-
пульсная подача электронов в ловушку (0,1–10 мс) вызывает ионизацию
необходимого числа молекул образца.
Ионные ловушки характеризуются исключительно высокой чувстви-
тельностью, обеспечивают высокую скорость сканирования, быстрое пе-
реключение регистрации с положительных ионов на отрицательные. Раз-
решающая способность ионных ловушек – около 1500, а верхний предел
измеряемых ионных (молекулярных) масс – 4 кДа.

72
 Вариант этого метода – резонансное извлечение. В обычных условиях
работы ионы в зависимости от величины m/z имеют характеристические
частоты движения. Эти частоты зависят от многих параметров. Можно
создать условия резонанса для конкретных ионов благодаря дополнитель-
ному радиочастотному сигналу, приложенному к концевым электродам.
В условиях резонанса ионы поглощают достаточную энергию для
того, чтобы покинуть ловушку, после чего они регистрируются внешним
детектором. В этом случае ионы можно извлечь из ловушки, приложив
более низкое напряжение, чем в классическом варианте. Основным до-
стижением метода является возможность расширения диапазона реги-
стрируемых масс. Например, прибор с верхним диапазоном ионных масс
650 Да при работе в обычном режиме может регистрировать соединения
с ионной массой до 70 000 Да в режиме резонансного извлечения ионов.
Возможность удаления мешающих ионов на разных стадиях ускоре-
ния и замедления движения ионов, индуцирование фрагментации ионов
при их столкновениях с атомами гелия позволяют успешно использовать
ионные ловушки для работы в режиме тандемной масс-спектрометрии,
причем можно получить информацию о нескольких последовательных
поколениях фрагментных ионов.
Показана также возможность достижения разрешающей способно-
сти 25 000.
К достоинствам ионных ловушек следует добавить также небольшие
размеры и самую низкую среди масс-спектрометров стоимость прибора.
К недостаткам можно отнести протекание в ловушке ионно-молеку-
лярных реакций, что приводит к искажениям стандартного масс-спект-
ра. В результате использование стандартных компьютерных библиотек
NIST и Wiley для идентификации соединений по масс-спектрам оказы-
вается менее эффективным, чем в случае магнитных или квадрупольных
анализаторов.
В последнее время предложена новая версия ионной ловушки, кото-
рая объединяет классическую линейную ионную ловушку с новым типом
анализатора, получившего название «орбитрэп», через квадрупольную
накопительную ловушку. При этом удалось обеспечить разрешающую
способность выше 100 000, что по конструкционной простоте и стоимо-
сти составляет серьезную конкуренцию масс-спектроскопии с преобра-
зованием Фурье.

1.6.5. Времяпролетный анализатор масс

Принцип функционирования времяпролетных анализаторов масс

основан на измерении времени, необходимого для пролета ионов от ион-
ного источника до детектора, которые расположены друг от друга на рас-
стоянии 1–2 м.

73
 При использовании ионных источников с ионизацией электронами,
все образующиеся ионы под действием ускоряющего потенциала полу-
чают одинаковую кинетическую энергию. Но поскольку ионы с разны-
ми массами характеризуются различной скоростью перемещения в бес-
полевом пространстве, то они пролетают свой путь до детектора за разное
время. Наиболее легкие ионы достигают детектора за время в несколь-
ко микросекунд, более тяжелые ионы – на доли микросекунд позднее.
Кинетическая энергия ионов, образующихся в источнике ионов, опи-
сывается соотношением
mv 2
= zeV ,
2
где z – число зарядов, е – заряд электрона, m – масса иона, V – величи-
на потенциала, ускоряющего ионы, покидающие ионный источник, v –
скорость иона.
Время, необходимое для преодоления ионом расстояния до детекто-
ра, определяется соотношением
l
t= .
v
Из этих соотношений получаем:
m
t2 = .
 l2 
z 
 2Ve 
Величины, приведенные в скобках, являются постоянными и извест-
ными величинами. Следовательно, измерив значение времени t, можно
определить величину отношения массы иона к его заряду.
Принципиальная схема линейного варианта времяпролетного анали-
затора представлена на рис. 41.

Рис. 41. Схема линейного времяпролетного масс-спектрометра

74
 При разности потенциалов 3 кВ и длине дрейфа 0,5 м ион с величи-
ной отношения m/z = 500 достигает детектора за 15 мкс, а ион с величи-
ной отношения m/z = 50 – за 4,6 мкс, т. е. масс-спектр в диапазоне от 50
до 500 Да можно зарегистрировать за время около 10 мкс.
Очевидно, что это время можно увеличивать, уменьшая разность по-
тенциалов или увеличивая длину дрейфа.
Анализатор такого типа крайне прост и дешев, а его диапазон масс
практически не лимитирован. Однако широкому использованию время-
пролетных приборов мешала низкая разрешающая способность и невоз-
можность их применения с непрерывными методами ионизации.
Основные проблемы времяпролетных приборов – это разброс ионов с
одной массой по времени, по скорости (энергии) и в пространстве.
Ионы, образовавшиеся в левой части источника, ускоряются разно-
стью потенциалов между стенкой источника и сеткой по направлению к
детектору. В области дрейфа происходит разделение ионов по скоростям
(следовательно, по массам).
Детектор регистрирует интенсивность пучков изобарных ионов. В ре-
зультате генерируется масс-спектр.
Следует отметить, что на детектор поступают все ионы, что сущест-
венно улучшает чувствительность метода по сравнению со сканирующи-
ми анализаторами, в которых фактически достигает детектора менее 1 %
от всех ионов.
Разброс по энергиям связан с тем, что ионы уже изначально (до уско-
рения) имеют различную кинетическую энергию ∆U. В результате полная
энергия движения ионов в области дрейфа будет (eV + ∆U).
Пространственный разброс связан с тем, что ионы в источнике на-
ходятся не на одной линии, а занимают конкретный объем. Часть их
оказывается ближе к сетке, часть – дальше. Если обозначить это от-
клонение в пространстве от среднего значения ∆s, и, учитывая, что V =
Es, получается, что энергия ионов в области дрейфа равна eE(s ± ∆s).
Таким образом, происходит уширение сигнала и соответственно поте-
ря разрешения.
Прибор, представленный на рис. 41, может быть использован для ра-
боты в сочетании с классическими непрерывными методами ионизации
органических молекул (ионизация электронами, химическая ионизация,
полевая ионизация, электрораспыление), поскольку в этом случае раз-
брос во времени появления ионов бесконечен, что означает нулевую раз-
решающую способность.
Тем не менее использование импульсных методов генерирования ио-
нов (лазерная десорбционная масс-спектрометрия, масс-спектрометрия
вторичных ионов и др.) позволяет достаточно эффективно работать на

75
линейных времяпролетных приборах. В этом случае время генерирова-
ния ионного пучка ограничивается временем импульса, т. е. разброс ио-
нов по времени имеет конечное значение, причем чем короче импульс,
тем меньше разброс.
Указанные методы ионизации, а также матричная лазерная десорбци-
онная ионизация связаны с генерированием ионов с поверхности. В ре-
зультате помимо разброса образования ионов во времени одновременно
устраняется и пространственный разброс, наблюдающийся при исполь-
зовании методов ионизации молекул в газовой фазе.
Для устранения разброса по энергиям и повышения разрешающей
способности линейных анализаторов было предложено использование
двух сеток, а также метод задержки извлечения ионов из источника им-
пульсной подачей напряжения.
Однако революционным решением стало использование отражателя
(рефлектрон, ионное зеркало).
Схема времяпролетного масс-спектрометра с рефлектроном пред-
ставлена на рис. 42.

Ионы с одинаковым
m/z

Рис. 42. Схема времяпролетного масс-спектрометра с рефлектроном

Из группы ионов с одной массой частицы с большей кинетической

энергией проникают глубже внутрь отражающего поля рефлектрона, тем
самым затрачивая больше времени на замедление и последующее уско-
рение. Достигая ионного зеркала первыми, они последними покидают
его и догоняют более медленные ионы в фокальной плоскости, в кото-
рой располагается детектор.
Такой принцип позволил проводить корректировку разброса по энер-
гиям и повысить разрешающую способность времяпролетных приборов
до 10 000.
Еще одним замечательным нововведением в масс-спектрометрию
было использование принципа ортогонального ускорения. Благодаря

76
этому методу удалось состыковать времяпролетный анализатор с непре-
рывными источниками ионов.
Принципиальная схема устройства масс-спектрометра с ортогональ-
ным ускорением приведена на рис. 43.

а б
Рис. 43. Принципиальная схема метода ортогонального ускорения:
а – выталкивающий электрод выключен; б – выталкивающий электрод включен

В приборах этого типа импульсное приложение потенциала к линзе,

расположенной параллельно движению ионов от источника к детектору,
ускоряет сегмент коллимированного пучка ионов в направлении, пер-
пендикулярном их движению. В итоге ионы достигают второго детекто-
ра в соответствии со своей массой.
После того как самые тяжелые ионы достигнут детектора, ортогональ-
ный импульс может быть повторен. В этом случае разброс в скоростях в
ортогональном направлении отсутствует, а пространственный разброс не-
велик и определяется только шириной пучка коллимированных ионов.
Важным достоинством времяпролетного анализатора является более
высокая чувствительность по сравнению со сканирующими приборами.
Все ионы, образовавшиеся в результате импульса ионизации или ока-
завшиеся в зоне действия импульса ортогонального ускорения, достига-
ют детектора. Следующий импульс можно осуществить, как только са-
мый тяжелый ион достигнет детектора. В реальной ситуации, например в
экспе­риментах с ортогональным ускорением, детектируется один из семи
ионов каждой массы, образовавшихся в источнике.
Для сканирующих приборов, напротив, характерно одномоментное
пропускание только ионов с конкретной массой. Например, если за одну
секунду сканируется диапазон ионных масс от 10 до 1000 Да, то ионы с
конкретной величиной m/z достигают детектора лишь в течение 0,001 с,
т. е. детектируется 0,1 % образовавшихся в источнике ионов.
Таким образом, выигрыш в чувствительности при переходе от сканиру-
ющего к времяпролетному анализатору составляет примерно два порядка.

77
 В заключение следует отметить такие достоинства масс-спектроме-
тра с времяпролетным анализатором, как:
zzболее высокая чувствительность по сравнению со сканирующими
  
приборами;
zzочень высокая скорость записи спектра (до нескольких сотен спек-
  
тров в секунду);
zzпрактически неограниченный диапазон масс;
  
zzразрешающая способность более 10 000;
  
zzсамые разнообразные источники ионов;
  
zzидеальный второй анализатор для работы в режиме тандемной масс-
  
спектрометрии;
zzнебольшие размеры.
  

1.6.6. Анализаторы масс

с ионным циклотронным резонансом
Физические основы функционирования этого метода, основанные на
принципе ионно-циклотронного резонанса, были разработаны в 30-х гг.
XX в., а первый масс-спектрометр этого типа построен уже в 1950-х гг.
Основным конструктивным элементом прибора является находяща-
яся в скрещенных магнитном и электрическом полях ячейка небольшо-
го объема, имеющая разнообразные формы, простейшей из которых яв-
ляется куб.
Для создания магнитного поля применяют постоянные магниты и
электромагниты. Поскольку характеристики прибора улучшаются при
увеличении напряженности поля, то наилучших результатов удалось до-
стичь при использовании сверхпроводящих магнитов силой 3–9 Т.
В целях обеспечения высокой разрешающей способности в ячейке
поддерживается высокий вакуум (до 10‾10 кПа).
Ионы исследуемого образца, генерированные любым известным ме-
тодом, направляются в ячейку, в которой и протекают все процессы их ак-
тивации и детектирования. Входное отверстие в ячейку расположено на
пластине, перпендикулярной силовым линиям магнитного поля. Можно
генерировать ионы и непосредственно в самой ячейке.
Оказываясь в ячейке, ион, обладающий определенной скоростью
теплового движения, испытывает на себе силу Лоренца, отклоняющую
заряженную частицу от ее прямолинейного движения. Эта сила перпен-
дикулярна направлениям магнитного поля и скорости иона. Она уравно-
вешивается центробежной силой.
В результате такого воздействия заряженная частица приобретает тра-
екторию с некоторым определенным радиусом кривизны.

78
 Установлено, что чем меньше скорость частицы и чем выше напря-
женность приложенного магнитного поля, тем меньше этот радиус.
Таким образом, можно добиться такой ситуации, когда частица по-
лучит круговую траекторию и будет удерживаться в некотором опреде-
ленном объеме пространства, вращаясь в нем с определенной частотой.
Изменение характера циклотронного движения ионов отражено на
рис. 44.

Рис. 44. Циклотронное движение ионов:

а – циклотронное движение ионов до возбуждения;
б – возбуждение ионов резонансным радиочастотным импульсом;
в – циклотронное движение ионов после возбуждения

При большой величине напряженности магнитного поля ион опи-

сывает окружность радиусом r, величина которого определяется соот-
ношением
mv 2
= =
F ma = zevB,
r
где m – масса иона; ν – компонента скорости иона в направлении, пер-
пендикулярном магнитному полю; r – радиус траектории кругового дви-
жения иона; е – единичный заряд; z – число единичных зарядов у иона;
В – напряженность магнитного поля.
Если выражать угловую (циклотронную) частоту ионов ωc в радианах
в секунду, то уравнение можно представить следующим образом:
mv
= mω c = zeB
r
или

zeB
ωc = .
m
Обычно используется выражение для циклотронной частоты иона в
герцах:

79
 ω c zeB
vc = =
2π 2πm
или
m B
= .
ze 2πvc
В частности, циклотронная частота иона N2+• в магнитном поле на-
пряженностью 1,0 T составляет:
−19
1,6 10 −19Кл; ⋅ 1,0
1,6⋅ ⋅10 ⋅ 1, 0Т"
−27
==570 F,
570:кГц,
6, 28 ⋅⋅28
6,28 28Да0 ⋅⋅ 1,66 10−27
1,66 ⋅⋅10 : 3/ 0
кг/Да
т. е. 5,7 ⋅ 105 циклов в секунду.
В соответствии с приведенным соотношением по величине частоты
может быть определено отношение массы иона к величине его заряда, а
следовательно, и сама масса иона.
Если исследуемый ион облучать электромагнитным излучением той
же самой частоты, что и циклотронная частота, то ион приобретает ре-
зонансную энергию, которая приводит к увеличению его кинетической
энергии. В соответствии с этим будет увеличиваться и радиус траектории,
который может превышать размеры измерительной ячейки.
Таким образом, если в ячейке установить детектор, то исследуемые
ионы, приобретая соответствующий радиус своей траектории, могут по-
падать на детектор и разряжаться. Следовательно, появляется возмож-
ность поочередно зарегистрировать все ионы, находящиеся в ячейке.

1.6.7. Анализаторы масс

с ионным циклотронным резонансом
с преобразованием Фурье

Масс-спектрометрия с преобразованиями Фурье основана на прин-

ципе ионно-циклотронного резонанса, и в настоящее время данный ме-
тод является одним из наиболее популярных в масс-спектрометрии.
Магнитное поле в масс-спектрометрах с преобразованиями Фурье,
как правило, не изменяется, а масса иона определяется при измерении его
циклотронной частоты. Следует подчеркнуть, что циклотронная часто-
та не зависит от скорости, а следовательно, кинетической энергии иона.
Поэтому появляется возможность достигать сверхвысокого разрешения
(до сотен миллионов), которая уменьшается с увеличением массы иона и
для достаточно тяжелых ионов она становится равной или даже уступает
разрешающей способности магнитных анализаторов.

