Inserto Oxidasa

REF 55 635 11059 D - FR - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

Dtection de l'enzyme cytochrome oxydase.
INTRODUCTION ET OBJET DU TEST xNe pas utiliser ce produit dans les cas suivants :
Ce test permet la dtection de lenzyme cytochrome - changement de couleur (ractif initialement incolore
oxydase des bactries. Cette enzyme est caractristique jaune ple),
du genre Neisseria et de la majorit des espces de - emballage dtrior,
Pseudomonas. Elle permet la diffrenciation des bacilles - autres signes de dtrioration (ampoule casse).
Gram (-) (1, 2). xLes performances prsentes ont t obtenues avec la
mthodologie indique dans cette notice. Toute
PRINCIPE dviation de mthodologie peut modifier les rsultats.
xL'interprtation des rsultats du test doit tre faite en
Le test de l'oxydase est bas sur la production tenant compte du contexte clinique, de l'origine du
bactrienne d'une enzyme oxydase intracellulaire. prlvement, des aspects macro et microscopiques et
En prsence d'oxygne atmosphrique et de ventuellement des rsultats d'autres tests.
cytochrome C, cette enzyme oxyde le ractif
phnylnediamine, pour former un compos color en
CONDITIONS DE STOCKAGE
violet, l'indophnol.
L'acide ascorbique, incorpor dans le ractif, agit en tant xLes ractifs se conservent entre 18C et 25C dans
qu'agent rducteur pour limiter l'auto-oxydation et leur coffret jusqu la date de premption.
amliorer la stabilit du ractif (6). xNe pas congeler.
Cette formulation est base sur la formule du ractif xConserver l'abri de la lumire.
oxydase de Kovacs (3). xLe ractif oxydase s'auto-oxyde rapidement et perd
sa sensibilit. Tout ractif partiellement utilis doit
PRESENTATION tre limin au bout de 12 heures.
REF 55 635 Ractif prt lemploi ECHANTILLONS

Coffret comprenant : Lchantillon est constitu dune colonie isole pour
laquelle on veut dtecter lenzyme cytochrome oxydase.
- 50 ampoules contenant chacune 0,75 ml de ractif
Cette colonie doit tre issue dune culture de 18
- 1 briseur d'ampoule rutilisable
24 heures sur milieux de culture gloss solides.
+ 1 notice
MODE OPERATOIRE
COMPOSITION
Ouverture de lampoule :
Formule thorique :
1. Placer le flacon compte-gouttes dans le briseur
Ce ractif peut tre ajust en fonction des critres de performances
imposs. d'ampoule.
N,N,N,N-ttramethyl-1,4-phnylnediamine .............................. 10,0 g 2. Tapoter le fond du flacon pour liminer les bulles qui
Acide ascorbique ......................................................................... 2,0 g auraient pu s'y former.
Eau dsionise ...............................................................................1 L 3. Saisir le milieu de l'ensemble flacon/briseur et appuyer
doucement pour briser l'ampoule.
MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI Ralisation du test :
xOese (en platine, plastique). 1. Distribuer prcisment 1 goutte de ractif sur un
xDisques non imprgns de diamtre 6 mm disque non imprgn de diamtre 6 mm (Rf. 54 991).
(Rf. 54 991). 2. Etaler la colonie sur le disque.
PRECAUTIONS DUTILISATION LECTURE ET INTERPRETATION

xPour diagnostic in vitro uniquement. xL'apparition en 10 30 secondes d'une coloration allant
xPour usage professionnel uniquement. de violet pourpre indique un test positif.
xLes prlvements et cultures bactriennes doivent tre xDes ractions tardives ou l'absence de couleur
considrs comme potentiellement infectieux et doivent indiquent un test ngatif.
tre manipuls de faon approprie par un personnel
comptent et averti. Les techniques aseptiques et les CONTROLE QUALITE
prcautions usuelles de manipulation pour le groupe
bactrien tudi doivent tre respectes tout au long de Protocole :
la manipulation; se rfrer "NCCLS M29-A, Protection Lactivit du ractif peut tre teste laide des souches
of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and suivantes cultives sur glose Trypcase-Soja :
Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, xPseudomonas aeruginosa

ATCC 27853
and Tissue; Approved Guideline Rvision en vigueur". xEscherichia coli

ATCC 25922.
Pour informations complmentaires sur les prcautions
de manipulation, se rfrer "Biosafety in Rsultats attendus :
Microbiological and Biomedical Laboratories CDC/NIH Souche Rsultats
- Dernire dition", ou la rglementation en vigueur
dans le pays d'utilisation. Pseudomonas aeruginosa
Positif : coloration violette
xNe pas utiliser les ractifs aprs la date de premption. ATCC 27853
Escherichia coli
Ngatif : pas de coloration
ATCC 25922
bioMrieux SA Franais - 1
Oxidase Reagent 11059 D - FR - 2005/06
Remarque : ELIMINATION DES DECHETS

Il est de la responsabilit de l'utilisateur de prendre en Les ractifs non utiliss peuvent tre limins comme
compte la nature de l'application et la lgislation locale en dchets non dangereux.
vigueur pour la mise en oeuvre du contrle de qualit Eliminer les ractifs utiliss ainsi que les matriels
(frquence, nombre de souches... ). usage unique contamins en suivant les procdures
relatives aux produits infectieux ou potentiellement
LIMITES DU TEST infectieux.
xLa raction doxydase ne doit pas tre ralise sur des Il incombe chaque laboratoire de grer les dchets et
colonies obtenues sur glose EMB ou CHAPMAN 2, ni les effluents qu'il produit selon leur nature et leur
sur des colonies issues dune culture de 48 heures sur dangerosit, et d'en assurer (ou faire assurer) le
des milieux gloss solides. traitement et l'limination selon les rglementations
xLa recherche de loxydase ne doit pas tre effectue sur applicables.
des colonies isoles prsentant une coloration
spontane (couleur violette, rose, verte, noire). Dans REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES
ce cas, la lecture du test est impossible. 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
xLutilisation dun volume de ractif trop important peut and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
entraner des rsultats faussement ngatifs. Nutiliser 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
quune seule goutte de ractif comme indiqu dans le 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
mode opratoire. Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
xIl est conseill d'utiliser une oese ou une aiguille en 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
platine ou en plastique pour le test de l'oxydase (7). oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
Toute trace de fer (nichrome) peut catalyser la raction 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
de l'oxydase et conduire une raction faussement in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
positive. Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
xTout ractif partiellement utilis doit tre limin au bout ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
de 12 heures. 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
xLes genres faiblement producteurs d'oxydase comme medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
les Pasteurella, peuvent donner des rsultats ngatifs Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
Precautions - p. 257.
(4).
xDes rsultats faussement ngatifs peuvent survenir en 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
cas de cultures mixtes de Pseudomonas et Neisseria. Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
Une substance inhibitrice est produite par 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
Pseudomonas spp. interfrant avec la production Gen. Microbiol., 1961, vol. 25, p. 297-306.
d'oxydase de Neisseria spp.
TABLE DES SYMBOLES
PERFORMANCES
Symbole Signification
Une tude a t conduite sur 100 souches.
Sur les 100 souches testes, seules 92 souches dcrites
comme positives ou ngatives strictes au test de ou REF Rfrence du catalogue
loxydase ont t conserves pour le calcul de la
sensibilit et de la spcificit ; les 8 autres souches Dispositif mdical de diagnostic in
dcrites comme variables (Bacillus et Micrococcus) nont vitro
pas t prises en compte.
Fabricant
Sur la base de cette tude, les rsultats sont les suivants :
xsur les 65 souches positives testes, 4 donnent un
rsultat ngatif : Haemophilus parainfluenzae (1 souche Limites de temprature
sur les 2 testes), Pasteurella multocida (1 souche sur
les 4 testes) et Photobacterium damsela (2 souches Utiliser jusque
sur les 2 testes).
x Sur les 27 souches ngatives testes, 1 seule donne un Code du lot
rsultat positif : Pseudomonas oryzihabitans (1 souche
sur 1 teste). Consulter les instructions
d'utilisation
Nombre de Sensibilit Spcificit
souches IC* (95%) IC* (95%) Conserver labri de la lumire
92 93,85% 96,30%
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
* Intervalle de confiance.
ATCC est une marque utilise, dpose et/ou enregistre appartenant American Type Culture Collection.
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l'une de ses filiales.
REF 55 635 11059 D - GB - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

Detection of the enzyme cytochrome oxidase
SUMMARY AND EXPLANATION xInterpretation of the test results should be made taking
This test is used to detect the production of the enzyme into consideration the patient's history, colonial and
cytochrome oxidase by bacteria. This enzyme is microscopic morphology and, if necessary, the results of
characteristic of the genus Neisseria and most species of any other tests performed.
Pseudomonas. It enables the differentiation of Gram (-)
bacilli (1, 2). STORAGE CONDITIONS
PRINCIPLE xStore the reagents at 18C-25C in their box until the
expiration date.
The oxidase test is based on the bacterial production of xDo not freeze.
an intracellular oxidase enzyme. xProtect from light.
In the presence of atmospheric oxygen and cytochrome xThe oxidase reagent quickly auto-oxidizes and loses
C, this enzyme oxidizes the phenylenediamine reagent to its sensitivity. Unused reagent should be discarded
form a purple colored compound, indophenol. after 12 hours.
Ascorbic acid is incorporated in the reagent as a reducing
agent to reduce autooxidation and to improve stability (6).
SPECIMENS
This formulation is based on the oxidase reagent formula
of Kovacs ( (3). The specimen consists of an isolated colony for which
cytochrome oxidase enzyme production is to be detected.
CONTENT OF THE KIT The colony should be collected from an 18-24-hour-old
culture grown on a solid agar medium.
REF 55 635 Ready-to-use reagent
Kit contents: INSTRUCTIONS FOR USE
- 50 ampules with 0.75 ml of reagent per ampule Opening the ampule:
- 1 reusable ampule crusher
+ 1 package insert 1. Place the dropper in the reusable ampule crusher.
2. Lightly tap the bottom of the dropper to dislodge any
bubbles that may have formed.
COMPOSITION 3. Take hold of the middle of the dropper/crusher and
Theoretical formula. press gently to crush the ampule inside.
This reagent can be adjusted according to the performance criteria Test procedure:
required.
N,N,N,N-tetramethyl-1,4-phenylenediamine ............................. 10.0 g
1. Dispense precisely 1 drop of reagent onto a non-
Ascorbic acid ............................................................................... 2.0 g impregnated disc (diameter 6 mm) (Ref. 54 991).
Deionized water.......................................................................... 1 L 2. Smear the colony on the disc.
MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED READING AND INTERPRETATION

