Manuscri Yamani - Souad

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‫الجمهورية الديمقراطية الشعبية الجزائرية‬

République Algérienne Démocratique et Populaire


‫وزارة التعليم العالي والبحث العلمي‬
Ministère de l'Enseignement Supérieur et de la Recherche
Scientifique
‫جامعة ابوبكر بلقايد – تلمسان‬
Université ABOUBEKR BELKAID - TLEMCEN
‫كلية العلوم الطبيعية وعلوم الحياة وعلوم األرض والكون‬
Faculté des Sciences de la nature et de la vie, des Sciences de la Terre et l'univers
Département de Biologie

MEMOIRE
Présenté par :

Melle SENHADJI Souad Melle YAMANI Souad

En vue de l’obtention du

Diplôme de MASTER

Filière : Sciences Alimentaires.


Option : Agro-Alimentaire et Contrôle de Qualité.

Thème :
Evaluation de l’activité antioxydante de l’huile essentielle d’une
espèce endémique de la région de Tlemcen « Pulicaria vulgaris »

Soutenu le : 27/06/2020

Devant le jury composé de :

Melle Ghanemi Fatima MCB Université de Tlemcen Présidente


Mme Chaib Faiza MCB Université d'Oran Encadreure

Mr Belyagoubi larbi MCA Université de Tlemcen Examinateur

Année Universitaire: 2019-2020


Remerciement

Nous tenons à exprimer nos profond et sincère remerciement à notre encadreur,


madame CHAIB FAIZA maitre de conférences classe B à l’université d'Oran d’avoir
dirigé ce travail en combinant l’ingénierie, la recherche scientifique l’enseignement.

Par sa disponibilité, ses conseils et ses idées innovantes tout au long de notre
travail, nous avons appris avec elle comment développer nos sens d’écoute, d’analyse et
de communication.

Nous adressons nos remerciements pour tous les membres du jury d’avoir accepté
de participer à cette soutenance, afin d’évaluer et d’examiner notre travail.

Melle GHANEMI F.Z. Maitre de conférences classe B, à l’université de Tlemcen,


pour l’honneur de présider les jurys.

A Mr BELYAGOUBI Maitre de conférences classe A, à l’université de Tlemcen,


votre venue en tant qu’examinateur.

Nous vifs remerciements d’adresses au Melle GHANEMI FATIMA ZAHRA pour


tous ces aides, ses orientations, sa gentillesse, et ses conseils.

Nous remerciement vont également à Mr GHALEM et Mr ALLALI de nous avoir


autorisé d’accéder au laboratoire LASNABIO. Ainsi qu’à la promotion MASTER
agroalimentaire et contrôle de qualité.

Enfin, nous exprimons nos remerciements à tous ceux qui contribué de près ou de
loin à l’élaboration de ce travail.
Dédicaces
Au nom de Dieu, le clément, le très miséricordieux

A Mes parents NOURADINNE et SALIHA

Aucune dédicace ne saurait exprimer mon respect, mon amour éternel et ma considération
pour les sacrifices que vous avez consenti pour mon instruction et mon bien être. Je vous
remercie pour tout le soutien et l’amour que vous me portez depuis mon enfance et j’espère
que votre bénédiction m’accompagne toujours. Que ce modeste travail soit l’exaucement de
vos vœux tant formulés, le fruit de vos innombrables sacrifices, bien que je ne vous en
acquitte jamais assez.

A Ma grande sœur SALIMA

Pour son dévouement, sa compréhension et sa grande tendresse, qui en plus de m'avoir


encouragé tout le long de mes études. Elle M’a consacré beaucoup de temps et disponibilité.

A Ma petite sœur RACHIDA et mon petite frère AMINE

A Ma chère cousine SOUAD et Ma meilleure amie ILHAM

A mes amies chacune son nom pour leurs aides précieuses

A toute ma famille pour leur soutien tout au long de mon parcours universitaire

A tous ceux qui ont contribué, de près ou de loin à l'élaboration de ce Travail.

Senhadji Souad
Dédicaces

Je dédie ce modeste travail

A mes parents qui m’ont toujours soutenu tout long ma vie

Abdel krim et Yamna

A mes sœurs Wassila et Meriem

A mes frères Kheireddine et Mohammed

A mes amis, plus particulièrement Leila et Meriem pour tous les

moments inoubliables

A mes collèges de la promotion Agro-Alimentaire et contrôle de

qualité

Yamani Souad
Liste des Abréviation
AFNOR : Association Française de Normalisation

BHA : Butyl Hydroxy Toluène

BHT : Butyl Hydroxy Anisol

DPPH : 2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyle

H2O2 : peroxyde d’hydrogène.

HE : Huile Essentielle.

HPLC : Chromatographie en phase liquide à haute performance

OH : radicale hydroxyle.

TBHQ : Ter Butyl-Hydroxy-quinone

IC50 : La concentration inhibitrice de 50%

CPG : Chromatographie en phase gazeuse

CPG/SM : Couplage de la chromatographie en phase gazeuse à la spectrométrie de masse

I
Liste des figures

Figure 01 : Structure de l'unite isoprène ................................................................................................... - 5 -


Figure 03 : structure générale d'un sesquiterpène ..................................................................................... - 6 -
Figure 02 : Exemple d'un monoterpène acyclique à gauche (myrcène) et monoterpène cyclique à droite(ρ-
cimène) .............................................................................................................................................. - 6 -
Figure 04 : Structure d’un phénol terpénique, le thymol .......................................................................... - 7 -
Figure 05 : structure de citronellal ............................................................................................................ - 8 -
Figure 06 : structure d'une cétone terpénique, la menthone ..................................................................... - 8 -
Figure 07 : Structure d’un ester terpénique, l’acétate de linalyle ............................................................. - 9 -
Figure 08 : structure d’alantolactone ........................................................................................................ - 9 -
Figure 09 : Structure des composés aromatiques dérivés de phénylpropane ......................................... - 10 -
Figure 10 : structure général de Coumarine ........................................................................................... - 10 -
Figure 11 : schéma du principe de la technique d'hydro distillation ...................................................... - 11 -
Figure 12 : Schéma d'extraction d'huile essentielle par expression ........................................................ - 12 -
Figure 13 : Illustration schématique de la méthode de distillation par la vapeur d'eau .......................... - 13 -
Figure 14 : Illustration schématique de la méthode d'extraction par solvant ......................................... - 13 -
Figure 15 : montage d’extraction par le CO2 supercritique .................................................................... - 14 -
Figure 16 : illustration schématique de L’hydrodistillation assistée par micro-ondes ........................... - 15 -
Figure 17 : photos originales de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana sèche ............................................... - 22 -
Figure 18 : Biotope de Pulicaria vulgaris subsp. Pomeliana .................................................................. - 22 -
Figure 19 : Photo de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana ........................................................................... - 25 -
Figure 20 : montage d'hydrodistillation (appareil de type Clevenger) ................................................... - 26 -
Figure 21 structure chimique du radical libre DPPH• (2,2 Diphenyl-1-Picryl-Hydrazyle) ................... - 28 -
Figure 22 : modification du DPPH• lors du transfert électronique ......................................................... - 28 -
Figure 23 : Piégeage du radical libre DDPH (2,2-Diphenyl-1picryhydrazil) ......................................... - 29 -
Figure 24 : Pourcentage d’inhibitions du DPPH en fonction des concentrations de l’HE de P. vulgaris ssp
pomeliana ........................................................................................................................................ - 34 -
Figure 25 : Pourcentage d’inhibitions du DPPH en fonction des concentrations de l’HE de P. vulgaris
ssp pomeliana .................................................................................................................................. - 35 -

II
Listes des tableaux

Tableau 01 : exemple des antioxydants naturels et synthétiques ........................................................... - 18 -

Tableau 2 : Classification botanique Pulicaria vulgaris ssp pomeliana ................................................ - 23 -

Tableau 03 : Comparaison des caracteristiques organoleptiques des différentes especes de Pulicaria .. - 33 -

Tableau 04 : Les valeurs d’IC50 de l’HE et des témoins positifs ........................................................... - 36 -

III
Table de matière
Remerciement

Dédicaces

Dédicaces

Liste des abréviations

Liste des figures

Liste des tableaux

Introduction……………………………………………………………………………………………...- 1 -

Chapitre 01 : Généralités sur les huiles essentielles ------------------------------------------------------------- - 4 -

1 Définition : ------------------------------------------------------------------------------------------------------- - 4 -

2 Les différentes familles des huiles essentielles : ------------------------------------------------------------ - 5 -


2.1 Composés terpéniques : ----------------------------------------------------------------------------------- - 5 -
2.1.1 Les monoterpènes : ------------------------------------------------------------------------------------- - 5 -
2.1.2 Les sesquiterpènes : ------------------------------------------------------------------------------------ - 6 -
2.2 Les composés terpéniques oxygénés : ------------------------------------------------------------------ - 6 -
2.2.1 Les Alcools : --------------------------------------------------------------------------------------------- - 7 -
2.2.1.1 Les monoterpénols :------------------------------------------------------------------------------- - 7 -
2.2.1.2 Les sesquiterpénols : ------------------------------------------------------------------------------ - 7 -
2.2.1.3 Les diterpénols : ----------------------------------------------------------------------------------- - 7 -
2.2.2 Les phénols : --------------------------------------------------------------------------------------------- - 7 -
2.2.3 Les aldéhydes : ------------------------------------------------------------------------------------------ - 8 -
2.2.4 Les Cétones : -------------------------------------------------------------------------------------------- - 8 -
2.2.5 Les oxydes :---------------------------------------------------------------------------------------------- - 8 -
2.2.6 Les esters : ----------------------------------------------------------------------------------------------- - 9 -
2.2.7 Les lactones : -------------------------------------------------------------------------------------------- - 9 -
2.3 Les composés aromatiques : --------------------------------------------------------------------------- - 10 -
2.3.1 Les Coumarines :-------------------------------------------------------------------------------------- - 10 -
2.4 Les composés d’origines diverses : ------------------------------------------------------------------- - 10 -

3 Les méthodes d’extractions des huiles essentielles : ----------------------------------------------------- - 11 -


3.1 Les méthodes classiques et conventionnelles : ------------------------------------------------------ - 11 -
3.1.1 Hydrodistillation :------------------------------------------------------------------------------------- - 11 -
3.1.2 L’expression : ----------------------------------------------------------------------------------------- - 11 -
3.1.3 Distillation par entrainement à la vapeur d’eau : ------------------------------------------------- - 12 -
3.1.4 L’extraction par solvant : ---------------------------------------------------------------------------- - 13 -
3.2 Les Méthodes innovantes : ----------------------------------------------------------------------------- - 14 -
3.2.1 L’extraction par CO2 à l’état supercritique : ------------------------------------------------------ - 14 -
IV
3.2.2 Hydro distillation assistée par micro-ondes : ----------------------------------------------------- - 15 -
3.2.3 L’extraction sans solvant assistée par micro-ondes : -------------------------------------------- - 15 -

