Cultivo de Tejidos Vegetales 2019-Ii

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE HUANCAVELICA

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS


ESCUELA PROFESIONAL DE AGRONOMÍA

CONCEPTOS, ANTECEDENTES HISTÓRICOS


DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

SANTIAGO OSCAR PUENTE SEGURA


ORIGEN, EVOLUCIÓN Y DESARROLLO DE LOS SISTEMAS IN VITRO

• En la teoría sobre totipotencialidad formulada por Schleiden y Schwann en 1838, cada célula
vegetal es autónoma y capaz de regenerar una planta completa cuando está sometida
condiciones especiales (Pierik, 1987a).
• Los ensayos preliminares que incidieron en el establecimiento y desarrollo de los sistemas in
vitro comienzan con los aportes de Sacks (1860) y Knops (1861) al observar que los principales
nutrientes de las plantas superiores con sales inorgánicas.
• Posteriormente, el fisiologo Haberlandt(1898), en la Universidad de Graz (Austria), inicio cultivos
de células a partir del mesófilo de células muy diferenciadas en Tradescantia, Ornithogalum y
Erithromiun. Algunos críticos le atribuyeron sus experimentos como fallidos; sin embargo, en
1902 público un trabajo y lanzó la hipotesis sobre la “totipotencia celular”, planteando como
alternativa válida la obtención de nuevas plantas que, al suministrarles las condiciones
apropiadas de nutrición y ambiente, ayudan a reorganizar su secuencia y desarrollo.
• Hanning, en 1904, logró el aislamiento de embriones inmaduros de crucíferas; más tarde
Dietrich(1924) y Laibach(1925, 1929) mostraron la más importante aplicación práctica del cultivo
de embriones en cruces interespecíficos, con cruzamientos de Linum perenne x : L. austriacum,
recuperando plantas normales.
ORIGEN, EVOLUCIÓN Y DESARROLLO DE LOS SISTEMAS IN VITRO

• Otro descubrimiento ocurrió en 1922 cuando Haberlandt y Kotte en Alemania,


cultivaron ápices de raíces de frijol y maíz; al mismo tiempo Robbins(1922), en la
Universidad de Missouri en Norteamérica, logró desarrollar raíces de tomate y
mantenerlas en cultivo durante varios meses. Público los resultados un poco antes
de los trabajos de Kotte; ninguno de los dos sabia sobre sus investigaciones.
Actualmente a ambos investigadores se les reconoce como los pioneros en la
obtención del desarrollo de raíces y mantenerlas en cultivo durante un tiempo
prolongado.
• Knudson, en 1922, estableció el medio de cultivo para la germinación a simbiótica
de semillas de orquídea.
• Gautheret, en 1934, realizó ensayos utilizando como ex plante el cambium de
árboles y arbustos, sin obtener éxito, debido a que para la época aún no se habían
descubierto las auxinas.
En la década de 1930, se logró establecer que el uso de vitaminas como B1, B6 y
también la inclusión de compuestos orgánicos, tales como la sacarosa, permitían el
enriquecimiento de los medios nutritivos utilizados anteriormente. Así se posibilitó la
mantención contenida de especies antes imposibles de ser introducidas al
laboratorio, dando un empuje significativo al desarrollo de plantas cultivadas in vitro.
ANTECEDENTES HISTÓRICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

• White(1939) en Estados Unidos, paralelamente con Nobécourt y Gautheret en Francia, lograron


