MORFOLOGIA

BACTERIANA
 MORFOLOGIA BACTERIANA
La mayoría de bacterias producen una envoltura celular en capas que incluye la
membrana plasmática y la pared celular y las proteínas y polisacáridos asociados.

Las bacterias presentan una amplia variedad de tamaños, y aparecen vistos al microscopio óptico
como esferas (cocos), cilindros (bacilos) y espirales (espiroquetas).

Las células de muchos géneros familiares de bacterias tienen una entre tres formas rápidamente
distinguibles:

Bastones Bastones largos

Esferas
Rectos helicoidales
ESTRUCTURA BACTERIANA
 Las bacterias son organismos relativamente sencillos.
 Sus dimensiones son 2 μm de ancho por 7-8 μm de longitud en la
forma cilíndrica (bacilo) y cocos de 0,5-1,5 μm.
 Carecen de un núcleo delimitado por una membrana aunque presentan
un nucleoide, una estructura elemental que contiene una gran molécula
circular de ADN.
 El citoplasma carece de orgánulos delimitados por membranas y de las
formaciones protoplasmáticas propias de las células eucariotas.
 En el citoplasma se pueden apreciar plásmidos, pequeñas moléculas
circulares de ADN que coexisten con el nucleoide, contienen genes y
son comúnmente usados por las bacterias en la conjugación.
 El citoplasma también contiene vacuolas (gránulos que contienen
sustancias de reserva) y ribosomas (utilizados en la síntesis de
proteínas).
ESTRUCTURA BACTERIANA
 Una membrana citoplasmática compuesta de lípidos rodea
el citoplasma y, al igual que las células de las plantas, la
mayoría posee una pared celular, que en este caso está
compuesta por peptidoglicano (mureína).
 Algunas bacterias, además, presentan una segunda
membrana lipídica (membrana externa) rodeando a la
pared celular.
 El espacio comprendido entre la membrana citoplasmática
y la pared celular (o la membrana externa si esta existe) se
denomina espacio periplásmico.
 MEMBRANA CITOPLASMATICA
Es una fina estructura que rodea completamente la célula.
La estructura general es de una bicapa lipídica, los fosfolípidos poseen tanto
unidades altamente hidrofóbicas (ácidos grasos) como unidades relativamente
hidrofílicas (glicerol) y pueden presentarse en múltiples formas químicas
distintas debido a la variación en la composición de los ácidos grasos y de los
compuestos fosforilados que se unen al esqueleto del glicerol.
Dado que los fosfolípidos se agregan en soluciones acuosas, tienden a formas
bicapas de manera espontánea, los ácidos grasos apuntan hacia el interior
(manteniéndose en un entorno hidrofóbico), mientras que las porciones
hidrofílicas son las expuestas a la fase acuosa.
ULTRAESTRUCTURA BASICA DE UNA BICAPA
H2O
REGION LIPIDICA
HIDROFILICA

ACIDOS
GRASOS

REGION
HIDROFÓBICA

GLICEROL

FOSFATO
H2O
 Estructuras intracelulares
 La membrana citoplasmática bacteriana tiene una
estructura similar a la de plantas y animales. Es
una bicapa lipídica compuesta fundamentalmente
de fosfolípidos en la que se insertan moléculas de
proteínas.
 A diferencia de las membranas eucarióticas,
generalmente no contiene esteroles (son
excepciones micoplasmas y algunas
proteobacterias), aunque puede contener
componentes similares denominados hopanoides.
 .
 Estructuras intracelulares
FUNCIONES DE LA MEMBRANA CITOPLASMATICA
 En las bacterias realiza numerosas funciones entre las que
se incluyen las de barrera osmótica, transporte, biosíntesis,
transducción de energía, centro de replicación de ADN y
punto de anclaje para los flagelos.
 Muchas importantes reacciones bioquímicas que tienen
lugar en las células se producen por la existencia de
gradientes de concentración a ambos lados de una
membrana. Este gradiente crea una diferencia potencial
análoga a la de una batería eléctrica y permite a la célula,
por ejemplo, el transporte de electrones y la obtención de
energía.
 La ausencia de membranas internas en las bacterias
significa que estas reacciones tienen que producirse a través
de la propia membrana citoplasmática, entre el citoplasma y
el espacio periplásmico.
 Estructuras extracelulares
Pared celular
 Las bacterias disponen de una pared celular que rodea a su
membrana citoplasmática.
 Las paredes celulares bacterianas están hechas de
peptidoglicano o mureína.
 Esta sustancia está compuesta por cadenas de polisacárido
enlazadas por péptidos inusuales que contienen
aminoácidos D. Estos aminoácidos no se encuentran en las
proteínas, por lo que protegen a la pared de la mayoría de
las peptidasas.
 Las paredes celulares bacterianas son distintas de las que
tienen plantas y hongos, compuestas de celulosa y quitina,
respectivamente. Son también distintas a las paredes
celulares de Archaea, que no contienen peptidoglicano.
 La penicilina puede matar a muchas bacterias inhibiendo un
paso de la síntesis del peptidoglicano.
 Estructuras extracelulares
Pared celular
 Existen dos diferentes tipos de pared celular
bacteriana denominadas Gram-positiva y
Gram-negativa
 Las bacterias Gram-positivas tienen una pared
celular gruesa que contiene numerosas capas de
peptidoglicano en las que se inserta ácido teicoico.
 Las bacterias Gram-negativas tienen una pared
relativamente fina, consistente en unas pocas
capas de peptidoglicano, rodeada por una segunda
membrana lipídica (la membrana externa) que
contiene lipopolisacáridos y lipoproteínas.
 Estructuras extracelulares
Pared celular
 Las micoplasmas son una excepción, pues carecen de
pared celular.

