Diagnóstico Laboratorial de Doenças

Infecciosas

Infecções Purulentas
Furúnculo: pode comprometer um
folículo piloso e também
comprometer uma glândula
sebácea e tecido subcutâneo.
Foliculite: processo inflamatório em Staphylococcus aureus é o principal
que ocorre a obstrução de um patógeno.
folículo piloso. Acontece muito nas
Úlcera: perda de continuidade do
nádegas e axilas que são regiões
epitélio. Algumas infecções fazem
quentes e úmidas e que
isso (inclusive de natureza fúngica
concentram muitas bactérias.
como a esporotricose).
80% das dermatoses e dos
problemas de pele de natureza
infecciosa e bacteriana são por
Staphylococcus aureus.
Erisipela: infecção que geralmente
acomete membros inferiores Pode Além dos processos purulentos,
ter febre, linfadenopatia e são acompanhadas de febre,
leucocitose. Geralmente causada principalmente em crianças. (por
por Streptococcus pyogenes. volta dos 5 anos)

Paroníquea: infecção na região A principal finalidade do exame

proximal do dedo que fica em bacteriológico é identificar
contato com a unha. Streptococcus pyogenes. (grupo A
Staphylococcus aureus é um dos de Lancefield)
principais agentes etiológicos.
É um coco gram positivo que tem
Pseudomonas aeruginosa também uma característica de cadeia.
pode acometer e, no caso de
fungo, a Candida spp.
 Pega o meio de cultura e semeia
com o swab (faz o movimento de
estrias até esgotar o material).
Coloca na estufa a 37ºC por 24 –
Coleta: 48h
 Usa dois swabs. Um swab vai Leitura das placas:
ser usado para
 Ágar sangue: deve – se
bacterioscopia (coloração de
procurar padrões de
gram) e o outro swab vai
hemólise (beta, alfa, gama).
ser usado para cultura.
Nesse caso, observaremos
O principal meio utilizado é o ágar uma beta hemólise (uma
sangue que cresce tanto gram (+) hemólise total). Ao redor da
quanto gram (-). Temos o EMB colônia, a cor vermelha do
que é seletivo para gram negativa
meio some.
e o manitol salgado que é seletivo
para bactérias do gênero Beta hemólise: característica de
Staphylococcus. Essa seleção de bactérias Staphylococcus aureus e
meios é a ideal. Streptococcus pyogenes. As
Na hora da coleta, é importante colônias de Streptococcus são
evitar contato com a língua, a mais puntiformes (menores).
gengiva e a saliva porque essas  Ágar MacConkey: meio para
regiões são muito ricas em bactéria Gram NEGATIVA.
bactérias da microbiota normal. O Se crescer, é gram negativa.
paciente deve abrir bem a boca e  Ágar manitol salgado: meio
deve – se priorizar passar o swab onde cresce Staphylococcus.
em uma placa purulenta. Nos casos
de material escasso, faz – se
enriquecimento com B H I (4h a
37ºC em banho Maria ou estufa).

Se só tem um swab, pode pegar

esse swab que estava lá na
solução salina ou no B H I e fazer Teste da catalase:
o esfregaço e o líquido que ficou
 Teste para diferenciar
no B H I ou na solução salina, utiliza
para fazer a cultura. Staphylococcus de
 Streptococcus e não fez o colônia e adiciona 0,5 mL de
ágar manitol. Pega um pouco plasma diluído (proporção 1
da amostra e coloca em para 4) e incuba em banho
contato com a água Maria (37ºC). Avalia de uma
oxigenada (peróxido de em uma hora até 4h e avalia
hidrogênio). Se a bactéria depois só com 24h. Se o
tiver a enzima catalase, ela plasma coagular, é coagulase
quebrar o peróxido de positiva. Se o plasma não
hidrogênio vai liberar coagular, é coagulase
oxigênio e se observa a negativa.
formação de bolhas (catalase
S. aureus é coagulase +
positiva).

