Préparation Des Dilutions Pour Porduits Laities

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6 Rabie Ethani 1439

22 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 74 25 décembre 2017

ARRETES, DECISIONS ET AVIS

MINISTERE DU COMMERCE

Arrêté du Aouel Rabie El Aouel 1439 correspondant


au 20 novembre 2017 rendant obligatoire la
méthode de préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue
de l'examen microbiologique des laits et des
produits laitiers.
————

Le ministre du commerce,

Vu le décret présidentiel n° 17-243 du 25 Dhou


El Kaâda 1438 correspondant au 17 août 2017 portant
nomination des membres du Gouvernement ;

Vu le décret exécutif n° 90-39 du 30 janvier 1990,


modifié et complété, relatif au contrôle de la qualité et à
la répression des fraudes ;

Vu le décret exécutif n° 02-453 du 17 Chaoual 1423


correspondant au 21 décembre 2002 fixant les attributions
du ministre du commerce ;

Vu le décret exécutif n° 13-328 du 20 Dhou El Kaâda


1434 correspondant au 26 septembre 2013 fixant les
conditions et les modalités d'agrément des laboratoires au
titre de la protection du consommateur et de la répression
des fraudes ;
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25 décembre 2017 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 74 23

Vu le décret exécutif n° 15- 172 du 8 Ramadhan 1436 ANNEXE


correspondant au 25 juin 2015 fixant les conditions et les
modalités applicables en matière des spécifications Méthode de préparation des échantillons, de la
microbiologiques des denrées alimentaires ; suspension mère et des dilutions décimales en vue
de l’examen microbiologique des laits et des
Vu le décret exécutif n° 17 - 62 du 10 Joumada El Oula
produits laitiers
1438 correspondant au 7 février 2017 relatif aux
conditions et aux caractéristiques d'apposition de
1. DOMAINE D'APPLICATION :
marquage de conformité aux règlements techniques ainsi
que les procédures de certification de conformité ;
La présente méthode spécifie les règles de préparation
Vu l'arrêté du 26 Rajab 1425 correspondant au 11 des échantillons des laits et des produits laitiers et de leur
septembre 2004 rendant obligatoire une méthode de mise en suspension en vue d'un examen microbiologique.
préparation des échantillons pour essai et dilutions en vue
de l'examen microbiologique ; La présente méthode s'applique :

Vu l’arrêté du 28 Rajab 1435 correspondant au 28 mai — aux laits et aux produits laitiers liquides ;
2014 rendant obligatoire la méthode de préparation des
— aux produits laitiers en poudre ;
échantillons, de la suspension mère et des dilutions
décimales en vue de l'examen microbiologique ; — aux fromages ;

Arrête : — à la caséine et aux caséinates ;

— au beurre ;
Article 1er. — En application des dispositions de
l’article 19 du décret exécutif n° 90-39 du 30 janvier — aux crèmes glacées ;
1990, modifié et complété, susvisé, le présent arrêté a
pour objet de rendre obligatoire la méthode de préparation — à la crème anglaise, aux desserts et à la crème
des échantillons, de la suspension mère et des dilutions douce ;
décimales en vue de l'examen microbiologique des laits et
des produits laitiers. — au lait fermenté et à la crème acide ;

— aux préparations à base de lait pour nourrissons.


Art. 2. — Pour la préparation des échantillons, de la
suspension mère et des dilutions décimales en vue de 2. TERMES ET DEFINITIONS :
l'examen microbiologique des laits et des produits laitiers,
les laboratoires du contrôle de la qualité et de la répression
Au sens de la présente méthode, il est entendu par :
des fraudes et les laboratoires agréés à cet effet, doivent
employer la méthode jointe en annexe du présent arrêté.
2.1. Echantillon pour laboratoire :
Cette méthode doit être utilisée par le laboratoire
lorsqu’une expertise est ordonnée. Echantillon prélevé pour être envoyé au laboratoire et
destiné à être utilisé pour un contrôle ou pour des essais.
Art. 3. — Sont abrogées les dispositions de l'arrêté du
26 Rajab 1425 correspondant au 11 septembre 2004 2.2. Echantillon pour essai :
rendant obligatoire une méthode de préparation des
échantillons pour essai et dilutions en vue de l'examen Echantillon représentatif mesuré en volume ou en
microbiologique. masse, prélevé sur l'échantillon pour laboratoire pour
servir à la préparation de la suspension mère.
Art. 4. — Le présent arrêté sera publié au Journal
officiel de la République algérienne démocratique et
2.3 Suspension mère (première dilution) :
populaire.
Suspension, solution ou émulsion obtenue en
mélangeant une quantité du produit à analyser (ou de
Fait à Alger, le Aouel Rabie El Aouel 1439
l'échantillon pour essai préparé à partir de ce produit) avec
correspondant au 20 novembre 2017.
une quantité de diluant égale à neuf (9) fois cette quantité
de produit, en laissant se déposer les particules grossières,
Mohamed BENMERADI. si elles existent.
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2.4 Dilutions décimales qui suivent : 4.2.2 Solution de Ringer diluée au quart :

