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1. RESUMO

O presente relatrio busca expor a aula prtica de Bioqumica Bsica, na qual foram
realizados procedimentos que visaram o entendimento do exame EAS, nas suas trs etapas:
fsica, qumica e sedimentoscopia. O qual de fundamental importncia na vida profissional
de um Biomdico.

1. INTRODUO TERICA
A anlise da urina para o diagnstico de doenas tem sido usada por muitos
sculos, sendo um dos procedimentos laboratoriais mais antigos utilizado na prtica mdica. A
amostra de urina pode ser considerada com uma bipsia do trato urinrio, obtida sem a
necessidade de procedimento invasivo. Seu exame fornece informaes importantes, de forma
rpida e econmica, seja para o diagnstico e monitoramento de doenas renais e do trato
urinrio seja para a deteco de doenas sistmicas e metablicas no diretamente
relacionadas com o rim.
Como a exatido da anlise da urina dependente da qualidade da amostra, todos
os cuidados devem ser tomados para que a amostra de urina seja colhida, armazenada e
transportada adequadamente.
Tipos de amostras de urina A amostra de escolha para realizao do exame de
urina a primeira urina da manh, de jato mdio, aps perodo no inferior a 4 horas de
permanncia da urina na bexiga. recomendado que a coleta seja realizada aps 8 horas de
repouso, isto , antes da realizao das atividades fsicas habituais do indivduo e,
preferencialmente, em jejum.
Na impossibilidade de se colher a primeira urina da manh, pode-se obter,
alternativamente, amostra de urina dita aleatria. Neste caso a coleta pode ser realizada em
qualquer momento do dia.
A amostra obtida de colheita aleatria pode ser usada para a anlise, porm est
mais freqentemente associada com resultados falso negativos e falso positivos. Visando
minimizar estes resultados recomenda-se que a amostra de urina seja colhida aps perodo no
inferior a 4 horas da ltima mico.
Outros mtodos de coleta de urina incluem: cateterismo vesical, puno
suprapbica e o uso de sacos coletores peditricos. Para todos, a coleta requer
obrigatoriamente a assistncia de profissional do laboratrio treinado adequadamente.
Com exceo da puno suprapbica e do cateterismo vesical, as amostras de
urina so obtidas pelo paciente atravs de mico espontnea. Assim, o laboratrio deve
prover orientaes suficientes, ou mesmo acompanhar a coleta, visando garantir amostra de
urina livre de contaminao fecal, secreo vaginal, esmegma, plos pubianos, ps, leos,
loes e outros materiais estranhos. No se deve recuperar urina de fraldas.

O EAS o exame de urina mais simples. Colhe-se 40-50 ml de urina em um

pequeno pote de plstico. Normalmente solicitamos que se use a primeira urina da manh e
que se despreze o primeiro jato. Essa pequena quantidade de urina serve para eliminar as
impurezas que possam estar no canal urinrio. Em seguida enche-se o recipiente com o jato
do meio.
No obrigatrio que seja a primeira urina do dia.
A urina deve ser colhida idealmente no prprio laboratrio, pois quanto mais
fresca estiver, mais confivel so seus resultados. Um intervalo de mais de 2 horas entre a
coleta e a avaliao normalmente invalidam qualquer resultado, principalmente se urina no
tiver sido mantida sob refrigerao.
O EAS divido em 3 etapas. A primeira, o teste fsico feito a olho nu, a segunda
atravs de reaes qumicas e a terceira por visualizao de gotas da urina pelo microscpio.
Na primeira parte a olho nu verifica-se a cor, aspecto e cheiro.
A cor da urina emitida por indivduos normais varia de amarelo-citrino a amarelo
mbar fraco, segundo a concentrao de pgmentos urocrmicos e, em menor medida de
urbilina, uroeritrin, uroporfirinas, riboflavinas, etc. Quandoe m repouso a urina escurece
provavelmente pela oxidao de urobilinognio. Existem vrios fatores e constituintes que
podem alterare a cor da uirna, incluindo substncias ingeridas, atividade fsica, assim como
diversos compostos presentes em situaes patolgicas. As cores comumente encontradas so:
Amarelo clara: encontrada em pactes poliricos, diabetes melito e inspido,
insuficincia renal avanada, elevado consumo de lquidos, medicao diurtica e ingesto de
lcool.
Amarelo escuro ou castanho: freqente nos estados oligricos, anemia perniciosa,
estados febris, incio de ictercia (presena anormal de bilirrubina), exerccio vigoroso e
ingesto de arirol, mpacrina, ruibarbo e furandantonas.
Alaranjada ou avermelhada: comum em presena de hematria, hemoglobinria,
mioglobinria, ictercias hemolticas, porfirinrias, e no empredgo de anilina, eosina,
fenolftalena, rfocina, sulfanol, tetranol, trional, xantonina, beterraba, vitamina A, derivados
de piridina, nitrofurantona, fenindiona e contaminao menstrual.
Marrom-escuro ou enegrecida: ocorrre no carcioma de bexigam glomerulonefrite
aguda, meta-hemoglobonria, alcaptonria, febres palustres, melanoma maligno e uso de
metildopa ou levodopa, metronidazol, argirol e salicilatos.

