Activite Antidrepanocytaire N
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Activité anti-falciformes de Daniellia oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel. extraits aqueux
d'écorce dans la prise en charge de la drépanocytose au Bénin
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Rôle de la cavéoline et des radeaux lipidiques dans la physiologie des cellules thyroïdiennes Voir le projet
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Lokonon et al., J. Appl. Biosci. Vol: 168, 2021 Activité anti-falciforme de Daniellia oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel.
extraits aqueux d'écorce dans la prise en charge de la drépanocytose au Bénin.
Soumis le 4 e
Octobre 2021. Publié en ligne sur www.m.elewa.org/journals/ le 31 décembre 2021
https://doi.org/10.35759/JABs.168.3
ABSTRAIT
Objectif : Daniellia oliveri (copaïba baumier africain) est une plante utilisée au Bénin dans le traitement de la
drépanocytose. C'est une plante traditionnelle, dont toutes les vertus n'ont pas été prouvées scientifiquement.
Ce travail a été réalisé pour évaluer l'action de l'écorce de Daniellia oliveri dans le traitement des crises drépanocytaires.
Méthodes et résultats : L'extrait aqueux d'écorce de Daniellia oliveri a été préincubé à différentes
concentrations avec des cellules de phénotype SS avant ou après le test d'Emmel.
La méthémoglobine a été dosée après incubation de l'extrait avec l'hémoglobine. In vivo, l'action de l'extrait
sur l'hématopoïèse a été évaluée chez des rats Wistar. A la dose de 40 mg/ml de sang, l'extrait a
significativement inhibé et inversé la formation des cellules falciformes (P<0,05). Il a fait baisser la
production de méthémoglobine à la dose de 10 mg/ml. Le taux d'hémoglobine, le VGM et la numération
plaquettaire n'ont pas changé de manière significative chez les rats traités.
Conclusion et application des résultats : L'extrait aqueux de l'écorce de Daniellia oliveri
inhibe donc la falciformation des globules rouges in vitro et pourrait être considérée comme un remède préventif
des attaques de drépanocytose. En outre, il a transformé les cellules falciformes en globules rouges de forme
normale et pourrait donc être envisagé dans le développement de traitements curatifs pour les crises de cellules falciformes.
Cependant, l'extrait n'a pas augmenté l'hémoglobine et le volume corpusculaire moyen. Il ne présentait
donc aucune activité hématopoïétique et ne pouvait être considéré comme un remède contre l'anémie.
De plus, le nombre de plaquettes sanguines n'a pas augmenté indiquant une absence de thrombopoïétique.
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activité. Il a abaissé la production de méthémoglobine dans les globules rouges SS indiquant une diminution du
stress oxydatif dans les globules rouges SS. Il pourrait ainsi être utilisé comme antioxydant pour la prévention
ou le traitement des agressions chez les personnes drépanocytaires en association avec des plantes aux
propriétés antianamiques.
Mots clés : Drépanocytose ; Daniellia oliveri; anémie; Bénin.
INTRODUCTION
La drépanocytose est une maladie génétique hématologique continent. La fréquence a augmenté d'ouest en est,
maladie très répandue dans le monde et reconnue du nord à l'Afrique du sud. Le trait drépanocytaire est
comme un problème de santé publique avec une ainsi passé de 15 % au Sénégal à plus de 40 % en
prévalence très croissante des formes majeures Afrique centrale (Mashako et al., 2019). Sa gestion
(Mashako et al., 2019). Elle a entraîné une en Afrique s'est faite en grande partie par la médecine
polymérisation de l'hémoglobine S, une anémie traditionnelle.