Suspensions ou solutions obtenues en mélangeant un 4.2.2.1 Composition :


volume mesuré de la suspension mère (2.3) avec un
volume de diluant égal à neuf (9) fois le volume prélevé
de la suspension mère et en répétant cette opération sur
chaque dilution préparée jusqu'à obtention d'une série de Chlorure de sodium (NaCl).................................2,25 g
dilutions décimales, appropriée pour l'ensemencement des Chlorure de potassium (KCl)............................0,105 g
milieux de culture.
Chlorure de calcium, anhydre (CaCl2)............ 0,06 g*)
3. PRINCIPE : Hydrogénocarbonate de sodium (NaHCO3) ......0,05 g
Préparation de la suspension mère (2.3) de façon à Eau..................................................................1 000 ml
obtenir une répartition aussi uniforme que possible des
micro-organismes contenus dans l'échantillon pour essai.
*) En alternative, utiliser 0,12 g de CaCl2, 6 H2O
Préparation, si nécessaire, de dilutions décimales (2.4)
qui suivent en vue de réduire le nombre de
micro-organismes par unité de volume pour permettre, 4.2.2.2 Préparation :
après incubation, d'observer leur éventuel développement
(cas des milieux liquides) ou d'observer les colonies (cas Dissoudre les sels dans l'eau. Ajuster le pH, si
des boîtes de gélose). nécessaire, de sorte qu'après stérilisation, il soit de
6,9 ± 0,2 à 25 °C.
Pour restreindre, si nécessaire, le domaine de
4.2.3 Solution de peptone :
dénombrement à un intervalle donné, ou si des nombres
élevés de micro-organismes sont attendus, il est possible 4.2.3.1 Composition :
d'ensemencer uniquement les dilutions décimales
nécessaires (au moins deux dilutions successives) pour
Digestat enzymatique de caséine .................. 1 g
pouvoir effectuer le dénombrement.
Eau ................................................................ 1 000 ml
4. DILUANTS :

Utiliser uniquement des réactifs de qualité analytique


4.2.3.2 Préparation :
reconnue et de l'eau distillée ou déionisée stérilisée.
Dissoudre la peptone dans l’eau. Ajuster le pH,
4.1 Composants de base : si nécessaire, de sorte qu’après stérilisation, il soit
de 7 ± 0,2 à 25 °C.
Il ya lieu de se conformer à la méthode d'analyse
relative à la préparation des échantillons, de la suspension
4.2.4 Solution tampon phosphate :
mère et des dilutions décimales en vue de l'examen
microbiologique, fixée par la réglementation en vigueur. 4.2.4.1 Composition :

4.2 Diluants à usage général :


Dihydrogénophosphate de potassium
4.2.1 Solution de peptone-sel :
(KH2PO4)........................................................ 42,5 g
4.2.1.1 Composition : Eau.................................................................. 1 000 ml

Digestat enzymatique de caséine................... 1 g


4.2.4.2 Préparation :
Chlorure de sodium (NaCl)......................... 8,5 g
Eau..........................................................1 000 ml Dissoudre le sel dans 500 ml d'eau. Ajuster le pH,
si nécessaire, de sorte qu'après stérilisation, il soit de
4.2.1.2 Préparation : 7,2 ± 0,2 à 25 °C. Diluer à 1 000 ml avec l'eau restante.