el crecimiento indefinido de tejido de raíz; al mismo tiempo, observaron las callosidades en
raíces de zanahoria y tabaco que, al ser aisladas a un medio de cultivo semisólido, evidenciaron
el desarrollo progresivo de células sin diferenciar, las denominaron callo(callus).
• Van Oberbeck, Cocklin y Blakeslee emplearon por primera vez el agua de coco para el cultivo
de embriones en Datura.
• Folke Skoog,, en 1944, obtiene los primeros cultivos de tabaco in vitro para estudiar la
formación de vástagos adventicios.
• Ball(1946) reporta por primera vez la obtención de plantas completas a partir de ápices
caulinares de Lupinus y Tropealum.
• Braw, brillante científico del Instituto Rockefeller, es recordado como el pionero en los estudios
de la enfermedad conocida como agallas de corona, causada por la bacteria Agrobacterium
tumefaciens. Estos trabajos allanaron la vía papa la transformación de plantas. En 1947, logró
cultivar por primera vez tejido de agalla de corona, libre de la bacteria inductora en un medio
definido que contenía sacarosa y sales inorgánicas en ausencia de hormonas endógenas.
ANTECEDENTES HISTÓRICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

• Skoog, en los Estados Unidos, logra inducir regeneración de plantas a partir de


explantes iniciales de médula de tabaco (Skoog y Tsui, 1948).
• En Francia, Morel y Martin (1952), revolucionaban el ambiente al promover el
crecimiento de dalias libres de virus a partir de yemas apicales.
• Reinert en Alemania y Steward en los Estados Unidos (Steward et al.,1958; Reinert,
1959), logran de manera casi simultanea, inducir embriones no cigóticos de
zanahorias, haciendo disponible así una metodología de propagación clonal en gran
escala con especial repercusión en las empresas forestales y de comercialización
de flores.
• Cocking en Inglaterra (Cocking, 1960) obtiene protoplastos (células sin pared
celular).
• Murashige y Skoog (1962), publican su medio nutritivo para el cultivo de plantas in
vitro, siendo esta publicación tal vez la más citada en el ámbito del cultivo de tejidos
vegetal de todos los tiempos.
ANTECEDENTES HISTÓRICOS DEL CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

• La suma de descubrimientos no se detiene y en la misma década Guha y


Maheshwari (1964), dos investigadores indios, consiguen obtener plantas haploides
a partir de granos de polen inmaduros y algunos años más tarde en los Estados
Unidos, son publicados los primeros resultados sobre selección in vitro (Carlson,
1970).
• Mientras tanto, Power hace lo mismo sobre fusión de protoplastos (Power et al.,
1970).
• Avanzando en el tiempo, Larkin y Scowcroft (1981), introdujeron en la nomenclatura
del cultivo de tejidos de planta, el término de variación somaclonal.
• En la misma década, comienzan a aparecer los primeros trabajos con
Agrobacterium tumefaciens y biobalística, en el campo de la transformación
genética de plantas (Larebeke et al., 1974; Klein, et al., 1987).
• El cultivo de tejido de plantas, técnica que ofrece entre otras, las siguientes
ventajas:
EVALUACIÓN DE CULTIVOS DE TEJIDOS IN
VITRO
• ¿Qué investigadores formulo la teoría de la
totipotencialidad?
• ¿En que consiste la teoría de la totipotencialiada?
• ¿Cuál fue el primer paso para el desarrollo de las
técnicas de cultivo de tejidos in vitro?
• ¿Qué investigadores demostraron que, en
determinadas partes de la planta, los tejidos
meristemáticos tenían la capacidad de desarrollar
plantas completas en condiciones in vitro?
FITOPATOLOGIA

MEJORAMIENTO DE
PLANTAS
EL MEDIO NUTRITIVO
Soluciones Stock
Soluciones Stock
PREPARACIÓN DE SOLUCIÓN STOCK DE HORMONAS

• PREPARACIÓN DE AG3: Solución concentrada de AG3: 1000 ppm

• PREPARACIÓN DE ANA: Solución concentrada de ANA: 1000 ppm

• PREPARACIÓN DE BAP: Solución concentrada de BAP: 1000 ppm

• PREPARACIÓN DE AIA: Solución concentrada de AIA: 1000 ppm

• PREPARACIÓN DE KIN: Solución concentrada de KIN: 1000 ppm

• PREPARACIÓN DE 2,4-D: Solución concentrada de 2,4-D: 1000 ppm

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