AULA 4 - INTRODUÇÃO Á MICROBIOLOGIA

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PRINCÍPIOS DE

MICROBIOLOGIA

M.V. Profª Doutoranda Marina Gatto


Processos Bioquímicos e Biofísicos
 O que vem a sua mente quando pensa em
microbiologia?

 Por que estudar microbiologia?


 Estamos em intimo contato com eles.
 Relacionados a saúde e ao ambiente.
 Desempenham importante papel em muitos
alimentos e medicamentos
 Fornecem modelos úteis para muitos processos
vitais que todos os organismos realizam.

 Menos de 1% dos microrganismos causam doenças


(patogênicos)
 Ajudam a manter o equilíbrio da natureza

 Microrganismos aquáticos - fotossíntese


 Decomposição: organismos mortos, produtos
de excreção dos seres vivos e algumas
espécies de resíduos industriais.
 Reações bioquímicas realizadas pelos
microrganismos aproveitadas na indústria
de alimentos
 Iogurtes
 Cervejas
 Vinhos
 Pães
 Capacidade de sintetizar
antibióticos (substâncias
derivadas de um
organismo que matam ou
inibem o crescimento de
outros microrganismos)
 É a ciência que estuda os microrganismos
 um grande e diverso grupo de organismos
microscópicos
 podem ser encontrados como células únicas
agrupamentos celulares, com exceção dos vírus
 Ciência biológica que consegue realmente
unir o velho e o novo
 Ciência dinâmica com ramificações em
todos os aspectos da vida humana
 medicina, agricultura e meio ambiente
 Principais grupos estudados
 Bactérias, algas, fungos, vírus e
protozoários

 Abundantemente distribuídos na
natureza

 Maioria possui uma única célula


(unidade morfológica dos organismos
vivos)
 Variam em tamanho, desde os pequenos
vírus com 20 nm de diâmetro até os grandes
protozoários com 5 mm ou mais.

 Capazes de realizar seus processos vitais de


crescimento, geração de energia e
reprodução
 Associada ao estudo das células vivas e ao
seu funcionamento

 Associada ao estudo dos microrganismos,


especialmente as bactérias

 A microbiologia estuda:
 A diversidade e a evolução dos microrganismos
 O papel dos microrganismos no mundo
 1. Ciência biológica básica
 Oferece ferramentas de pesquisa ao estudo
dos processos biológicos na natureza

 2. Ciência biológica aplicada


 Lida com muitos problemas práticos da
medicina, agricultura e indústria
Onde usarei a microbiologia na
Medicina Veterinária?
 Raízes Históricas:

 Os antigos gregos, romanos e judeus contribuíram para o


entendimento do processo de disseminação de doenças;
 Doenças como a peste bubônica e a sífilis causaram
milhões de mortes, devido à falta de conhecimentos de
como controlar ou tratar infecções;
 O desenvolvimento de lentes de alta qualidade por
Leeuwenhoek tornou possível observar os microrganismos
e, mais tarde, formular a teoria celular.

https://www.youtube.com/watch?v=l2DHyDj_tgI
 Teoria Germinal das Doenças
 A teoria germinal das doenças afirma que os
microrganismos (germes) podem invadir outros
organismos e causar doenças.

 Estudos Iniciais
 Os progressos na microbiologia e a aceitação da teoria
germinal das doenças precisaram de que a idéia da
geração espontânea fosse refutada. Redi e Spallanzani
demonstraram que os organismos não cresciam da
matéria não-viva. Pasteur, com seus frascos com
“pescoço de cisne”, e Tyndall, com seu ar livre de
poeira, finalmente eliminaram a ideia da geração
espontânea.
 Contribuições de Pasteur
 Combateu a teoria da geração espontânea
 Estudou a produção de cerveja, vinhos e a doença
do bicho-da-seda e desenvolveu a primeira vacina
contra a raiva.
 Suas associações de microrganismo específicos a
determinadas doenças contribuíram para
estabelecer a teoria germinal.
Pasteur:
Frascos com “pescoço de cisne”
Pasteur:
Frascos com “pescoço de cisne”
Pasteur:
Frascos com “pescoço de cisne”
 Contribuições de Koch
 Koch desenvolveu seus
postulados que ajudaram no
estabelecimento definitivo da
teoria germinal das doenças.