Dissoudre les composants dans l'eau en chauffant Ajouter 1 ml de cette solution mère à 1 000 ml d'eau
légèrement, si nécessaire, sur une plaque chauffante (5.6). pour utilisation en tant que diluant.
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu'après
stérilisation, il soit de 7 ± 0,2 à 25 °C. Conserver la solution mère au réfrigérateur.
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4.2.5 Eau peptonée tamponnée : 4.3.2 Solution d'hydrogénophosphate dipotassique :

4.2.5.1 Composition : 4.3.2.1 Composition :

Digestat enzymatique de tissus animaux................ 10 g Hydrogénophosphate dipotassique


Chlorure de sodium (NaCl)...................................... 5 g (K2HPO4).............................................................. 20 g

Hydrogénophosphate disodique dodécahydraté Eau................................................................... 1000 ml


(Na2HPO4, 12H2O)......................................... 9 g *)
Dihydrogénophosphate de potassium (KH2PO4)..1,5 g
4.3.2.2 Préparation :
Eau.................................................................. 1 000 ml
Dissoudre le sel dans de l'eau en chauffant, si
*) En alternative, utiliser 3,56g d'hydrogénophosphate
nécessaire, sur une plaque chauffante (5.6) à une
disodique anhydre (Na2HPO4).
température comprise entre 45 °C et 50 °C. Pour la poudre
de lactosérum acide, ajuster le pH de sorte que, pour la
première dilution après stérilisation, il soit de 8,4 ± 0,2 à
4.2.5.2 Préparation : 25 °C. Pour le fromage, le lait en poudre Hatmaker, le lait
fermenté, les caséinates et la crème acide, ajuster le pH de
Dissoudre les composants dans l'eau en chauffant sorte qu'après stérilisation, il soit de 7,5 ± 0,2 à 25 °C.
légèrement, si nécessaire, sur une plaque chauffante (5.6).
4.3.2.3 Application :
Si nécessaire, ajuster le pH de sorte qu'après
stérilisation, il soit de 7 ± 0,2 à 25 °C. Cette solution est utilisée pour le fromage, le lait en
poudre Hatmaker, le lait fermenté, certains caséinates, le
4.2.5.3 Application : lactosérum acide et la crème acide.

Ce diluant est recommandé en particulier pour la 4.3.3 Solution d'hydrogénophosphate dipotassique


détection de Salmonella spp ou le dénombrement de avec agent antimoussant :
Listeria monocytogenes, mais peut également être utilisé
pour la préparation de suspensions mères pour d'autres 4.3.3.1 Solution d'hydrogénophosphate dipotassique :
analyses.
4.3.3.1.1 Composition :
4.3 Diluants pour des besoins particuliers :

Ces diluants ne doivent être utilisés que pour la Hydrogénophosphate dipotassique


préparation de suspensions mères. (K2HPO4).............................................................. 20 g
Eau................................................................... 1000 ml
4.3.1 Solution de citrate de sodium :

4.3.1.1 Composition :
4.3.3.1.2 Préparation :

Citrate trisodique dihydraté Dissoudre l'hydrogénophosphate dipotassique dans de


(Na3 C6H5O7,2H2O)............................................. 20 g l'eau en chauffant, si nécessaire, sur une plaque chauffante
(5.6) à une température comprise entre 45 °C et 50 °C.
Eau................................................................... 1000 ml
4.3.3.2 Solution concentrée d'agent antimoussant :

4.3.3.2.1 Composition :
4.3.1.2 Préparation :

Dissoudre le sel dans de l'eau en chauffant, si néces-


saire, sur une plaque chauffante (5.6) à une température Polyéthylène glycol 2000 ....................................... 1 g
comprise entre 45 °C et 50 °C. Ajuster le pH, si néces-
saire, de sorte qu'après stérilisation, il soit de 7,5 ± 0,2 à Eau .................................................................... 100 ml
25 °C.

4.3.1.3 Application : 4.3.3.2.2 Préparation :

Cette solution est utilisée pour le fromage et le lait en Dissoudre le polyéthylène glycol 2000 dans l'eau en
poudre Hatmaker et certains caséinates. mélangeant.
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4.3.3.3 Préparation de la solution 4.3.5.2 Application :


d'hydrogénophosphate dipotassique avec agent
antimoussant : Cette solution est utilisée pour des aliments contenant
de l'amidon.
Ajouter 1 ml de la solution concentrée d'agent
antimoussant (4.3.3.2) à 1 litre de la solution de K2HPO4 4.3.6 Eau peptonée tamponnée avec pourpre de
bromocrésol :
(4.3.3.1).
4.3.6.1 Composition :
Ajuster le pH de sorte qu'aussi bien pour la première
dilution de la caséine acide que pour celle de la caséine
lactique, il soit de 8,4 ± 0,2 à 25 °C et pour la caséine Eau peptonée tamponnée (4.2.5).................... 1 000 ml
présure il soit de 7,5 ± 0,2 à 25 °C après stérilisation.
Pourpre de bromocrésol (à 4 % dans une solution
4.3.3.4 Application : d'alcool, par exemple une solution
d'éthanol)............................................................ 0,1 ml
Cette solution est utilisée pour la caséine acide, la
caséine lactique et les caséines présures.

