GLICOSE Liquiform Ref.

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Instruções de Uso MS 10009010236

Finalidade . Sistema enzimático para a determinação da glicose no Metodologia . GOD-Trinder.

sangue, líquor e líquidos ascítico, pleural e sinovial por método cinético
ou de ponto final. Reagentes
[Somente para uso diagnóstico in vitro.] 1. 1 - Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 ºC.
Contém tampão fosfato 30 mmo/L, pH 7,5; fenol ≥1 mmol/L; glicose
Princípio . A glicose oxidase catalisa a oxidação da glicose de acordo oxidase ≥12500 U/L; peroxidase ≥800 U/L; 4-aminoantipirina
com a seguinte reação: ≥290 µmol/L; azida sódica 7,5 mmol/L; e surfactantes.

GOD 2. - Padrão calibrador - Armazenar entre 2 - 30 ºC.

Glicose + O2 + H2O Ácido Glucônico + H2O2 Contém: glicose 100 mg/dL e biocida não tóxico. Após o manuseio
sugere-se armazenar bem vedado para evitar evaporação.

O peróxido de hidrogênio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, O estabilizador do padrão pode precipitar em baixas temperaturas, o que
sob ação catalisadora da peroxidase, através de uma reação oxidativa de não interfere em seu desempenho.
acoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha cuja
Os reagentes não abertos, quando armazenados nas condições
intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra.
indicadas, são estáveis até a data de expiração impressa no rótulo.
Durante o manuseio, os reagentes estão sujeitos à contaminações de
POD natureza química e microbiana que podem provocar redução da
2H2O2 + 4-Aminoantipirina + fenol Antipirilquinonimina + 4H2O estabilidade.

Precauções e cuidados especiais

Características do sistema . O reagente é apresentado pronto
para uso e utiliza metodologia enzimática de grande especificidade Os cuidados habituais de segurança devem ser aplicados na
analítica, de simples e fácil aplicação no laboratório clínico. manipulação do reagente.

A Labtest desenvolveu o sistema Glicose Liquiform otimizando as O Reagente contém azida sódica que é tóxica. Deve-se tomar cuidado
concentrações de enzimas do reagente visando fornecer o melhor para evitar a ingestão e no caso de contato com os olhos, deve-se lavar
desempenho analítico e maior estabilidade. imediatamente com grande quantidade de água e procurar auxílio
médico. A azida pode formar compostos altamente explosivos com
Os dados de repetitividade e reprodutibilidade obtidos com o sistema tubulações de chumbo e cobre. Portanto, utilizar grandes volumes de
Glicose Liquiform demonstram que o método é capaz de fornecer água para descartar o reagente.
resultados que superam as metas de desempenho para as medidas de
glicose estabelecidas pela American Diabetes Association (ADA). A Não utilizar o Reagente 1 quando sua absorbância medida contra a água
comparação entre as imprecisões encontradas na repetitividade e na em 505 nm for igual ou maior que 0,300 ou quando mostrar-se turvo ou
reprodutibilidade demonstra que o sistema de medição é bastante com sinais de contaminação.
robusto nas regiões de concentrações significativas para uso clínico,
indicando que tem um desempenho muito estável no dia a dia. Materiais necessários e não fornecidos

O sistema permite que a determinação seja realizada em método cinético 1. Banho-maria mantido à temperatura constante ( 37 ºC ).
de tempo fixo obtendo-se resultados em apenas 90 segundos de reação e 2. Fotômetro capaz de medir com exatidão a absorbância entre 490 e
também em método de ponto final, que proporciona mais agilidade para 520 nm.
determinados analisadores bioquímicos. 3. Pipetas para medir amostras e reagente.
O método pode ser utilizado em técnica manual e é facilmente aplicável 4. Cronomêtro.
em analisadores semi-automáticos e automáticos capazes de medir com
exatidão a absorbância entre 490 e 520 nm.