 Desenvolveu técnicas para o


isolamento de organismos,
identificou o bacilo que causa a
tuberculose, desenvolveu a
tuberculina e estudou várias
doenças na África e na Ásia
 Trabalhos para controlar infecções
 Lister e Smmelweis contribuíram para melhorar a
higiene na medicina, aplicando a teoria germinal e
usando técnicas assépticas.
 Surgimento de campos especiais da microbiologia

 Imunologia – Jenner (varíola); Pasteur (raiva, pasteurela -


enfraquecer organismos)

 Virologia – Beijerinck (caracterizou os vírus); Reed


(agente da febre amarela)

 Quimioterapia – Ehrlich (substâncias químicas); Fleming


(penicilina); Domagk (sulfas);Waksman (estreptomicina)

 Genética e Biologia Molecular - Griffith (alteração de


bactérias); Avery. McCarty e Macleod (associação ao DNA);
Tatum e Badle (mutantes bioquímicos de Neurospora.
 A microbiologia tem estado na dianteira das
pesquisas em medicina e biologia, e os
microrganismos continuam desempenhando um
papel crítico na engenharia e terapia genéticas.
BACTÉRIAS PATOGÊNICAS:
MECANISMOS DE
PATOGENICIDADE E RELAÇÃO
COM O HOSPEDEIRO
Eucariotos

 Seres uni e pluricelulares


 Reino Plantae: plantas (fotossíntese)
 Reino Fungi: bolores e leveduras (absorção)
 Reino Protista: algas e protozoários (absorção,
ingestão e fotossíntese)
 Reino Animalia: demais seres vivos (ingestão)
 Procariotos:
 Seres unicelulares
 Menor complexidade de organização

 Vírus e estruturas subcelulares:


 Não são seres vivos!
Célula animal Célula vegetal
Célula bacteriana
Microrganismos Características
eucarióticos, unicelulares, ingerem partículas alimentares, não apresentam
1.Protozoários parede celular rígida, não contém clorofila, alguns movem-se por meio de flagelo
ou cilios, e são amplamente distribuidos na natureza (principalmente aquáticos)
eucarióticos, considerados semelhantes às plantas, contém clorofila, podem ser
2. Algas uni ou multicelulares, apresentam parede celular rígida, crescem em muitos
ambientes diferentes (a maioria aquáticos)
eucarióticos, com parede celular rígida, uni ou multicelulares, desprovidos de
3. Fungos clorofila, absorvem nutrientes dissolvidos do ambiente (não digerem alimentos) -
são os bolores e leveduras
Bolores fungos multicelulares, produzem estruturas filamentosas (hifas, micélios...)
fungos unicelulares, apresentam formas variadas (esférica a ovóide; elipsóide a
Leveduras
filamentosos)
procarióticos, carecem de membrana nuclear e outras estruturas intracelulares
4. Bactérias organizadas observadas nos eucarióticos, são divididas em dois grupos:
Eubactérias e Arqueobactérias
apresentam várias formas (esférica, bastonete e espirilo) e aparecem em formas
Eubactérias
agrupadas, variam de 0.5 - 5.0 µm, são unicelulares, algumas apresentam flagelos
semelhantes às eubactérias pelo microscópio, porém apresentam diferenças
importantes quanto à sua composição química, hábeis em viver em ambientes
Arqueobactérias
não usuais (lagos salinos, piscinas térmicas, fundo de pântanos)
não são celulares como os citados acima, são muito menores (20 a 300 nm;
1nm=1/1000µm) e mais simples em estruturas que as bactérias, contém somente
5. Vírus um tipo de ácido núcleico circundante por um envelope protéico (DNA ou RNA),
podem multiplicar-se somente dentro das células vivas, apresentam-se sob várias
formas
 Morfologia
 Cocos
 Bacilos
 Vibriões
 Espirilos
 Espiroquetas
 Estruturas de superfície

 Flagelos

 Polares

 Peritríquios

 Pili (fímbrias)

 Cápsula

 Formação de esporos
 Estruturas de superfície

 Flagelos
Diferença entre bactéria Gram-
positiva e Gram-negativa

Há diferentes graus de permeabilidade na parede dos


microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos.

• As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à


presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero
constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma
espécie de malha na região exterior à membrana celular das
bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor
roxa.

• Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de


peptidoglicano mais fina que não retém o cristal violeta durante
o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no
processo de coloração final.
Exemplos de bactérias Gram-positivas
Bacillus, Nocardia, Clostridium, Propionibacterium, Actinomyces, Enterococcus,
Cornyebacterium, Listria, Lactobacillus, Gardnerella, Mycoplasma, Staphylococcus,
Streptomyces, Streptococcus.