 Mycobacterium, el cual, si bien se encuadra dentro de las

Gram positivas, no parece serlo desde el punto de vista
empírico, ya que su pared no retiene el tinte. Esto se debe a
que presentan una pared celular poco común, rica en
ácidos micólicos, de carácter hidrófobo y ceroso y bastante
gruesa, lo que les confiere una gran resistencia.


 PARED CELULAR GRAMPOSITIVA

La pared celular de las

Grampositivas está constituida
principalmente por cadenas de
peptidoglucano, a menudo
unidas por puents peptídicos .
Sin embargo estas células
contienen también una gran
cantidad de ácidos teicocos,
polímeros de glicerol y ribitol
unidos por grupos fosfato y
aminoácidos como D-alanina o
azúcares como la glucosa están
unidos a los grupos glicerol y
ribitol.
 PARED CELULAR GRAMPOSITIVA

Estructura del ácido teicoco

Esta constituido por fosfato glicerol y una
cadena lateral, R.
Donde R puede representar
D-alanina, Glucosa u otras moléculas.
 PARED CELULAR GRAMPOSITIVA

La pared celular de las Grampositivas está constituida

principalmente por cadenas de peptidoglucano, a menudo unidas por
puents peptídicos .
Sin embargo estas células contienen también una gran cantidad de
ácidos teicocos, polímeros de glicerol y ribitol unidos por grupos
fosfato y aminoácidos como D-alanina o azúcares como la glucosa
están unidos a los grupos glicerol y ribitol.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

A. La membrana externa
Sirve como membrana de permeabilidad selectiva que mantiene afuera
a sustancias hidrófobas y sustancias hidrófilas por encima de cierto
tamaño y retiene las proteínas periplásmicas. La membrana exterior es
una típica capa doble de fosfolípidos en la cual los fosfolípidos de la
capa más externa han sido sustituidos por moléculas de LPS.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

B. Porinas
Halladas en la membrana externa y con un peso molecular de 35,000,
forman los poros transmembrana o canales de difusión que permite el
pasaje de pequeñas moléculas hidrófilas a través de la membrana
externa.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

C. Lipoproteína
Es la proteína más abundante en las células Gramnegativas, su función
consiste en estabilizar la membrana externa y anclarla a la capa de
peptidoglucano.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

D. LPS
Conocido como lípido A, consiste en unidades
del disacárido de glucosamina fosforilada que
tiene unidos varios ácidos grasos de cadena
larga. Es termoestable, letalmente tóxico,
pirogénico.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

E. Protoplasto y Esferoplasto
La capa de glucopéptidos de la pared celular puede eliminarse
mediante hidrólisis con lisozimas, pero es estabilizada en soluciones
hipertónicas de sacarosa.
- Protoplasto, cuando se libera un cuerpo esférico sin pared
osmóticamente sensible, Grampositivas.
- Esferoplasto, cuando hay retención de la cubierta celular se
denomina esferoplasto (Gramnegativas).
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

F. Periplasma o espacio periplásmico

Ees el espacio que aparece entre la membrana plasmática y la
membrana externa, se observa fácilmente en (Gramnegativas), con
dificultad en Grampositivas., debido a las altas presiones osmóticas
internas de las bacterias Grampositivas 8 - 20 atm en comparación con
la Gramnegativas 3 a 5 atm.
 PARED CELULAR GRAMNEGATIVA