01 Português - Ref.: 133

Influências pré-analíticas . Por ser uma substância com Interferências
característica redutora o ácido ascórbico impede a formação do
cromógeno levando a obtenção de resultados falsamente diminuídos. Método de ponto final . Concentrações de bilirrubina até
Pacientes que fazem uso de ácido ascórbico (Cebion ®, Energil C ®, 2,5 mg/dL e hemoglobina até 200 mg/dL não produzem interferências
Redoxon ®, dentre outros) devem ser aconselhados a interromper seu significativas. Concentrações de bilirrubina maiores que 2,5 mg/dL
9
uso por 24 horas antes da realização do exame . produzem interferências negativas.

Nas 24 horas que sucedem a ingestão aguda de álcool ocorre Concentrações de triglicérides até 1000 mg/dL não produzem
significativa redução da glicemia. As reduções podem também ser interferência significativa quando se utiliza branco de amostra.
significativas nos indivíduos submetidos a jejum prolongado ou em
3 Para avaliar a concentração aproximada da hemoglobina em uma
obesos tratados com dietas com baixo valor calórico .
amostra hemolisada pode-se proceder do seguinte modo: diluir 0,05 mL
da amostra em 2,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85%) e medir a
Pacientes diabéticos em uso continuado de clorpropamida podem
absorbância em 405 ou 415 nm, acertando o zero com água deionizada
desenvolver hipoglicemias importantes que são muito difíceis de corrigir.
ou destilada.
A variação biológica intra-individual da glicose é 5,7% e a variação
4 Hemoglobina (mg/dL) ≅ Absorbância405 x 601
biológica intragrupo é 6,9% .
Hemoglobina (mg/dL) ≅ Absorbância415 x 467

Amostra Branco da amostra . Este procedimento é aplicável quando houver

Deve ser criado um Procedimento Operacional Padrão (POP) para ação positiva de interferentes. Misturar 1,0 mL de NaCl 150 mmol/L
colheita, preparação e armazenamento da amostra. Enfatizamos que os (0,85%) com 0,01 mL da amostra. Medir a absorbância em 505 nm,
erros devidos à amostra podem ser muito maiores que os erros ocorridos acertando o zero com água destilada ou deionizada. Diminuir a
durante o procedimento analítico. absorbância assim obtida, da absorbância do teste e calcular a
A amostra de sangue deve ser obtida após jejum de no mínimo 8 horas ou concentração.
em menor tempo de acordo com recomendação médica.
Método cinético . Concentrações de bilirrubina até 2,5 mg/dL,
Usar plasma ou soro tomando as precauções a seguir: hemoglobina até 200 mg/dL e triglicérides até 1000 mg/dL não produzem
Realizar a colheita do sangue utilizando um anticoagulante contendo um interferências significativas.
inibidor da glicólise. O uso do anticoagulante Glistab (Labtest Ref. 29)
permite a colheita de uma só amostra para as dosagens de creatinina,
Procedimento
glicose e uréia.
Método de ponto final . Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como
As amostras de sangue não contendo antiglicolítico devem ser
a seguir:
centrifugadas imediatamente após a colheita, e o plasma ou soro
separados das células ou coágulo.
Branco Teste Padrão
Em outros líquidos biológicos (líquor e líquidos ascítico, pleural e sinovial) Amostra 0,01 mL
adicionar anticoagulante contendo antiglicolítico na mesma proporção Padrão 0,01 mL
usada para a amostra de sangue, e centrifugar antes de iniciar a Reagente 1 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
6
medição .