80
 Удерживание иона в ячейке осуществляется при подаче на задер-
живающие пластины, перпендикулярные силовым линиям магнитного
поля, небольшого равного напряжения. Если исследуются положитель-
ные ионы, на пластины подается напряжение +3 В, если отрицательные
–3 В. В результате ионы в ячейке претерпевают гармонические колебания
между задерживающими пластинами. Комбинация магнитного и элек-
трического полей создает трехмерную ловушку, в которой ионы могут су-
ществовать часами. Столь длительное время жизни ионов существенно
отличает ионно-циклотронный резонанс от других масс-спектрометри-
ческих методов, когда ионы живут мили- и микросекунды.
Следует отметить, что масс-спектрометрия с преобразованиями Фу-
рье имеет более строгие вакуумные ограничения. Для нормальной работы
прибора в условиях высокого разрешения требуется давление на уровне
10‾10–10‾11 кПа. Такое давление достигается при использовании мощных
криогенных или турбомолекулярных насосов.
Суперпозиция циклотронного движения и колебаний между задер-
живающими пластинами, формально независимых друг от друга, приво-
дит к возникновению магнетронного движения ионов.
Магнетронная частота зависит от формы ячейки, расстояния между
пластинами, напряженностей магнитного и электрического полей и не
зависит от массы ионов. Эта частота имеет величину порядка 1–100 Гц,
т. е. существенно ниже частоты циклотронного движения, которая лежит
в кило- и мегагерцевом диапазоне. Магнетронный радиус иона опреде-
ляется также начальным положением иона относительно основной оси
ячейки. Для достижения максимального разрешения и максимальной
точности определения массы магнетронный радиус должен быть мини-
мизирован. Это достигается генерированием или вводом ионов в ячейку
вдоль основной оси параллельно магнитным силовым линиям.
Простейшая последовательность событий для получения масс-спек-
тра может быть представлена следующим образом: очистка ячейки –
ионизация – возбуждение ионов – детектирование ионов.
Для очистки ячейки от ионов к задерживающим пластинам приклады-
вается асимметричное напряжение (например, +10 и –10 В). В результате
все ионы, находившиеся в ячейке, покидают ее за несколько милисекунд.
Процесс ионизации может включать образование ионов непосредст-
венно в ячейке (электронный удар), рядом с ячейкой в условиях глубо-
кого вакуума (матричная лазерная десорбционная ионизация), вне маг-
нитного поля. В последнем случае образовавшиеся ионы направляются
в ячейку с помощью системы электродов.
Для возбуждения и детектирования ионов их облучают приложени-
ем радиочастотного поля к паре противолежащих пластин, расположен-

81
ных параллельно линиям магнитного поля. Когда собственная частота
иона оказывается в резонансе с частотой возбуждающего импульса, ра-
диус траектории иона увеличивается по спирали. Поскольку скорость и
радиус движения иона увеличиваются синхронно, угловая частота не из-
меняется и ион остается в резонансе. Ионы с другими массами продол-
жают при этом двигаться по своим нерезонансным орбитам. Если возбу-
ждение продолжается в течение длительного времени, ускоренные ионы
достигают боковых пластин и гибнут. Этот эффект можно также исполь-
зовать для удаления ионов определенной массы из ячейки, например, ра-
ботая в режиме тандемной масс-спектрометрии. Если же вовремя прекра-
тить подачу радиочастотной энергии, ионы будут продолжать вращаться
по орбите с большим радиусом.
В идеальных вакуумных условиях при отсутствии столкновений ионы
теоретически должны оставаться на этих орбитах неограниченное время.
Процесс детектирования ионов представлен на рис. 45.
Циклотронное когерентное движение пучка разогнанных положи-
тельных ионов между детектирующими пластинами, имеющими по-
тенциал Земли и соединенными друг с другом через сопротивление,
обусловливает следующее. Когда положительные ионы движутся от
левой к правой пластине, их электрическое поле заставляет электро-
ны перемещаться в том же направлении по внешней цепи через со-
противление.
Во второй части циклотронного движения ионов электроны переме-
щаются в обратном направлении. Это движение электронов называют
наведенным током.
Это переменный ток с частотой, равной разности частот циклотрон-
ного и магнетронного движения, а его амплитуда пропорциональна чи-
слу ионов данной массы в ячейке. Наведенный ток создает небольшое
переменное напряжение на сопротивлении, которое может быть усиле-
Усилитель но и измерено. Таким образом, мож-
но регистрировать ионы, не удаляя их
из ячейки.
В классическом варианте ионно-
циклотронного резонанса для по-
лучения спектра необходимо было
линейно сканировать частоту или
напряженность магнитного поля.
Рис. 45. Детектирование резонансно Это требовало значительного време-
ускоренных ионов ни и большого количества образца.

82
 Сущность масс-спектрометрии с преобразованиями Фурье заключается
в возбуждении сразу всех ионов в результате приложения широкого радио­
частотного импульса.
Существующие синтезаторы частот способны активировать ионы с
собственными частотами от 10 кГц до 1 МГц за 1 мс.
Регистрируемый наведенный ток является комплексом синусоид с
различной частотой и амплитудой.
Математические операции, основанные на преобразованиях Фурье,
позволяют перейти от временного сигнала к масс-спектру в обычном
виде (рис. 46).

Рис. 46. Регистрируемый временной сигнал (а)

и полученный после Фурье-преобразования масс-спектр (б)

Хотя вся необходимая информация о массовых числах ионов содер-

жится в любом коротком сегменте временного сигнала, полезно записать
сигнал полностью. Дело в том, что разрешающая способность анализато-
ра масс прямо пропорциональна продолжительности зарегистрирован-
ного временного сигнала.
Если обозначить это время T, то разрешение в спектре можно рас-
считать по уравнению
Tvc
R= .
2
К сожалению, T имеет ограничения. Амплитуда временного сигна-
ла уменьшается во времени, поскольку когерентность ионного пучка на-

83
рушается в результате столкновений ионов с нейтральными частицами.
Использование более глубокого вакуума будет способствовать увеличе-
нию разрешающей способности. В частности, временной сигнал до 60 с
получают в вакууме 10‾11 кПа.
Хорошие результаты получены при использовании масс-спектроме-
трии с преобразованиями Фурье для анализа соединений большой мас-
сы (особенно в сочетании с матричной лазерной десорбционной иониза-
цией). Особенно ценно сверхвысокое разрешение метода, позволяющее
устанавливать точные массы ионов. Также хорошие результаты были по-
лучены при работе в режиме тандемной масс-спектрометрии.
В начале 80-х гг. XX в. казалось, что масс-спектрометрия с преобразо-
ваниями Фурье позволит анализировать ионы любой массы, однако су-
ществуют не только практические, но и теоретические пределы. Прежде
всего, следует отметить, что, начиная с определенной массы, сила радиаль­
ного электрического поля начинает превосходить силу Лоренца. Кроме
того, радиус циклотронной орбиты ионов, движущихся со скоростями
теплового движения, растет с увеличением их массы, т. е. теоретический
предел масс для каждой ячейки определяется ее размерами. Первый фак-
тор является более важным, чем второй.
В ячейке размером 2,5 см с задерживающим напряжением 1 В в маг-
нитном поле 3T, радиальное электрическое поле не позволяет анализи-
ровать однозарядные ионы тяжелее 40 000 Да.
Термический радиус циклотронной орбиты анализируемого иона иг-
рает значительно меньшую роль. Для указанных параметров анализа пре-
дел по этому показателю составит 10 000 000 Да.

1.6.8. Анализатор нового типа «Орбитрэп»

Установлено, что при использовании непрерывных источников

ионов, обладающих широким диапазоном масс, высокой чувствительно-
стью и большим динамическим диапазоном, электростатические ловуш-
ки оказываются недостаточно эффективными.
В целях устранения отмеченных недостатков предложен прибор, со-
единяющий классическую линейную квадрупольную ловушку с анали-
затором нового типа, получившего название «Орбитрэп», через квадру-
польную накопительную ловушку (С-ловушку).
Эта дополнительная квадрупольная ловушка служит для накопления
и «охлаждения» ионов перед их вводом в анализатор «Орбитрэп».
Последовательность перемещения ионов в этом устройстве представ-
лена на рис. 47.

84
 Рис. 47. Принципиальная схема устройства масс-анализатора «Орбитрэп»

Ионы собираются в линейной ловушке, аксиально выталкиваются,

запираются в С-ловушке, где сжимаются до небольшого объема, и на-
правляются в «Орбитрэп».
Для анализа ионов в «Орбитрэпе» между внутренним и внешним
электродами создается симметричное статическое электрическое поле
специальной формы. Попадающие в это поле ионы начинают двигаться
по стабильным циклическим траекториям вокруг центрального электро-
да и одновременно осциллировать вдоль его оси.
Вращаясь вокруг центрального электрода и совершая аксиальные ко-
лебания, ионы создают наведенный ток на внешних половинках «Орби­
трэпа», который детектируется дифференциальным умножителем.
Ионы каждой массы генерируют соответствующую синусоидальную
волну.
Заканчивается процедура получения спектра преобразованиями Фу-
рье, благодаря которым частотный спектр трансформируется в класси-
ческий масс-спектр. Разрешающая способность при скорости отбора
данных 1 спектр/с составляет 60 000, а максимальная разрешающая спо-
собность превышает 100 000. Точность измерения массы при использо-
вании внутреннего стандарта – меньше 2 млн–1 (частей на миллион), а
при использовании внешнего стандарта – меньше 5 млн–1.
Учитывая отсутствие сверхпроводящих магнитов на жидком гелии,
данный масс-спектрометр становится серьезным конкурентом наибо-
лее дорогостоящему на сегодняшний день масс-спектрометрическому
методу – масс-спектрометрии ионно-циклотронного резонанса с пре­
образованием Фурье.

85
 1.6.9. Гибридные (комбинированные)
и тандемные анализаторы масс
При использовании «мягких» методов ионизации из исходных моле-
кул образуются первичные ионы, обладающие, как правило, незначитель-
ной внутренней энергией и по этой причине не претерпевающие дальней-
шей фрагментации. Для того чтобы получить информацию о структуре
молекул, используют проведение процедуры принудительной диссоциации
этих первичных ионов, что и является отличительным признаком тандем-
ной масс-спектрометрии.
Метод тандемной масс-спектрометрии основан на использовании
масс-спектрометров как минимум с двумя масс-анализаторами, между
которыми располагается так называемая ячейка столкновения.
Последовательность протекающих при этом процессов приведена
на рис. 48.

Рис. 48. Схема реализации метода тандемной спектрометрии

Образовавшиеся в ионном источнике ионы исследуемых соединений

разделяются по своим массам в первом анализаторе. Далее выбранный пу-
чок ионов с одинаковой массой, получивших название ионов-предшествен-
ников, попадает в ячейку столкновений, заполненную благородным газом.
Ячейка столкновений выполняет роль второго источника ионов, в ко-
тором при столкновении с атомами газа ионы-предшественники исследуе-
мого соединения, соответствующим образом выделенные из ионного пуч-
ка, получают приращение внутренней энергии и вследствие протекания

86
процессов диссоциации, индуцированной столкновениями, распадаются
на фрагменты, т. е. происходят процессы фрагментации ионов-предшест-
венников, в результате которых образуются новые ионы – ионы-продук-
ты. Образовавшиеся ионы-продукты направляются во второй анализа-
тор, в котором происходит их разделение и последующее детектирование.
Основная суть процессов фрагментации ионов-предшественников,
происходящих в ячейке столкновений, состоит в следующем.
По времени жизни все ионы, образующиеся в ионном источнике и
вылетающие из него, делятся на три группы:
zzсо временем жизни менее 10‾ 7 с. Эта группа ионов полностью рас-
  
падается, находясь еще в объеме источника ионов и только их осколки
покидают источник;
zzсо временем жизни более 10‾ 6 с. Ионы этой группы способны до-
  
стичь детектора до их разложения;
zzсо временем жизни в диапазоне 10‾ 6–10‾ 7 с. Это группа так называ-
  
емых метастабильных ионов, которые оказываются достаточно стабиль-
ными, чтобы миновать область действия первого анализатора, но обла-
дают еще достаточной энергией, чтобы разложиться на пути следования
ко второму анализатору.
Именно эта, последняя категория ионов, и является объектом взаи-
модействий в ячейке столкновений.
В ячейку столкновений напускают газ (гелий, аргон) с атомами ко-
торого и сталкиваются метастабильные ионы. За время столкновений,
которое составляет 10‾14–10‾16 с, происходит возбуждение иона и его по-
следующий распад.
Столкновения, реализуемые в ячейке, подразделяются на две груп-
пы – высокоэнергетические (несколько килоэлектронвольт) и низко­
энергетические (сотни электронвольт).
Высокоэнергетические столкновения осуществляются в ячейках, рас-
положенных между магнитным и электростатическим анализаторами или
между обратной последовательностью этих анализаторов.
Низкоэнергетические столкновения реализуются в ячейках масс-
спектрометров с тройными квадруполями, где средний квадруполь вы-
полняет роль ячейки столкновений.
Поскольку величина энергии, передающейся ионам при низкоэнер-
гетических столкновениях ниже, чем при высокоэнергетических столк-
новениях, для заполнения ячейки используются более легкие газы – ар-
гон, ксенон, криптон.
Для проведения активированной диссоциации ионов-предшествен-
ников в ячейке столкновений используются возможности электронно-
го или фотонного пучка лучей, а также столкновение с поверхностью.

87
 Еще одним вариантом диссоциации является взаимодействие поло-
жительных ионов-предшественников с тепловыми электронами, энергия
которых меньше 0,2 эВ. В этом случае протекают процессы захвата элек-
тронов и образующиеся ионы претерпевают характеристический распад.
Сечение данной реакции сильно возрастает с увеличением заряда
иона:
[M + nH]n+ + e- → [M + nH](n-1)+.
Возникающий радикальный центр инициирует специфическую фраг-
ментацию молекул.
Данный метод особенно широко применяется для определения по-
следовательности звеньев в биополимерах методом ионного циклотрон-
ного резонанса с преобразованием Фурье, источником ионов для кото-
рого служит электроспрей.
Известен также и так называемый метод распада после источника,
который заключается в том, что метастабильные ионы, вылетевшие из
источника ионов, могут распадаться во втором анализаторе масс, но обра-
зовавшиеся продукты распада будут регистрироваться при этих же значе-
ниях отношений массы к заряду, что и их предшественники.
Если дополнительно применять специальное устройство, рефлектрон,
то анализатор становится способным разделить ионы-предшественники
и продукты их распада по их кинетическим энергиям. Такой подход по-
зволяет получить масс-спектры, содержащие большое число пиков фраг-
ментных ионов, полезных при структурных отношениях.
Следует отметить еще один метод, метод инфракрасной мультифотон-
ной диссоциации, который основан на диссоциации ионов, активирован-
ной поглощенными фотонами:
m1+ + хhν → m2+ + n.
Энергию фотонов можно изменять. Метод удобен для использования
с масс-спектрометрией ионного циклотронного резонанса, когда ионы
можно удерживать в ячейке при возбуждении фотонами длительное время.

