Prática #03

PRTICA N 03
Titulao potenciomtrica de um aminocido

I - OBJETIVOS Entender o conceito de pK; Identificar, pelos valores de pK, os grupamentos ionizveis de um aminocido; Calcular o pI de um aminocido e sua carga em vrios valores de pH; Determinar experimentalmente os valores pK da valina atravs da curva de titulao.
II - INTRODUO Os aminocidos so os principais constituintes das molculas proticas, apresentam em sua constituio dois grupos funcionais caractersticos, o grupamento carboxlico (COOH) e o grupamento amnico (NH2), a nica exceo a prolina, que contm um grupo imino (-NH-) no lugar do grupo amino; alm disso, alguns aminocidos podem apresentar ainda outros grupos ionizveis importantes. Em pH fisiolgico, esses grupos esto na forma ionizada: -NH3+, -COO- e NH2+, no caso da prolina. Portanto, os aminocidos so anflitos, ou seja, eles se comportam como cidos (doador de prtons) e como bases (receptor de prtons). Tanto a forma cida como a bsica de um aminocido apresentam um pK caracterstico, que pode ser determinado experimentalmente atravs de titulao com cido ou com uma base forte. Estas constantes podem ser identificadas atravs da curva de titulao, uma vez que nestes pontos a capacidade tamponante mxima. Quando a dissociao de um aminocido d origem a quantidades iguais de cargas negativas e positivas no conjunto das molculas, a espcie inica que predominar a do on duplo (zwitterion), o qual no apresenta carga eltrica lquida. O pH onde a concentrao deste on mxima chama-se ponto isoeltrico, e na curva de titulao do aminocido, corresponde ao ponto mdio entre dois valores do pH, referentes aos respectivos pKs. Os aminocidos tm frmula bsica comum, na qual os grupos amino e carboxila esto ligados ao carbono , ao qual tambm se liga um tomo de hidrognio e um grupo varivel chamado cadeia lateral ou grupo R. Os aminocidos so classificados, de acordo com a polaridade do grupo R, em duas grandes categorias: aminocidos apolares (grupo R hidrofbico) e aminocidos polares (grupo R hidroflico) Os aminocidos apolares tm grupos R constitudos por cadeias orgnicas com carter de hidrocarboneto, que no interagem com a gua. Tm normalmente uma localizao interna na molcula de protena. Pertencem a este grupo: glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, metionina, prolina, fenilalanina e triptofano. Os aminocidos polares so os que tm, nas cadeias laterais, grupos com carga eltrica lquida ou grupos com cargas residuais, que os capacitam a interagir com a gua. So geralmente encontrados na superfcie da molcula protica. Estes aminocidos so subdivididos em trs categorias, segundo a carga apresentada pelo grupo R em soluo neutra: aminocidos bsicos (lisina, arginina, histidina); aminocidos cidos (cido glutmico e cido asprtico) e aminocido polares sem carga (serina, treonina, tirosina, cistena, glutamina e asparagina)
CURVA DE TITULAO Como exemplo, vejamos a titulao da serina: pH

1,0
ponto
1
formas inicas predominante

COOH H3N
+
CH2OH 100%
2,19 2
COOH H3N
+
COO H3N C H CH2OH

50%
C H CH2OH
50%
5,70
COO H3N
+
CH2OH 100%
9,21 4
COO H3N
+
COO H2N C H CH2OH
CH2OH
50%
12 5
50%
COO H2N C H CH2OH 100%
Como podemos observar na titulao da serina, originalmente colocada em meio fortemente cido (ponto 1), o aminocido apresenta carga positiva. Com a adio de uma base at o pH 2,19 (ponto 2), temos concentraes iguais da forma protonada e no protonada do grupo -carboxlico. E este valor de pH corresponde ao pK do grupo carboxlico.
Continuando a adio de base atingimos o pH 5,70, onde existe igualdade de cargas, portanto, o ponto isoeltrico, a carga lquida da aminocido zero. Esse ponto corresponde a um pH cujo valor a mdia aritmtica do valor de dois pK, no caso pk1 e pk2. Aps mais adio de base o pH vai at o valor de 9,21 que o pK do grupo amnico, onde as concentraes da forma protonada e desprotonada so novamente iguais. Se continuarmos a titulao at o ponto 5, onde o valor do pH ser maior que o pK NH2 o aminocido ficar com carga negativa. III - MATERIAIS E REAGENTES Material: agitador magntico becker funil de vidro pequeno pipeta graduada barra magntica bureta suporte universal; pipeta volumtrica piceta Equipamento pHmetro Reagentes: NaOH 0,5 mol.L-1; HCl concentrado; Glicina 0,1 mol.L-1; Solues-tampo para calibrao do pHmetro;
IV - PROCEDIMENTOS EXPERIMENTAIS a) Com uma bureta, transferir 50 mL de soluo de glicina 0,1 mol.L-1 para um bquer de 100 mL. b) Colocar uma barra magntica e levar o bquer ao agitador. c) Colocar o eletrodo na soluo de glicina e adicionar aproximadamente 0,6 mL de HCl concentrado ou quantidade de cido para colocar a soluo com pH 1,2. d) Titular a soluo de glicina com hidrxido de sdio 0,5 mol.L-1 com auxlio de uma bureta. e) Adicionar de 1 em 1 mL a soluo de hidrxido de sdio e anotar os valores de pH obtidos. V Resultados: Fazer um grfico de pH (ordenada) versus volume de NaOH (abscissa) para obter a curva de titulao da glicina. Assinalar, na curva obtida, os valores de pK e pI, e as faixas de pH tamponantes da glicina. Escrever as frmulas da glicina nos vrios valores de pH que correspondem aos pontos 1, 2, 3, 4 e 5 da curva de titulao e determinar sua carga lquida nesses pH.
VI EXERCCIOS 1) Supondo que o pH de uma soluo 5, calcular a concentrao em mol.L-1 de OH-. 2) Calcular a pH de uma soluo de NaOH 0,1 mol.L-1. 3) Supondo que a concentrao mol.L-1 de H+, numa determinada soluo, seja 0,00456. Calcular o pH da soluo. 4) Calcular o pH da soluo tampo formada por cido frmico 0,05 mol.L-1 e formiato de sdio 0,1 mol.L-1. O pK do cido frmico 3,75. 5) A lisina tem trs grupos ionizveis pK1 = 2,2; pK2 = 9,2; pKr = 10,8. - Faa a curva de titulao da lisina e indique seus trs valores de pK. - Escreva a estrutura da lisina em cada estado de ionizao. Qual a carga lquida da molcula de lisina em cada estado de ionizao? - Quando se usa a lisina como tampo, quais os pontos da curva de titulao representam os piores valores de pH para a capacidade tamponante? Quais espcies predominantes nesses pH?

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Titulao potenciomtrica de um aminocido

CURVA DE TITULAO Como exemplo, vejamos a titulao da serina: pH

formas inicas predominante

COO H3N C H CH2OH

COO H2N C H CH2OH

COO H2N C H CH2OH 100%

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