Libro Analisis Sensorial

VI
Capítulo VI - Análise sensorial
ANÁLISE SENSORIAL
A
análise sensorial é realizada em função das respostas transmitidas pelos indivíduos
às várias sensações que se originam de reações fisiológicas e são resultantes de certos
estímulos, gerando a interpretação das propriedades intrínsecas aos produtos. Para
isto é preciso que haja entre as partes, indivíduos e produtos, contato e interação.
O estímulo é medido por processos físicos e químicos e as sensações por efeitos psicológicos.
As sensações produzidas podem dimensionar a intensidade, extensão, duração, qualidade,
gosto ou desgosto em relação ao produto avaliado. Nesta avaliação, os indivíduos, por meio
dos próprios órgãos sensórios, numa percepção somato-sensorial, utilizam os sentidos da
visão, olfato, audição, tato e gosto.
Visão
No olho humano, ocorre um fenômeno complexo se um sinal luminoso incide

sobre a capa fotossensível, a retina, provocando impulsos elétricos que, conduzidos pelo
nervo óptico ao cérebro, geram a sensação visual que é, então, percebida e interpretada. O
olho, como órgão fotorreceptor, percebe a luz, o brilho, as cores, as formas, os movimentos
e o espaço. As cores são percebidas pelo indivíduo fisiologicamente normal quando a ener-
gia radiante da região visível do espectro (380 a 760) nm atinge a retina. As características
da cor são, essencialmente, o tom ou matiz, a saturação ou grau de pureza e a luminosidade
ou brilho. Na avaliação da acuidade visual de indivíduos, alguns testes podem ser aplicados
como, por exemplo, o de Munsell - Farnsworth 100 Hue Test (GretagMacbeth, 1997).
Olfato
A mucosa do nariz humano possui milhares de receptores nervosos e o bulbo olfati-

vo está ligado no cérebro a um “banco de dados” capaz de armazenar, em nível psíquico, os
odores sentidos pelo indivíduo durante toda a vida. Na percepção do odor, as substâncias
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Métodos Físico-Químicos para Análise de Alimentos - 4ª Edição
1ª Edição Digital
desprendidas e aspiradas são solubilizadas pela secreção aquosa que recobre as terminações
ciliadas, entrando em contato com os receptores nervosos e produzindo impulsos elétri-
cos. Estes, quando chegam ao cérebro, geram informações que, comparadas aos padrões
conhecidos por ele se encaixam como num sistema de “chave-fechadura”. Em média, o ser
humano pode distinguir de 2000 a 4000 impressões olfativas distintas. Para avaliar o poder
de discriminação, certas substâncias químicas comuns ou raras podem ser apresentadas
ao indivíduo para reconhecimento e identificação, como por exemplo: acético, alcoólico,
amoníaco, sulfídrico, pinho, lenhoso, cítrico, caramelo, mentol, eugenol, etc.
Audição
O ouvido humano tem a função de converter uma fraca onda mecânica no ar em es-
tímulos nervosos que são decodificados e interpretados por uma parte do cérebro, o córtex
auditivo, de forma a reconhecer diferentes ruídos. Para avaliar a capacidade de discrimina-
ção de indivíduos, algumas características peculiares dos produtos podem ser empregadas
utilizando simultaneamente os sentidos da audição e tato, como por exemplo: a dureza do
pé-de-moleque, a crocância do biscoito ou da batata frita, a mordida da maçã ou da azeito-
na e o grau de efervescência da bebida carbonatada, cujos sons ou ruídos são reconhecidos
pela quebra e mordida entre os dentes e o borbulhar do alimento.
Tato
É toda sensibilidade cutânea humana. É o reconhecimento da forma e estado dos

corpos por meio do contato direto com a pele. Ao tocar o alimento com as mãos ou com
a boca, o indivíduo facilmente avalia sua textura, mais do que quando utiliza a visão e a
audição. A textura, considerada como o grau da dureza, é definida como a força requerida
para romper uma substância entre os dentes molares (sólidos) ou entre a língua e o palato
(semi-sólidos). Para avaliar o poder de discriminação dos indivíduos, podem ser apresenta-
dos para reconhecimento alguns produtos de diferentes graus de dureza, como, por exem-
plo: a amêndoa (dura), a azeitona (firme), o requeijão (mole), etc.
Gosto
Na boca, a língua é o maior órgão sensório e está recoberta por uma membrana
cuja superfície contém as papilas, onde se localizam as células gustativas ou botões gus-
tativos e os corpúsculos de Krause, com as sensações táteis. O mecanismo de transmissão
da sensação gustativa se ativa quando estimulado por substâncias químicas solúveis que
se difundem pelos poros e alcançam as células receptoras que estão conectadas, de forma
única ou conjuntamente com outras, a uma fibra nervosa que transmite a sensação ao cére-
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bro. A sensibilidade não se limita apenas à língua, pois outras regiões também respondem
aos estímulos, como o palato duro, amídalas, epiglote, mucosa dos lábios, as bochechas e
superfície inferior da boca. A percepção mais conhecida envolve quatro gostos primários:
doce, salgado, ácido e amargo, sendo citado também o umami. Algumas soluções químicas
em concentrações diferentes são utilizadas para avaliar o poder de discriminação pelo
reconhecimento, como por exemplo: a sacarose, 5,76 g/L (doce); o cloreto de sódio,
1,19 g/L (salgado); a cafeína, 0,195 g/L (amargo); o ácido cítrico, 0,43 g/L (ácido); o
glutamato monossódico, 0,595 g/L (umami) e o sulfato heptahidratado de ferro II, 0,00475
g/L (metálico) (ISO/DIS 3972/1979). O espectro de gostos também pode incluir a presen-
ça de gostos secundários (alcalino e metálico) e os elementos sensíveis à química comum
(adstringente, refrescante, ardente, quente e frio). As sensações denominadas “picantes”
também definidas como “ardentes” ou “pungentes”, não são consideradas estímulos puros,
pois se percebe em toda a língua e garganta.
Preparo e apresentação de amostras
Os procedimentos de preparo e apresentação de amostras são etapas críticas e de-

vem ser padronizados segundo o tipo, a espécie ou a variedade de produto. Basicamente,
recomendam-se os seguintes procedimentos:
• Amostra representativa e, se necessário, acompanhada da amostra de referência ou pa-

drão, similar, de mesma procedência, marca e/ou fabricante, que possa servir como
comparação. Sempre na quantidade suficiente para análise e, se for o caso, com medidas
de massa ou peso e volumes bem definidos.
• Modo de preparo adequado da amostra e, de preferência, conforme a orientação do

fabricante nos rótulos. Durante o preparo, determinadas variações físicas devem ser
controladas com utilização de cronômetros, termômetros ou termopares. Prepare todas
as amostras de forma idêntica, estimando tempos mínimos e máximos de espera até a
apresentação. Para todas as unidades de amostras, a porção, a quantidade, o formato e
o tamanho (espessura) devem ser controlados segundo as características do produto.
• Amostras servidas em recipientes próprios ou os comumente utilizados nas refeições

de indivíduos, como, por exemplo, recipientes de vidro, porcelana ou plásticos des-
cartáveis. Se necessário, sirva em bandejas de cor branca ou neutra. Utilize talheres
compatíveis, descartáveis ou não, guardanapos, toalhas absorventes e vasilhames para
o descarte de resíduos. Todos os recipientes devem estar bem limpos, secos e livres de
odores estranhos.
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• Antes da apresentação da amostra verifique e controle a temperatura, sendo um im-

portante fator de variação na percepção do odor e do sabor. Melhor avaliar a amostra
na temperatura em que é normalmente consumida. Um grande número de produtos
pode ser avaliado em sua temperatura ambiente. O Quadro 1 indica algumas faixas de
temperaturas usualmente empregadas na avaliação sensorial de alimentos.
• As condições ambientais devem ser controladas antes da análise sensorial levando em

consideração a utilização de cabines individuais, o grau de luminosidade, temperatura
climatizada adequada, ausência de ruídos e odores estranhos.
Quadro 1 – Faixas de temperaturas indicadas para avaliação do odor e sabor em alguns

produtos alimentícios
Temperatura (ºC)
Produto
Água 20 – 22
Alimentos preparados quentes 35 – 45
Bebida carbonatada 06 – 10
Café 68 – 71
Cerveja 04 – 05
Chá 68 – 71
Leite 07 – 10
Licores destilados 20 – 22
Manteiga e margarina 20 – 22
Maionese 20 – 22
Óleos comestíveis 40 – 43
Pão 20 – 22
Sopa 68 – 71
Sorvete 10 – 12
Vinho 20 – 22 ou gelado
Fonte: Instituto Adolfo Lutz (Baseado em ELLIS, 1961).
Formação da equipe sensorial
Uma equipe sensorial efetiva deve ser formada a partir de critérios específicos que
podem influir na percepção do indivíduo que avalia um produto, como os fatores ligados
à fisiologia (receptores sensoriais, sistema nervoso), psicologia (relação estímulo-resposta) e
sociologia (idade, sexo, etnia, hábitos alimentares, grau de instrução). Na escolha de indi-
víduos que irão compor a equipe sensorial, alguns requisitos devem ser considerados, tais
como:
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• O indivíduo deve estar ciente de que a participação nos testes é espontânea e voluntá-
ria. Verifique se cada membro da equipe tem interesse, disponibilidade, pontualidade,
tranqüilidade e vontade de avaliar grande parte das categorias de produtos nos dias
marcados para teste, seleção e treinamento previamente agendados.
• Verifique se o candidato revela boa forma de expressão, habilidade verbal e vocabulário

próprio que possa definir e descrever adequadamente os atributos sensoriais. Deve-se
evitar qualquer tipo de comunicação com os colegas durante os testes, pois a resposta de
cada um é própria, independente e de responsabilidade exclusiva.
• O candidato deve apresentar boas condições de saúde, ausência de gripes e alergias,

comunicando quando houver doenças como diabetes, hipercolesterolemia ou qualquer
outra. Evite o indivíduo que use aparelho dentário corretivo, pois os dentes têm papel
importante na avaliação sensorial. Evite os fumantes, caso contrário, alerte a não fumar
pelo menos uma hora antes dos testes.
• Avalie a acuidade sensorial e o poder de discriminação para cores, textura, odores e gos-
tos primários. Fique atento nos casos de ocorrência de anomalias nos órgãos da visão,
olfato, audição e paladar. A faixa etária recomendável situa-se entre 18 a 50 anos, pois,
após esta idade o indivíduo pode revelar certa dessensibilização dos órgãos sensores.
• Oriente o julgador a não fazer uso de cosméticos e perfumes fortes e a não consumir
alimentos muito picantes nos dias marcados para os testes. Os medicamentos também
podem influenciar na sensibilidade do gosto do indivíduo.
Características sensoriais
Método subjetivo utilizado para avaliar as características sensoriais de alimentos,

bebidas e água. Este método considera as opiniões de indivíduos na interpretação de efeitos
do estímulo sensorial, simples ou múltiplos, segundo as impressões percebidas pelos órgãos
sensórios (visão, olfato, gosto, tato e audição) que irão gerar as interpretações e descrições
das propriedades intrínsecas aos produtos. A forma de definir atributos sensoriais é descre-
ver os componentes relativos às propriedades dos produtos, como os seguintes:
Aparência – Refere-se às propriedades visíveis como o aspecto, cor, transparência, brilho,

opacidade, forma, tamanho, consistência, espessura, grau de efervescência ou carbonata-
ção e as características de superfície. A cor, propriedade capaz de provocar estimulação da
retina por raios luminosos de comprimentos de onda variáveis, tem sua percepção limitada
à fonte de luz, devendo ser avaliada com iluminação adequada como, por exemplo, a luz
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do dia, natural ou artificial. Na avaliação, geralmente, são utilizadas cabines especiais de

controle visual de cores. Ela também é definida com maior coerência e uniformidade, por
meio de quadros cromáticos, discos ou dicionários de cor. Na avaliação da aparência e cor,
um quadro com expressões usuais e comuns poderá auxiliar na sua melhor denominação
(Quadro 2).
Odor e aroma – O odor é perceptível pelo órgão olfativo quando certas substâncias
voláteis são aspiradas e o aroma, via retronasal durante a degustação. O julgador deve
aproximar a amostra da narina e dar cheiradas curtas, evitando longas inalações que
cansem o olfato pela adaptação. O cansaço olfativo pode ser amenizado se for cheirada
a pele do próprio pulso ou por outro aroma que neutralize o anterior. Nesta avaliação,
pode-se fazer comparações com padrões de referência conhecidos, que serão identifica-
dos e descritos pelos seus odores ou aromas peculiares. No Quadro 3 são citados alguns
termos usuais e comuns para produtos alimentícios.
Textura oral e manual – Refere-se às propriedades reológicas e estruturais (geométricas

e de superfície) dos produtos. Geralmente é percebida por três ou quatro sentidos: os
receptores mecânicos, táteis e, eventualmente, os visuais e auditivos. Relaciona-se com a
sensibilidade térmica e cinestésica. A avaliação da textura é mais complexa nos alimentos
sólidos, como nos ensaios de corte, compressão, relaxação, penetração, cisalhamento,
dobramento, etc. O julgador deve utilizar a pele da mão, da face e/ou da boca (cavidade
bucal e dentes). Quando avaliado pela boca pode ser definido como sensação bucal,
utilizando-se também termos como: adstringente, metálico, quente, frio, etc. Algu-
mas sensações são também nasais, como: pungente, refrescante, etc. Uma listagem de
termos próprios pode ser utilizada para melhor definição das propriedades de textura
(Quadro 2).
Sabor e gosto – É considerada como uma experiência mista, mas unitária de sensações
olfativas, gustativas e táteis percebidas durante a degustação. O sabor é percebido, prin-
cipalmente, através dos sentidos do gosto e olfato, também influenciado pelos efeitos tá-
teis, térmicos, dolorosos e/ou cinestésicos. O julgador deve tomar uma certa quantidade
da amostra, sem excessos, e proceder à deglutição, tomando o cuidado em evitar a fadiga
sensorial. Entre uma amostra e outra é aconselhável lavagem da cavidade oral com água
filtrada ou a neutralização do paladar ingerindo-se uma maçã, pão ou biscoito tipo cream
craker. O julgador deve evitar sensações fortes de gostos pelo menos 30 minutos antes do
teste, não deve apresentar nenhuma indisposição no organismo. Alguns termos usuais e
comuns para o sabor estão descritos no Quadro 3.
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Quadro 2 – Atributos de aparência, textura e cor comuns a produtos alimentícios
Aparência / Textura Cor*

Abaulada Derretida Manchada Acromática Marrom-avermelhado
Aderente Dessecada Massa Alaranjada Marrom-acinzentado
Adsorvida Desintegrada Maturada Alaranjado-claro Marrom-claro
Afilada Depositada Mofada Alaranjado-escuro Marrom-escuro
Aglomerada Dura Moída Amarela Marrom-esverdeado
Alongada Efervescente Mole Amarelo-alaranjado Rosada
Amanteigada Elástica Oleosa Amarelo-âmbar Rósea
Amassada Embolorada Ondulada Amarelo-claro Róseo-avermelhado
Amolecida Entremeada Pasta Amarelo-cinzento Róseo-claro
Aquosa Esfarelenta Pastilha Amarelo-escuro Róseo-escuro
Áspera Esférica Pastosa Amarelo-esverdeado Róseo-purpúreo
Avariada Esmigalhada Pegajosa Amarelo-fosco Róseo-violáceo
Bastão Espessa Película Amarelo-ouro Ocre
Bastonete Espumante Pó Amarelo-pálido Parda
Barra Exsudato Porosa Amarelo-palha Pardacenta
Borbulhante Fatiada Polpa Amarelo-pardacento Perolada
Borrachenta Fermentada Precipitada Amarelo-torrado Prateada
Brilhosa Fibrosa Prensada Âmbar Preta
Butirosa Filete Pulverulenta Âmbar-escuro Roxa
Calcinada Fina Quebradiça Argentada Verde
Caldo Firme Rachada Azul Verde-abacate
Caramelada Floco Rala Azul-celeste Verde-acinzentado
Coagulada Floculosa Recheada Azul-claro Verde-amarelado
Cobertura Fluido Recheio Azul-escuro Verde-azulado
Cominuída Fresca Repicada Azul-esverdeada Verde-bandeira
Compacta Friável Resíduo Azul-marinho Verde-claro
Comprimida Fundida Ressecada Azul-piscina Verde-escuro
Com cortes Gasosa Resistente Azul-turquesa Verde-esmeralda
Com depósito Gaseificada Retalhada Bege Verde-folha
Com fragmentos Gelatinosa Rija Branca Verde-garrafa
Com furos Gomosa Rodela Branco-de-giz Verde-mar
Com partículas Gordurosa Seca Branco-amarelado Verde-musgo
Com polpa Grão Sedimentada Branco-marfim Verde-oliva
Com precipitado Granulada Semidura Branco-pérola Verde-piscina
Com riscas Granulosa Semente Branco-sujo Vermelha
Congelada Grossa Sólida Brilhante Vermelho-alaranjado
Consistente Grumosa Solta Brilho-metálico Vermelho-arroxeado
Cozida Grudenta Suculenta Castanha Vermelho-cereja
Creme Heterogênea Tenra Cinza Vermelho-pardacento
Cremosa Homogênea Translúcida Cinzenta Vermelho-rosado
Cristal Íntegra Transparente Cor opaca Vermelho-rubro
Cristalino Irregular Tolete Cor uniforme Vermelho-violáceo
Cristalizada Lâmina Turva Cor pálida Vinho
Crocante Limo Uniforme Creme Violeta
Crosta Limosa Úmida Dourada Violeta-avermelhado
Crua Líquida Untuosa Incolor Violeta-azulado
Drágea Límpida Viscosa Marrom Violeta-claro
Deformada Macia Xarope Marrom-amarelado Violeta-escuro
Fonte: Instituto Adolfo Lutz (Baseado em MELO, 1946).
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* Relativa à tonalidade, luminosidade e saturação ou pureza. A cor pode ser primária

(como: azul, vermelho e amarelo); secundária (misturas proporcionais das cores pri-
márias, como: vermelho + amarelo = laranja; amarelo + azul = verde; azul + verme-
lho = violeta) e terciárias (misturas proporcionais das cores primárias e secundárias,
como: branco + azul = azul claro; preto + branco = cinza; verde + amarelo = verde-
amarelado; laranja + azul = marrom; branco + azul + vermelho = lilás; amarelo +
vermelho + pouco preto = bege; verde forte + alaranjado + preto = verde azeitona;
violeta + vermelho + preto = vinho, etc.)
Nota: as definições dos atributos citados podem ser encontradas na literatura, por inter-
médio de um glossário de termos empregados em análise sensorial.
Exemplos: consistente = propriedade de fluxo detectada pela estimulação dos recep-

tores mecânicos e táteis, especialmente na cavidade oral, e que varia com a textura do
produto; cristalino = relativo à forma e orientação das partículas ou cristais de um pro-
duto, como o açúcar cristal; crocante = produto duro que ao ser quebrado produz som
característico, como da batata frita “chips”; efervescente = aquele que desprende gás
carbônico na superfície, observado em bebidas gaseificadas ou carbonatadas; esfarelenta
= que esfarela ou desintegra, como o bolo-de-fubá; fibrosa = propriedade da textura em
relação à percepção da forma e presença de partículas, como fibras do palmito e manga
espada; gomosa = relativa à energia necessária para desintegrar um produto semi-sólido
a fim de que possa ser ingerido, resultado de um fraco grau de dureza e alto grau de co-
esão, como flocos de aveia bem cozidos. Líquido, ralo, untuoso, viscoso = propriedade
de resistência ao escoamento, como a água (baixa), leite (média-baixa), creme de leite
(média), cuja correspondência pode ser a viscosidade; macio, firme, dura = relativa à
força necessária para obter dada deformação, penetração e/ou cizalhamento, como o
queijo cremoso (macio-baixa resistência); azeitona (firme-média resistência); bala (du-
ra-alta resistência); translúcida = aquela substância que permite a passagem da luz, mas
não permite a distinção de uma imagem distinta; transparente = aquela substância que
permite a passagem da luz e o aparecimento de uma imagem nítida.
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Quadro 3 – Atributos de odor e sabor comuns a alguns produtos alimentícios
Odor e Sabor
Ácido Amanteigado Cáustico Graxo Nauseante
Acre Amendoado Carbonatado Impróprio Odorífico
Acético Amiláceo Condimentado Impuro Picante
Achocolatado Amoniacal Cúprico Inadequado Penetrante
Açucarado Anormal Defumado Inodoro Perfumado
Adamascado Ardente Desagradável Irritante Próprio
Adoçado Ardido Desodorante Insípido Pungente
Adocicado Apimentado Diluído Insosso Putrefato
Adiposo Aromático Doce Insuportável Pútrido
Adstringente Atípico Enfumaçado Horrível Rançoso
Adulterado Artificial Enjoativo Láctico Refrescante
Afumado Azedo Envelhecido Leve Remanescente
Agradável Azeitonado Estragado Licoroso Repulsivo
Agre Balsâmico Estranho Maresia Salgado
Agridoce Benzênico Etéreo Maturado Salino
Aguado Bouquet Fermentado Medicinal Sápido
Alcalino Butírico Ferruginoso Melado Saponáceo
Alcoólico Cacau Fétido Mentolado Suave
Aliáceo Café-com-leite Floral Metálico Sulfuroso
Alterado Cafeinado Frutado Mofado Oxidado
Amargo Caramelado Frutoso Natural Queimado
Amargoso Característico Gorduroso Normal Velho
Fonte: Instituto Adolfo Lutz (Baseado em MELO, 1946).
Nota: as definições dos atributos citados podem ser encontradas na literatura, por meio de
um glossário de termos empregados em análise sensorial. Exemplos: acre = odor e sabor picante,
irritante e áspero, como o do alho, fósforo e solução de ácido fórmico a 90% (p/v); agre = qualifica
a sensação gustativa com predomínio ácido, onde alguns fatores que contribuem para esta sensação
se relacionam a um processo de fermentação (acético ou láctico); adstringente = sensação
produzida pela contração da mucosa da boca, como por uma solução aquosa diluída de
alguns taninos, como do caqui ou banana verde; alcalino = sensação escorregadia devido à
alcalinidade, como solução de bicarbonato de sódio; azedo = sensação complexa olfativa e/
ou gustativa, geralmente devido à presença de ácidos orgânicos. Entretanto não pode ser
usado como sinônimo de gosto primário ácido e pode ter algumas vezes, uma conotação
hedônica negativa. Bouquet = conjunto de caracteres olfativos específicos de um produto,
como vinho, licores; cúprico = com sabor de cobre, áspero e penetrante; estranho = aquele
odor ou sabor não característico do produto; inodoro = qualifica um produto que não tem
odor; insosso = ou “flat”, produto que não atinge nível sensorial adequado, como sem sal,
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sem tempero; metálico = sensação de metal na mucosa da boca; pungente = sensação de dor
causada, por exemplo, ao cheirar uma solução de ácido acético (2-5%); sápido = qualifica
um produto que produz sabor. O contrário é insípido = falta de sabor, ou que possui aroma
e sabor típicos, mas em níveis inferiores ao que poderia conter o produto (sinônimo de
insosso).
154/IV Análise das características sensoriais
Procedimento – Para análise das características sensoriais, o julgador deve expressar suas
impressões em relação aos atributos sensoriais e descrevê-los utilizando vocabulário próprio,
conforme modelo na Ficha 1. A reunião de julgadores se dá em torno de uma mesa redonda
confortável, com as condições ambientais controladas, tais como: iluminação, temperatura,
ausência de sons ou ruídos e livre de odores estranhos. Durante o teste, o julgador deve
omitir-se de conversas paralelas. Depois, inicia-se uma conversação, na qual, por consenso,
são definidos os termos ou componentes perceptíveis que melhor definem cada um dos atri-
butos sensoriais e, conseqüentemente, a conclusão do resultado de análise. Recomenda-se
que o número de julgadores selecionados seja no mínimo 3, de preferência número ímpar,
para que, se houver divergência de opiniões, possa haver desempate, prevalecendo o resul-
tado consensual da maioria.
Ficha 1 – Modelo para teste de características sensoriais
Amostra: Julgador: Data:
Aparência
Odor e aroma
Textura
Sensação bucal
Sabor e gosto
Comentários
Testes discriminativos
Os testes sensoriais discriminativos ou de diferença são considerados métodos objeti-

vos utilizados em análise sensorial de alimentos, bebidas e água, com os efeitos das opiniões
dos indivíduos minimizados. Medem atributos específicos pela discriminação simples, in-
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dicando por comparações, se existem ou não diferenças estatísticas entre amostras. Exi-
gem cuidados na padronização do preparo e apresentação das amostras e na formação da
equipe sensorial. Todas as amostras devem ser codificadas com números aleatórios de três
dígitos, casualizadas e apresentadas à equipe pré-selecionada e treinada. Os testes devem
ser conduzidos em cabines individualizadas com controle das condições ambientais, tais
como: iluminação, temperatura, ausência de sons ou ruídos e livre de odores estranhos.
Os testes discriminativos ou de diferença mais empregados em análise sensorial são o
triangular, duo-trio, ordenação, comparação pareada e comparação múltipla ou diferença
do controle.
155/IV Testes discriminativos – Teste triangular
Procedimento – O teste triangular detecta pequenas diferenças entre amostras. São apre-
sentadas simultaneamente três amostras codificadas, sendo duas iguais e uma diferente.
Cabe ao julgador identificar a amostra diferente (Ficha 2). A escolha é forçada. A proba-
bilidade de acertos é p = 1/3. A interpretação do resultado se baseia no número total de
julgamentos versus o número de julgamentos corretos (Quadro 4). Se o número de julga-
mentos corretos for maior ou igual ao valor tabelado (Tabela 1), conclui-se que existe dife-
rença significativa entre as amostras no nível de probabilidade correspondente. O número
de julgadores selecionados deve ser de 20 a 40, embora apenas 12 possam ser utilizados
quando as diferenças entre amostras são razoavelmente grandes. As amostras devem ser
apresentadas casualizadas em igual número de vezes nas permutações distintas: AAB, BAA,
ABA, ABB, BBA e BAB.
Ficha 2 – Modelo para teste triangular
Você está recebendo três amostras codificadas, sendo duas iguais e uma diferente.
Identifique com um círculo a amostra diferente.
__________ __________ __________
Comentários:
Fonte: ABNT, NBR 12995, 1993.
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Quadro 4 – Modelo de casualização e resultado do teste triangular
Amostra:
Nº de codificação: (A) _______/_______ (B) _______/_______
Resposta
Ordem de do
Nº Nome do julgador Comentários
apresentação julgador*
(C) ou (E)
1 A A B
2 B A A
3 A B A
4 A B B
5 B B A
6 B A B
7 A A B
p
nº de julgamentos totais
nº de julgamentos corretos
Valor tabelado (nível de
probabilidade)
* Correta (C)
Errada (E).
p = nº de julgadores
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Tabela 1 – Teste triangular (unilateral, p = 1/3). Número mínimo de julgamentos

corretos para estabelecer significância a vários níveis de probabilidade.
Nº total de Níveis de probabilidade ( α )
julgamentos 5% 4% 3% 2% 1% 0,5% 0,1%
5 4 5 5 5 5 5 -
6 5 5 5 5 6 6 -
7 5 6 6 6 6 7 7
8 6 6 6 6 7 7 8
9 6 7 7 7 7 8 8
10 7 7 7 7 8 8 9
11 7 7 8 8 8 9 10
12 8 8 8 8 9 9 10
13 8 8 9 9 9 10 11
14 9 9 9 9 10 10 11
15 9 9 10 10 10 11 12
16 9 10 10 10 11 11 12
17 10 10 10 11 11 12 13
18 10 11 11 11 12 12 13
19 11 11 11 12 12 13 14
20 11 11 12 12 13 13 14
21 12 12 12 13 13 14 15
22 12 12 13 13 14 14 15
23 12 13 13 13 14 15 16
24 13 13 13 14 15 15 16
25 13 14 14 14 15 16 17
26 14 14 14 15 15 16 17
27 14 14 15 15 16 17 18
28 15 15 15 16 16 17 18
29 15 15 16 16 17 17 19
30 15 16 16 16 17 18 19
31 16 16 16 17 18 18 20
32 16 16 17 17 18 19 20
33 17 17 17 18 18 19 21
34 17 17 18 18 19 20 21
35 17 18 18 19 19 20 22
36 18 18 18 19 20 20 22
37 18 18 19 19 20 21 22
38 19 19 19 20 21 21 23
39 19 19 20 20 21 22 23
40 19 20 20 21 21 22 24
41 20 20 20 21 22 23 24
42 20 20 21 21 22 23 25
43 20 21 21 22 23 24 25
44 21 21 22 22 23 24 26
45 21 22 22 23 24 24 26
46 22 22 22 23 24 25 27
47 22 22 23 23 24 25 27
48 22 23 23 24 25 26 27
49 23 23 24 24 25 26 28
50 23 24 24 25 26 26 28
60 27 27 28 29 30 31 33
70 31 31 32 33 34 35 37
80 35 35 36 36 38 39 41
90 38 39 40 40 42 43 45
100 42 43 43 44 45 47 49
IAL - 293
156/IV Testes discriminativos – Teste duo-trio
Procedimento – O teste duo-trio detecta diferença sensorial entre uma amostra e um

padrão (P). São apresentados simultaneamente o padrão e duas amostras codificadas,
sendo uma delas idêntica ao padrão. Cabe ao julgador identificar a amostra igual ao
padrão (Ficha 3). A escolha é forçada. A probabilidade de acertos é de 50% (p = 1/2).
A interpretação do resultado se baseia no número total de julgamentos versus o número
de julgamentos corretos (Quadro 5). Se o número de julgamentos corretos for maior
ou igual ao valor tabelado (Tabela 2), conclui-se que existe diferença significativa entre
as amostras no nível de probabilidade correspondente. O número de julgadores deve
ser no mínimo de sete julgadores especialistas ou no mínimo de 15 julgadores sele-
cionados. As amostras podem ser apresentadas casualizadas nas permutações: AB, BA
(para P = A) e AB, BA (para P = B).
Ficha 3 – Modelo para teste duo-trio

Você está recebendo uma amostra padrão (P) e duas amostras codificadas. Uma das amostras
codificadas é igual ao padrão, faça um círculo nesta amostra.
__________ __________
Comentários:
Quadro 5 – Modelo de casualização e resultado do teste duo-trio