1.7. ДЕТЕКТИРОВАНИЕ ИОНОВ

Последним звеном получения масс-спектра является процесс детек-

тирования ионов.
Основные требования, предъявляемые к детектору, сводятся к сле-
дующему:
zzминимальное снижение разрешающей способности, которую по-
  
зволяют получить выбранные анализатор и источник ионов;
zzмаксимальная чувствительность;
  

88
 обеспечение
zz
   заданной точности анализа;
обеспечение
zz
   необходимой скорости записи спектров;
стабильность характеристик во времени;
zz
  
временное разрешение детектора, обеспечивающее необходимую
zz
  
разрешающую способность и точность измерений.
В зависимости от сложности решаемой задачи для детектирования
ионов используются:
фотопластинки;
zz
  
электрометры;
zz
  
детекторы Фарадея;
zz
  
решетчатые детекторы;
zz
  
вторичные электронные умножители;
zz
  
фотоумножители.
zz
  
В ранних масс-спектрометрах детектирование ионов производилось
с использованием фотопластинки, расположенной в фокальной плоско-
сти ионного луча за масс-анализатором.
Бомбардировка фотопластинок ионным пучком приводит к образо-
ванию скрытого изображения на зернах галогенидов серебра, дисперги-
рованных в желатине. Поскольку пробег ионов с энергией до 20 кэВ в
эмульсии небольшой, толщина эмульсионного слоя должна быть очень
маленькой, а содержание галогенида серебра выше, чем в эмульсиях для
регистрации обычных световых пучков.
Пластинка затем проявлялась, обрабатывалась с помощью денсито-
метра и по величине ее затемненности устанавливалась относительная
интенсивность каждого конкретного иона. Подобные устройства для де-
тектирования ионов получили название масс-спектрографов.
Масс-спектрограмма положительных ионов приведена на рис. 49.

Рис. 49. Масс-спектрограмма положительных ионов

Разрешение такой системы оставляло желать много лучшего, а интен-

сивность засветки была не прямо пропорциональна количеству ионов.

89
 Из существующих способов повышения чувствительности, целесо­
образно отметить следующие:
zzудаление желатина из ионочувствительного слоя, что уменьшает
  
различия в глубине внедрения ионов и приводит к выравниванию чувст-
вительности эмульсии для легких и тяжелых ионов;
zzвведение в эмульсию люминесцентных веществ, что приводит к уси-
  
лению вторичного механизма почернения;
zzдобавление серы в эмульсию при ее изготовлении для образования
  
соединения Ag2S;
zzвведение AgI в кристаллы бромида серебра для увеличения цент-
  
ров чувствительности;
zzувеличение энергии ионов.
  
Для измерения ионных токов используют также электрометры, дей-
ствие которых основано на измерении постоянного напряжения, созда-
ваемого либо за счет протекания ионного тока по высокоомному сопро-
тивлению, либо за счет накопления заряда на емкости, подключенной к
коллектору.
Электрометры, измеряющие падение напряжения за счет протекания
тока на высокоомном сопротивлении, получили название электрометри-
ческих усилителей постоянного тока (УПТ), а электрометры, использую-
щие явление накопления заряда на емкости, называются интеграторами
тока. В масс-спектрометрии в основном используют электрометрические
усилители постоянного тока, которые характеризуются чувствительно-
стью 10‾15 А при сопротивлении на входе 1011–1012 Ом.
Принципиальная схема устройства приемника ионного тока приве-
дена на рис. 50.

Рис. 50. Принципиальная схема устройства приемника ионного тока:

1 – приемная щель; 2 – электрод задержки; 3 – антидинатронный электрод;
4 – экранный электрод; 5 – коллектор

90
 При регистрации спектра масс разрешающая способность и чувстви-
тельность масс-спектрометра будут зависеть от ширины входной щели
приемника и ее пространственного расположения. Для обеспечения боль-
шей разрешающей способности ширину входной щели приемника следу-
ет выбирать существенно меньшей, чем ширина пучка в плоскости щели.
Для измерения ионных токов, обусловленных наличием изотопов, ис-
пользуются двухколлекторные (двухлучевые) приемники А. Нира.
Принципиальная схема устройства такого приемника приведена на
рис. 51.

Рис. 51. Двухлучевой приемник ионов Нира

для измерения концентрации изотопов относительным методом

Следует учитывать существование возможных причин погрешностей

измерения ионных токов, таких как:
zz динатронный эффект;
  
zz вторичная эмиссия ионов и электронов из краев щелей и попада-
  
ние их на коллектор;
zz неполное собирание ионов при ширине входной щели приемника
  
меньшей, чем ширина ионного пучка в ее плоскости;
zz недостаточное разрешение и, следовательно, наложение соседних
  
ионных пучков из-за слишком большой ширины входной щели прием-
ника и непараллельности входной щели приемника и выходной щели
источника;
zz попадание на коллектор рассеянных ионов соседних пучков;
  
zz выбивание вторичных ионов из коллектора;
  
zz дрейф нуля и шумы электрометрического усилителя;
  
zzпогрешности измерительных приборов и элементов электронных схем;
  
zz нелинейность характеристики усилителя постоянного тока.
  
В некоторых масс-спектрометрах для детектирования ионов при-
меняются так называемые чаши Фарадея, в которых ионы попадают на
электрод, соединенный непосредственно с чувствительным усилителем.

91
 Детектор Фарадея целесообразно использовать при выполнении точ-
ных количественных определений, поскольку минимальный измеряемый
ток в отсутствие фона равен 1,4 · 10‾15 А, при точности измерения до 10 %
минимальный измеряемый ток равен 0,7 · 10‾14 А, а при точности изме-
рения до 1 % – 0,7 · 10‾13 А.
Принципиальная схема устройства решетчатого детектора, который
представляет собой пластинку с просверленными в ней цилиндрически-
ми отверстиями диаметром 15–20 мкм, приведена на рис. 52. Расстояние
между центрами отверстий составляет 10–30 мкм.

Рис. 52. Принципиальная схема решетчатого детектора

Сторона входа пластинки имеет отрицательный потенциал (~ 1 кВ)

относительно стороны выхода. Внутренняя поверхность каналов покры-
та полупроводниковым материалом, благодаря которому осуществля-
ется эмиссия вторичных электронов. Коэффициент умножения тако-
го устройства равен 105. При использовании 2–3 пластин коэффициент
можно повысить до 108.
Выходя из канала, поток вторичных электронов попадает на анод, и
сигнал передается на процессор. Такое устройство напоминает фотогра-
фическую пластинку. Ионы с разной величиной отношения массы к за-
ряду при сканировании параметров анализатора направляются на разные
каналы и могут детектироваться одновременно.
Решеточный детектор, безусловно, более чувствителен, однако и сто-
имость его выше.
Токи, создаваемые незначительным количеством ионов с одним и
тем же значением отношения массы к заряду, как правило, составляют

92
величины порядка 10‾9–10‾17 А и являются слишком малыми для их не-
посредственного измерения.
Поэтому после прохождения анализатора, пучок первичных ионов на-
правляется на специальное устройство, выполняющее роль умножителя,
которое должно перевести образовавшийся поток ионов в соответствую-
щий усиленный поток фотонов или электронов.
В настоящее время для детектирования ионов чаще всего использу-
ются вторичные электронные умножители и фотоумножители.
Вторичные электронные умножители состоят из серии электродов
(динодов), к которым приложена разность потенциалов, причем потен-
циал каждого последующего динода несколько выше, чем предыдущего.
Принципиальная схема устройства электронного умножителя при-
ведена на рис. 53.

Рис. 53. Принципиальная схема электронного умножителя

Единичный ион, выходя из анализатора масс, ударяется о поверх-

ность первого динода и выбивает из него несколько электронов, которые
под действием разности потенциалов ускоряются и попадают на следу-
ющий электрод.
Среднее число выбитых на диноде электронов на один ион характе-
ризуется коэффициентом ионно-электронной эмиссии А, который опре-
деляется из соотношения
А = Ie/I,
где Ie – величина тока, обусловленная выбитыми электронами; I – вели-
чина первичного ионного тока.
Величина А чаще всего может достигать значения от 1 до 10, а в неко-
торых случаях до 19 единиц.

93
 Таким образом, с поверхности каждого последующего динода выбра-
сывается большее число электронов, чем на него попадает, что и приво-
дит к лавинообразному возрастанию эмиссии электронов.
В результате такого каскадного процесса очень слабый электрический
ток, создаваемый первичными ионами, резко усиливается.
Если число динодов в электронном умножителе равно n, а коэффи-
циент электрон-электронной эмиссии на каждом диноде равен В, то ко-
эффициент усиления всей системы будет определяться выражением
K = АВ  n.
Коэффициент усиления характеризует среднее число электронов на
аноде вторичного электронного умножителя при попадании одного иона
на его катод. Коэффициент усиления такой системы, который пропор-
ционален разности потенциалов между первым и последним динодами,
может превышать 106.
Последний динод соединен с предусилителем, который преобразует
регистрируемый ток в напряжение, как наиболее удобную для цифровой
компьютерной регистрации форму.
При коэффициенте усиления, равном 106–107, при использовании
усилителя постоянного тока с чувствительностью 10‾11–10‾12 А чувстви-
тельность вторичного электронного умножителя может достигать вели-
чины 10‾17–10‾18 А.
Диноды вторичных электронных умножителей обычно изготавли-
ваются из материалов с большим коэффициентом вторичной ионно- и
электрон-электронной эмиссии и слабо подвергающихся «отравлению»
под действием пучка ионов и при напуске атмосферного воздуха. Этим
условиям хорошо удовлетворяют 2 % медно-бериллиевый сплав, 2 % се-
ребряно-магниевый сплав, а также сплавы никеля.
Коэффициент усиления некоторых вторичных электронных умно-
жителей из-за контакта с атмосферой может снижаться на 2–3 порядка.
Срок службы такого электронного умножителя составляет, как пра-
вило, 1–2 года, что связано с загрязнением поверхности динодов в ре-
зультате взаимодействия с ионами, а также с работой в условиях невы-
сокого вакуума.
В соответствии с их конструктивными особенностями чаще всего ис-
пользуются следующие типы вторичных электронных усилителей: короб-
чатые, ковшеобразные, жалюзийные, тороидальные, канальные.
В некоторых приборах пучок ионов ускоряется перед первым динодом
электростатическим полем. Поскольку увеличение энергии ионов при-
водит к увеличению выхода вторичных электронов, то будет иметь место
и увеличение чувствительности.

94
 Для регистрации ионов используются также фотоумножители, дей-
ствие которых основано на принципе регистрации фотонов, являющих-
ся результатом протекания процесса сцинтилляции, кратковременной
(10‾4–10‾9 с) световой вспышки (вспышка люминесценции), возникаю-
щей в сцинтилляторах под действием ионизирующих излучений. Сцин-
тилляторами могут выступать кристаллофосфоры (например, ZnS, NaI),
органические кристаллы (например, антрацен, стильбен), растворы
пластмасс, благородные газы.
Принципиальная схема устройства фотоумножителя приведена на
рис. 54.

Сцинтиллятор

Рис. 54. Принципиальная схема фотоумножителя

Поток ионов направляется на конверсионный динод и вызывает

эмиссию вторичных электронов. Электроны направляются на сцинтил-
ляционный экран, где происходит эмиссия фотонов, которые далее по-
падают на каскадный умножитель, аналогичный описанной выше динод-
ной системе. Усиленный поток фотонов регистрируется. Обладая таким
же коэффициентом усиления, что и электронный умножитель, фотоум-
ножитель имеет срок службы до 5 лет, так как фотоны в отличие от элек-
тронов проходят через стекло, т. е. умножитель может функционировать
в запаянной трубке в условиях глубокого вакуума.
Необходимо отметить следующие недостатки сцинтилляционного
детектора:
zzдля получения высокой чувствительности необходимо ускорение
  
ионов до энергии 50–70 кэВ, в то время как в масс-спектрометрах энер-
гия ионов составляет величину порядка 10–20 кэВ;
zzпри высоких энергиях, особенно в случае попадания довольно
  
интенсивных пучков, сцинтиллятор быстро разрушается и не регене-
рируется;

95
 Сцинтиллятор

Рис. 55. Принципиальная схема сцинтилляционного детектора

с ионно-электронным преобразователем

zzсуществует неопределенность в зависимости интенсивности сцин-

  
тилляции от массы, энергии, заряда и состава регистрируемых ионов;
zzфотоумножители обычно имеют значительный «темновой» ток;
  
zzпри продолжительном воздействии положительных ионов на лю-
  
минофор его чувствительность снижается;
zzк легким массам люминофоры имеют большую чувствительность,
  
чем к тяжелым;
zzспектр излучения люминофора должен соответствовать спектраль-
  
ной чувствительности фотокатода умножителя.
Некоторые из отмеченных недостатков сцинтилляционного детекто-
ра удается устранить путем его комбинации с ионно-электронным пре-
образователем. Принципиальная схема такого устройства приведена на
рис. 55.

1.8. ОСНОВНЫЕ ПРАВИЛА И ПОДХОДЫ

К ИНТЕРПРЕТАЦИИ МАСС-СПЕКТРОВ

Среди качественных теорий масс-спектрометрического распада наи­

более признанными являются концепции:
zzоценки стабильности ионов и нейтральных частиц;
  
zzлокализации заряда и неспаренного электрона.
  
В каждом из этих случаев используется принцип минимальных струк-
турных изменений на каждой стадии распада, а структура молекулярно-
го иона принимается равной структуре исходной молекулы, если какие-
либо процессы изомеризации первичного молекулярного иона М+• не
отмечены особо.

96
 Однако сами по себе обе эти теории позволяют сделать лишь качест-
венные выводы и только использование их в комплексе помогает успеш-
но интерпретировать масс-спектры разнообразных органических соеди-
нений.

1.8.1. Стабильность ионов и нейтральных частиц

В подавляющем большинстве случаев можно считать, что энергия

активации реакции, обратной реакции распада, отсутствует или очень
мала, и можно предположить, что для эндотермической фрагментации
переходное состояние будет значительно ближе к продуктам реакции,
чем к исходной частице.
Следовательно, степень стабильности этих продуктов будет в значи-
тельной мере определять эффективность процесса фрагментации. При
этом следует учитывать стабильность не только дочернего иона, но и от-
щепляющейся нейтральной частицы.
При оценке стабильности можно использовать обычные критерии.
Например, третичный алкильный карбокатион устойчивее вторично-
го, а вторичный – устойчивее первичного. Для карбанионов этого типа
порядок стабильности обратный.
Бензильный и аллильный ионы устойчивы благодаря резонансной
стабилизации, причем для бензильного катиона помимо четырех резо-
нансных форм существует возможность энергетически выгодной в га-
зовой фазе трансформации в катион тропилия, который имеет уже семь
резонансных форм.
Напротив, sp2-гибридизованные фенильный и винильный катионы
менее устойчивы по сравнению с их sp3-гибридизованными аналогами.
Резонансная стабилизация также приводит к значительному усиле-
нию стабильности в случае возможного участия π-электронов гетеро­
атомов, присутствующих в составе молекулы исследуемого соединения.
При образовании нейтральных продуктов фрагментации распад по
определенному направлению может осуществляться благодаря удобной
делокализации в нем электрона. Так, делокализация электрона вследствие
эффекта резонанса увеличивает стабильность аллильного и бензильного
радикалов. При этом следует учитывать, что стабилизация заряда более
существенна, чем стабилизация неспаренного электрона. Так, например,
если трет-С4Н+9 стабильнее н-С4Н+9 на 1,5 эВ, то трет-С4Н•9 стабильнее
н-С4Н•9 всего только на 0,4 эВ.
Достаточно часто ионы распадаются с выбросом небольших нейтраль-
ных молекул: водорода, метана, воды, оксида углерода (II) и диоксида
углерода, монооксида азота, хлороводорода, сероводорода, метанола и др.