4.3.4 Solution de tripolyphosphate : 4.3.6.2 Préparation :

4.3.4.1 Composition : Ajouter 0,1 ml de solution de pourpre de bromocrésol à


1 000 ml d'eau peptonée tamponnée (4.2.5).
Tripolyphosphate de sodium (Na5O10P3)............. 20 g
Eau................................................................... 1000 ml 4.3.6.3 Application :

Cette solution peut être utilisée dans certains produits


4.3.4.2 Préparation : acides (7.3) de sorte que l'ajustement du pH puisse être
réalisé sans utiliser une sonde de ph stérile.
Dissoudre le sel dans l'eau en chauffant légèrement sur
une plaque chauffante (5.6), si nécessaire, verser la Le pourpre de bromocrésol est jaune à un pH acide,
solution de tripolyphosphate dans des flacons à raison de virant au violet à un pH supérieur à 6,8.
90 ml et les stériliser.
4.4 Répartition et stérilisation du diluant :
Note : Cette solution peut être conservée à une
température de 5 °C ± 3 °C pendant un mois au Pour la préparation et la stérilisation du diluant, il y a
maximum. lieu de se conformer à la méthode d'analyse relative à la
préparation des échantillons, de la suspension mère et des
4.3.4.3 Application : dilutions décimales en vue de l'examen microbiologique,
fixée par la réglementation en vigueur.
Cette solution est utilisée comme autre diluant pour les
caséines présures qui sont difficiles à dissoudre.
5. APPAREILLAGE :
4.3.5 Diluant à usage général avec une solution
d'α-amylase : Matériel courant de laboratoire de microbiologie et en
particulier, ce qui suit :
4.3.5.1 Préparation :
5.1 Mélangeur rotatif ou péristaltique.
Ajouter 12,5 mg d'α-amylase ayant une activité
spécifique d'approximativement 400 unités(*) par 5.2 Agitateur Vortex.
milligramme pour 225 ml du diluant d'usage général (4.2).
Ce diluant est utilisé pour 25 g de prise d'essai. 5.3 Billes en verre de diamètre environ 6 mm.

Utiliser des quantités dans la même proportion pour la 5.4 Bains d'eau capables de maintenir des températures
préparation d'autres prises d'essai (par exemple pour une de 37 °C ± 1 °C et de 45 °C ± 1 °C.
prise d'essai de 10 g, ajouter 5 mg d'α-amylase à 90 ml du
diluant à usage général).
5.5 Spatules ou baguettes en verre.
Note : (*) Cette unité internationale est définie comme
étant la quantité d'enzyme qui catalyse la transformation 5.6 Plaque chauffante ou autre appareil, permettant
de 1 µmol de substrat par minute dans des conditions un chauffage doux (pas de brûleurs à gaz) et pouvant
normales. fonctionner à la température requise.
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6. PREPARATION DES ECHANTILLONS : 7. MODES OPERATOIRES GENERAUX :

6.1 Produits congelés : 7.1 Généralités :

Il convient de ramener les produits stockés congelés à Il convient que toutes les préparations et les
une consistance permettant de réaliser l'échantillonnage, manipulations soient effectuées selon des techniques
c'est-à-dire en les stockant entre 18 °C et 27 °C aseptiques appropriées et avec un équipement stérile pour
(température du laboratoire) pendant 3 h au maximum, ou empêcher toute contamination microbienne des
à 3 °C ± 2 °C pendant 24 h au maximum. échantillons par des sources extérieures.

Soumettre les échantillons à essai dès que possible. 7.2 Echantillonnage :