Amostra:
nº de codificação: (P = A) (A)______/ (B)______ (P = B) (A)______/ (B)_____
Resposta do
Nº Nome do julgador Ordem de apresentação julgador* Comentários
(C) ou (E)
1 A B
2 B A
3 A B
4 B A
5 A B
6 B A
p
nº de julgamentos totais
Valor tabelado (nível de probabilidade)
* Correta (C) Errada (E) p = nº de julgadores P = padrão
294 - IAL
Tabela 2 – Teste duo-trio (unilateral p = 1/2). Número mínimo de julgamentos corretos

para estabelecer significância a vários níveis de probabilidade.
Nº total de Níveis de probabilidade (α)

julgamentos 5% 4% 3% 2% 1% 0,5% 0,1%
7 7 7 7 7 7 - -
8 7 7 8 8 8 8 -
9 8 8 8 8 9 9 -
10 9 9 9 9 10 10 10
11 9 9 10 10 10 11 11
12 10 10 10 10 11 11 12
13 10 11 11 11 12 12 13
14 11 11 11 12 12 13 13
15 12 12 12 12 13 13 14
16 12 12 13 13 14 14 15
17 13 13 13 14 14 15 16
18 13 14 14 14 15 15 16
19 14 14 15 15 15 16 17
20 15 15 15 16 16 17 18
21 15 15 16 16 17 17 18
22 16 16 16 17 17 18 19
23 16 17 17 17 18 19 20
24 17 17 18 18 19 19 20
25 18 18 18 19 19 20 21
26 18 18 19 19 20 20 22
27 19 19 19 20 20 21 22
28 19 20 20 20 21 22 23
29 20 20 21 21 22 22 24
30 20 21 21 22 22 23 24
31 21 21 22 22 23 24 25
32 22 22 22 23 24 24 26
33 22 23 23 23 24 25 26
34 23 23 23 24 25 25 27
35 23 24 24 25 25 26 27
36 24 24 25 25 26 27 28
37 24 25 25 26 26 27 29
38 25 25 26 26 27 28 29
39 26 26 26 27 28 28 30
40 26 27 27 27 28 29 30
41 27 27 27 28 29 30 31
42 27 28 28 29 29 30 32
43 28 28 29 29 30 31 32
44 28 29 29 30 31 31 33
45 29 29 30 30 31 32 34
46 30 30 30 31 32 33 34
47 30 30 31 31 32 33 35
48 31 31 31 32 33 34 36
50 32 32 33 34 34 35 37
60 37 38 38 39 40 41 43
70 43 43 44 45 46 47 49
80 48 49 49 50 51 52 55
90 54 54 55 56 57 58 61
100 59 60 60 61 63 64 66
IAL - 295
157/IV Testes discriminativos – Teste de ordenação
Procedimento – O teste de ordenação avalia três ou mais amostras, simultaneamente,

ordenando-as em relação à intensidade de um atributo específico ou de sua preferên-
cia. Não quantifica o grau da diferença ou preferência entre amostras. Este teste pode
ser aplicado para pré-seleção entre grande número de amostras. Uma série de três ou
mais amostras codificadas aleatorizadas é apresentada ao julgador para que ordene em
ordem crescente ou decrescente da intensidade do atributo específico ou mais preferido
(Ficha 4). O resultado é dado pela soma das ordens obtidas dos julgadores a cada uma
das amostras (Quadro 6). A avaliação estatística deve ser feita pelo teste de Friedman
utilizando a tabela de Newell e MacFarlane para verificar se há ou não diferença signi-
ficativa entre amostras. Se a diferença entre as somas das ordens for maior ou igual ao
valor tabelado, conclui-se que existe diferença significativa entre as amostras ao nível
de significância correspondente. O número de julgadores deve ser no mínimo de cinco
especialistas ou 15 julgadores selecionados. Para o teste de preferência em laboratório,
utilizam-se 30 ou mais julgadores e, para o teste de consumidor, 100 ou mais. As amos-
tras devem ser apresentadas de forma balanceada ou casualizada.
Ficha 4 – Modelo para teste de ordenação
Você está recebendo quatro amostras codificadas. Avalie cada uma, colocando-as em
ordem crescente da intensidade do atributo específico.
________ ________ ________ ________

primeira segunda terceira quarta
Comentários:
Fonte: ABNT, NBR 13170 / 1994.
296 - IAL
Quadro 6 – Modelo de casualização e tabulação de resultado do teste de ordenação
Amostra:
nº de codificação: (A)______ (B)______ (C)______ (D)______
nº Nome do julgador Ordem de apresentação Comentários

1 A B C D
2 A C B D
3 B A D C
4 B C A D
5 C D B A
4 C A D B
5 D B A C
6 D C B A
7 A B C D
p
Tipos de amostras ou tratamentos (A) (B) (C) (D)
Soma das ordens Σ (A) Σ(B) Σ(C) Σ(D)
nº de julgamentos (p)
nº de amostras ou tratamentos (t)
Valor tabelado (nível de significância)
Teste de Friedman – Com o número de amostras ou tratamentos avaliados (t) e o núme-

ro de julgamentos (p) obtidos, utiliza-se a tabela de Newel e MacFarlane (Tabelas 3 ou
4, respectivamente, para os níveis de significância de 5% e 1%), para obter a diferença
crítica entre os totais de ordenação. Se as diferenças entre as soma das ordens de duas
amostras (Quadro 7) diferirem por um valor maior ou igual ao valor tabelado (crítico),
existe diferença significativa entre elas ao nível testado.
Quadro 7 – Módulos de diferenças entre somas das ordens de amostras
Amostras (A) (B) (C) (D)

Somatória total Σ (A) Σ (B) Σ (C) Σ(D)
Diferenças versus A - Σ (A) - Σ (B) Σ (A) - Σ(C) Σ (A) - Σ(D)
Diferenças versus B - - Σ (B) - Σ(C) Σ(B) - Σ (D)
Diferenças versus C - - - Σ (C) - Σ(D)
Nota: para saber quais amostras diferem entre si, primeiro coloque-as em ordem cres-
cente da somatória total e, depois, dê letras diferentes para as que diferirem por um
número maior ou igual ao valor tabelado e letras iguais para as que não diferirem
entre si.
IAL - 297
Tabela 3 – Valores críticos para comparação com os módulos das diferenças entre as so-
mas das ordens do teste de ordenação, a 5% de significância
Nº de nº de amostras ou tratamentos
julgamentos 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
5 8 11 14 17 21 24 27 30 34 37
6 9 12 15 19 22 26 30 34 37 42
7 10 13 17 20 24 28 32 36 40 44
8 10 14 18 22 26 30 34 38 43 47
9 10 15 19 23 27 32 36 41 46 50
10 11 15 20 24 29 34 38 43 48 53
11 11 16 21 25 30 35 40 45 51 56
12 12 17 22 27 32 37 42 48 53 58
13 12 18 23 28 33 39 44 50 55 61
14 13 18 24 29 34 40 46 52 57 63
15 13 19 24 30 36 42 47 53 59 66
16 14 19 25 31 37 42 49 55 61 67
17 14 20 26 32 38 44 50 56 63 69
18 15 20 26 32 39 45 51 59 65 71
19 15 21 27 33 40 46 53 60 66 73
20 15 21 28 34 41 47 54 61 68 75
21 16 22 28 35 42 49 56 63 70 77
22 16 22 29 36 43 50 57 64 71 79
23 16 23 30 37 44 51 58 65 73 80
24 17 23 30 37 45 52 59 67 74 82
25 17 24 31 38 46 53 61 68 76 84
26 17 24 32 39 46 54 62 70 77 85
27 18 25 32 40 47 55 63 71 79 87
28 18 25 33 40 48 56 64 72 80 89
29 18 26 33 41 49 57 65 73 82 90
30 19 26 34 42 50 58 66 75 83 92
31 19 27 34 42 51 59 67 76 85 93
32 19 27 35 43 51 60 68 77 85 95
33 20 27 36 44 52 61 70 78 87 96
34 20 28 36 44 53 62 71 79 89 98
35 20 28 37 45 54 63 72 81 90 99
36 20 29 37 46 55 63 73 82 91 100
37 21 29 38 46 55 64 74 83 92 102
38 21 29 38 47 56 65 75 84 94 103
39 21 30 39 48 57 66 76 85 95 105
40 21 30 39 48 57 67 76 86 96 106
41 22 31 40 49 58 68 77 87 97 107
42 22 31 40 49 59 69 78 89 98 109
43 22 31 41 50 60 69 79 89 99 110
44 22 32 41 51 60 70 80 90 101 111
45 23 32 41 51 61 71 81 91 102 112
46 23 32 42 52 62 72 82 92 103 114
47 23 33 42 52 62 72 83 93 104 115
48 23 33 43 53 63 73 84 94 105 116
49 24 33 43 53 64 74 85 95 106 117
50 24 34 44 54 64 75 85 95 107 118
55 25 35 46 56 67 78 90 101 112 124
60 26 37 48 59 70 82 94 105 117 130
65 27 38 50 61 73 85 97 110 122 135
70 28 40 52 64 76 88 101 114 127 140
75 29 41 53 66 79 91 105 118 131 145
80 30 42 55 68 81 94 108 122 136 150
85 31 44 57 70 84 97 111 125 140 154
90 32 45 58 72 86 100 114 129 144 159
100 34 47 61 76 91 105 121 136 151 167
Fonte: ABNT – NBR 13170, 1994.
298 - IAL
Capítulo VI - Análise Sensorial
Tabela 4 – Valores críticos para comparação com os módulos das diferenças entre as
somas das ordens do teste de ordenação, a 1% de significância
Nº de nº de amostras ou tratamentos
julgamentos 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
5 9 13 16 19 23 26 30 33 37 41
6 10 14 18 21 25 29 33 37 41 45
7 11 15 19 23 28 32 36 40 45 49
8 12 16 21 25 30 34 39 43 48 53
9 13 17 22 27 32 36 41 46 51 56
10 13 18 23 28 33 38 44 49 54 59
11 14 19 24 30 35 40 46 51 57 63
12 15 20 26 31 37 42 48 54 60 66
13 15 21 27 32 38 44 50 56 62 68
14 16 22 28 34 40 46 52 58 65 71
15 16 22 28 35 41 48 54 60 67 74
16 17 23 30 36 43 49 56 63 70 77
17 17 24 31 37 44 51 58 65 72 79
18 18 25 31 38 45 52 60 67 74 81
19 18 25 32 39 46 54 61 69 76 84
20 19 26 33 40 48 55 63 70 78 86
21 19 27 34 41 49 56 64 72 80 88
22 20 27 35 42 50 58 66 74 82 90
23 20 28 35 43 51 59 67 75 84 92
24 21 28 36 44 52 60 69 77 85 94
25 21 29 37 45 53 62 70 79 87 96
26 22 29 38 46 54 63 71 80 89 98
27 22 30 38 47 55 64 73 82 91 100
28 22 31 39 48 56 65 74 83 92 101
29 23 31 40 48 57 66 75 85 94 103
30 23 32 40 49 58 67 77 86 95 105
31 23 32 41 50 59 69 78 87 97 107
32 24 33 42 51 60 70 79 89 99 108
33 24 33 42 52 61 71 80 90 100 110
34 25 34 43 52 62 72 82 92 102 112
35 25 34 44 53 63 73 83 93 103 113
36 25 35 44 54 64 74 84 94 105 115
37 26 35 45 55 65 75 85 95 106 117
38 26 36 45 55 66 76 86 97 107 118
39 26 36 46 56 66 77 87 98 109 120
40 27 36 47 57 67 78 88 99 110 121
41 27 37 47 57 68 79 90 100 112 123
42 27 37 48 58 69 80 91 102 113 124
43 28 38 48 59 70 81 92 103 114 126
44 28 38 49 60 70 82 93 104 115 127
45 28 39 49 60 71 82 94 105 117 128
46 28 39 50 61 72 83 95 106 118 130
48 29 40 51 62 74 85 97 109 121 133
50 30 41 52 63 75 87 99 111 123 135
60 32 45 57 60 82 95 108 121 135 148
70 35 48 61 75 89 103 117 131 146 160
80 37 51 66 80 95 110 125 140 156 171
100 42 57 73 89 106 123 140 157 174 191
Fonte: ABNT, NBR 13170, 1994
IAL - 299
158/IV Testes discriminativos – Teste de comparação pareada
Procedimento – O teste de comparação pareada pode ser direcional, detectando

pequenas diferenças entre amostras quanto a um atributo específico ou estabelecendo
a existência de uma preferência. Pode ser aplicado para selecionar e treinar julgadores.
Duas amostras são apresentadas simultaneamente. Cabe ao julgador identificar a
amostra codificada que apresenta o atributo específico diferente (Ficha 5) ou a amostra
preferida. Ao julgador deve-se fazer uma pergunta específica relevante, referindo-se à
diferença, diferença direcional ou preferência. Perguntas sobre diferença e preferência
não devem ser combinadas. A escolha é forçada. A probabilidade de acertos é de
50% (p = 1/2). A interpretação do resultado se baseia no número de julgamentos
totais versus o número de julgamentos corretos. Se o número de julgamentos corretos
for maior ou igual ao valor tabelado (Tabela 5, unilateral e bilateral) conclui-se que
existe diferença significativa entre as amostras ao nível de probabilidade correspondente
(Quadro 8). O teste unilateral é utilizado quando a priori se sabe que existe diferença
entre amostras, mas, deseja saber se esta diferença é perceptível sensorialmente. O teste
bilateral é empregado quando não se sabe se existe diferença entre amostras ou na
avaliação da preferência. O número de julgadores selecionados deve ser no mínimo
15, porém com equipe altamente treinada pode-se trabalhar com 8 a 9 julgadores. Ao
julgador deve ser fornecido um ou mais pares de amostras codificadas, apresentadas em
ordem balanceada ou ao acaso nas permutações AB e BA.
Ficha 5 – Modelo para teste de comparação pareada
Você está recebendo duas amostras codificadas. Uma amostra codificada é mais intensa no
atributo (especificar). Identifique-a com um círculo.
__________ __________
Comentários:
300 - IAL
Quadro 8 – Modelo de casualização e resultado para comparação pareada
Amostra:
nº de codificação: (A) _______ (B) _______
Resposta do
Ordem de
nº Nome do julgador julgador* Comentários
apresentação
(C) ou (E)
1 A B
2 B A
3 A B
4 B A
5 A B
6 B A
p
nº de julgamentos totais (p)
Valor tabelado (nível de probabilidade)
* Correta (C) Errada (E) p = nº de julgadores ou julgamentos
Tabela 5 – Teste de comparação pareada. Número mínimo de julgamentos corretos

para estabelecer significância em vários níveis de probabilidade.
Níveis de probabilidade (α)
nº total de Bilateral (p=1/2), preferência Unilateral (p=1/2), diferença
julgamentos 5% 1% 0,1% 5% 1% 0,1%
5 - - - 5 - -
6 6 - - 6 - -
7 7 - - 7 7 -
8 8 8 - 7 8 -
9 8 9 - 8 9 -
10 9 10 - 9 10 10
11 10 11 11 9 10 11
12 10 11 12 10 11 12
13 11 12 13 10 12 13
14 12 13 14 11 12 13
15 12 13 14 12 13 14
16 13 14 15 12 14 15
17 13 15 16 13 14 16
18 14 15 17 13 15 16
19 15 16 17 14 15 17
20 15 17 18 15 16 18
21 16 17 19 15 17 18
22 17 18 19 16 17 19
23 17 19 20 16 18 20
24 18 19 21 17 19 20
25 18 20 21 18 19 21
26 19 20 22 18 20 22
27 20 21 23 19 20 22
28 20 22 23 19 21 23
29 21 22 24 20 22 24
30 21 23 25 20 22 24
IAL - 301
nº total de Níveis de probabilidade (α)

Bilateral (p=1/2), preferência Unilateral (p=1/2), diferença
julgamentos 5% 1% 0,1% 5% 1% 0,1%
31 22 24 25 21 23 25
32 23 24 26 22 24 26
33 23 25 27 22 24 26
34 24 25 27 23 25 27
35 24 26 28 23 25 27
36 25 27 29 24 26 28
37 25 27 29 24 26 29
38 26 28 30 25 27 29
39 27 28 31 26 28 30
40 27 29 31 26 28 30
41 28 30 32 27 29 31
42 28 30 32 27 29 32
43 29 31 33 28 30 32
44 29 31 34 28 31 33
45 30 32 34 29 31 34
46 31 33 35 30 32 34
47 31 33 36 30 32 35
48 32 34 36 31 33 36
49 32 34 37 31 34 36
50 33 35 37 32 34 37
60 39 41 44 37 40 43
70 44 47 50 43 46 49
80 50 52 56 48 51 55
90 55 58 61 54 57 61
100 61 64 67 59 63 66
Fonte: ABNT, NBR 13088, 1994
159/IV Testes discriminativos – Teste de comparação múltipla
Procedimento – O teste de comparação múltipla ou diferença-do-controle avalia, si-

multaneamente, uma ou mais amostras quanto a um atributo específico, determinando
a diferença e o grau da diferença em relação a um controle (C). Apresenta-se o controle
(C), a amostra-controle codificada e uma ou mais amostras-teste codificadas. Cabe ao
julgador avaliar e dar valores às amostras-teste codificadas em comparação ao controle
através da escala de grau de diferença (Ficha 6) que poderá ser verbal, numérica ou
mista. Para análise dos dados faça correspondência entre os valores verbais e numéri-
cos. Deve-se comunicar ao julgador que uma das amostras pode ser igual ao controle.
A interpretação do resultado (Quadro 9) é realizada por meio da análise de variância
(Quadro 10 – Tabela 6) e teste de comparação múltipla de médias. Quando o interesse
é comparar amostra-teste com a amostra-controle, o teste apropriado é o de Dunnett,
unilateral ou bilateral (Tabelas 7 ou 8). O número de julgadores deve ser no mínimo
7 especialistas ou, 15 treinados. As amostras são geralmente apresentadas em delinea-
mento experimental de blocos completos balanceados ou casualizados.
302 - IAL
Ficha 6 – Modelo para teste de comparação múltipla ou diferença-do-controle
Você está recebendo uma amostra controle (C) e três amostras codificadas. Compare cada
uma com o controle quanto ao atributo (especificar). Expresse o valor da diferença utilizando
a escala abaixo:
1 2 3 4 5
nenhuma ligeira moderada muita extrema
valor
_______ _______
_______ _______
_______ _______
Comentários:
Quadro 9 – Modelo de casualização e resultados do teste de comparação múltipla ou

diferença-do-controle
Amostra:
nº de codificação: (A = controle codificado) _____ (B) _____ (C) _____
nº Nome do julgador Ordem de apresentação Comentários

1 A B C
2 A C B
3 B C A
4 B A C
5 C A B
6 C B A
p
Soma de valores por amostra Σ am (A) Σ am (B) Σ am (C) Σ total am
Soma de valores por julgador Σ julg (1) Σ julg (2) Σ julg (3) Σ total julg
Média dos valores por amostra Σ am(A)/p Σ am(B)/p Σ am(C)/p
nº de julgadores ou julgamentos (p)
nº de amostras ou tratamentos (n)
nº de observações (N = n x p)
IAL - 303
Análise de Variância – Utilizando as fórmulas a seguir, realize a ANOVA tomando como

orientação o Quadro 10.
Cálculos
FC = (Σ total am ou julg)2 / N
N=nxp
SQ am = {[Σ am (A)] 2 + [Σ am (B)] 2 + [Σ am (C)] 2 /p} - FC
SQ julg = {[Σjulg (1)] 2 +[Σjulg (2)] 2 +[Σ julg (3)] 2 /n} - FC
SQ tot = Σ (cada valor atribuído às amostras pelos julgadores) 2 - FC
SQ res = SQ tot - (SQ am + SQ julg)
Quadro 10 – Modelo para análise de variância (ANOVA)
FV GL SQ QM Fc
Amostra (n – 1) SQ am SQ am / n – 1 QMam / QMres
Julgador (p – 1) SQ julg SQ julg / p – 1 QMjulg / QMres
Resíduo (N – 1) – (n – 1) – (p – 1) SQ res SQ res / N – n – p + 1 -
Total (N – 1) SQ tot - -
FV = fontes de variação; GL = graus de liberdade; SQ = soma dos quadrados; QM = qua-
drado médio; Fo = valor observado de estatística “F” de Snedecor (Tabela 6); Fc = valor
calculado.
Nota: se Fcam for maior que Fo, existe diferença significativa (p<0,05) entre pelo menos
duas amostras codificadas.
Diferença mínima significativa (DMS) pelo teste de Dunnett – Para verificar qual amostra-
teste difere da amostra-controle (C) ao nível de significância de 5%, utilize a fórmula:
QM res = quadrado médio do resíduo

n = número de repetições de cada amostra (número de julgadores)
d = valor crítico para teste unilateral ou bilateral de Dunnett (Tabela 7 ou 8)
As amostras que diferirem do controle codificado por uma diferença maior ou igual ao
valor de DMS, são consideradas significativamente diferentes do controle ao nível de sig-
nificância de 5%. Utilize o teste de Dunnett unilateral (Tabela 7) quando a priori sabe-se
304 - IAL
que existe diferença entre amostras, ou bilateral (Tabela 8) quando não se sabe se existe
diferença entre amostras.
Tabela 6 – Valores de F para o nível de erro α = 5%, segundo número de graus de liberdade
de n1 e n2
n1
n2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
5 6,61 5,79 5,41 5,19 5,05 4,95 4,88 4,82 4,77 4,74 4,70
6 5,99 5,14 4,76 4,53 4,39 4,28 4,21 4,15 4,10 4,06 4,03
7 5,59 4,74 4,35 4,12 3,97 3,87 3,79 3,73 3,68 3,64 3,60
8 5,32 4,46 4,07 3,84 3,69 3,58 3,50 3,44 3,39 3,35 3,31
9 5,12 4,26 3,86 3,63 3,48 3,37 3,29 3,23 3,18 3,14 3,10
10 4,96 4,10 3,71 3,48 3,33 3,22 3,14 3,07 3,02 2,98 2,94
11 4,84 3,98 3,59 3,36 3,20 3,09 3,01 2,95 2,90 2,85 2,82
12 4,75 3,89 3,49 3,26 3,11 3,00 2,91 2,85 2,80 2,75 2,72
13 4,67 3,81 3,41 3,18 3,03 2,92 2,83 2,77 2,71 2,67 2,63
14 4,60 3,74 3,34 3,11 2,96 2,85 2,76 2,70 2,65 2,60 2,56
15 4,54 3,68 3,29 3,06 2,90 2,79 2,71 2,64 2,59 2,54 2,51
16 4,49 3,63 3,24 3,01 2,85 2,74 2,66 2,59 2,54 2,49 2,45
17 4,45 3,59 3,20 2,96 2,81 2,70 2,61 2,55 2,49 2,45 2,41
18 4,41 3,55 3,16 2,93 2,77 2,66 2,58 2,51 2,46 2,41 2,37
19 4,38 3,52 3,13 2,90 2,74 2,63 2,54 2,48 2,42 2,38 2,34
20 4,35 3,49 3,10 2,87 2,71 2,60 2,51 2,45 2,39 2,35 2,31
21 4,32 3,47 3,07 2,84 2,68 2,57 2,49 2,42 2,37 2,32 2,28
22 4,30 3,44 3,05 2,82 2,66 2,55 2,46 2,40 2,34 2,30 2,26
23 4,28 3,42 3,03 2,80 2,64 2,53 2,44 2,37 2,32 2,27 2,24
24 4,26 3,40 3,01 2,78 2,62 2,51 2,42 2,36 2,30 2,25 2,22
25 4,24 3,39 2,99 2,76 2,60 2,49 2,40 2,34 2,28 2,24 2,20
26 4,23 3,37 2,98 2,74 2,59 2,47 2,39 2,32 2,27 2,22 2,18
27 4,21 3,35 2,96 2,73 2,57 2,46 2,37 2,31 2,25 2,20 2,16
28 4,20 3,34 2,95 2,71 2,56 2,45 2,36 2,29 2,24 2,19 2,15
29 4,18 3,33 2,93 2,70 2,55 2,43 2,35 2,28 2,22 2,18 2,14
30 4,17 3,32 2,92 2,69 2,53 2,42 2,33 2,27 2,21 2,16 2,12
40 4,08 3,23 2,84 2,61 2,45 2,34 2,25 2,18 2,12 2,08 2,04
60 4,00 3,15 2,76 2,53 2,37 2,25 2,17 2,10 2,04 1,99 1,95
120 3,92 3,07 2,68 2,45 2,29 2,17 2,09 2,02 1,96 1,91 1,86
n1 = graus de liberdade da causa de variação (amostra);
n2 = graus de liberdade do resíduo.
IAL - 305
Tabela 7 – Valores de d para teste de Dunnett, unilateral, nível de erro α = 5%, segun-
do o número de tratamentos P excluindo o controle, e o número de graus de liberdade
do resíduo n1
P
n1
1 2 3 4 5 6 7 8 9
5 2,02 2,44 2,68 2,85 2,98 3,08 3,16 3,24 3,30
6 1,94 2,34 2,56 2,71 2,83 2,92 3,00 3,07 3,12
7 1,89 2,27 2,48 2,62 2,73 2,82 2,89 2,95 3,01
8 1,86 2,22 2,42 2,55 2,66 2,74 2,81 2,87 2,92
9 1,83 2,18 2,37 2,50 2,60 2,68 2,75 2,81 2,86
10 1,81 2,15 2,34 2,47 2,56 2,64 2,70 2,76 2,81
11 1,80 2,13 2,31 2,44 2,53 2,60 2,67 2,72 2,77
12 1,78 2,11 2,29 2,41 2,50 2,58 2,64 2,69 2,74
13 1,77 2,09 2,27 2,39 2,48 2,55 2,61 2,66 2,71
14 1,76 2,08 2,25 2,37 2,46 2,53 2,59 2,64 2,69
15 1,75 2,07 2,24 2,36 2,44 2,51 2,57 2,62 2,67
16 1,75 2,06 2,23 2,34 2,43 2,50 2,56 2,61 2,65
17 1,74 2,05 2,22 2,33 2,42 2,49 2,54 2,59 2,64
18 1,73 2,04 2,21 2,32 2,41 2,48 2,53 2,58 2,62
19 1,73 2,03 2,20 2,31 2,40 2,47 2,52 2,57 2,61
20 1,72 2,03 2,19 2,30 2,39 2,46 2,51 2,56 2,60
24 1,71 2,01 2,17 2,28 2,36 2,43 2,48 2,53 2,57
30 1,70 1,99 2,15 2,25 2,33 2,40 2,45 2,50 2,54
40 1,68 1,97 2,13 2,23 2,31 2,37 2,42 2,47 2,51
60 1,67 1,95 2,10 2,21 2,28 2,35 2,39 2,44 2,48
120 1,66 1,93 2,08 2,18 2,26 2,32 2,37 2,41 2,45
Tabela 8 – Valores de d para teste de Dunnett, bilateral, nível de erro α = 5%, segundo
o número de tratamentos P excluindo o controle, e o número de graus de liberdade do
resíduo n1
P
n1
1 2 3 4 5 6 7 8 9
5 2,57 3,03 3,29 3,48 3,62 3,73 3,82 3,90 3,97
6 2,45 2,86 3,10 3,26 3,39 3,49 3,57 3,64 3,71
7 2,36 2,75 2,97 3,12 3,24 3,33 3,41 3,47 3,53
8 2,31 2,67 2,88 3,02 3,13 3,22 3,29 3,35 3,41
9 2,26 2,61 2,81 2,95 3,05 3,14 3,20 3,26 3,32
10 2,23 2,57 2,76 2,89 2,99 3,07 3,14 3,19 3,24
11 2,20 2,53 2,72 2,84 2,94 3,02 3,08 3,14 3,19
12 2,18 2,50 2,68 2,81 2,90 2,98 3,04 3,09 3,14
13 2,16 2,48 2,65 2,78 2,87 2,94 3,00 3,06 3,10
14 2,14 2,46 2,63 2,75 2,84 2,91 2,97 3,02 3,07
15 2,13 2,44 2,61 2,73 2,82 2,89 2,95 3,00 3,04
306 - IAL
16 2,12 2,42 2,59 2,71 2,80 2,87 2,92 2,97 3,02
P
n1
1 2 3 4 5 6 7 8 9
17 2,11 2,41 2,58 2,69 2,78 2,85 2,90 2,95 3,00
18 2,10 2,40 2,56 2,68 2,76 2,83 2,89 2,94 2,98
19 2,09 2,39 2,55 2,66 2,75 2,81 2,87 2,92 2,96
20 2,09 2,38 2,54 2,65 2,73 2,80 2,86 2,90 2,95
24 2,06 2,35 2,51 2,61 2,70 2,76 2,81 2,86 2,90
30 2,04 2,32 2,47 2,58 2,66 2,72 2,77 2,82 2,86
40 2,02 2,29 2,44 2,54 2,62 2,68 2,73 2,77 2,81
60 2,00 2,27 2,41 2,51 2,58 2,64 2,69 2,73 2,77
120 1,98 2,24 2,38 2,47 2,55 2,60 2,65 2,69 2,73
160/IV Testes com escalas
Procedimento – Os testes usando escalas indicam o tipo ou a intensidade de uma res-

posta sensorial. As escalas são classificadas em quatro classes: nominal, ordinal, interva-
lo e de proporção. A escala nominal especifica somente classes ou categorias, as quais
não possuem nenhuma relação quantitativa entre si como, por exemplo, a escala de
classificação da bebida de café. A escala ordinal especifica as categorias como uma sé-
rie ordenada, porém sem expressar o tamanho da diferença entre elas, sendo utilizada
nos testes de ordenação. A escala de intervalo assume igualdade de distância (interva-
los) entre pontos (categorias) da escala e origem arbitrária. Estas escalas são ancoradas
em vários pontos, geralmente nas extremidades e às vezes no meio da escala, com ter-
mos que indicam a magnitude da resposta. Costumam variar de 5 a 15 pontos (5-15)
cm nas escalas não estruturadas). São utilizadas nas avaliações de atributos específicos,
nos testes de perfil de textura, na análise descritiva quantitativa (ADQ) e nos testes de
preferência e aceitação (escala hedônica e de atitude). A escala hedônica é uma esca-
la de intervalo que expressa o grau de gostar ou desgostar de uma amostra pelo con-
sumidor. As escalas de intervalo se classificam em estruturada e não estruturada e em
unipolar e bipolar. Na escala estruturada (numérica e/ou verbal) os intervalos são asso-
ciados a números e/ou termos descritivos. Na escala não estruturada, linear ou gráfica,
a linha é demarcada por expressões quantitativas nas extremidades ou distantes destas
(0,5-1,25) cm. A escala unipolar apresenta extremidade zero enquanto que a bipolar
revela descrições opostas nas duas extremidades. A escala de proporção envolve a livre
atribuição de números pelos julgadores para indicar as proporções das intensidades sen-
soriais em relação a uma amostra de referência, fornecendo a relação de proporção entre
o estímulo e a resposta. É utilizada no teste de estimativa da magnitude. Nos testes de
escala, as amostras codificadas e aleatorizadas são apresentadas simultaneamente ou não
ao julgador para que avalie o atributo específico utilizando uma escala pré-definida (Ficha
7). Os resultados obtidos são avaliados estatisticamente segundo o objetivo proposto. Ge-
IAL - 307
ralmente, é realizada análise de variância (Quadro 10) e testes de comparação de médias

como, por exemplo, de Tukey (Tabela 9), Ducan ou SNK (Student-Newman-Keuls),
com nível de significância pré-fixado. Escolha o delineamento experimental estatístico
segundo o objetivo. Pode-se optar pelo delineamento experimental de blocos completos
casualizados ou blocos incompletos, se o número de amostras for grande e/ou o atributo
revelar intenso grau de fadiga sensorial. Outros delineamentos experimentais também
conhecidos podem ser empregados. No delineamento de blocos completos casualizados
todos os tratamentos são casualizados dentro de cada bloco. Cada provador avalia todas
as amostras, em uma só sessão de teste. Blocos incompletos casualizados é o delineamento
onde os blocos não contêm todos os tratamentos.
Ficha 7 – Modelo de escala estruturada de 7 pontos (numérica, verbal, bipolar)
Você está recebendo três amostras codificadas. Avalie cada uma segundo a intensidade de dureza
(atributo de textura), utilizando a escala abaixo:
(1) Muito duro

(2) Duro ________ ( )
(3) Levemente duro
(4) Nem duro nem mole ________ ( )
(5) Levemente mole
(6) Mole ________ ( )
(7) Muito mole
Comentários:
Tabela 9 – Valores de q para teste de Tukey, nível de erro α = 5%, segundo o número de
tratamentos P e graus de liberdade do resíduo n 1
P
n1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 15
1 17,97 26,98 32,82 37,08 40,41 43,12 45,40 47,36 49,07 55,36
2 6,08 8,33 9,80 10,88 11,74 12,44 13,03 13,54 13,99 15,65
3 4,50 5,91 6,82 7,50 8,04 8,48 8,85 9,18 9,45 10,53
4 3,93 5,04 5,76 6,29 6,71 7,05 7,35 7,60 7,83 8,66
5 3,64 4,60 5,22 5,67 6,03 6,33 6,58 6,80 6,99 7,72
6 3,46 4,34 4,90 5,30 5,63 5,90 6,12 6,32 6,49 7,14
7 3,34 4,16 4,68 5,06 5,35 5,61 5,82 6,00 6,16 6,76
8 3,26 4,04 4,53 4,89 5,17 5,40 5,60 5,77 5,92 6,48
9 3,20 3,95 4,41 4,76 5,02 5,24 5,43 5,59 5,74 6,28
308 - IAL
Capítulo VI - Análise Sensorial
P
n1
2 3 4 5 6 7 8 9 10 15
10 3,15 3,88 4,33 4,65 4,91 5,12 5,30 5,46 5,60 6,11
11 3,11 3,82 4,26 4,57 4,82 5,03 5,20 5,35 5,49 5,98
12 3,08 3,77 4,20 4,51 4,75 4,95 5,12 5,27 5,39 5,88
13 3,06 3,73 4,15 4,45 4,69 4,88 5,05 5,19 5,32 5,79
14 3,03 3,70 4,11 4,41 4,64 4,83 4,99 5,13 5,25 5,71
15 3,01 3,67 4,08 4,37 4,59 4,78 4,94 5,08 5,20 5,65
16 3,00 3,65 4,05 4,33 4,56 4,74 4,90 5,03 5,15 5,59
17 2,98 3,63 4,02 4,30 4,52 4,70 4,86 4,99 5,11 5,54
18 2,97 3,61 4,00 4,28 4,49 4,67 4,82 4,96 5,07 5,50
19 2,96 3,59 3,98 4,25 4,47 4,65 4,79 4,92 5,04 5,46
20 2,95 3,58 3,96 4,23 4,45 4,62 4,77 4,90 5,01 5,43
24 2,92 3,53 3,90 4,17 4,37 4,54 4,68 4,81 4,92 5,32
30 2,89 3,49 3,85 4,10 4,30 4,46 4,60 4,72 4,82 5,21
40 2,80 3,44 3,79 4,04 4,23 4,39 4,52 4,63 4,73 5,11
60 2,83 3,40 3,74 3,98 4,16 4,31 4,44 4,55 4,65 5,00
120 2,80 3,36 3,68 3,92 4,10 4,24 4,36 4,47 4,56 4,90
∞ 2,77 3,31 3,63 3,86 4,03 4,17 4,29 4,39 4,47 4,80
Fonte: DA SILVA (1998).
Nota: diferença mínima significativa, DMS, utilizando o teste de Tukey
QMres = quadrado médio do resíduo

n = número de julgamentos por tratamento
q = valor crítico tabelado a nº de tratamentos e graus de liberdade do resíduo
Testes sensoriais descritivos
Métodos utilizados em análise sensorial de alimentos, bebidas e água. Descrevem os

componentes ou parâmetros sensoriais e medem a intensidade em que são percebidos. Al-
guns dos componentes mais empregados em testes descritivos são os observados no Quadro
11 que se referem à aparência, odor e aroma, textura oral e manual, sensações táteis e super-
ficiais, sabor e gosto. Geralmente, a equipe sensorial define previamente os termos relativos
às propriedades mais relevantes do produto e sua seqüência de avaliação. Na análise descri-
tiva o provador também avalia, através de uma escala, o grau de intensidade com que cada
atributo está presente. Os julgadores devem ser treinados a usar a escala de forma consistente
em relação à equipe e às amostras, durante todo período de avaliação. Exige-se cuidado na
padronização do preparo e apresentação de amostras e na formação da equipe sensorial.
As amostras devem ser codificadas com números de três dígitos aleatórios, casualizadas e
apresentadas à equipe treinada e selecionada. As técnicas descritivas mais utilizadas são o
do perfil de sabor, perfil de textura, a análise descritiva quantitativa (ADQ) e o de tempo-
intensidade. As técnicas descritivas de espectro e de perfil livre também têm sido utilizadas.
IAL - 309
Quadro 11 – Parâmetros ou componentes sensoriais utilizados em análise descritiva
Tamanho e forma: dimensão, geometria.