Azulada ou esverdeada: deve-se infeco por pseudomonas, ictercias antigas,

tifo, clera e pela a utilizao de azul de Evans, azul de metileno, rboflavina, amitripilina,
metocarbamol, cloretos, infican, fenol e santonina (em pH cido).
Esbranquiada ou branco leitosa: est presente na quilria, lipidria macia,
hiperoxalria primria, fosfatria e enfermidades purulentas do trato urinrio.
Volume: A medida do volume urinrio apresenta interesse, somente quando
tomada do volume total emitido nas 24 horas, em funo da dosagem, ou na verificao de
nictrias, polirias e oligrias. Mede-se o volume urinrio em clices ou provetas graduadas
de boa procedncia, tomando-se o cuidado de utilizar vidrarias rigorosamente limpa, quando
h necessidade de realizao de outros exames.
Aspecto: - Lmpido (transparente)
- Opaco
- Ligeiramente turvo
- Turvo
- Muito Turva
- Leitoso
O aspecto de urina normal e recentemente emitida lmpido. Decorridas algumas
horas aps a emisso, a turvao da urina perde seu significado diagnstico, ocorrendo
precipitao dos colides protetores, pela perda de CO2 e consequentemente, a facilitao para
a precipitao de sais, fosfatos, caboidratos e uratos, que podero surgir com a mudana de
pH, formando grandes depsitos.
Quando a urina alcalina, em geral h precipitao de fosfatos alcalinos, terrosos
normalmente excretados.
A urina cida normal tambm pode mostrar-se turva devida precipitao de
uratos amorfos, cristais de oxalato de clcio ou cido rico. Alm dos cristais amorfos, outras
substncias causam turvao na urina leuccitos, hemcias clulas epiteliais e bactrias.
Tambm fazem o mesmo efeito os lipdeos, soro muco, linfa e contaminao externa com
talco e material de contraste radiogrfico.
Quando uma amostra de urina recentemente emitida apresenta turvao motivo
de preocupao. Causas de turvao urinria:
1- Urina cida (urato amorfo e material de contraste radiogrfico)
2- Urina alcalina (fosfato amorfos)
3- Termossolveis (uratos amorfos, cristais de c. rico)

4- Solvel em c. Actico diludo (hemcias, fosfatos amorfos, carbonatos)