4 Les activités biologiques des huiles essentielles. --------------------------------------------------------- - 16 -


4.1 Les activités antimicrobiennes et antiseptiques : ---------------------------------------------------- - 16 -
4.2 Les huiles essentielles en tant que pesticides verts : ------------------------------------------------ - 16 -
4.3 L’activité anticancéreuse : ------------------------------------------------------------------------------ - 16 -
4.4 Activité antioxydante : ---------------------------------------------------------------------------------- - 17 -

5 Les applications industrielles des huiles essentielles : --------------------------------------------------- - 18 -


5.1 Dans les parfums et les cosmétiques : ---------------------------------------------------------------- - 18 -
5.2 En aromathérapie et pharmacie : ---------------------------------------------------------------------- - 18 -
5.3 En agriculture : ------------------------------------------------------------------------------------------- - 19 -
5.4 En industrie agroalimentaire :-------------------------------------------------------------------------- - 19 -
5.5 Emballages actifs contenant des huiles essentielles et applications : ---------------------------- - 19 -

1 Description de la famille Astéracée : ----------------------------------------------------------------------- - 21 -

2 Espèce Pulicaria vulgaris ssp pomeliana : ---------------------------------------------------------------- - 21 -

3 Description botanique : --------------------------------------------------------------------------------------- - 21 -

4 Habitat et répartition : ---------------------------------------------------------------------------------------- - 22 -

5 La nomenclature : --------------------------------------------------------------------------------------------- - 23 -

6 La systématique : ---------------------------------------------------------------------------------------------- - 23 -

1 Matériel végétal : ---------------------------------------------------------------------------------------------- - 25 -

2 Procédé d’extraction : ---------------------------------------------------------------------------------------- - 25 -

3 Rendement en huile essentielle : ---------------------------------------------------------------------------- - 26 -

4 Caractéristiques organoleptiques : -------------------------------------------------------------------------- - 26 -

5 Les méthodes d’évaluation de pouvoir antioxydant : ---------------------------------------------------- - 27 -


5.1 Mesure de l’activité antioxydante par Piégeage du radical libre DDPH (2,2 diphenyl-1-
picrylhydrazyle) : ------------------------------------------------------------------------------------------------ - 27 -
5.1.1 Principe : ----------------------------------------------------------------------------------------------- - 27 -
5.1.2 Protocole : ---------------------------------------------------------------------------------------------- - 29 -
5.1.3 Le pourcentage d’inhibition : ----------------------------------------------------------------------- - 29 -
5.1.4 Calcule de IC50 :--------------------------------------------------------------------------------------- - 30 -

1. Rendement de l’huile essentielle : -------------------------------------------------------------------------- - 32 -

2. Analyse organoleptique -------------------------------------------------------------------------------------- - 32 -


V
3. Evaluation de l’activité antioxydante : --------------------------------------------------------------------- - 33 -
3.1. Étude de l’activité antioxydante par la méthode du piégeage du radical libre DPPH : -------- - 33 -
3.2. Calcule d’IC50 : ------------------------------------------------------------------------------------------ - 35 -
3.3. Discussion : ----------------------------------------------------------------------------------------------- - 36 -

Conclusion………………………………………………………………………………………………-40-
Référence bibliographique……………………………………………………………………………...-42-

Résume

VI
INTRODUCTION
Introduction générale

De nos jours, la tendance de l’utilisation des produits naturels issus des plantes est en pleine
croissance face au souci des effets cancérigènes et toxiques des composés synthétiques qui peuvent être
nocifs à la santé humaine.

En effet, la demande industrielle de ces composés à forte valeur ajoutée est bien réelle, et ceci grâce
à la multiplicité de leurs usages dans de nombreux secteurs tels que la pharmacie, le cosmétique, la
parfumerie et l’agroalimentaire.

L’Algérie, est reconnue par sa diversité variétale en plantes médicinales et aromatiques estimée à
plus de 3000 espèces appartenant à plusieurs familles botaniques (Arab et al, 2014)

Un grand nombre de ces plantes médicinales aromatiques et épices cultivées ou spontanées


possèdent des propriétés biologiques très intéressantes : antiseptiques, antifongiques, anti-inflammatoires,
et antioxydant. L’évaluation des effets biologiques de ces plantes présente aujourd'hui une tache très
intéressante.

La filière des huiles essentielles est un créneau potentiellement lucratif, commencent à avoir
beaucoup d’intérêt comme source potentielle des molécules naturelles bioactives. Quel que soit le secteur
d’activité, l’analyse des HEs reste une étape majeure qui, malgré les progrès constants des différentes
techniques d’identification et de séparation et d’évaluation, demeure toujours une opération délicate
nécessitant la mise en œuvre simultanée ou rotatoire des diverses techniques.

L’oxydation des lipides est l’un des problèmes majeurs en agroalimentaire, à cause de la formation
des produits d’oxydation qui sont responsables des odeurs indésirables et de la diminution des qualités
organoleptique, nutritionnelle et hygiénique des aliments. Pour prévenir le processus de dégradation des
lipides, l’industrie agroalimentaire utilise des antioxydants chimiques à des doses bien définies, ces additifs
sont de faible coût et d’une grande stabilité. Néanmoins, tels antioxydants de synthèse peuvent présenter
une certaine toxicité pour l’homme. En effet, le BHT, le BHA, et le TBHQ sont suspectés d’avoir des effets
négatifs sur la santé (Paradiso et al, 2006). De nombreuses études s’orientent vers la recherche
d’antioxydants naturels parfaits, à la fois sûrs et efficaces

Notre travail s’inscrit dans le cadre de la recherche des antioxydants naturels, on s’intéresse à l’étude
de l’huile essentielle d’une espèce de la famille des astéracées Pulicaria vulgaris ssp pomeliana, une plante
rarissime, endémique et surtout menacée de la région de Tlemcen. Cette plante n’a pas fait objet de travaux
antérieurs. D’autre part il est intéressant d’explorer une valorisation de cette huile essentielle par des essais
d’activités antioxydantes.

Notre étude est réalisée en deux parties, la première partie propose une mise au point
bibliographique. Elle est divisée en deux chapitres.
1
Introduction générale

Le premier chapitre est usité aux huiles essentielles, les différentes techniques d’extraction, les
propriétés biologiques, leurs compositions chimiques et enfin ses différentes applications industrielles.

Le deuxième chapitre est consacré à l’étude de la plante et la description botanique de l’espèce,


L’habitat et répartition, la systématique.

La deuxième partie du travail est réservée à l’étude expérimentale, dans laquelle nous avons
effectué : une extraction et une analyse organoleptique de la plante. Ensuite, nous avons évalué le pouvoir
antioxydant de notre extrait par le test de réduction de la 2,2-diphényl -1-picrilhydrazyle (DPPH). Enfin,
les résultats obtenus sont commentés et discutés, on termine par une conclusion générale

Initialement notre objet est de mener une étude phytochimique et l’évaluation de l’HE de Pulicaria
vulgaris ssp pomeliana par plusieurs tests antioxydants : DPPH, FRAP, ABTS.
Comme étant des spécialistes en agro-alimentaire nous voulons compléter ces activités anti-
oxydantes par le test de friture, malheureusement on était obligé d’arrêter toutes les manipulations au niveau
du laboratoire en raison de la pandémie mondiale COVID19.

2
Synthèse
Bibliographique
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

Chapitre 01 : Généralités sur les huiles essentielles

1 Définition :

Il est difficile de donner une définition précise au terme « l’huile essentielle ». En effet la notion d’HE
peut différer avec le point de vue au quel se place des personnes de formation professionnelle.

Selon Durvelle (1930, 1893) les essences ou huiles essentielles, connues également sous le nom d’huiles
volatiles, de parfums …etc, sont des substances odorantes huileuses, volatiles, peu solubles dans l’eau, plus
au moins solubles dans l’alcool et dans l’éther.

Elles sont en général incolores ou colorées en jaune pâle, mais on distingue autres couleurs telles que le
bleu pour la camomille allemande et tanaisie, celle de sarriette sont rouges, la bergamote est d’un très jolie
vert pâle, et les cannelles sont orange (Riotte, 2015).

Ces essences sont inflammables, elles s’altèrent facilement à l’air en se résinifiant. Elles sont liquides à
température ordinaire, quelques-unes sont solides ou en partie cristallisées. Elles n’ont pas le toucher gras
et onctueux des huiles fixes dont elles se distinguent par leur volatilité. Leur odeur plus ou moins forte,
suave, piquante ou désagréable. Elles ont la propriété de ne pas laisser de tâche durable sur le papier.
(Bousbia, 2011). Leur densité et généralement inférieure à celle de l’eau, à l’exception de certaines
essences telles que : l’amande amère, de cannelle, de sassafras qui sont plus lourdes que l’eau (Faye et al,
1997).

D’après Conner (1993) les huiles essentielles sont des produits odorants issus de métabolite secondaire,
formés dans des cellules spécialisées ou bien un groupe de cellules. On les trouve généralement dans les
fleurs et les feuilles et même dans les fruits, le bois, l’écorce, les racines ou les rhizomes et les graines
(Marouf et Tremblin, 2009).

Les huiles essentielles sont multiplexes, c'est-à-dire elles sont composées de divers éléments,
principalement à l'état liquide, mais peuvent également contenir des particules solides. Les rendements des
HEs qui sont obtenus actuellement à la température ambiante peuvent apparaitre incolores à jaune clair.
Elles sont facilement absorbées par l'épiderme. Les attributs physiques des huiles essentielles comprennent
une force de rotation et un indice de réfraction élevés (Naeem et al, 2018).

L’Association Française de Normalisation (AFNOR) a défini les huiles essentielles comme étant : «
Produit obtenu à partir d’une matière première végétale, soit par entraînement à la vapeur, soit par des
procédés mécaniques à partir de l’épicarpe de citrus, soit par distillation sèche. L’huile essentielle est
ensuite séparée de la phase aqueuse par des procédés physiques n’entraînant pas de changement significatif
de sa composition...» (Afnor, 2000).

-4-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

2 Les différentes familles des huiles essentielles :

La composition d’une huile essentielle est un mélange très complexe. (Couic-Marinier et Lobstein,
2013).

Grâce à la structure chimique et sa configuration spatiale, on peut expliquer l’activité thérapeutique des
différentes molécules qui constituent les huiles essentielles (Attanasio, 2018).