G. Componentes de la membrana,
La membrana están compuestas aproximadamente por 60 - 70% de
proteínas, 30 - 40% de lípidos y pequeñas cantidades de hidratos de
carbono. Los constituyente principales son las fosfatidiletanolaminas
75%, fosfatidilglicerol 20% y glucolípidos. La colina, esfingolípidos,
ácidos grasos poliinsaturados y esteroides son raros.
 DIFERENCIAS ENTRE GRAMPOSITIVAS Y
GRAMNEGATIVAS
GRAMPOSITIVAS
Producción de
polisacáridos
conocidos como
ácidos teicocos, una
capa de la pared
celular relativamente
gruesa, contigua y
que recubre la
membrana
plasmática.
GRAMNEGATIVAS
Presentan 3 capas de envoltura distintas, dispuestas de manera laxa, estas
incluyen la membrana externa (ME), convoluta, arrugada con surcos u
ondulante, que contiene el antígeno O somático conocido como
lipopolisacárido LPS, una capa densa intermedia, y la membrana
plasmática interna. Un espesor de 0.0075 um.
DIFERENCIAS ENTRE GRAMPOSITIVAS
Y GRAMNEGATIVAS
 DIFERENCIAS DE LA PARED CELULAR DE
GRAMPOSITIVAS, GRAMNEGATIVAS Y
MICOPLASMA

Grampositiva Gramnegativa Micoplasma

PARED CELULAR
La pared celular encontrada en todas las bacterias con excepción de los micoplasmas,
protege a la célula de los medios de baja presión osmótica y mantiene la forma. La
pared celular esta compuesta por un glucopéptido único para las bacterias.
El espesor oscila generalmente entre 0.150 um y 0.500 um de espesor, pudiendo
incluso alcanzar 0.8 um (Lactobacillus). Las paredes de las células jóvenes son más
delgadas que las células de cultivo antiguo.
 FUNDAMENTO DE LA
COLORACION GRAM
 El cristal violeta actúa como un colorante primario, que se une a la pared
celular bacteriana luego de un tratamiento con una solución débil de iodo
(Mordiente).
 Algunas bacterias debido a su naturaleza química de sus paredes celulares,
poseen la capacidad de retener el cristal violeta, aun luego del tratamiento con
un decolorante orgánico, tal como una mezcla de alcohol y acetona. Tales
bacterias se denominan Grampositivas.
 Las bacterias Gramnegativas debido a su mayor contenido lipídico en su pared
celular, pierden la coloración primaria del cristal violeta cuando son tratadas
con el decolorante. El colorante secundario o de contraste utilizado es la
safranina. Las bacterias Gramnegativas que han perdido el cristal violeta,
aparecen rojas o rosadas vistas al microscopio, habiendo fijado la safranina
como contracolor a sus paredes celulares.
 Las bacterias aparecen de color violeta, aunque el grado de absorción del
colorante por los diferentes microorganismos es variable, y algunas estructuras
como las esporas absorben el colorante con dificultad son así fácilmente
diferenciables.
 PROCEDIMIENTO DE LÑA
COLORACION GRAM
 Coloque una asada de caldo nutritivo que contiene una
mezcla de bacterias Grampositivas y Gramnegativas sobre
una lámina portaobjeto limpia.
 Deje secar a temperatura ambiente o pasando por la llama
suavemente para obtener la fijación del frotis, con la
finalidad de que el material no sea arrastrado durante el
proceso de tinción.
 Colocar el preparado sobre un soporte de tinción y cubrir la
superficie con solución de cristal violeta por 1 minuto. Lavar
bien con agua de caño.
 Cubrir el preparado con Iodo de Gram durante 1 minuto.
Lavar con agua.
 PROCEDIMIENTO DE LA
COLORACION GRAM
 Sostener el portaobjeto entre el pulgar y el índice y bañar
la superficie con unas gotas del decolorante acetona-
alcohol hasta no arrastrar más colorante violeta. Se
requiere unos 10 segundos más o menos.

 Cubrir la superficie con la safranina durante 1 minuto.

Lavar con agua de caño.
 Secar al aire, a temperatura ambiente.

 Observar al microscopio con lente de inmersión. (100X) y

con aceite de inmersión.
PROCEDIMIENTO
DE LA
COLORACION DE
GRAM
 REACTIVOS
1. SOLUCION DE CRISTAL VIOLETA
Cristal violeta 1.0 g
Alcohol 95º 20 ml.
Agua destilada csp 100 ml
2. SOLUCION DE LUGOL
Yodo en cristales 1.0 g.
Yoduro de potasio 2.0 g.
Agua destilada 100 ml.
3. DECOLORANTE
Acetona 50 ml.
Etanol 50 ml.
4. SAFRANINA
Safranina 0.25 g.
Alcohol 95º 10 ml.
Agua destilada c.s.p. 100 ml.
Candida sp.
VIBRIO
BACTEROIDES
 ACINETOBACTER
BRUCELLA
COLORACION DE
ZIEHL-NEELSEN
 FUNDAMENTO DE LA COLORACION
DE ZIEHL-NEELSEN
 Las micobacterias poseen una cápsula gruesa y
cerosa, y una pared celular compuesta por ácidos
micolicos y ácidos grasos de cadena larga resistente
a la tinción, sin embargo una vez teñida, esta cápsula
resiste la decoloración cuando es tratada con
potentes solventes orgánicos tales como el alcohol-
ácido. Por esta razón los microorganismos que tienen
esta propiedad se llaman ácidorresistentes.
 A fin de que el colorante primario, la carbolfucsina,
penetre a través de las cápsulas cerosas de los bacilos
ácidorresistentes, se requiere de cierto tipo de
tratamiento físico, se emplea calor. El fenol parece
ayudar a la penetración del colorante a través de los
lípidos. Se emplea el azul de metileno como
colorante de contraste.
 Esta coloración se emplea principalmente para el
diagnóstico de la tuberculosis y la lepra.
 REACTIVOS