97
Большая отрицательная величина теплоты образования этих молекул
создает преимущества для реализации соответствующего направления
распада.
Правило выброса максимального алкильного радикала. Важнейшим
исключением, когда интенсивность пика ионов падает с увеличением их
термодинамической стабильности, является предпочтительное отщепле-
ние большего алкильного радикала.
Этот эффект называется правилом выброса максимального алкильного
радикала. Это правило применимо к отщеплению радикалов не меньше
этильного, а интенсивности пиков вторичных ионов должны суммиро-
ваться с интенсивностью пика соответствующего первичного иона.
Правило Стивенсона. Разрыв простой связи в нечетноэлектронном
ионе может привести к двум парам ионов и радикалов:
AB+ + XY• ← ABXY+• → AB• + XY+.
В правиле, сформулированном Д. Стивенсоном, утверждается, что по-
скольку фрагмент с большей энергией ионизации имеет большую склон-
ность к удержанию неспаренного электрона, то вероятность образования
иона с меньшей энергией ионизации будет больше. Поскольку такой ион,
как правило, и более стабилен, его пик в масс-спектре будет интенсив-
нее, чем пик альтернативного иона (табл. 1, 2).

Таблица 1
Энергии ионизации фрагментов и интенсивности
пиков комплементарных ионов

Энергия Энергия
Интенсивность
ионизации + ионизации Интенсивность
Соединение AB-XY АВ
(АВ), (XY), XY+ (% к макс.)
(% к макс.)
эВ эВ

HOCH2 – CH2NH2 ≈ 7,6 2,3 ≈ 6,2 100

(CH3)2CH – CH2OH 7,55 100 ≈ 7,6 67

(CH3)3C – CH2OH 6,93 100 ≈ 7,6 7,4

(CH3)3C – CH2NH2 6,93 7,7 ≈ 6,2 100
ClCH2 – CH2OH 9,3 4,0 ≈ 7,6 100

BrCH2 – CH2OH 8,6 15,2 ≈ 7,6 100

98
 Таблица 2
Энергии ионизации фрагментов и интенсивности пиков
в масс-спектрах альдегидов

Фрагмент,
Интенсив- Фрагмент, Интенсив-
энергия
Соединение ность энергия иониза- ность
ионизации
(% к макс.) ции (эВ) (% к макс.)
(эВ)

Бутаналь С2Н4 – 10,5 3,4 С2Н4О – 9,5 16,5

Пентаналь С3Н6 – 9,8 2,4 С2Н4О – 9,5 26,4
Гексаналь С4Н8 – 9,6 16,1 С2Н4О – 9,5 15,0
2-метилпентаналь С3Н6 – 9,8 1,7 С3Н6О – 9,0 25,1
3-метилпентаналь С4Н8 – 9,3 27,0 С2Н4О – 9,5 5,9

Установлено, что если разница в энергиях ионизации альтернативных

радикалов составляет более 0,3 эВ, пик иона с меньшей энергией иони-
зации доминирует в масс-спектре. Если же различия в энергиях иони-
зации составляют менее 0,3 эВ, интенсивности пиков примерно равны.
Правило Стивенсона выполняется и для распада с перегруппировкой:
AY+• + BX ← ABXY+• → AY + BX+•.
В этом случае в результате реакции образуются нейтральная молеку-
ла и катион-радикал, т. е. за заряд конкурируют две молекулы. Катион-
радикалом становится та молекула, энергия ионизации которой ниже.
Следует учитывать, что правило Стивенсона описывает реакции с
термодинамическим контролем и не применимо для реакций с кинети-
ческим контролем.

Правило распада четноэлектронных ионов. В соответствии с правилом

распада четноэлектронных ионов они распадаются в основном с выбро-
сом молекул, а не радикалов. Таким образом, из катионов образуются
прежде всего катионы, а не катион-радикалы.
Это связано с тем, что процесс разрыва связи с образованием двух ра-
дикалов наиболее энергоемкий. Учитывая также, что стабильность ради-
кальных частиц меньше, чем молекул или катионов, такой процесс не мо-
жет конкурировать с альтернативным отщеплением молекул.
В результате фрагментации заряд четноэлектронного иона может
сохраняться на том же атоме, что и у предшественника, а может и миг-
рировать.

99
 В общем виде реакция распада четноэлектронного иона выражается
следующим уравнением:
АВ+ → А+ + В.
Выгодность обратной реакции, идущей практически без энергии ак-
тивации, зависит от сродства молекул В к катиону А+. Чем выше это срод-
ство, тем активнее протекает реакция. Поскольку сродство к катиону
должно изменяться параллельно сродству к протону, то вероятность того,
что разные катионы АВ+ будут распадаться с образованием идентичного
иона А+, обратно пропорциональна величинам сродства к протону для
соответствующих молекул В.
Подтверждением этого служит сравнение выгодности отщепления
молекул аммиака, воды и хлороводорода протонированными молеку-
лярными ионами соответствующих аминов, спиртов и алкилхлоридов.
Так, аммиак (сродство к протону 9,1 эВ) практически не отщепляется из
МН+ аминов, пик, обусловленный выбросом молекулы воды (сродство к
протону 7,7 эВ) из МН+ спиртов, весьма интенсивен в их масс-спектрах
химической ионизации, а отщепление хлороводорода (сродство к про-
тону 6,4 эВ) из МН+ алкилхлорида является доминирующим процессом.
Правило степеней свободы. Еще одно правило, которое носит назва-
ние «правило степеней свободы», связывает интенсивность пика метаста-
бильного иона для вторичного распада фрагментного иона с размером
молекулярного иона.
Для гомологического ряда установлено, что десятичный логарифм от-
ношения интенсивности пика метастабильного иона для последующего
распада первичного фрагмента к интенсивности пика этого первичного
фрагмента линейно связан обратно пропорциональной зависимостью с
числом колебательных степеней свободы в исходном молекулярном ионе.
При этом следует исходить из того, что избыточная энергия моле-
кулярного иона распределяется пропорционально числу колебательных
степеней свободы в образующихся ионе и нейтральном фрагменте. Сле-
довательно, чем больший нейтральный фрагмент отщепился, тем мень-
шим будет разброс избыточной энергии фрагментного иона. Именно эта
энергия и обусловливает вторичные процессы распада.
Прочность химических связей. Энергия образования фрагментного
иона из нейтральной молекулы может быть представлена в виде суммы
энергии гомолитического разрыва конкретной связи в молекуле и энер-
гии ионизации соответствующего образовавшегося радикала.
Энергия связей атомов в молекуле органического соединения лежит,
как правило, в диапазоне 2–4 эВ, а энергия ионизации равна, как пра-

100
вило, 6–12 эВ. Следовательно, энергия ионизации является более важ-
ным фактором и влияние ее величины для различных фрагментов на ин-
тенсивность пиков ионов в масс-спектрах регламентируется правилом
Д. Стивенсона. Однако в тех случаях, когда конкурирующие процессы
приводят к ионам с близкой стабильностью, прочность связи становит-
ся решающим фактором.
Структурные и стереохимические факторы. Высокие энергии ионов в
масс-спектрометрии не всегда нивелируют различия, вызываемые про-
странственными характеристиками молекулы, и стерические факторы
оказывают максимальное влияние на структуру активированного ком-
плекса, наиболее наглядно проявляясь в перегруппировочных процессах.
При этом увеличение внутренней энергии М+• приводит к умень-
шению количеств продуктов перегруппировки, а уменьшение энергии
молекулярных ионов, например, при использовании ионизирующих
электронов с энергией 12–20 эВ, напротив, приводит к возрастанию от-
носительных интенсивностей пиков перегруппировочных ионов в ущерб
пикам осколочных ионов.
Ортоэффект. Одно из наиболее известных проявлений влияния струк-
турных различий – это ортоэффект. Оказалось, что масс-спектры по-
давляющего большинства ортозамещенных органических соединений
существенно отличаются от их мета- и пара-изомеров. Примером масс-
спектрометрического ортоэффекта служит фрагментация молекулярных
ионов алкилсалициловой кислоты, в спектрах ионизации электронами
которых наблюдаются интенсивные пики ионов, образующиеся в резуль-
тате отщепления молекулы спирта. Масс-спектры мета- и пара-изоме-
ров алкилсалицилатов пиков таких ионов не содержат.

1.8.2. Концепция локализации заряда

и неспаренного электрона

Вариантом интерпретации процессов распада в масс-спектрометрии

служит предположение о том, что в сложной молекуле распад иниции-
руется зарядом или неспаренным электроном, локализованными в наи-
более благоприятном месте молекулы.
Если рассматривать молекулярный ион, то для него необходимо вы-
делить основное, невозбужденное, состояние, т. е. удалить электрон с
высшей занятой молекулярной орбитали. Следовательно, наиболее бла-
гоприятные для неспаренного электрона и заряда места в молекулярном
ионе связаны с потерей электрона с минимальной энергией ионизации,

101
а энергетические требования в этом случае аналогичны известным в УФ-
спектроскопии для электронных переходов: σ < π < n.
Концепция локализации заряда и электрона становится тем более
справедливой, чем уже разброс избыточной энергии в М+•. В этом слу-
чае увеличивается и доля низкоэнергетических реакций, логарифмы кон-
стант скоростей которых меньше 8.
Радикальный центр и центр, несущий заряд, могут располагаться как
на одном атоме (например, удаление n-электрона), так и на разных ато-
мах (например, удаление электрона π-связи). Во фрагментных ионах эти
центры могут оказаться на значительном расстоянии друг от друга.

Фрагментация, удаленная от места локализации заряда. Существуют

также и случаи фрагментации, удаленной от места локализации заряда.
Примером является фрагментация анионов жирных кислот, когда отще-
пляются молекулы водорода и алкена. Для протекания такого процесса
необходима цепочка не менее чем из четырех атомов углерода в молеку-
ле, причем интенсивность процессов фрагментации возрастает с увели-
чением длины алкильной цепи.

1.8.3. Практические основы

интерпретации масс-спектров

Интепретация масс-спектрометрических данных зачастую оказыва-

ется проще по сравнению с интерпретацией в других спектральных ме-
тодах. Во многих случаях для установления структуры исследуемого сое-
динения достаточно обычных химических знаний.
Так, например, на рис. 56 приведен масс-спектр электронной иони-
зации исследуемого соединения.

Рис. 56. Масс-спектр электронной ионизации исследуемого соединения

102
 Видно, что самый тяжелый ион, зарегистрированный масс-спектро-
метром, имеет массу 148 Да, что соответствует молекулярной массе соеди-
нения. Масс-спектрометрия высокого разрешения позволяет установить
его точную массу, равную 148,0888 дальтон, что соответствует элемент-
ному составу С10Н12О.
Небольшое количество пиков фрагментных ионов в масс-спектре
свидетельствует об их сравнительно высокой устойчивости и энергети-
ческой выгодности образования, что обычно является характерным для
ароматических соединений.
Интенсивные пики ионов со значениями отношений массы к заря-
ду, равными 105 и 77, почти однозначно указывают на присутствие в со-
ставе исследуемого соединения фрагмента С6Н5СО–, что подтверждает-
ся также присутствием пика иона с отношением m/z = 51 и отсутствием
пика иона с отношением m/z = 91 [C6Н5СН2]+.
Оставшиеся 43 единицы массы могут быть обусловлены только на-
личием в молекуле исследуемого соединения пропильной или изопро-
пильной групп.
Далее пик иона с величиной отношения массы к заряду, равной 120, сви-
детельствует об отщеплении из молекулярного иона молекулы этилена, что
возможно только в случае наличия в молекуле пропильного заместителя.
Таким образом, на рис. 56 представлен масс-спектр бутирофенона.
Для осуществления еще одного варианта расшифровки полученного
масс-спектра целесообразно прежде всего свериться с компьютерными
библиотеками масс-спектров. В идеале поставленная задача может быть
полностью решена уже на этой стадии.
Если библиотека масс-спектров не предоставляет однозначного от-
вета, следует обратить внимание на общий вид спектра: отметить пара-
метры съемки, наиболее интенсивные пики, характерные группы пиков.
Если, например, спектр характеризуется большим числом фрагментов,
пики которых имеют все большую интенсивность при движении вниз по
шкале масс, скорее всего исследуемый образец является алифатическим
соединением. Напротив, редкие интенсивные пики характерны для аро-
матических структур.
Однако основную работу со спектром следует начинать с установле-
ния пика молекулярного иона.
Для того чтобы считаться молекулярным, ион должен удовлетворять
следующим четырем необходимым, но не достаточным, условиям:
иметь самую большую массу в спектре;
zz
  
быть нечетноэлектронным;
zz
  
быть способным образовывать важнейшие ионы с большой массой
zz
  
за счет выброса реальных нейтральных частиц;
включать все группы атомов элементов, наличие которых в анали-
zz
  
зируемом образце можно увидеть по фрагментным ионам.

103
 Если хотя бы одно из этих условий не выполняется, ион не молеку-
лярный, а если выполняются все четыре условия, то ион может быть мо-
лекулярным.
Анализируя область молекулярного иона можно получить следую-
щую информацию:
zzмасса молекулярного иона – это молекулярная масса исследуемо-
  
го соединения;
zzсоотношение пиков нуклидов позволяет установить примерный
  
элементный состав исследуемого соединения;
zzизмерение точной массы молекулярного иона с помощью масс-
  
спектрометрии высокого разрешения позволяет установить точный эле-
ментный состав исследуемого соединения;
zzотносительная интенсивность пика молекулярного иона позволя-
  
ет сделать определенные предположения о структуре и принадлежно-
сти исследуемого соединения к тому или иному классу. Например, для
углеводородов относительная интенсивность пика молекулярного иона
в полном ионном токе увеличивается по мере увеличения степени нена-
сыщенности соединения.
Благодаря тому, что большинство химических элементов имеют не-
сколько стабильных нуклидов, элементный состав ионов можно с опре-
деленной степенью надежности установить даже по обычным спектрам
низкого разрешения.
В табл. 3 представлены данные по природной распространенности ну-
клидов важнейших для органических соединений элементов. Названия
элементов А, А + 1, А + 2 указывают на то, какой нуклид кроме основно-
го эти элементы имеют.