Selon Libbey Eurotext (2009) elles sont constituées des composés suivants : les composés terpéniques,
les compose terpéniques oxygénés, les composés aromatiques et des composés d’origine diverse.

2.1 Composés terpéniques :

Les terpènes sont très répandus dans l'ensemble des huiles essentielles. Ce sont des hydrocarbures ayant
respectivement dix et quinze atomes de carbone. De formule générale (C5H8)n. Leurs structures sont très
variables mais tous sont issus de l’assemblage de sous-unités isopréniques et du métabolisme du glucose.
Ils ont une action stimulante et toxique. Certains ont des propriétés antivirales même à très basse
concentration (Moro Buronzo, 2008 ; Libbey Eurotext,2009).

Leur classification est basée sur le nombre de unité isoprène (figure1) qui les compose : hémiterpènes
(C5), monoterpènes (C10), sesquiterpènes (C15), diterpènes (C20), sesterpènes (C25), triterpènes(C30),
caroténoïdes(C40) et les polyisoprènes(Cn) (Deschepper, 2017).

Figure 01 : Structure de l'unité isoprène

2.1.1 Les monoterpènes :

Ils sont les principaux constituants de l’huile essentielle (90%). Ils sont présents dans des nombreux
végétaux. Ils sont formés de deux unités d'isoprène(C10H16), ils peuvent être cycliques (myrcène) ou
monocycliques (thymol et ρ-cimène) (figure 2), ou bicycliques (camphène). Ils sont légèrement
antiseptiques, stimulants expectorants. Ils peuvent être irritants pour la peau et les muqueuses. (Moro
Buronzo, 2008 ; Libbey Eurotext, 2009)

-5-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

Figure 02 : Exemple d'un monoterpène acyclique à gauche (myrcène) et monoterpène


cyclique à droite (ρ-cimène)

2.1.2 Les sesquiterpènes :

Ce sont des dérivés hydrocarbures (figure 3) composés de trois unités d'isoprènes (C15H24), ils sont
présents en faible quantité dans HE. Ils présentent des activités bactéricides et anti- inflammatoires (Moro
Buronzo, 2008 ; Libbey Eurotext, 2009)

Figure 03 : structure générale d'un sesquiterpène

2.2 Les composés terpéniques oxygénés :

Ce sont des composés organiques, ils possèdent un groupe caractéristique renfermant un ou


plusieurs atomes d'oxygènes. Ayant la structure des terpènes, ils appartiennent à différentes familles
chimiques.

-6-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

2.2.1 Les Alcools :

Les alcools font partie des dérivés terpéniques (Laurent, 2017). Ils comptent parmi les molécules
les plus bénéfiques en raison de leurs propriétés antiseptiques, antivirales. Ils peuvent être acycliques,
monocycliques ou bicycliques (Moro Buronzo, 2008).

Les alcools de ce groupe se forment lorsque les unités composées d'un atome d'hydrogène et d'un
atome d'oxygène (hydroxydes) se relient à des atomes de carbone de la structure terpénique. On distingue
les monoterpénols, les sesquiterpénols, les diterpénols (Jouault, 2012).

2.2.1.1 Les monoterpénols :

Lorsque l’unité hydroxyle s’attache à un monoterpène, il en résulte un monoterpénol (Jouault,


2012). Les monoterpénols sont des anti-infectieux à large spectre, ils renforcent le système immunitaire.
Ils sont indiqués dans toutes les pathologies bactériennes, virales et fongiques (Laurent, 2017).

2.2.1.2 Les sesquiterpénols :

C’est un composé dérivé de la fixation d'un groupement hydroxyle sur un sesquiterpène, ces
molécules exhibent des propriétés anti-inflammatoires et hépato-protectrices (Jouault, 2012).

2.2.1.3 Les diterpénols :

Formés d'un hydroxyle fixé à un diterpène, les diterpénols sont souvent trop lourds pour être
entraînés par la vapeur d'eau. Ils présentent une analogie structurelle avec certaines hormones stéroïdiennes.
Ils ont une action mimétique (Jouault, 2012).

2.2.2 Les phénols :

Les HEs contiennent majoritairement des phénols terpéniques. Ils ont une action stimulante. Ils sont
antiseptiques et bactéricides. Protégeant l'organisme des contaminations, ces composés sont très irritants
pour la peau et les muqueuses (Moro Buronzo, 2008).

EX : Thym vulgaire à thymol (Thymus vulgaris L) (figure 4).

Figure 04 : Structure d’un phénol terpénique, le thymol

-7-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

2.2.3 Les aldéhydes :

Ils sont formés par l'oxydation des alcools, ce sont des molécules très volatiles qui dégagent souvent
une odeur puissante (Moro Buronzo, 2008). Dans le monde végétal, ils sont assez répandus. Ils ont un
effet relaxant, calmant et anti-inflammatoire. Ils donnent un parfum d'agrume à certaines huiles. Les
aldéhydes terpéniques indiquent le rattachement d’un carbonyle à l’un des carbones de la structure
moléculaire ainsi que la fixation d’un atome d’hydrogène à ce même carbone (Helene, 2015).

EX : l’HE d'Eucalyptus citriodora (eucalyptus citronne) contenant de la citronnellal (figure 5).

Figure 05 : structure de citronellal


2.2.4 Les Cétones :

Ce sont des molécules très actives, ils indiquent la présence d’un carbonyle dans la structure (figure
6), les propriétés s'inversent en fonction de la dose employée. À faible dose, elles sont stimulantes du
système nerveux central, Ils ont un effet relaxant et sédatif (Jouault, 2012).

Figure 06 : structure d'une cétone terpénique, la menthone


2.2.5 Les oxydes :

Les oxydes sont des composés formés de la combinaison d’un oxygène avec une autre substance.
Dans les huiles essentielles, on trouve les monoxydes, les dioxydes et les époxydes terpéniques. Ils ont une
action sur les glandes exocrines des muqueuses respiratoires et digestives. En général, ils ont des propriétés
mucolytiques, expectorantes, antibactériennes et antivirales (Jouault, 2012 et Helene, 2015).

-8-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

2.2.6 Les esters :

Ils agissent directement sur le système nerveux central. Ils sont issus de la réaction d'un acide
carboxylique avec un alcool. Ils ont une action équilibrante, apaisante et ils ont des propriétés anti-
inflammatoires et de régénération des cellules. Les huiles essentielles de la lavande sont riches en esters
(Moro Buronzo, 2008).

EX : l’HE de lavande vraie ou officinale (Lavandula angustifolia) (figure 7) contenant de l’acétate


d’inalyle.

Figure 07 : Structure d’un ester terpénique, l’acétate de linalyle

2.2.7 Les lactones :

Les lactones sont des esters cycliques dérivés de l'acide lactique. Ils contiennent un oxygène
hétérocyclique à côté d'une fonction carbonyle dans un cycle à cinq membranes ou plus (figure 8), il est
saturé ou insaturé (Berger, 2007). Dans la plupart des cas, les lactones sont dégradées au cours du procédé
d’hydrodistillation (Laurent, 2017). Ils ont des propriétés antibactériennes, antifongiques et antivirales.
Ces molécules sont toxiques pour le système nerveux et abortif à forte dose. Ils sont rarement présents dans
les plantes aromatiques (Jouault, 2012).

EX : l’HE d’inule odorante (Inula graveolens Desf.)

Figure 08 : structure d’alantolactone

-9-
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

2.3 Les composés aromatiques :

Les composés aromatiques des huiles essentielles sont principalement des dérivés du phényl-
propane C6-C3. Ils sont beaucoup moins fréquents que les terpènes. Ils peuvent comprendre des phénols
(chavicol, eugénol), des aldéhydes (cinnamaldéhyde), des alcools (alcool cinnamique), des dérivés méthoxy
(anéthol, estragol) ou méthylène dioxy (myristicine, safrole) (Bakkali et al, 2008). La structure des
différentes molécules est illustrée sur la Figure (09).

Figure 09 : Structure des composés aromatiques dérivés de phénylpropane


2.3.1 Les Coumarines :

D’après Bruneton (2009) les coumarines (figure 10) sont issues du métabolisme de la phénylalanine
via un acide cinnamique, l’acide 4-coumarique. La spécificité du processus est l’hydroxylation ensuite
l’isomérisation photocatalysée de la double liaison enfin lactonisation (la réaction est spontanée). Les HEs
contenant des coumarines sont sédatives nerveuses et sont utilisées dans les problèmes d’insomnie (Helene,
2015).

Figure 10 : structure générale de Coumarine

2.4 Les composés d’origines diverses :

Les huiles essentielles renferment certains composés aliphatiques (carbures, alcools, acides, esters,
aldéhydes), ils sont entrainés lors de la distillation (Libbey Eurotext, 2009).

Les composés d’origines diverses résultent de la transformation des molécules non volatiles. Il s’agit
de composé issu de la dégradation d’acide gras ou de terpène. D’autres composés comme les composés
azotés et soufrés peuvent être présents dans la composition des HEs (Helene, 2015).
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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

3 Les méthodes d’extractions des huiles essentielles :

La production et la consommation mondiale d'huiles essentielles augmentent très rapidement. La


technique de production est un élément essentiel pour améliorer le rendement global et la qualité de l'HE
(Rassem et al, 2016). Il existe plusieurs procédés d'extraction des huiles végétales, cette diversité est due à
la variété des matières végétales et à la sensibilité de certain constituant.

3.1 Les méthodes classiques et conventionnelles :

Les techniques traditionnelles relatives au traitement des HEs revêtent une grande importance et
sont encore utilisées dans des nombreux domaines.

3.1.1 Hydrodistillation :

L’hydrodistillation est l'une des méthodes les plus anciennes et les plus simples. Utilisée pour
l'extraction des huiles essentielles, cette méthode consiste à immerger le matériel végétal dans un bain
d’eau, l’ensemble est porté à ébullition. La chaleur permet l’éclatement et la libération des molécules
volatiles contenus dans les cellules végétales. Le mélange volatil est en ensuite refroidi, condensé puis
séparé en une phase aqueuse et une phase organique qui constitue l’huile essentielle. La distillation peut
s’effectuer avec ou sans recyclage de la phase aqueuse obtenue lors de la décantation.

À l’échelle du laboratoire, le système basé sur ce principe qui est généralement utilisé pour
l’extraction des huiles essentielles en accord avec la pharmacopée Européenne est l’appareil de Clevenger
(Marouf et Tremblin, 2009).

Figure11 : schéma du principe de la technique d'hydro distillation (Marouf et


Tremblin, 2009)
3.1.2 L’expression :

L’expression est réservée au péricarpe frais des fruits et agrumes. Cette opération consiste à faire
éclater par différents procédés mécaniques (abrasion, compression, incision, perforation) les « poches » qui

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

sont situées à la superficie de l’écorce de ce fruit et qui renferment l’huile essentielle. L’essence libérée est
ensuite recueillie par un courant d’eau (Marouf et Tremblin ,2009).