hémolytique chronique, un état pro-inflammatoire, Les plantes médicinales étaient et restaient le moyen
des crises douloureuses récurrentes et une le plus utilisé, en particulier dans les zones rurales,
susceptibilité accrue aux infections par des bactéries pour résoudre les problèmes de santé humaine et
encapsulées. Il existe également une inflammation animale. Au Bénin, 5 000 espèces végétales ont été
chronique, une hémolyse chronique, un déficit recensées dans les écosystèmes forestiers. Parmi
immunitaire, un phénotype clinique hétérogène et ces espèces, 814 étaient utilisées par les béninois
des atteintes viscérales. Le mécanisme pathogène pour soigner des maladies. La médecine traditionnelle
de la drépanocytose est principalement dû à une était toujours d'actualité et revêtait une importance
inflammation chronique associée au stress oxydatif sanitaire et économique croissante au Bénin (Koudoro
(Mukuku et al., 2018 ; Abdala et al., 2019 ; et al., 2018). La recherche en phytothérapie est
Wembonyama et al., 2021). Chaque année, la devenue une grande préoccupation scientifique
maladie est transmise à près de 300 000 enfants compte tenu de la croissance continue de l'utilisation
africains et l'OMS précise que près de 80 % d'entre de la médecine traditionnelle (Niyah Njike et al.,
eux meurent avant l'âge de 5 ans faute de diagnostic 2005). L'OMS a estimé que la médecine traditionnelle
et de soins adéquats (Amadou et al., 2019 ; représente 80 à 90 % des soins de santé en Afrique,
Wembonyama et al., 2021). En Afrique subsaharienne, et l'OMS encourageait de plus en plus la recherche
la fréquence des porteurs du trait drépanocytaire était sur les herbes utilisées en phytothérapie (OMS,
variable et pouvait atteindre 40 % au sein de certaines 2002). Ce travail vise à vérifier l'activité anti-
populations africaines. L'Afrique subsaharienne est drépanocytose d'extraits aqueux d'écorce de Daniellia
la partie la plus touchée du oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel.
MATÉRIEL ET MÉTHODES
Matériel végétal et extraction aqueuse : L'écorce La technique utilisée pour préparer les extraits était
de Daniellia oliveri a été collectée à Abomey au celle de la macération. Après filtration, les extraits
Bénin. L'identification et la certification de la plante ont été évaporés à sec à 60°C à l'aide d'un
évaporateur
ont été faites à l'Herbier National de l'Université rotatif de type Heidolph (Koudoro et al., 2018 ;
d'Abomey-Calavi sous le numéro YH267/HNB. Tchogou et al., 2021).
Matériel humain : Des prélèvements sanguins de
L'écorce a été séchée à l'air à la température du dix (10) malades drépanocytaires SS ont été effectués
laboratoire (20° - 25°)soleil
à l'abri la lumière pendant
et de l'humidité directe du à l'hôpital départemental du Zou/Collines au Bénin
trois semaines. Ils ont ensuite été réduits en poudre avec le consentement des malades après approbation
et stockés dans des sachets noirs (Koudoro et al., par le Comité d'Ethique de la
2018 ; Tchogou et al., 2021).
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Ecole des Biosciences Appliquées et des réalisée entre la prise de sang SS et l'eau physiologique
Biotechnologies au Bénin. d'une part pour constituer le contrôle et entre la prise
Matériel animal : Le matériel animal composé de six de sang et l'extrait d'autre part pour le test. Après 6
(6) rats femelles albinos de souche Wistar provenant heures d'incubation à température ambiante au
de l'animalerie de l'IBSA au Bénin dont le poids moyen laboratoire, une goutte de chaque mélange a été
est de 143g. Ces rats ont été acclimatés aux conditions montée entre lame et lamelle avec une goutte de
ambiantes d'élevage dans l'animalerie du Laboratoire métabisulfite de sodium à 2%, puis les bords ont été
de Biologie Expérimentale et Clinique de l'Ecole enduits de cire de bougie pour éviter le dessèchement.
Nationale des Biosciences Appliquées et des Les préparations ont ensuite été lues au microscope
Biotechnologies du Bénin. Ils avaient accès à de l'eau optique 4 heures plus tard et les érythrocytes de
et à de la nourriture légère 12 heures par jour et étaient différentes formes observés ont été comptés.
