Requerimientos Nutritivos2013

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REQUERIMIENTOS NUTRITIVOS

NUTRIENTES. Materiales básicos


para la vida, pues a partir de esta
materia orgánica, sintetizan materia
viva y energía necesaria para esta
síntesis.
COMPOSICION QUIMICA DE LA
CELULA BACTERIANA
AGUA. 80 – 90% de la célula,
disueltos los compuestos químicos
del protoplasma.
% peso
Elementos seco Función

Carbono 50% Constituyen los comp. orgánicos

Oxigeno 20% C.Org, Aceptor final e- en cadena respir.

Hidrógeno 8% Forma parte Comp.organ

Nitrógeno 14% Comp. Org, P,E, CoeE, A.N

Azufre 1% Comp. Org, P, CoeE, A.N

Fósforo 2% Comp. Org, A.N, Fosf, CoeE

  95%  
• 5% restante constituye, K, Mg, Ca, Fe, Mn, Co,
(Na, Cl), (Cu, Zn, Mo)
• K. Catión inorgánico, actúa cofactor en
reacciones orgánicas.
• Mg. Activador inorgánico de enzimas, en
formación de ATP, componente de la pared y
membrana celular y clorofila
• Ca. Cofactor en reacciones, Endosporas
• Fe. Cofactor importante de la cadena
respiratoria siendo cofactor de los citocromos
• Mn. Cofactor suele remplazar al Mg cuando es
necesario, interviene en reacciones del ATP
• Co. Vitamina B12 importante en los S.V.
• Na, Cl. Bacterias halófilas
• Cu, Zn y Mo. Forman parte de ciertas enzimas
especiales como la nitrogenasa
CLASIFICACION DE LOS MICRO DE ACUERDO A REQUERIMIENTOS
NUTRITIVOS

Los Seres Vivos, clasifican de acuerdo a


dos criterios
a) Fuente de ∑
b) Fuente de carbono
Luz Fotótrofos
1. Fuente de energía Comp. Químicos Org e Inorg (Quimiot)
CO2 Autótrofos

2. Fuente de carbono Comp. Orgánicos Heterótrofos

Organismos Fotoautótrofos.
Utilizan luz como fuente de energía
Y el CO2 como fuente carbono
Organismos Fotoheterótrofos
Luz como fuente de energía
Compuestos orgánicos como fuente
de carbono
Organismos Quimioautótrofos.
Compuestos químicos inorgánicos como
fuente de energía y CO2 como
fuente de carbono (bacterias
primitivas).
Organismos Quimioterótrofos.
Compuestos orgánicos tanto como
fuente de energía y como fuente de
carbono (microbios patógenos).
Organismos Potótrofos.
Son aquellos que no requieren factores
de crecimiento
Organismos Auxotrofos.
Son aquello que requieren factores de
crecimiento
Organismos Copiótrofos.
Requieren altos niveles de nutrientes
Organismos Oligotrofos.
Requieren bajos niveles de nutrientes
MEDIOS DE CULTIVOS

Es la sustancia o mezcla de sustancias que se utiliza


para cultivar microbios la que proporciona
nutrientes necesarios para el crecimiento de los
mismos. Tipos de medios de cultivo
1. Medio sintético. La composición química exacta
del cultivo es conocida es decir el tipo de
molécula y la cantidad de todos los nutrientes.
Ejemplo: bacterias quimioautótrofas que oxidan
el azufre.
Azufre en polvo 10 g
Sulfato de amonio 0,4 g
Fosfato de potasio di básico 4g
Cloruro de calcio 0,25 g
Sulfato de Mg heptahidratado 0,5 g
Sulfato de hierro 0,01 g
Agua destilada 1000 ml
2. Medio complejo. (básico) la composición química
exacta del cultivo no se conoce, es el mas utilizado
y crecen la mayoría de microorganismos
heterótrofos. Ejemplo: agar nutritivo que esta
constituido por:
a. Extracto de carne. Proporciona al medio
carbohidratos, compuestos orgánicos
nitrogenados, vitaminas, sales. 3 g/lt.
b. Peptona. Compuesto resultante de la
descomposicion de material proteico como:
extracto de carne, leche, gelatina. La peptona es la
principal fuente de N. orgánico para los microbios
aporta con vitaminas y carbohidratos. 5 g/lt
c. Agar. Carbohidrato de estructura bastante
compleja se extrae de algas rojas, solo es un
agente solidificante. 15 g/lt. Extracto de carne +
peptona = caldo nutritivo
3. Medio Enriquecido. Medio básico + una sust. Da lugar
al crecimiento de heterótrofos fastidiosos. Ejm.
Cuando a un medio básico se le añade extracto de
levadura, al extracto se le prepara con agua
destilada, se lo deja toda la noche y al día
siguiente se lo recoge solo lo superficial.
4. Medio selectivo. Se obtiene cuando a un medio básico o
enriquecido se le añade sust. Que permite el
crecimiento de ciertos microbios pero no de otros. Ejm.
Ciclohexamina. Crecimiento de bacterias
Estreptomicina. Crecimiento de hongos
5. Medio diferencial. Se obtiene cuando a un medio básico o
enriquecido se le añade sust. Que permite el
crecimiento de microbios en una forma típica o que
provoca algún cambio típico en el medio como
resultado de crecimiento. Ejm. Si al medio se le añade
azul de bromotimol (indicador de pH) el medio torna
una coloración azul verdosa bien típica, cuando se
inocula los microbios al medio se puede tornar azul o
amarillo. Si el microbio produce álcali (base) se torna
azul cuando el pH sube, si el medio produce ácido el
medio se hace amarillo el pH baja.