L'échantillon doit être représentatif, non endommagé ou
En ce qui concerne la durée des opérations relative à la
modifié lors du transport ou de l'entreposage.
préparation des échantillons, il y a lieu de se conformer à
la méthode d'analyse relative à la préparation des
7.3 Cas général des produits acides :
échantillons, de la suspension mère et des dilutions
décimales en vue de l'examen microbiologique, fixée par Il est important de s'assurer lors de l'utilisation d'une
la réglementation en vigueur. solution en suspension de produits acides, que le pH soit
ramené à la neutralité. L'utilisation de diluant additionné
Si le produit est encore congelé au moment de la d'un indicateur de pH (4.3.6) peut permettre d'éviter
prise d'essai, il est possible d'ajouter du diluant (4), à l'utilisation et la stérilisation des sondes de pH ;
température du laboratoire pour faciliter la décongélation. ajouter de l'hydroxyde de sodium (NaOH) jusqu'à ce que
l'indicateur commence à changer de couleur.
6.2 Produits durs et secs :
En cas d'utilisation de diluants tamponnés, l'ajout de
NaOH est souvent nécessaire pour augmenter l'effet
Pour mélanger des produits durs dans un mélangeur
tampon du composant alcalin. La concentration du NaOH
péristaltique (5.1) placer l'échantillon et le diluant dans
ajouté, dépend de l'acidité du produit. La concentration la
deux sacs ou plus stériles, afin d'empêcher leur perforation
plus adaptée est celle qui permet de s'écarter le moins
et un débordement possible de l'échantillon.
possible du rapport 1 pour 9 de diluant (par exemple 0,1
mol/l ou 1 mol/l)).
Pour les produits durs ou secs, ne pas homogénéiser
dans un homogénéisateur rotatif plus de 2,5 minutes en
7.4 Aliments à forte teneur en matières grasses
continu.
(plus de 20 % de matière grasse sur la masse totale
(fraction massique)) :
Pour les produits secs et durs ou hétérogènes, il peut
être nécessaire de broyer l'échantillon pour laboratoire. L'emploi de diluant additionné de 1 g/l à 10 g/l de
Dans ce cas et pour éviter un échauffement excessif, monooléate de sorbitol [polysorbate 80] : par exemple
l'opération de broyage ne doit pas durer plus d'une tween 80, correspondant approximativement au taux de
minute. matières grasses (par exemple ajout de 4 g/l pour une
teneur en matières grasses de 40 %) peut améliorer
6.3 Produits liquides et non visqueux : l'émulsification lors de la mise en suspension.

Agiter l'échantillon manuellement (8.1) ou par des 8. MODES OPERATOIRES SPECIFIQUES :


moyens mécaniques de manière à s'assurer que les
8.1 Lait et produits laitiers liquides :
micro-organismes sont uniformément répartis avant
l'analyse. Mélanger soigneusement l'échantillon pour essai afin
d'assurer une répartition aussi uniforme que possible des
6.4 Produits hétérogènes : micro-organismes en retournant rapidement 25 fois le
récipient contenant l'échantillon. Eviter la formation de
Pour les produits hétérogènes, il convient de prélever mousse et bien laisser la mousse se disperser, si elle se
des parties aliquotes de chaque composant en fonction de forme. L'intervalle de temps entre le mélange et le
leurs proportions dans le produit initial. prélèvement de la prise d'essai ne doit pas dépasser 3
minutes.
Il est également possible d'homogénéiser l'ensemble de
l'échantillon pour laboratoire pour permettre le Prélever au moins 1 ml d'échantillon pour essai avec
prélèvement d'un échantillon pour essai plus homogène. une pipette stérile et ajouter une quantité neuf fois égale
de diluant à usage général (4.2). Agiter cette première
Il peut être nécessaire de broyer l'échantillon pour dilution pour obtenir une dilution 10-1 [par exemple 25
laboratoire. Dans ce cas et pour éviter un échauffement fois avec un mouvement d'environ 300 mm pendant 7
excessif, l'opération de broyage ne doit pas durer plus secondes manuellement, ou utiliser un agitateur Vortex
d'une minute. (5.2) pendant 5 secondes à 10 secondes].
6 Rabie Ethani 1439
28 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 74 25 décembre 2017

Préparer les dilutions qui suivent conformément au Laisser la mousse se disperser.