5- Insolvel

em

c. Actico

diludo

(leuccitos,

bactrias,

leveduras,

espermatozide)
6- Solvel em ter (lipdeos, linfa, quilo)
Uma urina transparente, nem sempre significa normalidade.
Na segunda etapa parte mergulha-se na urina uma fita (dipstick). Cada fita possuiu
vrios quadradinhos coloridos compostos por substncias qumicas que reagem com
determinados elementos da urina. Aps 1 minuto, compara-se a cores dos quadradinhos com
uma tabela de referncia que costuma vir na embalagem das prprias fitas do EAS.
Atravs destas reaes e com o complemento do exame microscpico, podemos
detectar a presena e a quantidade dos seguintes dados da urina:
-Densidade
- pH
- Glicose
- Protenas
- Hemcias (sangue)
- Leuccitos
- Cetonas
- Urobilinognio e bilirrubina
- Nitrito
- Cristais
- Clulas epiteliais e cilindros
Os resultados do dipstick so qualitativos e no quantitativos. A fita identifica a
presena dessas substncias, mas a quantificao apenas aproximada. O resultado
normalmente fornecido em uma graduao de cruzes de 0 a 4.
Vamos, ento, aos valores de referncia:
Bilirrubina: Traos que produzem cor rosada so suficientes para indicar a
presena de bilirrubina na urina e sugerir investigao adicional. A maior parte da bilirrubina
derivada da poro heme da hemoglobina oriunda de hemcias velhas destrudas pelas
clulas do sistema reticuloendotelial do bao, fgado e medula ssea. A bilirrubina no-

conjugada (ou indireta) produzida transportada na corrente sangunea ligada albumina, no

sendo capaz de atravessar a barreira glomerular renal. No fgado, a bilirrubina captada e
conjugada com o cido glicurnico, tornando-se hidrossolvel sendo, ento, capaz de
atravessar os glomrulos renais e aparecer na urina. Normalmente, a bilirrubina conjugada (ou
direta) excretada atravs da bile para o intestino delgado e no est presente na urina. Sua
presena na urina observada quando h aumento da concentrao de bilirrubina conjugada
no sangue (> 1-2 mg/dL) e indica obstruo das vias biliares ou leso de hepatcitos. Desta
forma, a deteco de bilirrubina na urina importante na suspeita de doenas hepticas e na
investigao das causas de ictercia.
Cetonas: As cetonas (cidohidroxibutrico, cido acetoactico e acetona) so
produtos do metabolismo incompleto de lipdeos e sua presena na urina est relacionada com
condies metablicas, nas quais lipdeos, ao invs de carboidratos, so usados como fonte de
energia, como ocorre no diabetes mellitus no controlado, alcoolismo, jejum prolongado
(desidratao, vmitos, diarria e febre) e raras doenas metablicas hereditrias. A tira
reagente mais sensvel ao cido acetoactico (>5 mg/dL) que acetona (>50 mg/dL). A
escala de cores calibrada com o cido acetoactico.
Densidade: A densidade ou gravidade especfica da urina medida atravs da
concentrao de ons e se baseia no fato de que com o aumento da concentrao inica ocorre
aumento da densidade. O teste, que sofre influncia do pH urinrio, est otimizado para
resultados exatos em pH 6,0. A medida da densidade urinria oferece informao limitada
sobre a capacidade de concentrao renal, uma vez que sofre grande influncia do estado de
hidratao do paciente. A densidade pode variar de 1.001 a 1.035, sendo geralmente
encontrada entre 1.015 e 1.022 em indivduos com ingesto hdrica normal. Na disfuno
renal, como observada no diabetes mellitus, diabetes insipidus e hiperaldosteronismo, h
perda da capacidade de concentrar a urina sendo, ento, detectados valores fixos iguais ou
menores que 1.010.
Glicose: A glicose livremente filtrada pelos glomrulos e reabsorvida pelos
tbulos renais. Quando a concentrao de glicose no sangue alcana valores entre 180 e 200
mg/dL, a capacidade mxima de reabsoro dos tbulos ultrapassada e a glicose aparecer
na urina. Este o mecanismo de glicosria observada no diabetes mellitus. Glicosria na
ausncia de hiperglicemia (glicosria renal) decorrente de distrbio na reabsoro tubular
renal da glicose e pode ocorrer em diversas condies: desordens tubulares renais, sndrome

de Cushing, uso de corticoesterides, infeco grave, hipertireoidismo, feocromocitoma,