Nas amostras de sangue tratadas com antiglicolítico a concentração da Misturar vigorosamente e incubar em banho-maria a 37 ºC durante 10
glicose permanece estável até 8 horas. No plasma, soro e outros líquidos minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível dos
separados das células, a glicose permanece estável 3 dias entre 2 - 8 ºC, reagentes nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do Teste e
6
quando não ocorre contaminação bacteriana e fungica . Padrão em 505 nm (490 a 520), acertando o zero com o branco. A cor é
estável 30 minutos.
Como nenhum teste conhecido pode assegurar que amostras de sangue O procedimento sugerido para a medição é adequado para fotômetros
não transmitem infecções, todas elas devem ser consideradas como cujo volume mínimo de solução para medição é igual ou menor que
potencialmente infectantes. Portanto, ao manuseá-las deve-se seguir as 1,0 mL. Deve ser feita uma verificação da necessidade de ajuste do
normas estabelecidas para biossegurança. volume para o fotômetro utilizado.
Os volumes de amostra e reagente podem ser modificados
Para descartar os reagentes e o material biológico sugerimos aplicar as proporcionalmente sem prejuízo para o desempenho do teste e o
normas locais, estaduais ou federais de proteção ambiental. procedimento de cálculo se mantém inalterado. Em caso de redução dos
volumes é fundamental que se observe o volume mínimo necessário para
a leitura fotométrica. Volumes da amostra menores que 0,01 mL são
críticos em aplicações manuais e devem ser usados com cautela porque
aumentam a imprecisão da medição.

02 Português - Ref.: 133

Cálculos . Ver linearidade. Exemplo
Absorbância do Teste A 30 Teste = 0,104 A 30 Padrão = 0,095
Glicose (mg/dL) = x 100 A 90 Teste = 0,181 A 90 Padrão = 0,178
Absorbância do Padrão
0,181 - 0,104
Devido a grande reprodutibilidade que pode ser obtida com a Glicose (mg/dL) = x 100 = 93
metodologia, o resultado também pode ser obtido utilizando fator de 0,178 - 0,095
calibração.
Calibração . O padrão é rastreável ao Standard Reference Material
100
(SRM) 917 do National Institute of Standards and Technology (NIST).
Fator de Calibração =
Absorbância do Padrão
Calibrações manuais
Obter o fator de calibração ao usar novo lote de reagentes ou quando o
Glicose (mg/dL) = Absorbância do Teste x Fator de calibração
controle interno da qualidade indicar.
Exemplos Sistemas automáticos
Branco de reagentes: água ou solução de cloreto de sódio 150 mmol/L
Os dados apresentados a seguir são ilustrativos. (0,85%);
Padrões: usar calibradores protéicos. A concentração de glicose no
Absorbância do Teste = 0,362
calibrador da linha Calibra - Labtest é rastreavel ao SRM 917 do NIST.
Absorbância do Padrão = 0,340
Intervalo de calibrações
0,362
Calibração do branco ao usar novo frasco de reagente;
Glicose (mg/dL) = x 100 = 106
Calibração de 2 pontos ao mudar de lote;
0,340
Calibração de 2 pontos quando o controle interno da qualidade indicar.
ou
100
Fator de Calibração = = 294 Linearidade
0,340
O resultado da medição é linear até 500 mg/dL. Quando for obtido valor
Glicose (mg/dL) = 0,362 x 294 = 106 igual ou maior que 500 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L,
realizar nova medição e multiplicar o resultado obtido pelo fator de
Método cinético . Deve ser utilizado em todas as amostras diluição. Sugerimos a verificação da linearidade metodológica e
lipêmicas. O procedimento utiliza uma cinética de 2 pontos e não requer o fotométrica, no mínimo semestralmente utilizando amostra com valores
branco da reação. O controle da temperatura é absolutamente até 500 mg/dL.
indispensável para a reprodutibilidade dos resultados. É fundamental
também que as operações com amostras e padrões sejam realizadas Controle interno da qualidade . O laboratório deve manter um
mantendo-se rigorosamente constante o intervalo de tempo entre a programa de controle interno da qualidade que defina claramente os
mistura da amostra ou padrão com o reagente e o início da medição no objetivos, procedimentos, normas, critérios para limites de tolerância,
fotômetro. Como o tempo de reação é muito pequeno, é necessário ações corretivas e registro das atividades. Materiais de controle devem
utilizar um fotômetro que tenha controle de temperatura a 37 ºC na cubeta ser utilizados para monitorar a imprecisão da medição e desvios da
(cubeta termostatizada). calibração. Sugere-se que as especificações para o coeficiente de
variação e erro total sejam baseadas nos componentes da variação
Acertar o zero do fotômetro em 505 nm (490 a 520) com água destilada biológica (VB).
ou deionizada. Adicionar 0,01 mL da amostra ou Padrão a 1,0 mL do
Reagente 1 previamente aquecido a 37 ºC. Misturar e iniciar Sugere-se utilizar os produtos da linha Qualitrol - Labtest para controle
imediatamente a medida fotométrica. Realizar uma medição da interno da qualidade em ensaios de química clínica.
absorbância aos 30 segundos e outra medição aos 90 segundos
mantendo a reação com temperatura controlada em 37 ºC. Intervalo de referência . Os intervalos devem ser usados apenas
como orientação. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça sua
Cálculos própria faixa de valores de referência na população atendida.