Figure12 : Schéma d'extraction d'huile essentielle par expression (Google, 2020)

3.1.3 Distillation par entrainement à la vapeur d’eau :

Dans ce système d’extraction, le matériel végétal est soumis à l’action d’un courant de vapeur
ascendant ou descendant sans macération préalable. Cette technique ne met pas en contact direct l’eau et la
matière végétale, elle est basée sur le fait que la plupart des composés odorants volatils contenus dans les
végétaux sont entrainables par la vapeur d’eau (Chenni, 2016). La matière végétale est répartie à l’intérieur
de l’alambic, supportée par une grille. La vapeur d’eau, venant de la chaudière, est introduite dans l’alambic
à travers une conduite placée au-dessous de la grille. Le flux ascendant de vapeur traverse le lit de matière
végétale et entrain avec l’huile essentielle. Le mélange des vapeurs d’eau et d’huile arrive dans le
condenseur où il est refroidi et condensé. Le distillat est recueilli dans le receveur et sa température est
maintenue à une valeur fixe à l’aide du bain thermostaté. L’huile essentielle est séparée de l’eau de ce
distillat par décantation. Les eaux de condensation accumulées au fond de l’alambic sont
périodiquement évacuées, afin d’éviter tout contact avec la matière végétale (Charchari et Chahboub,
2001).

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

Figure 13 : Illustration schématique de la méthode de distillation par la vapeur d'eau


(Tongnuanchan et Benjakul, 2014)

3.1.4 L’extraction par solvant :

La technique d’extraction « classique » par solvant, consiste à placer dans un extracteur un solvant
volatil et la matière végétale à traiter. Grâce à des lavages successifs, le solvant va se charger en molécules
aromatiques, avant d’être envoyé au concentrateur pour y être distillé à pression atmosphérique. Le produit
ainsi obtenu est appelé « concrète ». Cette concrète pourra être par la suite brassée avec de l’alcool absolu,
filtrée et glacée pour en extraire les cires végétales. Après une dernière concentration, on obtient une «
absolue ». Les rendements sont généralement plus importants par rapport à la distillation et cette technique
évite l’action hydrolysant de l’eau ou de la vapeur d’eau. Parmi les solvants les plus utilisés, on recense :
le méthanol, l’éthanol, l’éther de pétrole ou encore le dichlorométhane (Lucchesi, 2005).

Figure 14 : Illustration schématique de la méthode d'extraction par solvant


(Lucchesi, 2005)

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

3.2 Les Méthodes innovantes :

Depuis que l'économie, la compétitivité, le respect de l'environnement, la durabilité, la haute


efficacité et la bonne qualité sont devenus les mots-clés de la production industrielle moderne, le
développement des techniques d'extraction des huiles essentielles attire l’attention des plusieurs chercheurs
et a permis la mise au point des nouvelles techniques d’extractions beaucoup plus écologiques utilisant des
solvants moins toxiques et en moins grande quantité et aussi pour obtenir des extraits naturels d'une qualité
supérieure.

3.2.1 L’extraction par CO2 à l’état supercritique :

L’extraction par CO2 supercritique est une technique alternative à l’extraction par solvant
organique pour les composés naturels, notamment les plus fragiles (Marouf et Tremblin ,2009). La
technique est fondée sur la solubilité des constituants dans le dioxyde de carbone à l’état supercritique.
Grâce à cette propriété, le dioxyde de carbone permet l’extraction dans le domaine liquide (supercritique)
et la séparation dans le domaine gazeux. Le dioxyde de carbone est liquéfié par refroidissement et comprimé
à la pression d’extraction choisie. Il est ensuite injecté dans l’extracteur contenant le matériel végétal, puis
le liquide se détend pour se convertir à l’état gazeux pour être conduit vers un séparateur où il sera séparé
en extrait et en solvant. L’avantage de cette méthode est la possibilité d’éliminer et de recycler le solvant
par simple compression détente (El haib, 2011).

Figure 15 : montage d’extraction par le CO2 supercritique (El haib, 2011)

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

3.2.2 Hydro distillation assistée par micro-ondes :

Ce procédé basé entièrement sur le principe de l’hydrodistillation classique consiste à placer une
partie du montage d’hydrodistillation dans le four à micro-ondes. Le matériel végétal est donc placé en
présence d’une quantité d’eau suffisante dans un ballon disposé dans une enceinte du four à micro-ondes.
Le système de réfrigération ainsi que la partie prévue pour la récupération des essences sont situés à
l’extérieur du four. Les avantages cités sont la rapidité et la similitude de la composition de l’huile par
rapport à une hydrodistillation classique (Chemat et Lucchesi, 2005).

Figure 16 : illustration schématique de l’hydrodistillation assistée par micro-ondes


(Chamate et Lucchesi, 2005)

3.2.3 L’extraction sans solvant assistée par micro-ondes :

L’extraction des produits naturels assistée par micro-ondes sans solvant et sans eau à pression
atmosphérique, a été développée et brevetée en 2004. Cette méthode décrit une distillation sèche assistée
par micro-ondes qui consiste à placer le matériel végétal dans un réacteur micro-ondes sans ajouter ni eau
ni solvant organique. Le chauffage de l’eau interne à la plante permet la rupture des glandes contenant
l’huile essentielle. Cette étape libère l’huile essentielle qui est ensuite entraînée par la vapeur d’eau produite
à partir de l’eau de la matière végétale. Un système de refroidissement à l’extérieur du four micro-ondes
permet la condensation du distillat, composé d’eau et d’huile essentielle, de façon continue et le retour de
l’excès d’eau à l’intérieur du ballon afin de maintenir le taux d’humidité propre au matériel végétal
(Chemat et Lucchesi, 2005).

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

4 Les activités biologiques des huiles essentielles.

Les plantes médicinales et aromatiques sont utilisées dans différents domaines. La plupart de leurs
propriétés sont dues aux huiles essentielles produites par leur métabolisme secondaire (Sartoratto et al,
2004).

4.1 Les activités antimicrobiennes et antiseptiques :

Les huiles essentielles peuvent agir comme agents antibactériennes contre un large spectre des
souches pathogènes et inhibent leurs croissances et leurs développements par exp Listeria monocytogènes,
Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Staphylococcus aureus…. etc (Properzi et al, 2013). En
général, l'activité antimicrobienne élevée des huiles essentielles est mieux observée chez les bactéries gram-
positives que les bactéries gram-négatives (Tongnuanchan et Benjakul, 2014). Les HEs possèdent les
plus importantes propriétés antimicrobiennes contre les agents pathogènes d'origine alimentaire, ces HEs
contiennent un pourcentage élevé des composés phénoliques tels que le carvacrol et le thymol (Burt, 2007).

D’après Bruneton (2009), la lavande, le thym, la cannelle, l’eucalyptus possèdent des HEs les plus
antiseptiques. Ils sont également actifs sur des champignons responsables des mycoses et sur des levures,
leurs doses actives sont généralement faibles et sont utilisées comme conservateur.

4.2 Les huiles essentielles en tant que pesticides verts :

Les problèmes environnementaux causés par la surutilisation des pesticides ont été le sujet de
préoccupation des scientifiques ces dernières années. Le concept " pesticides verts " suggère d'éviter
l'utilisation de tout pesticide ou bien des produits phytosanitaires afin d'éliminer le taux de toxicité, qui
comportent des risques pour la santé humaine et pour l’environnement.

L'utilisation de nombreuses huiles essentielles ou de leurs composants (terpénoïdes) s'ajoute à ce


concept naturel en raison de leur volatilité, de leur persistance limitée. Les bio- pesticides à partir des huiles
essentielles sont caractérisés par leur faible rémanence (Bessah et Benyoussef, 2015) et leur effet non
toxique pour les mammifères, les oiseaux et les poissons et notamment l’homme. Les huiles (d’eucalyptus
et de la citronnelle) présentent un large spectre d'activité contre les insectes nuisibles, les ravageurs et les
champignons phytopathogènes. Ils interfèrent avec le système nerveux octopaminergique des insectes.

Ces "pesticides verts" peuvent également s'avérer efficaces dans la production des aliments
biologiques (Koul et al, 2008).

4.3 L’activité anticancéreuse :

Les huiles essentielles et leurs composants aromatiques individuels ont montré une inactivité
suppressive du cancer lorsqu'ils ont été testés sur un certain nombre de lignées des cellules cancéreuses
humaines (Hamid et al, 2011). Les huiles essentielles peuvent être utilisées en combinaison avec une
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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

thérapie anticancéreuse afin de réduire les effets secondaires des médicaments. La cytotoxicité des huiles
essentielles est due à leur action sur l'intégrité cellulaire, entraînant la nécrose et l'apoptose, l'arrêt du cycle
cellulaire et la perte de la fonction des organelles clés. C'est pourquoi l'évaluation de l'activité
anticancéreuse des huiles essentielles et de leur innocuité sur des lignées cellulaires normales est d'une
grande importance (Morsy, 2017).

4.4 Activité antioxydante :

L'activité antioxydante des huiles essentielles est une autre propriété biologique de grand intérêt car
elle peut préserver les aliments des effets toxiques des oxydants. De plus, les huiles essentielles peuvent
également piéger les radicaux libres ce qui montre leur rôle dans la prévention des certaines maladies
(Miguel, 2010).

Selon Tongnuanchan et Benjakul (2014), les huiles essentielles ont plusieurs modes d'action en
tant qu'antioxydants, tels que les piégeurs des radicaux libres, les agents réducteurs, l'arrêt des peroxydes,
la prévention de l'abstraction continue d'hydrogène ainsi que les extincteurs de la formation d'oxygène
singlet et la liaison des catalyseurs d'ions de métaux de transition. Grâce à ces fonctions, les huiles
essentielles peuvent servir d'antioxydants naturels potentiels, qui peuvent être utilisés pour prévenir
l'oxydation des lipides dans les systèmes alimentaires.

D’après Halliwell (1990), les antioxydants sont définis comme « toute substance qui, en faible
concentration par rapport au substrat susceptible d’être oxydé, prévient ou ralentit l’oxydation de ce
substrat ».

En fonction de leur origine, les antioxydants sont classés :

Des antioxydants synthétiques : habituellement utilisés, sont des composés phénoliques. Vu leur
efficacité, leur faible coût et leur disponibilité, ils sont largement utilisés dans les aliments comme
additifs dans le but de prévenir la rancidité (Guo et al, 2006).