Таблица 3
Природная распространенность изотопов химических элементов

Интенсивность, Интенсивность,
Тип % (относитель- % (относительно Тип
Элемент Нуклид
нуклида но суммы наиболее распростра- элемента
нуклидов) ненного нуклида)
Водород 1
Н A 99,985 100,00
A
2
D A+1 0,015 0,02
12
Углерод C A 98,89 100,00
13
A+1
C A+1 1,11 1,12
14
Азот N A 99,64 100,00
15
A+1
N A+1 0,36 0,37

104
 Окончание табл. 3
Интенсивность, Интенсивность,
Тип % (относитель- % (относительно Тип
Элемент Нуклид
нуклида но суммы наиболее распростра- элемента
нуклидов) ненного нуклида)
16
O A 99,76 100,00
Кислород 17
O A+1 0,04 0,04
A+2
18
O A+2 0,20 0,20
19
Фтор F A 100,00 100,00 A
28
Кремний Si A 92,18 100,00
29
Si A+1 4,71 5,11
A+2
30
Si A+2 3,12 3,38
31
Фосфор P A 100,00 100,00 A
32
Сера S A 95,02 100,00
33
S A+1 0,75 0,79
34
S A+2 4,21 4,44 A+2
36
S A+4 0,11 0,11
35
Хлор Cl A 75,40 100,00
37
A+2
Cl A+2 24,60 32,63
79
Бром Br A 50,57 100,00
81
A+2
Br A+2 49,43 97,75
127
Иод I A 100,00 100,00 A

Определение элементного состава соединения следует начинать с

пика М + 2, учитывая при этом, что в случае присутствия в молекуле не-
скольких атомов (А + 2)-элементов в спектре могут проявиться интен-
сивные пики М + 4, М + 6 и т. д.
Правило, для проверки наличия в составе исследуемой молекулы ос-
новных (А + 2)-элементов формулируется следующим образом: если ин-
тенсивность пика М + 2 составляет менее 3 % от интенсивности пика М,
исследуемое соединение не содержит атомов хлора, брома, серы и кремния.
После этого следует перейти к определению присутствия в молекуле ис-
следуемого соединения (А + 1)-элементов путем рассмотрения интенсивно-
сти пика М + 1, а также интенсивности пика Ф + 1 для фрагментных ионов.
К (А+ 1)-элементам в органических соединениях относятся углерод,
водород и азот. Поскольку природное содержание дейтерия очень мало и
начинает проявляться в спектрах соединений только при его очень высо-

105
ком содержании, присутствие дейтерия в исследуемом соединении мож-
но исключить.
Углерод – важнейший элемент органических соединений и в зави-
симости от источника получения анализируемого образца содержание
нуклида 13С может колебаться от содержания 12С в диапазоне значений
1,08–1,12 %. На практике, при интерпретации масс-спектров обычно ис-
пользуется величина отношения 13С к 12С, равная 1,1 %.
Так, наличие одного атома углерода в молекуле метана приводит к
появлению наряду с пиком М+• с величиной отношения массы к заря-
ду, равного 16, пика иона с отношением массы к заряду, равным 17, и ин-
тенсивностью 1,1 % от М+• за счет молекул 13СН4, количество которых в
природе составляет 11 молекул на каждые 1000 молекул 12СН4.
Увеличение числа атомов углерода в молекуле приводит к увеличе-
нию интенсивности пика М + 1 до величины 1,1 n %, где n – число ато-
мов углерода в молекуле. Следовательно, для определения числа атомов
углерода в исследуемой молекуле необходимо разделить интенсивность
пика М + 1 в процентах от М на 1,1.
Для большинства элементов, входящих в состав органических соеди-
нений, установлено следующее соответствие между валентностью и мас-
сой наиболее распространенного нуклида: либо оба числа четные, либо –
нечетные. Исключение из этого – азот, что позволило сформулировать
следующее азотное правило:
если исследуемое соединение содержит четное число атомов азо-
zz
  
та или атомов азота в его составе нет, то его молекулярная масса четная;
если число атомов азота нечетное, молекулярная масса исследуемо-
zz
  
го соединения тоже нечетная.
Азот является (А + 1)-элементом, причем природная распространен-
ность нуклида 15N составляет примерно 0,4 % от 14N. Поскольку помимо
азота только углерод вносит заметный вклад в интенсивность пика А + 1,
пользуясь различиями в интенсивностях нуклидов 13С и 15N и азотным
правилом, можно оценить число атомов азота в молекуле.
Когда получена исчерпывающая информация о молекулярном ионе,
следует перейти к рассмотрению фрагментных ионов в соответствии со
следующей их классификацией:
наиболее тяжелые ионы, образующиеся из М+• в результате выбро-
zz
  
са простейших частиц, т. е. без существенной перестройки структуры ис-
ходной молекулы;
ионы, имеющие наиболее интенсивные пики в масс-спектре, ха-
zz
  
рактеризуют серии ионов, различающихся на гомологическую разность,
равную 14 а.е.м.
В табл. 4 представлены гомологические серии ионов наиболее рас-
пространенных классов органических соединений.

106
 Таблица 4
Гомологические серии ионов некоторых классов органических соединений

Класс соединения Формула m/z

+
Алканы CnH 2n+1 15, 29, 43, 57, 71, 85 …
+
Алкены, нафтены CnH 2n-1 27, 41, 55, 69, 83 …
Алкины, диены CnH+2n-3 25, 39, 53, 67, 81 …
+
Спирты, простые эфиры CnH2n+1O 31, 45, 59, 73, 87 …
+
Альдегиды, кетоны CnH2n-1O 29, 43, 57, 71, 85 …
Кислоты, сложные эфиры CnH2n-1O2+ 45, 59, 73, 87, 101 …
Тиолы, сульфиды CnH2n+1S+ 47, 61, 75, 89, 103 … (по 32S)
Амины CnH2n+2N+ 30, 44, 58, 72, 86, 100 …
Алкилхлориды CnH2nCl+ 35, 49, 63, 77, 91, 105 … (по 35Сl)
Алкилфториды CnH2nF+ 19, 33, 47, 61, 75 …
Алкилбромиды CnH2nBr+ 79, 93, 107, 121 … (по 79Br)
Алкилиодиды CnH2nI+ 127, 141, 155, 169 …
Нитрилы CnH2n-2N+ 40, 54, 68, 82, 96 …
Алкилбензолы 38, 39, 50-52, 63-65, 75-78, 91, 105, 119

Необходимо учитывать, что интенсивности пиков фрагментных ионов

первого и третьего типов могут быть незначительными.
При расшифровке масс-спектров, полученных в режиме «газовая хро-
матография–масс-спектрометрия», часто сталкиваются с хроматографи-
ческими пиками ионов с массами 73, 147, 207, 281, 355 и т. д. Этот набор
обусловлен выбросами фрагментов наиболее распространенных поли-
диметилсилоксановых неподвижных жидких фаз из используемой для
разделения хроматографической колонки в источник ионизации масс-
спектрометра.
 Глава 2
ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРАЛЬНЫЙ АНАЛИЗ

Использование масс-спектрометра в качестве детектора при хрома-

тографических разделениях дало толчок интенсивному развитию таких
комбинированных методов, как:
газовая хроматография с масс-селективным детектированием;
zz
  
высокоэффективная жидкостная хроматография с масс-селектив-
zz
  
ным детектированием;
сверхкритическая флюидная хроматография с масс-селективным
zz
  
детектированием;
капиллярный электрофорез с масс-селективным детектированием.
zz
  
Каждый из перечисленных методов имеет свои специфические осо-
бенности, связанные с характеристиками агрегатного состояния фаз хро-
матографической системы и состыковки разделительного устройства с
масс-спектрометром.

2.1. ГАЗОВАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

С МАСС-СЕЛЕКТИВНЫМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ

На современном этапе применения масс-спектрометрического детек-

тирования в газовой хроматографии является наиболее распространен-
ной разновидностью органической масс-спектрометрии.
Использование масс-селективного детектора в газовой хроматогра-
фии абсолютно логично, поскольку оба метода применяются для анализа
смесей органических соединений, находящихся в газообразном состоя-
нии, и обладают приблизительно одинаковой чувствительностью.
Единственная проблема для объединения этих двух методов в одном
приборе – это существенное различие в величинах их рабочих давлений:
газовая хроматография работает при атмосферном давлении (100 кПа
и выше), а масс-спектрометрия – в условиях глубокого вакуума (10‾6–
10‾ 7 кПа).

108
 В 1957 г. были сформулированы, а затем и реализованы на практике
основные принципы стыковки газового хроматографа и масс-спектроме-
тра путем создания специальных устройств – интерфейсов.
Интерфейс должен выполнять следующие функции:
zzпонижение давления на выходе из газохроматографической колон-
  
ки от атмосферного до 10‾4–10‾5 кПа;
zzудаление из газового потока избытка газа-носителя.
  
Существуют два основных типа соединительных устройств-интер-
фейсов:
zzинтерфейс с непосредственным соединением;
  
zzинтерфейс – молекулярный сепаратор.
  
В системах первого типа газовый хроматограф – масс-спектрометр,
роль интерфейса с непосредственным соединением выполняет делитель
потока, позволяющий направлять в масс-спектрометр через игольчатый
вентиль или узкий капилляр-ограничитель только небольшую часть об-
щего газового потока, выходящего из хроматографической колонки.
В основе функционирования этих устройств лежит уравнение, свя-
зывающее величину массового потока Q с величиной давления Р и вели-
чиной пропускания С:
Q = P C.
Так, для одного и того же потока при уменьшении давления Р от ат-
мосферного до 17 кПа, величина пропускания С увеличивается в 760 раз.
Принципиальная схема устройства игольчатого вентиля приведена
на рис. 57.
Игольчатые вентили, как правило, характеризуются значительными
мертвыми объемами, до величины V = 0,1 см3. Поскольку откачка мерт­
вого объема V происходит по экспоненциальному закону с постоянной
времени τ = V/C, то с увеличением пропускания С постоянная време-
ни τ соответственно уменьшается по-
чти на три порядка. Благодаря этому
уменьшается расширение хромато-
графических пиков, обусловленное
наличием мертвого объема, что осо-
бенно существенно для капиллярных
колонок, для которых длительность
пиков составляет всего 6–10 с. Для
потока 20 см3/мин и мертвого объе-
ма 0,1 см3 постоянная времени равна
0,3 с, что приемлемо для насадочных Рис. 57. Игольчатый вентиль для
колонок, но слишком велико для ка- соединения газохроматографической
пиллярных. колонки с масс-детектором

109
 При использовании игольчатых вентилей желательно присоединять
их так, чтобы пространство возле стебля иглы находилось в области вы-
сокого вакуума, где пропускание увеличивается на 2–3 порядка.
Соединительные линии до и после игольчатого вентиля обычно вы-
полнены из остеклованных металлических трубок.
При использовании капилляров-ограничителей их размеры выбирают
в соответствии с желаемой величиной потока. Так, например, если для
ионизации исследуемых соединений используется способ химической
ионизации, то поток газа-реагента метана может быть до 15 см3/мин. Та-
кой поток обеспечивает капилляр длиной 30–40 см с величиной внутрен-
него диаметра 0,12 мм. Для потока 1–2 см3/мин внутренний диаметр ка-
пиллярного ограничителя должен быть около 0,06 мм.
Материалом для капилляра часто служит платина, однако следует
учитывать возможное проявление платиновой поверхностью повышен-
ной активности, которая может зависеть от условий хроматографическо-
го разделения и от свойств используемой неподвижной жидкой фазы.
Ограничителем может служить и сама капиллярная колонка, которая
соединяется с масс-детектором через отрезок капилляра с внутренним
диаметром 0,3 мм. В этом случае, давление газового потока на выходе из
колонки снижается примерно до 13 кПа .
Эффективность такой системы достаточно низкая (1–10 %), и обо-
гащения исследуемого образца не происходит. Однако этот способ очень
прост, удобен для всех типов колонок, и масс-спектрометр в этом случае
не оказывает влияния на работу хроматографической колонки.
Еще одним вариантом интерфейса этого типа является соединение с
открытым разделительным устройством.
В интерфейсе такого типа строго постоянная часть газового потока
из капиллярной колонки вводится в масс-спектрометр, а остальная из-
быточная часть сбрасывается в атмосферу. Входной линией и ограничи-
телем обычно служит платиновый капилляр, присоединенный к источ-
нику ионов масс-спектрометра через отрезок тефлоновой трубки. Чтобы
не допустить попадания кислорода из атмосферы в масс-спектрометр,
соединительное устройство заключают в специальный кожух, постоян-
но продуваемый потоком благородного газа со скоростью 10–15 см3/мин.
Принципиальная схема интерфейса с открытым делителем потока,
позволяющая работать как с капиллярными, так и насадочными колон-
ками, приведена на рис. 58.
Разделительное устройство выполнено из двух стеклянных капил-
ляров, концы которых расположены друг от друга на расстоянии около
2 мм. Ограничительный капилляр имеет длину 27 см, внутренний диа-
метр 0,57 мм и обеспечивает поток 1,5–1,8 см3/мин.

110
 Рис. 58. Интерфейс с открытым делителем потока:
1 – поток из хроматографической колонки; 2 – остеклованная стальная трубка;
3 – газ для регулировки величины потока в масс-спектрометр (Не); 4 – капилляр;
5 – поток в масс-спектрометр; 6 – газ для продувки (Не)

В этих условиях конец хроматографической колонки находится при

атмосферном давлении и ее разделительная способность не нарушается.
Недостатком таких устройств является большая длина входной и ог-
раничительной линий, что может приводить к потерям лабильных сое-
динений, особенно в случае использования металлических капилляров.
Соединение хроматографической колонки с масс-спектрометром че-
рез обогатительные устройства – сепараторы – позволяет осуществить
концентрирование компонентов исследуемого образца перед вводом в
источник ионизации и тем самым повысить чувствительность опреде-
ления.
К настоящему времени предложено много разных типов молекуляр-
ных сепараторов, из которых наибольшее распространение получили сле-
дующие три системы:
эффузионный сепаратор;
zz
  
струйный сепаратор;
zz
  
мембранный сепаратор.
zz
  
В эффузионном сепараторе газовый поток из хроматографической
колонки проходит через ограничитель давления в трубку со стенками из
спекшейся стеклянной крошки со сверхтонкими порами среднего диа-
метра около 10‾ 4 см. Трубка окружена вакуумной камерой, откачиваемой
форвакуумным насосом.
Принципиальная схема эффузионного одноступенчатого молекуляр-
ного сепаратора приведена на рис. 59.