Aparência Textura superficial: maciez, aspereza.
Interação entre partículas e fragmentos: viscosidade, aglomerado, partícula
solta.
Cor: matiz, croma, uniformidade, profundidade, brilho.
Odor e aroma Sensações olfativas: floral, frutado, pútrido, baunilha.

Sensações nasais: frescor, quente, pungente.
Mecânicos de reação à força e pressão: dureza e firmeza; força de compressão
ou extensão ou tensão; elasticidade, volta à posição ou forma original após
compressão.
Textura manual Geométricos e/ou tamanho, forma e orientação das partículas: áspero, areno-
so, floculoso, frisado, nervuras ou com listas.
Presença e absorção de umidade: seco, dessecado, oleoso, untuoso, embebi-
do.
Mecânicos de reação à força e pressão: firmeza; viscosidade; deformação; fra-
turabilidade.
Textura oral Geométricos e/ou tamanho, forma e orientação das partículas: arenoso; gra-
nuloso, fibroso, floculoso.
Umidade e gordura e/ou presença e absorção de água, óleo e gordura: aguado
ou úmido, suculento, ensopado, untuoso ou besuntado.
Mecânicos de reação à força e pressão: densidade, espessura ou grossura, lisa
ou escorregadiça, elasticidade ou expandida, distendida, espalhada, estendi-
da.
Umidade, gordura e/ou presença de absorção de água, óleo ou gordura: agua-
Sensações táteis e do ou umedecido, ensopado, oleoso, untuoso ou besuntado, seco ou secura
superficiais ou dessecado.
Geométricos e/ou tamanho, forma e orientação das partículas táteis após con-
tato: arenoso, floculoso, espumoso ou escumoso.
De aparência, mudanças visuais durante o uso do produto: polido ou lustroso,
brancura ou pálido, macilento ou emaciado, pontiagudo.
Sensações olfativas: floral, frutado, cacau ou chocolate, pútrido, rançoso.
Sabor e gosto Sensações gustativas: doce, salgado, ácido, amargo, umami.
Sensações orais: frio, quente, adstringente, metálico, queimado.
Fonte: MEILGAARD et al. 1991
161/IV Testes descritivos – Perfil de sabor
Procedimento – Pelo método perfil de sabor (Arthur D. Little, 1940 em Meilgaard et al,
1987) pode ser realizada descrição completa do odor e aroma, do sabor e das sensações
bucais residuais perceptíveis pelos julgadores, determinando graus de diferenças entre amos-
tras ou suas misturas e impressão global do produto. Os julgadores, com a ajuda do líder
definem os atributos e os materiais de referência. É empregada escala constante de categoria.
Sempre se avalia a amplitude do aroma e sabor, definida como a intensidade geral, ou seja, o
primeiro impacto causado pelo aroma ou sabor. Embora os julgamentos sejam individuais,
após cada avaliação, o líder da equipe discute com seus membros os valores de intensidade
dados a cada atributo. O perfil de aroma e sabor de cada amostra é construído por consen-
310 - IAL
so. Os resultados são expressos de forma tabular ou gráfica. Em geral não são conduzidas
análises estatísticas dos dados obtidos. A equipe é composta por número de quatro a seis
julgadores treinados. Estes devem manifestar interesse e potencial para trabalhar em grupo,
habilidade para identificar e para discriminar as intensidades de gostos e odores.
162/IV Testes descritivos – Perfil de textura
Procedimento – O método Perfil de Textura (Brandt, 1963; Civille e Szczesniak, 1973;

Civille e Liska, 1975 em Meilgaard et al, 1987) pode fornecer uma descrição completa da
textura, segundo parâmetros mecânicos, geométricos, de gordura e umidade, com defini-
ção do grau em que estão presentes e da ordem com que são percebidos desde a primeira
mordida até a mastigação e fases finais de deglutição. Com base nas avaliações são utilizadas
classificações e definições dos termos de textura, bem como referências de intensidade des-
critos na literatura. Todos os termos descritivos são definidos com o objetivo de reduzir a va-
riabilidade entre julgadores. Dependendo da escala utilizada, o tratamento dos dados pode
ser obtido por consenso da equipe em cada atributo ou análise estatística pela análise de va-
riância (ANOVA), análise m ultivariada (MANOVA) e análise de componentes principais
(ACP). A apresentação dos resultados pode ser tabular ou gráfica. O número de julgadores
pode variar de 6 a 10 e são inicialmente selecionados com base no interesse, disponibilidade
e atitude, por entrevista. Os julgadores são treinados em definição de textura, procedimento
de avaliação e nas escalas de referência, sendo então selecionados pela habilidade de discri-
minação em atributos de textura.
163/IV Testes descritivos – Análise descritiva quantitativa
Procedimento – O método da Análise descritiva quantitativa (ADQ) desenvolvida por

STONE et al. (1974) é muito utilizado para traçar, de forma a mais completa possível, o
perfil sensorial quanto aos atributos de aparência, odor, textura e sabor. O método identifica
os atributos e os quantifica na ordem de ocorrência. Primeiramente, os atributos são decom-
postos pela equipe sensorial que busca os termos descritores, seus significados, materiais de
referências adequados e a melhor seqüência de avaliação. Para isto, é muito empregado o mé-
todo de rede de MOSKOWITZ (1983), onde o julgador descreve as similaridades e diferen-
ças entre pares de amostras (Ficha 8). Os termos gerados são listados por consenso (Ficha
9) permanecendo os citados em maior número de vezes para compor a ficha (Ficha 10).
As escalas não estruturadas, de (9-15) cm, são mais empregadas. Os dados obtidos, normal-
mente, são submetidos à análise de variância (fontes de variação: julgador (J), tratamento (T),
interação (J*T) e resíduo). Podem ser utilizados outros tratamentos estatísticos, como técni-
cas de análise multivariada, de acordo com os objetivos do teste. Diferenças entre tratamen-
tos devem ser analisadas utilizando-se testes de comparação de médias, tais como de Tukey
(Tabela 9), de Ducan ou SNK (Student-Newman-Keuls). A ADQ pode ser representada
por gráfico aranha e por análise de componentes principais (ACP), onde a primeira sugere
similaridades e diferenças entre as amostras e a segunda aponta relações existentes entre
IAL - 311
elas, evidenciando o que mais as caracterizam. Recomenda-se que o número de julgadores

selecionados seja entre 8 e 25 julgadores treinados. Avalie o desempenho de cada julgador
por testes com duas ou mais amostras diferentes, em pelos menos três repetições. O critério
de seleção é para os julgadores que discriminam amostras com probabilidade (p) menor ou
igual a 0,50 pela ANOVA. Pode haver o retreinamento dos julgadores selecionados. Vários
delineamentos experimentais estatísticos são recomendados, podendo-se optar pelo de blo-
cos completos casualizados ou blocos incompletos casualizados, conforme o caso; estes são
os mais freqüentemente utilizados.
Ficha 8 – Modelo de ficha para o método de rede
Você está recebendo duas amostras codificadas. Avalie cada uma quanto aos atributos abaixo apontando
suas similaridades e diferenças.
Códigos das amostras: ________ / ________
Similaridades Diferenças
Aparência:
Odor:
Textura:
Sabor:
312 - IAL
Ficha 9 – Modelo para listagem consensual de atributos e número de vezes em que foram
citados pelo método de rede
Termos descritivos ou descritores - Atributos Número de vezes
Aparência: 1:
2:
n:
Odor: 1:
2:
n:
Textura: 1:
2:
n:
Sabor: 1:
2:
n:
Ficha 10 – Modelo de escala não estruturada para análise descritiva quantitativa

Você está recebendo três amostras codificadas. Avalie cada uma segundo a intensidade do atributo
específico, assinalando com um traço vertical as escalas abaixo:
Aparência:
Atributo 1 _|______________________________________|_
Fraco Forte
Atributo 2 _|______________________________________|_
Fraco Forte
Odor:
Atributo 3 _ |______________________________________|_
Fraco Forte
Atributo 4 _|______________________________________|_
Fraco Forte
Textura:
Atributo 5 _|______________________________________|_
Pouca Muita
Atributo 6 _|______________________________________|_
Fraco Forte
Sabor:
Atributo 7 _ |______________________________________|_
Fraco Forte
Atributo 8 _|______________________________________|_
Ausente Forte
Comentário:
IAL - 313
Testes afetivos
Método utilizado em análise sensorial de alimentos, bebidas e água. O julgador ex-

pressa seu estado emocional ou reação afetiva ao escolher um produto pelo outro. É a forma
usual de se medir a opinião de um grande número de consumidores com respeito as suas
preferências, gostos e opiniões. As escalas mais empregadas são: de intensidade, a hedônica,
do ideal e de atitude ou de intenção. Os julgadores não precisam ser treinados bastando ser
consumidores freqüentes do produto em avaliação. Os testes afetivos em função do local
de aplicação podem ser de laboratório, localização central e uso doméstico. Basicamente,
os testes afetivos podem ser classificados em duas categorias: de preferência (escolha) e de
aceitação (categoria).
164/IV Testes afetivos – Testes de preferência
Procedimento – O indivíduo manifesta sua preferência em relação ao produto que lhe é

oferecido. As escalas mais utilizadas são de ordenação-preferência e comparação pareada.
No teste de ordenação-preferência (Ficha 11) uma série de amostras é apresentada para que
seja ordenada de acordo com a preferência do julgador. Na comparação pareada (Ficha 12)
são apresentados pares de amostras para serem comparadas pelo julgador em relação a sua
preferência.
Ficha 11 – Modelo para teste ordenação-preferência
Você está recebendo três amostras codificadas, avalie cada uma na ordem crescente de
sua preferência.
________ ________ ________

(1) (2) (3)
(menos preferida) (mais preferida)
Comentários:
314 - IAL
Ficha 12 – Modelo para teste pareado-preferência
Você está recebendo duas amostras codificadas, identifique com um círculo a sua amostra
preferida.
__________ __________
Comentários:
165/IV Testes afetivos – Testes de aceitação por escala hedônica
Procedimento – Com o teste da escala hedônica, o indivíduo expressa o grau de gostar

ou de desgostar de um determinado produto, de forma globalizada ou em relação a um
atributo específico. As escalas mais utilizadas são as de 7 e 9 pontos, que contêm os termos
definidos situados, por exemplo, entre “gostei muitíssimo” e “desgostei muitíssimo” con-
tendo um ponto intermediário com o termo “nem gostei; nem desgostei”. É importante
que as escalas possuam número balanceado de categorias para gosto e desgosto. As amostras
codificadas com algarismos de três dígitos e aleatorizadas são apresentadas ao julgador para
avaliar o quanto gosta ou desgosta de cada uma delas através da escala previamente definida
(Ficha 13). Sua preferência é obtida por inferência. Os dados coletados podem ser avaliados
estatisticamente pela análise de variância, ANOVA (Quadro 10) e comparação das médias
de pares de amostras pelo teste de Tukey (Tabela 9). Se for empregada escala hedônica com
comparação a um padrão de referência, será utilizado o teste de Dunnett. Recomenda-se
que o número de julgadores seja entre 50 e 100. O delineamento experimental a ser utiliza-
do deve ser previamente escolhido, podendo-se optar pelo de blocos completos balanceados
ou casualizados ou blocos incompletos casualizados, conforme a situação.
IAL - 315
Ficha 13 – Modelo de escala hedônica (estruturada verbal, numérica, bipolar, nove pontos).
Você está recebendo quatro amostras codificadas. Avalie globalmente cada uma segundo o
grau de gostar ou desgostar, utilizando a escala abaixo.
( 9 ) gostei extremamente _______ ( )

( 8 ) gostei moderadamente
( 7 ) gostei regularmente _______ ( )
( 6 ) gostei ligeiramente
( 5 ) não gostei, nem desgostei _______ ( )
( 4 ) desgostei ligeiramente
( 3 ) desgostei regularmente _______ ( )
( 2 ) desgostei moderadamente
( 1 ) desgostei extremamente
Comentários:
166/IV Testes afetivos – Testes de aceitação por escala do ideal
Procedimento – Na escala do ideal o indivíduo expressa o quão ideal o produto está em

relação à intensidade de um atributo específico. Geralmente, a escala possui de 3 a 5 pontos,
podendo conter termos opostos como, por exemplo, “muito fraco” a “muito forte” e no cen-
tro da escala o termo “ideal”, de tal forma que tenha números iguais de categorias de ambos
os lados. São apresentadas ao julgador amostras codificadas e aleatorizadas para indicar o
quão ideal está certo produto em relação a termos pré-definidos (Ficha 14). Geralmente,
os dados obtidos são avaliados na forma de porcentagem de julgamentos, podendo ser uti-
lizado um limite de 70% de respostas para o termo “ideal”. O resultado também pode ser
avaliado elaborando-se um gráfico de freqüências das respostas através de histogramas ou
comparando-se a distribuição das respostas das amostras avaliadas com uma amostra-padrão
pelo teste Qui-quadrado ou por regressão linear simples. Recomenda-se que o número de
julgadores selecionados esteja entre 50 e 100. O delineamento experimental deverá ser pre-
viamente definido, podendo-se optar pelo de blocos completos balanceados ou casualizados
ou blocos incompletos casualizados, conforme a situação.
316 - IAL
Ficha 14 – Modelo de escala do ideal (estruturada verbal, numérica, cinco pontos)
Você está recebendo três amostras codificadas. Indique o quão ideal está cada amostra
em relação à ....., utilizando a escala abaixo.
( 1 ) muito fraca ( 2 ) fraca ( 3 ) ideal ( 4 ) forte ( 5 ) muito forte
_______ ( ) _______ ( ) _______ ( )
Comentários:
167/IV Testes afetivos –Testes de escala de atitude ou de intenção
Procedimento – Por meio das escalas de atitude ou de intenção, o indivíduo expressa sua
vontade em consumir, adquirir ou comprar, um produto que lhe é oferecido. As escalas mais
utilizadas são as verbais de 5 a 7 pontos. As amostras codificadas e aleatorizadas podem ser
apresentadas seqüencialmente ao julgador para serem avaliadas através da escala pré-defi-
nida (Ficha 15). Os termos definidos podem se situar, por exemplo, entre “provavelmente
compraria” a “provavelmente não compraria” e, no ponto intermediário “talvez compraria,
talvez não compraria”. É importante que a escala possua número balanceado de categorias
entre o ponto intermediário e os extremos. Os dados são avaliados pelas freqüências através
dos gráficos de histogramas. Recomenda-se que o número de julgadores esteja entre 50
a 100. O delineamento experimental deverá ser previamente definido, podendo-se optar
pelo de blocos completos balanceados ou casualizados ou blocos incompletos casualizados,
conforme a situação.
IAL - 317
Ficha 15 – Modelo de escala de atitude ou de intenção (estruturada verbal, numérica, bi-

polar, sete pontos)
Você está recebendo três amostras codificadas. Avalie cada uma segundo a sua intenção de
consumo, utilizando a escala abaixo.
(7) Comeria sempre

(6) Comeria muito freqüentemente _______ ( )
(5) Comeria freqüentemente
(4) Comeria ocasionalmente _______ ( )
(3) Comeria raramente
(2) Comeria muito raramente _______ ( )
(1) Nunca comeria
Comentários:
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318 - IAL
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Colaboradores
Maria Auxiliadora de Brito Rodas e Jussara Carvalho de Moura Della Torre
320 - IAL
Capítulo VII - Açúcares e produtos correlatos
CAPÍTULO
VII
AÇÚCARES E
PRODUTOS
CORRELATOS
IAL - 321
322 - IAL
VII
AÇÚCARES E PRODUTOS CORRELATOS
N
este capítulo são abordados os métodos de análise para produtos com alto teor de
açúcar, tais como: açúcares refinado, cristal e mascavo, rapadura, melaço, xaropes
de diversos tipos e mel.
Com relação ao poder adoçante dos diferentes açúcares, não existem aparelhos específicos
para a sua determinação. Para a comparação desta propriedade, recorre-se a provas sensoriais.
O poder adoçante relativo de alguns açúcares e a sua rotação específica estão des-
critos na Tabela 1.
Tabela 1 – Poder adoçante de alguns açúcares e sua rotação específica
Açúcar Poder adoçante Rotação específica

relativo [ α ]D
Lactose 16 + 52,5º
Rafinose 22 + 104,0º
Galactose 32 + 80,2º
Raminose 32 + 8,3º
Maltose 32 + 137,0º
Xilose 40 + 18,8º
Dextrose 74 + 52,5º
Sacarose 100 + 66,5º
Açúcar invertido 130 -
Frutose 173 - 92,3º
IAL - 323
O açúcar, sem outra designação específica, é a sacarose obtida da cana-de-açúcar (Sac-

charum officinarum) ou da beterraba (Beta vulgaris). De acordo com a tecnologia emprega-
da, o açúcar é obtido em diferentes tipos e graus de pureza. As determinações para açúcar
compreendem: sacarose por desvio polarimétrico direto, umidade, cor ICUMSA, cinzas
(018/IV) e, eventualmente, minerais e metais pesados (cap. XXIII) e dióxido de enxofre
(050/IV).
As análises de glicose anidra e outros açúcares em pó mais usuais são as de glicídios

redutores, glicídios não redutores, cinzas (018/IV) e, eventualmente minerais e metais pe-
sados (cap. XXIII).
A determinação quantitativa dos açúcares redutores pode ser efetuada por diferentes
procedimentos, sendo o método de redução das soluções de Fehling o mais empregado.
Xarope, sem outra especificação, consiste de uma solução de açúcar em água, conten-
do aproximadamente dois terços de seu peso em sacarose ou de outros tipos de açúcares tais
como: maltose, frutose ou glicose.
Melaço é o líquido que se obtém como resíduo de fabricação do açúcar cristalizado,

do melado ou da refinação do açúcar bruto.
A análise de xaropes de diversos tipos de açúcares e melaço inclui as seguintes deter-

minações: glicídios redutores, glicídios não redutores, graus Brix, umidade, cinzas (018/IV)
e, eventualmente, minerais e metais pesados (cap. XXIII).
Rapadura é o produto sólido obtido pela concentração a quente do caldo de cana

(Saccharum officinarum).
Na análise de rapadura, as determinações incluem: glicídios redutores em glicose,

glicídios não redutores em sacarose, umidade (012/IV), cinzas (018/IV) e, eventualmente,
minerais e metais pesados (cap. XXIII).
O mel consiste basicamente de diferentes açúcares, predominantemente de frutose

e glicose. Contém em menor proporção uma mistura complexa de outros carboidratos,
enzimas, ácidos orgânicos, aminoácidos, minerais e pólen.
As determinações usuais em mel incluem, entre outras, umidade, acidez total, açúca-
res redutores, sacarose aparente, cinzas (018/IV), sólidos insolúveis em água, hidroximetil-
furfural (HMF), atividade diastásica e as diferentes reações que podem fornecer indicações
324 - IAL
sobre a adulteração do mel: reações de Lund, Fiehe e de Lugol.
168/IV Preparação da amostra de açúcares para análise
No caso de amostras em torrões ou grânulos grandes, faça uma homogeneização

quebrando no almofariz com o auxílio de um pistilo.
Para xaropes densos, aqueça a amostra a (40 ± 1)°C, em banho-maria e esfrie à tem-
peratura ambiente, antes de realizar os ensaios.
Mel líquido – Se a amostra estiver livre de cristalização, homogeneíze a amostra cui-

dadosamente, antes das pesagens. Tome cuidado com possíveis bolhas de ar que possam se
formar prejudicando algumas determinações.
Mel cristalizado – Coloque a amostra em um recipiente fechado em banho-maria a

(40 ± 1)ºC até 20 minutos, agitando ocasionalmente. Resfrie à temperatura ambiente antes
de pesar. Não aqueça o mel que será utilizado para a determinação da atividade diastásica e
do hidroximetilfurfural. Se estiverem presentes matérias estranhas, tais como: cera de abe-
lha, partículas de favos, etc, filtre através de gaze e coloque num funil aquecido na estufa.
169/IV Açúcares – Sacarose por desvio polarimétrico direto
Este método é aplicável a açúcares. A polarização é a porcentagem em massa da saca-

rose aparente contida em uma solução açucarada, determinada pelo desvio da luz polarizada
ao atravessar esta solução. As rotações na escala são designadas como graus sacarimétri-
cos (ºS) ou desvio polarimétrico [α]D20º. De acordo com a International Commission for
Uniform Methods of Sugar Analysis (ICUMSA), uma solução normal de sacarose qui-
micamente pura corresponde a 100ºS, sendo a base de calibração do sacarímetro. 100ºS
correspondem a um desvio polarimétrico de (34,620 ± 0,002)ºC, a 20ºC, no λ = 589,2 nm
(lâmpada de sódio).
Material
Polarímetro com leitura em escala em graus sacarimétricos (ºS) ou desvio polarimétrico

(αD20), tubo de vidro para polarímetro (200 ± 0,03) mm, termômetro, béquer de 50 mL,
balão volumétrico de 100 mL, proveta de 50 mL, bastão de vidro, funil de vidro de tamanho
pequeno, papel de filtro qualitativo e vidro de relógio.
IAL - 325
Reagentes
Creme de alumina
Acetato básico de chumbo
Procedimento – Pese, com precisão, (26,000±0,002)g da amostra totalmente homo-

geneizada em um béquer de 50 mL. Transfira para um balão volumétrico de 100 mL, com
o auxílio de 50 mL de água. Complete o volume com água a 20ºC. Enxugue a haste do
balão volumétrico com papel de filtro e agite. Filtre e cubra o funil com vidro de relógio ao
iniciar a filtração. Despreze os primeiros 25 mL do filtrado. Ajuste o polarímetro, conforme
o manual do equipamento. Lave o tubo polarimétrico com o próprio filtrado e preencha
com a mesma solução, evitando formação de bolhas no seu interior. Proceda a leitura com
a luz monocromática de sódio (λ= 589,2 nm) em % de sacarose ou desvio polarimétrico, à
temperatura constante de (20 ± 0,5)ºC.
Nota: para soluções mais escuras, emprega-se creme de alumina ou acetato de chumbo seco.
No caso deste último, adicione pequena quantidade do sal seco à solução de açúcar após
ter completado o volume e misture. Repita, se necessário, as adições do sal até completar
a precipitação e observe se a solução está sendo clarificada, tomando o cuidado de não se
adicionar excesso do referido sal.
Cálculo
L = leitura no polarímetro [α]D20º
Nota: se a leitura for realizada à temperatura de (20 ± 0,5)ºC não é necessária fazer correção
da polarização. Caso contrário, deve ser feita a correção utilizando a expressão abaixo.
P20 = polarização corrigida a 20ºC

Pt = polarização lida à temperatura do ensaio
t= temperatura da solução
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official Methods of

326 - IAL
Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed. Arlington: A.O.A.C.,
(method 925.46) 1995. chapter 44. p. 4.
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. NBR 8869: Açúcar

refinado - determinação de polarização. Rio de Janeiro, 1985.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v. 1:

Métodos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 157.
170/IV Açúcares – Determinação da cor ICUMSA
Este método é usado para a determinação da cor em açúcares, podendo ser aplicado
em todos os açúcares brancos cristalizados ou em pó. Baseia-se na determinação da absor-
bância da solução açucarada, no comprimento de onda de 420 nm. A solução é preparada e
filtrada para eliminar a turbidez. A cor ICUMSA é expressa em unidades ICUMSA.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, suporte para a cubeta de 5 a 10 cm de caminho óptico,

refratômetro com escala em graus Brix, balança analítica, pHmetro, agitador magnético
e barra magnética, banho de ultra-som, conjunto de filtração para membranas de
47 mm de polissulfona, bomba de vácuo, membranas filtrantes de fibra de vidro
tipo AP25 e membrana hidrofílica (HA) tipo triton-free de (0,45 μm) e ambas com
diâmetro de 47 mm, espátula metálica, frasco Erlenmeyer de 250 mL, cubetas de
quartzo de 5 cm e 10 cm de percurso óptico, proveta graduada de 100 mL, bastão de
vidro e béqueres de 100 e 250 mL.
Reagentes
Solução de trietanolamina 0,1 M – Pese, com precisão, 7,460 g de trietanolamina e transfira

com água para um balão volumétrico de 500 mL. Complete o volume com água.
Solução de ácido clorídrico 0,1 M – Pipete, cuidadosamente, 8,9 mL de ácido clorídrico

para um balão volumétrico de 1000 mL, contendo cerca de 750 mL de água. Complete o
volume com água.
Solução-tampão trietanolamina/ácido clorídrico (tampão TEA/HCl ) – Transfira 500 mL

da solução de trietanolamina para um béquer de 1000 mL. Ajuste o pH para 7, colocando
cerca de 420 mL da solução de ácido clorídrico para um volume final de 920 mL de solução-
IAL - 327
tampão TEA/HCl. Prepare a solução-tampão um dia antes de usar e guarde em refrigerador.

Estabilize a solução à temperatura ambiente antes de usar. Meça o pH e ajuste para 7, se
necessário, com solução de ácido clorídrico. Esta solução é estável por 2 dias, se mantida em
refrigerador a aproximadamente 4ºC.
Procedimento – Ligue, para estabilizar, o pHmetro e faça os ajustes para a operação. Ca-
libre com as soluções-tampão 7 e 4 ou 7 e 10, de acordo com as instruções do fabricante.
Circule água à temperatura constante pelo refratômetro, preferivelmente a 20ºC, por tem-
po suficiente para equilibrar a temperatura do prisma e da amostra e mantenha a água cir-
culando durante a leitura, observando se a temperatura permanece constante. Ligue e ajuste
o espectrofotômetro conforme as instruções do fabricante, para leituras da absorbância a
420 nm. Pese (50 ± 0,5) g da amostra em um béquer de 250 mL. Adicione (50 ± 0,1) g, ou
(50 ± 0,1) mL da solução-tampão TEA/HCl e agite no agitador magnético até a dissolução
do açúcar. Filtre a solução sob vácuo através das duas membranas, sendo a membrana de
vidro sobreposta à de HA. Transfira o filtrado para um béquer e coloque no banho de
ultra-som por 3 minutos. Meça o grau Brix no refratômetro e corrija a temperatura
a 20ºC (Tabela 2) e em seguida multiplique o valor do Brix corrigido a 20ºC pelo
fator de correção 0,989. Obtenha a concentração da sacarose (g/mL) conforme descrito na
Tabela 2. Faça a leitura da absorbância da solução a 420 nm, empregando-se a cubeta de
10 cm para açúcar refinado e de 5 cm para o açúcar cristal. A escolha da cubeta deve ser
tal que a leitura da transmitância da solução esteja dentro da faixa de (25 - 75) %. Utilize
como branco a solução-tampão TEA/HCl. A diferença absoluta entre dois resultados em
duplicata de açúcares com valor de cor ICUMSA abaixo de 50 UI, não deve ser maior que
3 UI. Para açúcares com valor de cor ICUMSA acima de 50 UI, a diferença absoluta entre
dois resultados em duplicata, não deve ser maior que 7 UI.
Cálculo
A = absorbância da solução a 420 nm

b = espessura da cubeta em cm
c = concentração da solução em g/mL
328 - IAL
Capítulo VII - Açúcares e podutos correlatos
Tabela 2 – Concentração de sacarose (g/mL) em função do grau Brix a 20ºC

% Concentração em g/mL
Grau ,0 ,1 ,2 ,3 ,4 ,5 ,6 ,7 ,8 ,9
Brix
41 0,4845 0,4855 0,4872 0,4886 0,4900 0,4914 0,4928 0,4942 0,4956 0,4970
42 0,4985 0,4999 0,5013 0,5027 0,5041 0,5055 0,5069 0,5083 0,5097 0,5111
43 0,5126 0,5140 0,5154 0,5168 0,5182 0,5197 0,5211 0,5225 0,5239 0,5254
44 0,5268 0,5282 0,5297 0,5311 0,5325 0,5340 0,5354 0,5368 0,5383 0,5397
45 0,5411 0,5426 0,5440 0,5455 0,5469 0,5484 0,5498 0,5513 0,5527 0,5542
46 0,5556 0,5571 0,5585 0,5600 0,5615 0,5629 0,5644 0,5658 0,5673 0,5688
47 0,5702 0,5717 0,5732 0,5746 0,5761 0,5776 0,5790 0,5805 0,5820 0,5835
48 0,5850 0,5864 0,5879 0,5894 0,5909 0,5924 0,5939 0,5953 0,5968 0,5983
49 0,5998 0,6013 0,6028 0,6043 0,6058 0,6073 0,6088 0,6103 0,6118 0,6133
50 0,6148 0,6163 0,6178 0,6193 0,6208 0,6223 0,6238 0,6254 0,6269 0,6284
51 0,6299 0,6314 0,6329 0,6345 0,6360 0,6375 0,6390 0,6406 0,6421 0,6436
52 0,6451 0,6467 0,6482 0,6497 0,6513 0,6528 0,6543 0,6559 0,6574 0,6590
53 0,6603 0,6621 0,6638 0,6651 0,6667 0,6682 0,6698 0,6713 0,6729 0,6745
54 0,6760 0,6776 0,6791 0,6807 0,6823 0,6838 0,6854 0,6869 0,6885 0,6901
55 0,6916 0,6932 0,6948 0,6954 0,6979 0,6995 0,7011 0,7027 0,7043 0,7058
56 0,7074 0,7090 0,7106 0,7122 0,7138 0,7154 0,7169 0,7185 0,7211 0,7217
57 0,7233 0,7249 0,7265 0,7281 0,7297 0,7313 0,7329 0,7345 0,7362 0,7378
58 0,7394 0,7410 0,7426 0,7442 0,7458 0,7474 0,7491 0,7507 0,7523 0,7539
59 0,7556 0,7572 0,7588 0,7604 0,7621 0,7637 0,7653 0,7670 0,7686 0,7702
60 0,7719 0,7735 0,7752 0,7768 0,7784 0,7801 0,7817 0,7834 0,7850 0,7867
ICUMSA. Methods Book – Method GS2/3-9. The determination of white sugar solution
colour – Official, 1994.
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. NBR 9724: Açúcar – Deter-

minação da cor ICUMSA. Rio de Janeiro, 1987.
171/IV Açúcares – Determinação da umidade por secagem à pressão atmosférica
Este método é aplicável para os diversos tipos de açúcares, inclusive rapadura. Baseia-
se na determinação da perda de massa por secagem em condições especificadas de tempera-
tura e tempo.
IAL - 329
Material
Balança analítica, estufa, termômetro, espátula de metal, dessecador com sílica gel e cápsula
de níquel, platina ou de alumínio com fundo chato e tampa.
Procedimento – Pese de 5 a 10 g da amostra totalmente homogeneizada em uma cápsula de fundo

chato com tampa, previamente tarada. Seque em estufa durante 2 horas a (105±2)°C. Remova a
cápsula da estufa, cubra, resfrie em dessecador e pese. Repita as operações de secagem por 30
minutos e de resfriamento até que o peso entre duas secagens tenha uma diferença ≤ 2 mg.
Cálculo
N = perda de massa em g
P = massa da amostra em g
ICUMSA. Methods Book – Method GS2/1/3-15. Determination of sugar moisture by loss

on drying official. 1994.
ASSOCIAÇÃO BRASILEIRA DE NORMAS TÉCNICAS. NBR 8870: Açúcar

Cristal e refinado, perda por secagem. Rio de Janeiro, 1985.

Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th. ed. Arlington: A.O.A.C.,
(method 925.45 B) 1995. chapter 44. p.2.
172/IV Açúcares – Determinação de anidrido sulfuroso pelo método modificado de

Monier-Williams
Procedimento – Pese (50 ± 1) g de açúcar homogeneizado e transfira para o balão de

destilação e proceda conforme descrito no método 050/IV.
173/IV Méis – Determinação da umidade por refratometria
Aplicável na determinação de umidade em mel e também em xaropes e baseia-se no

método refratométrico de Chataway, revisado por Wedmore, onde utiliza a medida de índice
de refração da amostra para ser convertida em porcentagem de umidade.
330 - IAL
Material
Refratômetro de Abbé ou digital, com escala que permita estimar pelo menos 0,0005 n,
banho-maria, espátula metálica, algodão hidrofílico e frasco de vidro de capacidade de 10
mL com tampa.
Procedimento – Circule água à temperatura constante pelo aparelho, preferivelmente a
20°C, por tempo suficiente para equilibrar a temperatura do prisma e da amostra e mante-
nha a água circulando durante a leitura, observando se a temperatura permanece constante.
Amostras líquidas – Transfira 3 a 4 gotas da amostra para o prisma do refratômetro. Faça a
leitura do índice de refração a 20°C. Se a determinação tiver sido feita a uma temperatura
diferente de 20°C, corrija a leitura do índice de refração para a temperatura padrão de 20°C,
de acordo com a nota de rodapé da tabela. Obtenha a porcentagem de umidade segundo a
Tabela 3.
Amostras cristalizadas – Transfira uma pequena porção para um frasco com tampa, feche
bem o frasco e coloque no banho-maria à temperatura de (50 ± 0,2)°C para que todos os
cristais sejam dissolvidos. Esfrie à temperatura ambiente. Em seguida proceda conforme as
amostras líquidas.
Tabela 3 – Relação entre o índice de refração e a porcentagem de água dos méis
Índice de Umidade Índice de Umidade Índice de Umidade Índice de Umidade

refração a % refração a % refração a % refração a %
20ºC 20ºC 20ºC 20ºC
1,5044 13,0 1,4961 16,2 1,4880 19,4 1,4800 22,6
1,5038 13,2 1,4956 16,4 1,4875 19,6 1,4795 22,8
1,5033 13,4 1,4951 16,6 1,4870 19,8 1,4790 23,0
1,5028 13,6 1,4946 16,8 1,4865 20,0 1,4785 23,2
1,5023 13,8 1,4940 17,0 1,4860 20,2 1,4780 23,4
1,5018 14,0 1,4935 17,2 1,4855 20,4 1,4775 23,6
1,5012 14,2 1,4930 17,4 1,4850 20,6 1,4770 23,8
1,5007 14,4 1,4925 17,6 1,4845 20,8 1,4765 24,0
1,5002 14,6 1,4920 17,8 1,4840 21,0 1,4760 24,2
1,4997 14,8 1,4915 18,0 1,4835 21,2 1,4755 24,4
1,4992 15,0 1,4910 18,2 1,4830 21,4 1,4750 24,6
1,4987 15,2 1,4905 18,4 1,4825 21,6 1,4745 24,8
1,4982 15,4 1,4900 18,6 1,4820 21,8 1,4740 25,0
1,4976 15,6 1,4895 18,8 1,4815 22,0 - -
1,4971 15,8 1,4890 19,0 1,4810 22,2 - -
1,4966 16,0 1,4885 19,2 1,4805 22,4 - -
IAL - 331
Nota: na correção do índice de refração para temperatura diferente de 20°C:

• Adicione 0,00023 ao índice de refração para cada grau acima de 20°C, antes de usar a
Tabela 3.
• Subtraia 0,00023 do índice de refração para cada grau abaixo de 20°C, antes de usar a
Tabela 3.
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official Methods

of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th. ed. Arlington:
A.O.A.C., (method 969.38 B) 1995. chapter 44. p.20-21.
BOGDANOV, S.; MARTIN, P.; LULLMAN, C. HARMONISED METHODS OF

THE EUROPEAN HONEY COMMISSION. Apidologie, Paris: Issue Spec. 1997. p.11-
13.

174/IV Méis – Determinação da acidez livre, lactônica e total
Este método baseia-se na determinação da acidez livre, lactônica e total. A acidez livre
é a medida obtida da titulação com hidróxido de sódio até o ponto de equivalência. A acidez
lactônica é obtida pela adição de um excesso de hidróxido de sódio que é titulado com ácido
clorídrico. A acidez total é obtida pela somatória entre acidez livre e lactônica.
Material
pHmetro, agitador magnético e barra magnética, balança analítica, espátula metálica,

béqueres de 50 e 250 mL e bureta de 25 mL.
Reagentes
Solução padronizada de hidróxido de sódio 0,05 N

Solução de ácido clorídrico 0,05 N
Soluções-tampão pH 4 e 7
Procedimento – Ligue e faça a calibração do pHmetro conforme as instruções do fabrican-

te, com as soluções tampão 4 e 7. Pese 10 g da amostra em um béquer de 250 mL e dissolva
332 - IAL
com 75 mL de água. Agite com agitador magnético. Mergulhe o eletrodo na solução e anote
o pH. Titule com solução de hidróxido de sódio 0,05 N até pH 8,5 e anote o volume (V).
Imediatamente, adicione nesta solução 10 mL de solução de hidróxido de sódio 0,05 N e,
sem demora, titule com solução de ácido clorídrico 0,05 N até o pH 8,30 (Va). Titule 75
mL de água com hidróxido de sódio 0,05 N (Vb) até pH 8,5.
Cálculos
Acidez livre
V = n.º de mL da solução de NaOH 0,05 N gasto na titulação

Vb = n.º de mL de solução de NaOH 0,05 N gasto na titulação para o branco
f = fator da solução de NaOH 0,05 N
Acidez lactônica
Va= nº de mL de solução de HCl 0,05 N gasto na titulação

f’ = fator da solução de HCl 0,05 N
Acidez total em milequivalentes por kg = acidez livre + lactônica
Referência bibliográfica
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official Methods

of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed. Arlington:
A.O.A.C., (mothod 962.19) 1995. chapter 44. p. 31.
175/IV Méis – Determinação de hidroximetilfurfural
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, cubeta de quartzo de 1 cm, balança analítica, banho de ultra-
IAL - 333
som, espátula metálica, papel de filtro qualitativo, béqueres de 25 e 50 mL, balão volumé-
trico de 50 mL, pipetas volumétricas de 0,5 e 5 mL, tubos de ensaio de tamanho médio,
proveta de 25 mL, funil de vidro de tamanho médio e bastão de vidro.
Reagentes
Solução de Carrez I – Dissolva 15 g de ferrocianeto de potássio - K4 [ Fe (CN)6 ] . 3H2O

em água e complete para 100 mL.
Solução de Carrez II – Dissolva 30 g de acetato de zinco – Zn (CH3COO)2 . 2H2O em

água e complete para 100 mL.
Solução de bissulfito de sódio - NaHSO3 a 0,2% m/v – Dissolva 0,20 g de bissulfito de

sódio em água e dilua a 100 mL. Se necessário, dilua 1+1 com a solução de referência.
Procedimento – Ligue e ajuste o espectrofotômetro conforme as instruções do fabricante,

para leituras das absorbâncias a 284 e 336 nm. Pese, com precisão, cerca de 5 g do mel em
um béquer de 50 mL e transfira, no máximo, com 25 mL de água para um balão volu-
métrico de 50 mL. Adicione 0,5 mL de solução de Carrez I e misture. Adicione 0,5 mL de
solução de Carrez II e misture. Se necessário, adicione uma gota de álcool para suprimir a
espuma. Complete o volume com água. Filtre, descartando os primeiros 10 mL do filtrado.
Pipete 5 mL para cada um dos dois tubos de ensaio. Adicione 5 mL de água em um dos tu-
bos (amostra) e 5 mL de solução de bissulfito de sódio 0,2% no outro (referência). Misture
bem em banho de ultra-som por 3 minutos e determine a absorbância da amostra a 284 e
336 nm em cubeta de 1 cm. Se a absorbância for maior que 0,6, dilua a solução de amostra
com água e a solução de referência com solução de bissulfito de sódio 0,10%, na mesma
proporção e corrija a absorbância para a diluição.
Nota: não aqueça o mel antes desta determinação.
Cálculos
A284 = leitura da absorbância a 284 nm

A336 = leitura da absorbância a 336 nm
5 = massa nominal da amostra
149,7 = (126/16830) x (1000/10) x (1000/5)
334 - IAL
126 = peso molecular do HMF

16830 =absortividade molar do HMF a 284 nm
1000 = conversão de g para mg
10 = diluição de 5 g de mel para 50 mL
1000 = conversão de g para kg
Referências Bibliográficas

Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 16th ed. Arlington: A.O.A.C.,
(method 980.23), 1995. chapter 44. p. 26.

THE EUROPEAN HONEY COMMISSION Apidologie, Paris: Issue Spec., 1997. p.
25-27.
176/IV Méis – Determinação de açúcares redutores pelo método A
É aplicável na determinação de açúcares redutores em mel, calculados como açúcar

invertido (glicose + frutose) e baseia-se no método modificado de Lane & Eynon.
Material
Balança analítica, banho-maria, chapa elétrica, espátula metálica, balão de fundo chato de
250 mL, balões volumétricos de 100, 200, 250, 500 e 1000 mL, pipetas volumétricas de 5
e 50 mL, pipeta graduada de 1 mL, buretas de 10 e 25 mL e funil pequeno.
Reagentes
Solução de azul de metileno a 0,2 % m/v -- Dissolva 2 g de azul de metileno em água e

dilua a 1 L.
Ácido clorídrico
Solução de hidróxido de sódio 1 M
Solução-padrão de açúcar invertido (10 g/L) – Pese com precisão 9,5 g de sacarose e transfira
para um balão de 1000 mL. Adicione 5 mL de ácido clorídrico e dilua com água até cerca
de 100 mL. Mantenha esta solução acidificada por vários dias (aproximadamente 7 dias de
12 a 15ºC ou 3 dias de 20 a 25ºC). Complete o volume com água. A solução ácida de açúcar
IAL - 335
invertido a 1% permanece estável por vários meses. Pipete 50 mL da solução ácida para um
balão volumétrico de 250 mL. Imediatamente antes de usar e diluir, neutralize com solução de
hidróxido de sódio 1 M. Complete o volume com água, para obter a concentração de 2 g/L.
Soluções de Fehling modificadas por Soxhlet - Solução A – Dissolva 69,28 g de sulfato

de cobre - CuSO4 . 5H2O - com água em um balão volumétrico de 1 L. Complete o
volume com água. Solução B - Dissolva 346 g de tartarato duplo de sódio e potássio -
K Na (C4 H4 O6). 4 H2O e 100 g de hidróxido de sódio com água em um balão volumétrico
de 1L. Complete o volume e filtre em papel de filtro qualitativo.
Padronização – Pipete 5 mL da solução A e 5 mL da solução B para um balão de fundo cha-
to de 250 mL. Adicione, com uma bureta de 25 mL, solução-padrão de açúcar invertido,
cerca de 0,5 a 1 mL a menos do volume total necessário para reduzir todo o cobre. Aqueça
a solução até a ebulição. Mantenha em ebulição moderada por 2 minutos. Sem remover da
chapa elétrica, adicione 1 mL da solução de azul de metileno. Complete a titulação, dentro
de um tempo total de ebulição de 3 minutos, adicionando gota a gota a solução de açúcar
invertido, até a descoloração do indicador. Após a redução completa do cobre, o azul de
metileno é reduzido a um composto incolor e a solução retorna à coloração que tinha antes
da adição do indicador. Na padronização, as soluções de Fehling deverão reagir comple-
tamente com 0,05 g de açúcar invertido, que corresponde a 25 mL da solução-padrão de
açúcar invertido (2 g/L).
Procedimento – Pese cerca de 2 g da amostra homogeneizada de mel em um béquer de

25 mL. Dissolva com água e transfira para um balão volumétrico de 200 mL. Complete
o volume com água. Pipete 50 mL da solução para um balão volumétrico de 100 mL e
complete o volume. Pipete 5 mL da solução A e 5 mL da solução B para um balão de
fundo chato de 250 mL. Adicione 7 mL de água. Na bureta de 25 mL, coloque a solução
de mel diluída e adicione 15 mL no balão de fundo chato. Aqueça a solução e mantenha
em ebulição moderada por 2 minutos. Adicione 1 mL de solução de azul de metileno
enquanto ainda em ebulição e complete a titulação, dentro de um tempo total de ebulição
de 3 minutos, adicionando gota a gota a solução diluída de mel até a descoloração do
indicador. O volume total para completar a titulação deve ser de 35 mL (soma da solução
de Fehling A e B, amostra diluída de mel e água). Anote o volume gasto da solução de mel
(V mL). Repita a titulação, usando 5 mL de cada solução de Fehling, (25 - V mL) de água e
adicione com uma bureta o volume da solução diluída de mel gasto na titulação preliminar
menos 1,5 mL. Aqueça a solução até a ebulição. Adicione 1 mL de solução de azul de
metileno e complete a titulação, dentro de 3 minutos, adicionando gota a gota a solução
diluída de mel até a descoloração do indicador. As titulações em duplicata devem concordar
dentro de 0,1 mL.
336 - IAL
Cálculo
P = massa de amostra em g
V = nº de mL da solução diluída da amostra gasto na titulação
CODEX ALIMENTARIUS COMMISSION. CAC/VOL III, Suppl. 2. ed. 1. Rome:

FAO/WHO, 1989. p. 7-13.

THE EUROPEAN HONEY COMMISSION. Apidologie, Paris: Issue Spec., 1997. p.
38-41.
177/IV Méis – Determinação de açúcares redutores pelo método B
Procedimento -- Pese 2 g de amostra de mel homogeneizada e proceda conforme a técnica

descrita nos glicídios redutores em glicose (038/IV).
178/IV Méis – Determinação de sacarose aparente pelo método A
Baseia-se na determinação dos açúcares, após a inversão por hidrólise ácida, pelo
método modificado de Lane & Eyon.
Material
Balança analítica, banho-maria, chapa elétrica, espátula metálica, papel indicador universal
de pH, balão de fundo chato de 250 mL, balão volumétrico de 100 mL, pipetas volumétri-
cas de 2, 10 e 50 mL, pipeta graduada de 1 mL, buretas de 10 e 25 mL e funil pequeno.
Reagentes
Solução-padrão de açúcar invertido (10 g/L)

Soluções de Fehling, modificadas por Soxhlet
Solução de azul de metileno 0,2 % m/v
Solução de ácido clorídrico 5 M
Solução de hidróxido de sódio 5 M
IAL - 337
Procedimento – Pipete 50 mL da solução de mel obtida na determinação de açúcares re-

dutores 176/IV para um balão volumétrico de 100 mL. Adicione 25 mL de água. Aqueça
a 65 ºC em banho-maria. Remova o frasco do banho e adicione 10 mL de solução de ácido
clorídrico. Deixe a solução resfriar naturalmente até a temperatura ambiente. Neutralize
com solução de hidróxido de sódio, usando papel indicador de pH. Complete o volume
com água. Proceda como em 176/IV.
Cálculo
V1 = n.º de mL da solução diluída da amostra gasto na titulação
C = n.º de g de açúcar invertido por cento, obtido antes da inversão, açúcares redutores

FAO/WHO, 1989, p. 9-13.

THE EUROPEAN HONEY COMMISSION. Apidologie, Paris: Issue Spec., 1997.
p. 38-41.
179/IV Méis – Determinação de sacarose aparente pelo método B
Procedimento - Pese 2 g de amostra de mel homogeneizado e proceda conforme a técnica

descrita no método 039/IV.
180/IV Méis – Determinação de sólidos insolúveis em água por gravimetria
Material
Balança analítica, estufa, bomba de vácuo, chapa elétrica, termômetro, dessecador com
sílica gel, espátula metálica, béquer de 150 mL, cadinho de vidro (15-40 μm), kitassato de
1000 mL e alonga de filtração.
338 - IAL
Reagentes
Solução alcoólica de floroglucina a 1% m/v

Ácido sulfúrico
Procedimento – Pese cerca de 20 g da amostra homogeneizada de mel. Dissolva em quan-

tidade adequada de água a 80 ºC e misture bem. Filtre sob vácuo através de um cadinho de
vidro previamente tarado a (135 ± 2)ºC e lave com água a 80ºC. Recolha parte do filtrado
em um tubo de ensaio e adicione algumas gotas da solução de floroglucina e de ácido sul-
fúrico (se houver a formação de névoa esbranquiçada existe ainda açúcar). Continue a lava-
gem com água a 80°C até que o filtrado esteja livre de açúcares. Seque o cadinho a 135ºC
por 1 hora, resfrie e pese. Retorne para a estufa a 135ºC em um intervalo de 30 min até que
o peso constante seja atingido.
Cálculo
N = massa seca de sólidos insolúveis em g


FAO/WHO, 1989, p.14-15.

THE EUROPEAN HONEY COMMISSION. Apidologie, Paris: Issue Spec., 1997. p.
51-52
181/IV Méis – Determinação da atividade diastásica
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, cubeta 1 cm, balança analítica, banho de ultra-som, pHmetro,

espátula metálica, termômetro, cronômetro, banho-maria, frasco Erlenmeyer de 250 mL,
balões volumétricos de 100 e 500 mL, proveta graduada de 50 mL, béquer de 50 mL, pipe-
tas volumétricas de 5, 10 e 20 mL.
IAL - 339
Reagentes
Acetato de sódio
Ácido acético
Solução de amido – Pese, com precisão, 2 g de amido solúvel anidro (próprio para a
determinação de poder diastásico) e misture com 90 mL de água em um frasco Erlenmeyer
de 250 mL. Rapidamente, leve à ebulição, agitando a solução tanto quanto possível. Reduza
o aquecimento e mantenha em ebulição moderada por 3 minutos, cubra, e deixe resfriar
até a temperatura ambiente. Transfira para um balão volumétrico de 100 mL e complete o
volume com água.
Solução-estoque de iodo – Dissolva 8,8 g de iodo ressublimado em (30 - 40) mL de água

contendo 22 g de iodeto de potássio e dilua para 1000 mL com água.
Solução de iodo a 0,00035 M – Dissolva 20 g de iodeto de potássio e 5 mL da solução-

estoque de iodo em água e dilua para 500 mL. Prepare uma nova solução a cada dois dias.
Solução-tampão de acetato pH 5,3 (1,59 M) – Dissolva 87 g de acetato de sódio em 400

mL de água, adicione cerca de 10,5 mL de ácido acético, transfira para um balão volumé-
trico de 500 mL e complete o volume com água. Ajuste o pH para 5,3, usando o pHmetro,
com acetato de sódio ou ácido acético, se necessário.
Solução de cloreto de sódio 0,5 M – Dissolva 14,5 g de cloreto de sódio em água, transfira
para um balão volumétrico de 500 mL e complete o volume com água.
Padronização da solução de amido – Pipete 5 mL da solução de amido para um béquer con-

tendo 10 mL de água e misture bem. Pipete 1 mL desta solução para várias provetas de 50
mL, contendo 10 mL da solução de iodo 0,00035 M. Misture bem e determine o volume
de água necessário para a diluição da solução de amido, para se obter uma leitura de absor-
bância de 0,760 ± 0,02, a 660 nm, utilizando um branco com água. Repita a padronização
a cada nova preparação da solução de amido.
Procedimento – Ligue e ajuste o espectrofotômetro conforme as instruções do fabricante,

para leituras da absorbância a 660 nm. Ligue para estabilizar o pHmetro e faça os ajustes
para a operação. Calibre o pHmetro com as soluções tampão 7 e 4. Pese cerca de 10 g de
amostra de mel em um béquer de 50 mL e dissolva com 15 mL de água, adicione 5 mL
da solução-tampão e transfira para um balão volumétrico de 50 mL, contendo 3 mL da
solução de cloreto de sódio 0,5 M e complete o volume com água. É importante que o mel
seja tamponado antes da adição da solução de cloreto de sódio. Pipete 5 mL da solução de
amido num tubo contendo 10 mL desta solução de mel tamponada e coloque em banho
de água a (40 ± 1)ºC por 15 minutos, agite essa solução periodicamente. Em intervalos
340 - IAL
de 5 minutos, pipete alíquotas de 1 mL desta solução e adicione rapidamente 10 mL de

solução de iodo diluída 0,00035 M, em uma proveta de 50 mL. Misture e dilua com água,
se necessário, conforme descrito na padronização do amido. Determine a absorbância a 660
nm. Continue tomando alíquotas de 1 mL em intervalos de 5 minutos, até obter um valor
de absorbância menor que 0,235.
Nota: não aqueça o mel antes desta determinação.
Construa a curva-padrão da absorbância versus o tempo em minutos. Trace uma linha reta,
para determinar o tempo (tx) em que a reação alcançou a absorbância de 0,235. Divida 300
pelo tempo (tx) minutos para obter a atividade diastásica (AD). O resultado é expresso em
unidades de Gothe ou Schade por grama de mel.
Cálculo
tx= o tempo da reação em minutos
BRASIL. Leis, Decretos etc. - Portaria nº 001, de 24 de março de 1980, Secretaria de inspeção
de Produto Animal. Diário Oficial, Brasília, 28 de mar. de 1980. Seção I, p. 5561-5572. Aprova as
Normas Higiênico-sanitárias e Técnicas para Mel, Cera de Abelhas e Derivados...

FAO/WHO, 1989, p. 17-21.
BOGDANOV, S.; MARTIN, P.; LULLMAN, C. HARMONISED METHODS OF THE

EUROPEAN HONEY COMMISSION. Apidologie, Paris: Issue Spec., 1997, p. 31-34.
182/IV Méis – Reação de Lund
A reação de Lund é aplicável em amostra de mel e indica a presença de albuminóides.

Sua ausência indica fraude.
Material
Balança analítica, espátula metálica, proveta de (50 ± 0,1) mL com tampa, béquer de 25
mL, pipeta volumétrica de 5 mL, funil pequeno e bastão de vidro.
IAL - 341
Reagentes
Solução de ácido tânico a 0,5% m/v -- Dissolva 0,5 g de ácido tânico em 100 mL de água.
Procedimento – Pese, com precisão, cerca de 2 g da amostra. Transfira para uma proveta de 50
mL, com tampa, com o auxílio de 20 mL de água. Adicione 5 mL de solução de ácido tânico
0,5%. Adicione água até completar o volume de 40 mL. Agite para misturar totalmente.
Deixe em repouso por 24 horas. Na presença de mel puro, será formado um precipitado no
fundo da proveta no intervalo de 0,6 a 3,0 mL. Na presença de mel adulterado, não haverá
formação de precipitado ou excederá o volume máximo do referido intervalo.
BRASIL. Leis, Decretos etc. - Portaria nº 001, de 24 de março de 1980, Secretaria de Inspeção
de Produto Animal. Diário Oficial, Brasília, 28 de mar. de 1980. Seção I, p. 5561-5572.
Aprova as Normas Higiênico-sanitárias e Técnicas para Mel, Cera de Abelhas e Derivados...

183/IV Méis – Reação de Fiehe
A reação de Fiehe com resorcina em meio ácido pode indicar a presença de substân-
cias produzidas durante o superaquecimento de mel ou a adição de xaropes de açúcares.
Material
Balança analítica, espátula metálica, provetas de 10 e 50 mL, béquer de 50 mL, pipeta

graduada de 1 mL, bastão de vidro e tubo de ensaio pequeno.
Reagentes
Éter
Solução clorídrica de resorcina - Dissolva 0,5 g de resorcina em 50 mL de ácido clorídrico.

Esta solução deverá ser recém-preparada.
Procedimento - Pese 5 g de amostra em um béquer de 50 mL. Adicione 5 mL de éter e

agite vigorosamente. Transfira a camada etérea para um tubo de ensaio e adicione 0,5 mL de
solução clorídrica de resorcina e deixe em repouso por 10 minutos. Na presença de glicose
comercial ou de mel superaquecido, aparecerá uma coloração vermelha intensa, indicando
a fraude.
342 - IAL
de Produto Animal. Diário Oficial, Brasília, 28 de mar. de 1980. Seção I, p. 5561-72. Aprova
as Normas Higiênico-sanitárias e Técnicas para Mel, Cera de Abelhas e Derivados...
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v. 1: Mé-

todos químicos e físicos para análise de alimentos, 3ª ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 164.
0184/IV Méis – Reação de Lugol
A reação com solução de Lugol pesquisa a presença de amido e dextrinas no mel.
Material
Balança analítica, banho-maria, espátula metálica, proveta de 50 mL, béquer de 50 mL,

pipeta graduada de 1 mL e bastão de vidro.
Reagentes
Solução de Lugol - Dissolva 1 g de iodo ressublimado em 10 mL de água contendo 3 g de

iodeto de potássio e dilua para 50 mL com água e armazene a solução em frasco âmbar.
Procedimento – Pese 10 g da amostra em um béquer de 50 mL. Adicione 20 mL de

água e agite. Deixe no banho-maria fervente por 1 hora e em seguida resfrie à temperatura
ambiente. Adicione 0,5 mL da solução de Lugol. Na presença de glicose comercial ou
xaropes de açúcar, a solução ficará colorida de marrom-avermelhada a azul. A intensidade
da cor depende da qualidade e da quantidade das dextrinas ou amido, presentes na amostra
fraudada. Faça a mesma prova para um mel puro para comparação.
de Produto Animal. Diário Oficial, Brasília, 28 de mar. de 1980. Seção I, p. 5561-72. Aprova as
Normas Higiênico-sanitárias e Técnicas para Mel, Cera de Abelhas e Derivados...

Métodos químicos e físicos para análise de alimentos, 3ª ed. São Paulo: IMESP, 1985, p. 165.
Colaboradores
Cristiane Bonaldi Cano; Letícia Araújo Farah Nagato e Maria Cristina Duran
IAL - 343
Capítulo VIII - Águas
CAPÍTULO
VIII
ÁGUAS
IAL - 345
346 - IAL
VIII
ÁGUAS
A
água é importante para a manutenção da vida e a sua sanidade e utilização racional
são de impacto para a economia e preservação da saúde da coletividade. A água para
o consumo humano é aquela cujos parâmetros microbiológicos, físico-químicos e
radioativos atendem aos padrões de potabilidade e não oferecem risco à saúde da
população. Essas águas são captadas de mananciais superficiais.
De acordo com a origem e tratamento recebido, as características das águas potáveis

variam, sendo de grande importância o conjunto de determinações físico-químicas, a seguir
descritas, que avaliam essas propriedades. Esses referidos ensaios são destinados à verificação
da qualidade de águas provenientes de poços, minas, água mineral e de abastecimento pú-
blico.
185/IV Determinação de dureza
A dureza total é definida como a soma das concentrações de cálcio e magnésio, ambas
expressas como carbonato de cálcio, em miligramas por litro. O ácido etilenodiaminotetra-
cético e seus sais sódicos (EDTA) formam complexos quelados solúveis com certos cátions
metálicos. Uma solução contendo íons de cálcio e magnésio, com uma pequena quantidade
do indicador negro de eriocromo T, em pH (10,0±0,1) torna-se púrpura. Titulando-se essa
solução com EDTA, cálcio e magnésio serão quelados e uma viragem de cor púrpura a azul
indicará o ponto final.
Material
Pipeta de 50 mL (ou balão volumétrico), pipeta de 2 mL, frasco Erlenmeyer de (250 e

500) mL, buretas de (10 e 25) mL e balões volumétricos de 250 e 1000 mL.
IAL - 347
Reagentes
Solução-padrão de cálcio – Transfira, para um frasco Erlenmeyer de 500 mL, 1 g de carbo-

nato de cálcio previamente aquecido a 105°C por 15 horas. Adicione, por meio de um funil,
ácido clorídrico diluído a 50%, aos poucos, até dissolver todo o carbonato. Adicione 200
mL de água. Aqueça até ebulição para eliminar todo gás carbônico. Esfrie, adicione duas
gotas do indicador vermelho de metila e ajuste para cor alaranjada, adicionando hidróxido
de amõnio 3 M ou ácido clorídrico 50%.Transfira a solução para um balão volumétrico de
1000 mL e complete o volume com água. Um mL desta solução equivale a 1 mg de carbo-
nato de cálcio.
Solução-tampão – Dissolva 16,9 g de cloreto de amônio em 143 mL de hidróxido de amô-

nio. Adicione 1,25 g do sal Mg-EDTA e dilua para 250 mL com água destilada.
Nota: Se o sal Mg-EDTA não for disponível, alternativamente, dissolva 1,179 g de EDTA
dissódico e 780 mg de sulfato de magnésio (MgSO4.7H2O) ou 644 mg de cloreto de mag-
nésio (MgCl2.6H2O) em 50 mL de água destilada. Adicione à esta solução 16,9 g de cloreto
de amõnio e 143 mL de hidróxido de amônio concentrado com agitação e dilua para 250
mL com água destilada.
Solução indicadora – Misture, em almofariz, 0,5 g de negro de eriocromo T - sal sódico do

ácido 1-(1-hidroxi-2-naftilazo)-5-nitro-2-naftol-4-sulfônico) - com 100 g de cloreto de só-
dio. Conserve em frasco com rolha esmerilhada.
Solução de EDTA 0,01 M – Dissolva 3,72 g do sal dissódico do ácido etilenodiaminotetra-

cético dihidratado em água bidestilada e deionizada e complete a 1000 mL.
Padronização – Transfira 50 mL de água destilada e deionizada para um frasco Erlenmeyer

de 250 mL. Adicione 2 mL da solução-tampão e 0,05 g do indicador negro de eriocromo T.
Adicione 20 mL da solução-padrão de cálcio. Titule com a solução de EDTA até viragem da
cor púrpura para azul. Calcule a massa de CaCO3 eqüivalente a 1 mL da solução de EDTA.
Procedimento – Transfira 50 mL da amostra para um frasco Erlenmeyer de 250 mL. Adi-

cione 1 mL da solução-tampão e pequena porção (0,05 g) do indicador negro de eriocromo
T. Titule com a solução de EDTA 0,01 M até que a coloração púrpura passe a azul.
Cálculo
v = nº de mL de solução de EDTA gasto na titulação

A= mg de CaCO3 eqüivalente a 1 mL da solução de EDTA 0,01 M
348 - IAL
V = n° de mL da amostra

todos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 307-308.
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKS AS-