∆A (Teste ou Padrão) = Absorbância90 - Absorbância30

Plasma (jejum de 8 horas)
Idade mg/dL
∆A do Teste
Prematuro 20 a 60
Glicose (mg/dL) = x 100
∆A do Padrão 0 a 1 dia 40 a 60
> 1 dia 50 a 80
Crianças e Adultos 65 a 99

03 Português - Ref.: 133

Os critérios para diagnóstico de pré diabetes podem ser obtidos em: Reprodutibilidade - imprecisão total
American Diabetes Association. Diabetes Care 2006; (suppl 29):
N Média DP CV (%)
S43-S48.
Amostra 1 80 47 1,04 2,19
Líquor . 2/3 da glicemia quando a medição é realizada em amostras Amostra 2 80 129 1,47 1,82
colhidas simultaneamente. Amostra 3 80 194 1,88 1,66

Em indivíduos sadios, a pequena quantidade de líquido presente nas

O erro total (erro aleatório + erro sistemático) estimado em
cavidades articular, pleural e peritoneal é originada do ultrafiltrado do
concentrações iguais a 45 mg/dL, 120 mg/dL e 180 mg/dL é igual a
plasma. Portanto, pode-se considerar que, praticamente, a glicose ali
6,17%, 4,32% e 4,83%, respectivamente.
presente está na mesma concentração do plasma.
Os resultados indicam que o método atende a especificação desejável
Conversão . Unidades convencionais (mg/dL) x 0,0556 = Unidades
para o erro total (≤6,9%) baseada nos componentes da Variação
SI( mmol/L)
Biológica.

Características do desempenho12 Sensibilidade metodológica . Uma amostra protéica contendo