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l'extrait a été remplacé par une solution physiologique chacun a été formé. Le premier groupe étant le témoin a
(0,9% NaCl). L'absorbance de la solution a été lue à 540 reçu de l'eau physiologique par gavage et le deuxième
ÿm à des intervalles de temps (0, 30, 60, 90 et 120 min) groupe a reçu par gavage l'extrait de Daniellia oliveri à
à l'aide d'un spectrophotomètre UV-visible : six tubes 200 mg/Kg de poids corporel quotidiennement pendant
étaient disponibles pour ce (en double) T0 (lecture à 28 jours.
l'heure de début), T30 (lecture après 30 min), T60 (lecture Tests sanguins : Le sang des rats des deux groupes a
après 60 min), T90 (lecture après 90 min) et T120 (lecture été prélevé au début (J0) et au vingt-huitième jour (J28)
après 120 min). La variation de la densité optique (delta par ponction orbitaire après anesthésie à l'éther. Le taux
DO) au fil du temps a été calculée pour quantifier la d'hémoglobine et le volume corpusculaire moyen (MCV)
formation ou la disparition de la méthémoglobine (adapté et le nombre de plaquettes ont été déterminés par un
de Mpiana et al., 2007a, b, c ; Kambale et al., 2013). système automatisé (Sènou et al., 2016ÿ; Agbogba et al.,
2019).
Tests biologiques in vivo : In vivo, l'effet de l'extrait de Analyse statistique : Pour évaluer l'effet biologique de
Daniellia oliveri sur l'évolution de l'hémoglobine, du volume l'extrait, le test de comparaison multiple de Dunn et le
globulaire moyen (VGM) et des plaquettes sanguines a test de Mann Whitney ont été utilisés. Le seuil de
été étudié chez des rats femelles de souche wistar. A cet signification a été fixé à 5 %. Les graphiques ont été
effet, deux groupes de rats de trois (3) rats tracés à l'aide du logiciel Graphpad.
RÉSULTATS
L'extrait aqueux d'écorce de Daniellia oliveri a empêché traité à 20 mg ; 0,81 ± 0,112 pour les cas traités à 10 mg
la formation de cellules falciformesÿ: la figure 1 montre et 0,83 ± 0,068 pour les cas traités à 05 mg avec Daniellia
le nombre moyen de cellules falciformes sur le test oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel. Le nombre moyen de
d'Emmel. Le nombre moyen de cellules falciformes était cellules falciformes a diminué de manière significative
de 0,85 ± 0,09 pour les cas témoinsÿ; 0,64 ± 0,13 pour chez les personnes traitées à 40 mg (P <0,05) par rapport
les cas traités à 40 mg ; 0,83 ± 0,088 pour les cas aux témoins.
Figure 1 : Nombre moyen de cellules falciformes dans le test d'Emmel en fonction de la concentration de l'extrait
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L'extrait aqueux de l'écorce de Daniellia oliveri a et 0,55 ± 0,1048 pour les cas traités à 40 mg avec
ramené les cellules falciformes à la forme biconcave Daniellia oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel. Le nombre moyen
normale des globules rouges : la figure 2 montre le de cellules falciformes a diminué de manière significative
nombre moyen de cellules falciformes sur le test inverse chez les personnes traitées à 40 mg (P <0,05) par rapport
d'Emmel. Le nombre moyen de cellules falciformes était aux témoins.
de 0,76 ± 0,1092 pour les cas témoins
Figure 2 : Numération moyenne des cellules falciformes sur le test inverse d'Emmel
L'extrait aqueux d'écorce de Daniellia oliveri réduit le 0,004 pour les cas traités à 10 mg/ml avec Daniellia
stress oxydatif intra-érythrocytaire : la figure 3 montre oliveri. Delta OD a été significativement réduit chez ceux
l'évolution de la méthémoglobine au cours du temps. Le traités à 10 mg/ml par rapport aux témoins.