doenas hepticas e do sistema nervoso central. Glicosria pode ocorrer , ainda, devido
ingesto de dieta com elevada porcentagem de carboidratos. O limite de deteco da Uriquest
50 mg/dL. Assim, resultados positivos at 50 mg/dL podem ser considerados como
esperados em pessoas sadias.
Leuccitos: A pesquisa da esterase leucocitria um mtodo indireto de deteco
da presena de leuccitos na urina. Esta enzima est presente nos grnulos primrios ou
azurfilos dos neutrfilos, moncitos, eosinfilos e basfilos. Linfcitos e clulas epiteliais
no contm esterase leucocitria. Como os leuccitos podem sofrer lise na urina, a pesquisa
da esterase leucocitria til na deteco de enzima derivada de clulas que no so mais
visveis microscopia. A presena de leuccitos na urina em nmero significativo est
relacionada, mais comumente, com infeco urinria (pielonefrite e cistite). Outros processos
inflamatrios do trato genito-urinrio podem levar ao aumento de leuccitos sem a presena
debacteriria. O limite de deteco da Uriquest se encontra entre 10 e 20
leuccitos/microlitro, portanto, qualquer resultado entre negativo e 25 leuccitos/microlitro
pode ter significado clnico.
Nitrito: Qualquer grau de colorao laranja a rosado indicativo de um resultado
positivo 5 sugerindo uma quantidade 10 organismos por mililitro de urina. Apesquisa de
nitrito representa testebastante til na deteco debacteriria assintomtica. O teste do nitrito
indica presena de bactrias na urina que so capazes de converter nitrato em nitrito , podendo
auxiliar no diagnstico da infeco urinria. Bactrias que convertem nitrato em nitrito
incluem, principalmente, bactrias gram-negativo como Escherichia coli, Proteus, Klebsiella,
Citrobacter, Aerobacter, Samonella, alm de algumas cepas de Pseudomonas e raras de
Staphylococcuse Enterococcus.
pH: Normalmente a urina discretamente cida (pH 5,0 ou 6,0). A determinao
do pH no constitui, isoladamente, ndice da capacidade renal de excreo de cidos,
apresentando valor limitado na investigao de disfunes renais. Urina alcalina
freqentemente indica que a amostra foi mantida temperatura ambiente por mais de 2 horas,
entretanto, quando colhida e armazenada adequadamente, pode sugerir infeco urinria.
Protena: O teste particularmente sensvel albumina e menos sensvel s outras
protenas. Apesar de ocorrer uma excreo de protenas na urina de indivduos sadios (at 15
mg/dL), a Uriquest detecta valores iguais ou maiores que 30 mg/dL. A deteco de protenas

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provavelmente o achado isolado mais sugestivo de doena renal. Proteinria por aumento da
permeabilidade glomerular ocorre em glomerulonefrites, nefrite lpica, amiloidose, obstruo
da veia renal , nefroesclerose , pr-eclmpsia e nefropatia diabtica. Proteinria devida a
desordens tubulares ocorre na pielonefrite, necrose tubularaguda , rimpolicstico, intoxicao
por metaispesados e vitamina D, hipopotassemia,Doena de Wilson, Sndrome de Fanconi e
galactosemia.Outras condies podemlevar a proteinria: proteinriapostural (3 a 5% de
adultos jovenssadios), estado febril, exerccio fsicovigoroso, exposio prolongada ao frio ou
calor, estresse emocional einsuficincia cardaca congestiva.
Sangue: A presena de sangue naurina pode ser confirmada atravsda deteco na
urina de hemciasntegras - hematria (5 hemcias/microlitro de urina) ou de hemoglobinalivre hemoglobinria (0,015mg/dL de urina). A hematria resultade sangramento em qualquer
pontodo trato urinrio desde o glomruloat a uretra, podendo ser devidodoenas renais,
infeco, tumor,trauma, clculo, distrbios hemorrgicosou uso de anticoagulantes.
Ahemoglobinria pode resultar dehemlise intravascular, no tratourinrio ou na amostra de
urina apsa colheita. A diferenciao entrehematria e hemoglobinria clinicamente
importante, porm, como as hemcias na urina so rapidamente lisadas, a ausncia
dehemcias microscopia no afasta hematria ou confirma a hemoglobinria.
Urobilinognio: A bilirrubinaconjugada liberada no intestinodelgado com a bile
desconjugadapor ao de bactrias da microbiotaindgena intestinal. A bilirrubinalivre ,
ento,