44 mg/dL de glicose foi utilizada para calcular o limite de detecção do
Exatidão . Em duas amostras com concentrações de glicose iguais a ensaio tendo sido encontrado um valor igual a 1,77 mg/dL, equivalente à
78 e 150 mg/dL foram adicionadas quantidades diferentes do analito, 3 vezes o desvio padrão das replicatas da amostra. Utilizando-se a
obtendo-se no método de ponto final recuperações entre 98 e 99%. O erro absorbância do padrão como parâmetro, o limite de detecção fotométrica
sistemático proporcional médio obtido em um valor de 120 mg/dL é igual é 0,28 mg/dL correspondendo a uma absorbância igual a 0,001.
a 1,8 mg/dL ou 1,5%.
Efeitos da diluição da matriz . Duas amostras com valores
Especificidade . O método proposto foi comparado com um método iguais a 634 e 625 mg/dL foram utilizadas para avaliar a resposta do
similar apresentando os resultados abaixo: sistema nas diluições da matriz com NaCl 150 mmol/L (0,85%).
Utilizando fatores de diluição que variaram de 2 a 8 foram encontradas
recuperações entre 95 e 99%.
Método
Método Labtest
Comparativo
Significado clínico . Valores elevados de glicose ocorrem nos
Número de amostras 40
vários tipos de diabetes primárias, nos estados de intolerância à glicose e
Intervalo de
44 - 606 mg/dL nas diabetes secundárias à várias doenças (hipertireoidismo,
concentrações (mg/dL)
hiperpituitarismo, hiperadrenocorticismo, etc.).
Método Labtest (mg/dL) = 0,9637 x
Equação da regressão
Comparativo + 2,8 Valores diminuídos de glicose ocorrem nas hipoglicemias que podem ser
Coeficiente de correlação 0,999 devidas a várias causas. Quando a ocorrência de sintomas de
hipoglicemia é relacionada à alimentação, duas formas de hipoglicemia
podem ser definidas: hipoglicemia do jejum e pós-prandial.
Utilizando a equação da regressão, o erro sistemático total (constante e
proporcional) verificado no limite de decisão (120 mg/dL) foi igual a As causas mais comuns de hipoglicemia do jejum são: hiperinsulinismo
1,58 mg/dL ou 1,32%.O erro total obtido no mesmo nível de decisão é endógeno (insulinoma e sulfonilurea), hiperinsulinismo exógeno
4,32%. Os resultados do estudo comparativo atendem à especificação (factício), tumores extrapancreáticos, síndrome auto imune (formação
para Erro Sistemático Total de 6,9% para a Variação Biológica. espontânea de anticorpos para receptores da insulina), insuficiência
Como as amostras foram selecionadas aleatoriamente em pacientes de supra-renal e ou hipofisária, doença hepática grave e alcoolismo.
ambulatório e pacientes hospitalizados, pode-se inferir que o método tem
uma especificidade metodológica adequada e atende aos requisitos A hipoglicemia pós-prandial dependendo da história clínica e da resposta
5
especificados pela American Diabetes Association (ADA) . ao teste oral de tolerância à glicose, é classificada em hipoglicemia
alimentar, hipoglicemia do diabético tipo II e do paciente com intolerância
Estudos de precisão . Os estudos de precisão foram realizados à glicose, hipoglicemia funcional ou reativa.
utilizando 80 amostras com concentrações médias iguais a 47, 129 e
194 mg/dL. Para uma revisão dos critérios diagnósticos e classificação do diabetes
mellitus consultar Diabetes Care 2004; 27 (SUPLL 1):S5-S10 ou:
http:/care.diabetesjournals.org/cgi/content/full/27/suppl_1/s5.
Repetitividade - imprecisão intra-ensaio
CV (%) A redução da concentração de glicose nos líquidos corporais encontra-se
N Média DP
usualmente relacionada a processos inflamatórios ou infecciosos. A
Amostra 1 80 47 0,60 1,25
determinação da concentração de glicose no líquor representa um dos
Amostra 2 80 129 1,86 1,08
parâmetros para a distinção entre meningite bacteriana e virótica, porém
Amostra 3 80 194 2,81 0,62
tendo sensibilidade inferior à avaliação da celularidade no mesmo
material.

04 Português - Ref.: 133

Observações 8. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981;27:493-
501.
1. A limpeza e secagem adequadas do material utilizado são fatores
9. Martinello F, Silva E.L. Interferência do ácido ascórbico nas
fundamentais para a estabilidade dos reagentes e obtenção de resultados
determinações de parâmetros bioquímicos séricos: estudos in vivo e
corretos.
in vitro. Jorn. Bras. Pat. Med. Lab, 2003;39:323-334.

