V de Gowin Extracao de DNA

VERTENTE CONCEPTUAL
VERTENTE METODOLÓGICA
TEORIA: QUESTÃO CENTRAL
CONHECIMENTO ADQUIRIDO
Teoria Celular Como extrair
Uma vez que o DNA das células vegetais está localizado nos
PRINCÍPIOS:
núcleos, para poder ser extraído é necessário destruir
Nas células eucarióticas o DNA encontra-se no núcleo.
e visualizar a
numa primeira fase as paredes celulares e as membranas
plasmáticas e, posteriormente, os invólucros nucleares. A

As células vegetais possuem parede celular. molécula de
primeira fase é conseguida com a maceração do material
A maceração destrói as paredes celulares e as
biológico utilizado. Os detergentes emulsionam as gorduras logo
membranas plasmáticas. DNA?
vão terminar a destruição das membranas plasmáticas e
Os detergentes emulsionam as gorduras.
desfragmentar as membranas nucleares. Para fazer a separação do
A filtração retém alguns constituintes maiores e é
DNA dos fragmentos celulares entretanto formados utiliza-se a
permeável a moléculas como o DNA.
técnica da filtração. O grupo fosfato confere ao DNA uma carga
O NaCl dissolvido na água dissocia-se em Na+ e Cl-.
negativa que é neutralizada com a ligação ao Na+ , resultante da
O DNA em solução possui carga negativa devido à
dissociação do NaCl em água. Ao impedir a repulsão eléctrica entre
ionização do grupo fosfato.
moléculas carregadas negativamente, este processo permite que as
moléculas de DNA se agreguem de modo a formar filamentos

O álcool desidrata as moléculas de DNA, precipitando-as.
espessos e compridos (logo mais visíveis). O álcool, à temperatura

A fuchscina do reagente de Schiff retoma a cor vermelha
utilizada (aproximadamente -20ºC) tona o DNA insolúvel. Quando

em contacto com o DNA na reacção de Feulgen
adicionado lentamente ao filtrado promove a precipitação do DNA.
Como o DNA precipitado é menos denso que a água, os filamentos

CONCEITOS:
de DNA acumulam-se no topo da camada do filtrado e ascendem
Ácidos nucleicos Parede celular
lentamente à camada superior. A reacção de Feulgen, específica
DNA Membrana plasmática
para o DNA permite corar os filamentos obtidos pois a Fuchsina do
Células eucarióticas Emulsão
Reagente de Schiff retoma a cor vermelha na presença do DNA.
Células vegetais Grupo fosfato
Núcleo
TRANSFORMAÇÕES E REGISTOS
ACONTECIMENTOS/OBJECTOS
Filamentos de
Triturou-se o Quivi com uma solução de água destilada, sal e detergente. Filtrou-
se o produto obtido DNA
sucessivamente por papel de filtro e algodão hidrófilo. Adicionou-se álcool
refrigerado.
Os filamentos obtidos foram corados pela reacção de Feulgen mergulhando
sucessivamente em água
destilada, ácido clorídrico, novamente água destilada e reagente de Schiff .

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plasmáticas e, posteriormente, os invólucros nucleares. A

moléculas de DNA se agreguem de modo a formar filamentos

espessos e compridos (logo mais visíveis). O álcool, à temperatura

utilizada (aproximadamente -20ºC) tona o DNA insolúvel. Quando

Como o DNA precipitado é menos denso que a água, os filamentos

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