Matériel et méthode :

Analyse physicochimique : eau gazéifiée aromatisée

1. PH (potentiel hydrogène)
 Définition :
Le potentiel hydrogène, noté ph, est une mesure de l’activité chimique des hydrons en solution. Notamment,
en solution aqueuse, ces ions sont présents sous la forme des l’ion hydronium. Plus souvent, le PH mesure
l’acidité ou la basicité d’une solution, et varie entre 0et 14 ;7 étant le PH correspondant à la neutralité. Une
eau est d’autant plus acide que son PH (inférieur à 7 ) est plus prés de 0 est d’autant plus alcalin que sont PH
( supérieur a 7) est plus prés de 14.

 Principe :
C’est la mesure de la différence de potentiel existant entre une électrode de verre et une électrode de
référence plongeant dans une même solution. Le potentiel de l’électrode est lié à l’activité des ions H+.

Mode opératoire (mesure de PH) :

 allumer le PH-mètre.
 Etalonner le PH-mètre avec deux solutions étalons de PH 4 et 7
 Rincée un bécher avec l’eau analysée.
 Prendre un bécher avec l’eau analysée.
 Plonger la sonde du PH-mètre dans l’échantillon.
 Après stabilisation lire le résultat.

 Expression des résultats :

La valeur de PH s’affiche directement sur le pH-mètre.

2. Titre Hydrométrique (TH) :

 Définition :
Le titre hydrométrique total (dureté total) ou TH total est une mesure de l’ensemble des ions alcalin terreux,
c’es-ta-dire les ions calciums et magnésium (ca2+/Mg2+)

 Principe :
Les alcalinoterreuses présentes dans l’eau sont amenées à former un complexe par le sel disodique de l’acide
éthylène diamine tétra-acétique (EDTA) à ph 10.

La disparition des dernières traces d’élément libre à doser est décelée par le virage d’un indicateur
spécifique, le noire Eriochrome T (NET). En milieu convenablement tamponnée par une solution
ammoniacal pour empêche la précipitation du magnésium, la méthode permette de doser la somme des ions
calcium et magnésium.

Réactif utilisés :

 EDTA (0.02N) ;
 Solution tampon ammoniacal ph=10 ;
 Noir eriochrome T (NET) indicateur coloré.
 Mode opératoire :
 Prendre 25ml de l’eau analysée dans un erlenmeyer ;
 Ajouter 3 gouttes de la solution tampon ammoniacal (qui sert à stabiliser le ph durant le
titrage) ;
 Ajouter une pincée d’indicateur NET et agiter manuellement ;
 Si une coloration bleu apparait, le TH est nul (TH=0°F) ;si une coloration violette apparait
(présente d’ion de ca2+ et Mg2+) ;titre le mélange avec EDTA jusqu’au virage de la
coloration violette vers bleu ;
 Enfin, lire le volume titré.
 Expression des résultats :
Le calcul de TH en mg /l de caco3.

TH=Vt*N (EDTA) *Meq (caco3)*FC*1000/PE

 Vt : le volume titré
 N(EDTA) : la normalité de l’EDTA
 Meq : la masse équivalente de caco3
 Fc : le facteure de correction de la solution complexometrique EDTA (indiqué sur la solution
comerciale ; ici c’est 1 )
 Pe : la prise d’essai qui est de 25 ml d’échantillon.
3. Le titre alcalimétrique complet TAC :
 Définition :
TAC (titre alcalimétrique complet) est la teneur d’une eau en hydroxydes, en carbonates et en
bicarbonates ( ou hydrogénocarbonates) alcalins et alcalino-terreux. Le TAC s’exprime en degré
français.

 Principe :

Cette détermination est basé sur la neutralisation du volume d’eau utilisée dans la détermination de
TA par un acide dilué en presence du méthyle orange comme indicateur coloré a PH =4,3
Réactifs utilisés :
 Acide sulfurique (0.02N) ;
 Méthyle orange.