111
 Рис. 59. Эффузионный одноступенчатый молекулярный сепаратор:
1 – поток из газового хроматографа; 2 – пористая стеклянная трубка;
3 – поток в масс-спектрометр; 4 – откачка

Во внутреннем объеме пористой трубки газовый поток может идти

в двух направлениях: или в масс-спектрометр, или откачиваться через
поры в вакуумную камеру.
При этом обогащение исследуемыми соединениями газового пото-
ка, поступающего в масс-спектрометр, будет иметь место когда в пори-
стой трубке поддерживается давление в диапазоне 65–650 Па. При таких
давлениях средняя длина свободного пробега молекул составляет около
10‾ 3 см, что превышает величину среднего диаметра пор. В этих условиях
каждая из молекул газа-носителя диффундирует через поры независимо
от других, и таким образом реализуется молекулярный поток.
Через капилляр в масс-спектрометр идет вязкостный поток, так
как величина внутреннего диаметра капилляра, равная, как правило,
2 · 10‾ 2 см, больше средней длины свободного пробега молекул, и по этой
причине обеспечивается одинаковая пропускная способность капилляра
абсолютно для всех молекул.
В том случае, если давление в пористой трубке слишком велико, по-
ток через поры не будет молекулярным, а если давление будет слишком
низким, поток в масс-спектрометр не будет вязкостным, и, следователь-
но, поток в обоих направлениях будет молекулярным, и обогащения не
произойдет.
Рабочие параметры сепаратора оцениваются с помощью таких харак-
теристик, как фактор обогащения и фактор эффективности.
Фактор обогащения рассчитывается как отношение величины концен-
трации анализируемого образца в газовом потоке, поступающем в масс-
спектрометр, к его концентрации в газовом потоке, выходящем из хро-
матографической колонки:
CMC
N= .
CГХ
Эффективность интерфейса оценивается величиной Y, представляю-
щей собой часть образца, поступающую в масс-спектрометр:

112
 QMC
Y = 100 %.
QГХ
Величины фактора обогащения и эффективности связаны между со-
бой соотношением
Y VГХ
=
N ⋅ ,
100 VMC
где VГХ – объемная скорость газового потока на выходе из колонки; VMC –
объемная скорость газового потока в масс-спектрометре.
На практике численные значения величин эффективности и факто-
ра обогащения рассчитываются с помощью следующих соотношений:
1
Y = ,
Vпор MHe
1+
VMC Mo
VГХ
N= ,
MHe
VМС + Vпор
Mo
где VГХ, Vпор, VMC – объемы газового потока из хроматографической ко-
лонки, проходящего через поры сепаратора и поступающего в масс-спек-
трометр соответственно; МНе, Мо – молекулярные массы гелия и иссле-
дуемого соединения.
Так, например, если исследуемое соединение характеризуется молеку-
лярной массой, равной 200 Да, а объемы газовых потоков, выходящих из
колонки, прошедших через поры и попадающих в масс-спектрометр, рав-
ны 20 см3/мин, 19 см3/мин и 1 см3/мин соответственно, то величина факто-
ра обогащения будет равна 5,4, а величина фактора эффективности – 27 %.
При обычном делении потока в этом же соотношении 20 : 1 величина
фактора эффективности оказывается равной только 5 %.
Основными недостатками эффузионных сепараторов являются сле-
дующие:
zzоптимизация только в узком интервале скоростей потоков;
  
zzвозможность сорбции и разложения нестабильных исследуемых ве-
  
ществ на пористой поверхности;
zzболее низкая эффективность, чем в других типах сепараторов.
  
Отдельные модификации эффузионного сепаратора позволяют устра-
нить некоторые из отмеченных недостатков. Стеклянная пористая труб-
ка заменялась на керамическую, серебряную или из нержавеющей стали.
Для придания металлическим поверхностям инертных свойств их подвер-
гали предварительной силанизации.
113
 В металлических и керамических пористых элементах размеры пор
изменяются в диапазоне от 5 · 10‾4 до 10‾5 см, что обеспечивает расшире-
ние диапазона проводимости эффузионной части.
Разработанный вариант сепаратора со сменными или регулируемыми
элементами позволил расширить интервал скоростей газового потока до
диапазона от 1 до 50 см3/мин.
Принципиальная схема устройства такого сепаратора приведена на
рис. 60.

4
Рис. 60. Щелевой молекулярный сепаратор с регулируемой проводимостью:
1 – поток из газового хроматографа; 2 – регулирующий винт;
3 – поток в масс-спектрометр; 4 – откачка

Эффузия происходит через регулируемую щель, существующую меж-

ду острыми краями двух концентрических колец и накрывающей их пла-
стиной диаметром около 2 см.
С помощью микрометрического винта размер щели может меняться
в диапазоне от 0 до 5 · 10–3 см. При полностью закрытой щели весь газо-
вый поток поступает в масс-спектрометр, при полностью открытой щели
сепаратор работает как вентиль, отводящий часть потока.
Действие струйного сепаратора основано на различии скоростей диф-
фузии разных газов в расширяющейся со сверхзвуковой скоростью газо-
вой струе, что обеспечивает протекание процесса фракционирования га-
зовой смеси.
Принципиальная схема устройства струйного сепаратора приведе-
на на рис. 61.
Газовый поток из хроматографической колонки проходит через огра-
ничитель и быстро расширяется в вакуумной камере. В свободно расши-
ряющейся струе устанавливается градиент давления, направленный к се-
редине струи. Скорость диффузии молекул в этой области зависит от их
молекулярных масс и пропорциональна их коэффициентам диффузии,
и таким образом эффект разделения оказывается связанным с условия-
ми вязкостного потока.

114
 Рис. 61. Струйный одноступенчатый молекулярный сепаратор:
1 – поток из газового хроматографа; 2 – выходное сопло; 3 – диафрагма;
4 – входное сопло; 5 – поток в масс-спектрометр; 6 – откачка

Середина струи, обогащенная более тяжелыми компонентами, вхо-

дит в приемное сопло источника ионизации масс-спектрометра, а пери-
ферическая часть струи, обогащенная более легкими компонентами, не
попадает в него и откачивается вакуумным насосом.
При использовании двухступенчатого струйного сепаратора первая
ступень откачивается форвакуумным насосом и остаточное давление в
ней составляет около 10–20 Па, вторая ступень откачивается диффузи-
онным насосом до величины давления около 0,1 Па.
Если на вход сепаратора поступает поток в 30 см3/мин, то после пер-
вой ступени он уменьшается до 2–4 см3/мин, а после второй ступени –
до 0,25 см3/мин. В таких условиях через первую ступень проходит 80 % от
общего количества анализируемого образца, через вторую – 50 %, а об-
щая эффективность системы составляет 40 %.
Величина среднего давления в расширяющейся струе должна быть
достаточной для обеспечения условия существования вязкостного пото-
ка в середине струи. Если это условие не соблюдается, разделение ком-
понентов газового потока не происходит.
Как правило, коэффициент разделения для первой ступени равен 12,
для второй ступени этот коэффициент равен 4, а для всей системы он ра-
вен 48.
Струйный сепаратор наиболее эффективен при скоростях потока
выше 10 мл/мин, если же поток менее 3–4 см3/мин, давление в струе мо-
жет быть слишком мало для поддержания сверхзвуковой скорости пото-
ка, и коэффициент разделения резко уменьшается.
Струйные сепараторы обычно изготавливают из нержавеющей ста-
ли, проводя предварительную силанизацию их внутренней поверхности,

115
а для анализа термически нестабильных соединений используются сте-
клянные сепараторы.
Достоинством струйного сепаратора является отсутствие мертвых
объемов, что позволяет избежать размывания хроматографических зон
исследуемых соединений.
Принципиальный недостаток струйного сепаратора заключается в
том, что весьма важным оказывается устройство и взаимное расположе-
ние сопел, и небольшие отклонения от оптимальных размеров могут от-
рицательно сказаться на эффективности.
Большинство систем конструируется с фиксированным расширитель-
ным соплом для потока до 20 см3/мин при атмосферном давлении. При
создании конструкции регулируемого струйного сепаратора изменение
расстояния между двумя соплами в диапазоне 0–1,4 мм позволило до-
стичь эффективности до 80 %.
В мембранном сепараторе камера, в которую вводится газовый по-
ток из хроматографической колонки, отделяется от вакуумной систе-
мы масс-спектрометра мембраной из силиконовой резины толщиной
0,025–0,040 мм.
Принципиальная схема устройства мембранного сепаратора приве-
дена на рис. 62.

Рис. 62. Мембранный молекулярный сепаратор:

1 – поток из газового хроматографа; 2 – мембрана из силиконовой резины;
3 – поток в масс-спектрометр; 4 – откачка

Молекулы газа-носителя и исследуемых соединений, проходя над

мембраной, диффундируют сквозь нее в масс-спектрометр. Проницае-
мость мембраны для органических веществ в 20–100 раз выше, чем для
гелия и других неорганических газов. По этой причине при изменении
температуры от 50 до 200 оС для мембраны площадью 15 см2 и толщиной
0,0025 см величина потока гелия в 30 см3/мин снижается до величин от
1 до 4 мл/мин. При использовании мембран площадью 1–2 см2 можно
получать поток в масс-спектрометр в пределах 0,3–0,6 см3/мин.

116
 Степень обогащения обычно составляет 10–20 %, а эффективность –
30–90 %.
Мембранный сепаратор может состоять из одной или двух ступеней.
В одноступенчатом сепараторе давление на выходе обычно соответству-
ет атмосферному, в двухступенчатом сепараторе давление на выходе пер-
вой ступени обычно равно атмосферному, а на выходе второй ступени со-
здается форвакуум.
Основные достоинства мембранных сепараторов следующие:
zzпоскольку давление в области мембраны равно атмосферному, вре-
  
мена удерживания разделяемых соединений не искажаются из-за несба-
лансированного потока, как это может иметь место при капиллярном ог-
раничителе;
zzвыходящий газовый поток, который может содержать 10–50 % от
  
общего количества исследуемого образца, можно направить в любой дру-
гой газохроматографический детектор;
zzвеличина мертвого объема сепаратора составляет менее 0,02 см3;
  
zzвозможность работы в большом интервале скоростей газового по-
  
тока как при низких скоростях – 8–10 см3/мин, так и при высоких – 60–
80 см3/мин;
zzодноступенчатый сепаратор не требует никакого дополнительно-
  
го насоса;
zzмембранные сепараторы относительно недороги.
  
Однако у мембранных сепараторов существуют и достаточно серьез-
ные недостатки:
zzоптимизация рабочей температуры. Нижний предел рабочих темпе-
  
ратур – 75–80 °С, верхний – 225–230 °С. При работе в условиях высоких
температур срок службы мембраны заметно уменьшается и возможна раз-
герметизация системы. Кроме этого, следует учитывать, что для каждого
исследуемого соединения существует оптимальная температура, при ко-
торой достигается компромисс между растворимостью и диффузией это-
го соединения в материал мембраны. При слишком высокой температуре
мала растворимость, а при слишком низкой температуре мала диффузия;
zzнекоторые из исследуемых соединений (например, первичные ами-
  
ны) могут взаимодействовать с материалом мембраны;
zzможет иметь место заметное расширение хроматографических зон.
  
Из других сепараторов известен серебряно-палладиевый сепаратор,
функционирование которого основано на уникальном свойстве сере-
бряно-палладиевой мембраны – высокой проницаемости для водорода
и практически полной непроницаемости для других газов и паров иссле-
дуемых органических соединений при температуре 250 °С.

117
 Этот сепаратор представляет собой электролитическую ячейку, состо-
ящую из двух палладиево-серебряных трубок, между которыми находит-
ся смесь гидроксидов калия и лития. Внутренняя трубка предназначена
для газа-носителя и служит анодом, внешняя трубка является катодом.
В такой ячейке используемый в качестве газа-носителя водород пол-
ностью удаляется из газового потока, и в масс-спектрометр попадают
только исследуемые соединения.
Основные достоинства этого сепаратора следующие:
zzэффективность, равная 100 %;
  
zzполное удаление газа-носителя;
  
zzотсутствие необходимости откачки интерфейса;
  
zzотсутствие размывания хроматографических зон;
  
zzотсутствие эффекта памяти.
  
Из недостатков серебряно-палладиевого сепаратора необходимо от-
метить:
zzограниченный интервал скоростей газового потока, зависящий от
  
zzустройства интерфейса;
  
zzограниченный интервал рабочих температур (200–250 °С);
  
zzвозможность химических превращений анализируемых соединений;
  
zzнеобходимость использования в качестве газа-носителя только во-
  
дорода;
zzмедленное удаление газа-носителя при загрязнении палладиево-се-
  
ребряной трубки соединениями серы и иода.
К мембранным сепараторам относится и тефлоновый сепаратор, дей-
ствие которого основано на его высокой проницаемости для гелия при
температурах выше 250 °С.
Такой сепаратор состоит из тефлонового капилляра длиной 200 см,
внутреннего диаметра 0,025 см и толщиной стенок 0,01 см, который по-
мещается в откачиваемую форвакуумным насосом вакуумную камеру.
Эффективность такого сепаратора достигает 80–90 %, а коэффициент
обогащения – до 200.
Основными недостатками этого сепаратора являются:
zzвозможные дискриминации исследуемых органических соедине-
  
ний;
zzвозможное размывание хроматографических зон;
  
zzвозможное искажение времен удерживания анализируемых соеди-
  
нений.
Следует учитывать, однако, что стыковка хроматографа и масс-спект-
рометра представляет собой некоторый компромисс, поскольку давление
в ионном источнике оказывается несколько выше его идеального рабо-
чего давления, а выходной участок хроматографической колонки функ-

118
ционирует в условиях вакуума. Отмеченные обстоятельства несколько
ухудшают разрешающую способность этого комбинированного метода.
Таким образом, этот метод, прежде всего, предназначен для анализа
смесей органических соединений и заключается в их разделении на ко-
лонке хроматографа с последовательным выходом компонентов из колон-
ки в ионный источник масс-спектрометра, где происходит их ионизация.
Масс-спектрометр должен проводить запись спектра (сканирование)
с достаточной частотой, чтобы зарегистрировать масс-спектр каждого
соединения несколько раз. Это условие важнейшее, поскольку концен-
трация вещества на выходе из хроматографической колонки очень бы-
стро изменяется. Следовательно, в зависимости от того, на восходящей
или нисходящей стороне хроматографического пика записывается масс-
спектр, будут дискриминированы или малые, или большие массы.
Безусловно, лучшим будет спектр, зарегистрированный на вершине
хроматографического пика, где максимальна концентрация вещества и
минимальны ее изменения во времени. Желательно получить 5–10 спек-
тров каждого компонента смеси, а для улучшения качества спектра часто
необходимо проводить усреднения и вычитания фона.
Именно по этой причине, времяпролетные анализаторы масс, обес-
печивающие регистрацию до 500 спектров в секунду, имеют преимуще-
ства по сравнению с секторными и квадрупольными анализаторами, по-
зволяющими фиксировать не более 1–10 спектров за секунду.
Очень важна скорость сканирования и для количественного анализа.
Недостаточное число сканирований приводит к значительному искаже-
нию площади хроматографического пика. Современные приборы позво-
ляют сканировать спектр за 0,1–0,5 с, что удовлетворительно сочетается
с шириной хроматографического пика, составляющей, как правило, не-
сколько секунд. Если учесть, что средний хромато-масс-спектрометри-
ческий анализ длится 30 мин, при скорости сканирования 0,3 с, в памяти
компьютера должно остаться 6000 спектров. Этот факт наглядно демонс-
трирует невозможность получения качественных результатов без стыков-
ки прибора с мощным компьютером. Времяпролетные спектрометры поз-
воляют регистрировать 100 и более полных масс-спектров в секунду. Эта
особенность привела к созданию быстрой хромато-масс-спектрометрии
(Rapid GC-MS), позволившей сократить время анализа смесей в 5–10 раз.
Помимо увеличения надежности качественного и количественного
анализа, ускорение регистрации масс-спектров позволяет получать ка-
чественные масс-спектры даже в случае неразрешенных хроматографи-
ческих пиков.
Компьютерная обработка спектров с построением масс-хромато-
грамм по каждому значению отношения m/z с последующим определе-

119
нием положения максимумов соответствующих пиков и построением ре-
конструированной хроматограммы и реконструированных масс-спектров
дает возможность математически решать хроматографические и масс-
спектрометрические проблемы коэлюирования.
Возможности компьютерной обработки результатов (деконволюции)
для идентификации компонентов смеси, выходящих из хроматографиче-
ской колонки в виде перекрывающихся зон, представлены на рис. 63, 64.