point (9).
Le diluant peut être préchauffé à 45 °C si une
8.2 Lait sec, poudre de lactosérum doux, poudre de suspension homogène ne peut pas être obtenue même
lactosérum acide, babeurre en poudre et lactose : après broyage.
Mélanger soigneusement le contenu du récipient fermé
Préparer les dilutions qui suivent conformément au
en le secouant et en le retournant de manière répétée.
point (9).
Si l'échantillon pour essai est dans le récipient d'origine
non ouvert et trop plein ne permettant pas un mélange 8.4 Caséine acide, caséine lactique, caséine présure
complet, le transférer dans un autre récipient stérile plus et caséinates :
grand, puis mélanger. Prélever la prise d'essai requise
avec une spatule et procéder comme indiqué ci-dessous. 8.4.1 Cas général :
Refermer immédiatement le récipient.
Mélanger soigneusement le contenu du récipient fermé
Peser 10 g de l'échantillon pour essai dans un récipient en l'agitant et en le retournant de manière répétée.
en verre stérile (par exemple un bécher) et verser ensuite
la poudre dans le flacon de dilution contenant un diluant à Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un sac plastique
usage général (4.2). Pour la poudre de lactosérum acide, stérile pour mélangeur péristaltique (5.1). Ajouter 90 ml
utiliser une solution d'hydrogénophosphate dipotassique
du diluant approprié à température ambiante, comme suit :
(4.3.2) à un pH de 8,4 ± 0,2 ou, si nécessaire, utiliser pour
le lait en poudre Hatmaker une solution de citrate de a) pour les caséines acides et lactiques, diluer avec une
sodium (4.3.1) ou une solution d'hydrogénophosphate solution d'hydrogénophosphate dipotassique avec agent
dipotassique (4.3.2) à un pH de 7,5 ± 0,2. antimoussant (4.3.3) à un pH de 8,4 ± 0,2 ;
Ou bien, peser 10 g de l'échantillon pour essai et le
verser directement dans le flacon avec le diluant requis. b) pour les caséinates, diluer avec une solution de
citrate (4.3.1) ou une solution d'hydrogénophosphate
Pour dissoudre l'échantillon pour essai, faire tourner dipotassique (4.3.2) à un pH de 7,5 ± 0,2 ou une solution
lentement le flacon pour mouiller la poudre, puis agiter le de peptone-sel (4.2.1) ;
flacon par exemple 25 fois avec une amplitude d'environ
300 mm pendant environ 7 secondes. Au lieu d'une c) pour la caséine présure, diluer avec une solution
agitation manuelle, un mélangeur du type péristaltique d'hydrogénophosphate dipotassique avec agent
(5.1) peut être utilisé. antimoussant (4.3.3) à un pH de 7,5 ± 0,2.
Laisser reposer 5 minutes, agiter occasionnellement. Bien mélanger manuellement et laisser reposer à
Le diluant peut être préchauffé à 45 °C si une température ambiante pendant 15 minutes. Mélanger si
suspension homogène ne peut pas être obtenue même nécessaire, pendant 2 minutes dans un mélangeur
après broyage. péristaltique (5.1) en utilisant deux sacs stériles pour les
produits en granulés. Laisser reposer pendant 5 minutes.
Préparer les dilutions qui suivent conformément au
point (9). Préparer les dilutions qui suivent conformément au
point (9).
Note : Pour une meilleure reconstitution, et en
particulier avec du lait en poudre Hatmaker, il est utile 8.4.2 Cas particulier de la caséine présure :
d'utiliser des billes en verre (5.3). Dans ce cas, il est
préférable de les mettre dans le flacon avant la
stérilisation. L'utilisation d'une solution d'hydrogénophosphate
dipotassique avec agent antimoussant (4.3.3) comme
8.3 Fromages et fromage fondu : diluant pour les caséines présures peut ne pas être efficace
pour dissoudre les grains de caséine. Ces grains gênent le
Peser 10 g d'échantillon pour essai dans une coupelle et dénombrement des micro-organismes à 30 °C. En
les transférer dans le récipient d'un mélangeur rotatif ou conséquence, il est recommandé d'utiliser la technique
d'un mélangeur de type péristaltique (5.1). Ou bien, peser suivante :
10 g d'échantillon pour essai directement dans le récipient.
Ajouter 90 ml de diluant à usage général (4.2) ou de Si nécessaire, réduire en poudre la caséine sèche avant
diluant pour fromage, soit 90 ml de solution de citrate de de prélever la prise d'essai. Transférer approximativement
sodium (4.3.1) ou de solution d'hydrogénophosphate 20 g d'échantillon pour essai dans un récipient
dipotassique (4.3.2) à un pH de 7,5 ± 0,2. approprié. Le broyer en utilisant un appareil comportant
des couteaux pouvant tourner à, approximativement,
Mélanger de manière à disperser complètement le 20.000 t/min, équipé d'un dispositif qui empêche
fromage. l'échauffement de l'échantillon pendant le broyage.
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25 décembre 2017 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 74 29