 Mode opératoire :
 La détermination de TAC se fais à la suite de l’analyse H2SO4 ( 0.02N) jusqu'au virage du jaune à
orange ;
 Puis lire la chute de burette.
  Expression des résultats :
Le calcul du TAC :

TAC=Vt*NH2so4*Fe*1000 /PE

4. Les chlorures (cl-) :

 Définition :
Les chlorures sont présents en grande quantité dans l’eau à l’état brut.

La concentration de ces sels est importante dans l’eau ils sont présents sous forme de chlorure de sodium, de
calcium et de magnésium exprimé en mg /l.

 Principe :
Les chlorures sont dosés en milieu neutre par solution titrés de nitrate d’argent en présence de chromate de
potassium. La fin de la réaction est indiquée par l’apparition de la teinte rouge caractéristique du chromate
d’argent (Méthode de Mohr).

 Réactif utilisés :
 Nitrate d’argent AgNO3 (0.014N) ;
 Chromate de potassium.
 Mode opératoire :
 Dans un erlenmyer, prendre 100 ml d’eau analyser ;
 Verser 1ml de solution k2CrO4 ;
 Titrer avec le nitrate d’argent à 0.014N jusqu'au virage du jaune au jaune brune ;
 Puis lire le volume titré.
  Expression des résultats :
Le calcule des chlorures :

cl-=N (AgNO3)*Vt*MeqCl*Fc*100/Pe

N : la normalité de AgNO3 ;

Vt : le volume titré ;

Fc : le facteur de correction ;

Meq :la masse équivalente de Cl- ;

Pe : la prise d’essai.

5. Détermination du taux de co2 :

 Définition :
Le co2 à une odeur faiblement piquante lorsquil est concentré, sa saveur est aigre. Il est plus lourd que l’air,
sa densité est 1.5273. Il se trouve sous trois états : solide, liquide, gazeux.

 Principe :
Cette technique se base sur la mesure de pression par le manomètre et de la température du produit. A
chaque couple pression-température correspond à une quantité bien précise de gaz carbonique.

Elle a pour but de déterminer la teneur en gaz carbonations dissout dans la boisson gazeuse.

 Mode opératoire :
On prend une bouteille de produit fini, on l’agite énergiquement, on la perce à l’aide d’un Baromètre doté
d’une barre transversale on laisse stabiliser son aiguille, on lit la valeur de la pression, on retire la barre
transvsale et on ouvre le robinet de décompression progressivement à proximité d’un éviter jusqu'à ce que
la pression atteigne 0. On enlève le baromètre et on introduit une sonde de température, on note la valeur de
la température.

Al ‘aide d’une règle de mesure de co2 on lit la valeur correspondante au couple (pression, température).

6. La spectrophotométrie

est une méthode analytique quantitative qui consiste à mesurer l'absorbance ou la densité optique d'une
substance chimique donnée, généralement en solution. Plus l'échantillon est concentré, plus il absorbe la
lumière dans les limites de proportionnalité énoncées par la loi de Berr-Lambert. La densité optique des
échantillons est déterminée par un spectrophotomètre préalablement étalonné sur la longueur d'onde
d'absorption de la substance à étudier. Tous les dosages qu’on va pratiquer, leurs lectures se fait avec le
spectrophotomètre. Il faut toujours préparer un témoin avec un blanc pour

la valeur de référence.
 Généralement, on utilise cette méthode pour les paramètres de pollution.

Spectromètre : De type à prisme, à réseau ou a filtré. Capable de recevoir des cuves optiques de 10 mm à
50mm d’épaisseur.