1. FUCSINA FENICADA DE ZIEHL-NEELSEN

Fucsina Básica 0.5 g
Fenol 2.5 g
Alcohol 95º 5 ml.
Agua destilada csp 100 ml

2. SOLUCION DECOLORANTE ALCOHOL-ACIDO

Etanol 97 ml.
Acido clorhídrico cc. 3 ml

3. SOLUCION DE AZUL DE METILENO

Azul de metileno 0.5 g.
Agua destilada 100 ml.
 PROCEDIMIENTO

Hacer un frotis con la muestra de esputo y fijar la preparación por

 .
calor.
Vierta unas gotas de solución de fucsina fenicada hasta cubrir la
preparación.
Calentar suavemente hasta que se desprenda vapor por tres veces
consecutivas, evitando la ebullición.
Elimine el colorante y lave la preparación con agua corriente.
Cubrir el portaobjetos con la solución decolorante durante 1 minuto,
hay que asegurarse que no desprenda coloración roja; si es
necesario, se pueden añadir unas gotas más del decolorante.
Lavar con agua con la finalidad de eliminar el exceso.
Añadir el colorante de contraste azul de metileno y se deja actuar
por un minuto.
Lavar con agua, eliminando el exceso.
Secar al aire, a temperatura ambiente.
Observar al microscopio con lente de inmersión. (100X) y con
aceite de inmersión
CLASIFICACIÓN DE CDC Y OMS PARA EL
REPORTE DE BAAR.

Número de BAAR Reporte

0 BAAR/100 Campos Negativo
1 BAAR/300 Campos Pseudobacilar
1 – 9 BAAR/100 Campos Positivo 1+
1 – 9 BAAR/10 Campos Positivo 2+
1 – 9 BAAR/ Campo Positivo 3+
10 a más BAAR/ Campo Positivo4+
CLASIFICACIÓN DE CDC Y OMS PARA EL
REPORTE DE BAAR.

Positivo 1+
CLASIFICACIÓN DE CDC Y OMS PARA EL
REPORTE DE BAAR.

Positivo 2+
CLASIFICACIÓN DE CDC Y OMS PARA EL
REPORTE DE BAAR.

Positivo 4+
CLASIFICACIÓN DE CDC Y OMS PARA EL
REPORTE DE BAAR.

Positivo 4+
 ULTRAESTRUCTURA
BACTERIANA

FLAGELOS
FILAMENTOS AXIALES
MICOFIBRILLAS, FIMBRIAS, Y PILIS
(PELOS SEXUALES)
FLAGELOS
 FLAGELOS

Los flagelos bacterianos son largos

apéndices filiformes compuestos en su
totalidad por proteína, miden de 12 a 30
nm de diámetro. Son los órganos de
locomoción para las formas que lo
poseen.
Un flagelo bacteriano está hecho de una
sola clase de subunidad proteínica,
denominada FLAGELINA; el flagelo
está formado por la agregación de
subunidads que forman una estructura
cilindrica hueca.
Los flagelos pueden variar desde unos
pocos (E. coli) hasta varios cientos
(Proteus).
 Partes del Flagelo
Esta compuesto de tres partes:
1. EL FILAMENTO Es
externo con respecto a la
célula y se une al gancho en la
superficie celular. Está
constituido por varias
membranas proteínicas que
forman una hélice con un
centro hueco.
2. EL GANCHO Esta fijado
al cuerpo basal, que a su vez
esta anclado en la membrana
plasmática.
 Partes del Flagelo
3. CUERPO BASAL Esta
constituido de un cilindro y
dos o más juegos de anillos
contiguos a la membrana
plasmática, el glicopéptido y
en el caso de las bacterias
Gramnegativas, la membrana
externa de la envoltura
celular.
El anillo M está integrado por
la membrana celular.
El anillo S en la capa de
peptidoglicanos.
Los anillos P y L en la
membrana externa.
 DISPOSICION DE LOS FLAGELOS

Los flagelos se diferencian por su número y disposición en la célula.