Des antioxydants naturels : ce sont les plus préférés par rapport aux produits synthétisés, ainsi les
sources sont nombreuses et variées, on les trouve dans les fruits (pommes, poires, fruits rouges…..),
les légumes (brocoli, oignon….), les boissons (café, thé, vin…) ainsi que dans les épices, le cacao
ou encore les céréales (Desmier, 2016)

- 17 -
Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

Tableau 01 : exemple des antioxydants naturels et synthétiques

Synthétique Naturel
BHA (Butyl Hydroxy Toluène) Caroténoïde (β- carotène)
BHT ((Butyl Hydroxy Anisol) Polyphénols et flavonoïdes
TBHQ (Ter Butyl-Hydroxy-quinone) Vitamine E
Les ester d’acide gallique Acide ascorbique (vitamine C)
5 Les applications industrielles des huiles essentielles :

L’intérêt grandissant de la population pour les produits de santé naturel et bio a contribué au
développement de l’industrie des huiles essentielles ces dernières années. La composition chimique de l’HE
lui confère des propriétés intéressantes, ce qui l'a rendu utilisé dans nombreux secteurs industriels tels que
l’industrie agroalimentaire, cosmétique et pharmaceutique, chimique et agricole, et dans les produits
d’hygiènes.

5.1 Dans les parfums et les cosmétiques :


L’industrie des cosmétiques, savonneries et parfums constituent le plus gros consommateur d’huiles
essentielles. Il représente 60 % de la demande totale en substances naturelles (Bessah et Benyoussef, 2015).

Actuellement, près de 300 huiles essentielles ont une importance commerciale et sont utilisées
comme matière première de base en parfumerie ou dans les produits cosmétique ou hygiéniques. Ce secteur
se caractérise par une très grande variété des produits, à titre d'exemple l’huile de d'ylang- ylang et l'HE de
vétiver, très utilisable en cosmétologie et en parfumerie et en savonnerie elles jouent le rôle de fixateur
naturel.

Les HEs servent aussi en hygiène, en esthétique corporelle sous forme de lotions, d'eaux florales,
des crèmes, des gels, des pommades (Kenoufi, 2018).

5.2 En aromathérapie et pharmacie :

Les vertus thérapeutiques des huiles essentielles sont connues depuis très longtemps, représentent
la base de la médecine traditionnelle (Mnayer, 2014). Le marché mondial des médicaments traditionnels à
base des plantes est estimé à 60 000 millions de dollars. (Bessah et Benyoussef, 2015). L’utilisation des
HEs dans différentes pathologies (digestive, infectieuse, cancer…) fait appel à leurs propriétés : anti-
infectieuses, antalgiques, anti-inflammatoires, sédatives, antimicrobiens, antispasmodiques et
antioxydants. Peuvent être utilisées directement comme agents thérapeutiques, mais aussi comme matière
première pour la synthèse des principes actifs.

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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

L’industrie pharmaceutique emploie également les huiles essentielles sous un nombre grandissant
des formes (complexes à vaporiser, pastilles, gélules, dentifrices, etc…). Ces préparations contenant des
huiles essentielles répondent à la règlementation des médicaments à base de plante (Deschepper, 2017).

5.3 En agriculture :
Certaines huiles essentielles et/ou leurs composants présentent un large spectre d’activité contre les
insectes nuisibles, les champignons pathogènes et les nématodes (Marouf et Tremblin, 2009).

Selon Deschepper (2017) l’utilisation des huiles essentielles dans le domaine de l’agriculture est
encore débutante mais est appelée à se développer. En effet, le contexte règlementaire actuel incite
fortement à développer des produits phytosanitaires d’origine naturelle comme alternative au moyen de
lutte chimique. Actuellement Les HEs sont testés sur différentes cibles : les insectes, les champignons, les
bactéries, les adventices et également pour la conservation des semences.

5.4 En industrie agroalimentaire :

Les maladies d'origine alimentaire sont un problème de santé publique dans le monde entier. Un
contrôle efficace est nécessaire par l’utilisation de plusieurs techniques de conservation durant la fabrication
et le stockage des produits alimentaires. Cependant, la perception négative des consommateurs pour les
additifs synthétiques a suscité un intérêt croissant pour trouver des alternatives naturelles (Cherrat, 2013).

Les HEs sont utilisées dans une très vaste gamme des denrées alimentaires, comme la préparation
des boissons alcoolisées, les sodas, les confiseries et les soupes préparées etc. Des divers nombres des
composants de ces huiles essentielles ont été enregistrés par la commission européenne pour être utilisés
comme arômes et exhausteurs des goûts dans les denrées alimentaires, par exemple le linalool, thymol,
l'eugénol, carvone, le cinnamaldéhyde, vanilline, le carvacrol, le citral et le limonène. Les effets
organoleptiques indésirables peuvent être limités par une sélection rigoureuse des HEs en fonction du type
d'aliment.

D’autre part, les huiles essentielles des différentes sources peuvent être exploitées aussi comme
additifs naturels dans les industries agroalimentaires et comme un agent de conservation des divers produits,
grâce à leurs propriétés antimicrobiennes, antivirales, antifongiques, insecticides, et anticancéreuses.

5.5 Emballages actifs contenant des huiles essentielles et applications :

La capacité des huiles essentielles des plantes à protéger les aliments contre les micro- organismes
pathogènes et d'altération a été signalée par plusieurs chercheurs.

D’après Tongnuanchan et Benjakul (2014), un emballage actif contenant de l'huile essentielle peut
être appliqué pour prolonger la durée de conservation et maintenir la qualité des aliments, tels que la viande,
le poisson et leurs produits. Les films peuvent servir de support à divers agents antimicrobiens et
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Chapitre 1 Généralités sur les huiles essentielles

antioxydants qui peuvent maintenir la qualité fraîche, prolonger la durée de conservation des produits et
réduire le risque de croissance des agents pathogènes.

Pour améliorer les propriétés de ces emballages, des composés ou des extraits sont incorporés non
seulement pour augmenter la bio-activité mais aussi pour modifier la propriété des biomatériaux utilisés
pour les emballages.

Des matériaux hydrophobes tels que les huiles essentielles ont été incorporés pour améliorer la
propriété de barrière à la vapeur d'eau des films à base des protéines, par exemple, un film de protéine de
muscle de poisson, un film de gélatine de poisson. À titre exemple, l'incorporation d'huiles essentielles de
gingembre, et de curcuma.

Il a été démontré que l'huile essentielle hydrophobe pourrait augmenter l'hydrophobicité des films,
réduisant ainsi la migration de la vapeur d'eau à travers le film. D’autre part, les HEs de faible densité sont
séparées et localisées à la surface supérieure du film, formant ainsi la microstructure bicouche. L’ajout de
l’HE a eu un impact sur la transparence du film, en fonction du type et de la concentration ajoutée.

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Chapitre 2 : Généralité sur la plante étudiée Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

Chapitre 02 : Généralité sur la plante étudiée Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

La région de Tlemcen est l’un des paysages d’Afrique des nord les plus diversifiés. Ce paysage, qui
va du littoral jusqu’à la steppe, il est riche en taxons endémiques et rares. Liée notamment au climat
particulièrement diversifié. Les monts de Tlemcen, avec 94 taxons endémiques, ils constituent un bon
refuge pour des nombreuses espèces menacées. Parmi celles- ci, c’est Pulicaria vulgaris ssp pomeliana
(Faure et Maire) E. Gamal-Eldin, une plante rarissime (RRR), endémique et surtout menacée, qui amène
notre attention (Babali et Bouazza, 2016).

1 Description de la famille Astéracée :

Le mot « aster » du grec signifie étoile, en relation avec la forme de la fleur. La famille des astéracées
(composées) est celle qui compte le plus grand nombre d’espèce soit environ 25000 espèces réparties en
1300 genres, ce qui représente environ 8 à 10% de toutes les plantes à fleurs. Les composées ont une
distribution mondiale (sauf l’Antarctique) avec une large diversification écologique. Toutefois, elles sont
abondantes principalement dans les régions tropicales et subtropicales bordant les zones semi-arides et
désertiques, elles sont moins fréquentes dans les forêts tropicales (Kennouche, 2017).

La pulicaire commune (Pulicaria vulgaris) fait partie de la famille des astéracées sa période de
floraison s’étale de juillet à septembre. Il s’agit d’une plante annuelle. Sa disparition est liée à la réduction
des zones humides, au comblement des mares. Notre étude se focalise sur une espèce endémique de la
région de Tlemcen Pulicaria vulgaris ssp pomeliana.

2 Espèce Pulicaria vulgaris ssp pomeliana :

Pulicaria vulgaris ssp pomeliana est une plante originale et endémique de l’Algérie occidentale,
extrêmement rare, considérée comme menacée d’extinction puisqu’elle ne se rencontre qu’à Terni
(Tlemcen) longtemps oubliée (Quezel et Santa 1963).

3 Description botanique :

Pulicaria vulgaris ssp pomeliana est une plante très petite (de 5 à 35 cm de hauteur), dressées d’un
vert clair. Entièrement pubescente. Elle se caractérise par une racine grêle. Une tige dressée et rameuse, dès
la base, à rameaux étalés, souvent su dichotomes, avec un capitule dans la bifurcation. Des feuilles intactes
entières ou su entières, sessiles et non auriculées, à peine semi-amplexicaules, linéaires-lancéolées,
légèrement ondulées, à apex pointu et mucroné des fleurs jaunâtres à ligules ne dépassant pas ou dépassant
peu l’involucre, à involucre large, des capitules de 5 à 7 mm de diamètre, hémisphériques, tous pédonculés.
Des akènes nervurés, oblongs-cylindriques, de 1,4 à 1,7 mm de longueur, à Pappus externes brièvement
cupuliformes, de 175 à 250 μm de long, à lobes triangulaires-ovales (Babali et Bouazza, 2016).
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Chapitre 2 : Généralité sur la plante étudiée Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

Figure 17 : photos originales de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

4 Habitat et répartition :

Pulicaria vulgaris ssp pomeliana a été trouvée à oued en-nechef. C’est une plante préférée en
général, les bordures basses, les lits d’oueds et les terrains inondés pendant les mois pluvieux de l’année,
nommément d’octobre à juin. À Terni, plus précisément, cette plante ne se trouve que le long de l’oued en-
nechef et ses chaàbas, vers l’embouchure du barrage d’el-mafrouch, à des altitudes comprises entre 1130
et 1208 m. La Pulicaria préfère les bordures basses des oueds et les terrains temporairement inondés
pendant les mois pluvieux de l’année. La sécheresse et les actions anthropiques (déversement d’eaux usées,
constructions) sont les causes principales de sa disparition (Babali et Bouazza, 2016).

