Microbiologia

Básica
Biotecnologia

Prof. Ms. Flávia Soares Lassie

Unidade de Ensino: 4
Competência da Unidade: Conhecer e compreender conceitos
básicos de microbiologia para a formação profissional
Resumo: Compreender a relação microbiota e sistema
imunológico. Compreender os processos de biotecnologia
Palavras-chave: microbiota, sistema imune, antibióticos,
biotecnologia.
Título da Teleaula: Biotecnologia
Teleaula nº: 4
Contextualização
 Imunidade
 Inata e Adaptativa
 Microbiota
 Normal e Transitória
 Ação dos fármacos antimicrobianos
 Inibição da parede celular
 Inibição de síntese proteica
 Outros mecanismos de ação
 Testes de sensibilidade aos antimicrobianos
 Biotecnologia: DNA recombinante
 Ricardo, 22 anos, praticante de esportes e gosta de jogar futebol com os amigos.
Após um jogo de futebol, ele foi com um grupo de amigos à churrascaria e ingeriu
uma grande quantidade de salada, legumes, vários tipos de carne, sendo sempre
mal passada. Após dois dias Ricardo começou com um quadro de cólica e diarreia.

 Ele procurou por atendimento médico e foi solicitado exame

de coprocultura. Na cultura de fezes foi identificado o
microrganismo E.coli.

Sabendo que a E.coli é um m.o constituinte

da microbiota normal, como é possível ter
causado essa infecção gastrointestinal??

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Imunidade
e
Microbiota
Imunidade Adaptativa
Inata

Fonte: https://binged.it/2M5GmmX Fonte: https://binged.it/2LW3EeE

 Imunidade Inata ou natural Barreiras físicas: pele,
• Principal característica: já presente ao mucosas, muco, ácido
nascimentos- 1ª linha de defesa; estomacal.
• Imunidade Inespecífica: não reconhecem o
que estão combatendo (vírus, bactérias,
protozoários, entre outros);
• Composta por: barreiras físicas e químicas
(tecido epitelial e substâncias antimicrobianas) e Fonte: Adaptado de Siverthorn, D.U. Fisiologia
humana: uma abordagem integrada. 7. ed.
celulares; Porto Alegre: Artmed, 2017.

• Células fagócitas ( neutrófilos e macrófagos),

NK, proteínas do sangue (Sistema Complemento
e medidadores da inflamação), citocinas.
• Defesa inicial contra infecções e estimula
as respostas da imunidade adquirida.
  Mecanismos existentes antes da infecção;
Imunidade inata  Promovem respostas rápidas aos m.o;
 Reagem do mesmo modo às infecções repetidas.

Constituem a maioria das

células da imunidade inata

Fonte: DELVES, P. J. et al.

Fundamentos de imunologia. 13. ed.
Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2018
(PÁG. 13) .
 Imunidade Linfócito B Produzem Ac
Imunidade humoral
adquirida Mediadores da
Imunidade
Linfócito T imunidade
celular
celular
Sistema
Imunológico LT CD4+ LT CD8+
(helper) (citotóxico) Fonte: http://bit.ly/36OPoxe

Imunidade Linfócitos B e T:
inata  Células capazes de reconhecer e
distinguir de modo específico diversos
Ag;
 Classificados de acordo com a função –
formas iguais;
Microbiota
• Os microrganismos que habitam os diversos sítios anatômicos do
corpo humano e de animais sadios podem ser dispostos em dois
grupos:

• Microbiota residente: m.o que estabelecem residência mais ou

menos permanente (colonizam) mas não produzem doenças em
condições normais; Grande variedade de m.o;

• Microbiota não residente ou transitória: originária do meio externo

e podem estar presentes por vários dias, semanas ou meses, e
depois desaparecer Fonte: https://binged.it/338JEL9
Microbiota humana
 Corpo humano: 1013 células corporais;

 Microbiota: 1014 células bacterianas;

 Trato gastrintestinal: Área de aproximadamente 300

m2; Espécies: 200 – 500; Gêneros: 50; Peso dos
microrganismos: 1,2 – 1,5 Kg (75% peso seco das fezes)

 Função: resistência a colonização (efeito de barreira

microbiológica); Produzem vit. K e algumas vitaminas do
complexo B.
Fonte: https://binged.it/3i7jh20
 OLHOS (Conjuntiva)
Staphylococcus epidermidis, S.
Representantes da
aureus, Propionibacterium, microbiota normal por região
Corynebacterium e difteroides corporal