2. O laboratório clínico tem como objetivo fornecer resultados exatos e 10. Basques JC. Especificações da Qualidade Analítica. Labtest
precisos. A utilização de água de qualidade inadequada é uma causa Diagnóstica 2005.
potencial de erros analíticos. A água utilizada no laboratório deve ter a
qualidade adequada a cada aplicação. Assim, para preparar reagentes, 11. Burtis CA, Ashwood ER. Textbook of Clinical Chemistry, 2a. edição,
usar nas medições e para uso no enxágüe final da vidraria, a água deve ter Philadelphia: W.B. Saunders, 1986:2175-2211.
resistividade ≥1 megaohm.cm ou condutividade ≤1 microsiemens/cm e
concentração de silicatos <0,1 mg/L. Quando a coluna deionizadora está 12. Labtest: Dados de Arquivo.
com sua capacidade saturada ocorre liberação de vários íons, silicatos e
substâncias com grande poder de oxidação ou redução que deterioram Apresentação
os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados
de modo imprevisível. Assim, é fundamental estabelecer um programa de Produto Referência Conteúdo
controle da qualidade da água. 1 1 x 500 mL
133-1/500
1 x 5 mL
3. Várias publicações demonstram que a urina contém numerosas Glicose Liquiform
1 2 x 500 mL
substâncias, principalmente o ácido úrico, que interferem nos métodos 133-2/500
1 x 5 mL
utilizando a reação GOD-POD, levando a resultados falsamente
diminuídos.
Estão disponíveis aplicações para sistemas automáticos e semi-
Referências automáticos.
1. Bergmeyer HU. Methods of Enzimatic Analysis, 3a. edição, Vol VI,
O número de teste em aplicações automáticas depende dos
Deerfield Beach:VCH, 1986:178-184.
parâmetros de programação.
2. Blaedel WJ, Uhl JM. Clin Chem 1975;21:119-124.
Informações ao consumidor
3. Young DS. Effects of Preanalytical Variables on Clinical Laboratory
Tests, 1a. edição, Washington: AACC Press, 1993. [Termos e Condições de Garantia]

4. Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología A Labtest Diagnóstica garante o desempenho deste produto, dentro das
Molecular, Base de Datos de Variación Biológica. Disponível especificações, até a data de expiração indicada nos rótulos, desde que
em:<http://www.seqc.es/ar ticle/ar ticleview/330/1/170> os cuidados de utilização e armazenamento indicados nos rótulos e
(acesso em 08/2006). nestas instruções sejam seguidos corretamente.

5. Sachs DB, Bruns DE, Goldstein DE, Maclaren NK, McDonald JM, Parrot
M. Clin Chem 2002;48:436-72. Labtest Diagnóstica S.A.
CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38
6. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia: W.B.
Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000
Saunders, 1970:154-166.
Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br

7. Tonks DB Quality Control in Clinical Laboratories, Warner-Chilcot Serviço de Apoio ao Cliente 0800 031 34 11 (Ligação Gratuita)
Laboratories, Diagnostic Reagents Division, Scarborough, Canada, e-mail: [email protected]

1972.

Revisão: Dezembro, 2011 Copyright by Labtest Diagnóstica S.A.

Ref.: 280113 Reprodução sob prévia autorização

05 Português - Ref.: 133

 Símbolos utilizados com produtos diagnósticos in vitro
Símbolos usados con productos diagnósticos in vitro
Symbols used with ivd devices

Conteúdo suficiente para < n > testes Risco biológico

Contenido suficiente para < n > tests Riesgo biológico
Contains sufficient for < n > tests Biological risk

Data limite de utilização (aaaa-mm-dd ou mm/aaaa) Marca CE

Estable hasta (aaaa-mm-dd o mm/aaaa) Marcado CE
Use by (yyyy-mm-dd or mm/yyyy) CE Mark

Material Calibrador Tóxico

Material Calibrador Tóxico
Calibrator Material Poison

Material Calibrador Reagente

Material Calibrador Reactivo
Calibrator Material Reagent

Limite de temperatura (conservar a) Fabricado por

Temperatura limite (conservar a) Elaborado por
Temperature limitation (store at) Manufactured by

Representante Autorizado na Comunidade Europeia Número do lote

Representante autorizado en la Comunidad Europea Denominación de lote
Authorized Representative in the European Community Batch code

Consultar instruções de uso Controle

Consultar instrucciones de uso Control
Consult instructions for use Control

Número do catálogo Controle negativo

Número de catálogo Control negativo
Catalog Number Negative control

Adições ou alterações significativas Controle positivo

Cambios o suplementos significativos Control positivo
Significant additions or changes Positive control

Produto diagnóstico in vitro Controle

Dispositivo de diagnóstico in vitro Control
In vitro diagnostic device Control

Liofilizado Corrosivo
Liofilizado Corrosivo
Lyophilized Corrosive

Período após abertura

Período post-abertura Ref.: 201112
Period after-opening

06 Português - Ref.: 133