xInoculating loop (platinum or plastic). xA positive test is indicated by the development of a
xNon-impregnated disks (diameter 6 mm)(Ref. 54 991). violet to purple color within 10-30 seconds.
WARNINGS AND PRECAUTIONS xDelayed reactions or no color development indicate a
negative test.
xFor in vitro diagnostic use only.
xFor professional use only.
xAll samples and microbial cultures must be treated as QUALITY CONTROL
potentially infectious and handled appropriately by Protocol:
trained and competent personnel. Aseptic technique and
The activity of the reagent can be tested using the
usual precautions for handling the group of bacteria
following strains grown on Trypcase-Soy agar:
studied should be observed throughout this procedure.
xPseudomonas aeruginosa ATCC 27853
See "NCCLS M29-A, Protection of Laboratory Workers
xEscherichia coli ATCC 25922.
from Instrument Biohazards and Infectious Disease
Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue ; Expected results:
Approved Guideline - Current Revision". For additional
handling precautions, refer to "Biosafety in Strain Results
Microbiological and Biomedical Laboratories, CDC/NIH, Pseudomonas aeruginosa Positive: violet color
Latest Edition", or to the regulations currently in use in ATCC 27853 development
each country.
Escherichia coli Negative: no color
xDo not use reagents past the expiration date.
ATCC 25922 development
xThis product should not be used if:
- the color has changed (the reagent is originally Note:
colorless to pale yellow),
It is the responsibility of the user to perform Quality
- the packaging is damaged,
Control taking into consideration the intended use of the
- there are other signs of deterioration (broken ampule)
medium, and in accordance with any local applicable
xThe performance data presented were obtained using
regulations (frequency, number of strains, etc.).
the procedure indicated in this package insert. Any
change or modification in the procedure may affect the
results.
bioMrieux SA English - 1
Oxidase Reagent 11059 D - GB - 2005/06
LIMITATIONS OF THE METHOD LITERATURE REFERENCES

xThe oxidase test should not be performed on colonies 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
obtained on EMB or CHAPMAN 2 agar, or colonies from and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
a 48-hour-old culture grown on solid agar media. 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
xOxidase detection should not be performed on isolated 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
colonies showing a spontaneous color development Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
(violet, pink, green, black, etc.). In this case, reading of 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
the test is impossible. oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
xUsing too large volumes of reagent could lead to false 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
negative results. Only use one drop of reagent as in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
indicated in the instructions for use. Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
xA platinum or plastic inoculating loop or needle (7) is ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
recommended for use in oxidase testing. The presence 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
of any trace of iron (nichrome) can catalyze an oxidase medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
reaction, resulting in a false-positive reaction. Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
xDiscard the remaining portion of partially used reagent
after 12 hours. 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
xWeak oxidase producers e.g. Pasteurella, may give Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
negative results (4). 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
xFalse-negative results occur if mixed cultures contain Gen. Microbiol., 1961, vol. 25, p. 297-306.
the genera Pseudomonas and Neisseria. An inhibitory
substance is produced by Pseudomonas spp which INDEX OF SYMBOLS
interferes with the production of oxidase by Neisseria Symbole Meaning
spp.
PERFORMANCE or REF Catalogue number
A study was carried out using 100 strains.
Out of the 100 strains tested, 92 were described as In Vitro Diagnostic Medical Device
oxidase-positive or oxidase-negative and were used to
calculate the reagent performance: sensitivity and
specificity; the other 8 strains were described as oxidase- Manufacturer
variable (Bacillus and Micrococcus) and were not taken
into account for the performance calculations.
Temperature limitation
On the basis of this study, the following results were
obtained :
xout of the 65 positive strains tested, 4 gave negative Use by
results: Haemophilus parainfluenzae (1 out of 2 strains
tested), Pasteurella multocida (1 out of 4 strains tested)
Batch code
and Photobacterium damsela (2 out of 2 strains tested).
x out of the 27 negative strains tested, only one tested
Consult instructions for use
positive: Pseudomonas oryzihabitans (1 out of 1 strain
tested).
Protect from light
Number of Sensitivity Specificity
strains CI* (95%) CI* (95%)
92 93.85% 96,30% WARRANTY
(84.98% 97.62%) (81.28% - 99.36%) bioMrieux disclaims all warranties, express or implied,
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Dispose of used reagents as well as any other EXCEED A REFUND OF THE AMOUNT PAID TO
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REF 55 635 11059 D - DE - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

Nachweis des Enzyms Cytochrom-Oxidase.
xDie angegebene Performance wurde gem dem
EINFHRUNG UND PRODUKTERKLRUNG Verfahren der vorliegenden Arbeitsanleitung ermittelt.
Dieser Test weist die Bildung des Enzyms Cytochrom- Jede Abweichung von diesem Verfahren kann die
Oxidase bei Bakterien nach. Dieses Enzym ist fr die Ergebnisse beeinflussen.
Gattung Neisseria und die meisten Pseudomonas xBei der Interpretation der Ergebnisse mssen der
Spezies charakteristisch. Es ermglicht eine Differen- klinische Hintergrund, die Probenherkunft, Kolonie- und
zierung von gramnegativen Stbchen (1, 2). mikroskopische Morphologie sowie gegebenenfalls die
Ergebnisse anderer Tests bercksichtigt werden.
PRINZIP
LAGERUNGSBEDINGUNGEN
Der Oxidase-Test beruht auf der Bildung des intra-
zellulren Oxidase-Enzyms durch die Bakterien. xDie Reagenzien sind bei 18C bis 25C in ihrer
In Anwesenheit von Luftsauerstoff und Cytochrom C oxi- Originalverpackung bis zum Verfallsdatum haltbar.
diert dieses Enzym das Reagenz Phenylendiamin, wobei xNicht einfrieren.
eine violett gefrbte Substanz (Indophenol) entsteht. xLichtgeschtzt lagern.
Das Reagenz enthlt Ascorbinsure, welche die Auto- xDas Oxidase-Reagenz oxidiert schnell und verliert
oxidation reduziert und die Stabilitt des Reagenzes an Sensitivitt. Nicht aufgebrauchtes Reagenz muss
verbessert (6). deshalb nach Ablauf von 12 h entsorgt werden.
Die Zusammensetzung basiert auf dem von Kovacs
PROBEN
beschriebenen Oxidase-Reagenz (3).
Die Probe besteht aus einer Einzelkolonie, bei der das
PACKUNGSGRSSE Enzym Cytochrom-Oxidase nachgewiesen werden soll.
Die Kolonie sollte von einer 18- bis 24 h-Kultur stammen,
REF 55 635 Gebrauchsfertiges Reagenz die auf festen Agarmedien angezchtet wurde.
Packungsinhalt:
GEBRAUCHSANWEISUNG
- 50 Ampullen mit je 0,75 ml Reagenz
- 1 wiederverwendbarer Ampullenffner ffnen der Ampullen:
+ 1 Arbeitsanleitung 1. Geben Sie das Tropfflschchen in den Ampullen-
ffner.
ZUSAMMENSETZUNG 2. Klopfen Sie leicht auf den Boden des Flschchens, um
Theoretische Zusammensetzung: eventuelle Blschen zu entfernen.
Dieses Reagenz kann in Abhngigkeit von den erforderlichen
3. Halten Sie Flschchen/Ampullenffner in der Mitte und
Leistungskriterien angepasst werden: drcken Sie diese vorsichtig zusammen, so dass die
N,N,N,N-Tetramethyl-1,4-phenylendiamin ................................. 10,0 g Ampulle zerbricht.
Ascorbinsure.............................................................................. 2,0 g
Deionisiertes Wasser......................................................................1 l Testdurchfhrung:
1. Geben Sie genau 1 Tropfen Reagenz auf ein nicht
ZUSTZLICH ERFORDERLICHE MATERIALIEN
imprgniertes Testblttchen (Durchmesser 6 mm)
xImpfse (Platin, Plastik). (Best.Nr. 54 991).
xNicht imprgnierte Testblttchen (6 mm Durchmesser) 2. Verreiben Sie die Kolonie auf dem Testblttchen.
(Best.Nr. 54 991).
ABLESUNG UND INTERPRETATION
VORSICHTSMASSNAHMEN
xDas Auftreten einer violett- bis purpurfarbenen Frbung
xNur fr die in vitro Diagnostik.
innerhalb von 10 bis 30 s zeigt ein positives
xNur fr die Verwendung durch Fachkundige bestimmt.
Testergebnis an.
xDie Proben, Mikroorganismen und beimpften Produkte
xVerzgert auftretende Reaktionen oder eine fehlende
mssen als potenziell infektis betrachtet und unter
Frbung zeigen ein negatives Testergebnis an.
Beachtung geeigneter Vorsichtsmanahmen sach-
gem behandelt werden. Whrend der gesamten Test- QUALITTSKONTROLLE
durchfhrung mssen aseptische Arbeitsbedingungen
und entsprechende Vorsichtsmanahmen fr die zu Verfahren:
untersuchende Keimgruppe eingehalten werden, siehe Die Aktivitt des Reagenzes kann mit folgenden auf
NCCLS M29-A, Protection of Laboratory Workers from Trypcase-Soja Agar angezchteten Stmmen berprft
Instrument Biohazards and Infectious Disease werden:

Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue; xPseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Approved Guideline aktuelle Revision. Weitere dies- xEscherichia coli ATCC 25922.
bezgliche Informationen finden Sie in Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories, CDC/NIH Erwartete Ergebnisse:
Letzte Ausgabe" oder in den jeweils gltigen Richtlinien. Stamm Ergebnisse
xDie Reagenzien nach Ablauf des Verfallsdatums nicht
mehr verwenden. Pseudomonas aeruginosa
Positiv: violette Frbung
xDas Reagenz darf nicht verwendet werden bei: ATCC 27853
- Verfrbung (das Reagenz ist im Originalzustand Escherichia coli
farblos bis hellgelb), Negativ: keine Frbung
ATCC 25922
- beschdigter Verpackung,
- anderen Anzeichen einer Beschdigung (zerbrochene
Ampullen).
bioMrieux SA Deutsch - 1
Oxidase Reagent 11059 D - DE - 2005/06
Anmerkung: BESEITIGUNG DER ABFLLE