TGI
Escherichia coli, Bacteroides, Fusobacterium,
Lactobacillus, Enterococcus, Bifidobacterium,
Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Klebsiella
e Candida (fungo)
TRATO URINÁRIO E
REPRODUTIVO
Staphylococcus, Micrococcus,
Enterococcus, Lactobacillus,
Bacteroides, difteroides aeróbicos e
Proteus na uretra;
Lactobacilos,Streptococcus, Candida Fonte: https://binged.it/3rDg1i0
albicans eTrichomonas vaginalis na
vagina Fonte: Shuitterstock
 CAVIDADE ORAL
Streptococcus, Lactobacillus,
Actinomyces, Candida

TRATO RESPIRATÓRIO
St.aureus, S. epidermidis,
e difteroides aeróbios no nariz; S.
PELE
epidermidis, S. aureus,
Propionibacterium, Staphylococcus,
difteroides, Streptococcus
Corynebacterium
pneumoniae, Haemophilus e
Neisseria na garganta

Fonte https://pxhere.com/pt/photo/673958
 Microbiota residente
 Papel importante na manutenção da integridade do
hospedeiro, quando em equilíbrio em um sítio específico

 Oferecem barreiras contra colonização por patógenos;

 Produzem substâncias utilizáveis pelo hospedeiro: sintetizam

ácidos graxos voláteis, vitaminas do complexo B e vitamina K; Fonte: https://binged.it/3kY05Fz

 Degradam produtos tóxicos;

 Regula a fisiologia digestiva (estimulação da multiplicação e

diferenciação das células, controle de pH);

 Participam da modulação do sistema imunológico dos hospedeiros.

 Fármacos
antibacterianos
Antibiótico Substância produzida pelo m.o que inibe outro m.o

Antibiose
Bactericidas
Toxicidade Fármacos efetivos contra céls. Bacteriostáticos
seletiva procarióticas e que não afetam as
céls. eucarióticas

Restrito

Espectro de ação

Amplo
 Principais
mecanismos de
ação de fármacos
antibacterianos

Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed. São Paulo: Artmed, 2017 (pág. 551).
 Inibição da síntese de parede celular
Parede celular
Lise celular
bacteriana
PEPTIDEOGLIGANO
β-lactâmicos

Penicilinas
Cefalosporinas
Carbapenens
Monobactans
Fonte:
https://binged.it/2K6Vo8h]
 Inibição da síntese de parede celular

Parede celular
Lise celular
bacteriana
PEPTIDEOGLIGANO

β-lactâmicos

Penicilinas
Cefalosporinas
Carbapenens
Monobactans
Fonte: https://binged.it/2K6Vo8h
 β- lactâmicos PLP Mecanismos de resistência:
 Penicilinas: Naturais ou Benzilpenicilinas
 Betalactamases
 Modificações estruturais
(Penicilina G e V); Semissintéticas; Resistentes de PLP
à penicilinase; de espectro estendido;  Diminuição da
associadas a inibidores da β-lactamase
permeabilidade

1ª- Cefalexina (Infecções de pele e

partes moles)
2ª- Cefoxitina (Infecções respiratórias)
 Cefalosporinas: 3ª- Ceftriaxona ( Grande variedade de
Gram- e meningites)
Gerações 4ª- Cefepima ( Pneumonias
hospitalares)
β- lactâmicos Aztreonam

 Carbapênicos: (Ertapenem, Imipenem,

Meropenem) espectro amplo de atividade (infecções
de bacterias MR)

Fonte: https://binged.it/2Kp0qNR

 Monobactâmicos: (Aztreonam)BGN (incluindo

Pseudomonas e E.coli
Inibição da síntese de parede celular
 Polipeptídicos:

 Bacitracina: efetivo contra bactérias G+ (Estafilococos e

estreptococos)- infecções superficiais

Fonte: https://binged.it/32ZMW3h

 Glicopeptideos: efetivo contra bactérias G+

(Vancomicina- infecções causadas por MRSA (
Staphylococcus aureus resistentes a meticilina);
(Teicoplanina)
Inibição da síntese proteica
Céls. eucariontes- Cloranfenicol
ribossomo 80S
Toxicidade Eritromicina
seletiva Aminoglicosídeos
Céls. Procariontes- Macrolídeos
ribossomo 70S
Tetraciclinas
Fonte: https://binged.it/2KcVjQs
 Inibição da
síntese
proteica

Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed. São Paulo: Artmed, 2017 (pág. 553).
Inibição da síntese proteica
 Cloranfenicol: inibe a formação de ligações peptídicas nas cadeias nascentes de
polipeptídios- pela reação com a porção 50S do ribossomo.
Bacteriostático; Meningites por Haemophilus influenzae, Neisseria meningitidis e
Streptococcus pneumoniae.
 Metronidazol: mesmo sítio ribossomal ( antiprotozoários- vaginite Trichomonas
vaginalis; giardíase e disenteria amebiana) e também contra bactérias anaeróbias
obrigatórias

 Aminoglicosídeos: altera a conformação da porção 30S

do ribossomo- leitura incorreta do RNAm
(Estreptomicina, gentamicina, neomicina, tobramicina)
Efeitos colaterais: ototoxicidade, nefrotoxicidade
Inibição da síntese proteica
 Tetraciclinas: inibem a tradução, interferindo na

ligação do RNAt, carreando aa específicos a porção 30S

do ribossomo (eficaz contra bactérias Gram + e Gram –

Fonte: https://binged.it/2KeBR5N

aeróbias e anaeróbias, espiroquetas, clamídias e alguns

protozoários).