reduzida

urobilinognio,estercobilinognio

emesobilirrubinognio

que

so

transformados em pigmentos que do a cor habitual das fezes. Parte do urobilinognio

produzido retorna ao sangue, atravs da circulao enteroheptica. A maior parte do
urobilinognio reabsorvido removido pelo fgado e uma pequena poro excretada na
urina (<1 mg/dL). Quando h produo elevada de bilirrubina (anemias hemoltica e
megaloblstica) observa-se aumento do urobilinognio reabsorvido, com conseqente
aumento da eliminao deste na urina. Nas disfunes ou leses hepticas (hepatites, cirrose e
insuficincia cardaca congestiva), o fgado torna-se incapaz de remover o urobilinognio
reabsorvido tornando sua pesquisa na urina positiva. Outras condies onde h aumento do
urobilinognio urinrio incluem: estados de desidratao e febril. O teste da Uriquest no
afetado por interferentes que produzem resultados falso positivos na reao de Ehrlich.
Resultados iguais ou maiores que 2,0 mg/dL devem ser considerados como positivos ou
patolgicos.

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2. MATERIAIS E MTODOS
Amostra biolgica
Fita reagente

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Estante para 20 tubos

Centrfuga para 16 tubos de 10 15 ml
Lminas
Lamnulas
Pincel para retroprojetor
Tubos de ensaio PVC cncavos c/ tampa
Papel toalha
Nas amostras disponibilizadas no

laboratrio

foi

realizado

POPS

(Procedimentos Operacionais Padro), tambm chamado de fase pr-analtica, onde

identificou-se a amostra com nome, idade e sexo com pincel no corpo e na tampa dos
coletores, foi feita a preparao da a amostra onde as amostras foram transferidas para tubos
de ensaio de 10 mL identificados, acondionando-as em estante para tubos de ensaio. Em
seguida foram feitos o teste fsico e qumico. Para o teste qumico foi utilizado fita reagente
(figura 1). O teste fsico foi feito a olho nu.

Figura 1: Fita reagente para urinlise.

A anlise do sedimento (Sedimentoscopia) foi realizada de acordo com as
diretrizes do NCCLS (National Committee for Clinical Laboratory Standards USA) GP16A24, onde 10 mL de amostra de urina centrifugada por 5 a 15 minutos a 1480 rpm (rotaes
por minuto) e aps o descarte do sobrenadante, o centrifugado (0,5 mL) ressuspendido e 20
L da suspenso so colocados entre lmina e lamnula para anlise microscpica em um
aumento de 400 vezes.
3. RESULTADOS E DISCUSSES
No teste fsico, a olho nu foi identificada a cor amarelo claro, aspecto lmpido de
cheiro sui gneris, caracterizando uma amostra de urina normal. A urina normal
essencialmente composta de gua, tem colorao varivel entre o incolor e o amarelo
(dependente da dieta, atividades fsicas e principalmente da ingesto de gua), e carreia
substncias de excreo, resultantes do metabolismo do organismo.