MONOTRICA, un solo flagelo en un

extremo

LOFOTRICA, dos o más flagelos en un polo

ANFITRICA, un flagelo en cado polo

ANFILOFOTRICA, dos o más flagelos en uno o ambos polos

PERITRICA, flagelos sobre toda la superficie celular

 Clasificación De Los Flagelos

Los flagelos se diferencian por su número y disposición en la célula.

1.- Monotricas: Bacterias con un flagelo único en posición polar.
2.- Lofotricas : dos o mas Flagelos que se originan en un polo o en un
punto de la célula.
 Clasificación De Los Flagelos

3.- Anfitricas: un solo flagelo en dos puntos o polos diferentes de la célula

4.- anfilotricas: Dos o mas flagelos (penacho) en dos puntos o polos de la
célula
5.- Peritricos: Poseen flagelos sobre toda su superficie
 flagelos

bacteria
 flagelos

bacteria

nutriente
 volteretas

carrera

Los flagelos permiten que las bacterias encuentren medios favorables y eviten los
desfavorables. Aunque pudiera parecerlo, el movimiento no se produce al azar.
Cuando una bacteria nada hacia un nutriente o alejándose de un compuesto tóxico,
aumenta la duración de las CARRERAS y disminuye la frecuencia de las
VOLTERETAS
situación del
nutriente
 Tinción de Flagelos
Es muy difícil observar flagelos en una preparación teñida, debido a que
se retraen muy fácilmente y se adhieren a la pared celular.
Ej: Spirillum volutans, Escherichia coli. Proteus, Pseudomona.

CONSIDERACIONES PARA REALIZAR LA TINCION

Se debe partir de cultivos jóvenes, de entre 6- 12 sembrado en agar
nutritivo blando.
Debe emplearse portaobjetos nuevos, perfectamente limpios, tratados
con mezcla sulfocrómica, perfectamente aclarados con agua destilada y
secados en estufa.
Preparar una suspensión del germen en agua destilada, mezclando
suavemente hasta obtener una suspensión lechosa.
Colocar el portaobjeto ligeramente inclinado y se depositan sobre él un
par de gotas de la suspensión.
Dejar secar al aire sin aplicar calor.
 METODO DE LEIFSON

Fundamento:
Los flagelos son estructuras demasiado finas para ser visible al
microscopio óptico, en presencia de ácido tánico puede
evidenciarse su presencia y disposición en las células, por medio
de un precipitado grueso que se deposita sobre la pared celular y
flagelos.
El diámetro aumenta de tal modo que con la tinción de fucsina se
les hace visibles al microscopio óptico.
Los flagelos se pueden teñir con soluciones alcohólicas de
colorantes de anilina, que forman un precipitado al evaporarse el
alcohol en el proceso de tinción.
La fucsina básica es el colorante primario y el ácido tánico
añadido a la solución actúa como un mordiente.
Se puede usar un contracolor como el azul de metileno, para
visualizar mejor la bacteria en los casos en que el colorante
primario es débil o no reacciona del todo con la pared celular
bacteriana.
 METODO DE LEIFSON

Reactivos:
•Colorante de Leifson (Fucsina básica, alcohol
•Acido tánico, cloruro de sodio)
•Solución acuosa de sulfato de cobre 2%.
Técnica:
•Se cubre la preparación con el colorante de
Leifson
• Se deja actuar por unos 10 a 15 minutos, hasta
que el
alcohol se evapore.
•Se lava con agua, sin volcar el colorante.
•Se seca a temperatura ambiente. Observar a
100X.
Observación
Los flagelos se observan de color rojo oscuro
a azul negruzco.
 METODO DE RHODES

Reactivos:
•Mordiente de Rhodes (contiene una solución
acuosa de tanino, alumbre potásico, aceite de
anilina y cloruro férrico).
•Nitrato de plata amoniacal.

Técnica:
•Se cubre la preparación con el mordiente de
Rhodes durante 3 a 5 minutos.
•Se lava cuidadosamente con agua, mejor por
Observación
inmersión.
Los flagelos se observan
•Se cubre con la solución de nitrato de plata
por el precipitado de
amoniacal, calentándolo hasta casi ebullición y nitrato de plata que se ha
dejándolo actuar por 3 a 5 minutos.
depositado en torno suyo.
•Se lava con agua destilada.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.
 METODO DE TRIBONDEAU

Reactivos:
•Mordiente de Tribondeau.(contiene solución alumbre
potásico y tanino).
•Solución de cristal violeta.