Es liegt in der Verantwortung des Anwenders, die Nicht verwendete Reagenzien knnen als normale Abflle
Qualittskontrolle in bereinstimmung mit den jeweils entsorgt werden.
gltigen Vorschriften (Hufigkeit, Anzahl der Stmme... ) Entsorgen Sie alle gebrauchten Reagenzien sowie
durchzufhren. kontaminierte Einwegmaterialien gem den fr infektise
oder potenziell infektise Materialien geltenden
LIMITIERUNGEN Bestimmungen.
xDer Oxidase-Test darf nicht auf Kolonien durchgefhrt Es liegt in der Verantwortung jedes Labors, die
werden, die auf EMB oder CHAPMAN 2 Agar entstandenen Fest- und Flssigabflle gem der
angezchtet wurden, des Weiteren drfen keine 48 h jeweiligen Risikogruppe zu behandeln und deren
Kulturen von festen Agarmedien verwendet werden. Entsorgung in bereinstimmung mit den gltigen
xDer Oxidase-Test darf nicht mit Einzelkolonien gesetzlichen Bestimmungen sicherzustellen.
durchgefhrt werden, die eine spontane Frbung
aufweisen (violett, rosa, grn, schwarz). Der Test LITERATUR
kann in diesem Fall nicht abgelesen werden. 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
xBei der Verwendung zu groer Reagenzvolumina kann and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
es zu falsch negativen Ergebnissen kommen. 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
Verwenden Sie nur einen Tropfen Reagenz wie im 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
Abschnitt Testdurchfhrung angegeben. Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
xEs wird empfohlen, Platin- oder Plastiksen bzw. 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
Nadeln zu verwenden (7), da Eisenspuren (Nichrom) die oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
Oxidasereaktion katalysieren und zu falsch positiven 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
Reaktionen fhren knnen. in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
xNicht aufgebrauchtes Reagenz muss nach Ablauf von Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
12 h entsorgt werden. ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
xSchwache Oxidase-Bildner wie Pasteurella knnen ein 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
negatives Testergebnis hervorrufen (4). medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
xMischkulturen, die Pseudomonas und Neisseria Spezies Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
enthalten, knnen zu falsch negativen Ergebnissen
fhren, da Pseudomonas spp. eine inhibierende 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
Substanz produziert, die mit der Oxidase-Bildung von Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
Neisseria spp interferiert. 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
Gen. Microbiol., 1961, vol. 25, p. 297-306.
PERFORMANCE
SYMBOLE
Es wurde eine Studie mit 100 Stmmen durchgefhrt.
Von den 100 getesteten Stmmen wurden nur 92 Stm- Symbol Bedeutung
me, die als strikt Oxidase-positiv oder negativ be-
schrieben wurden, zur Berechnung der Sensitivitt und oder REF Bestellnummer
Spezifitt herangezogen. Die 8 anderen Stmme wurden
als variabel beschrieben (Bacillus und Micrococcus) und In Vitro Diagnostikum
bei der Berechnung der Performance nicht bercksichtigt.
Es wurden folgende Ergebnisse ermittelt: Hersteller
xvon 65 getesteten positiven Stmmen waren 4 Stmme
negativ: Haemophilus parainfluenzae (1 von 2 getes- Temperaturbegrenzung
teten Stmmen), Pasteurella multocida (1 von 4 ge-
testeten Stmmen) und Photobacterium damsela (2 von
2 getesteten Stmmen). Verwendbar bis
xvon 27 getesteten negativen Stmmen war 1 einziger
Stamm positiv: Pseudomonas oryzihabitans (1 von 1 ge- Chargenbezeichnung
testeten Stamm).
Gebrauchsanweisung beachten
Anzahl Sensitivitt Spezifitt
Stmme KI* (95%) KI* (95%) Lichtgeschtzt lagern
92 93,85% 96,30%
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
* Konfidenzintervall.
ATCC ist eine verwendete, angemeldete und/oder eingetragene Marke von American Type Culture Collection.

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Oxidase Reagent IVD

Deteccin de la enzima citocromo oxidasa.
xLas prestaciones presentadas han sido obtenidas con la
INTRODUCCION Y OBJETIVO DE LA PRUEBA
metodologa indicada en esta ficha tcnica. Toda
Esta prueba permite la deteccin de la enzima citocromo desviacin en dicha metodologa puede modificar los
oxidasa de las bacterias. Esta enzima es caracterstica resultados.
del gnero Neisseria y de la mayora de las especies de xLa interpretacin de los resultados de la prueba debe
Pseudomonas. Permite la diferenciacin de los bacilos hacerse teniendo en cuenta el contexto clnico, el origen
Gram (-) (1, 2). de la muestra, los aspectos macro y microscpicos, y
PRINCIPIO eventualmente los resultados de otras pruebas.
La prueba de la oxidasa est basada en la produccin
CONDICIONES DE CONSERVACION
bacteriana de una enzima oxidasa intracelular.
En presencia de oxgeno atmosfrico y de citocromo C, xLos reactivos se conservan entre 18C y 25C en su
esta enzima oxida el reactivo fenilenediamina, para envase hasta la fecha de caducidad.
formar un compuesto coloreado violeta, el indofenol. xNo congelar.
El cido ascrbico, incorporado en el reactivo, es un xConservar protegido de la luz.
agente reductor que limita la auto-oxidacin y mejora la xEl reactivo oxidasa se auto-oxida rpidamente y
estabilidad del reactivo (6). pierde su sensibilidad. Todo reactivo parcialmente
Esta formulacin est basada en la frmula del reactivo utilizado debe ser eliminado en las 12 horas
oxidasa de Kovacs (3). siguientes a su apertura.
PRESENTACION MUESTRAS
REF 55 635 Reactivo listo al empleo La muestra est constituida por una colonia aislada en la
cul, se desea detectar la enzima citocromo oxidasa. Esta
Este equipo contiene: colonia debe proceder de un cultivo en medio slido de
- 50 ampollas cada una con 0,75 ml de reactivo 18 a 24 horas.
- 1 sistema de apertura de ampolla reutilizable
+ 1 ficha tcnica TECNICA
COMPOSICION Apertura de la ampolla:
Frmula terica: 1. Colocar el frasco cuentagotas en el sistema de
Este reactivo puede estar ajustado en funcin de los criterios de
apertura de ampolla.
prestaciones impuestas. 2. Golpear el fondo del frasco para eliminar las burbujas
N,N,N,N-tetrametil-1,4-fenilenediamina ........................................10,0 g que se hayan podido formar.
cido ascrbico ...............................................................................2,0 g 3. Dejar el conjunto frasco/sistema de apertura, y apretar
Agua desionizada ................................................................................1 l cuidadosamente para romper la ampolla.
MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Realizacin de la prueba:
xAsa (de platino, plstico). 1. Distribuir con precisin 1 gota de reactivo en el disco
xDiscos no impregnados de dimetro 6 mm no impregnado de dimetro 6 mm (Ref. 54 991).
(Ref. 54 991). 2. Extender la colonia en el disco.
PRECAUCIONES DE UTILIZACION
LECTURA E INTERPRETACION
xPara diagnstico in vitro nicamente.
xLa aparicin en 10 - 30 segundos de un color que vaya
xPara uso profesional exclusivamente.
del violeta al prpura indica una prueba positiva.
xLas muestras, cultivos bacterianos y productos
xLas reacciones tardas o la ausencia de color indican un
inoculados deben ser considerados como
resultado negativo.
potencialmente infecciosos y deben ser manipulados de
forma apropiada por personal debidamente formado.
Deben respetarse las tcnicas de asepsia y las CONTROL DE CALIDAD
precauciones usuales de manipulacin para el grupo Protocolo:
bacteriano estudiado a lo largo de todo el proceso de
La actividad del reactivo puede ser valorada con la ayuda
manipulacin; consultar en "NCCLS M29-A, Protection
de las siguientes cepas cultivadas en medio Trypcase-
of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
Soja:
Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
and Tissue; Approved Guideline Revisin en vigor".
Para obtener informaciones complementarias sobre las
precauciones de manipulacin, consultar: "Biosafety in Resultados esperados :
Microbiological and Biomedical Laboratories,
CDC/NIH ltima edicin)", o la reglamentacin en Cepa Resultados
vigor en el pas de utilizacin. Pseudomonas aeruginosa
Positivo : color violeta
xNo utilizar los reactivos despus de la fecha de ATCC 27853
caducidad.
Escherichia coli
xNo utilizar este producto en los siguientes casos : Negativo : sin color
ATCC 25922
- cambio de color (reactivo inicialmente incoloro a
amarillo plido),
- embalaje deteriorado,
- otros signos de deterioro (ampolla rota).
bioMrieux SA Espaol - 1
Oxidase Reagent 11059 D - ES - 2005/06
Advertencia: ELIMINACION DE RESIDUOS