Peser 5 g de l'échantillon pour essai ainsi préparé dans Préparer les dilutions qui suivent, conformément au
un flacon stérile de 250 ml. Ajouter des billes en verre point (9).
(5.3) pour mélanger et 95 ml de la solution de
tripolyphosphate de sodium (4.3.4) préchauffée à 37 °C.
8.6 Crème glacée :
Mélanger en laissant le flacon sur un dispositif mélangeur
pendant 15 minutes. Puis le placer dans le bain d'eau (5.4)
réglé à 37 °C pendant 15 minutes tout en agitant de temps Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un flacon ou
à autre. dans un sac plastique stérile pour mélangeur péristaltique
(5.1). Ajouter 90 ml de diluant à température ambiante et
Préparer les dilutions qui suivent conformément au mélanger. Le produit fond au cours du mélange.
point (9).
Préparer les dilutions qui suivent, conformément au
8.5 Beurre :
point (9).
S'il est nécessaire d'exclure la surface d'un échantillon
de beurre de l'examen, il convient d'utiliser une spatule à 8.7 Crème anglaise, desserts et crème douce
large lame pour enlever la couche supérieure du produit (pH> 5) :
dans la zone d'échantillonnage sur une épaisseur d'au
moins, 5 mm. Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un flacon
Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un récipient contenant des billes en verre (5.3). Ajouter 90 ml de
pour échantillon. Placer le récipient dans le bain d'eau diluant à usage général (4.2) à température ambiante et
(5.4) réglé à 45 °C. Le maintenir dans le bain d'eau jusqu'à agiter pour disperser. Ou bien, un mélangeur péristaltique
ce que toute la prise d'essai ait fondu.
(5.1) peut être utilisé suivant les instructions du fabricant.
Ajouter 90 ml de diluant à usage général (4.2) porté à Dans ce cas, il convient que le sac ne contienne pas de
45 °C et mélanger. billes en verre.

Cette opération est plus facile à exécuter dans un


Préparer les dilutions qui suivent, conformément au
mélangeur péristaltique (5.1). Ou bien, n'utiliser que la
phase aqueuse pour la dilution, comme suit : point (9).

Prélever une prise d'essai de 50 g contenant une fraction 8.8 Lait fermenté et crème acide (pH < 5) :
en volume/masse d'eau de w %. Ajouter une quantité de
(50 – [50 x w/100]) ml de diluant à usage général (4.2)
Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un flacon
préchauffé dans le bain d'eau (5.4) à 45 °C.
contenant des billes en verre (5.3). Ajouter comme diluant
Dans ces conditions, 1 ml de la phase aqueuse 90 ml d'eau peptonée tamponnée (4.2.5) ou une solution
correspond à 1 g de beurre. d'hydrogénophosphate dipotassique (4.3.2) à un pH de
7,5 ± 0,2 à température ambiante et agiter manuellement.
EXEMPLE : Pour 50 g de beurre contenant une
fraction en volume/masse d'eau d'environ 16 %, la phase
aqueuse représente 8 ml de liquide. Ajouter (50 – [50 x Ou bien, un mélangeur péristaltique (5.1) peut être
16/100]) = 42 ml de diluant à usage général (4.2) utilisé suivant les instructions du fabricant. Dans ce cas, il
préchauffé dans le bain d'eau (5.4) à 45 °C. convient que le sac ne contienne pas de billes en verre.

Placer le récipient dans le bain d'eau (5.4) réglé à 45 °C Préparer les dilutions qui suivent, conformément au
jusqu'à ce que le beurre fonde. Le retirer du bain d'eau, point (9).
bien agiter, et laisser les phases se séparer pendant une
durée maximale de 15 minutes. Si nécessaire, enlever la
phase de matière grasse avec une spatule ou une baguette 8.9 Aliments à base de lait pour nourrissons :
en verre (5.5).
Mélanger soigneusement le contenu du récipient fermé
Si nécessaire, et pour séparer les phases, transférer la en l'agitant et en le retournant de manière répétée. Si
prise d'essai fondue dans un tube de centrifugation stérile l'échantillon pour essai est dans le récipient d'origine non
(ou faire fondre directement la prise d'essai dans le tube) ouvert et trop plein ne permettant pas un mélange
et centrifuger à une vitesse de rotation permettant aux
complet, le transférer dans un autre récipient stérile, plus
phases de se séparer. Il peut être nécessaire, d'enlever la
phase grasse (supérieure) de manière aseptique avec un grand, puis mélanger. Prélever la prise d'essai requise
tube stérile relié à une pompe à vide. Aspirer avec une avec une spatule (5.5) et procéder comme indiqué
pipette depuis la couche inférieure. ci-dessous. Refermer immédiatement le récipient.
6 Rabie Ethani 1439
30 JOURNAL OFFICIEL DE LA REPUBLIQUE ALGERIENNE N° 74 25 décembre 2017