Cuidado com o ágar sangue

porque ele tem hemácias e as Teste da produção de DNAse
hemácias tem catalase. Se
 Verificar a atividade da
hemácia entrar em contato com
o peróxido de hidrogênio, vai enzima
haver uma reação falso +. desoxiribonuclease – S.
Se a catalase deu + será que é aureus é +
S. aureus?  Essa enzima
despolimeriza o DNA do
Teste da coagulase:
meio de cultura DNAse
 É uma enzima (fator de  Serratia que é gram
virulência da bactéria) e é negativa (+) Proteus (-)
semelhante à protrombina  Semeia a bactéria no
que transforma fibrinogênio meio DNAse + HCl (ácido
em fibrina e forma o clorídrico) na
coagulo. Fator de concentração de um
patogenicidade importante normal após 24 de
para a bactéria. 97% dos S. incubação. O DNA
aureus é positivo. despolimeriza e precipita
 Uma das formas de fazer com o HCl.
esse teste é a prova em
A vantagem desse teste é que
tubo: detecta coagulase livre em uma placa, pode – se fazer
ou extracelular. Pega a vários testes.
Teste da Novobiocina do teste de sensibilidade à
Novobiocina.
 Os coagulase negativos,
 S. saprophyticus e S.
especialmente o S.
epidermidis são bactérias da
saprophyticus tem ganhado
microbiota normal.
importância clínica (se
 Se for sensível a esse
destacando como causador
antibiótico e tiver um aro de
de infecções urinárias).
inibição maior ou igual a
 A diferenciação com o S.
16mm é S. epidermidis.
epidermidis é feita através
Espécie Catalase Coagulase DNAse Novobiocina
S. epidermidis + - - Sensível
S. aureus + + + Sensível
S. saprophyticus + - - Resistente

Teste da Bacitracina
 Identificação de
 S. pyogenes é sensível
Streptococcus beta
 Ver a hemólise (tem que
hemolíticos do grupo B
ser beta hemolítico)
(S. agalactiae) muito
 Suspensão
comum na microbiota
 Plaquear em ágar sangue
vaginal.
 Disco de bacitracina 0,04
 Produzem fator Camp
unidades
 Fator Camp atua
 Incubar numa atmosfera
sinergicamente com
de CO2 (jarra de
betalisina de algumas
Gaspark)
linhagens de S. aureus
 Halo de qualquer
ATCC – 25923
intensidade é S. pyogenes.
 Semeia a S. aureus e de
Bactéria que é beta hemolítico e forma perpendicular a ela,
bacitracina negativa semeia a amostra.
Acontece uma distorção
Teste de Camp da hemólise. Próximo ao
S. aureus, a bactéria da
 amostra produz uma  Hidrólise de esculina =
hemólise (aspecto de glicose e esculeteína +
seta) citrato férrico do meio =
escurecimento.
Teste da Optoquina:
Prova de tolerância ao sal (NaCl de
 Colônias produzem alfa
6,5%)
hemólise (parcial)
 Diferenciar Streptococcus  Diferenciação de
pneumoniae de Enterococcus dos não
Streptococcus viridans Enterococcus (S. bovis)
Fazem parte da microbiota  Enterococcus faecalis
(S. viridans na microbiota crescem em B H I + 6,5%
bucal e S. pneumoniae no de NaCl
pulmão pode causar  Prova segura e definitiva;
pneumonia).  Observar turvação (turvação
 Semeia a bactéria em ágar em meio líquido significa que
sangue amostra cresceu)
 Coloca disco de Optoquina
 Incubar em jarra de
anaerobiose
 Halos maiores ou iguais a O escarro reflete qualquer infecção
14mm = S. pneumoniae que possa estar ativa na árvore
brônquica e pulmões.
Suponha – se que a bactéria é
bacitracina negativa, Camp Principais causadores de infecções:
negativo, posso pensar numa
 Klebisiella pneumoniae (gram
bactéria do grupo D (S. bovis ou
Enterococcus) negativa)
 S. aureus (gram positiva)
 Mycobacterium tuberculoses
Prova da bile esculina (bacilo álcool ácido
 Streptococcus e bactérias resistente)
Enterococcus ambos do O uso indiscriminado de antibióticos
grupo “D” hidrolisam a pode promover o surgimento de
esculina em presença de 1 – bactérias que não são tão comuns
4% de sais biliares..
como Proteus spp. E. coli,
Pseudomonas aeruginosa