Es responsabilidad del usuario tener en cuenta la Los reactivos no utilizados pueden ser eliminados como
naturaleza de la aplicacin y la legislacin local en vigor residuos no peligrosos.
para realizar el control de calidad (frecuencia, nmero de Eliminar los reactivos utilizados as como los materiales
cepas). de un solo uso contaminados siguiendo los
procedimientos relacionados con los productos
LIMITES DE LA PRUEBA infecciosos o potencialmente infecciosos.
xLa reaccin de oxidasa no debe ser realizada con Es responsabilidad de cada laboratorio gestionar los
colonias obtenidas en medio EMB o CHAPMAN 2, ni residuos y efluentes que produzca segn su naturaleza y
con colonias de un cultivo de 48 horas en medios su peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) el
slidos. tratamiento segn las reglamentaciones aplicables.
xLa deteccin de la oxidasa no debe ser efectuada con
colonias aisladas que presenten un color espontneo REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
(color violeta, rosa, verde, negro). En este caso, la 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
lectura de la prueba es imposible. and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
xLa utilizacin de un volumen de reactivo muy grande 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
puede originar resultados falsamente negativos. Utilizar 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
una nica gota de reactivo como se indica en la tcnica. Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
xSe aconseja utilizar un asa o una aguja de platino o 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
plstico para la prueba de la oxidasa (7). Toda traza de oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
hierro (ni cromo) puede catalizar la reaccin de la 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
oxidasa, y conducir a una reaccin falsamente positiva. in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
xTodo reactivo parcialmente utilizado debe ser eliminado Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
al cabo de 12 horas. ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
xLos gneros dbilmente productores de oxidasa como 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
Pasteurella, pueden dar resultados negativos (4). medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
xLos resultados falsamente negativos pueden originarse Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
en caso de cultivos mixtos de Pseudomonas y
Neisseria. Pseudomonas spp. produce una sustancia 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
inhibidora que interfiere con la produccin de la oxidasa Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
de Neisseria spp. 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
PRESTACIONES TECNICAS
Se ha realizado un estudio con 100 cepas. TABLA DE SIMBOLOS
De las 100 cepas analizadas, solo 92 cepas descritas
como positivas o negativas estrictas para la prueba de la Smbolo Significado
oxidasa fueron conservadas para el clculo de la
sensibilidad y de la especificidad; las otras 8 cepas o REF Nmero de catlogo
descritas como variables (Bacillus y Micrococcus) no han
sido tenidas en cuenta. Producto sanitario para diagnstico in vitro
Basndose en este estudio, los resultados son los
Fabricante
siguientes:
xDe las 65 cepas positivas analizadas, 4 han dado un
resultado negativo: Haemophilus parainfluenzae (1 cepa
Lmite de temperatura
de las 2 analizadas), Pasteurella multocida (1 cepa de
las 4 analizadas) y Photobacterium damsela (2 cepas
de las 2 analizadas). Fecha de caducidad
x De las 27 cepas negativas analizadas, 1 sola dio un
resultado positivo: Pseudomonas oryzihabitans (1 cepa
de 1 analizada). LOT Cdigo de lote
Nmero de Sensibilidad Especificidad

cepas IC* (95%) IC* (95%) Consulte las instrucciones de uso
92 93,85% 96,30%
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
* Intervalo de confianza.
Conservar protegido de la luz
ATCC es una marca utilizada, depositada y/o registrada perteneciente a American Type Culture Collection

bioMrieux SA Tl. 33 (0)4 78 87 20 00
au capital de 12 029 370 Fax 33 (0)4 78 87 20 90
673 620 399 RCS LYON http://www.biomerieux.com Impreso en Francia
bioMrieux y el logo azul son marcas utilizadas, depositadas y/o registradas pertenecientes a bioMrieux SA o a cada
una de sus filiales.
REF 55 635 11059 D - IT - 2005/06
Reagente Ossidasi IVD

Rilevazione dellenzima citocromo ossidasi.
INTRODUZIONE E OBIETTIVO DEL TEST xNon utilizzare questo prodotto nei casi seguenti :
Questo test permette le rilevazione dellenzima citocromo - cambiamento di colore (inizialmente il reattivo
ossidasi dei batteri. Questo enzima caratteristico del incolore o giallo pallido),
genere Neisseria e della maggior parte delle specie di - imballaggio deteriorato,
Pseudomonas. Permette la differenziazione dei bacilli - altri indici di deterioramento (fiale rotte).
Gram (-) (1, 2). xLe performance riportate sono state ottenute seguendo
il procedimento indicato in questa scheda tecnica.
PRINCIPIO Qualsiasi deviazione dal procedimento indicato pu
alterare i risultati.
Il test dellossidasi si basa sulla produzione batterica di un xL'interpretazione dei risultati del test deve essere fatta
enzima ossidasi intracellulare. tenendo conto del contesto clinico, dellorigine del
In presenza di ossigeno atmosferico e di citocromo C, prelievo, degli aspetti macro e microscopici e dei risultati
questo enzima ossida il reattivo fenilendiamina, formando di altri test.
un composto colorato viola, lindofenolo.
L'acido ascorbico, incorporato nel reattivo, agisce come
CONDIZIONI DI CONSERVAZIONE
agente riducente limitando lauto-ossidazione e
migliorando la stabilit del reattivo (6). xI reattivi si conservano a 18-25C, nella loro
Questa formulazione basata sulla formula del reattivo confezione, fino alla data di scadenza.
ossidasi di Kovacs (3). xNon congelare.
xConservare al riparo della luce.
PRESENTAZIONE xIl reattivo ossidasi si auto-ossida rapidamente e
perde di sensibilit. Ogni reattivo parzialmente
REF 55 635 Reattivo pronto per luso utilizzato deve essere eliminato dopo 12 ore.
La confezione comprende :
CAMPIONI
- 50 fiale contenenti ciascuna 0,75 ml di reattivo
Il campione costituito da una colonia isolata per la quale
- 1 rompi-fiala riutilizzabile
si vuole rilevare lenzima citocromo ossidasi.
+ 1 scheda tecnica
Questa colonia deve essere prelevata da una coltura di
18-24 ore su terreno di coltura agarizzato solido.
COMPOSIZIONE
Formula teorica. PROCEDIMENTO
Questo reattivo pu essere aggiustato e/o addizionato a seconda
delle performance richieste :
Apertura della fiala :
N,N,N,N-tetrametil-1,4-fenilendiamina ..........................................10,0 g 1. Porre il flacone conta-gocce nel rompi-fiala.
Acido ascorbico ...............................................................................2,0 g 2. Picchiettare sul fondo del flacone per eliminare le bolle
Acqua deionizzata ..........................................................................1 L che avrebbero potuto formarvisi.
3. Afferrare il centro dellinsieme flacone/rompi-fiala e
MATERIALE NECESSARIO MA NON FORNITO premere dolcemente per rompere la fiala.
xAnsa (di platino,di plastica). Esecuzione del test :
xDischi non impregnati di 6 mm di diametro
1. Distribuire 1 goccia esatta di reattivo su un disco non
(Cod. 54 991).
impregnato di 6 mm di diametro (Cod. 54 991).
2. Spandere la colonia sul disco.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
xUnicamente per diagnostica in vitro. LETTURA E INTERPRETAZIONE
xEsclusivamente per uso professionale.
xLa comparsa in 10-30 secondi di una colorazione che va
xI prelievi, le colture batteriche ed i prodotti seminati
dal viola al porpora indice di un test positivo.
devono essere considerati come potenzialmente infettivi
xReazioni tardive o lassenza di colore indicano un test
e devono essere manipolati in maniera appropriata. Le
negativo.
tecniche di asepsi e le precauzioni duso per il gruppo
batterico studiato devono essere rispettate durante tutta
la manipolazione; fare riferimento a "NCCLS M29-A, CONTROLLO DI QUALIT
Protection of Laboratory Workers from Instrument Protocollo :
Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Lattivit del reattivo pu essere saggiata con i ceppi
Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline - seguenti coltivati sullagar Tripticasi-Soia :
Revisione in vigore". Per ulteriori informazioni sulle xPseudomonas aeruginosa

ATCC 27853
precauzioni di manipolazione, consultare "Biosafety in xEscherichia coli

ATCC 25922.
Microbiological and Biomedical Laboratories CDC/NIH
- Ultima edizione", oppure fare riferimento alla normativa Risultati attesi :
vigente nel Paese.
Ceppo Risultati
xNon utilizzare i reattivi dopo la data di scadenza.
Pseudomonas aeruginosa
Positivo: colorazione viola
ATCC 27853
Escherichia coli Negativo: assenza di
ATCC 25922 colorazione
bioMrieux SA Italiano - 1
Reagente Ossidasi 11059 D - IT - 2005/06
Nota : SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

E responsabilit dellutilizzatore tenere conto della natura I reattivi non utilizzati possono essere smaltiti come rifiuti
dellapplicazione ed assicurarsi che il controllo di qualit non pericolosi.
corrisponda a quanto previsto dalla legislazione locale Smaltire i reattivi utilizzati ed i materiali monouso
vigente (frequenza, numero di ceppi... ). contaminati seguendo le procedure relative ai prodotti
infettivi o potenzialmente infettivi.
LIMITI DEL METODO E responsabilit di ogni laboratorio gestire i rifiuti e gli
xLa reazione dellossidasi non deve essere eseguita su effluenti prodotti a seconda della loro natura e della loro
colonie ottenute su agar EMB o CHAPMAN 2, ne su pericolosit ed assicurarne (o farne assicurare) il
colonie provenienti da una coltura di 48 ore su terreni trattamento e lo smaltimento conformemente alla
agarizzati solidi. legislazione vigente.
xLa ricerca dellossidasi non deve essere eseguita su
colonie isolate che presentino una colorazione RIFERIMENTI BIBLIOGRAFICI
spontanea (colore viola, rosa, verde, nero). In questi 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
casi la lettura del test impossibile. and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
xLuso di un volume di reattivo eccessivo pu causare 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
risultati falsamente negativi. Utilizzare una sola goccia di 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
reattivo come indicato nel procedimento. Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
xSi consiglia di utilizzare unansa od un ago di platino o di 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
plastica per il test dellossidasi (7). La presenza di tracce oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
di ferro (nicromo) pu catalizzare la reazione di 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
ossidazione e rendere falsamente positiva la reazione. in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
xI reattivi parzialmente utilizzati devono essere utilizzati Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
nellarco di 12 ore. ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
xI germi deboli produttori di ossidasi, come le 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
Pasteurella, possono dare risultati negativi (4). medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
xRisultati falsamente negativi possono aversi in caso di Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
colture miste di Pseudomonas e di Neisseria. Le
Pseudomonas spp. producono una sostanza inibitrice 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
che interferisce con la produzione di ossidasi delle Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
Neisseria spp. 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
PERFORMANCE
TABELLA DEI SIMBOLI
Uno studio stato eseguito su 100 ceppi.
Sui 100 ceppi saggiati, per il calcolo della sensibilit e Simbolo Significato
della specificit sono stati presi in considerazione solo i
92 ceppi descritti come ossidasi positivi o negativi ; gli altri
8 ceppi, descritti come variabili (Bacillus e Micrococcus), o REF Numero di catalogo
non sono stati presi in considerazione.
Dispositivo medico-diagnostico in vitro
Sulla base di questo studio, i risultati sono i seguenti :
xDei 65 ceppi positivi saggiati, 4 hanno dato un risultato
negativo : Haemophilus parainfluenzae (1 ceppo dei 2 Fabbricante
saggiati), Pasteurella multocida (1 ceppo dei 4 saggiati)
e Photobacterium damsela (2 ceppi dei 2 saggiati).
Limiti di temperatura
x Dei 27 ceppi negativi saggiati, 1 solo ha dato un risultato
positivo : Pseudomonas oryzihabitans (unico ceppo
saggiato). Utilizzare entro
Numero di Sensibilit Specificit
ceppi AF* (95%) AF* (95%) Codice del lotto
92 93,85% 96,30%
Consultare le istruzioni per l'uso
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
* Ambito fiduciario.
Conservare al riparo della luce
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filiali.
REF 55 635 11059 D - PT - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