Рис. 63. Фрагмент хроматограммы без компьютерной обработки

Рис. 64. Результаты компьютерной обработки

13-секундного фрагмента хроматограммы

Визуально можно выделить на представленном 13-секундном сег-

менте хроматограммы только 7–8 пиков. После компьютерной обработ-
ки этого сегмента хроматограммы удается надежно обнаружить 21 инди-
видуальное соединение (см. рис. 64).
Хромато-масс-спектральный анализ добавляет к масс-спектрометри-
ческой информации еще один очень важный параметр – время удержи-
вания каждого из компонентов анализируемой смеси. Именно благодаря
этому параметру появляется возможность во многих случаях проводить
качественный и количественный анализ изомеров, масс-спектры кото-
рых практически неразличимы.

120
 Хромато-масс-спектральный анализ позволяет также детектировать
ультрамикрокомпоненты на фоне высоких концентраций других соеди-
нений. Для этой цели используется мониторинг заданных ионов.
Еще одно направление метода ГХ/МС, появившееся в последнее де-
сятилетие, – коммерческие масс-спектрометры, использующие так на-
зываемую высокоэффективную двумерную газовую хроматографию (ГХ/
ГХ/МС). В таких приборах две капиллярные колонки, первая из которых
(длиной 30 м) содержит неполярную неподвижную фазу, а вторая (длиной
1 м) – полярную неподвижную фазу, последовательно соединяются друг с
другом через специальное устройство – криогенно-термический модуля-
тор. Модулятор улавливает элюат на выходе из первой колонки в течение
определенного времени, а затем коротким импульсом подает собранный
материал во вторую колонку, где происходит второй этап хроматографи-
ческого разделения. Затем разделенные компоненты поочередно подают-
ся в масс-спектрометр с времяпролетным анализатором.
Такой подход позволяет разделять сложнейшие смеси соединений не
только по температурам кипения, но и по полярности.
Тем не менее следует отметить, что число соединений, которые можно
проанализировать методом газовой хроматографии с масс-селективным
детектированием, значительно меньше, чем при использовании масс-
спектрометра с прямым вводом. Действительно, в последнем случае мож-
но получить масс-спектр соединения, обладающего хотя бы слабой лету-
честью в условиях глубокого вакуума и температуре 300–400 °С, не говоря
уже об альтернативных методах ионизации (бомбардировка быстрыми
атомами, полевая десорбция, десорбционная химическая ионизация).
При использовании метода ГХ/МС необходимо, чтобы вещество
прошло через колонку газового хроматографа при атмосферном давле-
нии и температуре 250–300 °С, а в некоторых случаях до 400 °С. Это об-
стоятельство обусловливает невозможность анализа без предваритель-
ной дериватизации труднолетучих, высокополярных, термолабильных
соединений.
Для реализации этих возможностей на практике в методе реакционной
хромато-масс-спектрометрии перед колонкой хроматографа или между
колонкой и масс-спектрометром устанавливается реакционная камера,
в которой можно осуществлять заданные превращения анализируемых
соединений. В таком варианте дериватизация, разделение и анализ ком-
понентов пробы осуществляются в режиме онлайн.
Реакционная хромато-масс-спектрометрия может использоваться для
улучшения разделения компонентов смеси или для проведения структур-
ных анализов. Например, дейтерирование алкенов в реакционной камере
позволяет установить положение двойной связи в молекуле.

121
 К комбинированным методам следует отнести и объединение ГХ/МС
с различными деструктивными методами, которые позволяют проводить
анализы в режиме реального времени.
Наибольшую распространенность получила комбинация ГХ/МС с пи-
ролизом. Пиролитическая система в этом случае может быть подсоедине-
на непосредственно к ГХ/МС-системе (пиролитическая ГХ/МС).
Эти методы наиболее эффективны при исследовании разнообразных по-
лимеров, особенно синтетических, и позволяют определять их микрострук-
туру, пространственное строение, состав, всевозможные примеси и добав-
ки, изучать механизм и кинетику термических процессов и многое другое.
В таких комбинированных системах, помимо пиролизеров, можно
использовать различные реакционные системы, в частности, на базе ге-
терогенных катализаторов.
В последнее время широкое распространение получила масс-спект-
рометрия изотопных отношений, основанная на прецизионном измере-
нии соотношений стабильных нуклидов 13С/12C, 15N/14N, 18O/16O, 34S/32S,
2
H/1H в различных органических и неорганических объектах.
Соответствующие приборы обычно включают специальную систе-
му для превращения исследуемых веществ в газы, удобные для после-
дующего исследования масс-спектрометрическим методом. Наиболее
эффективными являются приборы, включающие специальную камеру
сжигания, расположенную между газовым хроматографом и масс-спек-
трометром. В этом случае нуклидное соотношение можно определять для
каждого из компонентов смеси, поочередно элюируемого из хроматогра-
фической колонки.

2.2. ВЫСОКОЭФФЕКТИВНАЯ ЖИДКОСТНАЯ

ХРОМАТОГРАФИЯ С МАСС-СЕЛЕКТИВНЫМ
ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ

Очевидно то, что уже в ближайшее время лидирующее положение в

аналитической хроматографии займут многочисленные варианты ком-
бинированного метода высокоэффективной жидкостной хроматогра-
фии-масс-спектрометрии (ЖХ/МС), поскольку они могут успешно ре-
шить проблему анализа тяжелых полярных термолабильных соединений.
При всей принципиальной очевидности такого решения создать эф-
фективный метод на основе объединения жидкостного хроматографа с
масс-спектрометром оказалось не столь простой задачей.
Для нормальной работы жидкостного хроматографа желательно, что-
бы соединение его с масс-спектрометром не оказывало слишком сильно-

122
го влияния на основные характеристики процесса хроматографического
разделения, а именно:
zzне накладывало ограничения на виды используемых для разделе-
  
ния подвижных растворителей, величину скорости потока подвижного
растворителя;
zzне препятствовало возможности выполнения разделений в услови-
  
ях градиентного элюирования;
zzне исключало возможности применения летучих и нелетучих бу-
  
ферных растворов;
zzпозволяло применять реагенты в виде ионных пар.
  
Само соединительное устройство, интерфейс, в свою очередь долж-
но обеспечить:
zzвысокую степень обогащения анализируемого образца в газовом по-
  
токе по отношению к растворителю;
zzвысокую эффективность переноса образца из хроматографической
  
колонки в источник ионизации масс-спектрометра;
zzотсутствие расширения хроматографических зон;
  
zzвозможность испарения малолетучих компонентов анализируемо-
  
го образца.
Для обеспечения эффективного функционирования масс-спектроме-
тра, подключенного к жидкостному хроматографу, обязательно выполня-
ются следующие требования:
zzдля поддержания необходимого вакуума величина газового потока
  
на входе в масс-спектрометр не должна превышать 20 см3/мин;
zzдолжна существовать возможность:
  
– использования как можно большего числа существующих методов
ионизации анализируемых соединений;
– обеспечения сканирования полного масс-спектра, а также при необ-
ходимости и непрерывного детектирования только выбранных ионов;
– при использовании приемов химической ионизации применять
требуемые газы-реагенты;
– обеспечения анализа как положительных, так и отрицательных ионов;
zzдля получения высокой чувствительности шумы и фоновый сигнал
  
должны быть минимизированы, наложения от используемого для хро-
матографического разделения подвижного растворителя и от примесей
в нем должны быть малы.
Наиболее сложным моментом оказывается стыковка жидкостного
хроматографа с масс-спектрометром, поскольку масс-спектрометр обыч-
но работает в условиях глубокого вакуума (10‾ 7 кПа), а скорость потока
подвижной фазы через стандартную колонку жидкостного хроматографа
составляет примерно 1 мл/мин.

123
 В современной высокоэффективной жидкостной хроматографии в
качестве подвижных фаз довольно часто используются метанол и вода.
При испарении в источнике ионов 1 см3 метанола образуется 0,55 дм3
пара, а при испарении 1 см3 воды – 1,24 дм3 пара. Учитывая, что вакуум-
ная система масс-спектрометра может поддерживать требуемое для рабо-
ты давление только в том случае, если приток паров в ионный источник
не превышает 10 см3/мин, соединительный узел (интерфейс) системы
«жидкостный хроматограф – масс-спектрометр» должен эффективно осу-
ществлять обогащение анализируемым соединением примерно в 100 раз
за счет удаления избытка растворителя.
При этом следует учитывать, что проводящие жидкости могут быть
причиной возникновения электрической дуги в магнитных секторных
приборах, работающих в условиях высокой разности потенциалов, а не-
летучие неорганические соли, используемые в качестве буфера в хрома-
тографии, приводят к проводящим отложениям на линзах источника
ионов, вызывая расфокусировку прибора.
К настоящему времени существует уже значительное число интер-
фейсов «жидкостный хроматограф – масс-спектрометр».
Исторически первым интерфейсом можно считать ленточный тран-
спортер, появившийся в 1976 г.
Принципиальная схема интерфейса с движущимся ленточным тран-
спортером приведена на рис. 65.

Рис. 65. Интерфейс с движущимся ленточным транспортером:

1 – ионизационная камера; 2 – область электронного пучка; 3 – вакуумные уплот-
нения; 4 – инфракрасный испаритель; 5 – поток из колонки жидкостного хромато-
графа; 6 – привод транcпортера; 7 – откачка

Его основной конструкционной деталью является тонкая полиимид-

ная кольцевая лента. Элюат из колонки хроматографа попадает на лен-
ту, движущуюся по направлению к источнику ионов. На пути следова-

124
ния он проходит вдоль инфракрасных испарителей, которые переводят
в газовую фазу значительную долю подвижной жидкой фазы. Далее лен-
та проходит вакуумный замок, и в условиях вакуума остатки подвижно-
го растворителя откачиваются насосами. В месте перегиба ленты, в ион-
ном источнике, находится импульсный нагреватель, который переводит
в газовую фазу молекулы анализируемого образца, подвергающиеся элек-
тронному удару или химической ионизации. Двигаясь в обратном направ-
лении, лента очищается от возможных остатков анализируемого образца
благодаря использованию дополнительных испарителей, а иногда и рас-
творителей, и возвращается за новой порцией элюата в исходном (тео-
ретически чистом) виде.
Основные достоинства этого метода заключаются в том, что:
zzдля идентификации исследуемых веществ можно использовать
  
стандартные библиотеки масс-спектров электронного удара;
zzсуществует возможность работы со стандартными колонками для
  
жидкостной хроматографии, поскольку метод использует скорости потока
до 1,5 мл/мин. Такие потоки приемлемы при распылении элюата на ленту;
zzнеорганические соли, используемые в качестве буфера при хрома-
  
тографировании, не мешают анализу.
Тем не менее ленточные транспортеры не получили широкого при-
знания, поскольку лишь незначительно расширяли круг органических
соединений, доступных масс-спектрометрическому анализу. В ионном
источнике все равно требовался термический перевод вещества в газо-
вую фазу. Лента транспортера примерно через 10 прохождений оказыва-
лась настолько загрязненной, что приводило к наложению масс-спектров
друг на друга и мешало надежной идентификации. Качество спектров и
интенсивность характеристических ионов существенно зависели от ко-
личества образца, т. е. воспроизводимость была плохой. В настоящее вре-
мя ленточные транспортеры практически не используются.
Метод прямого ввода анализируемых жидких проб тоже следует рас-
сматривать, скорее, как историю масс-спектрометрии. Он более или ме-
нее активно использовался в 80-х гг. XX в., но уступил место более про-
грессивной технике, основанной на аналогичном принципе. Фактически
все современные интерфейсы «жидкостный хроматограф – масс-спект-
рометр», за исключением проточного варианта бомбардировки быстры-
ми атомами, могли бы быть названы прямым вводом жидкости.
Для реализации прямого ввода жидкости на выходе из хроматогра-
фической колонки устанавливается делитель потока, позволяющий на-
править часть элюата через диафрагму с отверстиями 2–5 мкм в диаме-
тре. Возникающая после прохождения диафрагмы струя мелких капель
движется с большой скоростью к источнику ионов. На пути следования
капли перемещаются через камеру испарения, где большая часть раство-

125
рителя переходит в газовую фазу и откачивается из системы. Оказываясь
в ионном источнике масс-спектрометра, молекулы анализируемого ве-
щества подвергаются химической ионизации, тогда как оставшиеся мо-
лекулы растворителя играют роль газа-реагента.
Основной недостаток метода – низкая скорость потока. При пото-
ках более 50 мкдм3/мин давление в источнике становится слишком вы-
соким. Поэтому требуется либо разделять поток элюента на выходе из
стандарт­ных хроматографических колонок, уменьшая тем самым чувст-
вительность метода примерно в 20 раз, либо использовать узкие колонки.
Кроме того, узкое отверстие диафрагмы постоянно засоряется, а до-
бавки неорганических солей к подвижной фазе приводят к быстрому
ухудшению работы масс-спектрометра.
В следующем варианте интерфейса поток жидкости, выходящий из
колонки хроматографа, направляется через капилляр в стеклянный рас-
пылитель, где элюат превращается в облако мелких капель, разорванных
концентрическим потоком гелия. Это облако перемещается внутри сте-
клянной испарительной камеры, стенки которой подогреваются, а дав-
ление поддерживается на уровне чуть ниже атмосферного. При этом про-
исходит частичное испарение используемого подвижного растворителя,
и размер капель уменьшается.
Испарительная камера заканчивается узким отверстием, за которым
следует сепаратор молекулярного пучка с вакуумной откачкой. Вылетая
из испарительной камеры, частицы приобретают высокую скорость бла-
годаря сужению потока. Поскольку более тяжелые молекулы анализиру-
емого вещества менее подвержены диффузии, чем атомы гелия или мо-
лекулы растворителя, только они и проходят в узкое входное отверстие
сепаратора, а из него в масс-спектрометр.
Частицы анализируемого вещества в ионном источнике подвергают-
ся химической или электронной ионизации. Получение спектров элек-
тронного удара является преимуществом метода, поскольку позволяет
использовать компьютерные библиотеки масс-спектров. Такой интер-
фейс может работать с потоками жидкости из хроматографа в диапазоне
от 0,1 до 1,0 см3/мин. Чувствительность метода для получения полного
масс-спектра лежит на уровне единиц нанограммов (10‾ 9 г). Этот метод
фактически заменил ленточный транспортер, хотя и не устранил недо-
статки, связанные с невозможностью работы с высокомолекулярными,
нелетучими и термолабильными соединениями.
Для ввода анализируемых проб в настоящее время широко использу-
ются методы, совместимые с такими методами ионизации, как терморас­
пыление, электрораспыление, плазмораспыление и химической иониза-
ции при атмосферном давлении.