• En otros casos se añade sangre al medio se torna rojo,


pero si en este crecen bacterias hemolíticas, el medio se
produce zonas claras ya que las bacterias destruyen los
glóbulos rojos.
PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVOS

• SUSTANCIAS NATURALES. Si el medio es una sustancia natural como la


leche, lo único que se debe hacer es dispersar el medio sobre
recipientes adecuados y esterilizar.
• Mezcla de sustancias
1. Pesar
2. Disolver
3. Medir el pH. No pH indicado 0,1 a 0,5 N de NaOH o HCl
4. Dispersar
5. Esterilizar
CONDICIONES NECESARIAS PARA EL CRECIMIENTO DE LOS
MICROORGANISMOS

• TEMPERATURA. Crecimiento esta en relación a


la Tº, o el metabolismo esta en relación a la Tº.
• Existen tres tipos de Tº
• Tº óptima. Crecimiento máximo
• Tº máxima. Crecimiento se detiene
normalmente, resulta la muerte de microbios
por la coagulación de proteínas
• Tº mínima. Bajo crecimiento se detiene a
diferencia de la máxima no mueren permanecen
en refrigeración a 4 o 5ºC y no crecen.
Rangos de temperatura
• Psicrófilos. Tº =< 0ºC – 15 a 20ºC
• P obligados. No crecen a Tº > 20ºC
• P facultativos. Crecen a Tº > 20ºC
• Mesófilos. 25 y 40 ºC
• Termófilos. Crecen Tº > 55ºC y óptima
45 a 60ºC
• T obligados. No crecen < 37ºC
• T facultativos. Crecen > 37ºC
OXIGENO
• Aceptor final en la cadena respiratoria.
Atmósfera 20 – 22%. Gas altamente
reactivo. SV necesitan para respirar
• Aeróbicos
• Anaeróbicos
• A. obligados. No crecen en oxigeno
• A aerotolerantes. No oxigeno pero crecen
en presencia de oxigeno
• A facultativos. Si hay oxigeno utilizan y si
no hay viven en el.
• Microaerófilos. No utilizan el oxigeno que
esta al 22% porque es tóxico. Utilizan de 2
a 10%
Anaeróbico obligado
• Algunas alternativas
• Uso de agente reductantes. Elimina
el oxigeno. Tioglocolato de sodio
• La remoción mecánica del oxigeno.
Bomba extrae el oxigeno y se
remplaza con N2, H2, CO2
• Reacción química. Mueve el oxigeno
del recipiente en donde se hace el
cultivo.
pH
• pH = 1/log (H+)
• Prevenir el cambio de pH
• Buffer. Parejas de sustancias que resisten el cambio
de pH. Fosfatos buffer fuente de fósforo para el
crecimiento de microbios
• Pareja de sustancias el uno es una sal débilmente
ácida y el otro es una sal débilmente básica.
• Acido. Sustancia que libera iones hidrógeno en el
agua
• Base. Sustancia que libera iones OH en solución.
• Una sal débilmente ácida es el fosfato de potasio
monobásica KH2PO4 y la sal débilmente acida es
K2HPO4
COMO ACTUAN LOS BUFFER
• K2HPO4 + HCl KH2PO4 +KCl sal débilmente acida,
mantiene el pH no cambia
• KH2PO4 + KOH K2HPO4 + H2O sal débilmente básica.
• Los fosfatos neutralizan y no es tóxico para los microbios y
actúan como fuente de fósforo
• Sin embargo en ocasiones la cantidad de ácido es muy alto el
fosfato buffer no es suficiente en este caso se usa.
• Carbonatos insolubles. Carbonato de calcio CaCO3
H H
• CO3-2 HCO3- H2CO3 CO2 + H2O

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