Deteco da enzima citocromo oxidase.
INTRODUO E OBJECTIVO DO TESTE xEste produto no deve ser utilizado nos seguintes
Este teste permite a deteco da enzima citocromo casos:
oxidase das bactrias. Esta enzima caracterstica do - se tiver mudana de cor (reagente inicialmente incolor
gnero Neisseria e da maioria das espcies de a amarelo plido),
Pseudomonas. Permite a diferenciao dos bacilos Gram - se a embalagem estiver danificada,
(-) (1, 2). - outros sinais de deteriorao (ampola partida).
xO comportamento funcional apresentado foi obtido com
PRINCPIO o procedimento indicado neste folheto informativo.
O teste da oxidase baseia-se na produo bacteriana de Qualquer desvio ao procedimento pode alterar os
uma enzima oxidase intracelular. resultados.
Na presena de oxignio na atmosfera e de xA interpretao dos resultados do teste deve ser
citocromo C, esta enzima oxida o reagente efectuada tendo em conta o contexto clnico, a origem
fenilenodiamina, para formar um composto colorido da amostra, os aspectos macro e microscpicos da
violeta, o indofenol. estirpe/cepa e, eventualmente, os resultados de outros
O cido ascrbico, incorporado no reagente, age testes.
enquanto agente redutor para limitar a auto-oxidao e CONDIES DE ARMAZENAMENTO
melhorar a estabilidade do reagente (6).
xOs reagentes conservam-se entre 18C e 25C na
Esta frmula baseia-se na frmula do reagente oxidase
sua embalagem at data de validade.
de Kovacs (3).
xNo congelar.
APRESENTAO xConservar ao abrigo da luz.
xO reagente oxidase oxida-se rapidamente a ele
REF 55 635 Reagente pronto a usar prprio e perde a sua sensibilidade. Qualquer
reagente parcialmente utilizado deve ser eliminado
Embalagem contendo : aps 12 horas.
- 50 ampolas contendo cada uma 0,75 ml de
reagente AMOSTRAS
- 1 quebra-ampolas reutilizvel A amostra constituda por uma colnia isolada para a
+ 1 folheto informativo qual queremos detectar a enzima citocromo oxidase.
Esta colnia deve ser proveniente de uma cultura de 18 a
24 horas em meios de cultura gelosados slidos.
COMPOSIO
PROCEDIMENTO
Frmula terica:
Este reagente pode ser ajustado em funo dos critrios de Abertura da ampola :
qualidade impostos. 1. Colocar o frasco conta-gotas no quebra-ampolas.
N,N,N,N-tetrametil-1,4-fenilenediamina ........................................10,0 g 2. Bater no fundo do frasco para eliminar as bolhas que
cido ascrbico ...............................................................................2,0 g se podero formar.
gua desionizada .......................................................................... 1 L
3. Pegar no meio do conjunto frasco e quebra-ampolas e
premir ligeiramente para partir a ampola.
MATERIAIS NECESSRIOS MAS NO FORNECIDOS
Realizao do teste :
xAnsa (em platina, plstico).
xDiscos no impregnados com dimetro de 6 mm 1. Distribuir exactamente 1 gota de reagente num disco
(Ref. 54 991). impregnado de dimetro 6 mm (Ref. 54 991).
2. Espalhar a colnia sobre o disco.
PRECAUES DE UTILIZAO
LEITURA E INTERPRETAO
xSomente para uso em diagnstico in vitro
xO aparecimento em 10 a 30 segundos de uma
xUnicamente para uso profissional
colorao que vai de violeta a prpura indica um teste
xAs amostras e culturas bacterianas devem ser
positivo.
consideradas como potencialmente infecciosas e
xAs reaces tardias ou a ausncia de cor indicam um
devem ser manipuladas de forma apropriada por uma
teste negativo.
pessoa competente e avisada. As tcnicas asspticas e
as precaues habituais de manipulao para o grupo CONTROLO DE QUALIDADE
bacteriano estudado devem ser respeitadas durante Protocolo :
toda a manipulao; consultar o "NCCLS M29-A,
Protection of Laboratory Workers from Instrument A actividade do reagente pode ser testada com as
Biohazards and Infectious Disease Transmitted by seguintes estirpes/cepas cultivadas em gelose Trypcase-
Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline Soja :
Reviso em vigor". Para informaes complementares xPseudomonas aeruginosa ATCC 27853
sobre as precaues de manipulao, consultar o xEscherichia coli ATCC 25922.
"Biosafety in Microbiological and Biomedical Resultados esperados :
Laboratories CDC/NIH ltima edio", ou a
Estirpe/cepa Resultados
regulamentao em vigor no pas de utilizao.
xNo utilizar os reagentes aps a data de validade. Pseudomonas aeruginosa
Positivo : colorao violeta
ATCC 27853
Escherichia coli Negativo : nenhuma
ATCC 25922 colorao
bioMrieux SA Portugus - 1
Oxidase Reagent 11059 D - PT - 2005/06
Nota : ELIMINAO DE RESDUOS

da responsabilidade do utilizador ter em conta a Os reagentes no utilizados podem ser eliminados como
natureza da aplicao e a legislao local em vigor para a resduos no perigosos.
elaborao do controlo de qualidade (frequncia, nmero Eliminar os reagentes utilizados bem como os materiais
de estirpes/cepas... ). descartveis contaminados em conformidade com os
LIMITES DO TESTE procedimentos relativos aos produtos infecciosos ou
xA reaco de oxidase no deve ser efectuada em potencialmente infecciosos.
colnias obtidas em gelose EMB ou CHAPMAN 2, nem da responsabilidade de cada laboratrio gerir os
em colnias provenientes de uma cultura de 48 horas resduos e os efluentes que este produz consoante a sua
em meios gelosados slidos. natureza e o seu perigo, e assegurar (ou fazer assegurar)
xA pesquisa da oxidase no deve ser efectuada em o tratamento e a eliminao em conformidade com as
colnias isoladas com uma colorao espontnea (cor regulamentaes aplicveis.
violeta, rosa, verde, preta). Neste caso, a leitura
impossvel. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
xA utilizao de um volume reagente muito importante 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
pode levar a resultados falsamente negativos. Utilizar and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
apenas uma nica gota de reagente como indicado no 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
procedimento. 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
x aconselhado utilizar uma ansa ou uma agulha em
3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
platina ou em plstico para o teste da oxidase (7). oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
Qualquer vestgio de ferro (nicromo) pode catalisar a 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
reaco da oxidase e conduzir a uma reaco in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
falsamente positiva. Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
xQualquer reagente parcialmente utilizado deve ser ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
eliminado aps 12 horas. 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
xOs gneros fracamente produtores de oxidase como as medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
Pasteurella, podem dar resultados negativos (4). Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
xOs resultados falsos negativos provm em caso de
6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
culturas mistas com as duas espcies Pseudomonas e Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
Neisseria. Uma substncia inibidora produzida por 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
Pseudomonas spp. que interfere com a produo de Gen. Microbiol., 1961, vol. 25, p. 297-306.
oxidase de Neisseria spp.
QUADRO DE SMBOLOS
COMPORTAMENTO FUNCIONAL
Foi efectuado um estudo com 100 estirpes/cepas. REF ou REF Referncia de catlogo
Das 100 estipes/cepas testadas, apenas 92
estirpes/cepas descritas como positivas ou negativas IVD Dispositivo mdico para diagnstico in
estritas ao teste de oxidase foram conservadas para o vitro
clculo da sensibilidade e da especificidade ; as 8 outras
estirpes/cepas descritas como variveis (Bacillus e Fabricante
Micrococcus) no foram consideradas para o clculo do
comportamento funcional.
Com base neste estudo, os resultados foram os Limites de temperatura
seguintes :
xdas 65 estirpes/cepas testadas, 4 deram um resultado
negativo : Haemophilus parainfluenzae (1 estirpe/cepa Prazo de validade
de 2 analisadas), Pasteurella multocida (1 estirpe/cepa
de 4 analisadas) e Photobacterium damsela (2
LOT Cdigo do lote
estirpes/cepas de 2 analisadas).
x das 27 estirpes/cepas negativas testadas, 1 nica d
um resultado positivo : Pseudomonas oryzihabitans (1
estirpe/cepa de 1 analisada). Consultar as instrues de utilizao
Nmero de Sensibilidade Especificidade

estirpes/cepas IC* (95%) IC* (95%)
92 93,85% 96,30% Conservar ao abrigo da luz
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
* Intervalo de confiana.
ATCC uma marca utilizada, depositada e/ou registada, propriedade exclusiva da American Type Collection Culture
Brasil: Distribudo por bioMrieux Brasil, S.A. - Estrada do Mapu, 491 - Jacarepagu - R.J. - CEP 22710-261
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REF 55 635 11059 D - GR - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

x
.
x :
. - (
Neisseria Pseudomonas. ),
Gram (-) - ,
(1, 2). - (
)
x

. .
.
C, x
,
, .
,
.
(6).

Kovacs (3). o
x 18 C-25 C
.
x .
REF 55 635 x .
x -
: .
- 50 0,75 ml
12 .
- 1

+ 1

.

18-24 .

.
N,N,N,N- -1,4-...................................10,0 g
.................................................................................2,0 g
..1 L :
1.

x ( ). .
x - ( 6 mm)(Ref. 54 991). 2.

.
3. /
x in vitro .
x . .
x
:
1. 1
. - ( 6 mm) (Ref. 54991).
2. .