delta DO était de 0,012 ± 0,004 pour les cas témoins et
de - 0,020 ±
Figure 3 : Évolution de la production de méthémoglobine dans les globules rouges SS au fil du temps
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L'extrait aqueux de l'écorce de Daniellia oliveri n'a provoquer la libération de globules rouges immatures
pas stimulé la production de cellules sanguines : dans la circulation sanguine. La numération plaquettaire
le tableau 1 a montré les changements du taux moyen moyenne était de 603 ± 26,2 G/l chez les rats témoins
d'hémoglobine, du volume moyen des cellules et de 545 ± 19,1 G/l chez les rats traités avec Daniellia
sanguines et de la numération plaquettaire chez le rat. oliveri (Rolfe) Hutch. & Dalziel. Le nombre moyen de
Le taux moyen d'hémoglobine était de 14,5 ± 0,291 g/ plaquettes sanguines n'a pas varié significativement
dl chez les rats témoins et de 14,6 ± 0,318 g/dl chez entre les rats témoins et traités, ce qui suggère que
les rats traités avec Daniellia oliveri (Rolfe) Hutch. & l'extrait n'a pas stimulé la production de plaquettes
Dalziel. Le taux moyen d'hémoglobine n'a pas changé sanguines.
de manière significative entre les rats témoins et Phytochimiques dans l'écorce de Daniellia oliveri :
traités, ce qui signifie que l'extrait n'a pas stimulé la Le tableau 2 montre le criblage phytochimique de
synthèse d'hémoglobine. Le volume sanguin moyen l'écorce de Daniellia oliveri. Le dépistage a révélé la
était de 56,7 ± 1,45 fL chez les rats témoins et de 61,7 présence de flavonoïdes, de leucoanthocyanes
± 1,45 fL chez les rats traités avec Daniellia oliveri catéchiques, d'anthocyanes
tanins, et de composés
dans l'écorceréducteurs
de
(Rolfe) Hutch. & Dalziel. Le volume moyen de cellules Daniellia oliveri. Cela dénotait également l'absence de
sanguines n'a pas varié significativement entre les rats tanins galliques, de saponines, d'alcaloïdes et de
témoins et les rats traités, ce qui signifie que l'extrait mucilage.
n'a pas
Tableau 1 : Évolution du taux d'hémoglobine chez le rat, du volume globulaire moyen et de la numération plaquettaire sanguine.
rats Taux d'hémoglobine (g/dl) 14,5 ± 0,291 14,6 ±Jour
0,3180 Volume
Jour 28 corpusculaire
Paramètres Valeur P
moyen (fl) 56,7 ± 1,45 61,7 ± 1,45 Numération plaquettaire
26,2 545moyenne
± 19,1 (G/l) 603 ± 0,8
0,2
0,2
Leucoanthocyanes +
Anthocyanes +
-
Saponosides
Composés réducteurs +
-
Mucilages
Alcaloïdes -
DISCUSSION
La drépanocytose était une maladie génétique dont la extrait aqueux de l'écorce de cette plante dans la
prévalence des formes majeures est très élevée. Cela prévention ou la correction de la drépanocytose des
constitue un véritable problème de santé publique. Ce globules rouges SS, responsable des crises drépanocytaires.
travail s'inscrivait dans une recherche de remèdes A une concentration de 40 mg/ml, l'extrait aqueux de
pouvant soulager les victimes de cette pathologie. Les Daniellia oliveri inhibe significativement la falciformation
thérapeutes traditionnels béninois ont utilisé Daniellia des érythrocytes SS dans des conditions d'hypoxie. Il
oliveri pour soulager les crises de drépanocytose. a donc empêché la polymérisation de l'hémoglobine S
Ainsi, ce travail a testé l'efficacité de la et
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CONCLUSION
L'extrait de Daniellia oliveri a empêché et donc inversé stress oxydatif intra-érythrocytaire sans stimulation
la falciformation des globules rouges de phénotypes de l'hématopoïèse. On croyait que l'action de Daniellia
SS. Il a minimisé oliveri était due à la
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abondants métabolites secondaires qu'il contenait, traitement des crises drépanocytaires, après tests de
dont des anthocyanes. Elle pourrait donc être envisagée toxicité.
dans le cadre préventif ou curatif
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