 Glicilciclinas: nova classe de antibióticos (descoberta

ano 2000); Tigeciclina (Tygacil);Bacteriostático se liga
a subunidade 30S MRSA e linhagens de Acinetobacter
baumanii resistentes a múltiplos fármacos.
Inibição da síntese proteica
Se ligam a subunidade 50S do ribossomo
 Macrolídeos: (Eritromicina, claritromicina,
azitromicina) amplo espectro de ação; Infecções
respiratórias
 Estreptograminas: Dalfopristina e quinopristina Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed. São Paulo:
Artmed, 2017 (pág. 561).

 Lincosaminas

 Oxazolidinonas: nova classe de antibióticos

desenvolvida em resposta a resistência à vancomicina;
Linezolida (Zyvox) – combater MRSA
Outros mecanismos de
ação dos
antimicrobianos
 Inibição da síntese de ácidos nucleicos
Atuam processos de replicação e transcrição do DNA

Rifamicinas
Quinolonas e
Fluoroquinolonas

Fonte: https://binged.it/330vM5x

 Rifamicinas: Rifampicina- inibe a síntese de RNAm;

Tuberculose e hanseníase (micobactérias)
 Inibição da síntese de ácidos nucleicos
 Quinolonas e fluoroquinolonas:
Bactericida; inibição da enzima DNA-girase ou
topoisomerase II (enovalamento e relaxamento das fitas
de DNA)
1960- ácido nalidíxico (Quinolonas 1ª Geração)
1980- fluoroquinolonas : ITU e pneumonia
- 2ª geração: Norfloxacino e Ciprofloxacino
-3ª geração: levofloxacino, gatifloxacina,
moxifloxacina
-4 geração: trovafloxacina
Fonte: https://binged.it/330ARuC
Fonte: https://binged.it/330Bbtk
Danos a membrana plasmática
Interferência na biossíntese de ácidos graxos da M.P- Altera a
permeabilidade da M.P perda de metabólitos importantes para a célula

Lipopeptídeos:
 Daptomicina- eficaz apenas para bactérias Gram+
(infecções cutâneas)

 Polimixina B- bactericida eficaz contra bactérias Gram-;

infecções causadas por Pseudomonas aeruginosa
- Altamente neurotóxicas e nefrotóxicas
Inibição competitiva de metabólitos essenciais

Sulfonamidas (Sulfas)- Uma das

primeiras terapias antimicrobiana;
Bloqueiam a produção de ácido
fólico;
Bacteriostáticos; Sinergismo:
sulfametoxazol+ trimetoprim

Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed. São Paulo:

Artmed, 2017 (pág. 563).
Teste de sensibilidade a antimicrobianos (TSA)
 Diferentes espécies e linhagens microbianas  graus
distintos de suscetibilidade;

 É importante conhecer a sensibilidade do patógeno

para iniciar o tratamento;

 Problemas relacionados a resistência dos antibióticos;

 ANTIBIOGRAMA.
Métodos Discodifusão Método de SENSÍVEL, INTERMEDIÁRIO,
RESISTENTE ???????
Kirby-Bauer

E. Coli - CLSI 2007

Fonte: https://binged.it/2KfBZ51

Fonte: https://binged.it/32XB8Pc

Fonte: https://binged.it/2KgsItJ
Métodos
Determinação da CIM (Concentração inibitória
Testes de diluição em caldo mínima) e CBM (Concentração bactericida
mínima)

Penicilina

Sulfametoxazol

Estreptomicina

Eritromicina Fonte: https://binged.it/2KcPWks

Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed.