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No teste qumico feito com fita reagente, obeteve-se os resultados (tabela 1):
Tabela 1: Resultado do Teste Qumico
Resultado do Teste Qumico
Densidade
pH
Glicose
Protenas
Sangue
Bilirubina
Urobilinognio
Nitrito
Leuccitos
cido ascrbico

Resultado
1025
6
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Ausente

Valor de referncia
1.005 a 1.035;
5-7
Ausente
Menos que 10 mg/dL ou 0,05 g/L
Menos que 10.000 clulas por mL
Negativo
Normal
Negativo
Menos 10.000 clulas por mL
-

O pH na fita reagente tem a cor salmo, no resultado apresentou a cor salmo

claro, estimando a quantitativa de pH 6,0 considerado normal.
A densidade na fita indicada pela cor verde escuro, no resultado apresentou uma
colorao verde oliva, estimando quantitativamente uma densidade de 1,020, considerada
normal.
A protena indicada pela cor amarela, no resultado permaneceu a mesma cor
indicando normalidade para protena.
A glicose representada pela cor verde piscina, no resultado a cor permaneceu
inalterada, indicando glicose normal.
A cetona indicada pela cor rosa, que tambm permaneceu inalterada.
O sangue representado pela cor amarela permanecendo inalterada no resultado.
A bilirubina, o urobilinognio, o nitrito e o leuccito tambm permaneceram
inalterados, indicando resultado normal para a amostra analisada.

Tabela 2: Microscopia do Sedimento (Sedimentoscopia)

Clulas epiteliais
Muco

SEDIMENTOSCOPIA
Resultado
Positivo
Ausente

Valor de referncia
-

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Hemcias
Leuccitos
Bactrias
Leveduras
Trichomonas
Cilindros
Cristais

3 a 5 por campo
Positivo
Flora bacteriana aumentada
Ausente
Ausente
Presente
Presente

Menos que 3 a 5 hemcias por campo

Menos de 5 clulas por campo
Ausente
Ausente
Ausente
Ausente

Na sedimentoscopia, o resultado indicou a presena de bactrias, uma grande

quantidade de picitos (figura 2), raras hemcias (figura 3) e presena de clulas epiteliais
(figura 4), indicando uma infeco urinria, contradizendo o teste qumico que apresentou
tudo ausente. E isso se deve a algum problema na fita reagente, para qual deve-se ter os
seguintes cuidados e precaues:
As tiras devem ser armazenadas no recipiente original que deve ser mantido bem
tampado;
As reas reagentes so estveis e mantm o desempenho especificado at a data de
expirao indicada no rtulo quando o frasco mantido em temperaturas inferiores a 30 C.
No armazenar em refrigerador.
Remover do frasco somente a quantidade de tiras necessria para uso imediato;
Exposio das tiras luz solar direta,vapores qumicos e umidade ambiental pode
afetar as reas de reao ; No tocar nas reas de reao;
Usar somente urina recente, bem homogeneizada e no centrifugada. Observar o
tempo correto de leitura das reaes. Para a tira Uriquest a leitura das reaes deve ser feita
em 60 segundos e entre 60 e 120 segundos para Leuccitos. No realizar a leitura aps 120
segundos.

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Figura 2: Picito

Figura 3: Hemcias

Figura 4: Clula Epitelial

4. CONCLUSO
O conhecimento deste tipo de exame essencial para a vida profissional de um biomdico.
Deve-se ter boa infra-estrutura de modo a promover uma adequada condio de trabalho, armazenamento e

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processamento do material alm de equipamentos calibrados e matria-prima especfica e de qualidade. A

uroanlise simples, rpida e de fcil diagnostico para presena de alteraes, porm com muita cautela deve
ser realizada. A correta anlise da lmina trar resultados que se analisados em conjunto com outros exames
podero dar informaes importantes para que o profissional de sade possa fazer o diagnostico preciso e
garantir o melhor tratamento para o paciente.

5. REFERNCIAS

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HENRY, J. B. Diagnsticos Clnicos e Tratamentos por Mtodos Laboratoriais. So

Paulo: Ed. Manole, 1999.
MEDEIROS, A. Semiologia do Exame Sumrio de Urina. Rio de Janeiro, Guanabara, 1981.
MOURA, R de A. Tcnicas de Laboratrio. 3. ed. So Paulo: Atheneu, 2002.
MULLER, O. Laboratrio para o Clnico. 8. ed. So Paulo: Atheneu, 1999.
VALLADA, EP. Manual de Exames de Urina. 4. ed. So Paulo: Atheneu, 1999.