. "NCCLS M29-A, Protection of
Laboratory Workers from Instrument Biohazards and
x
Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids,
10-30
and Tissue; Approved Guideline -
.
".
x
,
.
"Biosafety in Microbiological and Biomedical
Laboratories, CDC/NIH, ",

.
bioMrieux SA - 1
Oxidase Reagent 11059 D - GR - 2005/06

:
100 .
100 ,
92
- :

xPseudomonas aeruginosa ATCC 27853 : .

xEscherichia coli ATCC 25922. 8
: (Bacillus Micrococcus)
.
,
Pseudomonas aeruginosa : :

ATCC 27853 x 65 ,
4 : Haemophilus
Escherichia coli :
parainfluenzae ( 1 2 ),
ATCC 25922
Pasteurella multocida ( 1 4 )
: Photobacterium damsela ( 2
2 ).

x 27 ,

: Pseudomonas oryzihabitans
,
( 1 1 ).
(, ).

CI* (95%) CI* (95%)
x
CHAPMAN 92 93,85% 96,30%
2, 48 (84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
. * .
x

(, , ,
). ,
. .
x

.
.
.
x
(7) ,
. (
( -) )
, .
.
x

12 .
x .. 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
Pasteurella, and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
(4). 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
x 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
Pseudomonas Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
Neisseria. 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
Pseudomonas spp oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
Neisseria spp 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
bioMrieux sa - 2
Oxidase Reagent 11059 D - GR - 2005/06
REF
In Vitro

ATCC , / American Type Culture Collection.

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bioMrieux SA .
REF 55 635 11059 D - SE - 2005/06
Oxidas Reagens IVD

Detektion av enzymet cytokromoxidas
SAMMANFATTNING OCH FRKLARING - det finns andra tecken p frsmring (ampullen r

snder).
Detta test anvnds fr detektion av produktion av enzymet
xData angende prestanda som presenterats har erhllits
cytokromoxidas av bakterier. Detta enzym r
med hjlp av den metod som anges i denna
karakteristiskt fr slktet Neisseria och fr de flesta arter
bipacksedel. Varje ndring i utfrandet kan pverka
av Pseudomonas, vilket mjliggr differentiering av
resultaten.
gramnegativa bakterier (1, 2).
xTolkningen av testresultaten skall gras med hnsyn till
patientens anamnes, kolonimorfologi och mikroskopisk
METOD morfologi och, om ndvndigt, resultat av andra utfrda
Oxidastestet bygger p den bakteriella produktionen av tester.
ett intracellulrt oxidasenzym.
I nrvaro av atmosfriskt syre och cytokrom C oxiderar FRVARING
detta enzym fenylendiamin-reagens och bildar en
xFrvara reagenser vid 18-25C i sin frpackning
lilafrgad frening, indofenol.
fram till sista frbrukningsdatum.
Reagenset innehller askorbinsyra som reduktionsmedel
xFrys inte ned.
fr att reducera sjlvoxidation och fr att frbttra
xSkydda mot ljus.
stabiliteten (6).
xOxidasreagens sjlvoxiderar snabbt och frlorar sin
Denna formulering grundar sig p Kovacs
knslighet. Oanvnd reagens br kastas efter 12
oxidasreagensformel (3).
timmar.
KITETS INNEHLL
PROVER
REF 55 635 Reagens frdigt att anvnda Provet bestr av en isolerad koloni fr vilken produktionen
Kitinnehll: av enzymet cytokromoxidas ska detekteras.
Kolonin br tas frn en 18-24-timmar gammal kultur odlad
- 50 ampuller med 0,75 ml reagens per ampull
p ett fast agarmedium.
- 1 teranvndbar ampullkrossare
+ 1 bipacksedel
BRUKSANVISNING
INNEHLLSDEKLARATION ppnande av ampull:

1. Placera pipetten i den teranvndbara
Teoretisk formel.
ampullkrossaren.
Detta reagens kan anpassas enligt ndvndiga kriterier fr
utfrandet. 2. Sl frsiktigt p nedre delen av pipetten fr att ta bort
N,N,N,N-tetrametyl-1,4-fenylendiamin ..........................................10,0 g bubblor som kan ha bildats.
Askorbinsyra....................................................................................2,0 g 3. Hll i mitten p pipetten/krossaren och tryck frsiktigt
Avjoniserat vatten ...........................................................................1 L fr att krossa ampullen inuti.
Testprocedur:
NDVNDIGT MATERIEL (SOM INTE MEDFLJER)
1. Dosera exakt 1 droppe reagens p den icke-
xInokuleringsgla (platina eller plast) impregnerade skivan (diameter 6 mm) (Art nr. 54 991).
xIcke-impregnerade skivor (diameter 6 mm)(Art nr. 2. Stryk ut kolonin p skivan.
54 991)
FRSIKTIGHETSTGRDER AVLSNING OCH TOLKNING
xEndast fr in vitro-diagnostik. xEtt positivt test uppvisas av att en violett till lila frg
xEndast fr professionell anvndning. utvecklas inom 10-30 sekunder.
xAlla prover och mikrobiella odlingar ska behandlas som xFrdrjd reaktion eller ingen frgutveckling betyder att
potentiellt infektisa och ska handhas p lmpligt stt av testet r negativt.
utbildad och kompetent personal. Sterilteknik och
vanliga frsiktighetstgrder fr att handha den KVALITETSKONTROLL
speciella gruppen av bakterier skall iakttas under hela
Protokoll:
proceduren. Se "NCCLS M29-A, Protection of
Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Reagensets aktivitet kan testas med fljande stammar p
Infectious Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, Trypcase-Soy-agar:

and Tissue; Approved Guideline - Aktuell revidering". xPseudomonas aeruginosa ATCC 27853

Fr ytterligare information angende frsiktighets- xEscherichia coli ATCC 25922.
tgrder vid hantering, se Biosafety in Microbiological Frvntade resultat:
and Biomedical Laboratories CDC/NIH Senaste
upplagan", eller de f.n. gllande reglerna i det aktuella Stam Resultat
landet. Pseudomonas aeruginosa Positivt: violett
xAnvnd inte reagenser efter sista frbrukningsdatum. ATCC 27853 frgutveckling
xProdukten ska inte anvndas om:
- frgen ndrats (reagenset r ursprungligen frglst till Escherichia coli Negativt: ingen

ljusgult), ATCC 25922 frgutveckling
- frpackningen r skadad,
bioMrieux SA Svenska - 1
Oxidas Reagens 11059 D- SE - 2005/06
Obs: AVFALLSHANTERING
Det r anvndarens ansvar att utfra kvalitetskontroll med Oanvnda reagenser kan anses som ofarligt avfall och
hnsyn till den planerade anvndningen av mediet, och kan avlgsnas drefter.
ienlighet med lokalt tillmpliga frhllningsregler Avfallshantering av anvnda reagenser, liksom av andra
(frekvens, antal stammar...). kontaminerade engngsmaterial, ska ske i enlighet med
procedurer fr infektisa eller potentiellt infektisa
METODENS BEGRNSNINGAR produkter.
xOxidastestet br inte utfras p kolonier erhllna p Det r varje laboratoriums ansvar att handha avfalls- och
EMB-agar, CHAPMAN 2 eller kolonier frn en 48-timmar avloppsprodukter enligt typ och farlighetsgrad och
gammal odling odlad p fast agarmedia. behandla och avlgsna dem (eller f dem behandlade och
xOxidasdetektion br inte utfras p isolerade kolonier avlgsnade) i enlighet med alla tillmpliga freskrifter.
som visar en spontan frgutveckling (violett, rosa, grn,
svart...). I detta fall r avlsning av testet omjligt. REFERENSLITTERATUR
xAnvndning av fr stora volymer reagens kan leda till 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
falskt negativa resultat. Anvnd endast en droppe and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
reagens som angivet i bruksanvisning. 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
xEn inokuleringsgla av platina eller plast (7) 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
rekommenderas fr anvndning vid oxidastestning. Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
Frekomst av ngot spr av jrn (nichrome) kan 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
katalysera en oxidasreaktion, vilket ger en falskt positiv oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
reaktion. 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
xKasta terstende del av delvis anvnt reagens efter 12 in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
timmar. Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C.:
xSvaga oxidasproducenter, t.ex. Pasteurella, kan ge ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
negativa resultat (4). 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
xFalskt negativa resultat intrffar om en blandningsodling medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
innehller de tv slktena Pseudomonas och Neisseria. Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
En inhibitorisk substans bildas av Pseudomonas spp
vilken interfererar med oxidasbildningen hos Neisseria 6. STEEL K.J. The oxidase activity of Staphylococci. - J. Appl.
spp. Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
PRESTANDA Gen. Microbiol., 1961, vol. 25, p. 297-306.
En studie utfrdes p 100 stammar.
Av de 100 stammar som testades ansgs 92 vara SYMBOLER
oxidaspositiva eller oxidasnegativa och anvndes fr att
Symboler Betydelse
rkna ut reagensprestanda: knslighet och specificitet. De
andra 8 stammarna ansgs vara oxidasvariabla (Bacillus
eller REF Katalognummer
och Micrococcus) och togs inte med i
prestandaberkningarna.
Medicintekniska produkter fr in vitro
Fljande resultat erhlls p basis av denna studie: diagnostik
xav 65 positiva testade stammar gav 4 ett negativt
resultat: Haemophilus parainfluenzae (1 av 2 testade
stammar), Pasteurella multocida (1 av 4 testade
stammar) och Photobacterium damsela (2 av 2 testade Tillverkare
stammar).
x av 27 negativa testade stammar var endast en positiv:
Temperaturbegrnsning
Pseudomonas oryzihabitans (1 av 1 testad stam).
Antal Knslighet Specificitet Anvnd fre

stammar CI* (95%) CI* (95%)
92 93,85% 96,30% Lot nummer
(84,98% - 97,62%) (81,28% - 99,36%)
*konfidensintervall Se handhavandebeskrivningen
Skyddas mot ljus
ATCC r ett anvnt, patentskt och/eller registrerat varumrke som tillhr American Type Culture Collection.