SOCIATION, WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: American Public Heal-
th Association,1995. chapter 2, p. 2-37.
186/IV Determinação de dureza de carbonatos e de não-carbonatos
Quando a dureza é numericamente maior que a soma da alcalinidade de carbonato e

de bicarbonato, a quantidade de dureza equivalente à alcalinidade total é denominada “du-
reza de carbonatos”; a quantidade de dureza em excesso à anterior é denominada “dureza de
não-carbonatos”.
D ≤ A - Dureza de carbonatos = D
D > A - Dureza de carbonatos = A
A = alcalinidade de carbonatos + alcalinidade de bicarbonatos

D = dureza total
Calcule a dureza de não-carbonatos subtraindo a dureza de carbonato da dureza total.

todos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 309.
187/IV Determinação da alcalinidade total por método volumétrico com indicador

visual
A alcalinidade total de uma solução é, geralmente, devida aos íons hidroxila, carbo-
nato e bicarbonato dissolvidos na água e a soma das concentrações desses íons é expressa em
carbonato de cálcio. O conteúdo de cloro residual não deve ser superior a 1,8 mg/L, pois
pode destruir o indicador colorimétrico; esse excesso de cloro pode ser eliminado pela adição
de solução de tiossulfato de sódio (1 litro de água com concentração de cloro de 1,8 mg/L
IAL - 349
necessita de 1 mL de solução de tiossulfato de sódio contendo 3,2 g/L). A alcalinidade total é

determinada por titulação da amostra de água com solução padronizada de ácido, com pon-
tos finais estabelecidos em pH 4,5 e 8,3. As medidas podem ser realizadas por volumetria,
com emprego de indicadores ácido-base. As reações que se processam são:
H3O+ + OH- ↔ 2H2O
CO3-2 + H3O+ ↔ HCO3- + H2O
HCO3- + H3O+ ↔ H2CO3 + H2O
Material
Pipeta volumétrica de 50 mL, balões volumétricos de 100 e 1000 mL, pipetas, frascos
Erlenmeyer de 250 mL, bureta de 25 mL, pesa-filtro, balança analítica e frasco conta-gotas.
Reagentes
Solução-padrão de carbonato de sódio 0,025 M
Solução-padrão de ácido sulfúrico 0,05 M ou clorídrico 0,1 M – Dilua em um balão volu-

métrico de 1000 mL, 3 mL de ácido sulfúrico ou 8,3 mL de ácido clorídrico e complete o
volume com água. Coloque a solução ácida na bureta e padronize, por titulação, com 40 mL
de solução de carbonato de sódio 0,025 M.
Padronização da solução de ácido sulfúrico 0,05 M ou ácido clorídrico 0,1 M, utilizando

indicador visual – Em um frasco Erlenmeyer de 250 mL, adicione 40 mL de solução-padrão
de carbonato de sódio e 60 mL de água bidestilada e deionizada. Coloque na bureta o ácido
a ser padronizado (H2SO4 0,05 M ou HCl 0,1 M). Adicione duas gotas de indicador fe-
nolftaleína e acrescente lentamente o ácido até viragem de cor rósea a incolor (formação de
HCO3-). A seguir, adicione 2 gotas de indicador verde de bromocresol ou da mistura de verde
de bromocresol e vermelho de metila. Continue a titulação até viragem de cor azul para verde
(ou verde para amarela, no caso de mistura de indicadores).
Nota: 1 mL da solução ácida = 5 mg de CaCO3
Indicador verde de bromocresol – Pese 100 mg do indicador verde de bromocresol (sal

sódico), transfira para um balão volumétrico de 100 mL e complete o volume com água
bidestilada e deionizada.
Indicador verde de bromocresol-vermelho de metila – Dissolva 100 mg de verde de bro-

mocresol (sal sódico) e 20 mg de vermelho de metila (sal sódico) em 100 mL de água, ou
350 - IAL
alternativamente, em 100 mL de álcool a 95% ou álcool isopropílico.
Solução de fenolftaleína – Pese 1 g de fenolftaleína, transfira para um balão volumétrico de

100 mL, dissolva com álcool a 95% e complete o volume.
Solução de tiossulfato de sódio – Pese 3,2 g de tiossulfato de sódio, transfira para um balão
volumétrico de 1000 mL, dissolva com água destilada e deionizada e complete o volume .
Solução de ácido sulfúrico 0,005 M ou de ácido clorídrico 0,01 M – Transfira 100 mL da

solução de ácido sulfúrico 0,05 M ou 100 mL da solução de ácido clorídrico 0,1 M para um
balão de 1000 mL. Complete o volume com água bidestilada e deionizada.
cione 2 gotas da solução indicadora de fenolftaleína. Se aparecer cor, hidróxidos ou carbo-
natos estão presentes, e então titule esta solução, sob agitação constante, com solução pa-
dronizada 0,005 M de ácido sulfúrico ou 0,01 M de ácido clorídrico até o desaparecimento
da cor rósea. Anote o volume gasto na bureta (alcalinidade referente a íons hidroxila livres).
Adicione 2 gotas do indicador verde de bromocresol (ou da mistura dos indicadores verde
de bromocresol e vermelho de metila) à solução incolor acima obtida. Titule com solução de
ácido sulfúrico 0,005 M (ou ácido clorídrico 0,01 M), até a mudança da cor azul para verde
(ou de verde para amarelada, no caso da mistura dos indicadores). Leia na bureta o volume
total de ácido gasto (alcalinidade total).
Cálculo
v = volume do ácido sulfúrico (ou clorídrico) gasto, em L

M = molaridade da solução de ácido
Va = volume da amostra de água, em L
Nota: a alcalinidade referente a íons hidroxila livres (F) e total (AT) pode ser usada para se
calcular a alcalinidade em termos de hidróxido, carbonato e bicarbonato. A realização deste
cálculo é feita utilizando a tabela 1.
Tabela 1 – Cálculo de alcalinidade da água
Alcalinidade (em mg/L como CaCO3)
Resultado da
titulação Hidróxidos Carbonatos Bicarbonatos
F=0 0 0 AT
IAL - 351
F < ½ AT 0 2F AT – 2 F
F = ½ AT 0 2F 0
F > ½ AT 2 F – AT 2 (AT – F) 0
F = AT AT 0 0
F = alcalinidade fenolftaleína, AT = alcalinidade total
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKSAS-

th Association,1995. chapter 2, p. 25-28.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v. 1: Méto-

dos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo:IMESP, 1985. p. 307-310.
188/IV Determinação de amônia por método potenciométrico
A presença de amônia nas águas de superfície pode ser resultante da desaminação de

compostos orgânicos que contêm nitrogênio por atividade microbiológica ou pela hidrólise
da uréia. Pode também ter origem durante o tratamento da água, para formar resíduo com-
binado de cloro (cloraminas). O método potenciométrico é aplicado para a determinação
de amônia em águas de superfícies, domésticas e de resíduos industriais. Interferem nesta
metodologia altas concentrações de íons dissolvidos, porém a cor e turbidez não são interfe-
rentes. O eletrodo seletivo para amônia possui uma membrana hidrofóbica gás-permeável,
para separar a amostra da solução interna do eletrodo (cloreto de amônio). Obtém-se NH3
aquosa quando, na solução contendo a mistura de NH3 e NH4+, por mudança de pH com
base forte (aproximadamente 11), os íons NH4+ se convertem em NH3 aquosa.
Material
Potenciômetro, eletrodo seletivo, agitador magnético, balança analítica, béqueres de 150

mL, balões volumétricos de 100 e 1000 mL e pipetas volumétricas.
352 - IAL
Reagentes
Cloreto de amônio
Hidróxido de sódio
Tiossulfato de sódio
Tetraborato de sódio
Solução-estoque de cloreto de amônio – Pese 3,819 g de cloreto de amônio, seco a 105°C

por duas horas. Transfira para um balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com
água bidestilada e deionizada, livre de amônia. Transfira 10 mL desta solução para balão vo-
lumétrico de 1000 mL. Complete o volume (cada mL desta solução contém 1 mg de N ou
1,22 mg de NH3).
Soluções-padrão de cloreto de amônio – Prepare, a partir de diluições de uma solução-

estoque de cloreto de amônio com água, uma série de soluções de concentrações 0,1; 1, 10
e 100 mg/L de NH3.
Curva-padrão – Transfira 100 mL de cada solução-padrão para béqueres de 150 mL. Mer-
gulhe o eletrodo no padrão de mais baixa concentração e agite lentamente (para minimizar
as perdas de NH3) com um agitador magnético. Mantenha a agitação à temperatura de 25°C
e adicione aproximadamente 1 mL de NaOH 10 M para elevar o pH até 11. O eletrodo
deve permanecer na solução até que a leitura, em milivolts, permaneça estável. Não adicione
NaOH antes de imergir o eletrodo na solução. Repita o procedimento para todas as soluções-
padrão, aguardando estabilização das leituras. Construa a curva: concentração de amônia, em
mg/L versus potencial, em milivolts, utilizando papel semi-logarítimico.
Procedimento – Transfira 100 mL da amostra de água para um béquer de 150 mL e proce-

da como na curva-padrão. A partir da leitura obtida para amostra, interpole a concentração
de NH3, na curva-padrão previamente construída.

th Association, 1995. chapter 4, p. 78-79.
189/IV Determinação de amônia por método espectrofotométrico
Este método utiliza o reagente de Nessler que reage, quando adicionado a uma solu-
ção diluída de amônia, formando um composto de cor amarelada, o qual pode flocular após
IAL - 353
certo tempo. A determinação espectrofotométrica deve ser efetuada antes que isto ocorra.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, sistema de destilação, balança analítica, balões volumétricos de

50 e 1000 mL e pipetas volumétricas de 1, 2 e 10 mL.
Reagentes
Cloreto de amônio
Carbonato de sódio
Iodeto de mercúrio II
Iodeto de potássio
Dihidrogenofosfato de potássio (KH2PO4)
Monohidrogenofosfato de potássio (K2HPO4.3H2O)
Água bidestilada e deionizada, livre de amônia para preparo de reagentes
Reagente de Nessler: solução A – Pese 100 g de iodeto de mercúrio II e 70 g de iodeto de

potássio, transfira para um balão volumétrico de 200 mL, dissolva e complete o volume com
água destilada e deionizada; solução B – Pese 160 g de hidróxido de sódio e dissolva com 500
mL de água destilada e deionizada. Resfrie à temperatura ambiente. Adicione vagarosamente
e sob agitação, a solução A à solução B e dilua para 1000 mL com água bidestilada e deioni-
zada. Manuseie a solução na penumbra e armazene-a em frasco plástico rígido ao abrigo da
luz.
Solução-tampão de fosfato de potássio – Pese 14,3 g de dihidrogenofosfatode potássio e

90,15 g de monohidrogenofosfato de potássio. Transfira para um balão volumétrico de 1000
mL e complete o volume com água destilada e deionizada. Esta solução deverá apresentar
pH (7,4 ± 0,2). Confira com medida potenciométrica. Caso não coincida o valor com o
mencionado, acerte, via potenciométrica, pela adição de um dos sais sólidos mencionados,
sob agitação.
Solução-padrão de cloreto de amônio – Pese 0,0785 g de cloreto de amônio e transfira para

um balão volumétrico de 1000 mL, completando o volume com água bidestilada e deioni-
zada. Esta solução tem concentração equivalente a 25 mg de NH3/L.
354 - IAL
Procedimento
Teste qualitativo – Transfira 50 mL da amostra de água para uma cápsula de porcelana e

adicione 1 mL do reagente de Nessler, sem agitação. Aguarde 10 minutos e observe o desen-
volvimento de coloração amarela, comparando-a com um branco com água bidestilada e
deionizada. Se houver aparecimento de cor amarela, proceda a destilação da amostra.
Destilação da amostra – Transfira, para o sistema de destilação, 50 mL de solução saturada

de carbonato de sódio e 500 mL de água destilada. Destile aproximadamente 300 mL e
despreze. Continue a destilação, recolha 50 mL de destilado e adicione 1 mL de reagente de
Nessler. A coloração amarela indica resultado positivo. Continue a destilação até que o teste
seja negativo. Esfrie o sistema e substitua o volume restante do balão por 500 mL da amostra.
Adicione 10 mL da solução-tampão de fosfato de potássio. Proceda a destilação de modo que
o tubo de saída do destilado fique imerso na solução coletora (50 mL de ácido sulfúrico 0,02
M) contida em um Erlenmeyer de 250 mL. A velocidade de destilaçao deverá ser de 6 a 10
mL/min. Colete aproximadamente 180 mL do destilado, transfira para um balão volumé-
trico de 250 mL e complete o volume. Transfira 50 mL do destilado para balão volumétrico,
adicione 1 mL de reagente de Nessler e homogeneíze. Deixe em repouso por 10 minutos e
meça a coloração desenvolvida, em espectrofotômetro a 425 nm e determine a quantidade de
amônia correspondente, usando a curva-padrão previamente estabelecida.
Curva-padrão – A partir de diluições da solução-padrão de cloreto de amônio, prepare uma

série de soluções de concentrações de 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0 mg de NH3/L, transferindo, respec-
tivamente, 1, 2, 3, e 4 mL da solução-mãe para balões volumétricos de 50 mL e completando
o volume com água destilada e deionizada. Adicione a cada balão 1 mL de reagente de Nes-
sler e homogeneíze. Deixe em repouso por 10 minutos e meça a coloração desenvolvida, em
espectrofotômetro, a 425 nm. Construa a curva-padrão.
Cálculo
Determine a concentração de amônia utilizando a curva-padrão estabelecida com soluções-

padrão de cloreto de amônio. Multiplique o resultado por 0,5, pois foi tomada uma alíquota
de 50 mL de um volume de 250 mL contendo 200 mL de distilado de 500 mL da amos-
tra.
Nota: para expressar o resultado em nitrogênio amoniacal, o procedimento será o mesmo,

bastando multiplicar o resultado obtido para amônia por 14/17 (ou 0,824).
IAL - 355

SOCIATION WATER ,ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: American Public Heal-

190/IV Determinação de cloreto
Íons cloreto podem ser encontrados em águas provenientes de depósitos minerais e

de fontes poluídas, tais como esgotos e resíduos industriais. Em solução com pH entre 6,0 e
7,5, íons cromato são usados para indicar o ponto final da titulação de íons cloreto com íons
prata. O cloreto de prata é precipitado quantitativamente antes do cromato de prata, de cor
vermelha.
Material
Banho-maria, estufa, dessecador, balança analítica, cápsula de porcelana de 150 mL, buretas
de 10 e 25 mL, bastão de vidro, balões volumétricos de 50 e 1000 mL, pipetas volumétricas
de 25 e 50 mL e bureta de 25 mL.
Reagentes
Cromato de potássio
Cloreto de sódio
Nitrato de prata
Solução-padrão de nitrato de prata 0,0282 M – Pese 4,7909 g de nitrato de prata, transfira

para um balão volumétrico de 1000 mL, dissolva e complete o volume com água destilada
e deionizada.
Indicador cromato de potássio 10% m/v – Pese 5 g de cromato de potássio, transfira para
um balão volumétrico de 50 mL, dissolva e complete o volume com água destilada e deio-
nizada.
Solução-padrão de cloreto de sódio – Aqueça o cloreto de sódio em estufa a 200°C, por três
356 - IAL
horas. Resfrie em dessecador, pese 1,6484 g do sal e dilua a 1000 mL, em balão volumétrico,
com água destilada e deionizada. Um mL desta solução corresponde a 1 mg de íon cloreto.
Transfira 25 mL de solução de cloreto de sódio para o interior da cápsula de porcelana de
150 mL. Adicione 4 gotas de indicador de cromato de potássio. Adicione o nitrato de prata
pela bureta de 25 mL, lentamente, sob agitação até o aparecimento de um precipitado leve-
mente avermelhado. Anote o volume gasto e calcule a molaridade da solução de nitrato de
prata, usando a fórmula:
M = molaridade da solução de nitrato de prata

v = volume da solução de cloreto de sódio
v1 = volume da solução de nitrato de prata
Procedimento – Pipete 50 mL da amostra para uma cápsula de porcelana de 150 mL.

Aqueça em banho-maria até reduzir o volume a aproximadamente 20 mL. Adicione 4 gotas
do indicador cromato de potássio. Titule com a solução de nitrato de prata em bureta de
10 mL até o aparecimento de uma coloração avermelhada.
Nota: íons brometo e iodeto interferem nessa reação.
Cálculo
M = molaridade do nitrato de prata

v = volume de nitrato de prata gasto na titulação
va = volume da amostra, em mL
THEROUX, F.R.; ELDRIDGE, E.F.; MALLMANN, W.R. Laboratory Manual for

Chemical and Bacterial Analysis of Water and Sewage. 3.ed. London: McGraw-Hill
Book Company, 1943. p. 15,68,164.
SOCIATION WATER, ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater, 19th ed.. Washington, DC: American Public
Health Association, 1995. chapter 4, p.48-50.

todos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo:IMESP, 1985. p. 320-321.
IAL - 357
191/V Determinação da cor pelo método de comparação óptica por via instrumental
A presença de cor na água pode ser devida ao seu conteúdo de íons metálicos (geralmen-
te ferro e manganês), plâncton, resíduo industrial, húmus e outros materiais orgânicos e po-
derá ser expressa como “aparente” ou como “verdadeira”. A aparente é originária dos materiais
dissolvidos e em suspensão. Por sedimentação ou centrifugação dos materiais em suspensão,
pode-se determinar a cor verdadeira. Se a cor aparente é a dos materiais em suspensão, pode-se
determinar a cor verdadeira. Se a cor aparente é a que se quer determinar, proceda à análise da
amostra sem submetê-la à separação de materiais em suspensão (não filtrada). A cor é determi-
nada por comparação visual entre a amostra e soluções coloridas de concentrações conhecidas.
A comparação poderá ser feita por via instrumental, com discos coloridos especiais.
Material
Aparelho comparador visual munido de disco padrão de cor; tubos de cristal próprios para a
leitura ou tubos de Nessler de 50 mL, peças de cristal homogêneo e plunger.
Reagentes
Solução-padrão de cor – Pese 1,246 g de hexacloroplatinato de potássio (K2PtCI6), 1 g de

cloreto cobaltoso CoCI2.6H2O e meça 100 mL de ácido clorídrico. Transfira para um ba-
lão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água bidestilada e deionizada. Esta
solução-estoque apresenta cor equivalente a 500 unidades internacionais. Prepare padrões
contendo cores de 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 60, e 70 unidades, diluindo 0,5;
1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 3,5; 4,0; 4,5; 5,0; 6,0 e 7,0 mL da solução-padrão estoque em balões
volumétricos de 50 mL. Proteja estes padrões contra a evaporação e a contaminação quando
não estiverem sendo usados.
Procedimento – Encha um dos tubos com água bidestilada e deionizada, de modo a não
formar bolhas. Mergulhe o plunger no interior do tubo de água de modo a homogeneizar o
conteúdo da coluna. Proceda analogamente com o segundo tubo, utilizando agora a amostra
cuja cor se quer determinar. Leve os tubos ao comparador visual, colocando-os corretamente
em cada presilha do aparelho. Gire o disco até que a cor da amostra coincida com a cor apre-
sentada no disco padrão. Faça a leitura da escala. O resultado é expresso em uH (unidade de
Hazen).
Nota: Caso deseje medir a cor verdadeira, faça a decantação e, se necessário, centrifugue
previamente uma porção da amostra (como opção, pode-se efetuar filtração com papel quan-
titativo para precipitados finos).
358 - IAL


192/IV Determinação de ferro
Os compostos de ferro, muito abundantes na natureza, são integrantes da composição

química do solo, das rochas e da matéria vegetal. Em condições redutoras, o ferro existe no
estado ferroso. Em águas expostas ao ar ou em condições oxidantes, os íons ferrosos são oxi-
dados ao estado férrico, o qual se hidrolisa formando hidróxido de ferro III insolúvel. O ferro
ocorre em solução aquosa, em estado coloidal que pode ser peptizado por matéria orgânica,
em complexos inorgânicos ou orgânicos ou em partículas em suspensão.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, chapa elétrica, pHmetro, balança analítica, béqueres de 100,

250, 500, 1000 e 2000 mL, balões volumétricos de 50, 100 e 1000 mL, barra magnética,
buretas de 10 mL e 25 mL, frascos Erlenmeyer de 125 e 250 mL, funil de haste longa, lã de
vidro, pipetas volumétricas de 5, 25 e 50 mL, pipetas graduadas de 5 mL, proveta de 100
mL e vidro de relógio.
Nota: recomenda-se não usar espátula metálica
Reagentes
Acetato de sódio
Ácido acético glacial
Ácido clorídrico
Ácido fosfórico
Ácido sulfúrico
1,10-Fenantrolina
Cloreto de hidroxilamina
Oxalato de sódio
Permanganato de potássio
Sulfato ferroso amoniacal
IAL - 359
Zinco em pó
Ácido sulfúrico 0,4 M
Solução de permanganato de potássio 0,02 M
Ácido clorídrico a 50%
Ácido sulfúrico a 50% (para padronização do KMnO4).
Solução-padrão de ferro II – Pese 7 g de sulfato de amônio e ferro Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O,

dissolva em 50 mL de água bidestilada e deionizada, transfira para um balão volumétrico de
1000 mL e adicione 5 mL de ácido sulfúrico. Complete o volume com água destilada e deio-
nizada e homogeneíze. Esta solução contém cerca de 1 g de ferro. Pipete 25 mL da solução-
estoque em frasco Erlenmeyer de 250 mL. Adicione 70 mL de água bidestilada e deionizada,
0,1 g de zinco em pó. Ferva lentamente, até dissolver todo o zinco, agitando o frasco Erlen-
meyer, de tempos em tempos, com movimentos circulares. Se a solução ficar turva, adicione,
lentamente, solução de ácido sulfúrico 1 M até a turvação desaparecer. Esfrie, cobrindo o
frasco Erlenmeyer com vidro de relógio. Adicione 1 mL de ácido fosfórico e titule imediata-
mente com solução-padrão de permanganato de potássio 0,02 M até cor levemente rosada.
A solução original deve estar com concentração ao redor de 0,0178 M em íons de Fe II.
Nota: quando disponível, poderá ser usada a solução-padrão 1000 mg/kg (em Fe) para espec-
trometria de absorção atômica.
Reagente cloreto de hidroxilamônio (cloridrato de hidroxilamina) – Pese 10 g de cloreto de

hidroxilamônio NH2OH.HCl, transfira para um balão volumétrico de 100 mL e complete
o volume com água destilada e deionizada.
Solução-tampão de acetato de sódio – Dissolva 250 g de acetato de sódio em 150 mL de

água destilada e deionizada em béquer de 1000 mL. Mergulhe um eletrodo de vidro com-
binado previamente calibrado, conectado a pHmetro, uma barra magnética e, sob agitação,
adicione lentamente 500 mL de ácido acético glacial. Após homogeneização, sob agitação
constante, continue adicionando o ácido acético até o pH ficar entre 4,4 e 5,0. Complete o
volume a 1000 mL com água bidestilada e deionizada. Transfira para frasco de vidro e guarde
em geladeira, para se evitar a formação de fungos. Retire da geladeira, uma hora antes do uso,
quantidades suficientes recolhidas em béqueres ou frascos pequenos de polietileno e manti-
das à temperatura ambiente.
Solução-reagente – Pese 1 g de 1,10-fenantrolina monoidratada C12H8N2.H2O, transfira

para um balão volumétrico de 1000 mL com 100 mL de água bidestilada e deionizada,
adicione duas gotas de HCl, dissolva sob agitação e complete o volume com água bidestilada
e deionizada.
360 - IAL
Curva-padrão – Pipete 1 mL da solução-estoque com pipeta volumétrica em um balão

volumétrico de 100 mL e complete o volume com água bidestilada e deionizada. Esta
solução contém 10 mg de Fe ou o confirmado pela padronização. Seguindo o mesmo
tratamento dado às amostras, abaixo descrito, prepare soluções-padrão de ferro conten-
do 0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8 e 1,0 mg/L de ferro, a partir da solução-estoque de 10 mg/L.
Com bureta de 10 mL, adicione quantidades de 0; 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 e 5,0 mL em
balão volumétrico de 50 mL. Complete o volume com água bidestilada e deionizada e
transfira para um béquer de 250 mL. Adicione 4 mL de HCl a 50% e 1 mL de solução
de NH2OH.HCl. Ferva até que o volume se reduza a 15 ou 20 mL. Esfrie à tempera-
tura ambiente. Adicione 10 mL do tampão de acetato de sódio, 2 mL de solução de
1,10-fenantrolina. Transfira para outro balão volumétrico de 50 mL, lavando as paredes
do béquer e complete o volume com água bidestilada e deionizada. Homogeneíze e
deixe em repouso por 10 a 15 minutos, para o completo desenvolvimento da cor. Meça
a absorbância em espectrofotômetro, utilizando comprimento de onda igual a 510 nm.
Construa o gráfico de absorbância em função da concentração da solução-padrão de ferro
(em mg Fe/L).
Procedimento – Agite bem a amostra e transfira 50 mL para um béquer de 250 mL. Adi-
cione 4 mL de HCl 50% (v/v) e 1 mL de solução de cloreto de hidroxilamônio10% (m/v).
Ferva até que o volume se reduza a 15 ou 20 mL. Esfrie à temperatura ambiente. Adicione
5 mL de tampão acetato e 2 mL de solução de fenantrolina. Transfira para um balão volu-
métrico de 50 mL, lavando as paredes do béquer e complete o volume com água destila-
da e deionizada. Homogeneíze e deixe em repouso por 10 a 15 minutos, para o completo
desenvolvimento da cor. Acerte o “zero” do equipamento com a prova em branco. Meça a
absorbância da amostra analisada.
Nota: quando o teor de ferro na amostra for superior a 1 mg/L, dilua, cuidadosamente, uma
alíquota da amostra original até 50 mL e proceda de maneira análoga à descrita no proce-
dimento. Jamais dilua a solução colorida final.
Cálculo
Obtenha a concentração da amostra diretamente da curva-padrão.

Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: American Public Health
Association, 1995. chapter 3, p. 68-70.
IAL - 361

193/IV Determinação de fluoreto pelo método colorimétrico
O íon fluoreto em águas pode ocorrer naturalmente ou proveniente do processo de

fluoretação, o qual consiste na adição controlada de compostos de flúor na água de abasteci-
mento público. Quando presente em concentrações adequadas, o flúor produz efeitos bené-
ficos, promovendo a redução da incidência de cáries dentais, porém pode originar a fluorose
quando em concentrações acima das recomendadas.
Entre os métodos analíticos sugeridos para a determinação do íon fluoreto em
águas, o método potenciométrico com eletrodo íon seletivo é o mais indicado, mas pode-
se também usar o colorimétrico com o reagente de SPADNS. Ambos estão sujeitos a erros
devido à interferência de outros íons presentes. A fim de eliminar estas interferências,
pode ser necessária a destilação prévia da amostra; no caso de águas potáveis, onde a con-
centração destes íons interferentes é pequena, a destilação da amostra, normalmente, não
é necessária.
Tabela 2 – Concentração limite das substâncias que causam interferência na determinação

do íon fluoreto
Substância Método potenciométrico Método colorimétrico

ou parâmetro mg/L tipo de erro mg/L tipo de erro
alcalinidade 7000 + 5000 -
(CaCO3)
alumínio 3 - 0,1* -
cloreto 20000 7000 +
cloro 5000 remoção com arsenito de sódio
cor e turbidez remoção por destilação
ferro 200 - 10 -
hexametafosfato 50000 1,0 +
fosfato 50000 16 +
sulfato 50000 - 200 -
(*) para leitura imediata, a tolerância aumenta com o tempo: após 2 h, 3 mg/L; depois de 4
h, 30 mg/L
O método colorimétrico utilizando como reagente o SPADNS tem uma faixa analítica de
0 a 1,40 mg/L com desenvolvimento de cor virtualmente instantânea. A determinação da
concentração do íon fluoreto é feita por meio da medida de absorbância da amostra. Este
método
.
baseia-se na reação entre o fluoreto e o composto colorido formado entre o zircônio
362 - IAL
e o SPADNS. O fluoreto reage com este composto resultando em um complexo sem cor
(ZrF6-2) e liberando o ligante orgânico. Com o aumento da concentração de fluoreto, ocorre
um decréscimo na intensidade da cor da solução. Algumas interferências podem ser elimina-
das pelo uso de reagentes específicos, como o arsenito de sódio para eliminação de cloro ou o
aumento do tempo de repouso da amostra após a adição do reagente analítico, no caso especí-
fico do alumínio. Para as demais interferências, tais como: hexametafosfato (1 mg/L), fosfato
(16 mg/L) e sulfato (200 mg/L), é necessária a destilação prévia da amostra.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, balões volumétricos de 50, 100, 500 e 1000 mL, bureta de
10 mL, pipetas volumétricas de 5, 10 e 50 mL e proveta de 10 mL.
Reagentes
Fluoreto de sódio anidro

Sal trissódico do ácido 4,5-di-hidróxido-3-(para-sulfo-fenil-azo)- 2,7-naftileno-dissulfônico
– SPADNS
Oxicloreto de zircônio octahidratado
Ácido clorídrico
Arsenito de sódio
Solução-padrão de fluoreto 100 mg/L – Pese 221 mg de fluoreto de sódio anidro, transfira
para um balão volumétrico de 1000 mL e complete com água bidestilada e deionizada. Ar-
mazene esta solução (1 mL = 0,1 mg F-) em frasco plástico (polipropileno). Dilua 100 mL da
solução-estoque de fluoreto a 1000 mL com água destilada e deionizada, (1 mL = 0,01 mg
F-). A partir desta solução, prepare uma série de padrões de fluoreto com concentrações no
intervalo de 0,05 a 1,4 mg F-/L, com volume final de 100 mL.
Solução de SPADNS – Pese 958 mg de SPADNS, transfira para um balão volumétrico de

500 mL e complete com água destilada e deionizada. Esta solução é estável por um ano, se
protegida da luz direta.
Solução de oxicloreto de zircônio – Pese 133 mg de oxicloreto de zircônio, ZrOCl2. 8H2O

e transfira para um balão volumétrico de 500 mL, aproximadamente 25 mL de água bides-
tilada e deionizada e 350 mL de ácido clorídrico. Complete o volume com água destilada e
deionizada.
Solução mistura SPADNS-oxicloreto de zircônio – Misture volumes iguais das soluções de

SPADNS e de oxicloreto de zircônio. Armazene em frasco âmbar, protegido da luz. A solu-
ção é estável por 2 anos.
IAL - 363
Solução de referência – Misture 10 mL da solução de SPADNS e 100 mL de água bidesti-

lada e deionizada. Adicione 10 mL ácido clorídrico diluído (7 mL de ácido clorídrico mais
3 mL de água bidestilada e deionizada). A solução resultante é utilizada para estabelecer o
ponto de referência (zero) de absorbância do instrumento. Esta solução é estável por um ano.
Solução de arsenito de sódio 0,5% (m/v) – Pese 5 g de arsenito de sódio, transfira para um
balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
Procedimento – Ajuste o equipamento para comprimento de onda igual a 570 nm. Deter-
mine o ponto de referência (zero) do espectrofotômetro a partir da solução de referência. Se a
amostra contiver cloro residual, o mesmo deve ser eliminado pela adição de solução de arse-
nito de sódio. Meça 50 mL da amostra de água a ser analisada. Adicione 1 mL de arsenito de
sódio a 0,5% (se a amostra contiver cloro residual), agite e espere 1 minuto. Adicione 5 mL
da solução SPADNS e 5 mL da solução de oxicloreto de zircônio, ou 10 mL do reagente
SPADNS-oxicloreto de zircônio, e misture bem. Leia as absorbâncias das amostras a 570 nm.
Se o valor de absorbância da amostra não estiver dentro do intervalo da curva-padrão, repita
o procedimento usando uma amostra diluída.
Curva-padrão – Meça porções de 50 mL de soluções-padrão de concentrações no intervalo

de 0,05 a 1,4 mg F-/L. Adicione a cada uma, 5 mL de solução SPADNS e 5 mL de oxicloreto
de zircônio, ou 10 mL do reagente SPADNS-oxicloreto de zircônio e misture. Faça as leitu-
ras de absorbância de cada uma das soluções-padrão na mesma temperatura em que serão
lidas as amostras. Construa o gráfico de absorbância em função da concentração de fluoreto.
Deve-se obter uma reta com coeficiente angular negativo.
Nota: prepare uma nova curva-padrão sempre que alguma das soluções reagentes seja
refeita.
Cálculo
Determine a concentração de fluoreto diretamente da curva-padrão.