Figure 18 : Biotope de Pulicaria vulgaris subsp. pomeliana

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Chapitre 2 : Généralité sur la plante étudiée Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

5 La nomenclature :

Pulicaria vulgaris subsp. Pomeliana (Faure et Maire) E. Gamal- Eldin (1981)


Pulicaria vulgaris Gaertner subsp. pomeliana (Faure et Maire) Quézel et Santa(1963), comb.
inval.
Pulicaria pomeliana Faure et Maire (1932)
Pulicaria dentata Gussone non D.C. (1905).
Pulicaria vulgaris Gaertner subsp. dentata Batt. (1889)

6 La systématique :

La classification botanique de Pulicaria vulagaris ssp pomeliana (tab 02)

Tableau 2 : Classification botanique Pulicaria vulgaris ssp pomeliana (GBIF : Pulicaria vulgaris subsp.
pomeliana (Faure & Maire) Quezel & Santa)

Taxonomie Description
Règne Plantae
Embranchement Spermaphytes
Sous embranchement Angiospermes
Classe Magnoliopsida
Ordre Asterales
Famille Asteraceae
Genre Pulicaria
Espèce Pulicaria vulgaris
Sous espèces Pulicaria vulgaris ssp pomeliana

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Matériel
Et
Méthode
Matériel et Méthode

Notre travail a été réalisé au niveau du laboratoire des substances naturelles & bioactives
(LASNABIO) de l’université de Tlemcen.

1 Matériel végétal :

Pulicaria vulgaris ssp pomeliana est prélevé pendant la période de floraison vers la fin du mois de
juillet 2019, dans la région de Tlemcen (Terni). Ensuite la partie aérienne de la plante est nettoyée puis
séchée à l’ombre pendant une dizaine des jours, à l’abri de l’humidité et de la lumière à une température
ambiante puis conservée dans des sacs en papier jusqu’à l’extraction.

2 Procédé d’extraction :

Figure 19 : Photo de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana


(Original)
La méthode d’hydrodistillation consiste à immerger 60g de la partie aérienne de la plante dans un
ballon (6L) en verre rempli de 2/3 d’eau de son volume puis le mélange est porté à l’ébullition pendant 5
heures. La formation d’une vapeur va entrainer les constituants volatiles. La vapeur de l’huile qui se dégage
passe à travers le serpentin de refroidissement en verre où aura lieu la condensation, puis elles s’écoulent
en goutte-à-goutte dans un récipient où elles forment le distillat, ce dernier est un mélange de l’huile
essentielle + eau. Ces deux phases se séparent par leur différence de densité (par une simple décantation).
L’huile essentielle primaire récupérée à l’aide de l’éther d’éthylique, enfin l’huile obtenue après
évaporation de l’éther est conservée dans des flacons opaques en verre bien scellé pour éviter toute
dégradation de l’essence à basse température (4°C) jusqu'à son utilisation. (Marouf et Tremblin ,2009).

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Matériel et Méthode

Figure 20 : montage d'hydrodistillation (appareil de type Clevenger)


(Original)

3 Rendement en huile essentielle :


Le rendement en huile essentielle est le rapport entre la masse de l’huile essentielle obtenue après
extraction sur la masse de la matière végétale utilisée. Le rendement est exprimé en pourcentage et il est
représenté par la formule suivante :

Avec :
R : Rendement de l’huile essentielle.
M : masse de l’huile essentielle exprimée en (g).
Ms : masse de la matière végétale sèche utilisée exprimée en (g).

4 Caractéristiques organoleptiques :

Selon AFNOR 2000, les huiles essentielles sont habituellement liquides à température ambiante et
volatiles, ce qui les différencie des huiles dites fixes. Elles sont plus ou moins colorées et très odorantes.
L’appréciation des caractéristiques organoleptiques de notre huile essentielle de Pulicaria vulgaris ssp
pomeliana nécessite l’utilisation de nos sens afin d’évaluer l’aspect, l’odeur, la couleur.

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Matériel et Méthode

5 Les méthodes d’évaluation de pouvoir antioxydant :

Depuis ces dernières années, les tests d’activités antioxydantes ont été largement développés pour
évaluer l’efficacité des nouveaux composés. Diverses méthodes sont disponibles et mentionnées par la
littérature permettent d’évaluer les différents aspects physico-chimiques du potentiel antioxydant dans
différentes conditions. Certaines se basent sur la capacité réductrice d’un composé radicalaire, d'autres tests
reposent sur la mesure de la capacité des antioxydants à piéger les composés radicalaires tels que les tests
Trolox equivalent antioxidant Capacity (TEAC), Ferric-ReducingAntioxidant Power (FRAP), Oxygen
radical absorbance Capacity (ORAC) et le test à la 2,2-diphényl -1- picrilhydrazyle (DPPH) et le test de
blanchiment de β-carotène, etc.

Dans ce cadre nous nous sommes intéressées à l’évaluation de l’activité antioxydante de l’huile
essentielle de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana en vue de sa valorisation en tant qu’antioxydant, nous avons
utilisé le test DPPH selon la méthode de (Blois ,1958).

5.1 Mesure de l’activité antioxydante par Piégeage du radical libre DDPH (2,2 diphenyl-1-
picrylhydrazyle) :

Le test DPPH est l'un des tests les plus couramment utilisés qui est actuellement populaire, car il est
simple et très sensible et non couteux.

En général, le pouvoir antioxydant des huiles essentielles testées est estimé par comparaison avec des
antioxydants synthétiques tels que (acide ascorbique, BHT, BHA) ou bien des antioxydants naturels.
Plusieurs facteurs influent sur le potentiel antioxydant et la cinétique de réduction, notamment les
conditions de la réaction (temps, rapport Antioxydant/DPPH•, type de solvant).

5.1.1 Principe :

D’après (Molyneux, 2004) le composé chimique 2,2-diphényl-1-picrylhydrazyle (α, α-diphényl-β-


picrylhydrazylе) (DPPH) est caractérisé comme un radical libre stable en raison de la délocalisation de
l'électron de réserve sur l'ensemble de la molécule. Il est l’un des premiers radicaux à avoir été utilisé pour
étudier la relation structure-activité antioxydante des composés phénoliques. Il possède un électron non
apparié sur un atome du pont d’azote (figure 21)

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Matériel et Méthode

Figure 21 : structure chimique du radical libre DPPH• (2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyle)

La mesure de l’efficacité d’un antioxydant se fait en mesurant la diminution de la coloration bleue-


violet, due à une recombinaison des radicaux DPPH•, mesurable par spectrophotométrie à 515-518 nm.
(Popovici et al, 2009)
La couleur passe du bleu-violet (forme radicalaire DPPH) au jaune (forme réduite DPPH-H),
principalement à cause d’un transfert d'électrons rapide de l'échantillon au radical DPPH, selon la réaction
suivante de (Brand-Williams et al, 1995).

L'extraction de l'hydrogène de l'échantillon par le radical DPPH est marginale, car elle se produit
très lentement et dépend du solvant acceptant la liaison hydrogène. Le méthanol et l’éthanol sont
généralement des solvants utilisés pour les tests de capacité antioxydante, qui acceptent fortement la liaison
hydrogène, par conséquent la réaction d'abstraction d'hydrogène se produit très lentement (Miguel, 2010).

Figure 22 : modification du DPPH• lors du transfert électronique

- 28 -
Matériel et Méthode

5.1.2 Protocole :

L’activité anti-radicalaire de l’HE a été mesurée par la méthode de DPPH selon le protocole décrit
par (Molyneux, 2003) avec quelques modifications.

Pour l’échantillon testé, une solution mère de 5 mg/ml est préparée dans l’éthanol, à partir de
laquelle des dilutions sont préparées. L’acide ascorbique et BHT sont utilisés comme témoins positifs.

1 ml de solution de DPPH à 0.006 % dans l’éthanol a été ajoute à 1 ml de l’échantillon à tester à


différentes concentrations, après agitation le mélange est mis à l’obscurité pendant 30 mn et 1H, la densité
optique est mesurée à 517 nm à l’aide d’un spectrophotomètre. Le contrôle négatif est réalisé avec 1 ml
d’éthanol et 1 ml de solution éthanoïque de DPPH. Les tests sont répétés 03 fois (figure23)

Figure 23 : Piégeage du radical libre DDPH (2,2 diphenyl-1-picrylhydrazyle)


5.1.3 Le pourcentage d’inhibition :

L’activité antioxydante liée à l’effet du piégeage du radical DPPH est exprimée en pourcentage
d’inhibition où l’absorbance du mélange réactionnel qui contient le radical libre et l’échantillon de
l’antioxydant est reliée avec l’absorbance du mélange sans aucun antioxydant (solution témoin ou contrôle)
à un temps t. (Popovici et al, 2009) :

Le pourcentage d’inhibition est calculé comme suit :

- 29 -
Matériel et Méthode

Avec :

Abs c : absorbance du contrôle

Abs e : absorbance de l’échantillon testé

Les résultats sont exprimés selon la moyenne des valeurs.

5.1.4 Calcule de IC50 :


La concentration inhibitrice de 50% est la concentration de l’échantillon testé nécessaire pour
réduire 50% de radical DPPH.
Les IC50 de l’échantillon et des témoins sont calculées par Excel et les pourcentages d’inhibitions
sont représentés par des histogrammes indiquent le pourcentage d’inhibition en fonction des différentes
concentrations des fractions testées.

- 30 -
Résultats
Et
discussion
Résultats et discussion

1. Rendement de l’huile essentielle :

L’extraction de l’huile essentielle étudiée est réalisé à l’aide d’un hydrodistillateur de type clevenger
durant cinq heures. L’extrait brut récupéré est pesé puis conservé à 4˚C.
Le rendement en huile essentielle de la partie aérienne de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana est de
0.6%.
En 2017 Chaib et al, ont obtenu un rendement de 0,5% de l’HE de Pulicaria incisa une espèce
poussant à EL- Hoggar.
D’autres études menées par Shahat et al (2017) sur les huiles essentielles des feuilles fraiches de
Pulicaria incisa sub. Candolleana de la région d’Egypte obtenues par hydrodistillation ont révélé un
rendement identique à celui de notre HE qui est de 0.66%. D’autre part, ces mêmes auteurs ont noté un
rendement nettement inférieur pour les fleurs de 0.33%.

Par ailleurs, Al fahimi et al (2015) ont estimé un rendement de 0.84% pour Pulicaria jaubertii de
la région de Yémen (sud du Yémen).

En Iran, Bashi et al (2013) et Shariatifar et al (2014) ont calculé le rendement de l’HE de partie
aérienne de la même espèce Pulicaria gnaphalodes, ils ont constaté une grande différence, le rendement
calculé est de 0.1% pour 200g et de 3% pour 100g de matière végétale respectivement.