126
 При этом поток, выходящий из колонки жидкостного хроматогра-
фа, направляется в нагреваемый капилляр. Диаметр капилляра – 0,1 мм,
что значительно больше по сравнению с отверстием для метода прямо-
го ввода жидкости. Это обстоятельство позволяет устранить случаи его
закупорки, что является серьезным недостатком способа прямого ввода
жидкости. Температура капилляра поддерживается на уровне температу-
ры кипения растворителя. В результате из капилляра вырывается струя
пара, которая попадает в ионизационную камеру.
При использовании плазмаспрея подача напряжения на разрядный
электрод или просто пучок электронов создает условия для химической
ионизации, причем роль газа-реагента играют пары растворителя.
При применении метода плазмораспыления замечено, что часто уда-
ется регистрировать ионы даже в случае выключенного электрода. Ана-
лиз этого эффекта привел к возникновению техники термораспыления.
Дело в том, что некоторые анализируемые соединения уже в растворе на-
ходятся в виде положительных или отрицательных ионов. Применяемые
в большинстве случаев в качестве растворителей в жидкостной хромато-
графии вода и метанол с добавками кислот и оснований могут протони-
ровать или депротонировать субстрат. Появлению заряда способствуют
также добавки электролитов, например ацетата аммония.
Струя пара, выходящая из капилляра, представляет собой аэрозоль
небольших заряженных капель. Нагретый источник ионов и работаю-
щие вакуумные насосы заставляют эти капли при движении уменьшать-
ся в размере. В конечном итоге градиент поля на каплях может достигать
критических значений, что приводит к устранению сольватной оболоч-
ки и появлению свободных ионов в газовой фазе.
Выталкивающий потенциал направляет эти ионы в узкое отверстие,
ведущее к анализатору, а избыток растворителя откачивается насосами.
Термоспрей и плазмаспрей применимы к уровням потоков жидкости
из хроматографа в диапазоне от 0,5 до 2,0 см3/мин, что позволяет работать
с обычными аналитическими колонками. Следует отметить нежелатель-
ность использования в качестве буфера нелетучих неорганических солей
из-за возможного образования отложений в источнике ионов.
В качестве недостатка метода можно отметить его плохую воспро-
изводимость. Интенсивность спектра, а также наличие или отсутствие
фрагментных ионов существенно зависят от состава раствора, наличия
добавок, температуры капилляра и источника ионизации. В связи с этим
важным становится выбор оптимальных условий регистрации спектра для
каждого анализируемого вещества.
Чувствительность метода лежит в очень широком диапазоне – от не-
скольких нанограммов до десятков микрограммов. Увеличение доли пи-

127
ков фрагментных ионов в спектре достигается увеличением потенциала
на выталкивающем электроде. Причиной тому становятся более эффек-
тивные столкновения разогнанных ионов с молекулами, так как в этой
части ионного источника давление достаточно высоко.
Как и в случае ГХ/МС, для ЖХ/МС также актуальны задачи увеличе-
ния экспрессности и повышения чувствительности. Одним из путей по-
вышения производительности и эффективности метода стало использо-
вание частиц неподвижной фазы размером менее 2 мкм и сверхвысокого
давления для подачи элюента (до 100 мПа). В результате возник метод
ультра-эффективной жидкостной хроматографии (УЭЖХ).
Стыковка УЭЖХ с времяпролетным масс-спектрометром привела к
существенному сокращению времени анализа, повышению его чувстви-
тельности и разрешающей способности по сравнению с уже существую-
щим методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Возможности метода УЭЖХ/МС в сравнении с методом ВЭЖХ/МС,
позволяющие сократить время анализа в 9 раз, а также повысить в 3 раза
чувствительность определения, сопоставлены на рис. 66, 67.

Скорость: в 9 раз быстрее

Рис. 66. Сопоставление скорости выполнения анализа

методами УЭЖХ/МС и ВЭЖХ/МС

Чувствительность: в 3 раза больше

Рис. 67. Сопоставление чувствительности анализа

методами УЭЖХ/МС и ВЭЖХ/МС

128
 Возможности метода УЭЖХ/МС в сравнении с методом ВЭЖХ/МС
по увеличению разрешения сопоставлены на рис. 68.

Разрешение: в 7 раз больше

Рис. 68. Сопоставление разрешения методами УЭЖХ/МС и ВЭЖХ/МС

Рис. 69. Совокупные преимущества метода УЭЖХ/МС (а) над ВЭЖХ/МС (б)

Совокупные преимущества метода УЭЖХ/МС над ВЭЖХ/МС, об-

условленные одновременной оптимизацией всех вышеперечисленных
характеристик, представлены на рис. 69, а, б.

129
 2.3. СВЕРХКРИТИЧЕСКАЯ
ФЛЮИДНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ
С МАСС-СЕЛЕКТИВНЫМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ

Помимо газа или жидкости в качестве подвижной фазы для хромато-

графического разделения органических соединений может служить веще-
ство, находящееся в сверхкритическом состоянии. В сверхкритической
флюидной хроматографии (СФХ) используемое в качестве подвижной
фазы вещество можно представить как очень плотный газ. Наиболее ча-
сто используемый оксид углерода (IV) в таком состоянии имеет свойства
промежуточные между жидкостью и газом, т. е. это плотный газ с высо-
кой сольватирующей способностью. Растворение образца в таком мате-
риале можно рассматривать как процесс, родственный переводу вещест-
ва в газовую фазу, но протекающий при достаточно низкой температуре.
Как уже отмечалось, основной проблемой стыковки жидкостного
хроматографа и масс-спектрометра является большой объем вещества
(растворителя), поступающего в ионный источник, что трудно совмести-
мо с условиями высокого вакуума в нем.
В СФХ поток подвижной фазы значительно меньше, чем в жидкост-
ной хроматографии и, следовательно, комбинация СФХ/МС осущест-
вима с меньшими сложностями по сравнению с ЖХ/МС. Фактически
метод СФХ/МС промежуточный между ЖХ/МС и ГХ/МС и в плане ин-
струментальных требований, и в плане свойств анализируемых соедине-
ний. Важно, что метод позволяет анализировать более тяжелые и более
термолабильные соединения по сравнению с ГХ/МС.
В 80-х гг. XX в. казалось, что этот метод может существенно потес-
нить ЖХ/МС благодаря большей разрешающей способности и уже суще-
ствующим в то время эффективным интерфейсам. Однако изобретение
электроспрея и создание метода капиллярного электрофореза отодвинули
СФХ/МС на вторые позиции. Тем не менее метод по-прежнему широко
используется для анализа пестицидов, силиконов, неионогенных ПАВ,
природных соединений и т. д.
Еще одно преимущество СФХ/МС над ГХ/МС представляет собой тот
факт, что в сверхкритическом состоянии вещество, используемое в каче-
стве подвижной фазы, – это отличный растворитель, который очень эф-
фективно экстрагирует органические соединения разных классов из образ-
цов пищи, полимерных материалов, биоты, объектов окружающей среды.
Существует большое разнообразие интерфейсов для стыковки сверх-
критического флюидного хроматографа с масс-спектрометром. Для этого

130
метода подходят практически все интерфейсы, используемые в ЖХ/МС,
хотя они могут быть и немного модифицированы.
Результаты анализа проб часто улучшаются при увеличении поляр-
ности подвижной фазы. Так, например, при использовании в СФХ/МС
электроспрея положительным образом сказывается добавление к подвиж-
ной фазе метанола или другого полярного органического растворителя.
Помимо электроспрея активно используется химическая ионизация
при атмосферном давлении. Применение ленточного транспортера, по-
тока частиц или специальных капиллярных ограничителей позволяет ра-
ботать в режимах электронного удара и химической ионизации.
Следует подчеркнуть, что при химической ионизации газом-реаген-
том служит не СО2, а метан, изобутан или аммиак. Последний часто ока-
зывается предпочтительным, поскольку процесс ионизации аммиаком
подвержен менее значительному влиянию изменений парциального дав-
ления СО2 в процессе анализа. Это обусловлено прежде всего очень низ-
ким сродством к протону молекулы углекислого газа. Некоторое «рас-
крытие» ионизационной камеры хотя и ухудшает чувствительность, но
позволяет получать классические спектры электронного удара.
Ионизация молекул образца осуществляется как напрямую, при их
взаимодействии с электронами, так и в результате перезарядки при взаи-
модействии с СО2+. Такие спектры перезарядки оказываются практически
аналогичными обычным спектрам электронного удара. Их даже можно
использовать для поиска по компьютерным библиотекам масс- спектров.

2.4. КАПИЛЛЯРНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

С МАСС-СЕЛЕКТИВНЫМ ДЕТЕКТИРОВАНИЕМ

Создание капиллярного варианта электрофореза повысило харак-

теристику разрешающей способности методов разделения компонен-
тов смесей (до 107 теоретических тарелок) и, как следствие, существенно
увеличило эффективность анализа, а стыковка электрофоретического ка-
пилляра с масс-спектрометром подняла этот метод на новый, более вы-
сокий уровень.
В данном случае не следует говорить о принципиально другой системе
ввода образца в масс-спектрометр, потому что в качестве интерфейса ис-
пользуются системы ЖХ/МС. Наилучших результатов удалось достигнуть
при использовании на выходе из колонки техники электрораспыления.
Возможно также использование техники ультразвукового распыления.

131
 Тем не менее сочетание капиллярного электрофореза с масс-спект-
рометрией по праву считается самостоятельным методом анализа пре-
жде всего для биологических молекул (белков, аддуктов с ДНК и т. д.).
Поскольку наряду с очень малым объемом пробы (менее 10-9 дм3) ка-
пиллярный электрофорез позволяет проводить сверхбыстрое разделение
компонентов смеси с шириной пика в несколько миллисекунд, то необ-
ходимо осуществлять и такое же быстрое сканирование спектра. Впе-
чатляющие результаты получены при использовании времяпролетного
анализатора с ортогональным ускорением и масс-спектрометрии с пре-
образованиями Фурье.
 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Бейнон, Дж. Масс-спектрометрия и ее применение в органической

химии / Дж. Бейнон. – М. : Мир, 1964. – 701 с.
Будзикевич, Г. Интерпретация масс-спектров органических соедине-
ний / Г. Будзикевич, К. Джерасси, Д. Уильямс. – М. : Мир, 1966. – 323 с.
Вульфсон, Н. С. Масс-спектрометрия органических соединений /
Н. С. Вульфсон, В. Г. Заикин, А. И. Микая. – М. : Химия, 1986. – 312 с.
Джонстон, Р. Руководство по масс-спектрометрии для химиков-ор-
гаников / Р. Джонстон. – М. : Мир, 1975. – 236 с.
Заикин, В. Г. Масс-спектрометрия малых циклов / В. Г. Заикин,
А. И. Микая, В. М. Вдовин. – М. : Наука, 1983. – 159 с.
Заикин, И. Г. Масс-спектрометрия синтетических полимеров /
В. Г. Заикин. – М. : ВМСО, 2009. – 332 с.
Заикин, В. Г. Химические методы в масс-спектрометрии органиче-
ских соединений / В. Г. Заикин, А. И. Микая. – М. : Наука, 1987. – 200 с.
Зенкевич, И. Г. Интерпретация масс-спектров органических соедине-
ний / И. Г. Зенкевич, Б. В. Иоффе. – Л. : Химия, 1986. – 175 с.
Исидоров, В. А. Хромато-масс-спектрометрическое определение сле-
дов органических веществ в атмосфере / В. А. Исидоров, И. Г. Зенкевич. –
Л. : Химия, 1982. – 136 с.
Лаваньини, И. Количественныe методы в масс-спектрометрии / И. Ла-
ваньини, Ф. Маньо, Р. Сералья. – М. : Техносфера, 2008. – 176 с.
Лебедев, А. Т. Масс-спектрометрия в органической химии / А. Т. Ле-
бедев. – М. : БИНОМ, Лаборатория знаний, 2010. – 493 с.
Леман, Т. А. Спектрометрия ионно-циклотронного резонанса /
Т. А. Леман, М. М. Берси. – М. : Мир, 1980. – 215 с.
Масс-спектрометрия органических соединений в начале ХХI века /
А. Т. Лебедев [и др.] // Журн. аналит. химии. – 2008. – Т. 63, № 12. –
С. 1236–1264.
Полякова, А. А. Молекулярный масс-спектральный анализ органиче-
ских соединений / А. А. Полякова. – М. : Химия, 1983. – 248 с.

133
 Полякова, А. А. Введение в масс-спектрометрию органических соеди-
нений / А. А. Полякова, Р. А. Хмельницкий. – Л. : Химия, 1966. – 204 с.
Тахистов, В. В. Органическая масс-спектрометрия / В. В. Тахистов. –
Л. : Наука, 1990. – 223 с.
Тахистов, В. В. Практическая масс-спектрометрия органических со-
единений / В. В. Тахистов. – Л. : ЛГУ, 1977. – 278 с.
Терентьев, П. Б. Масс-спектрометрия в органической химии /
П. Б. Терентьев. – М. : Высш. шк., 1979. – 223 с.
Терентьев, П. Б. Масс-спектрометрический анализ биологически ак-
тивных азотистых оснований / П. Б. Терентьев, А. П. Станкявичус. –
Вильнюс: Мокслас, 1987. – 280 с.
Хвостенко, В. И. Масс-спектрометрия отрицательных ионов в орга-
нической химии / В. И. Хвостенко. – М. : Наука, 1981. – 159 с.
Хмельницкий, Р. А. Масс-спектрометрия загрязнений окружающей
среды / Р. А. Хмельницкий, Е. С. Бродский. – М. : Химия, 1990. – 182 с.
Хмельницкий, Р. А. Хромато-масс-спектрометрия / Р. А. Хмельницкий,
Е. С. Бродский. – М. : Химия, 1984. – 216 с.
Хромато-масс-спектрометрия в России / В. Г. Заикин // Журн. ана-
лит. химии. – 2011. – Т. 66, № 11. – С. 1205–1209.
Чепмен, Дж. Практическая органическая масс-спектрометрия /
Дж. Чепмен. – М. : Мир, 1988. – 216 с.
Шеховцов, Н. А. Магнитные масс-спектрометры / Н. А. Шеховцов. –
М. : Атомиздат, 1971. – 232 с.
 ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение..................................................................................................... 3

Глава 1. Основы масс-спектрометрического анализа ............................... 6

1.1. Физические основы ионизации молекул и распада
молекулярных ионов ............................................................................... 6
1.2. Теоретическое описание процессов образования и распада
молекулярных ионов ................................................................................ 9
1.3. Принципиальная блок-схема масс-спектрометра ......................... 15
1.4. Системы ввода анализируемых проб .............................................. 18
1.5. Основные способы ионизации молекул исследуемых
соединений ............................................................................................. 22
1.6. Разделение ионов . ........................................................................... 62
1.7. Детектирование ионов .................................................................... 88
1.8. Основные правила и подходы к интерпретации масс-спектров . .... 96

Глава 2. Хромато-масс-спектральный анализ . .......................................108

2.1. Газовая хроматография с масс-селективным детектированием....108
2.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография
с масс-селективным детектированием .................................................122
2.3. Сверхкритическая флюидная хроматография
с масс-селективным детектированием ................................................ 130
2.4. Капиллярный электрофорез с масс-селективным
детектированием....................................................................................131

Список литературы .................................................................................133

 Учебное издание

Винарский Владимир Афанасьевич

Юрченко Руслан Александрович

МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ
И ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРАЛЬНЫЙ
АНАЛИЗ

Пособие

Редактор Н. Ф. Акулич
Художник обложки Т. Ю. Таран
Технический редактор Т. К. Раманович
Компьютерная верстка Г. И. Василевской
Корректор О. С. Сафронова

Подписано в печать 30.09.2013. Формат 60×84/16.

Бумага офсетная. Печать офсетная. Усл. печ. л. 7,9.
Уч.-изд. л. 9,1. Тираж 150 экз. Заказ 672.

Белорусский государственный университет.

ЛИ № 02330/0494425 от 08.04.2009.
Пр. Независимости, 4, 220030, Минск.

Республиканское унитарное предприятие

«Издательский центр Белорусского государственного университета».
ЛП № 02330/0494178 от 03.04.2009.
Ул. Красноармейская, 6, 220030, Минск.