Exemplos de bactérias Gram-negativas


Escherichia, Helicobcater, Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, Enterobacter, Chlamydia,
Pseudomonas, Salmonella, Shigella.
Passo a passo da metodologia de Gram

1. Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e logo após deixe por


aproximadamente 15 segundos;
2. Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de-
metila e então deixe agir por mais 45 segundos;
3. Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina
com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto;
4. Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente;
5. Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que
não desprenda mais corante;
6. Lave em um filete de água corrente;
7. Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30
segundos;
8. Lave em um filete de água corrente;
9. Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente com o auxílio de um papel
de filtro limpo;
10. Visualize no microscópio. Logo após leia em objetiva de imersão (100 X).
BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS
BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS
Atmosfera gasosa
 Aeróbias estritas  exigem presença de oxigênio
 Pseudomonas aeruginosa

 Aeróbias facultativas  utiliza o oxigênio quando


disponível
 Família Enterobacteriaceae (Escherichia coli, etc)

 Aerotolerantes  “suportam” a presença do oxigênio


 Streptococcus sp.
Atmosfera gasosa
 Microaerófilas  baixos teores de oxigênio

 Campylobacter jejuni

 Anaeróbicas  não toleram o oxigênio

 Clostridium botulinum
 Temperaturas ótimas para crescimento

 Psicrófilas  entre 15ºC e 20ºC

 Mesófilas  entre 25ºC e 40ºC

 Termófilas  entre 40ºC e 85ºC


 Fatores de crescimento in vitro

 Fastidiosas e não-fastidiosas

 pH

 Mais adequados

 De 4 a 9

 Melhor próximo a 7,0


 Crescimento in vivo / in vitro

 Intracelular obrigatória

 Ehrlichia sp., Rickettsia sp.

 Intracelular facultativa

 Salmonella sp.

 Predominantemente extracelular

 Mycoplasma sp.
(sobrevivência
 Fatores de virulência
bacteriana no hospedeiro)
 Pili (fímbrias)
 Produção de cápsula
 Produção de toxinas
 Produção de coagulase
 Capacidade de invasão celular
 Produção de fatores citotóxicos necrosantes
 Genes de resistencia a antimicrobianos e
desinfetantes
 Troca de genes por conjugação bacteriana: plasmídeos
 Entre outros…
 Fatores de virulência: pili  adesão
 Fatores de virulência: pili  adesão
 Após adesão  MO pode invadir a célula
 Fatores de virulência: pili (fímbrias)
 Transformação  moléculas de DNA livre


 Fatores de virulência: transdução  inserção de
material genético por bacteriófagos
FATORES DETERMINANTES DE UMA
ENFERMIDADE

HOSPEDEIRO

SAÚDE X DOENÇA

AGENTE AMBIENTE
Aeróbios

 Cocos

 Gram positivos  Staphylococcus,


Streptococcus

 Gram negativos  Neisseria


 Aeróbios

 Bacilos

 Gram positivos, formadores de esporos  Bacillus

 Gram positivos, não formadores de esporos 

Corynebacterium, Listeria, Erysipelothrix, Lactobacillus


aeróbicos, Actinomyces aeróbicos
 Aeróbios

 Bacilos

 Gram negativos, fermentadores de glicose 


Escherichia coli, Salmonella, Yersinia, Citrobacter,
Proteus

 Gram negativos, não fermentadores de glicose 

Pseudomonas, Acinetobacter, Alcaligenes,


Flavobacterium
 Aeróbios ou Microaerófilos

 Bacilos

 Gram negativos variáveis quanto à fermentação de glicose

 Aeromonas, Bordetella, Brucella, Campylobacter, Francisella,


Haemophilus, Pasteurella, Plesiomonas

 Gram variáveis  Gardnerella


Aeróbios

 Bacilos

 Álcool-ácido resistente  Mycobacterium

 Parcialmente álcool-ácido resistente 

Nocardia
Aeróbios

 Espiroquetas

 Borrelia, Treponema, Leptospira


 Anaeróbios

 Cocos

 Gram positivos  Streptococcus anaeróbicos,

Coprococcus

 Gram negativos  Acidoaminococcus, Veillonella


 Anaeróbios

 Bacilos

 Gram positivos, formadores de esporos 

Clostridium

 Gram positivos, não formadores de esporos 

Actinomyces anaeróbicos, Bifidobacterium,


Eubacterium, Lactobacillus anaeróbicos
 Anaeróbios

 Bacilos

 Gram negativos  Bacteroides, Fusobacterium


 Bactérias sem parede celular

 Mycoplasma

 Chlamydia

 Rickettsia
Muito Obrigada!!!

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