Métodos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 325-
326.
364 - IAL
194/IV Determinação de fluoreto pelo método potenciométrico
O método potenciométrico com eletrodo de íon seletivo de fluoreto é adequado

para concentrações de íon fluoreto acima de 0,2 mg/L. A adição de solução-tampão
elimina algumas interferências e, nestes casos, evita-se a destilação prévia. As vantagens
deste método são: alta seletividade, simplicidade e rapidez. O eletrodo de fluoreto é um
sensor íon-seletivo. O elemento principal do eletrodo de fluoreto, basicamente, é um
monocristal de fluoreto de lantânio, através do qual se estabelece um potencial entre a
solução de fluoreto interna do eletrodo e a solução cuja concentração do referido íon
pretende-se determinar. O cristal entra em contato com a amostra em uma face e uma
solução interna de referência com a outra face. A cela eletrolítica pode ser representada
por:
Ag/AgCl, Cl- (0,3M), F- (0,001M)/LaF3 / amostra/ eletrodo de referência
O eletrodo de íon fluoreto pode ser usado com um eletrodo de referência de calome-
lano em qualquer pHmetro com precisão de 0,1 mV (milivolt). A atividade do íon depende
da força iônica total, do pH e das espécies complexantes de íon fluoreto na solução. A adição
de um tampão adequado permite manter a força iônica uniforme e constante, ajustar o pH
e liberar o íon fluoreto dos complexos existentes.
Material
Potenciômetro com eletrodos de referência e de íon seletivo de fluoreto, agitador magnético

com barras magnéticas revestidas com teflon, balões volumétricos de 50, 100 e 1000 mL,
béquer de plástico de 100 mL e pipetas volumétricas de 5, 10 e 50 mL.
Reagentes
Fluoreto de sódio anidro

Ácido 1,2-ciclohexilenodinitrilotetracético (CDTA)
Solução-padrão de fluoreto 1000 mg/L – Pese 2,21 g de fluoreto de sódio anidro, transfira
para um balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deio-
nizada. Armazene a solução em frasco plástico. A partir de diluições adequadas da solução-
estoque, prepare soluções-padrão de trabalho.
Tampão TISSAB (T3) – Num béquer de 2000 mL, coloque, sob agitação, 500 mL de água
deionizada e 18 g de CDTA . Adicione, gota a gota, uma solução de NaOH a 40% até dis-
solução do sal e, em seguida, 300 g de citrato de sódio dihidratado e 58 g de NaCl . Após a
IAL - 365
dissolução dos sais, transfira para um balão volumétrico de 1000 mL, acerte o pH em torno
de 6,0 (± 0,2) e complete o volume com água destilada e deionizada. Confirme, novamente,
o pH. Armazene em frasco plástico, sob refrigeração.
Procedimento – Meça 50 mL da amostra e transfira para um béquer de plástico de 100 mL.

Adicione, com pipeta volumétrica, 5 mL da solução-tampão T3. Coloque uma barra magné-
tica no béquer e homogeneíze sob agitação magnética. Com o potenciômetro e os eletrodos
calibrados, proceda à leitura das amostras. Faça as leituras das amostras utilizando agitação
magnética constante e velocidade similar à que foi utilizada para a leitura dos padrões.
Curva-padrão – Nos casos em que o equipamento permite a calibração em leituras auto-

máticas em concentração direta, construa a curva interna de calibração, seguindo as instru-
ções expressas no manual do aparelho. Quando o equipamento não permite a calibração em
leituras automáticas em concentração, proceda às leituras em milivolts, utilizando soluções
padrão de 0,2 a 2 mg/L de fluoreto. Construa uma curva milivolts x [F-] em papel monolog.
O coeficiente angular da reta (slope), deve estar entre -54 a -60 mV/[F-].
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKS

ASSOCIATION WATER, ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Meth-
ods fort he
Examination of Water and Wastewater, 19th Ed. Washington, DC: American Public
Health Association,1995. chapter 4, p. 61-62.
195/IV Determinação de nitrato pelo método espectrofotométrico na região do ultra-

violeta
O íon nitrato geralmente ocorre em pequenas quantidades nas águas superficiais, mas
atinge elevadas concentrações em algumas águas subterrâneas. Este método baseia-se na lei-
tura direta da absorbância da amostra de água, com adição de ácido clorídrico 1,0 M, para
águas de abastecimento e mineral.
A região do espectro eletrônico em que são feitas as medidas de absorbância é muito
sujeita a interferências espectrais. Assim, este ensaio somente é aplicável em águas com baixo
conteúdo em matéria orgânica (águas naturais não contaminadas e águas de abastecimento
público). O uso do ácido clorídrico é para previnir a interferência de concentrações de hidró-
xido ou carbonato acima de 1000 mg CaCO3/L. Interferentes: máteria orgânica dissolvida,
surfactantes, NO-2 e Cr 6+ , íons inorgânicos não encontrados em águas naturais, tais como
cloreto e clorato.
366 - IAL
Método I - Determinação de nitrato na região do ultravioleta a 205 nm
O método baseia-se na leitura direta da absorbância da amostra de água, com adição

de ácido clorídrico 1,0 M, em espectrofotômetro a 205 nm, para águas de abastecimento e
mineral.
Material
Estufa, espectrofotômetro UV/VIS, balões volumétricos de 100 e 1000 mL e pipetas volu-

métricas de 1, 2, 4, 5 e 7 mL.
Reagentes
Nitrato de potássio
Nitrato de sódio
Ácido clorídrico
Solução ácido clorídrico 1 M – Meça, em proveta de 100 mL, 85 mL de ácido clorídrico e

transfira para um balão volumétrico de 1000 mL , completando o volume com água desti-
lada e deionizada.
Solução-estoque de nitrato a 100 mg/L – Pese 0,1631 g de nitrato de potássio, seco a

105°C ou 0,1371 g de nitrato de sódio, seco a 105°C, transfira para um balão volumétri-
co de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
Procedimento – Transfira quantitativamente a amostra de água para um balão volumétrico

seco de 100 mL. Adicione 1 mL de ácido clorídrico 1,0 M e homogeneíze. Leia a absor-
bância a 205 nm. Determine a quantidade de nitrogênio nítrico correspondente, usando a
curva-padrão previamente estabelecida.
Curva-padrão – A partir da solução-padrão estoque, prepare a curva-padrão transferindo

alíquotas de 1, 2, 3, 4, 5, e 7 mL da solução para balão volumétrico de 100 mL, completando
o volume com água destilada e deionizada. Adicione em cada balão volumétrico 1 mL de
HCl 1,0 M e homogeneíze. Proceda à leitura a 205 nm, obtendo-se soluções de 1, 2, 3, 4, 5
e 7 mg/L de nitrato.
Nota: obtendo-se leitura de absorbância acima de 1, dilua a amostra original como descrito
acima e faça uma nova leitura.
IAL - 367

Método II - Determinação de nitrato na região do ultravioleta a 220 nm e 275 nm
Este método baseia-se na leitura direta da absorbância da amostra de água, com

adição de ácido clorídrico 1 M, em espectrofotômetro a 220 e 275 nm
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, balões volumétricos de 50 e 1000 mL, pipetas volumétricas de

5,10,15,20 e 25 mL
Reagentes
Nitrato de potássio ou nitrato de sódio, com pureza mínima de 99%
Solução de ácido clorídrico 1 M - veja método I
Solução-estoque de nitrato 100 mg/L - veja método I
Solução-padrão intermediária de nitrato 10 mg/L
Procedimento - Transfira, quantativamente, a amostra de água para um balão volumétrico de

50 mL. Adicione 1 mL de ácido clorídrico 1 M e homogeneíze. Leia a absorbância a 220 nm
e 275 nm. Determine a quantidade de nitrogênio nítrico correspondente, usando a curva-
padrão previamente estabelecida.
Curva-padrão - A partir da solução-padrão intermediária, prepare a curva-padrão transferin-

do alíquotas de 5, 10, 15, 20 e 25 mL da solução-padrão de nitrato 10 mg/L para balões
volumétricos de 50 mL, completando o volume com água destilada e deionizada. Adicione
a cada balão volumétrico 1 mL de HCl 1 M e homogeneíze. As soluções preparadas apre-
sentarão concentrações de 1, 2, 3, 4 e 5 mg NO-3 /L, respectivamente,
Medidas espectrofotométricas - Leia a absorbância no comprimento de onda 220 nm para

relacionar com a concentração de nitrato e a 275 nm para determinar a interferência devida
à matéria orgânica dissolvida.
368 - IAL
Cálculo
Para amostras e padrões, multiplique por 2 a leitura de absorbância em 275 nm e subtraia

pela absorbância obtida em 220 nm. Usando também as absorbâncias corrigidas (Acorrigida
= A220 - 2xA275), obtenha as concentrações das amostras diretamente a partir da curva-padrão
(A x concentração). Se a concentração de nitrato da amostra for maior que 5 mg/L, proceda
a diluição da amostra original com água destilada e deionizada, adicione 1 mL de HCl a 50
mL da amostra diluída e repita a leitura. Neste caso, o resultado deverá ser multiplicado pelo
fator da diluição.
Nota: se o valor da correção ( 2xA275) for maior que 10% do valor da leitura da absorbância
em 220 nm, este método não poderá ser utilizado.

196/IV Determinação de nitrato pelo método espectrofotométrico com desenvolvi-

mento de cor
O método baseia-se na reação de íons nitrato com ácido fenol dissulfônico e posterior
alcalinização com hidróxido de sódio, obtendo-se um composto amarelo. Este composto é
o sal sódico do ácido pícrico formado pela nitração do fenol, cuja coloração é medida em
espectrofotômetro.
C6 H3 (OH)(SO3 H)2 + 3 HNO3 ↔ C6H2 (OH)(NO2 )3 + 2 H2 SO4 + H2O
C6H2 (OH)(NO2 )3 + NaOH ↔ C6H2(NO2 )3ONa + H2O
Os íons cloreto interferem no processo porque formam HCl com o excesso de H2SO4 con-
tido na mistura ácido fenol dissulfônico/ácido sulfúrico e o HCl reage com o HNO3 forma-
do:
6 HCl + 2HNO3 ↔ 2 NO + 4 H2O + 3 Cl2
IAL - 369
Acima da concentração de 5x10-4 M, os íons cloreto podem ser precipitados com Ag2
SO4 e separados previamente. Abaixo dessa concentração a interferência permanece, com
diminuição da concentração de nitrato medida, mas com efeito significativo baixo, pois a
tolerância legal de nitrato em águas é da ordem de 10 mg/L.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, banho-maria, balança analítica, placa aquecedora, béquer de

100 mL, balões volumétricos de 50, 100, 500 e 1000 mL, pipeta graduada de 10 mL, pipe-
tas volumétricas de 10 e 50 mL, bureta de 25 mL, cápsula de porcelana de 150 mL e bastão
de vidro.
Reagentes
Nitrato de potássio
Nitrato de sódio
Ácido sulfúrico
Fenol
Sulfato de prata
Sulfato de alumínio e potássio
Hidróxido de amônio
Solução-padrão estoque de nitrato a 100 mg/L – Pese 0,1631 g de nitrato de potássio, seco
a 105°C ou 0,1371 g de nitrato de sódio, seco a 105°C. Transfira para um balão volumétrico
de 1000 mL, dissolva e complete o volume com água destilada e deionizada.
Nota: 1 mL desta solução corresponde a 0,1 mg de nitrato.
Solução de ácido fenoldissulfônico – Pese 25 g de fenol e transfira para um béquer com

225 mL de ácido sulfúrico. Aqueça em placa aquecedora a 100°C por duas horas, em cape-
la. Resfrie, transfira para um balão volumétrico de 250 mL e complete o volume com ácido
sulfúrico.
Solução hidróxido de sódio a 50% m/v – Pese 50 g de hidróxido de sódio, transfira para um
balão de 100 mL, dissolva e complete o volume com água destilada e deionizada. Transfira a
solução para um frasco limpo de plástico.
Solução de sulfato de prata (para amostras com cloretos) – Pese 0,4397 g de sulfato de prata,
transfira para um balão volumétrico de 100 mL e complete o volume com água destilada e
deionizada.
370 - IAL
Nota: 1 mL desta solução reage com 1 mg de íons cloreto.
Creme de alumina (para amostras turvas) – Prepare uma solução saturada de sulfato duplo
de alumínio e potássio. Alcalinize com hidróxido de amônio até pH 10. Agite e deixe o pre-
cipitado sedimentar. Lave com água por decantação até que a água de lavagem não dê reação
para sulfatos. Decante o líquido sobrenadante.
Procedimento – Transfira 50 mL da amostra para uma cápsula de porcelana de 150 mL.

Evapore até a secura, em banho-maria. Adicione 1 mL da solução de ácido fenoldissulfônico.
Misture, com um bastão de vidro, o ácido e o resíduo eventualmente presente nas paredes
da cápsula. Lave com pequena porção (10 mL) de água destilada e deionizada e adicione 3 a
5 mL de solução de hidróxido de sódio a 50% sob agitação, até obter uma cor amarela está-
vel. Transfira para um balão volumétrico de 50 mL, lavando a cápsula (quando a tonalidade
amarela for muito intensa, faça diluições maiores, a partir da amostra original). Complete o
volume com água bidestilada e deionizada, filtre se necessário, homogeneíze, aguarde 15 mi-
nutos e meça a absorbância em espectrofotômetro, a 410 nm, utilizando como branco água
destilada e deionizada, preparado nas mesmas condições da amostra. Determine a quantida-
de de nitrato correspondente, usando a curva-padrão previamente estabelecida.
notas
Se a amostra contiver cloretos acima de 30 mg/L, precipite-os em pH 1 (acidule com ácido

sulfúrico), usando uma alíquota conveniente de solução de sulfato de prata.
Quando a amostra se apresentar excessivamente turva, clarifique-a com uma ponta de espá-
tula de solução de creme de alumina.
Curva-padrão – A partir da solução-estoque, prepare soluções-padrão de nitrato no intervalo

de 0 a 7 mg NO3-/L. Com bureta de 25 mL, adicione quantidades de 0 (branco), 1, 2, 3, 4,
5, e 7 mL, respectivamente, em cápsulas de 150 mL. Evapore até a secura em banho-maria.
Adicione em cada uma das cápsulas, 1 mL da solução de ácido fenoldissulfônico, misture
bem com bastão de vidro a mistura e o eventual resíduo nas paredes das cápsulas. Lave com
pequena porção (cerca de 10 mL) de água destilada e deionizada e adicione 5 mL de solução
de hidróxido de sódio a 50%. Misture bem com bastão de vidro até obter cor amarela estável.
Transfira para um balão volumétrico de 100 mL, lavando as cápsulas e os bastões com água des-
tilada e deionizada. Complete o volume, agite bem, aguarde 15 minutos e meça a absorbância
em espectrofotômetro, utilizando comprimento de onda de 410 nm. Construa o gráfico de
absorbância em função da concentração da solução-padrão de nitrato (em mg NO3-/L).
IAL - 371
Cálculo
Determine a quantidade de nitrogênio nítrico (NO3-) correspondente, usando a curva-pa-

drão pré-estabelecida.
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORKS,

ASSOCIATION WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for
the Examination of Water and Wastewater, 11th ed. Washington, DC: American Public
Health Association,1960, p. 175.

Health Association,1995. chapter 4, p. 85-86.

197/IV Determinação de nitrito pelo método espectrofotométrico com desenvolvi-
mento de cor
O íon nitrito corresponde a um estágio intermediário de oxidação do nitrogênio.

Forma-se tanto pela oxidação da amônia como pela redução do nitrato. Tais oxidações
e reduções podem ocorrer em estações de tratamento de esgotos, em sistemas de distri-
buição de água e em águas naturais. O nitrito pode ainda ser proveniente de aditivos
inibidores da corrosão em instalações industriais. O íon nitrito (NO2-) é determinado
por meio da formação de uma cor vermelho-púrpura produzida em pH (2,0 - 2,5) pela
reação de diazotação da sulfanilamida com dihidrocloreto de N-(1-naftil)etilenodiamina.
Na estocagem da amostra de água para a determinação de íons nitrito, nunca use ácido
para a sua preservação. A determinação deve ser efetuada na amostra recém-coletada, de
modo a prevenir a conversão bacteriana de NO2- para NO3- ou NH3. Para tempos de
espera de 1 a 2 dias, conserve a 4°C.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, balança analítica, estufa, pesa-filtro, balões volumétricos de 50,

250 e 1000 mL, bureta de 10 mL, bastões de vidro, béquer de 100 mL, dessecador, pipetas
volumétricas de 2 e 50 mL e pipetas graduadas de 10 mL.
372 - IAL
Reagentes
Nitrito de sódio com pureza mínima de 99%, armazenado em dessecador

Nitrito de potássio com pureza mínima de 99%, armazenado em dessecador
Ácido fosfórico
Sulfanilamida
Dihidrocloreto de N-(1-naftil)etilenodiamina
Oxalato de sódio anidro, grau padrão primário
Ácido sulfúrico
Solução-padrão de íons nitrito (100 mg/L) – Em um béquer de 100 mL, pese exatamente
0,15 g de nitrito de sódio ou 0,1848 g de nitrito de potássio puros, previamente secos por 2
horas em estufa a 105°C e resfriados em dessecador por uma hora. Transfira, cuidadosamen-
te, para um balão volumétrico de 1000 mL com água bidestilada e deionizada e complete o
volume. Homogeneíze.
Nota: utilize sempre solução recém-preparada. Esta solução tem validade de 30 dias, desde
que mantida sob refrigeração.
Solução de oxalato de sódio 0,025 M – Dissolva 3,350 g de oxalato de sódio em água des-
tilada e deonizada, transfira para balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume.
Solução de permanganato de potássio 0,01 M – Dissolva 1,6 g de permanganato de potássio

em 1 litro de água destilada e deionizada. Armazene a solução em um frasco âmbar (rolha
de vidro), por uma semana. Cuidadosamente, de modo a não ressuspender o sedimento,
decante ou pipete o sobrenadante para outro frasco âmbar (rolha de vidro). Padronize esta
solução, freqüentemente, pelo seguinte procedimento (em triplicata): em Erlenmeyer de 250
mL, pese 0,200 g de oxalato de sódio anidro, adicione 100 mL de água destilada e deionizada
e agite até dissolver o sal. Adicione 10 mL de solução aquosa de ácido sulfúrico 1:1 e aqueça
a 90-95º C. Titule, sob agitação e rapidamente, com a solução de permanganto de potássio
preparada até que uma leve colaração rósea persista por, no mínimo, 1 minuto. Durante a
titulação, não permita que a temperatura fique abaixo de 85º C (se necessário, aqueça o Er-
lenmeyer durante a titulaçao). Faça um branco com água destilada e ácido sulfúrico (1:1). A
molaridade da solução de KMnO4 é calculada por meio da média de três titulações a partir
da seguinte equação:
IAL - 373
M= Molaridade da solução de KMnO4

m= Massa de Na2C2O4
Va= volume da solução de KMnO4 gasto na titulação do oxalato de sódio, em mL
vb= volume da solução de KMnO4 gasto na titulação do branco, em mL
Padronização da solução de nitrito – Pipe, na ordem, em um Erlenmeyer de boca esmerilha-

da com tampa: 50 mL de solução de KMnO4 0,01 M, 5 mL de H2SO4 concentrado e 50
mL da solução de nitrito a ser padronizada (quando da adição da solução de nitrito, submerja
a ponta da pipeta dentro da solução acidulada de KMnO4). Com o frasco tampado, agite
suavemente e aqueça a (70-80)º C em placa aquecedora. Faça a descoloração da solução pela
adição de porções de 10 mL de solução-padrão de 0,025 M de Na2C2O4. Titule o excesso de
Na2C2O4 adicionado com solução 0,01 M de KMnO4 até o surgimento de coloração rósea
fraca e persistente. Conduza uma titulação do branco (50 mL de água destilada e deioniza-
da). Calcule a concentração da solução de nitrito por meio da seguinte equação:
A= mg NO2- – N/mL na solução estoque de NaNO2 ou KNO2

B= molaridade da solução de KMnO4
C= volume total, em mL, da solução de KMnO4
D= molaridade da solução de Na2C2O4
E= volume total, em mL, da solução de Na2C2O4
F= volume, em mL, da solução de NaNO2 ou KNO2
Reagente de N-(1-naftil)etilenodiamina – Em balão volumétrico de 250 mL, adicione um

pouco de água destilada e deionizada, 25 mL de ácido fosfórico a 85%, 2,5 g de sulfanilami-
da e dissolva completamente. Adicione 0,25g de N-(1-naftil)etilenodiamina, e homogeneíze
para dissolver completamente. Complete o volume com água destilada e deionizada. Homo-
geneíze novamente.
Nota: guarde a solução em frasco escuro, sob refrigeração. A solução tem validade de 1 mês.
Procedimento – Transfira 50 mL da amostra para um balão volumétrico, adicione 2 mL do

reagente de cor e faça um branco nas mesmas condições da amostra, utilizando água desti-
lada e deionizada. Aguarde de 30 a 45 minutos. Meça a absorbância da coloração vermelha
desenvolvida a 543 nm, em espectrofotômetro.
Curva-padrão – Pipete 10 mL da solução-estoque num balão volumétrico de 100 mL, e

complete o volume com água destilada e deionizada (1 mL desta solução de NaNO2 contém
0,1 mg de NO2-). A partir desta solução de uso, prepare uma série de soluções de concentra-
ções no intervalo de 0,0 a 0,5 mg/L em nitrito. Com bureta de 10 mL, adicione quantidades
374 - IAL
de 0,0, 1, 2, 3, 4 e 5 mL em balão volumétrico de 100 mL, complete o volume com água

destilada e deionizada e adicione 4 mL do reagente de cor. Aguarde de 30 a 45 minutos.
Meça a absorbância em espectrofotômetro, utilizando comprimento de onda igual a 543
nm. Construa o gráfico de absorbância em função da concentração da solução-padrão de
nitrito (em mg NO2-/L).
Nota: prepare a curva-padrão a cada troca da solução reagente de cor.
Cálculo
Determine a quantidade de íons nitrito correspondente, usando a curva-padrão, previamen-

te estabelecida.
Nota: caso a cor apresente intensidade acima daquela de concentrações usadas para a curva-
padrão, repita o procedimento, diluindo a amostra, ou utilize balões volumétricos de maior
volume para a leitura final, e considere as diluições no cálculo final. Deverá ser respeitada a
faixa de aplicabilidade do método.

ASSOCIATION WATER, ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for
Health Association, 1995. chapter 4, p.83-84.

198/IV Determinação de nitrogênio albuminóide
O nitrogênio albuminóide origina-se de grupos amino de proteínas, polipeptídios ou

aminoácidos. Estes materiais são constituintes importantes da poluição orgânica na fonte.
Após a destilação do nitrogênio amoniacal, a adição de uma solução alcalina de permangana-
to de potássio produz desprendimento de amônia adicional, que corresponde ao nitrogênio
albuminóide.
Material
Espectrofotômetro UV/VIS, balança analítica, estufa, sistema de destilação, proveta de

50 mL balões volumétricos de 50 e 100 mL e pipeta de 1 mL.
IAL - 375
Reagentes
Solução-padrão estoque de cloreto de amônio – Pese, com precisão, 3,141 g de cloreto de

amônio, previamente seco a 105°C. Transfira para um balão volumétrico de 1000 mL e
complete o volume com água bidestilada e deionizada. Cada mL desta solução contém
1 mg de NH3.
Soluções-padrão de cloreto de amônio – Prepare, a partir de diluições de uma solução-

estoque de cloreto de amônio com água, uma série de soluções de concentrações 0,5; 1,0; 1,5
e 2,0 mg/L de NH3.
Solução alcalina de permanganato de potássio – Pese 16 g de permanganato de potássio,

transfira para um béquer de 3000 mL, acrescente 1200 mL de água bidestilada e deio-
nizada (fervida por 10 minutos). Adicione 800 mL de solução de NaOH a 36%, clarifica-
da por decantação. Adicione água destilada e deionizada até completar 2500 mL. Aqueça
até reduzir o volume a 2000 mL. Guarde a solução em frasco plástico rígido e ao abrigo
da luz. Determine, numa prova em branco, o nitrogênio amoniacal correspondente a
50 mL da solução e use este resultado para as correções nas determinações.
Reagente de Nessler: Solução A – Pese 100 g de iodeto de mercúrio II, 70 g de iodeto de

potássio, transfira para um balão volumétrico de 200 mL e complete o volume com água
destilada e deionizada. Solução B – Pese 160 g de hidróxido de sódio, transfira para um ba-
lão volumétrico de 500 mL e complete o volume com água destilada e deionizada. Resfrie
à temperatura ambiente. Adicione vagarosamente e sob agitação, a solução A à solução B e
dilua para 1000 mL com água destilada e deionizada. Manuseie a solução na penumbra e
armazene em frasco plástico rígido ao abrigo da luz.
Procedimento – Ao resíduo da destilação resultante da determinação de amônia (ou ni-

trogênio amoniacal) conforme método 189/IV, adicione 50 mL da solução alcalina de per-
manganato de potássio. Adapte novamente o balão ao sistema refrigerante e destile. Receba
100 mL do destilado em um balão volumétrico. Transfira 50 mL para um balão volumétrico,
adicione 1 mL do reagente de Nessler, homogeneíze, meça a coloração amarela desenvolvida,
segundo procedimento descrito em 189/IV e determine a quantidade correspondente de
nitrogênio albuminóide.
Cálculo
Determine a concentração de nitrogênio albuminóide utilizando a curva-padrão pré-esta-
376 - IAL
belecida com soluções-padrão de cloreto de amônio. Multiplique o resultado pelo fator 0,2,
correspondente à alíquota de 50 mL tomada de um balão volumétrico de 100 mL contendo
o destilado de 500 mL da amostra.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1: Mé-
199/IV Determinação do oxigênio consumido em meio ácido
A determinação de oxigênio consumido indica a quantidade de substâncias oxidáveis

presentes na água. No método analítico proposto, a amostra é oxidada com íons perman-
ganato em meio ácido. Após a adição de excesso de íons oxalato, titula-se novamente com
solução de permanganato.
Material
Banho-maria, balança analítica, pipeta volumétrica de 100 mL, frasco Erlenmeyer

de 300 mL, pipeta volumétrica de 5 mL, buretas de 10 e 25 mL, balão volumétrico de
1000 mL e béquer de 200 mL.
Reagentes
Ácido sulfúrico
Oxalato de sódio
Solução de permanganato de potássio a 0,0025 M – Pese 4 g de permanganato de potássio

e dilua com aproximadamente 1100 mL de água destilada e deionizada. Aqueça a solução
até reduzir o volume a aproximadamente 1000 mL. Esfrie à temperatura ambiente. Filtre,
a vácuo, em placa de porcelana porosa, previamente purificada com ácido sulfúrico e exaus-
tivamente lavada com água destilada e deionizada. Recolha o filtrado em balão volumétrico
de 1000 mL, complete cuidadosamente o volume com água destilada e deionizada. Deixe a
solução em repouso por uma semana, em frasco âmbar e dilua 100 mL desta solução com
água destilada e deionizada, completando o volume até 1000 mL em balão volumétrico.
Padronização – Pese quantitativamente massas de oxalato de sódio, em torno de 0,01 g, secas

em estufa a 100°C por duas horas. Transfira para um frasco Erlenmeyer de 250 mL. Adi-
cione 200 mL de água destilada e deionizada e 5 mL de ácido sulfúrico a 25% v/v. Leve ao
banho-maria e aqueça entre (60–70)°C. Titule com a solução de permanganato de potássio
IAL - 377
até a primeira coloração rósea.

Nota: nas primeiras gotas há uma viragem aparente; retorne então ao banho-maria até a des-
coloração completa e prossiga normalmente a titulação. Faça ao menos duas provas e calcule
a molaridade média.
Cálculo
2 MnO4- + 16 H+ + 5 C2O4-- ↔ 2 Mn++ + 10 CO2 + 8 H2O
m = massa de oxalato de sódio empregada, em gramas

v = volume da solução de KMnO4 gasto na titulação, em L
Solução aquosa de ácido sulfúrico 25% v/v – Dilua 25 mL de ácido sulfúrico concentrado
em água destilada e deionizada, lentamente, deixando esfriar e completando o volume até
100 mL.
Solução de oxalato de sódio 0,00625 M – Pese 8,375 g de oxalato de sódio, transfira para
um balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
Transfira 100 mL desta solução para balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume
com a mesma água.
cione 5 mL de ácido sulfúrico a 25% v/v. Adicione, com uma bureta, 5 mL de permangana-
to de potássio 0,0025 M. Aqueça em banho-maria por 30 minutos. Havendo descoloração
da solução, adicione mais 10 mL da solução de permanganato. Caso descore novamente,
repita o teste com a amostra diluída a 100 mL. Adicione, com uma bureta, uma quantidade
de oxalato de sódio 0,00625 M exatamente igual a do total da solução de permanganato de
potássio empregada. Leve ao banho-maria até descorar. Titule com solução de permanganato
de potássio até coloração rósea.
Cálculo
O oxigênio consumido pela amostra (em mg/L) corresponde exatamente ao no de mL de

permanganato de potássio 0,0025 M gasto na titulação da amostra.

378 - IAL
the Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: American Public
Health Association, 1995. chapter 4, p.100 -101.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1: Méto-
dos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 311-313.
200/IV Determinação de sódio e potássio
Os íons de sódio estão presentes nas águas naturais, em concentrações que podem
variar de menos de 1 mg/L a mais de 500 mg/L. Os íons de potássio também podem ocorrer
naturalmente nas águas, sendo que sua concentração raramente excede 20 mg/L.
Quantidades traços de íons sódio e potássio podem ser determinadas por fotometria
de emissão de chama sendo que o sódio emite luz no comprimento de onda de 589 nm e o
potássio no comprimento de onda de 766,5 nm. A amostra é aspirada e dispersa numa cha-
ma de gás na forma de spray e a excitação é conduzida sob condições controladas e reprodutí-
veis. A linha espectral de interesse é isolada com o uso de filtros ou sistema óptico adequado.
A intensidade da luz a 589 nm e a 766,5 nm é proporcional à concentração de íons sódio ou
de potássio na amostra.
Material
Fotômetro de chama com filtros para sódio e potássio ou sistema óptico equivalente, bomba
de vácuo, dessecador, estufa, balança analítica, balões volumétricos de 100 e 1000 mL, bé-
quer de 50 mL e pipeta volumétrica de 10 mL.
Reagentes
Solução-padrão estoque de íons sódio – Pese 2,5421 g de cloreto de sódio, seco em estufa
a 200°C por 3 horas e resfriado à temperatura ambiente, em dessecador. Transfira para um
balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
Nota: 1 mL desta solução corresponde a 1 mg de íons sódio.
Solução-padrão estoque de íons potássio – Pese 1,9067 g de cloreto de potássio, seco em

estufa a 200°C por 3 horas e resfriado à temperatura ambiente, em dessecador, transfira para
um balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
IAL - 379
Nota: 1mL desta solução corresponde a 1 mg de íons potássio.
Soluções-padrão de íons sódio/potássio – A partir da solução-padrão estoque, prepare uma

solução de concentração intermediária, diluindo 10 mL para um volume final de 100 mL
com água destilada e deionizada. Use volumes adequados desta solução de concentração in-
termediária para preparar soluções-padrão na faixa de 0,1 a 10 mg de sódio/L ou de 0,1 a 10
mg de íons potássio/L, utilizando sempre água bidestilada e deionizada.
Nota: 1 mL corresponde a 0,1 mg de íons Na ou de K.
Procedimento – Ajuste o comprimento de onda para 589 nm para íons sódio ou a 766,5
nm para íons potássio ou coloque os filtros adequados para a determinação de sódio e po-
tássio (ou siga as instruções do fabricante para o ajuste do aparelho). Zere a escala de medida
com água destilada e deionizada. Agite bem a amostra e transfira cerca de 40 mL para um bé-
quer seco e limpo. Com o fotômetro já calibrado e zerado, faça a leitura das amostras. Sempre
cheque o zero da escala do aparelho com água bidestilada e deionizada, entre as medidas.
Curva-padrão – Confirme o zero da escala do aparelho com água destilada e deionizada.