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bioMrieux och den bl logotypen r patentskta och/eller registrerade varumrken som tillhr och anvnds av
bioMrieux SA eller ngot av dess dotterbolag.
REF 55 635 11059 D - DK - 2005/06
Oxidase Reagent IVD

Detektion af enzymet cytokrom oxidase
RESUM OG FORKLARING xDe fremlagte prstationsdata blev fundet ved

Denne test benyttes til at detektere bakteriers produktion anvendelse af den procedure, der er angivet p denne
af enzymet cytokrom oxidase. Dette enzym er indlgsseddel. Enhver ndring eller modifikation af
karakteristisk for genus Neisseria og de fleste species af denne procedure kan pvirke resultaterne.
Pseudomonas. Det gr det ogs muligt at skelne mellem xVed fortolkning af testresultaterne skal der tages hjde
gramnegative baciller (1, 2). for patientens sygehistorie, den kolonimssige og
mikroskopiske morfologi samt om ndvendigt
PRINCIP resultaterne af eventuelle andre udfrte prver.
Oxidasetesten benyttes til at detektere bakteriers
produktion af et intracellulrt oxidaseenzym. OPBEVARINGSBETINGELSER
Ved tilstedevrelse af atmosfrisk ilt og cytokrom C, xReagenserne skal opbevares ved 1825C i deres
oxiderer dette enzym fenylendiaminreagenset, og danner ske, indtil udlbsdatoen.
en purpurfarvet forbindelse, indofenol. xM ikke nedfryses.
Askorbinsyre er indeholdt i reagenset som xBeskyttes mod lys.
reduktionsmiddel for at reducere autooxidation og xOxidasereagenset autooxideres hurtigt og mister
forbedre stabiliteten (6). sin flsomhed. Ubrugte reagenser br kasseres
Dette prparat er baseret p Kovacs efter 12 timer.
oxidasereagensformel (3).
KITTETS INDHOLD PRVER
Prven bestr af en isoleret koloni, for hvilken dannelse af
REF 55.635 Brugsklart reagens. cytokromoxidaseenzym skal detekteres.
Kit-indhold: Kolonien br indsamles fra 18-24 timer gammel kultur, der
er dyrket p et fast agarmedium.
- 50 ampuller med 0,75 ml reagens pr. ampul
- 1 genbrugs-ampulknuser
BRUGSANVISNING
+ 1 indlgsseddel
bning af ampullen:
SAMMENSTNING 1. Anbring drbeenheden i flergangs-ampulknuseren.
2. Bank let p bunden af drbeenheden for at fjerne
Teoretisk sammenstning. eventuelle bobler, der kan have dannet sig.
Dette reagens kan justeres og/eller suppleres efter de ndvendige 3. Grib fat om midten af drbeenheden/knuseren og tryk
ydelseskriterier.
forsigtigt for at knuse ampullen indeni.
N,N,N,N-tetrametyl-1,4-fenylendiamin ..........................................10,0 g
Askorbinsyre....................................................................................2,0 g Testprocedure:
Af-ioniseret vand 1L
1. Fordel njagtigt 1 drbe reagens p en ikke-
imprgneret skive (diameter 6 mm) (Ref. 54.991).
NDVENDIGE MEN IKKE MEDFLGENDE 2. Smr kolonien ud p skiven.
MATERIALER
xInokulationsslynge (platin eller plast). AFLSNING OG FORTOLKNING
xIkke-imprgnerede skiver (diameter 6 mm) (Ref. xEn positiv test angiives ved, at der udvikles en violet til
54.991.) purpur farve i lbet af 10-30 sekunder.
ADVARSLER OG FORSIGTIGHEDSREGLER xForsinkede reaktioner eller ingen farveudvikling er tegn
p en negativ test.
xKun til in vitro-diagnostisk anvendelse.
xKun til professionel brug.
xAlle prver og mikrobekulturer skal behandles som KVALITETSKONTROL
potentielt smittefarlige og hndteres korrekt af uddannet Protokol:
og fagligt kompetent personale. Der skal anvendes
Reagensets aktivitet kan testes ved hjlp af flgende
aseptisk teknik og sdvanlige forholdsregler for
stammer dyrket p Trypcasesojaagar:
hndtering af den undersgte bakteriekultur gennem
hele denne procedure. Se venligst "NCCLS M29-A,
Protection of Laboratory Workers from Instrument
Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Forventede resultater:
Blood, Body Fluids, and Tissue; Approved Guideline
gldende revision". For yderligere oplysninger om Stamme Resultater
forsigtighedsforanstaltninger ved hndtering henvises til Pseudomonas aeruginosa
Positiv: violet farveudvikling
"Biosafety in Microbiological and Biomedical ATCC 27853
Laboratories, CDC/NIH, seneste udgave", eller de
aktuelt gldende bestemmelser i det aktuelle land. Escherichia coli Negativ: ingen
xReagenserne m ikke anvendes efter udlbsdatoen. ATCC 25922 farveudvikling
xDette produkt br ikke anvendes, hvis:
Bemrk:
- farven har ndret sig (reagenset er oprindelig
farvelst til lysegult), Det er brugerens ansvar at gennemfre Kvalitetskontrol
- emballagen er beskadiget, under hensyntagen til den tiltnkte anvendelse af mediet
- der er andre tegn p nedbrydning (knkket ampul) og i overensstemmelse med eventuelle lokalt gldende
bestemmelser (frekvens, antal stammer).
bioMrieux SA Dansk - 1
Oxidase Reagent 11059 D - DK - 2005/06
METODENS BEGRNSNINGER LITTERATURHENVISNINGER

xOxidasetesten br ikke udfres p kolonier, der er 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
opnet p EMB eller CHAPMAN 2 agar eller p kolonier and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
fra en 48 timer gammel kultur, der er dyrket p et fast 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
agarmedium. 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
xOxidasedetektion br ikke foretages p isolerede Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
kolonier, der udviser en spontan farveudvikling (violet, 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
lyserd, grn, sort). I s fald er aflsning af testen oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
ikke mulig.
4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
xHvis der anvendes for store mngder reagens, kan det
in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
fre til falsk negative resultater. Anvend kun n drbe Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
reagens som angivet i brugsanvisningen. ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
xDet anbefales at anvende en inokulationsslynge eller
5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
nl af platin eller plast (7) til brug ved oxidasetestning.
medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
Tilstedevrelse af det mindste spor af jern (nikrom) kan Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
katalysere en oxidasereaktion og fre til en falsk positiv Precautions - p. 257.
reaktion.
xBortskaf den resterende portion af delvist brugt reagens
Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
efter 12 timer.
xSvage oxidasedannere f.eks. Pasteurella, kan give 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
negative resultater (4).
xFalsk negative resultater kan forekomme, hvis blandede
kulturer indeholder genera Pseudomonas og Neisseria. SYMBOLFORTEGNELSE
Pseudomonas spp danner et hmmende stof, som
pvirker Neisseria spp's oxidasedannelse. REF Katalognummer
PRSTATIONER In vitro-diagnostisk medicinsk udstyr

IVD
Der blev foretaget en undersgelse p 100 stammer.
Ud af de 100 testede stammer blev 92 beskrevet som
oxidase-positive eller oxidase-negative, og disse blev Fremstillet af
brugt til beregning af reagensets prstation: sensitivitet
og specificitet. De vrige 8 stammer blev beskrevet som
oxidase-variable Bacillus og Micrococcus) og blev ikke
Temperaturbegrnsning
taget i betragtning ved prstationsberegninger.
P basis af denne undersgelse opnedes flgende
resultater:
xud af de 65 positive testede stammer gav 4 negative Anvendes fr
resultater: Haemophilus parainfluenzae (1 ud a 2
testede strammer), Pasteurella multocida (1 ud af 4
testede stammer) og Photobacterium damsela (2 ud af 2 LOT Batch-kode
testede stammer).
x ud af de 27 negative testede stammer blev kun en
testet positiv: Pseudomonas oryzihabitans (1 ud af 1 Se brugsanvisning
testet stamme).
Antal Sensitivitet Specificitet

stammer CI* (95%) CI* (95%)
Beskyttes mod lys
92 93,85% 96,30%
(84,98% 97,62%) (81,28% - 99,36%)
*konfidensinterval.
BORTSKAFFELSE AF AFFALD
Ubrugte reagenser kan betragtes som ufarligt affald og
bortskaffes derefter.
Bortskaf brugte reagenser samt eventuelle andre
kontaminerede engangsmaterialer efter procedurer for
infektise eller potentielt infektise produkter.
Det er ethvert laboratoriums ansvar at hndtere det affald
og spildevand, der opstr, i overensstemmelse med dets
art og grad af farlighed, og at behandle og bortskaffe det
(eller f det behandlet og bortskaffet) i henhold til
gldende forskrifter.
ATCC er et anvendt, under registrering og/eller registreret varemrke tilhrende American Type Culture Collection

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bioMrieux og det bl logo er anvendte, under registrering og/eller registrerede varemrker tilhrende bioMrieux SA
eller et af dettes datterselskaber.
REF 55 635 11059 D - PL - 2005/06
Odczynnik do wykrywania oksydazy IVD

Wykrywanie enzymu oksydazy cytochromowej
WPROWADZENIE xProduktu nie naley uywa jeli:

Test sucy do wykrywania wytwarzania przez bakterie - zmieni kolor (odczynnik jest pierwotnie bezbarwny do
enzymu oksydazy cytochromowej. Enzym ten jest blado tego),
charakterystyczny dla rodzaju Neisseria i wikszoci - opakowanie jest uszkodzone,
gatunkw Pseudomonas. Pozwala na rnicowanie - s jakiekolwiek inne oznaki utraty pierwotnych
paeczek Gram (-) (1, 2). waciwoci (potuczona ampuka)
xW celu osignicia odpowiednich wynikw naley
ZASADA DZIAANIA stosowa procedur zawart w opakowaniu. Kada
modyfikacja procedury moe wpywa na wyniki.
Test na oksydaz oparty jest na wykrywaniu wytwarzania xW interpretacji wynikw testu naley wzi pod uwag
przez bakterie wewntrzkomrkowego enzymu histori choroby pacjenta, miejsce pobrania materiau,
katalizujcego reakcj utleniania. makro- i mikroskopow morfologi oraz jeli bdzie
W obecnoci tlenu atmosferycznego i cytochromu C, konieczne, wyniki innych przeprowadzonych testw.
enzym ten utlenia odczynnik fenylodiamin do formy
zabarwionego na purpurowo indofenolu.
PRZECHOWYWANIE
Dodatek do odczynnika kwasu askorbinowego jako
czynnika redukujcego obnia jego samoutlenianie oraz xProdukt naley przechowywa w oryginalnych
poprawia stabilno (6). opakowaniach w temperaturze 18C-25C.
Test jest oparty na przepisie na odczynnik Kovacsa do xNie zamraa.
oznaczania oksydazy (3). xChroni przed wiatem.
xOdczynnik do oznaczania oksydazy szybko ulega
ZAWARTO ZESTAWU autoutlenieniu i traci swoj czuo. Niezuyty
odczynnik naley wyrzuci po 12 godzinach.
REF 55 635 Odczynnik gotowy do uycia
Zawarto zestawu: MATERIA DO BADA
- 50 ampuek z 0.75 ml odczynnika w kadej Materia do bada stanowi wyizolowane kolonie, dla
- 1 przyrzd wielokrotnego uytku do otwierania ktrych chce si oznaczy wytwarzanie enzymu oksydazy
ampuek cytochromowej.
+ 1 instrukcja Kolonie naley zebra z 18-24-godzinnej hodowli
z podoa staego.
SKAD
SPOSB WYKONANIA
Teoretyczna zawarto skadnikw.
Odczynnik ten mona dostosowywa zgodnie z wymaganymi Otwieranie ampuek:
kryteriami. 1. Umieci kroplomierz ampuki w przyrzdzie do
N,N,N,N-tetrametylo-1,4- fenylodiamina ................................... 10,0 g otwierania.
Kwas askorbinowy ....................................................................... 2,0 g
Woda dejonizowana .......................................................................1 L 2. Trzymajc ampuk w pionowej pozycji delikatnie
popuka w dno, aby pozby si ewentualnych
pcherzykw powietrza.
WYPOSAENIE WYMAGANE NIE NALECE DO 3. Uj ampuk po rodku naoonej nasadki amicej
ZESTAWU midzy kciuk i palec wskazujcy. Nastpnie
xEzy (platynowelub plastikowe). naciskajc lekko od siebie kocwk nasadki, zama
xCzyste krki bibuowe (rednica 6 mm)(Ref. 54 991). ampuk.
RODKI OSTRONOCI Procedura testu:
xWycznie do diagnostyki in vitro. 1. Nakropi dokadnie 1 kropl odczynnika na czysty
xDo wykorzystania wycznie przez profesjonalistw. krek bibuowy (rednica 6 mm) (Ref. 54 991).
xWszystkie prbki pobrane od pacjentw i hodowle 2. Rozprowadzi koloni na krku.
bakteryjne s potencjalnie zakane i powinien nimi
operowa wyszkolony i kompetentny personel. Naley ODCZYT I INTERPRETACJA
stosowa techniki aseptyczne i zwyke procedury xNa wynik pozytywny wskazuje pojawienie si barwy od
obowizujce przy pracy ze szczepami bakteryjnymi fioletowej do purpurowej w cigu 10-30 sekund.
zgodnie z "NCCLS M29-A, Protection of Laboratory xPniejsza reakcja lub brak zabarwienia wskazuje na
Workers from Instrument Biohazards and Infectious wynik negatywny.
Disease Transmitted by Blood, Body Fluids, and Tissue;
Approved Guideline Bieca wersja". Dodatkowe
KONTROLA JAKOCI
rodki ostronoci zawarte s w "Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories, CDC/NIH, Protok:
Ostatnie wydanie", lub regulowane przepisami Aktywno odczynnika mona oceni przy uyciu
waciwymi dla poszczeglnych pastw. nastpujcych szczepw wyhodowanych na agarze
xNie uywa odczynnikw przeterminowanych. tryptozowo-sojowym:


bioMrieux SA Polski - 1
Odczynnik do wykrywania oksydazy 11059 D - PL - 2005/06
Zakres spodziewanych wynikw : POSTPOWANIE ZE ZUYTYMI TESTAMI

Szczep Wyniki Niezuyty odczynnik naley traktowa jako bezpieczny
biologicznie i utylizowa zgodnie z tym wskazaniem.
Pseudomonas aeruginosa Zuytych odczynnikw, jak i zanieczyszczonych sprztw
Dodatni: kolor fioletowy
ATCC 27853 jadnorazowych, naley pozbywa si zgodnie
Escherichia coli z procedurami dla materiaw zakanych lub potencjalnie
Ujemny: brak zabarwienia zakanych.
ATCC 25922
Obowizkiem kadego laboratorium jest pozbywanie si
Uwaga : zuytych testw i wytworzonych ciekw w zalenoci od
Obowizkiem uytkownika jest prowadzenie kontroli ich typu i stopnia zabezpieczenia laboratorium oraz
jakoci biorc pod uwag zamierzony sposb dezynfekowanie ich i usuwanie (zlecenie dezynfekcji
wykorzystania podoa i zgodno z lokalnymi przepisami i usuwania) zgodnie z zatwierdzonymi procedurami.
(czstotliwo, liczba szczepw...). PIMIENNICTWO
OGRANICZENIA TESTU 1. BARON E.J. - PETERSON L.R. - FINEGOLD S.M. Bailey
xTestu na oksydaz nie naley wykonywa z 48- and Scotts Diagnostic Microbiology - 9th ed.- Ed. Mosby,
godzinnych kolonii wyhodowanych na agarze EMB lub 1994 ISBN 0-8016-6987-1.
CHAPMAN 2, ktre wyrosy na podoach staych. 2. COWAN S.T., STEEL K.J. - Manual for the Identification of
xDo testu na oksydaz nie naley uywa wyizolowanych Medical Bacteria, Cambridge: University Press. - 1965, p. 22.
kolonii, ktre wykazuj spontaniczne zabarwienie 3. KOVACS N. Identification of Pseudomonas pyocyanea by
(fioletowe, rowe, zielone, czarne). W tym przypadku oxidase reaction. - Nature, 1956, n 4535, p. 703.
odczyt testu jest niemoliwy. 4. KNAPP J.S., KOUMANS E.H. Neisseria and Branhamella
xUywajc zbyt du ilo odczynnika mona otrzyma in MURRAY P.R., BARON E.J., PFALLER M.A. et al. -
wyniki faszywie ujemne. Stosuje si tylko jedn kropl Manual of Clinical Microbiology, 7th ed., Washington, D.C. :
odczynnika, jak to podano w sposobie wykonania testu. ASM Press, 1999, p. 587-597, p. 1070.
xDo wykonania testu poleca si uywa ez lub igie 5. MAC FADDIN J.F. - Biochemical tests for identification of
platynowych albo plastikowych (7). Obecno nawet medical bacteria. - 2nd ed. Baltimore : Williams and
Wilkins, 1980, Chap. 27 : Oxydase test. Paragraphe VIIII:
ladw elaza (chromu) moe katalizowa reakcj Precautions - p. 257.
utleniania i dawa faszywie dodatnie wyniki.
xNaley wyrzuca pozosta cz odczynnika po 12
Bacteriol., 1962, vol. 25, n3, p. 445-455.
godzinach.
xBakterie wytwarzajce mae iloci oksydazy np. 7. STEEL K.J. - The oxidase reaction as a taxonomic tool. - J.
Pasteurella, mog da wynik ujemny (4).
xFaszywie ujemne wyniki mog pojawi si przy
mieszanej hodowli dwch rodzajw Pseudomonas TABELA SYMBOLI
i Neisseria. Pseudomonas spp produkuje substancje, Symbol Znaczenie
ktre hamuj wytwarzanie oksydazy przez Neisseria
spp. lub REF Numer katalogowy
OCENA TESTU
Badania przeprowadzono na 100 szczepach. Wyrb do diagnostyki In Vitro
Ze 100 przebadanych szczepw 92 byy opisane jako
okydazo-ujemne lub dodatnie i uyte zostay do oceny
przydatnoci testu: czuoci i swoistoci. Pozostae 8 Producent
szczepw, opisywanych jako oksydazo-zmienne (Bacillus
i Micrococcus) nie brano w ocenie pod uwag.
W wyniku tych bada otrzymano nastpujce wyniki: Przestrzega zakresu temperatury
xz 65 badanych dodatnich szczepw, 4 day ujemne
wyniki: Haemophilus parainfluenzae (1 z 2 badanych
szczepw), Pasteurella multocida (1 z 4 badanych Uy przed
szczepw) i Photobacterium damsela (2 z 2 badanych
szczepw).
x z 27 badanych ujemnych szczepw, tylko jeden da Kod partii
wynik dodatni: Pseudomonas oryzihabitans (1 na 1
badany szczep). Sprawd w instrukcji obsugi
Liczba Czuo Specyficzno
szczepw Pu* (95%) Pu* (95%)
Chroni przed wiatem
92 93.85% 96,30%
(84.98% 97.62%) (81.28% - 99.36%)
* Poziom ufnoci.
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bioMrieux SA Tel. 33 (0)4 78 87 20 00
au capital de 12 029 370 Fax 33 (0)4 78 87 20 90 Wydrukowano we
673 620 399 RCS LYON http://www.biomerieux.com France
bioMrieux i jego niebieskie logo s znakami towarowymi uywanymi, w trakcie rejestracji i/lub zastrzeonymi,
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Oxidase Reagent IVD

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PRECAUTIONS DUTILISATION LECTURE ET INTERPRETATION

Remarque : ELIMINATION DES DECHETS

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Oxidase Reagent IVD

MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED READING AND INTERPRETATION

LIMITATIONS OF THE METHOD LITERATURE REFERENCES

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Oxidase Reagent IVD

Anmerkung: BESEITIGUNG DER ABFLLE

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Advertencia: ELIMINACION DE RESIDUOS

Nmero de Sensibilidad Especificidad

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Reagente Ossidasi IVD

Nota : SMALTIMENTO DEI RIFIUTI

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Oxidase Reagent IVD

Nota : ELIMINAO DE RESDUOS

Nmero de Sensibilidade Especificidade

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Oxidase Reagent IVD

ATCC , / American Type Culture Collection.

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Oxidas Reagens IVD

SAMMANFATTNING OCH FRKLARING - det finns andra tecken p frsmring (ampullen r

INNEHLLSDEKLARATION ppnande av ampull:

Antal Knslighet Specificitet Anvnd fre

Skyddas mot ljus

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Oxidase Reagent IVD

RESUM OG FORKLARING xDe fremlagte prstationsdata blev fundet ved

METODENS BEGRNSNINGER LITTERATURHENVISNINGER

PRSTATIONER In vitro-diagnostisk medicinsk udstyr

Antal Sensitivitet Specificitet

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Odczynnik do wykrywania oksydazy IVD

WPROWADZENIE xProduktu nie naley uywa jeli:

Zakres spodziewanych wynikw : POSTPOWANIE ZE ZUYTYMI TESTAMI

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