Nous suggérons que ces variations en rendement en huiles essentielles pourraient être expliquées
par plusieurs facteurs, l’espèce étudiée, l’origine de la plante, la partie ou l'organe utilisé, le milieu de
récolte, la période de récolte et d’autre part, les pratiques culturales et les techniques d’extractions.

2. Analyse organoleptique

L’huile essentielle obtenue est de couleur jaune clair avec une odeur aromatique un peu piquante et
un aspect liquide.

Nous avons comparé les caractéristiques organoleptiques de notre huile essentielle de Pulicaria
vulgaris ssp pomeliana avec les autres espèces de la même famille citée précédemment. Les résultats sont
mentionnés dans le tableau (03) :

- 32 -
Résultats et discussion

Tableau 03 : Comparaison des caractéristiques organoleptiques des différentes espèces de genre Pulicaria

Propriétés Aspect Couleur Odeur Référence

P. vulgaris (l’Algérie) Liquide Jaune clair Aromatique un peu ____________


piquante

P. incisa (l’Égypte) Liquide Jaune Agréable (Shahat et al, 2017)

P. incisa (l’Algérie) Liquide Jaune clair Parfumée et forte (Chaib et al, 2017)

P. jaubertii (Yémen) Liquide Jaune Parfumée (Al-Fatimi et al, 2015)

3. Evaluation de l’activité antioxydante :

Ces dernières années, l’intérêt porté aux antioxydants naturels, en relation avec leurs propriétés
biologiques intéressantes a augmenté considérablement. Cette étude porte sur l’activité antioxydante de
l’huile essentielle de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana poussant à terni (Tlemcen). La comparaison des
résultats est réalisée avec deux contrôles positifs l’acide ascorbique et BHT.

3.1.Étude de l’activité antioxydante par la méthode du piégeage du radical libre DPPH :

Nous avons étudié le pouvoir anti-radicalaire des extraits de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana sur
le piégeage de radical libre DPPH. Ce test est largement utilisé en raison de sa stabilité en forme radicale
et la simplicité de l’analyse. Le radical DPPH• fixe un radical H• qu’il détache de l’antioxydant AH ainsi,
il perd sa couleur violette et son absorbance à 517 nm pour se transformer en DPPH-H de couleur jaunâtre.

Les résultats obtenus sont présentés sous forme des graphes représentant la réduction du radical
libre DPPH en fonction des concentrations.

La figure (24) montre les résultats du pourcentage d’inhibition du radical DPPH en fonction des
concentrations du composé testé pour 30min d’incubation. D’après la figure, on constate que le pourcentage
d’inhibition du radical libre augmente avec l’augmentation de la concentration. Il varie de 44,37 % à 57,99
%. D’autre part, on remarque que la concentration 5000 µg/ml de l’huile essentielle de P.vulgaris ssp
pomeliana présente le meilleur pourcentage d’inhibition, il attienne la valeur de 57.99%.

Par ailleurs la concentration 4000 µg/ml montre un pourcentage d’inhibition très intéressant
(56.26%). Par contre, les concentrations 2000 µg/ml et 3000 µg/ml ont enregistrées des faibles pourcentages

- 33 -
Résultats et discussion

d’inhibitions 46,50% et 48,64% respectivement. Ceci montre que nos résultats sont significatifs pour une
durée de 30min d’incubation seulement.

HE P.vulgaris ssp pomeliana


70,00
57,99 56,28
60,00
48,64
% d'hinibition

50,00 46,50 44,37


40,00

30,00

20,00

10,00

0,00
5000 4000 3000 2000 1000

concentration en µg/ml

Figure 24 : Pourcentage d’inhibitions du DPPH en fonction des concentrations de l’HE de P. vulgaris


ssp pomeliana (30min)

Pour une durée de 1H on remarque que l’huile essentielle présente une activité antioxydante qui
dépasse 50% pour une concentration de 2000 µg/ml, il atteint la meilleure capacité de piégeage de DPPH
79,64% à la concentration de 5000 µg/ml. Quant aux concentrations 1000 µg/ml, 3000 µg/ml et 4000 µg/ml,
le pourcentage d’inhibition est de 39.46%, 64.50% et 75.50% respectivement.

Plusieurs facteurs influent sur le potentiel antioxydant, notamment les conditions de la réaction telle
que la composition chimique, le temps, le rapport Antioxydant/DPPH•, type de solvant.

- 34 -
Résultats et discussion

90,00 79,64
% d'inhibition 80,00 75,50
70,00 64,50
56,76
60,00
50,00 39,46
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
5000 4000 3000 2000 1000

concentration en µg/mL

Figure 25 : Pourcentage d’inhibitions du DPPH en fonction des concentrations de l’HE


de P. vulgaris ssp pomeliana (1h)

À travers les histogrammes qui sont illustrées dans les figures 24 et 25, on remarque que le pouvoir
anti-radicalaire dépend de la concentration de l’HE. En effet, nous avons remarqué une différence de la
valeur du pourcentage d’inhibition entre les deux graphes, ce pourcentage est plus élevé pendant la durée
de 1H par rapport à la durée de 30mn. On peut dire que l’efficacité antioxydante et la capacité de piégeage
du radical DPPH est influencé de façon directe par le temps d’incubation.

3.2.Calcule d’IC50 :

L’inhibition à 50% exprime la quantité d’antioxydants requise pour diminuer la concentration de


50% du radical libre. Plus la valeur d’IC50 est faible plus l’activité antiradicalaire d’un composé est
importante.

Dans la présente étude, nous avons comparé notre huile essentielle avec deux témoins positifs BHT
et Acide ascorbique, les résultats obtenus sont regroupés dans le tableau ci-dessous :

- 35 -
Résultats et discussion

Tableau 04 : Les valeurs d’IC50 de l’HE et des témoins positifs

IC50 (µg/mL)
30min 1 heure
Acide ascorbique 9.39 µg/mL 9.38 µg/mL

BHT 729.18 µg/mL 681.38 µg/mL

HE P.vulgaris 1255 µg/mL 1178.5 µg/mL

Dans les premières 30 min d’incubation, l’huile essentielle est dotée d’un pouvoir antioxydant
modérer la valeur d’IC50 est de 1255 µg/ml, elle est faible par rapport au BHT (IC50=729.18 µg/ml). On
remarque une activité antiradicalaire très importante pour l’acide ascorbique (IC50=9.39 µg/ml).

Concernant les valeurs obtenues après 1H d’incubation, les résultats montrent une capacité de
piégeage de DPPH plus au moins intéressante, l’IC50 de l’HE enregistré est de 1178.5 µg/ml celui du BHT
et de l’acide ascorbique sont de 681.38 µg/ml et de 9.38 µg/ml respectivement.

3.3.Discussion :

Les plantes médicinales sont une source riche en métabolites secondaires ayant des activités
biologiques intéressantes (Hussien et al, 2017).

La recherche des nouvelles molécules est devenue indispensable. La lutte biologique par l’utilisation
des substances naturelles pouvant constituer une alternative aux produits chimiques. Parmi ces substances
naturelles, nous avons les huiles essentielles extraites des plantes aromatiques (Laib et Barkat, 2012).

L’activité antioxydante d’un composé correspond à sa capacité de résister à l’oxydation. Notre


étude se focalise sur une espèce appartenant à la famille des astéracées : P.vulgaris ssp pomeliana.

À la lumière des résultats obtenus par l’étude du pouvoir anti-radicalaire par DPPH de l’HE, on
constate que cette plante possède une activité antioxydante intéressante.

En termes de concentration, à 5000 µg/ml de l’HE de P. vulgaris ssp pomeliana possède le


pourcentage anti-radicalaire le plus élevé pour les deux durées d’incubation par rapport aux autres
concentrations. En effet, il atteint 79,64% après 1H d’incubation, alors qu’il est à 57.99% après une durée
de 30mn. La littérature relève que le pourcentage d’inhibition du radical libre augmente avec
l’augmentation de la concentration de l’HE (Chaib, 2018).

- 36 -
Résultats et discussion

L’activité antiradicalaire de l’huile essentielle pourrait être attribuée à sa teneur élevée en composé
chimique majoritaire et minoritaire. Des espèces du genre Pulicaria contiennent divers composés bioactifs
tels que les monoterpènes, les flavonoïdes, les acétylènes, l'isocomène et les lactones sesquiterpéniques.
(Al-Hajj et al, 2014 ; Hanbali et al, 2005)

La capacité de piégeage à 50% du radical DPPH de l’HE de P. vulgaris ssp pomeliana est de 1178.5
µg/ml. Une étude réalisée par Shariatifar et al (2014) en Iran sur l’huile essentielle de Pulicaria
gnaphalodes obtenue par hydrodistillation montre une faible capacité de piégeage de DPPH (IC 50=147
±1,50 µg/ml) par rapport au contrôle BHT (IC50=4,9 ±0,25 µg/ml). À Yémen, Al-Hajj et al (2014) ont
remarqué que l’huile essentielle de Pulicaria inuloides a une activité antioxydante élevé, IC50 = 4.95±0.05
µg/ml et le pourcentage d’inhibition est de 92.92%.

En comparant les valeurs du potentiel anti-radicalaire de notre huile essentielle (IC50=1178.5 µg/ml)
et celui des témoins positifs testés BHT (IC50=61.38 µg/ml) et l’acide ascorbique (IC50=9.38 µg/ml) l’IC50
de l’HE est le moins significatif. Cette comparaison n’est pas prise en grande considération car les
concentrations ne sont pas identiques.

Une autre étude réalisée par Al-Fatimi et al (2015) sur l'huile essentielle extraite des fleurs de
Pulicaria jaubertii montre un effet antioxydante faible (IC50 = 280 μg/ml) comparé à l’acide ascorbique
(IC50 = 6μg/ml). Il a été rapporté que certains monoterpènes oxygénés tels que la carvotanacetone et le
bornéol présentent des potentiels antioxydants.

En Algérie dans la région du Hoggar, Chaib (2018) montre que l’huile essentielle de P. incisa
obtenue par hydrodistillation présente une très bonne activité antioxydante avec un (IC50 = 3,37 ± 0,12
mg/ml) par rapport au BHT (IC50= 0,21 ± 0,018 mg/ml). Il atteint un pourcentage d’inhibition égale 83,83
% à 10mg/ml.

En outre, Djermane et al (2016) ont noté que le pourcentage d'inhibition des radicaux libres pour
l'huile essentielle de Pulicaria arabica est très faible, presque nul par rapport à celui de l'acide ascorbique
à toutes les concentrations testées. La faible activité antioxydante de l'huile essentielle peut s'expliquer par
son faible profil chimique en composés connus pour leurs effets antioxydants tels que les composés
phénoliques.