Faça a leitura das soluções-padrão, iniciando com a solução mais diluída. Após a leitura de
cada amostra, cheque o zero da escala do aparelho com água destilada e deionizada. Repita a
operação de leitura com os padrões de calibração, o número de vezes necessário para garantir
que o valor médio obtido para a solução-padrão seja confiável e reprodutível. Construa o
gráfico de intensidade de emissão em função da concentração de íons sódio (mg Na/L) ou
de íons potássio (mg K/L).
Cálculo
A partir da curva-padrão e dos resultados obtidos para cada amostra, determine o valor da
concentração de íons sódio (mg Na/L) ou de íons potássio (mg K/L) nas amostras analisa-
das.

th Association, 1995. chapter 3, p.83, 96-98.
201/IV Determinação do pH
A uma dada temperatura, a acidez ou a alcalinidade de uma solução é indicada pelo

valor do pH ou pela atividade do íon hidrogênio. O pH é definido como o co-logarítmo
380 - IAL
da atividade do íon hidrogênio (- log aH+); para soluções diluídas, a atividade do íon H+ é
praticamente igual à concentração molar e expressa a acidez do meio. O valor do pH para
água pura, a 25°C, é igual a 7. Como resultado da presença de ácidos ou bases e também da
hidrólise de sais dissolvidos, o valor do pH pode apresentar valores abaixo de 7 (meio ácido)
ou acima de 7 (meio básico). Para efeitos práticos em análises de água, basta determinar o pH
até segunda casa decimal.
A medida do pH baseia-se na determinação da atividade dos íons hidrogênio por

meio da medida potenciométrica usando um eletrodo de vidro e um de referência ou um
eletrodo de vidro combinado. A força eletromotriz medida com o sistema do eletrodo de vi-
dro combinado varia linearmente com o pH. O instrumento de medida de pH é, incluindo
o eletrodo combinado, calibrado com soluções-tampão de pH conhecido.
Material
pHmetro com compensador de temperatura, eletrodo de vidro combinado, agitador mag-

nético com barra magnética, béqueres de 50 e 150 mL, balão volumétrico de 500 mL, cáp-
sula de porcelana e dessecador com agente dessecante.
Reagentes
Solução-tampão – Podem ser adquiridas, no comércio, soluções-tampão certificadas.

Em geral são fornecidas em três valores de pH: 4, 7 e 10 (ou próximo destes). Essas
soluções também podem ser preparadas no laboratório. A calibração do aparelho com
o uso de eletrodo de vidro combinado deve ser efetuada como indicado no manual do
aparelho.
Solução-tampão de biftalato pH 4 (25°C) – Pese 5,06 g de biftalato ácido de potássio, pre-

viamente seco a 110°C por 2 horas. Dissolva em água destilada e deionizada, transfira para
um balão volumétrico de 500 mL e complete o volume.
Solução-tampão de fosfato pH 6,86 (25°C) – Seque, separadamente, cerca de 2,5 g de fos-

fato diácido de potássio e de fosfato ácido dissódico por duas horas a (110–130)°C e deixe
esfriar em dessecador. Pese 1,694 g de fosfato diácido de potássio e 1,767 g de fosfato ácido
dissódico e dissolva em água destilada e deionizada. Transfira para um balão volumétrico de
500 mL e complete o volume com água destilada e deionizada.
Solução-tampão de borato pH 9,18 (25°C) – Pese 1,9 g de borato de sódio decahidratado;

dissolva em água destilada e deionizada. Transfira para um balão volumétrico de 500 mL
com água destilada e deionizada.
IAL - 381
Nota: as soluções-tampão acima mencionadas devem ser mantidas em geladeira a cerca

de 4°C, a fim de se evitar contaminação por fungos. Pelo menos uma hora antes do uso
das mesmas, retire dos frascos de solução-estoque cerca de 20-30 mL que são transferi-
dos a béqueres de 50 mL limpos e secos, de diâmetro suficiente para mergulhar o ele-
trodo de vidro combinado em seu interior. Lave o béquer com alguns mL do tampão,
preencha com a solução, feche imediatamente e deixe sobre a bancada por uma hora
pelo menos, para que a temperatura da solução atinja a temperatura ambiente. Após o
uso no ensaio, descarte a solução.
Procedimento – Lave o eletrodo de vidro com água destilada e deionizada. Seque

delicadamente com papel absorvente fino. Coloque o eletrodo na solução-tampão de
fosfato preparada (béquer de 50 mL) com agitação suave e constante. Leia a tempe-
ratura da solução e verifique o valor do pH do tampão para esta temperatura (tabela
3). Retire o eletrodo da solução e lave com água destilada e deionizada. Verifique a
linearidade do eletrodo com o segundo tampão. Para efeito de ajuste de aparelhagem,
escolha o tampão de biftalato se as amostras apresentarem pH < 7 ou o tampão de bo-
rato se apresentarem pH > 7. Proceda de maneira semelhante ao descrito para tampão
de fosfato. As amostras não requerem nenhuma preparação especial. Transfira cerca de
50 mL de amostra para um béquer de 100 mL. Lave o eletrodo e o compensador de
temperatura com água bidestilada e deionizada, seque suavemente e coloque-os dentro
do béquer com a amostra com agitação laminar. Espere a leitura ficar constante e anote
o valor de pH da amostra
Tabela 3 – Valores de pH de soluções-tampão em relação à temperatura da solução
t Valores de pH de soluções-tampão padrão

(°C) Biftalato de Fosfato diácido de potássio e fosfato ácido Borato de
potássioo dissódico (1:1) sódio
15 3,999 6,900 9,276
20 4,002 6,881 9,225
25 4,008 6,865 9,180
30 4,015 6,853 9,139
35 4,024 6,844 9,102
38 4,030 6,840 9,081
40 4,035 6,838 9,068
Fonte: MIDGLEY, D.; TORRANCE, K. Potenciometric water analysis. 2nd ed. New York:
Hohb Wiley & Sons, 1991. p. 168.
382 - IAL

Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: American Public Health
Association, 1995. chapter 4, p. 65-69.
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1: Méto-
dos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 310.
202/IV Determinação de sólidos totais secos a (103-105)°C
Os termos sólidos, sólidos suspensos e sólidos dissolvidos vêm substituir os antigos

termos resíduo não filtrável e resíduo filtrável. O termo sólido se refere à matéria suspensa ou
dissolvida na água. A designação de sólidos totais é aplicada para o resíduo material deixado
no recipiente após a evaporação de uma amostra de água e a subseqüente secagem completa
a uma temperatura definida, normalmente 105°C. Os sólidos totais incluem: sólidos totais
suspensos, que é a porção dos sólidos totais retidos por um filtro de porosidade igual a 2,0 μm,
e sólidos totais dissolvidos, que é a porção que passa através do filtro.
Os sólidos dissolvidos ou em suspensão, diferenciam-se em fixos e voláteis. “Sólidos

fixos” é o termo aplicado ao produto da calcinação do resíduo total, da matéria suspensa ou
dissolvida, por um tempo especifico a uma determinada temperatura, por exemplo: 2 horas
e 500°C. A perda de peso durante a calcinação é denominada “sólidos voláteis”. As determi-
nações de sólidos fixos e voláteis não distinguem precisamente entre a matéria orgânica e a
inorgânica, pois a perda por calcinação não é exclusiva de material orgânico, podendo ocorrer
a decomposição ou volatilização de alguns sais minerais.
Sólidos totais são matérias suspensas ou dissolvidas presentes numa amostra de água.
Este termo é aplicado ao resíduo de material deixado no recipiente após a evaporação de uma
amostra e sua subseqüente secagem completa a uma temperatura definida.
Os sólidos totais são determinados pela verificação da massa do resíduo de uma amos-
tra de água, após evaporação e secagem até peso constante, a (103-105)°C.
Material
Banho-maria, estufa, balança analítica, pinça metálica, cápsula de porcelana ou platina, ba-
lão volumétrico ou pipeta volumétrica de 100 mL e dessecador com sílica-gel.
Procedimento – Aqueça, em uma estufa, uma cápsula limpa de platina ou porcelana a (103-
105)°C, por no mínimo 3 horas. Retire da estufa, transferindo para um dessecador, até a
IAL - 383
temperatura ambiente e pese. Meça 100 mL da amostra de água não filtrada em um balão
volumétrico e transfira quantitativamente para a cápsula já pesada. Evapore até secagem
em um banho-maria ou numa chapa de aquecimento, evitando que a amostra entre em
ebulição. Coloque a cápsula em uma estufa a (103 - 105)°C por 3 horas. Transfira a cápsula
para um dessecador, deixando atingir o equilíbrio térmico com o ambiente e pese. Repita
as operações até obter peso constante ou até que a diferença de peso seja menor do que 4%
da medida anterior. As determinações devem ser feitas em duplicata e os resultados devem
concordar em 5% entre as medidas.
Cálculo
A = massa (resíduo seco + cápsula) mg

B = massa da cápsula mg
v = volume da amostra em L

203/IV Determinação de sólidos dissolvidos, secos a 180°C, pelo método gravimétrico
Os sólidos totais dissolvidos são os materiais que passam através de um filtro sinterizado pa-
drão e que posteriormente são evaporados e secos à uma determinada temperatura por um
determinado período de tempo. A amostra de água é filtrada em filtro de vidro de porosidade
igual a 2 μm, ou através de papel de filtro quantitativo para precipitados finos, evaporada e
seca em estufa a 180°C, até peso constante. O aumento de peso do recipiente utilizado para
a realização da evaporação corresponde aos sólidos totais dissolvidos.
Material
Banho-maria ou chapa aquecedora, estufa, balança analítica, pinça metálica, agitador mag-
nético com barra magnética, bomba de vácuo ou trompa de vácuo, cápsulas de porcelana ou
platina, balão volumétrico de 100 mL, dessecador com sílica-gel e sistema de filtração a vácuo
com filtro de vidro sinterizado de porosidade de 2 μm.
Procedimento – Monte o sistema de filtração, aplique vácuo e lave o filtro com três volumes
sucessivos de 20 mL de água destilada e deionizada. Continue a sucção para remover todos
os traços de água. Descarte as águas de lavagem. Agite a amostra com agitador magnético,
transfira quantitativamente 100 mL da amostra medida em balão volumétrico e filtre sob
384 - IAL
vácuo. Lave com três volumes de 10 mL de água destilada e deionizada, esperando a com-
pleta drenagem entre as lavagens e continue a sucção por cerca de 3 minutos após a filtração.
A amostra filtrada mais os três volumes de 10 mL de água destilada e deionizada compõem
a amostra para a análise. Aqueça, em estufa, uma cápsula limpa de platina ou porcelana a
(180 ± 2)°C, por 3 horas. Retire da estufa e coloque em um dessecador para esfriar, deixan-
do atingir o equilíbrio térmico com o ambiente. Pese e coloque a amostra de água filtrada
juntamente com as três porções de 10 mL de água destilada e deionizada utilizadas na la-
vagem do filtro, em uma cápsula de porcelana ou platina, previamente pesada. Evapore até
secagem em banho-maria ou em uma chapa aquecedora evitando que a amostra entre em
ebulição. Coloque a cápsula em uma estufa a (180 ± 2)°C por 3 horas. Transfira a cápsula
para um dessecador, deixando atingir o equilíbrio térmico com o ambiente onde se encon-
tra a balança e pese. Repita as operações dos itens anteriores até obter peso constante ou até
que a diferença de peso seja menor do que 4% da medida anterior. As determinações devem
ser feitas em duplicata e os resultados devem concordar dentro de 5% entre suas medidas.
Cálculo
A = peso (resíduo seco + cápsula) mg

B = peso da cápsula mg
v = volume da amostra, em mL
204/IV Determinação de sólidos dissolvidos, secos a 180°C, pelo método condutivi-

métrico
A condutivida de elétrica proporciona uma indicação da quantidade de sólidos totais

dissolvidos presentes em uma amostra de água. Seu valor depende da concentração e do grau
de dissociação dos íons, bem como da temperatura e da velocidade de migração dos íons no
campo elétrico. A cela de condutividade não é seletiva, mede a soma total das concentrações
dos eletrólitos dissolvidos na solução. Nenhuma conclusão pode ser fornecida sobre o tipo de
íons presentes. O valor da concentração dos sólidos totais dissolvidos é estimado a partir de
um eletrólito padrão como NaCl ou KCl.
Material
Condutivímetro com cela de condutividade, compensador de temperatura, béquer de

150 mL e termômetro (na ausência de compensador de temperatura).
IAL - 385
Reagentes
Solução-padrão de NaCl 1000 mg/L – Pese 1000 mg de cloreto de sódio seco a 200°C por 3
horas e resfriado em dessecador, transfira para um balão volumétrico de 1000 mL e complete
o volume com água destilada e deionizada.
Procedimento – Calibre o equipamento com solução-padrão de cloreto de sódio. Em um

béquer de 150 mL, coloque cerca de 100 mL de amostra de água homogeneizada. Insira a
cela de condutividade na amostra, agite-a verticalmente para eliminar as bolhas de ar que
possam estar presentes. Deixe a cela imersa e em repouso até o aparelho estabilizar-se. Faça a
leitura, lave a cela com água deionizada antes e depois de cada leitura.

Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: American Public Health
Association,1995. chapter 2, p. 53,55.
205/IV Determinação da turbidez pelo método nefelométrico
A turbidez é a expressão usada para descrever a propriedade óptica referente ao espalha-

mento e a absorção da luz quando esta passa através de uma amostra. Esta propriedade é uma
característica decorrente da presença de materiais suspensos, tais como areia, poeira, matéria
orgânica e inorgânica, plâncton e organismos microscópicos. A presença destes sólidos suspen-
sos, finamente divididos e geralmente em estado coloidal, impede a passagem da luz através
da amostra de água. A correlação da turbidez com a concentração de matéria suspensa é difícil
porque o tamanho, a forma e o índice de refração das partículas também afetam a propriedade
de espalhamento da luz. A turbidez pode ser determinada para qualquer amostra livre de detri-
tos e sedimentos, usando-se uma escala arbitrária em unidades de turbidez. O método compara
a intensidade de luz espalhada pela amostra com a de uma amostra-padrão de referência, sob
condições definidas. A nefelometria envolve a medida da luz espalhada numa direção específica,
normalmente a 90° da trajetória do raio incidente. O polímero de formazina é usado como sus-
pensão-padrão de referência de turbidez. As paredes da cubeta contendo a amostra, assim como
as janelas sujas do equipamento, a presença de bolhas de ar na amostra e vibrações que possam
perturbar a superfície da amostra, fornecem resultados falsos. A “cor verdadeira”, que é a cor da
água devido às substâncias dissolvidas que absorvem luz, causa medidas menores de turbidez.
386 - IAL
Material
Turbidímetro, balança analítica, cubetas de vidro, balões volumétricos de 100 e 1000 mL,
pipetas volumétricas de 5 e 10 mL, sistema de filtração completo e filtro de membrana com
porosidade 0,2 μm.
Reagentes
Água livre de turbidez – Passe água através de uma membrana de filtro de porosidade igual a
0,2 μm. O filtro de membrana convencional usado para exames bacteriológicos não é satis-
fatório. Lave o frasco coletor duas vezes com a água filtrada e descarte os próximos 200 mL.
O método é satisfatório para se medir turbidez até 0,02 UT.
Suspensão-estoque de turbidez: Solução I – Pese 1000 mg de sulfato de hidrazina, transfira

para um balão volumétrico de 1000 mL e complete o volume com água destilada e deioniza-
da. Solução II – Pese 10 g de hexametilenotetramina, transfira para um balão volumétrico de
100 mL e complete o volume com água bidestilada e deionizada. Em um balão volumétrico
de 100 mL, misture 5 mL da solução I e 5 mL da solução II. Deixe em repouso por 24 horas
a (25 ± 3)°C. Complete o volume com água destilada e deionizada e misture. A turbidez
desta solução é de 400 UT (unidades de turbidez).
Nota: prepare as soluções e suspensão, mensalmente.
Suspensão-padrão de turbidez 40 UT Com uma pipeta volumétrica, transfira 10 mL da

suspensão-padrão de polímero de formazina (400 UT) para um balão volumétrico de 100
mL. Complete o volume com água destilada e deionizada livre de turbidez e misture. Prepare
esta suspensão semanalmente.
Suspensão-padrão de turbidez menor que 40 UT A partir da suspensão-padrão de turbidez

de 40 UT, utilizando-se pipeta e balão volumétrico de 100 mL, prepare diariamente soluções
diluídas de acordo com a necessidade (Tabela 4).
Nota: alternativamente, use padrões disponíveis no comércio, tais como estireno-divinilben-

zeno ou outros que sejam equivalentes à suspensão de polímero de formazina, recentemente
preparada.
IAL - 387
Tabela 4 – Dados referentes ao preparo de suspensões diluídas de turbidez (em balões volu-
métricos de 100 mL)
Volume de suspensão necessário

( mL)
Padrão de turbidez Suspensão de 2 UT Suspensão de 40 UT Volume de água
UT requerido utilizada utilizada livre de turbidez
(mL)
0,05 2,5 - 97,5
0,1 5,0 - 95
0,5 25 - 75
1,0 50 - 50
1,5 75 - 25
2,0 100 - 0
4,0 - 10 90
6,0 - 15 85
10 - 25 75
20 - 50 50
30 - 75 25
40 - 100 0
Procedimento – Agite a amostra, procurando evitar a formação de bolhas antes da realização

da medida de turbidez. Deixe repousar para eliminar as bolhas de ar e transfira uma quan-
tidade de amostra para a cubeta do turbidímetro. Quando possível, coloque a cubeta com
a amostra num banho de ultra-som por 1 a 2 segundos, para eliminar qualquer bolha de ar.
Dilua as amostras com 1 ou mais volumes de água livre de turbidez até que a turbidez das
amostras se enquadre na faixa de 30 a 40 UT. Limpe bem as paredes da cubeta contendo a
amostra e coloque-a no turbidímetro. Leia a turbidez diretamente na escala do aparelho ou a
partir de uma curva-padrão adequada.
Curva-padrão – Nos instrumentos pré-calibrados, verifique a escala de calibração com o

uso de padrões apropriados. Leia ao menos um padrão em cada faixa de leitura disponível
no aparelho utilizado. Na ausência de uma escala pré-calibrada, prepare curvas de calibração
para cada faixa de leitura do instrumento com as suspensões-padrão de turbidez listadas na
Tabela 4. Essas suspensões-padrão não devem ser agitadas.
Cálculo
Determine a turbidez, com a curva-padrão previamente estabelecida.
388 - IAL

Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: American Public Health
Association,1995. chapter 2, p. 8,11.
206/IV Determinação da turbidez pelo método turbidimétrico
Material
Turbidímetro Hellige
Procedimento – Escolha a faixa de turbidez apropriada e selecione o filtro adequado a esta

posição. Limpe e seque cuidadosamente a cela do turbidímetro de altura própria para a faixa
de turbidez escolhida. Encha a cela até a marca com a amostra. Limpe o plunger e mergulhe
no líquido que preenche a cela, cuidadosamente para evitar bolhas. Limpe o exterior da cela e
coloque na plataforma espelhada. Feche a porta do aparelho e ligue a luz. Balanceie imediata-
mente a intensidade da luz do feixe central com a intensidade do fundo. Leia a escala gradua-
da sobre o disco do botão quando o brilho dos dois campos estiver balanceado. Determine a
turbidez da amostra, por meio do gráfico apropriado à faixa de operação utilizada.
Nota: estes gráficos acompanham o aparelho e variam segundo a turbidez da amostra, o filtro
utilizado e a altura da cela.
Curva-padrão – Ao se trocar a lâmpada do aparelho, é necessária uma nova calibração e a

elaboração de um novo gráfico para cada faixa de turbidez. A solução-padrão para a cons-
trução da curva consiste de um “kit de calibração de turbidez”, contendo 500 mL de uma
suspensão-padrão estoque de sílica (SiO2) equivalente a 200 mg/L e papéis de gráfico em
branco impressos especialmente para trabalhar com as cinco faixas de turbidez.

the Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: American Public
Health Association,1995. chapter 2, p. 8, 11.
odos químicos e físicos para análise de alimentos, 3. ed. São Paulo: IMESP, 1985. p. 303-304.
IAL - 389
207/IV Determinação de resíduos de pesticidas e bifenilas policloradas pelo método

multiresíduo
Este método determina resíduos de pesticidas e PCBs em água, referentes aos princí-
pios ativos constantes da Tabela 5. O método baseia-se na extração dos referidos princípios
ativos na amostra de água com uma mistura dos solventes diclorometano e n-hexano e cuja
detecção e quantificação são realizadas por cromatografia em fase gasosa com os detectores de
captura de elétrons (ECD) e fotométrico de chama (FPD) ou seletivo de nitrogênio e fósforo
(NPD).
Tabela 5 – Distribuição de pesticidas e bifenilas policloradas-PCBs
(a) (b)
Pesticidas Pesticidas
Aldrin Azinfós etílico
Lambda-cialotrina Azinfós metílico
Cipermetrina Carbofenotiona
DDT total (op’DDT, pp’DDT, op’DDE,
Clorfenvinfós
pp’DDE, op’DDD, pp’DDD)
Dieldrin Clorpirifós-etílico
Deltametrina Clorpirifós-metílico
Dodecacloro Diazinona
Endrin Diclorvos
(a) (b)
Endosulfam(alfa, beta e sulfato de
Dimetoato
endosulfam)
HCH total (alfa, beta e gama) Dissulfotona
Heptacloro Etiona
Heptacloro epóxido Etoprofós
Hexaclorobenzeno Etrinfós
- Fenamifós
- Fentiona
BifenilasPolicloradas-PCBs congêneres Fentoato
PCB 28 Folpete
PCB 52 Forato
PCB 101 Malationa
390 - IAL
PCB138 Metamidofós
PCB153 Metidationa
PCB180 Mevinfós
- Ometoato
- Parationa-etílica
- Parationa-metílica
- Pirimifós-etílico
- Pirimifós-metílico
- Profenofós
- Pirazofós
- Terbufós
- Triazofós
(a) Cromatografia a gás com detector de captura de elétrons (ECD).
(b) Cromatografia a gás com detector fotométrico de chama (FPD) ou de nitrogênio e fós-
foro (NPD).
Material
Cromatógrafo a gás com detectores de captura de elétrons (ECD) e fotométrico de chama

(FPD) ou de nitrogênio e fósforo (NPD), capela de exaustão para solventes, rotavapor,
estufa, aparelho extrator de Soxhlet, funis de separação de 2000 mL, balões volumétricos
de diferentes capacidades, pipetas volumétricas de diferentes capacidades, pipetas Pasteur,
frasco Erlenmeyer com tampa, tubos graduados de 10 mL com tampa, funis analíticos,
provetas 100 e 1000 mL, béqueres de 2000 mL, coluna cromatográfica de vidro de 15 mm
de diâmetro por 30 cm de altura com torneira de teflon e reservatório de 300 mL, tubo de
vidro com tampa e batoque de teflon, vials de vidro com tampas e septos de teflon para injetor
automático
Reagentes
n-Hexano, grau resíduo

Isoctano, grau resíduo
Algodão tratado
Sulfato de sódio anidro granulado, grau resíduo
Cloreto de sódio
Água tratada – Transfira 1000 mL de água destilada para um funil de separação de 2000 mL
e extraia três vezes com 60 mL da mistura de diclorometano:n-hexano (1:1). Despreze a fase
IAL - 391
orgânica e armazene a água.
Sílica gel 60, 70-230 mesh
Nota: Faça, previamente, brancos de cada r eagente para certificar-se de que não possuem
interferentes para a análise.
Solução-padrão dos princípios ativos – Pese 0,010 g de cada padrão analítico em béquer
de 10 mL e transfira quantitativamente para um balão volumétrico de 100 mL. Complete
o volume com isoctano. Transfira para um frasco de vidro com tampa e batoque de teflon.
Os frascos devem conter uma etiqueta com dados de procedência, identidade, concentração,
estabilidade, data de preparação, prazo de validade e temperatura de armazenamento. Faça
diluições necessárias com n-hexano em 5 níveis (1/2 LQ, 1 LQ, 2 LQ, 5 LQ e 10 LQ) para
verificação da faixa de linearidade do detector e construção da curva-padrão.
Nota: LQ – Limite de quantificação: menor concentração do analito na amostra que pode

ser quantificada com precisão e exatidão aceitáveis, sob determinadas condições experimen-
tais adotadas.
Diclorometano:n-hexano (1:4) – Transfira 200 mL de diclorometano para balão volumétri-

co de 1000 mL. Adicione n-hexano. Misture bem e complete o volume com n-hexano.
Diclorometano:n-hexano (1:1) – Transfira 500 mL de diclorometano para balão volumétrico

de 1000 mL. Adicione n-hexano. Misture bem e complete o volume com n-hexano.
Sílica gel ativada – Calcine quantidade suficiente de sílica gel 60-70-230 mesh a 450°C du-
rante 4 horas. Deixe em dessecador até temperatura ambiente. Armazene em frasco de vidro
com tampa e batoque de teflon. Ative a sílica gel calcinada por 5 horas a 135°C de 2 em 2
dias. Armazene-a em dessecador.
Sílica gel desativada a 10% – Pese 13,5 g de sílica gel ativada em frasco Erlenmeyer com
tampa. Adicione 1,5 g de água tratada. Homogeneíze.
Solução saturada de cloreto de sódio – Em um béquer de 100 mL, adicione água e cloreto
de sódio até que a solução fique saturada. Transfira para frasco de vidro com tampa e batoque
de teflon.
Algodão tratado – Coloque, em frasco de Soxhlet, algodão e extraia com 200 mL de n-

hexano, no mínimo por cinco horas. Coloque em béquer e seque em estufa. Armazene em
frasco de vidro com tampa.
392 - IAL
Procedimento
Extração – Transfira 1000 mL da amostra homogeneizada para um funil de separação de

2000 mL. Extraia com 60 mL da mistura diclorometano:n-hexano (1:4) para análise dos
pesticidas do item (a) da Tabela 5, exceto lambda-cialotrina, cipermetrina, deltametrina,
sulfato de endosulfam e/ou com 60 mL da mistura diclorometano:n-hexano (1:1) para
análise dos pesticidas: lambda-cialotrina, cipermetrina, deltametrina, sulfato de endosulfam e
todos os pesticidas do item (b) da Tabela 5. Quando analisar todos os pesticidas da Tabela 5,
extraia com 60 mL da mistura diclorometano:n-hexano (1:1). Adicione, aproximadamente,
10 mL de solução saturada de cloreto de sódio. Tampe o funil. Inverta e abra a torneira para
o escape de vapores de solventes. Agite. Deixe em repouso para separação das fases. Recolha
a fase aquosa em béquer de 2000 mL. Passe a fase orgânica sobre sulfato de sódio anidro
granulado através de um funil com algodão tratado e recolha em balão de fundo chato de
300 mL. Transfira a fase aquosa para funil de separação e extraia, como descrito, mais duas
vezes. Os extratos recolhidos são evaporados em rotavapor até quase à secura. Adicione, apro-
ximadamente, 5 mL de n-hexano e concentre novamente para eliminar o diclorometano.
Transfira, quantitativamente, para tubo de vidro graduado com uma pipeta Pasteur. Com-
plete o volume a 5 mL com n-hexano, lavando as paredes do balão. Injete nos respectivos
cromatógrafos.
Purificação – Quando o extrato não estiver limpo, isto é, com muitos interferentes, puri-
fique-o em coluna cromatográfica com 15 g de sílica gel desativada a 10% com água, elu-
índo com 200 mL da mistura de diclorometano:n-hexano (1:4) e com 200 mL da mistura
diclorometano:n-hexano (1:1). Recolha o eluído em balão de fundo chato de boca esmeri-
lhada de 300 mL e concentre em rotavapor. Adicione, aproximadamente, 5 mL de n-hexano
e concentre novamente para eliminar o diclorometano. Transfira, quantitativamente, para
tubo de vidro graduado com uma pipeta Pasteur. Complete o volume a 5 mL com n-hexa-
no, lavando as paredes do balão.Transfira uma alíquota para um vial e injete nos respectivos
cromatógrafos.
Análise da amostra-testemunha e estudos de recuperação – Realize análise da testemunha e

estudos de recuperação com cinco repetições em pelo menos dois níveis: 1LQ e 10 LQ.
Condições cromatográficas para a análise dos princípios ativos dos pesticidas do item (a) da
Tabela 5:
Cromatógrafo a gás, com detector de captura de eletrons (ECD), equipado com worksta-
tion.
Coluna capilar – fase estacionária 5% de fenilmetil siloxano (30 m x 0,32 mm x 0,25 μm
de filme)
Temperatura do detector – 320°C
Temperatura do forno: 60°C (1 min), (60-220)°C (10°C/min), (220-280)°C
IAL - 393
(3°C/min), 280°C (17 min) - tempo: 60 min.

Fluxo do gás de arraste-nitrogênio - 1 mL/min.
Temperatura do injetor - 240°C
Modo de injeção - splitless
Condições cromatográficas para a análise dos princípios ativos dos pesticidas do item (b) da
Tabela 5:
Cromatógrafo a gás, com dector fotométrico de chama (FPD) ou de nitrogênio e fósforo
(NPD)
Coluna megabore - fase estacionária 5% de fenilmetil siloxano (30 m x 0,53 mm x 2,65 μm
de filme)
Temperatura do detector - 280°C
Temperatura do forno: (50 - 150)°C (30°C/min), (150 - 240)°C (10°C/min).
Fluxo do gás de arraste - nitrogênio – 18 mL/min.
Fluxo de Hidrogênio -75 mL/min .
Fluxo de ar sintético -100 mL/min.
Temperatura do injetor - 240°C
Modo de injeção - splitless
Curva-padrão – Injete as soluções de trabalho com diferentes concentrações por duas ou três
vezes ou até que haja repetitividade dos cromatogramas. Construa a curva-padrão dentro da
faixa de linearidade do detector.
Determinação – A análise qualitativa é feita por padronização externa, por meio de compa-
ração do tempo de retenção dos respectivos princípios ativos e a confirmação em coluna de
diferente polaridade ou por detector seletivo de massa.
Cálculo
A análise quantitativa é feita por meio da curva-padrão com padronização externa, por com-
paração de área, levando em consideração o fator de diluição e a quantidade da amostra. O
resultado deve ser expresso em µg do princípio ativo por litro de amostra (µg/L).
AMERICAN PUBLIC HEALTH ASSOCIATION, AMERICAN WATER WORK-

SASSOCIATION, WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Method for
the Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington D.C.: A.P.H.A., 1995.
chapter 6, p. 114-128. (com modificações).
STEIWANDTER, H. Contributions to sílica gel application in pesticide residue analysis.

III. An on-line method for extracting and isolating chlorinated hidrocarbon pesticides and
394 - IAL
polychlorinated biphenyls (PCBs) from milk and dairy products. Fresenius Z. Anal. Chem.,
v. 312, p. 342-345, 1982.
208/IV Determinação de arsênio total por espectrometria de absorção atômica com

gerador de hidretos
Este método é aplicável à determinação de arsênio total em água para o consumo

humano. O arsênio está na forma de arsenato (As5+) e, no caso de poço profundo, algum
arsenito (As3+) pode estar presente. Espécies metiladas (ácidos monometilarsônico e dime-
tilarsínico) raramente estão presentes em águas de consumo. O arsênio orgânico é oxidado
a arsênio inorgânico com K2S2O8/HCl sob aquecimento e este é pré-reduzido a As3+ com
KI/HCl. O As3+ é transformado em AsH3 com NaBH4, no gerador de hidretos e depois é
reduzido ao estado elementar em cela de quartzo aquecida a 900oC e determinado por espec-
trometria de absorção atômica.
Material
Espectrômetro de absorção atômica acoplado a sistema de geração de hidretos com injeção

em fluxo, chapa aquecedora, lâmpada de catodo oco ou de descarga sem eletrodo de arsênio,
balões volumétricos, pipetadores automáticos com volumes ajustáveis, pipetas volumétricas
e béqueres
Reagentes
Ácido clorídrico para análise de traços de metais
Nota: antes de usar o ácido, borbulhe um gás inerte (por exemplo, argônio ou nitrogênio)
ao frasco do reagente por aproximadamente três horas, para eliminar o Cl2 dissolvido, pois
interfere na reação, oxidando o hidreto formado.
Ácido nítrico para análise de traços de metais.
Solução de iodeto de potássio a 10% m/v .
Solução de ácido L(+)-ácido ascórbico a 10% m/v.
Solução de perssulfato de potássio a 4%.
Solução-padrão estoque de arsênio para absorção atômica - 1 000 mg/L, com certificado de
análise e incerteza associada.
IAL - 395
Solução de boridreto de sódio a 0,5% m/v em NaOH a 0,5% m/v – Pese 0,5 g de NaHB4 e
dissolva em 100 mL de solução a 0,5% de NaOH.
Solução-padrão estoque intermediária de arsênio 10 mg/L – Pipete 1 mL da solução-padrão

estoque (1000 mg/L) em um balão volumétrico de 100 mL e complete o volume com solu-
ção de ácido nítrico a 2%.
Solução-padrão intermediária de arsênio 50 µg/L – Pipete 0,5 mL da solução-padrão esto-

que intermediária de arsênio 10 mg/L em um balão volumétrico de 100 mL e complete o
volume com água destilada e deionizada. Prepare no dia do ensaio.
Notas
Conserve todas as soluções-padrão estoque em frascos de polietileno.
Utilize água destilada e deionizada para preparar todos os reagentes.
Procedimento
Otimize os parâmetros instrumentais segundo o manual de instruções do fabricante.