Peser 10 g d'échantillon pour essai dans un récipient en


verre stérile approprié (par exemple un bécher). Puis MINISTERE DE L’ENVIRONNEMENT
ajouter la poudre dans le flacon de dilution contenant un ET DES ENERGIES RENOUVELABLES
diluant à usage général (4.2) ou pour des échantillons
ayant une teneur élevée en amidon, un diluant pour des Arrêté interministériel du 26 Moharram 1439
besoins particuliers (4.3.5). correspondant au 17 octobre 2017 fixant la
nomenclature des recettes et des dépenses du
Ou bien, peser directement 10 g de l'échantillon pour compte d’affectation spéciale n° 302-065 intitulé
essai dans le flacon avec le diluant requis. « Fonds national de l’environnement et du
littoral ».
Le diluant peut être préchauffé à 45 °C si une ————
suspension homogène ne peut pas être obtenue même
après broyage. Le ministre des finances,

Pour une meilleure reconstitution, il est utile d'utiliser La ministre de l'environnement et des énergies
des billes en verre (5.3). Dans ce cas, les ajouter dans le renouvelables,
flacon avant la stérilisation.
Vu le décret présidentiel n° 17-243 du 25 Dhou
Pour dissoudre l'échantillon, faire tourner lentement le El Kaâda 1438 correspondant au 17 août 2017 portant
flacon pour mouiller la poudre puis agiter nomination des membres du Gouvernement ;
manuellement le flacon, par exemple 25 fois, avec une
Vu le décret exécutif n° 95-54 du 15 Ramadhan 1415
amplitude d'environ 300 mm, pendant environ 7 secondes.
correspondant au 15 février 1995 fixant les attributions du
Ou bien, un mélangeur péristaltique (5.1) peut être utilisé.
ministre des finances ;
Laisser reposer 5 min, en agitant occasionnellement.
Vu le décret exécutif n° 17-170 du 25 Chaâbane 1438
Préparer les dilutions qui suivent, conformément au correspondant au 22 mai 2017 fixant les modalités
point (9). de fonctionnement du compte d'affectation spéciale
n° 302-065 intitulé « Fonds national de l'environnement et
Les échantillons ayant une teneur élevée en amidon du littoral » ;
peuvent créer des problèmes du fait de la viscosité élevée
de la première dilution. Vu l'arrêté interministériel du 10 Joumada El Oula 1428
correspondant au 27 mai 2007 fixant la nomenclature des
Utiliser un diluant à usage général (4.2) avec une recettes et des dépenses imputables sur le compte
solution d'α-amylase (4.3.5) pour réduire la viscosité de la d'affectation spéciale n° 302-113 intitulé « Fonds national
solution mère ou utiliser deux fois la quantité de diluant. pour la protection du littoral et des zones côtières » ;
Tenir compte de cette dilution supplémentaire lors des
examens ultérieurs. Arrêtent :

9. DILUTIONS DECIMALES : Article 1er. — En application des dispositions de


l'article 3 du décret exécutif n° 17-170 du 25 Chaâbane
1438 correspondant au 22 mai 2017, susvisé, le présent
Il convient de suivre les recommandations prévues dans
arrêté a pour objet de fixer la nomenclature des recettes et
la méthode relative à la préparation des échantillons, de la
des dépenses du compte d'affectation spéciale n° 302-065
suspension mère et des dilutions décimales en vue de
intitulé « Fonds national de l'environnement et du
l'examen microbiologique, fixée par la réglementation en
littoral ».
vigueur.
Art. 2. — Conformément aux dispositions de l'article 3
Lors du transfert d'une suspension mère visqueuse, du décret exécutif n° 17-170 du 25 Chaâbane 1438
préparée à partir de caséine acide ou de caséine présure correspondant au 22 mai 2017, susvisé, le Fonds national
(8.4), rincer la pipette avec le diluant par plusieurs de l'environnement et du littoral a pour recettes :
aspirations, en ayant recours au diluant utilisé pour
réaliser la dilution décimale. — une taxe sur les actions polluantes et dangereuses
pour l'environnement ;
Lorsque 10 ml plus 90 ml ou 11 ml plus 99 ml, ont été
prélevés, agiter manuellement comme décrit en (8.1). — les taxes spécifiques fixées par les lois de finances ;
— les produits des amendes perçues au titre des
Note : Si l'étape mentionnée ci-dessus est réalisée sans infractions à la législation sur la protection de
rincer la pipette lors du transfert d'une première dilution l'environnement et du littoral ;
visqueuse, le volume de la suspension mère à transférer
sera incorrect. — les dons et legs nationaux et internationaux ;

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