Técnica:
•Se fija el frotis con alcohol.
•Se cubre la preparación con la mezcla formada por 5
ml del mordiente y 0.5 ml de cristal violeta
previamente sometida a ebullición. Observación
•Se deja actuar la mezcla unos veinte segundos. Los flagelos se
•Se lava rapidamente con agua, sin volcar previamente observan de color rojo
el colorante para evitar que se forme una película sobre oscuro a azul negruzco
la preparación.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.
FILAMENTOS AXIALES
Las Espiroquetas, Treponemas, Leptospiras, Borrelias; son células con
motilidad y se mueven desplazándose por una onda helicoidal, tipo de
movimiento que le permite la penetración en medios viscosos.

Estas bacterias producen filamentos axiales semejantes a flagelos, en torno

de los cuales se arrolla la célula.

Estos filamentos están ubicados en el espacio periplásmico entre las

membranas interna y externa de la célula. El Treponema microdentium
produce dos filamentos por célula, el T. reiteri produce 6 a 8.
 FIMBRIAS

Las fimbrias y los pili presentan una estructura similar a la de los flagelos
pero no participan en la motilidad.

Las fimbrias son bastante más cortas que los flagelos y mucho más
numerosas. Pero también son de naturaleza protéica.

No todos los microorganismos poseen fimbrias y la capacidad para fabricarlas

es un rasgo hereditario.

No se conoce con certeza la función de las fimbrias en todos los casos, pero
parece evidente que favorecen, en algunos organismos, su fijación a las
superficies como los tejidos animales, en el caso de algunas bacterias
patógenas, o la formación de películas o la fijación a las superficies líquidas.
 PILIS

Los pili (pelos) son estructuralmente similares a las

fimbrias, son más largos y existe uno o pocos pili
sobre la superficie, en una proporción de 1 a 4 pili
por 100 a 200 fimbrias.

Los pili pueden verse con el microscopio electrónico

al funcionar como receptores específicos para
determinadas partículas víricas, por lo que pueden
observarse con facilidad cuando están recubiertos
con virus.

Los pili son  proyecciones tipo fibroso de las células.

Están relacionados con la conjugación sexual y otros
permiten la adherencia de la bacteria a las superficies
epiteliales del huésped que infecta.
 ENVOLTURA CELULAR

CAPSULA Y MUCUS O GLICOCALIX

MEMBRANA CITOPLASMATICA
PARED CELULAR
 CAPSULA, GLICOCALIX
 Muchas bacterias son capaces de acumular material en el exterior para
recubrir su superficie.
 LA CAPSULA, es una estructura rígida, bien definida que rodea a la
célula y que se une firmemente a la superficie bacteriana.. Ej: Bacillus
megaterium.1
 EL GLICOCALIX, es flexible y se une de forma laxa, es cuando el
polímero forma una maraña de fibras que se extiende fuera de la
célula.. Ej: Klebsiella
 CAPSULA, GLICOCALIX
 La formación de estas estructuras extracelulares depende
del sistema de secreción bacteriano.
 Este sistema transfiere proteínas desde el citoplasma al
periplasma o al espacio que rodea a la célula. Los sistemas
de secreción son esenciales para la virulencia de los
patógenos

Capsula Glicocalix Biopelicula

 CAPSULAS

El material capsular pueden ser polímeros de un único monosacárido (glucosa,

dextrano, levano) o heteropolisacáridos que contienen tanto hexosas como
pentosas, más ribitol, glicerol u otros alcoholes azúcar. Los fosfatos con
frecuencia también están presentes.
En Bacillus es de naturaleza polipeptídica. La cápsula es sintetizada a nivel de
la membrana celular, sus componentes son sintetizados y exportados fuera de
la célula por un sistema transportador para lípidos isoprenoides, en el cual los
componentes se unen a un material capsular

Bacteria que presentan cápsula:

Streptococus pneumoniae,
Haemophilus influenzae, Klebsiella
pneumoniae,y Neisseria meningitidis,
Cryptococcus neoformans.
 FUNCIONES

•Protege a la célula de la desecación y de materiales tóxicos del medio

ambiente (metales pesados y radicales libres) y promueve la concentración
de nutrientes en la superficie de la bacteria debido a su naturaleza
polianiónica.
•La cápsula también tiene participación en la adherencia de las bacterias a las
células y mucosas superficiales.
•Esta adherencia permite que los microorganismos establezcan infecciones
en los huéspedes adecuados y permite la formación de biopelículas,
•La cápsula ofrece resistencia a la acción bactericida del complemento y de
los anticuerpos séricos.
Estas estructuras protegen a las bacterias y evita que sean fagocitadas por
los macrófagos
Actuán como antígenos y estar implicadas en el reconocimiento bacteriano
 TINCION DE CAPSULA
La cápsula es una capa mucosa, más o
menos gruesa, que envuelve la pared celular
de algunas bacterias.
Está compuesta de polisacáridos,
mucopolisacáridos o polipéptidos.
A consecuencia de su elevado contenido en
agua, se tiñen débilmente por los colorantes.
Algunas técnicas colorean el fondo de la
preparación, destacando sobre él las
cápsulas sin teñir.
Nota:
Preparación de los frotis: debe realizarse un
frotis espeso a partir de una suspensión de
los gérmenes en suero sanguíneo a 1/3 en
suero fisiológico.
 METODO DE HISS

Reactivos:
•Solución acuosa de cristal violeta 1%.
•Solución acusoa de sulfato de cobre 2%.