São Paulo: Artmed, 2017 (pág. 569).
Claritromicina
Resistência microbiana
 Uso de antibióticos de forma indiscriminada e irracional;
 Seleção e multiplicação de microrganismos resistentes;

ÍNTRINSECA Natural
CONJUGAÇÃO
TRANSFORMAÇÃO
Mutações aleatórias/ TRANSDUÇÃO
espontânea

ADQUIRIDA
Seleção

Fonte: https://binged.it/32WaYMG
Recombinação
Mecanismos de resistência microbiana

Fonte: TORTORA, G.J. et al. Microbiologia. 12.ed. São Paulo: Artmed, 2017 (pág. 570).
Biotecnologia
 Ciência que estuda as aplicações tecnológicas em sistemas
Biotecnologia biológicos, seres vivos ou parte deles, com o objetivo de
obter produtos de interesse.
 Áreas de aplicação:
 Vacinas: Vacina da Hep. B – S. cerevisiae carrega um gene do
vírus da hepatite em um plasmídeo
 Insulina humana: Produzida por E.coli
 Agricultura: plantas transgênicas
 Alimentos: produção de leite fermentado, pão, manteiga, tofu
 Produção de substâncias químicas: produção de ácido acético,
biocombustível
 Biorremediação: remover ou reduzir poluentes no ambiente
Tecnologia do DNA recombinante
Transgenia e organismos geneticamente modificados

Organismos transgênicos Organismos geneticamente modificados

Tiveram parte do material

Não são adicionados de
genético modificado pela
fragmentos de DNA externo.
introdução de DNA de outro
organismo (exógeno).

Passam por manipulação e alteração na estrutura ou função do

próprio material genético por meio de técnicas de engenharia
genética.
Tecnologia do DNA recombinante
Recebe o trecho de Codificação do
RECEPTOR DNA que será produto
expresso

Bactéria, Vírus,
Levedura

Esta Foto de Autor Desconhecido está licenciado em

CC BY-SA-NC
Biotecnologia na Indústria Farmacêutica
 Industria farmacêutica:
produção de antibióticos,
insulina

 Biotecnologia: organismos
geneticamente modificados

Fonte: https://binged.it/3320rjf
Técnica de clonagem do gene - Plasmídeo

Fonte: Livro didático da disciplina.

 Biotecnologia de alimentos
Biotecnologias Aumento do prazo de validade dos alimentos

Adição de microrganismos benéficos aos alimentos

Entram como ingredientes na elaboração de alimentos para que sejam

conseguidos sabores, odores e propriedades tecnológicas específicas.

Responsáveis por colonizarem o meio concorrendo com

microrganismos indesejáveis, deteriorantes e patogênicos.
 Biotecnologia de alimentos
O que é um alimento fermentado?

Precisam de energia na forma de ATP (adenosina trifosfato),

que é conseguida pelo processo de respiração celular
usando glicose.
Fonte: Desenvolvido pela autora obter ATP mesmo na ausência de oxigênio

FERMENTAÇÃO: principais microrganismos

utilizados são fungos e bactérias. GLICÓLISE

Na fermentação lática o piruvato é

convertido a ácido lático, enquanto na 2 ATPs 2 moléculas de piruvato
fermentação alcoólica é transformado em
etanol e CO2.
 Biotecnologia de alimentos
Para o uso em alimentos, além da capacidade fermentativa, fungos e bactérias que
apresentam as seguintes características:

 Possui eficiência de conversão do substrato em produto.

 Permite o acúmulo do produto no meio, de forma a obter sua elevada
concentração no caldo fermentado; (não adianta nada um organismo
que converte substrato também consumir todo o produto).
 Ser homofermentativo, ou seja, apresentar um único produto de
fermentação e não produzir substâncias incompatíveis com o
alimento (assim se evita processos de filtração e purificação). Não ser
patogênico (facilitando muito o manuseio e evitando purificação).
 Não exigir condições de processo muito complexas.
 Não exigir meios de cultura caros.
 Biotecnologia de alimentos
Produção de produtos fermentados à base de cereais (pães, bebidas fermentadas e fermento-destiladas).

Utiliza-se a levedura Saccharomyces cerevisiae  produção de etanol e CO2 , produtos desejáveis.

Produção de fermentados lácteos (leites fermentados, iogurtes e alguns tipos de queijos).

Utiliza-se Lactobacillus bulgaricus e Streptococcus thermophillus 

obtenção do ácido lático pela ação dos micoroganismos sobre o açúcar do
leite.

Produção de produtos cárneos fermentados.

São obtidos pela adição de açúcar como ingrediente, uma vez que carnes
são fontes ruins de carboidratos.
Utiliza-se gênero Lactobacillus.
 Biotecnologia de alimentos
Vegetais fermentados

Picles é uma hortaliça submetida à fermentação lática e uma fonte de glicose,

frutose e sacarose para os microrganismos fermentadores, que podem ser
Lactobacillus, Leuconostoc, Pediococcus e/ou Streptococcus.
Shutterstock: 2100503137

Azeitona in natura Azeitona fermentada em conversa

Fonte: Livro didático.

Recapitulando......
 Recapitulando.....
 Imunidade
 Inata e Adaptativa
 Microbiota
 Normal e Transitória
 Ação dos fármacos antimicrobianos
 Inibição da parede celular
 Inibição de síntese proteica
 Outros mecanismos de ação
 Testes de sensibilidade aos antimicrobianos
 Biotecnologia: DNA recombinante