D’autre part en Algérie, Gherib et al (2016) ont testé des extraits organiques du genre Pulicaria,
c’est une plante médicinale endémique du Sahara algérien « Pulicaria mauritanica Coss. » Ces auteurs ont
déduit que l'activité par DPPH sur l’extrait d'acétate d'éthyle des fleurs a montré une activité antiradicalaire
similaire au BHT dont les valeurs d’IC50 sont de IC50=7,43µg/ml et IC50=6,26 μg/ml, celui de l’acide
ascorbique est la plus importante elle est de 3,62 μg/ml.
- 37 -
Résultats et discussion

En Iran, Ravandeh et al (2011) ont examiné l’extrait éthanolique de Pulicaria undulata, les résultats
montre une activité antioxydante par DPPH plus faible par rapport au BHT, l’IC50 est de 63,47 ppm et 25,86
ppm respectivement.

Ces différences en résultats s’expliquent par l’origine géographique de l’espèce, son cycle végétatif,
la période de sa récolte ainsi que les méthodes d’extractions utilisées (Chaib, 2018)

Au cours des dernières années, des études sur les activités antioxydantes des plantes médicinales
sont considérablement augmentées grâce à leur potentiel d’être utilisées en tant que sources d’antioxydantes
naturelles. L'activité antioxydante, l'un des rôles physiologiques les plus importants de l'alimentation est
censée de protéger les organismes des dommages oxydatifs et permet de prévenir les maladies réfractaires
graves, notamment divers types de cancer, les maladies coronariennes, le diabète, les maladies
neurologiques et autres.

La famille des astéracées contient un grand nombre d'espèces aromatiques et médicinales avec
différents principes actifs et des propriétés biologiques très intéressantes. Ils sont largement utilisés dans
les domaines de la cuisine et de la médecine traditionnelle, leurs huiles essentielles sont largement utilisées
dans les industries alimentaires, pharmaceutiques et cosmétiques.

Actuellement, plusieurs espèces appartenant à la famille des astéracées font l'objet des recherches
phytochimiques visant à découvrir des nouveaux antioxydants.

D’autre part, Chaib (2018) montre que l’HE d’A.graveolens (IC50= 25,33± 4,36 mg/ml) contient
une très faible capacité de piégeage de la DPPH, par a rapport au témoin de BHT (IC 50= 0,21 ± 0,018
mg/ml). En termes de concentration, cette HE a un très faible pourcentage d’inhibition de 9.73± 3,52% et
30± 3,65% pour les concentrations 5 mg/ml et 15 mg/ml respectivement.

Sobrinho et al (2016), ont étudié l’activité antioxydante de l’huile essentielle de Eupatorium


ballotifolium (Asteraceae) recueillies en Brésil, les résultats de la méthode du piégeage du radical de DPPH
ont montré une faible capacitée antioxydante avec un IC50 de 222,17 µg/ml par rapport aux témoins positifs
: IC50 de thymol = 21,71 µg/ml et l’IC50 de carvacrol = 25,5 µg/ml.

D’après Segueni et al (2017), l'huile essentielle de Hertia cheirifolia récolté en Algérie possède une
forte activité de piégeage des radicaux DPPH (88,47 %). Il a été remarqué qu’il a exercé une activité
antioxydante plus importante que la vitamine C (71 %).

Selon Moldovan et al (2017) les résultats de la méthode de DPPH ont montré une activité
antioxydante importante pour l’extrait de Rudbeckia triloba avec un IC50 inférieur à (0.32%). Cela
s’explique par sa richesse en hydrocarbures monoterpéniques.

- 38 -
Conclusion
Conclusion et perspective
Par sa position géographique, l’Algérie est très connue par sa richesse en plantes aromatiques et
médicinales. Notre étude se focalise sur une espèce de genre pulicaria de la région de Tlemcen Pulicaria
vulgaris ssp pomeliana, c’est une plante endémique et originale appartenant à la famille des astéracées.

L'extraction de notre HE est réalisée par une hydrodistillation à partir d'un appareil du type
Clevenger. Le pouvoir antioxydante de notre huile essentielle est évalué par la méthode de piégeage du
radical libre DPPH (2,2 diphenyle-1-Picrylhydrazyle).

Le rendement en huile essentielle de la partie aérienne de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana est de
0.6%.

À la lumière des résultats obtenue par l’étude de l’activité antioxydante de P.vulgaris ssp pomeliana
par DPPH le pourcentage d’inhibition atteint 79,64% à la concentration de 5000 µg/ml. La valeur d’IC50
est de 1178.5 µg/ml, celles du BHT et Acide Ascorbique sont 9.39 µg/ml. 681.38 µg/mL respectivement.

En s’appuyant sur ces résultats, on constate que l’HE de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana montre
un pouvoir anti-radical important, mais il reste faible par rapport aux standards BHT et Acide ascorbique.

À notre connaissance, aucune étude n’est réalisée sur cette plante, si en considère cela comme une
première étape, les résultats étaient prometteurs. Pour cette raison, il serait intéressant de faire des études
plus approfondies sur l’huile essentielle de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana afin d’isoler, de purifier et
d’identifier les composés ayant une activité antioxydante et antifongique. En perspectives, plusieurs travaux
peuvent être envisagés :

• L’étude phytochimique de l’HE par des techniques chromatographiques. L’analyse de


l’huile essentielle par (CCM, CPG CPG/SM)

• La mesure d’activité antioxydante en utilisant d’autres tests telle que : la réduction de fer
(FRAP), le blanchiment du β-caroten, piégeage du peroxyde d’hydrogène (H2O2), et essai
de décoloration de radical cation (ABTS).

• L’étude d’autres propriétés biologiques telle que : l’activité antibactérienne, anti-


inflammatoire, anti pesticide, anti-enzymatique et anticancéreuse.

• La soumission de l’HE à une étude toxicologique.

• Détermination du potentiel conservateur des huiles essentielles sur les denrées alimentaires.

- 40 -
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https://www.gbif.org/species/8829632

47
:‫الملخص‬
‫ في عدة قطاعات‬.‫لقد زاد االهتمام بمضادات األكسدة الطبيعية وخصائصها البيولوجية المثيرة لالهتمام مقارنة بالسنوات السابقة‬
.‫ بما في ذلك النباتات العطرية‬،‫ وتحديد كميتها من عدة مواد طبيعية‬،‫يجري تطوير بحوث علمية الستخراج هذه المركبات‬
‫ هذه‬،«Pulicaria vulgaris ssp pomeliana" ‫الهدف من هذه الدراسة هو البحث عن نشاط مضاد لألكسدة للزيت األساسي لـ‬
،‫ حيث تم حصادها في منطقة تيرني بتلمسان‬،»Astéracées" ‫ مستوطنة ومهددة أيضا باالنقراض تنتمي إلى عائلة‬،‫األخيرة تعتبر أصلية‬
.%0.6 ‫أما الزيت األساسي المستخرج عن طريق التقطير المائي فكان عائده مثيرا لالهتمام حيث بلغ‬
‫ فعالية كبيرة مضادة لألصولية‬DPPH ‫أظهر النشاط المضاد لألكسدة الذي يقوم به الزيت األساسي والذي تم تقييمه بواسطة طريقة‬
‫ حمض‬:‫ إال أنه ما زال منخفضا جدا مقارنة بالمواد المضادة لألكسدة القياسية التي استخدمت‬،IC50= 1178.5 µg/ml ‫) مع‬%79.64(
IC50= 9.39 µg/ml ‫ وحمض االسكوربيك‬IC50=681.38 µg/mL ‫ مع‬BHT
‫" لديه نشاط مضاد لألكسدة ملحوظ يمكن أن يستغل كحافظ في مجال‬Pulicaria vulgaris ssp pomeliana" ‫الزيت األساسي ل‬
.‫ وهذا يقودنا إلى مواصلة هذا العمل مستقبال‬،‫صناعة األغذية‬
.‫ نشاط مضاد لألكسدة‬،‫ استخراج‬،‫ الزيت األساسي‬، DPPH، Pulicaria vulgaris ssp pomeliana:‫الكلمات المفتاحية‬

Résumé :

L’intérêt porté aux antioxydants naturels en relation avec leurs propriétés biologiques intéressantes
a augmenté par rapport aux années précédentes. Dans plusieurs secteurs, les recherches scientifiques sont
développées pour extraire, identifier et quantifier ces composés à partir des plusieurs substances naturelles
notamment les plantes aromatiques.
L’objectif de ce travail vise à réaliser une étude basée sur la recherche de l’activité antioxydante de
l’huile essentielle de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana récolté à la région de terni (Tlemcen), une plante
originale et endémique et surtout menacée qui appartient à la famille des astéracées. L’huile essentielle
extraite par hydrodistillation a fourni un rendement très intéressant de 0,6%.
L’activité antioxydante d’huile essentielle évaluée par la méthode de DPPH (2,2 diphenyle-1-
Picrylhydrazyle) a montré un pouvoir anti-radicalaire important (79,64%) avec une IC50 de1178.5 µg/mL.
Il reste très faible par rapport aux antioxydants standards employés BHT et acide ascorbique avec une
concentration d'inhibition IC50 : 681.38 µg/mL et 9.39 µg/ml respectivement.
L’huile essentielle de Pulicaria vulgaris ssp pomeliana présente une activité antioxydante
remarquable qui pourrait être exploitée comme un agent conservateur en industrie agroalimentaire, cela
nous mène à poursuivre ce travail ultérieurement.

Mots clés : Pulicaria vulgaris ssp pomeliana, extraction, huile essentielle, activité antioxydante,
DPPH.

Abstract :
The interest in natural antioxidants in relation to their interesting biological properties has increased
compared to previous years. In several sectors, scientific research is being developed to extract, identify
and quantify these compounds from several natural substances, including aromatic plants.
The objective of this work is to carry out a study based on the search for antioxidant activity of
essential oil of Pulicaria vulgaris ssp pomeliana recolted in the region of terni (Tlemcen), an original and
endemic and especially endangered plant belonging to the family asteraceae. The essential oil extracted by
hydrodistillation provided a very interesting yield of 0.6%.
The antioxidant activity of essential oil evaluated by the DPPH method (2,2 diphenyl-1-
Picrylhydrazyl) showed significant anti-free-radical potency (79.64%) with an IC50 of 1178.5 µg/mL. It
remains very low compared to the standard antioxidants used BHT and ascorbic acid with IC50 inhibition
concentration : 681.38 µg/mL and 9.39 µg/ml respectively.
The essential oil of Pulicaria vulgaris ssp pomeliana has a remarkable antioxidant activity that
could be exploited as a preservative in the food industry, this leads us to continue this work later.
Keywords : Pulicaria vulgaris ssp pomeliana, extraction, essential oil, antioxidant activity, DPPH.

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