1. Diagnóstico de pneumonias
bacterianas.
 Exame a fresco (não é tão
A Mycobacterium tuberculoses ou
comum)
Bacilo de Koch é a bactéria
 Gram
causadora, afeta principalmente os
 Cultura: ágar sangue,
pulmões. A transmissão ocorre por
MacConkey e ágar
via respiratória através do espirro,
chocolate.
tosse ou fala. Uma pessoa com
2. Diagnóstico de casos
tuberculose pode infectar em
suspeitos de tuberculose
média outras 15 em um ano. Após
 Pesquisa de BAAR
15 dias de tratamento, o risco de
 São necessárias 3 amostras
transmissão é muito baixo.
consecutivas
É importante o diagnóstico  Bacterioscopia: cocobacilos a
precoce e o tratamento em que o bacilos longos e delgados
paciente tenha uma adesão à
terapia. Preparo do esfregaço MÁXIMO
CUIDADO – a flambagem da alça
pode produzir aerossóis. Para o
Sintomas: descarte, o ideal é que use fenol a
5%.
 Tosse seca ou produtiva
(quando há muco ou catarro)
 Febre vespertina Leitura e interpretação – escala
 Sudorese noturna logarítmica de Ridley:
 Emagrecimento
(0) Ausência de bacilos em 100
 Cansaço e fadiga campos examinados
 Tosse por mais de 3
semanas precisa ser (1+) Presença de 1 a 10 bacilos
investigada. em 100 campos

(2+) Presença de 1 a 10 bacilos a

cada 10 campos
(3+) Presença de 1 a 10 bacilos,
em média, em cada campo
examinado.
(4+) Presença de 10 a 100
O microrganismo mais comumente
bacilos, em média, em cada
relacionado às infecções do trato
campo examinado.
genital é o gonococo (Neisseria
(5+) Presença de 100 a 1000 gonorrhoeae)
bacilos, em média, em cada
A gonorreia é uma IST (infecção
campo examinado.
sexualmente transmissível) e o
(6+) Presença de mais de 1000 diagnóstico é basicamente clínico.
bacilos, em média, em cada
Outros que podem acometer:
campo examinado.
Streptococcus spp., Enterococcus
Cultura spp., Staphylococcus spp., E. coli.,
Chlamydia trachomatis., C. albicans.,
Para casos suspeitos de
Trichomonas vaginalis
tuberculose: meio Loewenstein
– Jensen (meio de alto custo). Coleta de material
Leva em torno de 30 a 60 dias  Secreção ou corrimento
de encubação. uretral induzido por
Teste rápido para a tuberculose massagem da uretra.
será oferecido no SUS – o  Antes da primeira micção ou
GeneXpert 4h após a última.
 Nova tecnologia com  Gonococo é sensível à
diagnóstico em 2h dessecação e não suporta
 O MS vai disponibilizar refrigeração – Coloca a
gratuitamente na rede amostra no meio de
pública transporte Stuart.
 Especificidade de 99%
Diagnóstico laboratorial
 Identifica resistência a
rifampicina
 Esfregaço
 Exame direto a fresco e
gram
  Leitura: leucócitos  Bacilos gram negativos – G.
polimorfonucleares e vaginalis
diplococos gram  Em infecções sintomáticas
negativos, reniformes e  Secreção + KOH (10%) =
intracelulares ODOR DE PEIXE
 Interpretação – gonorreia.  Lamina com poucos
 Cultura Lactobacillus
1. Ágar sangue (jarra) – Não  A cultura no ágar sangue se
cresce observa colônias pequenas e
2. MacConkey – não cresce hemolíticas
3. Thayer – Martin ou  Fenômeno CLUE CELL:
chocolate enriquecido (jarra) observa – se bacilos gram
– cresce. negativos aderidos a células
4. Teste da oxidase positivo. epiteliais de descamação
Diagnóstico diferencial entre as
Neisseria
Fermentação de açúcares Critério de Nugent para o
 N. gonorrhoeae – glicose diagnóstico da vaginose
positivo, lactose e bacteriana baseado no
maltose negativo esfregaço vaginal corado pelo
 N. meningitidis – glicose e método de Gram.
maltose positivos e  Zero = sem morfotipos
lactose negativo (Suspeita no campo de imersão
de meningite) (1000X)
 N. lactamica – glicose,  1 += menos que um
maltose e lactose morfotipo por campo de
positivos. imersão (1000X)
Bacilos gram negativos –  2+= um a quatro
Gardnerella vaginalis. Algumas morfotipos por campo de
mulheres tem essa bactéria na imersão (1000X)
microbiota normal  3+= de cinco a trinta
 Critérios de AMSEL para morfotipos por campo de
vaginose bacteriana imersão (1000X)
  4+= mais que 30
morfotipos por campo de
imersão (1000X)

Pontuação segundo a quantidade de microrganismo

Tipo morfológico Nada 1 + 2+ 3+ 4+
dos microrganismos
Bacilos longos gram 4 3 2 1 0
positivos
Cocobacilos gram 0 1 2 3 4
negativos
Bacilos curvos gram 0 1 1 2 2
negativos

0 – 3 pontos: normal
4 – 6 pontos: intermediário
7 – 10 pontos: vaginose bacteriana.