Técnica:
•Se fija el frotis al calor.
•Se cubre la preparación con cristal violeta y
se calienta a vapor fluente durante 1 minuto.
•Se lava con sulfato de cobre.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.

Las cápsulas se habrán coloreado de azul

pálido, las bacterias de color púrpura y el
fondo de color claro.
 TINTA CHINA
Reactivos:
Solución de fucsina diluida.
•Nigrosina o tinta china

Técnica:
•Se fija el frotis al calor.
•Agregar la fucsina diluida durante 2 minuto.
•Se lava con agua destilada
•Se seca a temperatura ambiente.
•Se coloca, en un extremo del portaobjeto dos gotas
de nigrosina o tinta china y se hace una extensión
por el método de los dos portaobjetos.
•Se seca.
•Observar a 100X.

Al haber hecho la extensión con la nigrosina, el

fondo aparecerá negro, las bacterias teñidas de rojo
por la fucsina y la cápsula será un halo blanco que
las envuelve.
 ESTRUCTURAS
CITOPLASMATICAS
CUERPO NUCLEAR
RIBOSOMAS
POLIAMINAS Y PROTEINAS
SIMILHISTONAS
GRANULOS CITOPLASMATICOS
ENDOSPORAS BACTERIANAS
 CUERPO NUCLEAR

El ADN bacteriano puede ser detectado

como nucleiodes o cuerpos de cromatina con
microscopio óptico empleando la coloración de
Feilgen, es difícil demostrar los cuerpos de
cromatina debido a la alta concentración de ARN.

El tratamiento previo con ribonucleasa elimina casi todo al ARN, y los cuerpos
de cromatina pueden verse.
Con microscopio electrónico se observa material nuclear como una red
irregular, delgada, fibrilar de ADN, que corre paralela al eje de la célula.
El ADN bacteriano representa un 2 a 3% del peso celular, ocupa el 10% del
volumen de la célula, esta difusión permite una rápida difusión de los
materiales solubles hacia todas las partes de la estructura nuclear.
 RIBOSOMAS
Los ribosomas están compuestos por 30% de
proteínas y de 70% de ARN.
La lisis suave de la célula en crecimiento hace que
aparezcan agregados polirribosomas y membrana,
que contienen todo el mecanismo de síntesis
protéica: Los polirribosomas son cadenas de
ribosoma 70S manómeros, fijados al ARN
mensajero.
El número de ribosomas varía con las condiciones de crecimiento: Células de
crecimiento rápido en medios ricos contienen muchos más ribosomas.
SUBUNIDADES, La estabilidad de los cromosomas depende de Mg+2 , con
bajas concentraciones de Magnesio, los ribosomas 70 S, se disocian en
monómeros ribosómicos 50S y 30S.
POLIAMINAS Y PROTEINAS SIMILHISTONAS

Las poliaminas se encuentran asociadas con ribosomas y

membranas.
Las principales son: Putrescina y Espermidina, ejercen un efecto
antimutagénico, impiden la disociación de los ribosomas 70S en sus
componentes 30S y 50S y aumentan la resistencia de los protoplastos a la
lisis osmótica.

Proteínas simil Histonas se ha encontrado en pequeña cantidad en

asociación con el ADN de E. coli
 GRANULOS CITOPLASMATICOS
Los gránulos identificados por
procedimientos de tinción
adecuados indican la acumulación
de reservas de alimentos,
incluyendo polisacáridos, lípidos o
polifosfatos.

El número y el tipo de gránulos de

almacenamiento varía con el
medio y el estado funcional de las
células.
 GRANULOS CITOPLASMATICOS

El glucógeno es el principal material de almacenamiento de

las bacterias entéricas y constituye el 40% del peso.
Mientras que algunas especies de Bacillus y Pseudomonas
acumulan un 30% como poli--hidroxibutarato
Los polímeros de alto peso molecular (polifosfatos) como el
polihexametafosfato conocidos como granulos
metacromáticos o volutina se producen en especies de
Corynebacterium, Yersinia pestis y especies de Mycobacteria.
Estos gránulos de volutina se ven rojo rosáceo cuando se tiñen
con azul de metileno.
 ENDOSPORAS BACTERIANAS
Las endosporas se forman en respuesta a la falta de nutrientes
dentro de la célula bacteriana vegetativa. Estas estructuras son altamente
resistentes a los efectos destructivos del calor, sequedad, presión y muchos
agentes desinfectantes. Se requiere de 120ºC por 15 a 20 minutos para matar
esporas. Se cree que la resistencia al calor de las endosporas se debe al
reducido contenido de agua en el centro propiamente dicho de la espora.