Le spectromètre choisi, doit convenir pour la mesure de l’absorbance dans les régions du spectre visible et
proche de l’infrarouge.la longueur d’onde la plus sensible et 880 nanomètres (nm), mais, si une perte de
sensibilité est admissible, l’absorbance peut être mesurée à 700nm. A l’aide du spectrométre.mesurer
l’absorbance de chaque solution au bout d’une durée comprise entre 10 min et 30 min. Ou à 700 nm si une
perte de sensibilité est admissible .utiliser toujours un témoin avec l’échantillon à analyser pour la valeur de
référence. (Journal officiel, 18 ramadhan 1439).

Les indicateurs de pollution :

Les nitrates

 Définition :
Les nitrates (ou de azote nitrique) représentent la forme azotée souvent la plus présent dans les eaux
gazéifiée aromatisée .les nitrates constitue le composant principal de l’azote inorganique (N
inorganique ou minéral).
 Principe :
En présence de salicylate de sodium, les nitrates donnent du paranitrosalicylate de sodium, coloré en
jaune et susceptible d’un dosage spectrométrique.
  Mode opératoire
 Après avoir allumé le spectrophotomètre, sélectionner le programme (longueur d’onde spécifique
qui est de 500 nm).
 Remplir une cuvette de 1cm avec 10ml de l’échantillon.
 Ajouter le contenu d’une pochette de réactif nitra ver dans la cuve.
 Agiter pour bien mélanger et essuyer les parois des cuvettes avec du papier joseph.
 Démarrer le minuteur, une période de réaction de 5mn commence. Entre temps remplir une autre
cuvette avec 10 ml de l’échantillon.
 Quand le minuteur alerte par une simple sonnerie, lancer le blanc dans le puits de mesure de presser
sur la touche 0.
 Mettre la cuve dans le puitspressésur la touche mesuré et lire directement la valeur affichée.
 Expression des résultats :

La valeur qui s’affichera sera la teneur de nitrate contenu dans cette eau minérale .elle est exprimée en
mg/l NO3-

Les sulfates

 Principe :

Les sulfates sont précipités en milieu chlorhydrique à l’état de sulfate de baryum. Les suspensions
homogènes sont mesurées au spectrophotomètre.

 Mode opératoire

Le temps de réaction est de 5 minutes avec le réactif sulfa ver 4 ou sulfate et ensuite faire la lecture.

 Expression des résultats

La valeur qui s’affichera sera la teneur des sulfates contenu dans cette eau gazéifiée aromatisée. Elle est
exprimée en mg/L. la lecture se fait à une longueur d’onde de 450 nm dans des cuves de 1cm.une turbidité
blanche apparaitra en présence de sulfate. Indication à l’écran 0 mg/L SO42-

L’analyse microbiologique dune eau aromatisée gazéifiée

a) Clostridium Sulfito-Réducteurs (C.S.R) :
Les cloqtridiume sulfito-réducteur possèdent une intense activité protéolytique qui se traduit par la
production de l’H2S. Elle sont capable de détruire le sulfite de sodium, cette réaction est mise en évidence
par formation de sulfure de fer dans un milieu contenant du sulfite de sodium et un sel de fer (Guiraud,
2003).
LE dénombrement des clostridium sulfito-réducteurs a été effectué sur le milieu viande foie (VF) avec l,
incorporation de deux additifs (1ml d’un fer 5ml de sulfite de sodium pour un flacon de 250ml de milieu).
Pour chaque échantillon.

 Principe :
Les clostrudium solfito-réducteur sont capables de réduire les sulfites présents dans le milieu de culture en
surfaces ; ceux-ci combinet anec un sel de fer pour donner du sulfure de fer noir. Les colonies noir entourées
d’un halo noir sont caractéristique de bactéries sulfito-réducteurs(ou anaérobies sulfito-réducteurs), de
clostridium ou de C.prefringens après confirmation selon les conditions de recherche (Dellaras, 2007).

 Mode opératoire :
 Verser 20ml d, echantillon en ajoute 20ml de gélose viande foi (VF) dans un flacon stérile
 Laisser le flacon refroidir sans bouger et solidifier.
 Incuber à 37°c à 48h.