Colete as amostras de água em frasco de polietileno contendo ácido nítrico, de forma
que a concentração final do ácido seja 0,2% e estoque sob refrigeração até a análise.
Se a amostra estiver límpida, faça a pré-redução e a determinação. Se amostra contiver
particulados ou matéria orgânica é necessário que ela seja previamente digerida antes
da pré-redução.
Curva-padrão – Prepare as soluções-padrão de trabalho a partir da solução-padrão interme-

diária de 50 µg/L com 5 pontos, compreendendo a faixa linear de trabalho para o elemento.
É recomendável que um dos pontos da curva-padrão seja o limite máximo estabelecido pela
legislação. Faça o branco da curva-padrão. Em seguida, proceda à pré-redução.
Pré-redução das soluções-padrão de trabalho – Aos balões contendo os padrões, adicione

alíquotas de HCl, da solução de KI e da solução de ácido ascórbico, de tal maneira que as
concentrações desses reagentes na solução final sejam: 10%, 0,5% e 0,5%, respectivamente.
Aguarde uma hora, complete o volume dos balões com água destilada e deionizada e efetue
a determinação. Prepare as soluções-padrão no dia do ensaio.
Digestão da amostra – Pipete uma alíquota de 25 mL da amostra previamente acidificada

(pH<2) com HNO3 em béquer de 150 mL, adicione 8 mL de K2S2O8 e aqueça a 95°C, em
banho-maria, até que o volume seja reduzido a aproximadamente 10 mL. Adicione 12,5 mL
de HCl, tampe o béquer com vidro de relógio e continue o aquecimento a 95°C por cerca
de uma hora. Descubra o béquer e faça a redução do volume até aproximadamente 10 mL.
Transfira para um balão volumétrico de 25 mL com água destilada e deionizada e proceda à
pré-redução.
396 - IAL
Pré-redução da amostra – Em balão volumétrico, pipete um volume adequado da amostra

original ou a amostra digerida, conforme o caso, de tal maneira que a leitura esteja na faixa
linear da curva-padrão e execute o mesmo procedimento da pré-redução das soluções-padrão
de trabalho.
Determinação – Depois de determinar a curva-padrão pela leitura das soluções-padrão pre-

viamente preparadas, faça a leitura das amostras. Analise um ponto intermediário da curva-
padrão após a leitura de dez amostras para verificar se o equipamento está mantendo a
calibração. Se a leitura tiver uma variação maior que a estabelecida pelo laboratório, faça a
recalibração.
Nota: caso a leitura da amostra fique fora da faixa linear da curva-padrão, não dilua a amos-
tra. Tome uma alíquota menor e reinicie a análise a partir da digestão ou da pré-redução, de
acordo com o tipo de amostra.
Cálculo
L = leitura no equipamento, em µg/L

v1 = volume do balão utilizado na pré-redução, em mL
v2 = volume de amostra utilizada na pré-redução, em mL
NYGAARD, D. D.; LOWRY, J.H. Sample digestion procedures for simultaneous determi-
nation of arsenic, antimony, and selenium by Inductively Coupled Argon Plasma Emission
Spectrometry with Hydride Generation. Anal. Chem. v. 54, p. 803-807, 1982.
209/IV Determinação de metais totais por espectrometria de emissão atômica com

plasma de argônio indutivamente acoplado
Este método é aplicável à determinação de metais totais (prata, alumínio, bário, cál-
cio, cobre, cromo, ferro, potássio, magnésio, manganês, sódio, fósforo e zinco) em água para
consumo humano. Os metais são determinados usando a técnica de espectrometria de emis-
são atômica por plasma de argônio indutivamente acoplado (ICP OES).
IAL - 397
Material
Espectrômetro de emissão atômica com plasma de argônio indutivamente acoplado (ICP

OES), balões volumétricos, pipetadores automáticos com volumes ajustáveis, pipetas volu-
métricas, béquer, frascos de polietileno.
Reagentes
Ácido nítrico para análise de traços de metais
Soluções-padrão estoque monoelementares de 1000 mg/L de: alumínio, prata, bário, cromo,
cobre e manganês para análise espectrométrica, com certificado de análise e incerteza associa-
da.
Soluções-padrão estoque monoelementares de 10000 mg/L de: cálcio, ferro, fósforo, magné-
sio, potássio, sódio e zinco para análise espectrométrica, com certificado de análise e incerteza
associada.
Nota: a solução-padrão de prata deve ser preparada separadamente da solução-padrão multi-

elementar, pois este metal forma precipitado com haletos. Recomenda-se que as soluções
para a construção da curva-padrão da prata sejam preparadas no dia do ensaio.
Procedimento
Otimize os parâmetros instrumentais segundo o manual de instruções do fabricante.
Curva-padrão – Prepare as soluções-padrão multi-elementares de trabalho para a construção

da curva-padrão com seis pontos, incluindo o branco, a partir de uma solução-padrão inter-
mediária, levando em consideração a sensibilidade do equipamento e a faixa linear de traba-
lho para cada elemento. As soluções são preparadas em ácido nítrico a 0,2% v/v e conservadas
em frascos de polietileno. É recomendável que o ponto intermediário da curva-padrão com-
preenda o limite estabelecido pela legislação, para cada elemento.
Determinação – Zere o equipamento com solução de ácido nítrico a 0,2% v/v. Estabeleça as
curvas-padrão para cada elemento a ser determinado usando regressão não linear. Verifique
a calibração após analisar um número de amostras, utilizando uma das soluções-padrão da
curva. Se a leitura apresentar uma variação maior que a estabelecida pelo laboratório, deve-se
recalibrar. Se necessário, dilua a amostra para que a leitura fique inserida na faixa linear da
curva-padrão. A diluição também deve ser feita com ácido nítrico a 0,2% v/v.
398 - IAL
Cálculo
Como o metal é determinado diretamente na amostra de água, o valor lido no equipamento

é o próprio valor da concentração, a não ser que alguma diluição ou pré-concentração tenha
sido necessária. Nesse caso, deve-se dividir ou multiplicar o valor da leitura obtida pelo fator
de diluição ou da pré-concentração.

ASSOCIATION WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods for the
Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: A.P.H.A., 1995. chapter
3, p. 5, 34-39.
210/IV Determinação de metais totais por espectrometria de absorção atômica com
chama
O método é aplicável à determinação de bário, cálcio, cádmio, chumbo, cromo, co-

bre, ferro, magnésio, manganês, sódio, potássio e zinco em águas, com exceção de água de
efluentes e água do mar. Íons de metais em água podem ser determinados diretamente por
espectrometria de absorção atômica com chama, dependendo da concentração do elemento
na amostra. Para a determinação de alguns elementos é necessária a pré-concentração da
amostra.
Material
Espectrômetro de absorção atômica com chama equipado com corretor de background e

lâmpada de catodo oco do elemento a ser determinado, chapa aquecedora, balões volumétri-
cos, pipetador automático com volume ajustável e béqueres.
Reagentes
Ácido nítrico para análise de traços de metais
Soluções-padrão estoque de 1000 mg/L dos seguintes elementos: bário, cálcio, cád-
mio, chumbo, cromo, cobre, ferro, magnésio, manganês, sódio, potássio e zinco para
uso em absorção atômica, com certificado de análise e incerteza associada.
Procedimento
Opere o equipamento de acordo com o manual de instruções do fabricante. Ajuste o

queimador, a chama e a nebulização para obtenção de máxima absorbância, utilizando
IAL - 399
uma solução-padrão da curva. Para a determinação de elementos tais como: bário, cád-
mio, chumbo, cromo e manganês, devido à baixa sensibilidade da técnica, é necessário
pré-concentrar a amostra. Os outros elementos também podem ser lidos nessa solução
da amostra pré-concentrada. As amostras de água que apresentam resíduo devem ser di-
geridas conforme o procedimento da digestão/pré-concentração. Os elementos: cobre,
ferro e zinco podem ser lidos diretamente na solução original da amostra ou, então, na
solução da amostra pré-concentrada.
Digestão/pré-concentração da amostra – Colete a amostra conforme procedimento re-

comendado no cap. III e transfira 250 mL da amostra homogeneizada para um béquer
ou outro volume dependendo da concentração esperada do analito e do limite de de-
tecção do método. Adicione 5 mL de ácido nítrico. Leve à ebulição lenta e evapore so-
bre chapa aquecedora até o volume aproximado de 10 mL ou antes que a precipitação
ocorra. Adicione 2 mL de ácido nítrico e cubra com vidro de relógio para refluxar sobre
as paredes do béquer. Continue aquecendo até que a solução fique clara e límpida. Se
necessário, repita a adição de ácido nítrico. Reduza o volume ao mínimo, sem deixar
secar a amostra durante o tratamento. Transfira, quantitativamente, para um balão vo-
lumétrico de 25 mL com água destilada e deionizada. Faça a determinação dos metais
nessa solução. Prepare a amostra em triplicata e o branco dos reagentes, submetido às
mesmas condições de análise.
Para a determinação de íons sódio e potássio, adicione um outro metal alcalino para
evitar a interferência de ionização na chama. No caso da determinação de íons de po-
tássio, adicione solução de cloreto de sódio à amostra, ao branco e às soluções-padrão
de tal forma que a concentração final seja 0,1% em íon sódio. Na determinação de íons
sódio, adicione solução de cloreto de potássio para que a concentração final seja 0,1%
em íon potássio. As soluções de cloretos de sódio e de potássio podem ser substituídas
por solução de césio de tal forma que a concentração final em césio seja 0,1%.
Para a determinação de íons cálcio e magnésio, adicione à amostra, ao branco e às

soluções-padrão uma solução de íons lantânio, de tal forma que a concentração final
seja 1% em lantânio.
Curva-padrão – Prepare as soluções-padrão da curva a partir da solução-padrão esto-

que, levando em consideração a sensibilidade do equipamento e a faixa linear de traba-
lho para cada elemento. As soluções-padrão de trabalho devem ser preparadas em ácido
nítrico a 0,2% e conservadas em frascos de polietileno.
Zere o equipamento com o branco e faça a leitura das absorbâncias das soluções-padrão.
Estabeleça as curvas-padrão para cada elemento a ser determinado usando regressão li-
near. Em seguida, faça a leitura das amostras. Se necessário, dilua a solução da amostra
400 - IAL
para que a leitura da absorbância fique inserida na faixa linear da curva-padrão.
Cálculo
A partir da curva-padrão, obtenha a absortividade (coeficiente angular da curva absor-

bância versus concentração) para cada elemento.
Aa = absorbância da amostra
Ab = absorbância do branco da amostra
A = absortividade, obtida a partir da curva-padrão
v = volume do balão no qual a amostra foi transferida após dissolução, em mL
d = fator de diluição da amostra, quando necessária
v1 = volume da amostra original, em mL
m = massa da amostra original, em g
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods As-

sociation Of Official Analytical Chemists. Arlington: AOAC, (method 973.53),
16th ed., chapter 11, 1995 p. 19.
PERKIN ELMER. Analytical methods for atomic absorption spectroscopy.

Norwalk, U.S.A, 1996.

the Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: APHA, 1995,
chapter 3, p. 3-9, 13-15.
211/IV Determinação de mercúrio total por espectrometria de absorção atômica

com gerador de vapor frio
Este método é aplicável à determinação de mercúrio total em água. O mercúrio

orgânico é oxidado a mercúrio inorgânico com a mistura de KMnO4 /K2S2O8 com
aquecimento e reduzido ao estado elementar com cloreto estanoso. O mercúrio é deter-
minado por espectrometria de absorção atômica com gerador de vapor frio, utilizando-
se sistema de injeção em fluxo e amalgamador.
IAL - 401
Material
Espectrômetro de absorção atômica acoplado ao gerador de vapor frio com sistema
de injeção em fluxo e amalgamador, chapa aquecedora, lâmpada de catodo oco ou de
descarga sem eletrodo de mercúrio, balões volumétricos, pipetadores automáticos com
volumes ajustáveis, pipetas volumétricas e béqueres.
Reagentes
Ácido nítrico isento de mercúrio

Ácido sulfúrico isento de mercúrio
Ácido clorídrico isento de mercúrio
Ácido clorídrico 5% v/v
Permanganato de potássio isento de mercúrio
Solução-padrão estoque de mercúrio 1000 mg/L com certificado de análise e incerteza

associada.
Solução-padrão estoque intermediária 10 mg/L de mercúrio – Pipete 1 mL da solução-

padrão estoque 1000 mg/L em um balão volumétrico de 100 mL e complete o volume
com solução contendo os ácidos ácido sulfúrico a 2% e nítrico a 2%.
Solução-padrão intermediária de trabalho de mercúrio 50 μg/L – Pipete 0,5 mL da so-

lução-padrão intermediária (10 mg/L) em um balão volumétrico de 100 mL e comple-
te o volume com solução de ácido sulfúrico e nítrico a 2%. Prepare no dia do ensaio.
Solução de cloreto estanoso a 5% em HCl 5% – Pese 5 g de SnCl2 em béquer, adicio-

ne 5 mL de HCl e aqueça para dissolver o cloreto estanoso. Adicione água destilada e
deionizada até completar 100 mL, com agitação constante.
Solução de permanganato de potássio a 5% m/v – Pese 5 g de KMnO4 em béquer, dis-
solva em 100 mL de água destilada e deionizada. Guarde em frasco protegido da luz.
Solução de persulfato de potássio a 5% m/v – Pese 5 g de K2S2O8 em béquer e dissolva

em 100 mL de água destilada e deionizada.
Solução de cloridrato de hidroxilamina a 5% m/v – Pese 5 g de NH2OHCl e dissolva

em 100 mL de água destilada e deionizada.
Nota: Armazene todas as soluções-padrão estoque em frascos de polietileno.
402 - IAL
Procedimento
Os parâmetros instrumentais devem ser otimizados segundo o manual de instruções

do fabricante. As amostras de água devem ser coletadas em frasco de polietileno conten-
do ácido nítrico e cloreto de sódio, de forma que a concentração final, tanto de NaCl
quanto de HNO3, sejam 2% e estocadas sob refrigeração até a análise. Se a amostra
apresentar particulados ou matéria orgânica é necessário que seja digerida.
Digestão da amostra – Pipete uma alíquota de 25 mL da amostra em béquer de 150

mL. Lentamente, adicione 1,3 mL de H2SO4 e 0,6 mL de HNO3 e misture. Adicione
3,5 mL de KMnO4 a 5% e aguarde por cerca de 15 minutos. Adicione 2 mL de K2S2O8
e aqueça a 95°C em banho-maria por 2 horas e resfrie. Se necessário, elimine o excesso
de permanganato com algumas gotas de solução de hidroxilamina a 5%. Transfira para
um balão volumétrico de 25 mL com água destilada e deionizada. Se a amostra estiver
límpida, faça a leitura diretamente sem digestão prévia.
Curva-padrão
A partir da solução-padrão intermediária de trabalho de mercúrio (50 µg/L), prepare 6

concentrações para a curva compreendendo a faixa linear de trabalho, de acordo com a
sensibilidade do equipamento. As soluções-padrão são preparadas em meio ácido sulfúri-
co a 2% e nítrico a 2%. Estas soluções-padrão devem ser preparadas no dia do ensaio.
Nota: é recomendável que um dos pontos da curva-padrão seja o limite estabelecido

pela legislação.
Determinação – Zere o equipamento com solução de H2SO4/HNO3 a 2% e faça a

leitura das soluções-padrão. Depois de completar a calibração, as amostras podem ser
analisadas. Se necessário, dilua as amostras para que as leituras fiquem compreendidas
na faixa linear da curva-padrão. Verifique a calibração, analisando um ponto interme-
diário da curva-padrão. Se a leitura tiver uma variação maior que a estabelecida pelo
laboratório, recalibre.
IAL - 403
Cálculo
Como o metal é determinado diretamente na água coletada, o valor lido no equipamento

é o próprio valor da concentração, a não ser que alguma diluição tenha sido necessária.
Nesse caso, deve-se multiplicar o valor da leitura obtida pela diluição efetuada.

ASSOCIATION, WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods
for the Examination of Water and Wastewater, 19th ed. Washington, DC: APHA, 1995,
chapter 3, p. 18-19.
212/IV Determinação de metais totais por espectrometria de absorção atômica

com forno de grafite
Este método é aplicável à determinação de metais totais (antimônio, cádmio,

chumbo, cromo e alumínio), em níveis de traços (µg/L) em águas para consumo. Os
metais são determinados usando a técnica de espectrometria de absorção atômica com
forno de grafite (ETAAS).
Material
Espectrômetro de absorção atômica com forno de grafite e corretor de fundo (Back-

ground), lâmpadas de catodo oco ou de descarga sem eletrodo do elemento a ser anali-
sado, balões volumétricos, pipetadores automáticos com volumes ajustáveis, pipetas vo-
lumétricas, béqueres e balões volumétricos de polimetilpenteno ou polipropileno para
a determinação de íons alumínio.
Reagentes
Ácido nítrico para a análise de traços de metais
Soluções-padrão estoque de 1000 mg/L de: alumínio, antimônio, cádmio, chumbo e

cromo para uso em absorção atômica com certificado de análise e incerteza associa-
da.
Soluções de modificadores químicos:
a) Mistura de dihidrogenofosfato de amônio a 0,5% m/v e nitrato de magnésio a 0,03%

m/v, para as determinações de chumbo e cádmio – Pese cerca de 0,5 g de NH4H2PO4 e
404 - IAL
0,052 g de Mg(NO3)2.6H2O em béqueres. Dissolva os sais com água destilada e deio-
nizada e transfira para um balão volumétrico de 100 mL e complete o volume.
b) Solução de nitrato de magnésio a 0,15% m/v, para as determinações de antimônio,

alumínio e cromo – Pese cerca de 0,259 g de Mg(NO3)2.6H2O em um béquer. Dissol-
va com água destilada e deionizada e transfira para um balão volumétrico de 100 mL
e complete o volume.
Procedimento - Os parâmetros instrumentais devem ser otimizados segundo o manu-

al de instruções do fabricante. Zere o equipamento com solução de ácido nítrico 0,2%
v/v. Estabeleça a curva-padrão para cada elemento a ser determinado usando regressão
linear. Recalibre após o número de leituras definido pelo laboratório. Caso necessário,
dilua a amostra para que a leitura fique inserida na faixa linear da curva-padrão.
Curva-padrão – Prepare as soluções-padrão de trabalho para a curva com seis pontos a

partir da uma solução-padrão intermediária, levando em consideração a sensibilidade
do equipamento e a faixa linear de trabalho para o elemento. As soluções são prepara-
das em ácido nítrico a 0,2% v/v, no dia do ensaio.
Nota: é recomendável que a curva-padrão compreenda o limite estabelecido pela legislação
Cálculo
Como o metal é determinado diretamente na água coletada, o valor lido no equipamento

é o próprio valor da concentração, a não ser que alguma diluição tenha sido necessária.
Neste caso, deve-se multiplicar o valor da leitura obtida pelo fator da diluição.

ASSOCIATION, WATER ENVIRONMENT FEDERATION. Standard Methods
for the Examination of Water and Wastewater. 19th ed. Washington, DC: APHA,
1995, chapter 3, p. 22-27.
PERKIN ELMER. The THGA Graphite Furnace: Techniques and Recommended

Conditions for Atomic Spectroscopy. Norwalk, U.S.A., 1991.
213/IV Identificação de cianeto – Prova de Pertusi-Gastaldi
IAL - 405
Material
Pipetas graduadas de 1 mL e placa de toque.

Reagentes
Solução de acetato de cobre 30% m/v

Solução saturada de acetato de benzidina em ácido acético a 10% m/v
Procedimento – Em uma placa de toque, coloque uma gota de acetato de cobre a

30% m/v, cinco gotas da solução saturada de acetato de benzidina em ácido acético a
10% e 0,5 mL da amostra. Em presença de íons cianeto, aparecerá uma coloração azul
característica.
Nota: os oxidantes e os ânions que complexam com o cobre (I) também reagem nesta
prova. São interferentes: iodetos, sulfetos, etc
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1:

Métodos químicos e físicos para análise de alimentos, 3.ed. São Paulo: IMESP, 1985, p.
327-328.
214/IV Determinação de sulfatos
Material
Béquer de 400 mL, balões volumétricos de 500 e 1000 mL, pipetas volujmétricas de
1, 2 e 5 mL, proveta de 10 mL, filtro, filtro de papel Whatman nº 40, cápsula de por-
celana de 250 mL, bico de Bünsen, banho-maria e mufla.
Reagentes
Solução de ácido clorídrico (1+1)

Indicador metilorange
Solução de cloreto de bário – Dissolva 100 g de cloreto de bário em água bidestilada e

deionizada. Complete o volume até 1000 mL com água bidestilada e deionizada. Filtre
a solução antes de usar.
Nota: 1 mL desta solução precipita aproximadamente 40 mg de íon sulfato.
406 - IAL
Solução de nitrato de prata – Pese 8,5 g de nitrato de prata, transfira para um balão de
500 mL, adicione 0,5 mL de ácido nítrico e complete o volume com água bidestilada
e deionizada.
Procedimento
Preparação da amostra – Se a amostra contiver sílica em concentração superior a

25 mg/L, remova-a evaporando a amostra em banho-maria, até próximo da secura.
Junte 1 mL de solução de ácido clorídrico (1+1), gire a cápsula para que o ácido
entre em contato com o resíduo contido nos lados internos da cápsula e continue
a evaporação até a secura. Adicione 20 mL de água bidestilada e deionizada e re-
serve. Se a amostra contiver matéria orgânica, evapore e leve diretamente ao bico
de Bünsen, junte 2 mL de água bidestilada e deionizada e 1 mL de solução de
ácido clorídrico (1+1). Evapore novamente até secura, em banho-maria, junte 2
mL de água quente e filtre. Lave a sílica insolubilizada com várias porções de água
bidestilada e deionizada quente e reserve. Se a amostra for turva, clarifique-a por
decantação ou filtração. Em se tratando de águas contendo íons sulfato em concen-
tração menor que 200 mg/L, o volume da amostra usado para esta determinação
não deve exceder 150 mL.
Determinação de íons sulfato – Transfira, 200 mL da amostra para um béquer de

400 mL. Evapore até aproximadamente 20 mL. Ajuste o pH para 4,4, com adição
de ácido clorídrico (1+1), usando metilorange como indicador. Adicione mais 1
mL de solução ácido clorídrico (1+1). Aqueça a solução até a ebulição, agitando
suavemente. Adicione solução de cloreto de bário, quente, até que a precipitação
esteja completa. Junte mais 2 mL da solução de cloreto de bário. Deixe o precipi-
tado digerir em banho-maria a (80–90)°C, preferivelmente durante a noite, porém
nunca menos que 2 horas. Junte pedaços de papel de filtro Whatman nº 40 ao
precipitado contido no béquer. Filtre em papel Whatman nº 40, lave o precipitado
no filtro com porções de água bidestilada e deionizada quente até que as águas de
lavagem estejam livres de íon cloreto. Faça o teste com solução de nitrato de prata.
Seque o papel de filtro em estufa 105°C e transfira para uma cápsula de porcelana
de 250 mL tarada, previamente aquecida em mufla a 550°C, durante uma hora.
Esfrie em dessecador e pese.
Cálculo
N x 5 x 1000 = mg de sulfato de bário por 1000 mL da amostra

N = massa, em gramas, do resíduo.
IAL - 407
INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analíticas do Instituto Adolfo Lutz. v.1:

Métodos químicos e físicos para análise de alimentos, 3.ed. São Paulo: IMESP, 1985,
p.329-330.
Colaboradores
Maria Anita Scorsafava; Jaim Lichtig; Berenice Mandel Brígido; Cristina Eico Yokosawa; Francisco
Lopes Dias Jr.; Isaura Akemi Okada; Joel Batista da Silva; Liliana Brancacio Bacetti; Maria Cristina
Duran; Maria de Lourdes Burini Arine; Maria do Rosário Vigeta Lopes; Roberto Carlos Fernandes
Barsotti; Rute Dal Col; Tereza Atsuko Kussumi; Valéria Pereira da Silva Freitas; Paulo Tiglea; Alice
Momoyo Ata Sakuma; Carmen Silvia Kira; Franca Durante de Maio; Heloísa Helena Barretto de
Toledo; Janete Alaburda; Kátia Regina Marton de Freitas Martins; Linda Nishihara; Maria de Fátima
Henriques Carvalho; Maria de Lourdes Paixão da Silva; Marina Miyuki Okada; Rosângela Aguilar da
Silva; Sônia Otero Bio Rocha; Teresa Marilene Bronharo e Vera Regina Rossi Lemes
408 - IAL
CAPÍTULO
IX
BEBIDAS
ALCOÓLICAS
IAL - 409
410 - IAL
IX
Capítulo IX - Bebidas Alcoólicas
BEBIDAS ALCOÓLICAS
E
stão incluídos neste capítulo os métodos de análise para: aguardentes de cana, de
melaço, de frutas, arac, bagaceira, conhaque, pisco, rum, tequila, tiquira e uísques.
As determinações efetuadas nas bebidas alcoólicas destilo-retificadas são as mesmas
que se fazem nas alcoólicas fermento-destiladas. As determinações usuais efetuadas
nestes produtos são, entre outras, densidade, grau alcoólico, extrato seco (ou resíduo seco),
glicídios totais, cinzas, acidez total, acidez volátil, metanol, componentes secundários: és-
teres, aldeídos, furfural e álcoois superiores, além de carbamato de etila ou uretana, cobre e
outros contaminantes inorgânicos (cap. XXIII).
215/IV Bebidas fermento-destiladas – Densidade relativa a 20°C/20ºC com picnô-

metro
A densidade em relação à água pura é uma ferramenta utilizada para determinar a %

de álcool em soluções hidroalcoólicas, a uma dada temperatura. Pode ser medida por vários
aparelhos, sendo os seguintes os mais usados: picnômetro, densímetro de leitura direta e
hidrômetro calibrado.

O método com picnômetro consiste na medida da massa de um volume conhecido de
líquido num recipiente denominado picnômetro. O mesmo é calibrado em relação à massa da
água pura a 20 ºC. Da relação destas massas e volumes resulta a densidade relativa à água.
IAL - 411
Material
Balança analítica, termômetro, dessecador e picnômetros de 25, 50 ou 100 mL
Reagentes
Álcool
Éter
Procedimento – Lave o picnômetro, enxágüe com álcool e, posteriormente, com éter.

Deixe secar naturalmente e pese. Encha o picnômetro com água a 20°C e pese. Lave e seque
o picnômetro e proceda da mesma forma com a amostra.
Cálculo
m am = massa do picnômetro com a amostra

m p = massa do picnômetro vazio
m H O = massa do picnômetro com a água
2
Nota: a densidade relativa a 20°C é expressa no mínimo com quatro casas decimais.
ASSOCIATION OF OFFICIAL ANALYTICAL CHEMISTS. Official methods of

analysis of the Association of Official Analytical Chemists (method 945.06) Gaithersburg:
A.O.A.C., 2005, Revision 1, 2006, chapter 26. p. 2.
216/IV Bebidas fermento-destiladas – Densidade relativa a 20°C/20°C com densíme-

tro de leitura direta
A densidade a 20°C é determinada pela medida da freqüência da oscilação do tubo

em U do densímetro preenchido com a amostra, comparada com as freqüências de oscila-
ção quando preenchido com água pura ou com padrões determinados.
Material
Densímetro automático digital de leitura direta com injetor automático, opcional, e seringas
de 10 a 15 mL.
412 - IAL

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VI

Capítulo VI - Análise sensorial

No olho humano, ocorre um fenômeno complexo se um sinal luminoso incide

A mucosa do nariz humano possui milhares de receptores nervosos e o bulbo olfati-

É toda sensibilidade cutânea humana. É o reconhecimento da forma e estado dos

Preparo e apresentação de amostras

Os procedimentos de preparo e apresentação de amostras são etapas críticas e de-

• Amostra representativa e, se necessário, acompanhada da amostra de referência ou pa-

• Modo de preparo adequado da amostra e, de preferência, conforme a orientação do

• Amostras servidas em recipientes próprios ou os comumente utilizados nas refeições

• Antes da apresentação da amostra verifique e controle a temperatura, sendo um im-

• As condições ambientais devem ser controladas antes da análise sensorial levando em

Quadro 1 – Faixas de temperaturas indicadas para avaliação do odor e sabor em alguns

Fonte: Instituto Adolfo Lutz (Baseado em ELLIS, 1961).

Formação da equipe sensorial

• Verifique se o candidato revela boa forma de expressão, habilidade verbal e vocabulário

• O candidato deve apresentar boas condições de saúde, ausência de gripes e alergias,

Método subjetivo utilizado para avaliar as características sensoriais de alimentos,

Aparência – Refere-se às propriedades visíveis como o aspecto, cor, transparência, brilho,

do dia, natural ou artificial. Na avaliação, geralmente, são utilizadas cabines especiais de

Textura oral e manual – Refere-se às propriedades reológicas e estruturais (geométricas

Quadro 2 – Atributos de aparência, textura e cor comuns a produtos alimentícios

Aparência / Textura Cor*

* Relativa à tonalidade, luminosidade e saturação ou pureza. A cor pode ser primária

Exemplos: consistente = propriedade de fluxo detectada pela estimulação dos recep-

Quadro 3 – Atributos de odor e sabor comuns a alguns produtos alimentícios

154/IV Análise das características sensoriais

Ficha 1 – Modelo para teste de características sensoriais

Amostra: Julgador: Data:

Os testes sensoriais discriminativos ou de diferença são considerados métodos objeti-

155/IV Testes discriminativos – Teste triangular

Ficha 2 – Modelo para teste triangular

Amostra: Julgador: Data:

__________ __________ __________

Fonte: ABNT, NBR 12995, 1993.

Quadro 4 – Modelo de casualização e resultado do teste triangular

Tabela 1 – Teste triangular (unilateral, p = 1/3). Número mínimo de julgamentos

156/IV Testes discriminativos – Teste duo-trio

Procedimento – O teste duo-trio detecta diferença sensorial entre uma amostra e um

Ficha 3 – Modelo para teste duo-trio

Fonte: ABNT, NBR 13169, 1994.

Quadro 5 – Modelo de casualização e resultado do teste duo-trio

Tabela 2 – Teste duo-trio (unilateral p = 1/2). Número mínimo de julgamentos corretos

Nº total de Níveis de probabilidade (α)

157/IV Testes discriminativos – Teste de ordenação

Procedimento – O teste de ordenação avalia três ou mais amostras, simultaneamente,

Ficha 4 – Modelo para teste de ordenação

Amostra: Julgador: Data:

________ ________ ________ ________

Fonte: ABNT, NBR 13170 / 1994.

Quadro 6 – Modelo de casualização e tabulação de resultado do teste de ordenação

nº Nome do julgador Ordem de apresentação Comentários

Teste de Friedman – Com o número de amostras ou tratamentos avaliados (t) e o núme-

Quadro 7 – Módulos de diferenças entre somas das ordens de amostras

Amostras (A) (B) (C) (D)

158/IV Testes discriminativos – Teste de comparação pareada

Procedimento – O teste de comparação pareada pode ser direcional, detectando

Ficha 5 – Modelo para teste de comparação pareada

Amostra: Julgador: Data:

__

Códigos das amostras: /

___ ( ) _ ( ) _____ ( )