Las endosporas son estructuras esféricas u ovales formadas dentro

de ciertas especies bacterianas que representan un estado latente o de reposo
en el ciclo de crecimiento de esos microorganismos.

El proceso de germinación ocurre en tres etapas

iniciación
activación excrecencia
 ENDOSPORAS BACTERIANAS

La formación de endosporas es un rasgo distintivo de la familia

Bacillaceae, que incluye al género aerobio, Bacillus y el género anaerobio
Clostridium.

Entre las bacterias con importancia clínica , las endosporas sólo se

presentan en 2 géneros. Las bacterias aerobias grampositivas formadoras de
endosporas pertenecientea al género Bacillus y los anaerobios obligados del
género Clostridium.
 ESPORAS

Bajo los estímulos de ciertas condiciones ambientales como el

agotamiento de nutrientes (glucosa, nitrógeno o fosfato) o la exposición a
temperaturas o potenciales redox subóptimos, el material nuclear se divide
en dos nucleoides, y uno se separa del otro por un septo membranoso.
El septo crece y el centro de la espora termina rodeado por una doble
membrana. Entre las dos membranas, una capa cortical se deposita sobre
ellas. Esta corteza consta principalmente de material peptidoglicano.
La capa cortical se endurece y acumula iones calcio debido a la actividad
quelante de una molécula singular llamada ácido dipicolínico.
 ESPORAS

El centro queda protegido por la alta concentración de iones calcio que

entrecruzan fuertemente el material peptidoglicano y toda el agua
contenida en la espora es expulsada.
Varias capas de la cubierta de la espora (una sustancia de tipo queratina
que es rica en enlaces disulfuro) se depositan y la espora es liberada en
el momento en que muere y se lisa la célula madre vegetativa. Las
endoporas pueden permanecer por durante períodos prolongados.
 ESPORAS

Cuando la endospora es colocada en condiciones ambientales favorables

en presencia de algún estímulo particular (presencia de una aminoácido
particular, hidrato de carbono o agua) se produce su germinación.

Bajo este estímulo las células son activadas, degradan la corteza de la

espora y lilberan material peptidoglicano, los iones calcio y el ácido
dipicolínico. Comienza la síntesis del RNA, seguido por la síntesis de
proteínas y, finalmente, la síntesis de DNA. El resultado es una nueva
célula vegetativa.
BACTERIAS

Según su localización en la célula, se distinguen tres tipos de esporas

Subterminales Terminales
Centrales
 POSICION DE LA ESPORA
El tamaño, la forma y la localización de las esporas incipientes en células
en fase estacionaria de especies Clostridium y Bacillus es útil para la
caracterización e identificación de ciertas especies dentro de estos dos
géneros.

Las endosporas pueden ser esféricas u ovales; pueden diferir en su

localización dentro de la célula es decir, central, terminal o subterminal y
pueden o no hinchar la célula.

Las endosporas generalmente no se tiñen por el método de Gram y

aparecen cuerpos refractarios, no teñidos en los extendidos.
POSICION DE LA ESPORA
A. ENDOSPORAS CENTRALES
Están situadas en el centro de la célula.

B. ENDOSPORAS SUBTERMINALES
Se encuentran próximas al extremo. Bacilos
grampositivos sobrecoloreados con
endosporas subterminales. Característico del
Bacillus y Clostridium.
La diferencia se realiza en base a que el
Bacillus es aerobio o anaerobio facultativo y
el Clostridium es anaerobio obligado.

C. ENDOSPORAS TERMINALES
Se encuentran situadas en el extremo.
Clostridium tetani
 MORFOLOGIA MICROSCOPICA Y
REACCIONES TINTORIALES
TINCION DE LAS ESPORAS
Las esporas son la forma de resistencia de las bacterias. Tienen
forma esférica u oval. Al microscopio, las esporas sin teñir se observan
como gránulos brillantes.
Se tiñen con verde malaquita o carbolfucsina y en suspensiones de
bacterias sin teñir se observan como cuerpos refringentes intracelulares.
Ej: Clostridium
BACTERIAS

A. TINCION DE GRAM:
Las bacterias se tiñen de color violeta, mientras
que las esporas no se colorean dejando espacios vacíos.
BACTERIAS

B. TINCION DE WIRTZ CONKLIN

Las esporas se habrán teñido de
verde y las células bacterias de color rojo.
 BACTERIAS

C. TINCION DE MOELLER
Las esporas se habrán teñido de rojo o
rosado y las bacterias azules.
 FASES DE LA
FORMACIÓN DE
ENDOSPORAS
BACTERIANAS